Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-09-05Bitstream added on 2014-06-13T19:01:54Z : No. of bitstreams: 1 crisci_fs_dr_arafo.pdf: 2406575 bytes, checksum: 7ed8c4c8f95948faa1e0430e502e380a (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O presente estudo avaliou o efeito do laser de baixa intensidade diodo semicondutor de arseneto de gálio e alumínio em exposições pulpares induzidas e nos tecidos apicais e periapicais após tratamento endodôntico em dentes de macacos. Nas exposições pulpares, foi avaliado efeito do laser infra-vermelho associado ao hidróxido de cálcio, variando o tempo de aplicação, onde utilizou-se quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em quatro grupos experimentais: Grupo I: Laser 2,5 segundos (dentes incisivos), Grupo II: Laser 40 segundos (dentes incisivos), Grupo III: Laser 40 segundos (dentes prémolares) e Grupo IV: Controle sem Laser (dentes pré-molares), por um período de 55 dias. Quanto ao efeito do laser sobre a agressividade tecidual do cimento endodôntico óxido de zinco e eugenol (OZE), após tratamento endodôntico nos tecidos apicais e periapicais, foi comparando o laser vermelho com o infravermelho, utilizando quatro macacos, totalizando 24 dentes, distribuídos em três grupos experimentais: Grupo I (Laser Vermelho), Grupo II (laser Infra-Vermelho) e Grupo III (Controle: Sem Laser), por um período de 22 dias. Decorrido os períodos experimentais de cada estudo, os animais foram mortos, os dentes ou peças removidas e preparadas para análise histológica. De acordo com a proposta e as condições específicas deste trabalho, os resultados nos permitem concluir que nas exposições pulpares, a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos) diminuiu a reação inflamatória e induziu a organização tecidual, bem como na formação da barreira mineralizada, apresentando diferenças estatísticas significantes entre os grupos (p<0,05), tendo como melhor resultado a irradiação com laser infra-vermelho (40 segundos), já nos tecidos apicais e periapicais a irradiação... / The present study evaluated the effect of the laser of low intensity diode semiconductor of gallium aluminum arsenide in exposed pulp induced in apical and periapical tissues after endodontic treatment in teeth of monkeys. In the exposed pulp, the effect of the laser infra-red associated to the hydroxide of calcium was evaluated varying the time of application, being used 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in four experimental groups: Group I: Laser 2,5 seconds (incisive teeth), Group II: Laser 40 seconds (incisive teeth), Group III: Laser 40 seconds (premolar teeth) and Group IV: Control without Laser (premolar teeth), for a period of 55 days. As for the effect of the laser on the tissue aggressiveness of the endodontic zinco oxide and eugenol (OZE) sealer, after endodontic treatment o in the apical and Periapical tissues, the red laser was compared with the laser infra-red, using 04 monkeys, totaling 24 teeth, distributed in 03 experimental groups: Group I (Red Laser), Group II (Infra-red laser) and Group III (it Controls: Without Laser), for a period of 22 days. After the experimental periods of each study, the animals were killed, the teeth or pieces were removed and prepared for histological analysis. In agreement with the proposal and the specific conditions of this study work, the results allow to conclude us that in exposed pulp infra-red laser irradiation (40 seconds.) reduced the inflammatory reaction and induced the tissue organization, as well as the mineralized barrier formation and in apical and periapical tissues infra-red laser irradiation stimulated the cells of the periodontal tissue inducing periapical repair.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:02Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-07-23Bitstream added on 2014-06-13T19:57:14Z : No. of bitstreams: 1 campos_n_me_araca_parcial.pdf: 374524 bytes, checksum: 0e80098f70073718b0c1a9511ce69881 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-07-02T12:36:04Z: campos_n_me_araca_parcial.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-07-02T12:37:29Z : No. of bitstreams: 1 000674476_20250723.pdf: 374303 bytes, checksum: e8c36bf585abbff4e58e95157dbe1d90 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Este estudo avaliou, histomorfometricamente, o processo de cicatrização em defeitos de fenestração periodontal, criados cirurgicamente em ratos e tratados com Plasma Rico em Plaquetas (PRP), Laser de Baixa Intensidade (LBI) ou a associação de ambos. Defeitos de fenestração periodontal foram realizados na mandíbula de 80 ratos, divididos em 4 grupos: Grupo C (Controle) – o defeito foi preenchido somente com coágulo sanguíneo; Grupo PRP – o defeito foi preenchido com PRP; Grupo LBI – o defeito recebeu a aplicação de LBI, foi preenchido com coágulo sangüíneo e irradiado novamente; Grupo PRP/LBI – o defeito recebeu a aplicação de LBI, foi preenchido com PRP e irradiado novamente. Os animais foram submetidos à eutanásia aos 10 e 30 dias pós-operatórios. A porcentagem de preenchimento ósseo (NO), densidade do novo osso (DNO), formação de novo cemento (NC) e a extensão remanescente do defeito (ERD) foram histometricamente avaliadas. Os dados foram submetidos à análise estatística (análise de variância, Tukey, p < 0,05). Aos 10 dias, o Grupo PRP apresentou ERD significativamente menor que o Grupo C. Aos 30 dias, o Grupo PRP apresentou NO e DNO significativamente maiores que o Grupo C. Todos os espécimes do Grupo C, aos 10 e 30 dias, apresentaram ausência total de formação de cemento. Já os espécimes dos grupos LBI, PRP e PRP/LBI apresentaram, aos 30 dias, significativa neoformação de cemento. LBI, PRP e PRP/LBI promoveram formação de cemento em defeitos de fenestração periodontal aos 30 dias. O PRP acelerou a regeneração óssea aos 10 dias e resultou em densidade e volume ósseos significativamente maiores que o LBI e o controle aos 30 dias. A associação PRP/LBI não foi vantajosa quando comparada ao uso isolado dessas terapias / This study histomorphometrically analyzed the influence of platelet-rich plasma (PRP), low-level laser therapy (LLLT) or their combination on the healing of surgically created periodontal fenestration defects in rats. Periodontal fenestration defects were created in the mandible of 80 rats divided into 4 groups: Group C (control) – the defect was filled by blood clot only; Group PRP – the defect was filled with PRP; Group LLLT – the defect received laser irradiation, was filled with blood clot and then irradiated again; Group PRP/LLLT – the defect received laser irradiation, was filled with PRP and then irradiated again. Animals were euthanized at either 10 or 30 days postoperatively. The percentage of bone fill (NB) and density of newly formed bone (DNB), new cementum formation (NC) and the extension of the remaining defect (ERD) were histometrically evaluated. Data were statistically analyzed (analysis of variance; Tukey p < 0.05). At 10 days, Group PRP presented ERD significantly lower than Group C. At 30 days, Group PRP presented NB and DNB significantly greater than Group C. Cementum formation was not observed in any specimen of Group C at either 10 or 30 days. The specimens of groups LLLT, PRP and PRP/LLLT showed significant formation of new cementum at 30 days. LLLT, PRP and PRP/LLLT promoted new cementum formation in periodontal fenestration defects at 30 days. PRP enhanced bone regeneration at 10 days and resulted in bone volume and density significantly greater than LLLT and control at 30 days. The combination PRP/LLLT did not show additional effects when compared to the use of each therapy separately

Embora a terapia com uso de laser de baixa potência (TLBP) seja uma modalidade terapêutica amplamente estudada no meio científico, sua aplicação na clínica médica ainda gera controvérsias, já que a literatura reporta que a TLBP é capaz de promover a proliferação e diferenciação de células tumorais. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da TLBP no crescimento celular usando como modelo a linhagem B16F10 de melanoma murino em estado de homeostase e estado redox, além de verificar o comportamento quimiotáxico da linhagem B16F10 por meio do ensaio de migração transwell em resposta à TLBP em diferentes densidades de energia. Foram montados cinco grupos experimentais utilizando um laser de emissão vermelha em &lambda; = 660 nm: Grupo controle (GC) onde nenhuma irradiação foi realizada; G30 (30J/cm2); G60 (60J/cm2); G90 (90J/cm2); G120 (120J/cm2); G150 (150J/cm2), com as respectivas doses utilizadas. Todos os experimentos foram realizados em triplicata e os resultados obtidos foram submetidos à análise estatística. Sob as condições experimentais deste estudo, nossos resultados mostram que a TLBP neste comprimento de onda não promoveu mudanças no metabolismo celular nos tempos de 48 h e 72 h, independente do estado nutricional. Foi possível observar mudança no padrão de comportamento quimiotáxico da linhagem celular B16F10 irradiadas com laser de emissão vermelha. / The low power lasers (TLBP) is a therapeutic modality widely studied in scientific field, its application in clinical medicine still generates many conflicts since literature reports proliferation in cancer cells. The objective of this study was to evaluate the effects of TLBP on cell growth using as model the line B16F10 in state of homeostasis and redox state and investigate the chemotactic behavior of B16F10 lineage through transwell migration assay in response to TLBP in different energy densities. For this purpose five experimental groups were assembled using a laser emission at &lambda; = 660 nm: control group (G0) where no irradiation was performed; G30 (30J/cm2), G60 (60J/cm2), G90 (90J/cm2); G120 (120J/cm2); G150 (150J/cm2) with the respective doses used. All experiments were performed in triplicate and the results were statistically analyzed. Under the experimental conditions of this study, our results show that TLBP did not induced changes in cellular metabolism that influence proliferation at 48 h and 72 h, independent nutritional status. It was possible to observe changes in behavior pattern chemotactic of cell line B16F10 with TLBP at red emission.

Made available in DSpace on 2016-06-02T19:02:46Z (GMT). No. of bitstreams: 1 6801.pdf: 11048203 bytes, checksum: 8a72f69d416355a991979721e7b4ee7c (MD5) Previous issue date: 2015-02-27 / Financiadora de Estudos e Projetos / This study aimed to evaluate the effects of low level laser therapy (LLLT) in the expression genes related to bone defect repair in tibia in rats. For this, one hundred male Wistar rats (3 months ± 250 g) were submitted to bilateral tibial defects and randomly distributed in two experimental groups (n=50). In the first study the effects of the LLLT in the expression of inflammatory and angiogenic genes in bone repair of rats were investigated in three groups: bone defect group (CG) and bone defect treated with laser 830nm (GL). Laser irradiation started immediately after the surgery and it was performed for two (36 h), three (3 days) or seven (7 days) sessions, with an interval of 24 hours between sessions. The application was punctual transcutaneously above the site of the injury. Rats were euthanized individually by carbon dioxide asphyxia in different set points (36 hours, 3 days and 7 days after surgery). Histopathological analysis showed that LLLT was able to modulate the inflammatory process in the area of the bone defect and to produce an earlier deposition of granulation tissue and newly formed bone. Microarray analysis demonstrated that LLLT produced an up-regulation of genes related to the inflammatory processes (MMD, PTGIR, PTGS2, Ptger2, IL1, 1IL6, IL8, IL18) and angiogenic genes (FGF14, FGF2, ANGPT2, ANGPT4 and PDGFD) at 36 h and 3 days, followed by a decrease of the gene expression on day 7. Immunohistochemical analysis revealed that treated animals presented a higher expression of COX-2 at 36 h after the surgery and an increased VEGF expression on days 3 and 7. Our findings indicate that LLLT was efficient on accelerating the development of newly formed bone probably by modulating the inflammatory and angiogenic gene expression and COX2 and VEGF immunoexpression during the initial phase of bone healing. In the second study, aspects related to bone cell stimulation and newly formed bone were evaluated in five groups: CG and LG. The laser treatment started immediately after the surgery to produce the bone defects and there have been 1, 2, 3, 5 e 7 sessions with an interval of 24 hours. Rats were euthanized in different set points (12 hours, 36 hours, 3 days, 5 days and 7 days after surgery). Histopathology revealed that treated animals produced increased amount of newly formed bone at the site of the injury. Also, microarray analysis evidenced that LLLT produced a significantly increase in the expression TGF-&#946;, BMP, FGF, RUNX-2 and BMP, which could have stimulated osteoblast proliferation and differentiation, which may be related to improving the deposition of newly formed bone at the site of the injury. Thus, it is possible to concluded that LLLT improved bone healing by producing a significant increase in the expression of osteogenic genes. Finally, we concluded that LLLT was effective to stimulate newly formed bone by active expression of inflammatory, angiogenic and osteogenic genes and also stimulate immunoexpression of proteins related to the initial phases of bone healing in tibial defects in rats. / Este trabalho teve como objetivo verificar os efeitos da terapia laser de baixa intensidade (LLLT) na expressão de genes relacionados à regeneração óssea de defeitos tibiais em ratos. Para isso, 100 ratos machos Wistar (3 meses de idade ± 250 gramas) foram submetidos a defeitos tibiais bilaterais e distribuídos aleatoriamente em 2 grupos experimentais (n=50). No primeiro estudo, foram avaliados os efeitos da LLLT na expressão de genes inflamatórios e angiogênicos no reparo ósseo de ratos, a partir de três grupos experimentais: grupo controle com defeito ósseo e sem tratamento (GC); grupo defeito ósseo tratado com laser 830 nm (GL). Os animais foram submetidos a irradiação laser em um único ponto sobre o defeito ósseo por 2, 3 e 7 sessões de tratamento, a cada 24 horas. A eutanásia dos animais aconteceu em diferentes períodos (36 horas, 3 dias e 7 dias após a cirurgia). A análise histológica revelou que a LLLT foi capaz de modular o processo inflamatório e induzir a deposição de tecido de granulação e osso recém formado na região do defeito ósseo. A análise com microarray demonstrou que a LLLT estimulou a expressão de genes relacionados com o processo inflamatório (MMD, PTGIR, PTGS2, Ptger2, IL1, 1IL6, IL8, IL18) e genes angiogênicos (FGF14, FGF2, ANGPT2, ANGPT4 e PDGFD) após 36 horas e 3 dias, seguido pela a diminuição da expressão gênica no 7° dia. A análise imunohistoquímica revelou que os animais tratados apresentaram maior imunoexpressão de COX-2 após 36 horas e aumentou a imunoexpressão de VEGF após 3 e 7 dias. Assim, os achados indicam que a LLLT foi eficiente em acelerar a deposição de tecido ósseo neoformado, provavelmente através da modulação de genes inflamatórios e angiogênicos e a imunoexpressão de COX-2 e VEGF durante a fase inicial de reparo ósseo. No segundo estudo, foram avaliadas os aspectos relacionados a estimulação de células ósseas e a neoformação do tecido ósseo, a partir de cinco grupos experimentais: GC e GL. O tratamento laser iniciou-se imediatamente após a cirurgia dos defeitos ósseos e realizaram-se 1, 2, 3, 5 e 7 sessões, com um intervalo de 24 horas entre elas. A eutanásia dos animais aconteceu em diferentes períodos (12 horas, 36 horas, 3 dias, 5 dias e 7 dias após a cirurgia) As análises histológica e morfométrica revelaram que o GL apresentou aumento de osso neoformado no defeito ósseo após 3, 5 e 7 dias. A análise com microarray evidenciou que a LLLT aumentou significantemente a expressão de TGF-&#946;, BMP, FGF, RUNX-2 e OC que podem ter estimulado a proliferação e diferenciação dos osteobastos e consequentemente aumentado a deposição de osso neoformado. Dessa forma, pode-se concluir que a LLLT aumentou a expressão de genes osteogênicos, o que culminou na aceleração do reparo ósseo. Finalmente, podemos concluir que a LLLT foi eficaz em estimular a deposição óssea, ativando a expressão de genes inflamatórios, angiogênicos e osteogênicos e ainda, estimulando a imunoexpressão de proteínas relacionados a fase iniciais do reparo ósseo em defeitos tibiais em ratos.

Uma das principais doenças degenerativas, conhecida internacionalmente pelo nome de osteoartrite (OA), é uma condição patológica crônica e prevalente que traz prejuízos sociais, psicológicos e financeiros a 10% da população em geral e a mais de 50% dos idosos. Acima dos 75 anos de idade aproximadamente 85% dos idosos são acometidos por essa doença. A população no Brasil envelhece rápido, envelhecerá em 30 anos tanto quanto a Europa envelheceu em 200 anos. Assim, novas técnicas para o tratamento da OA de joelho são muito relevantes. Este trabalho teve por objetivo estudar os efeitos de uma Terapia Combinada (TC) sobre o comportamento de ratos submetidos a um modelo experimental de osteoartrite de joelho. Ratos Wistar machos e adultos foram submetidos à lesão do joelho direito pela injeção intra-articular de iodoacetato monosódico (IM). Quinze dias após a lesão foram aplicados 3 tratamentos por 14 dias: Laserterapia de Baixa Potência (LBP), Estimulação Elétrica Artificial (EEA) e TC (i.e., LBP + EEA). Foram observados os efeitos agudos e crônicos destes tratamentos sobre o comportamento dos animais em 3 testes comportamentais: campo aberto, analgesímetro e descarga de peso. Os principais resultados do presente estudo indicam que (i) o modelo experimental de OA de joelho proposto foi induzido com sucesso e resultou em déficits agudos e crônicos ao longo de 30 dias de experimento; (ii) o tratamento com LBP resultou em diminuição dos déficits devido à hiperalgesia primária e secundária à lesão, porém não teve impacto sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento dos animais; (iii) o treinamento com EEA resultou em diminuição dos déficits de hiperalgesia primária e teve impacto sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento e (iv) a TC resultou em diminuição dos déficits de hiperalgesia primária e efeito moderado sobre a hiperalgesia secundária, além de impacto positivo sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento. Com base nestes resultados, a TC apresentou efeitos benéficos tanto sobre o controle da dor, quanto para a menor incapacitação e melhor funcionalidade, sendo indicada para combater os efeitos deletérios da OA de joelho sobre o sistema de movimento. / A major degenerative disease, internationally known as osteoarthritis (OA) is a prevalent and chronic pathological condition which results in social, psychological and financial impairments to 10% of the general population and to over 50% of the elderly. Above 75 years of age approximately 85% of the elderly are affected by this disease. In Brazil there is a fast ageing of population who will age during 30 years as much as Europe aged in 200 years. Thus, new techniques for the treatment of knee OA are very relevant. This work aimed to study the effects of a combined therapy (TC) on the behavior of rats submitted to an experimental model of knee osteoarthritis. Male adult Wistar rats underwent right knee injury by intra-articular injection of monosodium iodoacetate (IM). Fifteen days after injury received 3 treatments for 14 days: Low Power Laser Therapy (LBP), Artificial Electrical Stimulation (EEA) and TC (i.e., LBP + EEA). We observed the acute and chronic effects of these treatments on the behavior of animals in 3 behavioral tests: open field, analgesymeter and weight bearing. The main results of this study indicate that (i) the proposed experimental model of knee OA was successfully induced and resulted in acute and chronic deficits over 30 days of experiment, (ii) treatment with LBP resulted in reduction of deficits due to primary and secondary hyperalgesia to the lesion, but had no impact on the overall functionality of the movement system, (iii) the training with EEA resulted in decreased deficits of primary hyperalgesia and impacted the overall functionality of the movement system (iv) the TC resulted in reduction of deficits due to primary hyperalgesia and moderate effect on secondary hyperalgesia, and positive impact on the overall functionality of the movement system. Based on these results, the TC showed beneficial effects on pain control and on less disability and better functionality, thus TC is indicated to combat the deleterious effects of knee OA on the motion system.

O laser de baixa potência vem sendo utilizado em Odontologia com diversos objetivos, como diminuir o tempo de reparação de tecidos moles e duros e, atualmente, alguns profissionais tem utilizado esta ferramenta para o controle clínico da dor. O presente trabalho in vivo teve como objetivo avaliar quantitativamente os efeitos do laser de baixa potência (LBP) com diodo de GaAlAs (Gálio-alumínioarsenieto) no controle da dor após a expansão rápida da maxila (ERM), analisando a ativação de regiões cerebrais relacionadas à nocicepção, por meio da expressão de c-fos nos subnúcleos caudalis, interpolaris e oralis. Utilizou-se 75 ratos Wistar, machos, pesando em média 220g, que foram distribuídos em 4 grupos: Grupo Controle (n=5) animais não tratados (sem ERM e sem aplicação do LBP) e no período zero foram submetidos à eutanásia; Grupo Experimental I (n=20) animais submetidos apenas à aplicação do LBP no período zero e à eutanásia nos períodos 12, 24 48 e 72 horas após a aplicação do LBP; Grupo Experimental II (n=25) animais submetidos apenas à ERM e à eutanásia nos períodos 6, 12, 24 48 e 72 horas após a ERM; Grupo Experimental III (n=25) animais submetidos à ERM e logo em seguida o LBP no período zero; Os animais deste grupo foram submetidos à eutanásia nos mesmos períodos que o Grupo Experimental II. Após a eutanásia, os cérebros foram coletados e realizou-se secções coronais de 40 micrômetros. Os cortes foram processados para a imunohistoquímica para c-fos e analisados com o auxilio de um microscópio óptico. As células imunorreativas à proteína Fos foram contadas através do auxilio de um sistema de imagem (Image J). O teste de variância (ANOVA) foi usado seguido pelo pós-teste de Tukey, com nível de significância de 5%. O grupo que teve ERM apresentou um aumento significativo do número de neurônios Fos positivos nos subnúcleos interpolaris e caudalis 6 horas após a expansão maxilar, o que diminuiu expressivamente a partir de 12 horas, com um segundo pico no período de 24 horas (p<0,001). O grupo que teve aplicação do LBP teve redução expressiva do número de neurônios Fos positivos em todos os subnúcleos 12 horas após a aplicação da força (p<0,001). Os resultados sugerem que o LBP reduz a ativação neuronal de região nociceptiva e o mesmo seria uma possível alternativa para o alívio de dor em pacientes ortodônticos. / Low-level laser therapy (LLLT) has been used in Dentistry with many objectives, especially to decrease the time needed for bone and soft healing. Currently, some professionals have applied this tool for clinical management of pain. The aim of the present iin vivo study was to quantitatively evaluate the effects of Gallium-Aluminum- Arsenide (GaAlAs) low-level laser therapy (LLLT) on pain control after rapid maxillary expansion (RME) in young rats, by means of c-fos quantification in nociceptive related structures (caudalis, interpolaris and oralis subnuclei). A total of 75 male rats, weighting 220g, were assigned to 4 groups: Control Group (n=5) with no treatment (no RME and no LLLT); Experimental I (n=20) with LLLT without RME, evaluated at 12, 24, 48 and 72 hours; Experimental II (n=25) with RME without LLLT, evaluated at 6, 12, 24, 48 and 72 hours after RME; Experimental III (n=25) with RME and LLLT (54J/cm2), evaluated at 6, 12, 24, 48 and 72 hours after RME. The animals were euthanized, brain tissues were collected and coronal sections were cut at 40m, through the spinal trigeminal caudalis, spinal trigeminal interpolaris, and spinal trigeminal oralis subnuclei. The sections were processed for c-fos immunohistochemistry and were analyzed in light microscopy. The Image J software was used to quantify Fos immunoreactive neurons in sections of the rat brains. Statistical analysis was performed using ANOVA and Tukey tests with a significance level of 5%. In the experimental group I, Fos expression significantly increased in neurons in oralis and interpolaris subnuclei 6 hours after the maxillary expansion, then significantly decreased at 12 hours, and increased again at 24 hours (p<0.001). In experimental group III, Fos significantly decreased in neurons in all subnucleis 12 hours after force application (p<0.001). These results suggest that LLLT decrease cfos expression in neurons of nociceptive regions and it may be used as a therapeutic alternative to reduce pain in orthodontic patients.

A proposta deste trabalho foi analisar os efeitos da laserterapia de baixa potência(LLLT) no comportamento nociceptivo e na atividade neuronal do núcleo trigeminal após lesão unilateral do disco da articulação temporomandibular (ATM) em ratos. Foram utilizados 40 ratos. Foi realizado acesso cirúrgico na ATM sob anestesia geral. Os animais foram divididos em 4 grupos (n=10): Grupo 1: Lesão cirúrgica do disco articular e LLLT; Grupo 2: Sham - operado e LLLT; Grupo 3: Lesão cirúrgica do disco articular; Grupo 4, Naive: controle sem lesão articular ou LLLT. Foram realizadas 10 sessoes de LLLT com laser de GaAs com comprimento de onda de 904 nm e densidade de energia 6J/cm2.O desenvolvimento de sintomas neuropáticos foi avaliado pelo teste de Von Frey. As amostras do gânglio trigêmeo foram preparadas para determinação da expressão proteica da substancia P (SP), do receptor de potencial transiente vaniloide do subptipo-1 (TRPV-1) e do peptídeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP). Análise estatística foi realizada (p<0,050). Houve reversão total do limiar nociceptivo, a partir da primeira sessão no grupo1, e a partir da segunda sessão no grupo 2, e se manteve até a décima sessão. Houve um aumento da expressão de SP, TRPV-1 e CGRP no gânglio trigeminal no grupo 3 e uma diminuição significativa após a LLLT no grupo 1. Foi concluído que o uso da laserterapia tem efetividade para diminuição do comportamento nociceptivo, e que seu uso nesse modelo de lesão experimental se mostrou viável para estudo experimental das disfunções temporomandibulares. / The purpose of this study was to analyze the effects of low level laser therapy (LLLT) on nociceptive behavior and trigeminal nucleus neuronal activity after unilateral temporomandibular joint (TMJ) disc injury in rats. 40 rats were used. Surgical access to TMJ under general anesthesia was performed. The animals were divided into 4 groups (n = 10): Group 1: Surgical lesion of the articular disc and LLLT; Group 2: sham operated and LLLT; Group 3: Surgical lesion of the articular disc; Group 4, Naive: control without joint injury or LLLT. Ten sessions of LLLT were performed with GaAs laser with wavelength of 904 nm and energy density 6J / cm2. The development of neuropathic symptoms was evaluated by the von Frey test. The trigeminal ganglion samples were prepared for determination of the protein expression of substance P (SP), vanilloid transient potential receptor of subtype-1 (TRPV-1) and peptide related to the calcitonin gene (CGRP). Statistical analysis was performed (p <0.050). There was a total reversal of the nociceptive threshold, from the first session in group1, and from the second session in group 2, and remained until the tenth session. There was an increase in the expression of SP, TRPV-1 and CGRP in the trigeminal ganglion in group 3 and a significant decrease after LLLT in group 1. It was concluded that the use of laser therapy is effective in reducing nociceptive behavior, and that the use of this Model of experimental lesion proved to be feasible for the experimental study of temporomandibular disorders.

Uma das principais doenças degenerativas, conhecida internacionalmente pelo nome de osteoartrite (OA), é uma condição patológica crônica e prevalente que traz prejuízos sociais, psicológicos e financeiros a 10% da população em geral e a mais de 50% dos idosos. Acima dos 75 anos de idade aproximadamente 85% dos idosos são acometidos por essa doença. A população no Brasil envelhece rápido, envelhecerá em 30 anos tanto quanto a Europa envelheceu em 200 anos. Assim, novas técnicas para o tratamento da OA de joelho são muito relevantes. Este trabalho teve por objetivo estudar os efeitos de uma Terapia Combinada (TC) sobre o comportamento de ratos submetidos a um modelo experimental de osteoartrite de joelho. Ratos Wistar machos e adultos foram submetidos à lesão do joelho direito pela injeção intra-articular de iodoacetato monosódico (IM). Quinze dias após a lesão foram aplicados 3 tratamentos por 14 dias: Laserterapia de Baixa Potência (LBP), Estimulação Elétrica Artificial (EEA) e TC (i.e., LBP + EEA). Foram observados os efeitos agudos e crônicos destes tratamentos sobre o comportamento dos animais em 3 testes comportamentais: campo aberto, analgesímetro e descarga de peso. Os principais resultados do presente estudo indicam que (i) o modelo experimental de OA de joelho proposto foi induzido com sucesso e resultou em déficits agudos e crônicos ao longo de 30 dias de experimento; (ii) o tratamento com LBP resultou em diminuição dos déficits devido à hiperalgesia primária e secundária à lesão, porém não teve impacto sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento dos animais; (iii) o treinamento com EEA resultou em diminuição dos déficits de hiperalgesia primária e teve impacto sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento e (iv) a TC resultou em diminuição dos déficits de hiperalgesia primária e efeito moderado sobre a hiperalgesia secundária, além de impacto positivo sobre a funcionalidade geral do sistema de movimento. Com base nestes resultados, a TC apresentou efeitos benéficos tanto sobre o controle da dor, quanto para a menor incapacitação e melhor funcionalidade, sendo indicada para combater os efeitos deletérios da OA de joelho sobre o sistema de movimento. / A major degenerative disease, internationally known as osteoarthritis (OA) is a prevalent and chronic pathological condition which results in social, psychological and financial impairments to 10% of the general population and to over 50% of the elderly. Above 75 years of age approximately 85% of the elderly are affected by this disease. In Brazil there is a fast ageing of population who will age during 30 years as much as Europe aged in 200 years. Thus, new techniques for the treatment of knee OA are very relevant. This work aimed to study the effects of a combined therapy (TC) on the behavior of rats submitted to an experimental model of knee osteoarthritis. Male adult Wistar rats underwent right knee injury by intra-articular injection of monosodium iodoacetate (IM). Fifteen days after injury received 3 treatments for 14 days: Low Power Laser Therapy (LBP), Artificial Electrical Stimulation (EEA) and TC (i.e., LBP + EEA). We observed the acute and chronic effects of these treatments on the behavior of animals in 3 behavioral tests: open field, analgesymeter and weight bearing. The main results of this study indicate that (i) the proposed experimental model of knee OA was successfully induced and resulted in acute and chronic deficits over 30 days of experiment, (ii) treatment with LBP resulted in reduction of deficits due to primary and secondary hyperalgesia to the lesion, but had no impact on the overall functionality of the movement system, (iii) the training with EEA resulted in decreased deficits of primary hyperalgesia and impacted the overall functionality of the movement system (iv) the TC resulted in reduction of deficits due to primary hyperalgesia and moderate effect on secondary hyperalgesia, and positive impact on the overall functionality of the movement system. Based on these results, the TC showed beneficial effects on pain control and on less disability and better functionality, thus TC is indicated to combat the deleterious effects of knee OA on the motion system.

Orientador: Maria Alice da Cruz Hofling / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T07:40:42Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dourado_DorotyMesquita_D.pdf: 6138629 bytes, checksum: 583afdc02d280fcf5b42546f6eeb5981 (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: O estudo de substâncias naturais visa não só a caracterização dos seus princípios ativos e efeitos biológicos, mas também a compreensão de fenômenos patofisiológicos que muitas vezes são reproduzidos experimentalmente por essas substâncias. Dentre estas, nos países de clima tropical, os venenos ofídicos merecem importância particular pela riqueza de constituintes farmacologicamente ativos e pela freqüência dos acidentes causados por picada de serpentes venenosas, particularmente abundantes em países tropicais. No Brasil, esses acidentes adquirem relevância em termos de saúde pública porque podem causar graves alterações sistêmicas e no local da picada, sendo o gênero Bothrops responsável por 90% deles. Neste trabalho, as alterações patológicas locais e sistêmicas (mionecrose, edema e hemorragia) induzidas pela injeção intramuscular (i.m.) do veneno de Bothrops moojeni (40 µg/mL, 0,1 ml/100 g do peso do animal) em camundogos foram estudadas histologicamente, através da contagem de capilares e pela imunomarcação do fator de crescimento endotelial de vasos (VEGF) no músculo gastrocnêmio e pelas alterações nos níveis séricos das enzimas creatino kinase (CK), fosfatase ácida (AcPase), fosfatase alcalina (AlkPase), desidrogenase lática (LDH), transaminase oxalo-acética (AST) e da proteína mioglobina ao longo de 3, 12, 24 horas, 3, 7 e 21 dias (n = 5/período) após o envenenamento. Os efeitos de protocolos de irradiação por lasers de baixa potência, HeNe (632,8 nm) e o diodo AsGa (904 nm), ambos com densidade de energia de 4 J/cm², sobre esses parâmetros foram avaliados. A primeira sessão de irradiação foi administrada logo após a injeção i.m. do veneno e depois a cada 24 h, de forma que o número de irradiações feito foi uma, uma, duas, 4, 8 e 22, respectivamente, incididas perpendicularmente no local da injeção por 120 s (HeNe) e 18,3 s (GaAs) de duração de cada sessão. Para as dosagens de LDH, AST e mioglobina o tempo zero, sem irradiação foi acrescentado. Os resultados foram comparados com animais controles, injetados com solução salina estéril (0,9%). Morfologicamente, o veneno produziu imediata série de alterações, a qualidade das quais mostrou-se semelhante das 3 às 24 h (pós-injeção) p.i., porém com aumento do número de células mionecróticas e de infiltrado inflamatório. A fase regenerativa iniciada 3 d p.i., mostrou crescente número de fibras em regeneração, decrescente número de fibras degeneradas e substituição de polimorfos nuclerares por população de macrófagos. Histologicamente, a irradiação pelo HeNe atenuou as alterações iniciais (3 h), porém a do AsGa foi mais efetiva em longo prazo (21 d), induzindo ao maior número de miotubos e à melhor citoarquitetura do tecido. A contagem do número de vasos sangüíneos no local e vizinhanças da lesão, mostrou que o grupo tratado com veneno e não irradiado com laser de baixa energia teve diminuição do número médio de capilares na área afetada, e que a irradiação laser acelerou a neovascularização, sendo o HeNe mais eficaz do que o AsGa. Os resultados também mostraram que o VEGF e seus receptores foram expressos em parte dos neutrófilos, em esparsas células satélites nos períodos iniciais do envenenamento (3 ¿ 24 h), nos capilares das áreas periféricas à lesão, e nos interstícios de fibras em degeneração. A irradiação com HeNe induziu o aparecimento desse marcador nos polimorfonucleares, mas o AsGa aboliu a positividade a eles. O HeNe promoveu a expressão de VEGF nos capilares dos tendões e nas células musculares intactas. Aos 7 d p.i., na região das fibras regenerativas a irradiação com HeNe levou ao aparecimento de positividade em células do interstício semelhantes a fibroblastos, além de marcação em células ¿satélites¿ de miotubos em formação. A irradiação por ambos os lasers induziu também o aparecimento de VEGF positivo nos fibroblastos do tendão que atravessava o músculo, nas camadas média e adventícia de pequenas artérias e veias e nos fusos neuromusculares, além do interstício dos ramos nervosos intramusculares, principalmente nos períodos de 7 e 21 dias. Os resultados da análise das enzimas mostraram que a irradiação pelo laser HeNe reduziu marcadamente a atividade de CK de 3 h até 7 dias, enquanto o laser AsGa de 12 h até 21 dias p.i. A atividade da AcPase aumentou dramaticamente às 12 h p.i., após o que houve um declínio que foi mais acentuado com o laser AsGa. A irradiação com o laser HeNe induziu aumento gradual da atividade de AlkPase até 24 h e então diminuiu-a, ao passo que o laser AsGa causou um extraordinário aumento entre 12 h e 24 h, mantendo diferença signifitiva em relação ao grupo veneno de camundongos não irradiados. A irradiação com HeNe não foi eficaz em diminuir os níveis de LDH, ao invés foi prejudicial elevando os seus níveis em diferentes momentos. Já a irradiação com AsGa foi eficaz em diminuir significativamente os níveis da enzima ao longo de todos os períodos observados. Com relação a AST, a irradiação com HeNe foi eficaz em diminuir os níveis da enzima apenas às 3 h p.i., após o que teve efeitos deletérios. Por outro lado, a irradiação com AsGa não foi eficaz em diminuir os níveis de AST, exceto aos 7 dias, quando houve redução significativa de16,6%. Os níveis elevados de mioglobina sérica causados pelo veneno de B. moojeni, foram diminuídos significativamente com o laser AsGa das 12 h p.i. até os 7 d, ao passo que o HeNe só mostrou eficácia dos 3 aos 7 d p.i. O grupo de camundongos injetados com solução salina não mostrou nenhuma diferença significante em todos os tempos analisados para esses parâmetros. Concluímos que a terapia laser de baixa energia, arsenieto de Gálio aplicada localmente é capaz de alterar o conteúdo sérico de biomarcadores de dano da fibra muscular (CK e mioglobina), como também de marcadores de alterações sistêmicas, como o laser HeNe foi eficaz para aumentar a quantidade de vasos sanguíneos no tecido lesado. A fotoestimulação promovida pela irradiação com laser de baixa energia pode alterar favoravelmente indicadores de alterações locais e sistêmicas causadas por envenenamento por Bothrops moojeni, apontando esse recurso como promissor na recuperação do músculo afetado e nos distúrbios sistêmicos advindos / Abstract: The study of natural substances aims not only characterization of its active principles and biological effects, but also the comprehension of pathophysiologic phenomena that frequently are reproduced experimentally by these substances. Among these substances, snake venoms deserve special importance for the richness of pharmacologically active components and the frequency of accidents caused by venomous snake bites, particularly abundant in tropical countries. In Brazil these accidents acquires relevance in terms of public health because they may cause severe systemic and local alterations, being the Bothrops genus responsible for 90% of them. In this work, the pathologic local and systemic alterations induced by the intramuscular (i.m.) injection of Bothrops moojeni venom (40 µg/mL, 0.1 ml/100 g of animal weight) in mice were studied histologically, by capillary counting, immunolabeling of the vascular endothelial growth factor (VEGF) in the gatrocnemius and by the changes of creatinekinase (CK), acid phosphatase (AcPase), alkaline phosphatase (AlkPase), lactic acid desidrogenase (LDH), transaminase oxaloacética (TGO) and mioglobin serum levels at 3, 12, 24 hours, 3, 7 and 21 days (n = 5/period) after envenoming. The effects of protocols of irradiation using low potency lasers, HeNe (632.8 nm) and GaAs diode (904 nm), both with a energy density of 4 J/cm-2, on these parameters were evaluated. The first section of irradiation was administered soon after the i.m. injection of venom and then at each 24 h interval, in such a way that the number of irradiations done were one, one, two, 4, 8 and 22, respectively, applied perpendicularly right at the injection site during 120 s (HeNe) and 18.3 s (GaAs) duration for each session. For determination of LDH, TGO and mioglobin, a zero time without irradiation was added. The results were compared with control animals, injected with sterile saline (0.9%). Morphologically, the venom produced a immediate series of changes, the quality of which were similar from 3 to 24 h p.i., but with a progressive number of myonecrotic fibers and inflammatory infiltrate. The regenerative phase starting at day 3, showed a crescent number of regenerating and decreasing number of degenerated fibers with polymorphonuclear cells being replaced by macrophages. Histolgically, HeNe irradiation attenuated the first stages of degeneration (3 h), but GaAs¿s was more effective considering the whole period of observations (21 d), leading to the presence of higher number of miotubes and better cytoarchitecture of the tissue. The counting of capillaries at the site and periphery of lesion showed that the venom-injected unirradiated mice had a decrease in the average number of capillaries, and that laser irradiation accelerated the neovascularization, being HeNe more efficient than GaAs. The results also showed that VEGF and its receptors were expressed in a parcel of neutrophils, in sparce satellite cells in the initial periods of the envenoming (3 ¿ 24 h), in capillaries of the periphery of lesion and in the middle of the degenerating fibers. The irradiation with HeNe induced enhancement of VEGF expression in the neutrophils, but the GaAs abolished it. HeNe also promoted VEGF expression in the tendon capillaries and intact skeletal muscles. At 7 d p.i., VEGFlabeled fibroblast-like cells were seen in the regenerative region, as well as ¿satellite¿-like cells around developing miotubes after irradiation with HeNe. The irradiation by both lasers also induced VEGF positivity in tenocytes, in smooth muscle cells of blood vessels, in adventitia layer, in neuromuscular spindle and in the interstices of intramuscular nerves in the periods from 7 to 21 days p.i.. The results from serum enzymes showed that HeNe irradiation reduced markedly CK activity from 3 h to 7 days, whereas GaAs reduced it from 12 h to 21 days p.i.. AcPase activity increased dramatically at 12 h p.i. after which there was decline, which was more accentuated with laser GaAs. HeNe irradiation induced a gradual increase of AlkPase activity until 24 h p.i., followed by decrease, whereas GaAs caused an extraordinary increase between 12-24 h, maintaining a significant difference in comparison to the venom unirradiated mice. The irradiation with HeNe was not efficient in decrease the LDH levels; on the contrary, it was deleterious, elevating their levels. Conversely, the irradiation with GaAs was efficient in decrease significantly the enzyme levels during all observed periods. In regard to TGO, the irradiation with HeNe was efficient in diminishing the enzyme levels in the initial 3 h p.i., after which it was deleterious. On the other hand, irradiation with GaAs was not effective in minimizing AST serum levels, except at day 7 when there was a significant 16.6% reduction. The high mioglobin serum levels induced by B. moojen venom, significantly declined with GaAs from 12 h to 7 d p.i., while HeNe irradiation showed efficacy between 3-7 days p.i. The group of mice injected (I.m.) with sterile saline did not show any significant difference in all periods analyzed for these parameters. We conclude that therapy with low potency laser applied locally is capable of alter the serum content of muscle damage biomarkers (CK and myoglobin), as well markers of systemic alterations. The photostimulation promoted by low energy laser irradiation can alter favorably markers of local and systemic alterations caused by Bothrops moojeni snake envenoming, suggesting this approach as a promising resource for recovery of affected muscle as well as in the resulting systemic disturbances. Key-words: B. moojeni, CK, seric enzymes, morphometry, VEGF, laser irradiation / Doutorado / Histologia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:29:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao kelly cristina borges tacon santos.pdf: 1732513 bytes, checksum: 5bf4b573e2a46462cc50c821b7b2fc7d (MD5) Previous issue date: 2011-03-14 / Objective: To analyze the healing activity AlGaInP laser in induced skin wounds in rats wistar. Materials and Methods: This is an experimental study, pre-clinical trial conducted in the room at the Center for Research and Toxic-pharmacological approaches. Were used for the experiment 54 Wistar rats divided into 3 groups of 18 animals and divided into 3 groups of 6 animals. The animals were weighed, tricotomiados anesthetized and then subjected to a surgical incision in the dorsal-neck of all animals using a punch of 1 cm (diameter). After 24 hours of surgery, we used the laser diode Aluminum Indium Gallium Phosphorus - AlGaInP (IBRAMED - Laserpulse) with a continuous power of 30 mW and wavelength (&#654;) of 660 nm for the treatment groups L3 and L6 (3 and 6J/cm2 + saline (0.9%) respectively and for the control group (CG) received only saline (0.9%). The animals (n = 6) for each group were euthanized at 5, 10 and 15th days after injury. The samples were embedded in paraffin, stained with hematoxylin-eosin and picrossírius. We observed the daily appearance of the wound during the healing process and noted in individual spreadsheet, by the same examiner. Data from histological evaluation were converted in quantitative variables by assigning scores: absent (0), mild (1-25%), moderate (25-50%) and severe (above 50%). For morphometric analysis, we used the program Image J. The count of the number of blood vessels was used for point counting planimetry. For analysis of collagen was used picrossírius staining and polarized light to scan images. The data were treated statistically by analysis of variance (ANOVA) and post-Tukey test. For the non - parametric variables we used the Kruskal - Wallis test. The significance level was set at (p<0.05). Results: There was a statistically significant difference in the contraction of the wound edge in L3 group compared to GC and L6 on the 10th day of the injury, indicating that the laser energy density 3J/cm2 acted positively in the healing process. During the histological assessment, we observed reduction of bleeding (p=0.007) L3 group compared to control and to the number of polymorphonuclear (p=0.045) treated groups L3 and L6 compared to control. Also on the 10th day there was also an increase in collagen content (p=0.003) L3 and L6 in the groups compared to control. On the 15th day was observed a significant increase in collagen content (p=0.034) of the L6 in the control group. Conclusion: The wound healing activity AlGaInP laser was evidenced by increased angiogenesis, decreasing inflammation and stimulation of fibroplasia. Thus it is assumed that the laser used in the study contributed positively tested in both phases (inflammatory and proliferative) to accelerate the healing process and also that the energy densities of three proposals 6J/cm2 and responded to the type of treatment proposed in this study. / Objetivo: Analisar a atividade cicatrizante do laser AlGaInP em feridas cutâneas induzidas em ratos wistar. Materiais e Métodos: Trata-se de um estudo experimental, pré-clínico, realizado na sala de experimentação do Núcleo de Estudos e Pesquisas Tóxico-farmacológicas. Foram utilizados para o experimento 54 ratos fêmeas linhagem Wistar distribuídos em 3 grupos de 18 animais e subdivididos em 3 grupos de 6 animais. Os animais foram pesados, tricotomiados, anestesiados e posteriormente submetidos a uma incisão cirúrgica em região dorso-cervical de todos os animais utilizando um punch de 1cm (diâmetro). Após 24 horas da cirurgia utilizou-se o laser diodo Alumínio Gálio Índio Fósforo - AlGaInP ( IBRAMED Laserpulse) com uma potência contínua de 30 mW e comprimento de onda (&#654;) de 660 nm para o tratamento dos grupos L3 e L6 (3 e 6J/cm2 + solução fisiológica (0,9%) respectivamente e para o grupo controle (GC) utilizou-se apenas solução fisiológica (0,9%). Os animais (n=6) de cada grupo foram eutanasiados no 5, 10 e 15° dias após a lesão. As amostras obtidas foram emblocadas em parafina, coradas com hematoxilina-eosina e picrossírius. Foi observado diariamente o aspecto da ferida durante o processo de cicatrização e anotado em planilha individual, sempre pelo mesmo examinador. Os dados da avaliação histológica obtidos foram transformados em variáveis quantitativas, pela atribuição de escore: ausente (0), discreto (1 a 25%), moderado (25 a 50%) e acentuado (acima de 50%). Para análise morfométrica, utilizou-se o programa Image J. A contagem do número de vasos sanguíneos utilizou-se a planimetria por contagem de pontos. Para análise do colágeno utilizou-se coloração picrossírius e luz polarizada para digitalizar as imagens. Os dados foram tratados estatisticamente pela análise de variância (ANOVA) e pós-teste de Tukey. Para as variáveis não paramétricas utilizou-se o teste Kruskal Wallis. O nível de significância foi fixado em p< 0,05. Resultados: Observou-se uma diferença estatística significativa na contração da borda da ferida no grupo L3 em relação aos grupos GC e L6 no 10º dia da lesão, indicando que o Laser na densidade de energia 3J/cm2 atuou de forma positiva no processo de cicatrização. Durante a avaliação histológica, observou-se diminuição da hemorragia (p=0,007) do grupo L3 em relação ao controle e também no número de polimorfonucleares (p=0,045) dos grupos tratados L3 e L6 em relação ao controle. Ainda no 10°dia observou-se também um aumento no conteúdo de colágeno (p=0,003) nos grupos L3 e L6 em relação ao controle. No 15° dia foi observado um aumento significativo no conteúdo de colágeno (p=0,034) do grupo L6 em relação ao grupo controle. Conclusão: A atividade cicatrizante do laser AlGaInP foi evidenciada pelo aumento da angiogênese, diminuição da inflamação e estímulo da fibroplasia. Dessa forma admite-se que o laser utilizado no estudo contribuiu de forma positiva em ambas as fases testadas (inflamatória e proliferativa) para acelerar o processo de cicatrização e também que as densidades de energia propostas 3 e 6 J/cm2 responderam ao tipo de tratamento proposto neste estudo.