Orientador: Sergio Ricardo Batlouni / Banca: Maria Inês Borella / Banca: Carlos Alberto Vicentini / Resumo: A reprodução de peixes migradores nativos apesar de já apresentar relativo sucesso, ainda apresenta diversos obstáculos. Entre eles podemos destacar as variações nas taxas de fertilidade, eclosão e sobrevivência de larvas entre desovas. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar de forma inédita se o manejo pode interferir neste processo em machos de P. lineatus. Os resultados mostraram que os machos mantidos em tanques-rede (TR) com água de baixa qualidade durante 18 meses apresentam encurtamento do ciclo reprodutivo; redução significativa no IGS e no diâmetro de túbulos seminíferos (p<0,05) quando comparados com machos mantidos em viveiros escavados (VE). A concentração espermática e as taxas de fertilidade obtidas com o sêmen dos machos de TR foram inferiores às obtidas com o sêmen dos machos em VE (p<0,05). Além disso, os espermatozoides de TR apresentaram maior frequência de danos de DNA, mesmo apresentando taxas similares de motilidade e sobrevivência que os de VE (p<0,05). Os resultados mostraram de forma inédita que o manejo inadequado pode interferir na gametogênese e na qualidade de gametas masculinos nesta espécie. Além disso, demonstramos que práticas inadequadas de manejo podem prejudicar a função testicular ainda nos meses de inverno, muito antes dos meses de reprodução / Abstract: The reproduction of native migratory fish still presents several obstacles. Among them we can highlight the changes in fertility rates, hatching and survival of larvae among spawning. Thus, the objective of this study was to evaluate in an unprecedented way if the reproductive management can interfere in this process in males of P. lineatus. The results showed that males kept in cages (C) for 18 months have their reproductive cycle shortened; significant reduction in the GSI and in the diameter of seminiferous tubules (p<0.05) compared with males kept in earths ponds (EP). The sperm concentration and fertility rates obtained with semen from males of Cs were lower than those obtained with semen EP (p<0.05). In addition, the sperm of males maintained in Cs had higher frequency of DNA damage, even with similar rates of survival and motility of the EPs (p<0.05). The results showed by unprecedented manner that the improper management can interfere with gametogenesis and quality of male gametes in this species. Furthermore, we demonstrate inadequate management practices can affect the testicular development even in the winter months, long before the breeding season / Mestre

Resumo: Testou-se a hipótese de influência da sazonalidade sobre a produção embrionária in vitro de gato doméstico (Felis catus), na cidade de Botucatu, localizada sob latitude de 22º53'09" S, no estado de São Paulo, Brasil, em associação a três condições ovarianas - inativa, luteal e folicular em dois momentos: período I, que compreendeu os meses de janeiro, fevereiro e março e período II constituído pelos meses de agosto, setembro e outubro. Realizaram-se dois experimentos: I) Aspectos relacionados à maturação in vitro e análise ultra-estrutural de complexos cumulus-oophorus (COC) de felinos domésticos e II) Produção in vitro e análise ultra-estrutural de embriões de gato doméstico. O objetivo do experimento I foi avaliar as taxas de recuperação e maturação in vitro de COC e a descrição de suas características ultra-estruturais. O experimento II visou à avaliação das taxas de clivagem, de formação de mórulas, de produção de blastocistos; à avaliação da qualidade dos embriões felinos em fase inicial de desenvolvimento e à descrição das características ultra-estruturais dos embriões obtidos. No experimento I, para verificação das taxas de recuperação oocitária e de maturação in vitro foram avaliados 473 oócitos grau I no período I e 482 oócitos grau I no período II, provenientes de 20 e de 10 pares de ovário, respectivamente. O número médio de oócitos obtidos por gata foi de 23,65 e 48,2 nos períodos I e II, respectivamente. Esses COC foram maturados in vitro e classificados quanto à configuração nuclear em vesícula germinativa (VG), quebra de vesícula germinativa (QVG), metáfase I (MI), metáfase II (MII) e degenerados/não identificados (D/NI). No experimento II, 386 e 568 COC durante o período I e II respectivamente, foram fertilizados com sêmen fresco e após três e oito dias de cultivo verificou-se... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The hypothesis of season effect at Botucatu, 22º53'09" S, Sao Paulo State, Brazil, on in vitro embryo production of domestic cat (Felis catus), was tested in association with three ovarian conditions - inactive, luteal and follicular during two seasons: season I, which comprehended the months of January, February and March and season II, constituted by the months of August, September and October. This study was divided in two experiments: I) In vitro oocyte maturation and ultrastructural analysis of cumulus-oocyte complexes (COC) of domestic cats and II) In vitro embryo production and ultrastructural analysis of embryo of domestic cats. The aim of the experiment I was to analyze the COC recovery rate and in vitro nuclear maturation (IVM) rate and the description of its ultrastructural characteristics. The experiment II aimed to evaluate cleavage and morulae rates and blastocyst formation; to evaluate the quality of domestic cat embryos and to describe ultrastructural characteristics of these embryos. In experiment I, to evaluate COC recovery rate and in vitro maturation rate; 473 Grade I COC recovered from 20 ovarian pairs and 482 Grade I COC recovered from 10 ovarian pairs were evaluated during season I and season II, respectively. These COC were in vitro matured and classified according to nuclear configuration as germinal vesicle (GV), germinal vesicle breakdown (GVBD), metaphase I (MI), metaphase II (MII) and degenerated/non-identified (D/NI). In experiment II, 368 and 568 COC recovered from ovaries during season I and II, respectively, were in vitro fertilized with fresh semen and after three and eight days of culture the development stage and embryo viability were analyzed. In experiment I, no significant difference was verified in the percentage of oocytes in MII in both seasons and considering the three conditions. These results indicate that in vitro maturatiom... (Complete abstract click electronic access below) / Orientador: Maria Denise Lopes / Coorientador: Fernanda da Cruz Landim Alvarenga / Banca: Marcelo Alcindo de Barros Vaz Guimarães / Banca: Nei Moreira / Banca: Sony Dimas Bicudo / Doutor

Orientador: Irene Bastos Franceschini Vicentini / Banca: Antonio Marcos Orsi / Banca: Maíra Aparecida Stefanini / Banca: Margarida Maria Barros Ferreira Lima / Banca: Maria Terezinha Siqueira Bombonato / Resumo: O presente trabalho realizou o estudo dos aspectos estruturais do hepatopâncreas, ovários e da caracterização hormonal de fêmeas de Macrobrachium amazonicum, nos diferentes estágios de maturação gonadal. Para tanto utilizaram-se 150 fêmeas adultas subdivididas entre os cinco diferentes estágios de maturação ovariana. Após serem capturados os animais foram pesados e mortos por choque térmico. Ovários e hepatopâncreas foram coletados e pesados individualmente para obtenção dos índices gonadossomático (IGS) e hepatossomático (IHS). Para as análises de microscopia de luz e eletrônica de transmissão, ovários e hepatopâncreas foram fixados em solução de Karnovsky e seguiram os procedimentos de rotina de inclusão. Os ovários, hepatopâncreas e hemolinfa destinados à quantificação hormonal foram armazenados em ependorfes e preservados em nitrogênio líquido a -70ºC, para posterior processamento de radioimunoensaio visando avaliação das concentrações de estradiol, progesterona e testosterona. Os resultados relacionados ao IGS e IHS demonstram uma correlação inversa entre os ovários e o hepatopâncreas nos diferentes estágios de maturação gonadal. Em relação ao desenvolvimento ovariano, observa-se a distribuição de cinco tipos celulares ao longo dos cinco estágios de maturação gonadal. Desta forma encontram-se as ovogônias ou células germinativas mais jovens no estágio I de maturação ovariana. As células pré-vitelogênicas, observadas a partir do estágio II, apresentam vesículas de retículo endoplasmático rugoso. Essas vesículas são importantes nas fases de vitelogênese endógena e exógena. Os ovócitos em vitelogênese inicial, característicos do estágio III, apresentam a deposição de vitelo endógeno. As células em vitelogênese avançada, próprias do estágio IV de maturação gonadal, são o alvo principal da vitelogênese ...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: This study described the structural aspects of the hepatopancreas and ovaries, and the hormonal features of females of the freshwater prawn Macrobrachium amazonicum, during the reproductive cycle. The specimens were captured and killed by thermic chock. The gonadosomatic (GSI) and hepatosomatic (HSI) indices were calculated as the percentage of the weight of the gonad and hepatopancreas to total body weight, respectively. Ovaries and hepatopancreas were fixed in Karnovsky solution and destined to light and ultrastructural microscopy studies. Small portions of the ovary, hepatopancreas and hemolymph were frozen in liquid nitrogen, for later steroid quantification (estradiol, progesterone and testosterone). The relationships between GSI and HSI demonstrate an inverse correlation between ovary and hepatopancreas during the maturation cycle. The oocytes distribution is variable depending on the ovarian maturation degree. The ovary in stage I consists of oogonia. The ovary in stage II consists mainly by previtellogenic oocytes that possess vesicles of the endoplasmic reticulum. These vesicles are important to endogenous and exogenous vitelogenesis. Initial vitellogenic oocytes are mainly observed in the ovary in stage III and possess vitelline reserve, called as endogenous vitelogenesis. Ovary in stage IV is composed of late vitellogenic oocytes that uptake exogenous vitellogenin. Mature oocytes present a corion formation. The hepatopancreas is composed by tubules that are lined by a pseudostratified epithelium, which consists of five cell types, identified as E (embryonic), F (fibrillar), B (blisterlike), R (resorptive) and M (basal). These cells present relationships with digestion and nutrient storage, which are very important for the reproductive processes ...(Complete abstract, click electronic access below) / Doutor