Orientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Rosangela Zacarias Machado / Banca: Marcos Rogério André / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Felipe Augusto Ruiz Sueiro / Resumo: O tumor venéreo transmissível canino (CTVT) é um câncer transmissível que propaga-se, naturalmente, entre os cães pela transferência alogênica de células tumorais, principalmente, durante o coito. Trata-se da mais antiga linhagem tumoral conhecida na natureza e uma de suas características marcantes é a habilidade de se desenvolver e se evadir da rejeição imunológica, como enxerto alogênico, apesar da estrita e contínua vigilância do sistema imunológico. Há a hipótese de que as células do CTVT não expressam MHC-II, como um mecanismo de escape à detecção imune, e que a positividade detectada em muitas amostras tumorais possa ser atribuída à infiltração de células do hospedeiro no sítio do tumor. Objetivou-se avaliar a expressão gênica e proteica e a caracterização genotípica do loco DLADQA-1 (MHC-II) em tumores venéreos transmissíveis de ocorrência espontânea em cães. Adicionalmente, detectar a interação entre anticorpos séricos e antígenos tumorais específicos do CTVT. Para tanto, foram incluídos neste estudo 20 cães provenientes de São José do Rio Preto, São Paulo, Brasil, com CTVT de ocorrência natural. As amostras tumorais foram coletadas antes do tratamento quimioterápico (M1) e três semanas após o início da quimioterapia (M2). A análise de expressão gênica foi realizada pelo método de qPCR e de expressão proteica de CD3, CD79, MAC387, Ki67 e MHC-II, pelo método de imuno-histoquímica. Foi realizado sequenciamento por capilaridade para caracterização genotípica e estudo dos antígenos tumorais pela técnica de Western Blotting. Amostras de CTVT e de seus hospedeiros provenientes de outros países foram empregados para estudos comparativos. Foi observada diferença significativa de células imunomarcadas para MHC-II e CD3 entre M1 e M2 detectando-se maior expressão em M2. Não houve expressão gênica de DLADQA-1 em nenhuma amostra de CTVT em M1 e M2. O elevado grau de... / Abstract: The canine transmissible venereal tumor (CTVT) is a transmissible cancer that is spread between dogs by the allogeneic transfer of living cancer cells during coitus. It is the oldest cancer lineage known in nature and one of the most remarkable features of CTVT is its ability to develop and evade the immune rejection, as an allogeneic graft, despite the strict and continuous surveillance of the immune system. It has been hypothesized that CTVT cells do not express MHC-II as an escape mechanism to immune detection, and MHC-II positivity detected in tumor samples can be attributed to infiltrating host cell at the tumor site. The aims of this study were: evaluate gene and protein expression and genotypic characterization of DLADQA-1 locus (MHC-II) in spontaneous transmissible venereal tumours in dogs. Additionally, to detect the interaction between serum antibodies and specific tumor antigens of CTVT. For this, 20 dogs from São José do Rio Preto, São Paulo, Brazil with naturally occurring CTVT were included and samples were collected before chemotherapy (M1) and three weeks after starting chemotherapy (M2). The gene expression analysis was performed by qPCR method and protein expression of CD3, CD79, MAC387, Ki67 and MHC-II by immunohistochemistry method. Sequencing was performed by capillary method and the study of tumor antigens by the Western Blotting technique. CTVT samples and their hosts from other countries have been used for comparative studies. Significant differences were observed in MHC-II and CD3 immunostained cells between M1 and M2 with higher expression in M2. There was no gene expression of DLADQA-1 in any sample of CTVT in M1 and M2. The genotypic similarity between tumor samples, which differ from their respective hosts, is consistent with a clonal origin of this tumour. There was no significant difference between the genotypes of hosts and control dogs. The detection of two protein bands in different CTVT from Brazil ... / Doutor

Resumo: O tumor venéreo transmissível (TVT) é a segunda neoplasia de maior prevalência nos cães atendidos no Hospital Veterinário de Botucatu. Na associação entre o comportamento biológico do tumor e a clínica desses animais, há fortes diferenças em relação às apresentadas na literatura especializada no assunto. O TVT desperta, no meio científico, o interesse pela sua origem, modo de transmissão e questionável regressão espontânea, fato atribuído ao comportamento versátil desse tumor, diferindo dos mecanismos de outras neoplasias. Investigações têm sugerido fenômenos semelhantes aos que ocorrem nos tumores de outras espécies, inclusive no homem. A quimioterapia para o TVT é a mais indicada. Porém, traz efeitos colaterais extremamente tóxicos às células desses animais. Pesquisadores relatam a propriedade antitumoral in vitro da própolis sobre o grau de agressividade do TVT. Para tal, foram utilizadas células neoplásicas de 77 animais, sem distinção por raça, sexo e idade. Os animais foram provenientes do Hospital Veterinário da FMVZ - UNESP, Campus de Botucatu. As neoplasias foram divididas em três Grupos: TVT linfocitóide; TVT plasmocitóide e TVT misto. Nestas neoplasias, o índice de proliferação celular foi verificado pelo AgNOR e CEC, para auxiliar a averiguar o grau de agressividade do tumor. No final do estudo, foi possível observar que a própolis apresenta atividade antitumoral tempo-dose dependente sobre as células de TVT, incluindo nas do grupo plasmocitóide (considerada a de maior agressividade), onde, após 48 horas e na concentração de 100 æg, a atividade antitumoral é efetiva. Concluímos também que os marcadores de proliferação (AgNOR e CEC) mostram-se eficientes para monitorar a evolução do TVT e que, a avaliação clínica, morfológica e o estudo in vitro auxiliam no diagnóstico, na conduta terapêutica e na monitoração do TVT. / Abstract: The transmissible venereal tumor is the second most common neoplasia among the dogs attended in the Veterinary Hospital of Botucatu. When neoplastic biological behavior and clinical findings are associated, intense differences were presented with the literature. In the scientific environment, interest in the origin of this tumor, the means of transmissible and questionable spontaneous regression, since this tumour has a versatile behavior, differs from that in other neoplasias. Studies have been done that show similar phenomena occurring in human neoplasias. Chemotherapy is advised for transmissible venereal tumor, but it has extreme toxicity for other cells. Investigators have related the antitumoral properties of propolis; so, this study aimed to verify the supposed antitumoral effect on the transmissible venereal canine tumor, in order to minimize the toxicity caused by chemotherapy. Seventy-seven animals from Veterinary Hospital of Botucatu, were used. Based on the cellular morphology stained with Giemsa, new nomenclature was created and the animals were divided into three groups: "lymphocyte-like" transmissible venereal tumor, "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor and "mixed" transmissible venereal tumor. Proliferation markers (AgNOR and CEC) were used to verify whether there were malignancies, in different morphological groups and in the sensitivity to propolis, were studied in vitro. In this study, we saw that propolis showed activity on transmissible venereal tumor. After 48 hours and with 100 æg of propolis, the antitumoral activity was effective, including the "plasmocyte-like" transmissible venereal tumor, that showed cytotoxic effect only with the greatest dose and the longest time. / Orientador: Noeme Sousa Rocha / Coorientador: José Maurício Sforcin / Mestre

Orientador: Aureo Evangelista Santana / Coorientador: Gyl Eanes Barros Silva / Coorientador: Mirela Tinucci Costa / Banca: Priscylla Tatiana Chalfun Guimarães Okamoto / Banca: Andrigo Barboza de Nardi / Banca: Geórgia Modé Magalhães / Banca: Sabryna Gouveia Calazans / Resumo: O presente estudo buscou avaliar as alterações glomerulares e tubulares associadas com o carcinoma mamário em cadelas. Para tanto foram utilizadas 11 fêmeas caninas como controle e 32 com diagnóstico de carcinoma mamário, atendidas pelo Serviço de Oncologia e Obstetrícia do Hospital Veterinário "Governador Laudo Natel" da Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal, SP. O protocolo experimental incluiu a obtenção de histórico clínico e exames inerentes ao hemograma, bioquímica sérica, excreção fracionada de sódio, eletroforese de proteínas séricas e urinárias e pressão arterial sistêmica em conjunto da avaliação do tecido renal obtido por tru-cut logo após a realização da ováriohisterectomia (OH), os quais foram avaliados por microscopia de luz, imunofluorescência e microscopia eletrônica de transmissão. Vale ainda ressaltar que exames sorológicos, PCR e testes hormonais foram utilizados para exclusão/inclusão de animais nos seus respectivos grupos. O grupo carcinoma apresentou maior concentração de globulinas, haptoglobina e transferrina séricas, indicando provável estímulo e produção de substâncias provenientes do carcinoma mamário. A proteinúria associada a maior frequência no aparecimento de proteínas urinárias de baixo, médio e alto pesos moleculares e sua relação com as alterações da microscopia de luz evidência que existem tanto alterações glomerulares quanto tubulares. Ademais a associação desses achados ao depósito de diferentes classes de imunoglobulinas e complemento C3 (C3) na imunofluorescência renal, e a presença de depósitos eletrodensos subendoteliais no glomérulo confirmam a existência de importantes alterações renais relacionados ao carcinoma mamário em cadelas / Abstract: The present study evaluated the glomerular and tubular alterations associated with mammary carcinoma in bitches. Eleven animals was used for control and 32 bitches with diagnosis of mammary carcinoma was assisted by Oncology and Obstetrics Service of the Veterinary Teaching Hospital "Governador Laudo Natel" of Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias - UNESP, câmpus de Jaboticabal. The experimental protocol included obtaining clinical history and examination inherent to the blood count, serum biochemistry, urinary fractional excretion of sodium, electrophoresis of serum and urinary protein and blood pressure in combination with the evaluation of renal tissue obtained by tru-cut after the achievement of ovariohysterectomy (OH), which were evaluated by light, immunofluorescence and transmission electron microscopy (TEM). Serological tests, PCR and hormonal tests were used for animal's exclusion or inclusion in their respective groups. Carcinoma group had higher concentration of globulins, haptoglobin and serum transferrin, indicating probable stimulation and production of substances from mammary carcinoma. Proteinuria associated with higher frequency of low, medium and high molecular weights of urinary proteins and their relationship with glomerular and tubular alterations evidenced by light microscopy and the association of these findings to the deposit of different classes of immunoglobulins and complement C3 (C3) in renal immunofluorescence, and the presence of subendothelial electron-deposits in the glomerulus might support the hypothesis of existence of renal alterations associated with mammary carcinoma / Doutor

Orientador: Noeme Souza Rocha / Resumo: No presente trabalho foram avaliadas 152 massas neoplásicas de tumor venéreo transmissível procedentes do Hospital Veterinário da FMVZ-UNESP e do Biotério central da UNESP (campus Botucatu), no período de março de 2002 a setembro de 2004. As preparações citológicas foram coradas pelo método de Giemsa e, segundo critérios estabelecidos, foram divididos em três tipos citomorfológicos: linfocitóide, misto e plasmocitóide. Posteriormente, foram reagrupadas de acordo com comportamento biológico em primárias e não primárias. O objetivo foi identificar e comparar anormalidades nucleares (binucleação, multinucleação, brotamento, lobulação e micronucleação), avaliar parâmetros citomorfométricos através da técnica da CEC (concentração eletrolítica critica), determinar a taxa de proliferação mediante a imunomarcação com o Ki-67 (MIB-1) e com a quantificação das AgNORs, observar a expressão da glicoproteína-p, avaliar a resposta clínica à quimioterapia, bem como, relacionar esta resposta com a expressão de glicoproteína-p. Foi observada maior freqüência das lobulações nucleares no tipo plasmocitóide. A área do nucléolo e a relação nucléolo/núcleo foram maiores nas massas primárias. O Ki-67 (MBI-1) apresentou maior taxa de marcação (positividade) no tipo plasmocitóide e nas neoplasias não primárias. A média de pontos das AgNORs foi maior no tipo linfocitóide em relação aos outros dois tipos. O tipo plasmocitóide e o grupo das neoplasias não primárias tiveram um percentual de marcação da glicoproteína-p maior em relação aos outros grupos. Os tumores do grupo plasmocitóide tiveram um maior percentual de resposta parcial à terapia do que os outros grupos, enquanto os tipos linfocitóde tiveram um maior percentual de resposta completa. Os casos com resposta clínica parcial à quimioterapia apresentaram um... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: In this study were evaluated 137 neoplastic masses of transmissible venereal tumor from clinical attendance at the Veterinary Hospital and Central biotery of UNESP (Botucatu campus), between March 2002 and September 2004. The cytological samples were stained by the Giemsa method and, by preestablished criteria, divided into three cytomorphological patterns: lymphocyte-like, plasma cell-like and mixed. Then, They were regrouped by biological behavior as primary or non-primary (metastatic or recurrent). The aim of the present work was to identify and compare nuclear abnormalities occurrence (binucleation, multinucleation, nuclear buds, nuclear lobulation and micronucleation), to evaluate cytomorphometric parameters by the critical electrolyte concentration (CEC) technique, to determinate proliferation ratio by immunoreaction with Ki-67 (MIB-1) antibody and AgNOR quantification. Additionally, the immunolabelling with p-glycoprotein antibody, and the clinical response to chemotherapy, were evaluated and correlated. The results showed a higher frequency of nuclear lobulation in the plasma-cell-like pattern. The nucleolus area and nucleolus: nucleus ratio were greater in primary masses. The proliferative index measured by Ki-67 immunocytochemistry was most elevated in the plasma-cell-like and not primary tumors. The AgNOR point average was highest in lymphocyte-like patterns. The expression of p-glycoprotein was highest in plasma-cell-like and non-primary masses than in the others. Similarly, the plasma-cell-like group showed a larger partial response to chemotherapy than the other two patterns, although the lymphocyte-like group presented the largest percentage of complete response. The association between p-glycoprotein expression and clinical response revealed that with the partial response had greater p-glycoprotein expressions than the total response... (Complete abstract, click electronic address below). / Doutor

Orientador: Érika Veruska Paiva Ortolan / Banca: Bonifácio Katsumori Takegawa / Banca: José Roberto de Souza Baratella / Resumo: Com a finalidade de avaliar a repercussão no prognóstico e na morbidade dos pacientes com TCG em função da adesão do cirurgião ao protocolo cirúrgico, foram analisados retrospectivamente, com ênfase nos aspectos cirúrgicos, 64 pacientes de 0 a 18 anos completos, durante o período de junho de 1996 a janeiro de 2009 em dois centros de referência para o tratamento do paciente oncológico pediátrico: Hospital Amaral Carvalho de Jaú e o Hospital das Clínicas da Faculdade de Medicina de Botucatu (UNESP). Os dados coletados eram referentes a variáveis qualitativas e, desse modo, foram obtidas frequências e porcentagens para cada variável. As associações entre as variáveis de interesse foram feitas obtendo-se tabelas de contingência e testes qui-quadrado ou exato de Fisher. Em todos os testes foi adotado o nível de significância de 5%. Dos 64 pacientes estudados, 22 do Hospital Amaral Carvalho e 42 do Hospital das Clínicas - UNESP, com relação ao local primário, houve predomínio do ovário, seguido de testículo, sacrococcígeo, retroperitoneal, mediastino, orofaringe e útero. O tipo histológico predominante foi o teratoma puro, e o estadio I foi o mais freqüente. Quarenta e quatro pacientes foram classificados como baixo risco, e todos os 64 pacientes receberam tratamento cirúrgico, sendo em 44 deles exclusivo. A cirurgia pediátrica foi quem mais encaminhou casos operados dos serviços de origem, enquanto a ginecologia foi a especialidade que mais operou nas instituições de estudo. Quinze casos foram encaminhados com algum tipo de cirurgia e 49 encaminhados sem cirurgia. A quantidade de casos encaminhados sem cirurgia prévia foi estatisticamente significante quando comparado aos casos encaminhados com algum tipo de cirurgia. Dos 15 pacientes encaminhados com algum tipo de cirurgia, 10 seguiram o protocolo... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: In order to assess the impact on prognosis and morbidity of patients with GCT according to the surgeon's accession to the surgical protocol were analyzed retrospectively, with emphasis on surgery, 64 patients 0-18 years of age, during the period of June 1996 to January 2009 in two hospitals for the treatment of pediatric cancer patients: Hospital Amaral Carvalho de Jau and the Hospital of the Medical School of Botucatu (UNESP). Data were collected regarding the qualitative variables, and thus, frequencies and percentages were obtained for each variable. The associations between the variables of interest were made by obtaining contingency tables and chisquare or Fisher exact test. In all tests, we adopted the significance level of 5%. Of the 64 patients studied, 22 of 42 Amaral Carvalho Hospital and the Hospital das Clinicas - UNESP, with respect to the primary site, there was a predominance of the ovary, followed by testis, sacrococcygeal, retroperitoneal, mediastinal, oropharynx and uterus. The predominant histological type was pure teratoma, and the stage I was the most frequent. Forty-four patients were classified as low risk, and all 64 patients received surgical treatment in 44 of them being unique. The pediatric surgery was the most referred cases operated source of services, while gynecology was the specialty that most institutions operated in the study. Fifteen cases were referred to some type of surgery and 49 conveyed without surgery. The number of cases referred without previous surgery was statistically significant when compared to cases presenting with some type of surgery. Of the 15 patients referred with type of surgery, 10 followed the protocol and not 5, while the 49 patients referred without surgery, 24 were operated on following the protocol and not 25. Although there was no statistically significant differences... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: Os objetivos deste estudo foram detectar a presença e a expressão dos genes supressores p53 e c-Myc em tumores palpebrais, pelas técnicas de PCR, RTPCR, PCR-ELISA E RT-PCR-ELISA que até o então não foram descritas nestes tumores e nesta espécie. Foram utilizadas 10 amostras de tumores que foram fixados em formol e incluídos em parafina. O material foi obtido junto aos arquivos do Serviço de Patologia Veterinária, sendo nove amostras de tumores localizados nas pálpebras e terceira pálpebra e uma de tumor mamário para controle. Todos os tumores tiveram o seu diagnóstico firmado empregando-se a coloração de H.E e imunoistoquímica para citoqueratina AE1/AE3 e vimentina (V9), marcadores de tecido epitelial e mesenquimal, respectivamente. Os resultados indicaram que os tumores palpebrais e da terceira pálpebra aqui estudados verificou-se a presença do gene supressor p53 em 8 amostras (88,8%, n=8), e entre as amostras positivas (n=8), ele esteve expresso em 75 % delas. O gene supressor c-Myc esteve presente em 5 amostras (55,5%) e com expressão em 100% delas (n=5). Foi possível concluir que os tumores palpebrais e da terceira pálpebra de cães expressam o p-53 e c-Myc identificados pelas técnicas de PCR e RT-PCR, no entanto, as técnicas de PCR ELISA e RT-PCR ELISA foram mais importantes para avaliação da presença e expressão do oncogenes estudados, pois permitiram identificar produtos amplificados que não foram visualizados em gel de agarose. / Abstract: The aims of this study were to detect the presence and the expression of p53 and c-Myc suppressor genes in eyelid tumors of dogs, by the PCR, RT-PCR, PCR-ELISA and RT-PCR-ELISA techniques, which until then they were not described in these tumors and in this specie. Ten samples of tumors were fixed in formalin and included in paraffin. The material was obtained from the archives of the Department of Veterinary Pathology, being nine samples of epithelial tumors located in the eyelids and the third eyelid, and a breast tumor which was used as a positive control of the reactions. All the samples had reached their diagnosis employing up the HE technique, and the immunohistochemistry for cytokeratin AE1/AE3 and vimentin (V9). The results showed that the eyelid and the third eyelid tumors, here studied, (88.8%, n=8) of them demonstrated the presence of the p53 gene and between the positive samples (n=8), the expression was around 75%. The c-Myc gene was present in 55.5% (n=5) of the samples, with 100% of expression (n=5). Thus, it was possible to conclude that the eyelid and the third eyelid tumors of dogs express the p53 and c-Myc genes, identified by the techniques of PCR and RT-PCR, however, the PCR ELISA and RT-PCR ELISA techniques were of extreme importance for assessing the presence and expression of these studied genes, and they allowed to identify amplified products that were not visible on the electrophoresis on the agarose gel. / Orientador: Alexandre Lima de Andrade / Coorientador: Tereza Cristina Cardoso da Silva / Banca: Débora Aparecida Pires de Campos Zuccari / Banca: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:51Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-02-18Bitstream added on 2014-06-13T19:25:31Z : No. of bitstreams: 1 barra_rr_me_botfm.pdf: 279891 bytes, checksum: 248366747840e55e574a1cabd3ba3749 (MD5) / Este estudo teve como objetivo avaliar a eficácia da cintilografia de mamas com sestamibi-99mTc na predição da resposta tumoral à quimioterapia neoadjuvante, em pacientes com tumor localmente avançado da mama (estadio T3 e T4, maiores que 5 cm, com invasão de parede ou pele). Foram selecionadas 33 pacientes do sexo feminino com câncer de mama que realizaram cintilografia de mamas antes, durante e após quimioterapia neoadjuvante (QT), seguida de cirurgia (mastectomia ou quadrantectomia). A cintilografia de mamas foi realizada nas incidências anterior e laterais, 10 minutos (precoce) e 60 minutos (tardia) após a injeção de 740 a 925 MBq de sestamibi-99mTc. A aquisição foi realizada em três momentos: estudo basal (antes da QT), após quatro ciclos de QT e após término do esquema quimioterápico, antes da cirurgia. Foi calculada a relação Tumor/Radiação de fundo, através de regiões de interesse com contagens/pixel, nas imagens precoces e tardias de cada estudo. Houve correlação estatisticamente significativa entre a imagem de aquisição tardia (60 minutos após a injeção) e a resposta tumoral à quimioterapia. Apesar de não ter sido estatisticamente significativo, observou-se que um valor de cutoff que separa os respondedores dos não respondedores seria de 28%, ou seja, taxa de washout < 28% preveria os respondedores e washout > 28% seria o grupo dos não respondedores. Os resultados encontrados são compatíveis com outras publicações disponíveis, sendo encorajadores, porém mais estudos e novas investigações são necessários / This study aimed to evaluate the efficacy of breast scintigraphy with 99mTc-sestamibi predicting tumor response to neoadjuvant chemotherapy in patients with locally advanced breast tumors (stage T3 and T4, larger than 5 cm, with chest wall or skin invasion). 33 female patients with breast cancer who underwent scintigraphy breast before, during and after neoadjuvant chemotherapy (NAC) followed by surgery (mastectomy or lumpectomy) were chosen. Breast scintigraphy was performed in front and side view, 10 minutes (early) and 60 min (delayed) after injection of 740-925 MBq of 99mTc-sestamibi. The acquisition was performed at three time points: baseline study (before NAC), after four cycles of NAC and after completion of chemotherapy regimen before surgery. The tumor / background radiation ration was calculated through regions of interest in counts / pixel in early and late images of each study. There was a statistical significant positive correlation in the Student t test between the mean values of the ratio tumor / background radiation of 10 and 60 minutes in the first and second studies. However, there was no statistical significance, cutoff value to distinguish responders would be 28%, that is, washout ratio < 28% would indicate NAC responders while washout ration > 28% nonresponders. Our results are encouraging and similar to some available publications; more research needed and further are investigations

Os objetivos da tomografia computadorizada de tórax pré-operatória na investigação dos pacientes com carcinoma brônquico são avaliar o tumor primário, o mediastino e outros possíveis comprometimentos extrapulmonares em pacientes com doença potencialmente ressecável. No período de janeiro de 1992 a dezembro de 1996, foram estudados 141 pacientes portadores de carcinoma brônquico não de pequenas células internados no Serviço de Cirurgia Torácica do Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, buscando-se comparar achados entre tomografia computadorizada de tórax, mediastinoscopia com biópsia e toracotomia, no que se refere à avaliação dos gânglios linfáticos mediastinais em pacientes portadores de carcinomas brônquicos não de pequenas células. O principal objetivo do trabalho foi determinar o rendimento global e por regiões nodais da tomografia computadorizada de tórax. Usou-se como critério de normalidade para os gânglios um tamanho menor ou igual a 1,5 cm em seu maior eixo.A presença ou ausência de metástases ganglionares foram comprovadas por exame anatomopatológico através de mediastinoscopia e/ou toracotomia. Asérie é constituída de 99 (70,3%) homens e 42 (29,9%) mulheres, com idades variando entre 32 e 79 anos (média 60,3 anos). Em relação às metástases nodais mediastinais, 67 pacientes (47,5%) não as apresentavam (N0), 29 (20,5%) tinham doença metastática ganglionar peribrônquica e/ou hilar ipsilateral (N1), 30 (21,2%) possuíam metástases mediastinais ipsilaterais e/ou subcarinais (N2) e 15 (10,6%) apresentavam doença metastática mediastinal e/ou hilar contralateral, escalênica ou supraclavicular (N3). A prevalência global de metástases nodais foi de 52,2%. A avaliação da presença de metástases ganglionares mediastinais pela tomografia computadorizada de tórax apresentou uma sensibilidade de 79,2%, uma especificidade de 52,2%, um valor preditivo positivo de 63,3%, e um valor preditivo negativo de 50,6%. As regiões com melhores valores de sensibilidade foram paratraqueal esquerda alta (2L), paratraqueal direita baixa (4R) e paratraqueal esquerda baixa (4L). As regiões nodais com melhores resultados de especificidade foram paratraqueal esquerda alta (2L), paratraqueal esquerda baixa (4L), paratraqueal direita alta (2R) e paratraqueal direita baixa (4R). No presente trabalho, a tomografia computadorizada de tórax mostrou constituir-se em importante ferramentadiagnóstica na detecção de anormalidades em gânglios mediastinais; entretanto, a natureza neoplásica ou não desses gânglios deve ser conferida por mediastinoscopia, ou até mesmo por toracotomia, a fim de que a correta decisão possa ser tomada quanto ao tratamento cirúrgico de pacientes portadores de carcinoma brônquico não de pequenas células. / The goals of computed tomography of the thorax, before surgical intervention of patients with non small cell lung cancer are to evaluate the primary lesion, mediastinum and possible extrapulmonary involvement in patients with potencially resectable disease. From January, 1992 to December, 1996, 141 patients with non-small cell lung cancer were evaluated in the Thoracic Surgery Department of the Hospital São Lucas da Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, trying to compare findings among computed tomography, mediastinoscopy and thoracotomy, having in view the mediastinal lymph nodes in patients with non small cell lung cancer. The aim of the study was to determine the accuracy of the computed tomography globally and in each nodal station. A criteria of normality was used: 1,5 cm of diameter, or less, in the longest axis. The presence or absence of nodal metastasis was recorded by histopathological studies through mediastinoscopy and/or thoracotomy.The group was formed with 99 (70,3%) men and 42 (29,9%) women with the age range between 32 and 79 years old (average 60,3 years old). Considering the nodal metastasis, in 67 patients (47,5%) there were no evidence of regionalnode metastasis (N0), 29 (20,5%) there were metastasis to ipsilateral peribronchial and/or hilar region lymph nodes (N1), 30 (21,2%) there were metastasis to ipsilateral mediastinal or subcarinal lymph nodes (N2) and 15 (10,6%) this serie found metastasis to contralateral mediastinal or hilar, or to scalene or supraclavicular lymph nodes (N3). The global prevalence of nodal metastasis was 52,2%. The global evaluation of the computed tomography showed a sensivity of 79,2%, a specificity of 52,2%, a positive predictable value of 63,3% and a negative predictable value of 50,6%. The stations which presented the best results considering sensivity were left upper paratracheal (2L), right lower paratracheal (4R) and left lower paratracheal (4L). The nodal stations with the best results considering the specificity were left upper paratracheal (2L), left lower paratracheal (4L), right upper paratracheal (2R) and, right lower paratracheal (4R). In this serie, the computed tomography of the thorax had shown an important diagnostic tool in detection of mediastinal lymph node anormalities. Nevertheless, the neoplastic nature or not of these lymph nodes must be checked through mediastinoscopy, or even through thoracotomy, in order to achieve the correct decision regarding the surgical treatment of patients with non small cell lung cancer.

Dissertação (mestrado)—Fundação Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biologias, Programa de Pós Graduação em Biologia Animal, 2014. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-20T15:20:30Z No. of bitstreams: 1 2014_AlinedaSilvaChagas.pdf: 1323645 bytes, checksum: 96f661143e6ce644d15ed547e942f4ce (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-21T17:04:58Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_AlinedaSilvaChagas.pdf: 1323645 bytes, checksum: 96f661143e6ce644d15ed547e942f4ce (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-21T17:04:58Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_AlinedaSilvaChagas.pdf: 1323645 bytes, checksum: 96f661143e6ce644d15ed547e942f4ce (MD5) / A secreção cutânea de anuros é reconhecida como uma rica fonte de compostos biologicamente ativos, incluindo aminas biogênicas, alcaloides, bufadienolídeos, peptídeos e proteínas. Os peptídeos antimicrobianos constituem um sistema de defesa imediato, atuando sobre um grande espectro de mircroorganismos. A busca por novas alternativas terapêuticas no tratamento de infecções e câncer tem impulsionado nos estudos voltados à prospecção de novos peptídeos antimicrobianos. No presente trabalho, as secreções cutâneas de Leptodactylus labyrinthicus e Phyllomedusa azurea foram utilizadas para avaliar seus efeitos antiproliferativos e citotóxicos sobre células tumorais. Também foram submetidas a fracionamento cromatográfico a fim de se isolar peptídeos com atividade inibitória sobre a proliferação do fungo patogênico Candida albicans. As frações bioativas foram analisadas por MALDI-TOF MS e submetidas à recromatografia por RP-HPLC. De acordo com a estratégia experimental empregada foi possível a obtenção de duas frações homogêneas a partir da secreção de P. azurea, denominadas PaF31-7(F12) e PaF36-10(F13) que foram empregadas na determinação dos MICs para C. albicans. Tais frações mostraram-se capazes de inibir parcialmente o crescimento da levedura C. albicans na maior concentração empregada (128 µM). Também foram avaliados os efeitos citotóxicos e antiproliferativos das secreções brutas de P. azurea e L. labyrinthicus sobre as linhagens celulares HeLa, B16F10 e NIH3T3. Observou-se que a secreção bruta de L. labyrinthicus apresenta atividade antiproliferativa acentuada sobre células tumorais empregadas, especialmente células Hela, com um IC50 de 4,216 µg/mL sem apresentar citotoxicidade relevante contra células normais da linhagem NIH3T3. Ensaios adicionais de citometria de fluxo revelaram que a secreção bruta de L. labyrinthicus não interfere de forma significativa nas etapas do ciclo celular, no entanto, observa-se um aumento importante na fragmentação do DNA de células HeLa quando expostas à secreção, sugerindo que a morte celular ocorra por meio de apoptose. Mais estudos precisam ser realizados a fim de se determinar o mecanismo pelo qual a secreção bruta de L. labyrinthicus promove a morte das células tumorais. ______________________________________________________________________________ ABSTRACT / The anurans skin secretion is recognized as a rich source of active biological compounds, including alkaloids, peptides and proteins. The antimicrobial peptides constitute an immediate defense system, acting on a wide spectrum of microorganisms. The quest for new therapeutics alternatives for infections treatments and cancer have been driven studies focused on prospecting for new antimicrobial peptides. In this present work, the skin secretions by Leptodactylus labyrinthicus and Phillomedusa azurea were utilized for evaluating their antiproliferative and cytotoxic effects on tumor cells. Were also subjected the skin secretion to fractionation in order to isolate peptides with inhibitory activity on the proliferation of the pathogenic fungus Candida albicans. The bioactive fractions were analyzed by MALDI-TOF MS, and subjected to rechromatography by RP-HPLC. According to the experimental strategy used was possible to achieve two homogeneous fractions secretion from P. azurea, called PaF31 7 (F12) and PaF36 10 (F13). These fractions were capable of partially inhibiting the growth of the yeast C. albicans in greater concentration employed (128 μM). We also evaluated the cytotoxic and antiproliferative crude secretions of P. azurea and L. labyrinthicus on cell lines HeLa, NIH3T3 and B16F10 effects. It was found that the crude secretion of L. labyrinthicus shows marked antiproliferative activity on tumor cells employed, especially Hela cells with an IC50 of 4.216 μ g / ml without showing significant cytotoxicity against normal NIH3T3 cells lineage. Additional tests of flow cytometry showed that the crude secretion of L. labyrinthicus not significantly interfere with the stages of the cell cycle, however, there was a significant increase in DNA fragmentation in HeLa cells exposed to secretion, suggesting that cell death occurs by apoptosis. More studies need to be conducted to determine the mechanism by which the crude secretion of L. labyrinthicus promotes tumor cell death.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular, 2014. / Submitted by Larissa Stefane Vieira Rodrigues (larissarodrigues@bce.unb.br) on 2014-10-29T17:42:12Z No. of bitstreams: 1 2014_LudmillaReginaDeSouza.pdf: 5872084 bytes, checksum: 386a948215542a6de0ddc448cbd69b61 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2014-10-29T18:54:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_LudmillaReginaDeSouza.pdf: 5872084 bytes, checksum: 386a948215542a6de0ddc448cbd69b61 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-29T18:54:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_LudmillaReginaDeSouza.pdf: 5872084 bytes, checksum: 386a948215542a6de0ddc448cbd69b61 (MD5) / O selol é uma mistura oleosa de selenitotriacilgliceróis efetivo contra as células de câncer e menos tóxico às células normais em comparação às formas inorgânicas de selenito. No entanto, sua hidrofobicidade é um obstáculo à sua administração in vivo. Neste contexto, desenvolveu-se para o presente estudo uma formulação de nanocápsulas contendo selol estabilizadas pelo copolímero poli (vinil, metil-éter-co-anidrido maléico) (PVM/MA) (SNP). O objetivo deste trabalho foi caracterizar a formulação de nanocápsulas de selol e avaliar sua efetividade contra células de carcinoma de pulmão do tipo não-pequenas (CPCNP) em modelos in vitro e in vivo. As nanocápsulas de selol mostraram-se monodispersas e estáveis. As linhagens celulares de CPCNP utilizadas nos ensaios in vitro foram carcinoma de células escamosas (NCIH 2170) e adenocarcinoma (A549). Ambos selol livre (S) e SNP reduziram significantemente a viabilidade das células de adenocarcinoma pulmonar (A549), enquanto S reduziu mais pronunciadamente a viabilidade das células não tumorais em comparação a SNP. Células da linhagem NCIH 2170 não foram responsivas ao selol livre e encapsulado nas condições estudadas. O efeito supressor de SNP sobre as células A549 foi principalmente associado ao bloqueio na progressão do ciclo celular na fase G2/M, corroborado pelas reduções nas expressões gênicas de CCNB1 e CDC25C. Apoptose e necrose foram induzidas por S e SNP em porcentagens discretas de células A549. No entanto, SNP parece ter causado alterações celulares capazes de aumentar a produção de espécies reativas de oxigênio e os níveis dos transcritos de GPX1, CYP1A1, BAX e BCL2. Em camundongos portadores de adenocarcinoma de pulmão, SNP reduziu a área dos nódulos tumorais superficiais, no entanto não provocou redução do volume dos nódulos tumorais totais. A pequena diminuição da porcentagem de proliferação das células tumorais tratadas não foi estatisticamente significante. Os resultados bioquímicos e hematológicos são sugestivos de baixa toxicidade sistêmica por SNP. As propriedades de superfície das nanocápsulas de selol apontam para características compatíveis com o tratamento de tumores in vivo: baixos potenciais inflamatório e hemolítico, ausente ativação do sistema complemento e leves ou ausentes alterações conformacionais de proteínas plasmáticas. Concluindo, o presente estudo apresenta uma formulação de nanocápsulas de selol com potencial para ser utilizada como terapia contra células de adenocarcinoma de pulmão, e demonstra, pela primeira vez, bloqueio no ciclo celular induzido pelo selol. __________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Selol is an oily mixture of selenitetriacylglycerides that is effective against cancerous cells and less toxic to normal cells in comparison to the inorganic forms of selenite. However, its hydrophobicity hinders its administration in vivo. In this context, it was developed for the present study a formulation of poly (methyl vinyl ether-co-maleic anhydride) (PVM/MA)-stabilized selol nanocapsules (SNP). The aim of this work was to characterize the formulation of selol nanocapsules and evaluate its effectiveness against non-small cells lung carcinoma (NSCLC) at in vitro and in vivo models. Selol nanocapsules were monodisperse and stable. NSCLC cell lines used in in vitro assays were squamous cells carcinoma (NCIH 2170) and adenocarcinoma (A549). Both free selol (S) and SNP significantly reduced the viability of pulmonary adenocarcinoma (A549) cells, whereas S reduced more pronouncedly the viability of non-tumor cells, in comparison to SNP. The NCIH 2170 line cells were not responsive to both free selol and encapsuled under the conditions studied. The SNP suppressor effect at A549 cells was mainly associated to an arrest of cell cycle progression at G2/M phase, corroborated by down-regulation of CCNB1 and CDC25C genes. Apoptosis and necrosis were induced by S and SNP in discrete percentages of A549 cells. However, SNP appears to have induced cell changes able to increase reactive oxygen species production and transcripts levels of GPX1, CYP1A1, BAX and BCL2. In mice with lung adenocarcinoma, SNP reduced the area of superficial tumor nodules, however caused no reduction in the volume of total tumor nodules. Subtle decrease of proliferation percentage of treated tumor cells was not statistically significant. Biochemical and hematological findings are suggestive of low systemic toxicity by SNP. The surface properties of the selol nanocapsules indicate characteristics compatible with tumors treatment in vivo: low inflammatory and hemolytic potentials, no activation of complement system and mild or absent conformational changes of plasma protein. Concluding, this present study exhibits a selol nanocapsule with potential to be used as a therapy against lung adenocarcinoma cells, and shows, for the first time, cell cycle arrest induced by selol.