A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética recessiva e hereditária, ligada ao cromossomo X, caracterizada pela ausência ou insuficiência da proteína distrofina no sarcolema das fibras musculares. É uma doença muscular progressiva, que afeta um em cada 3.500 meninos. Atualmente, os cães da raça Golden Retriever, portadores da distrofia muscular do Golden Retriever (GRMD), que exibem mudanças musculares, patogenia, bem como o fenótipo, comparáveis aos vistos nos casos de DMD, vêm sendo considerados o melhor modelo animal para o estudo da DMD. Nos GRMDs a fraqueza muscular inicia-se a partir do segundo mês de vida e é progressiva, portanto, a expectativa de vida destes cães é muito reduzida. Histologicamente, os músculos mostram necrose, fibrose e regeneração. As manifestações patológicas da GRMD já se iniciam na vida intra-uterina com o desenvolvimento de lesões nos músculos da língua. A hipertrofia da língua está associada com disfunção da faringe e do esôfago, o que resulta em disfagia,regurgitação e sialorréia. O objetivo desse estudo foi avaliar no modelo animal, utilizando cães golden retrievers normais e afetados pela distrofia muscular de duchenne, a proteína na urina e o peso molecular das proteínas urinárias, além de acompanhar a bioquímica sérica. Durante quatro meses seis cães machos com distrofia muscular e idade entre dois e seis anos tiveram amostras de urina coletadas a cada duas semanas e amostras de sangue coletadas uma vez por mês, e três cães normais foram avaliados para estabelecer uma comparação. Nas amostras sanguíneas foram realizados exames para avaliar a função renal e a urina foi usada para a mensuração de proteína, creatinina e a realização da eletroforese. Não foi encontrado indício de lesão renal nos exames realizados nas amostras de sangue e também na relação proteína:creatinina nas amostras de urina. Na análise das eletroforeses, foi encontrado diferenças na quantidade de bandas protéicas apresentadas entre os animais normais e os cães com distrofia muscular. Os cães com distrofia apresentam uma maior distribuição de bandas de alto peso molecular que não são encontradas nos cães normais, além de terem ainda uma maior quantidade de proteínas de baixo peso molecular. Apesar de se manterem dentro dos parâmetros estabelecidos para lesão renal, os cães com distrofia, tem bandas protéicas que não são vistas em animais normais e que mantém a integridade do parênquima renal. / Duchennes Muscular Dystrophy (DMD) is a lethal childhood disease, a X-linked recessive disorder, caused by mutations of the dystrophyn gene, a protein that has a vital role in maintaining muscle structure and function. DMD is a progressive muscular disease, which affects 1:3500 born boys. At this moment, the dogs with Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD), are the best animal model to study DMD. GRMD dog exhibits muscle changes, pathogenesis and phenotype comparable with the DMD boys. In GRMDs, the muscular weakness beginning with 60 days of life and this is progressive. Histologically, the muscles show necrosis, fibrosis, degeneration and regeneration. The pathogenesis manifests in utero with the development of lingual muscle lesions. The tongue hypertrophy is associated with pharyngeal and esophageal dysfunction, and results in dysphagia, regurgitation and drooling. The aim of this research was investigates in normal dogs and in dogs affected by the Duchene muscular dystrophy the protein in the total urinary proteins and their separation with SDS-PAGE. During four months, six male dogs between two and six years were evaluated. The blood was examined once a month and the urine twice a month, three normal dogs were examined to establish a comparison between both. In blood samples were carried out tests to evaluate renal function and urine was used for the measurement of protein, creatinine and for electrophoresis. We found no evidence of kidney damage in tests performed on blood samples and also in the protein: creatinine ratio in urine samples. In the analysis of electrophoresis, we found differences in the amount of protein bands presented between normal dogs and dogs with muscular dystrophy. GRMD dogs have a wider distribution of bands with high molecular weight, which are not found in normal dogs. In addition they have a greater amount of protein with low molecular weight. While staying within the parameters established for renal injury, the dogs with dystrophy, has protein bands not seen in normal animals that maintains the integrity of the renal parenchyma.

Orientadora: Marileda Bonafim Carvalho / Banca: Julieta Rodini Engracia Moraes / Banca: Aguemi Kohayagawa / Resumo: Para este estudo foram avaliados 20 cães adultos sadios (10 machos e 10 fêmeas) e 24 cães adultos (16 machos e 8 fêmeas) com insuficiência renal crônica (IRC), com o objetivo de estudar a proteinúria. Foram empregadas técnicas para determinação quantitativa de proteína da urina e para a separação de suas frações por meio de SDS-PAGE. As quantidades de proteínas presentes na urina de cães sadios foram pequenas, mas o estudo dos perfis eletroforéticos mostrou haver diferenças entre machos e fêmeas. Apesar da ampla variação das concentrações de proteínas entre os animais, o grupo dos portadores de IRC apresentou proteinúria intensa. Os resultados dos portadores de IRC foram agrupados de acordo com o sexo ou em função do tipo de lesão renal predominante, para comparação dos eletroforetogramas. As análises revelaram que os perfis eletroforéticos seguem um padrão para os machos e outro pra as fêmeas. Ainda, o padrão o perfil eletroforético observado quando há predomínio de lesões glomerulares difere do observado quando há predomínio de lesões túbulo-intersticiais. / Abstract: This trial was conducted in 20 adult health dogs (10 male and 10 female) and in 24 adult dogs (16 male and 8 female) in chronic renal failure (CRF), in order to study urinary protein loss. Determination of total urinary proteins and their separation with SDS-PAGE were employed. The results show that CRF dogs had higher proteinuria when compared to controls and the amount of detected protein had large difference among them. In the CRF there are different patterns of protein bands occurrence and distribution according to the patient sex and predominant renal lesion. The difference between protein bands occurrence of male and female already exists in normal dogs. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001-01-16Bitstream added on 2014-06-13T19:15:42Z : No. of bitstreams: 1 toledo_egh_me_jabo.pdf: 1480955 bytes, checksum: 264147d52e4fdcb0c91216e8ebe11eca (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Para este estudo foram avaliados 20 cães adultos sadios (10 machos e 10 fêmeas) e 24 cães adultos (16 machos e 8 fêmeas) com insuficiência renal crônica (IRC), com o objetivo de estudar a proteinúria. Foram empregadas técnicas para determinação quantitativa de proteína da urina e para a separação de suas frações por meio de SDS-PAGE. As quantidades de proteínas presentes na urina de cães sadios foram pequenas, mas o estudo dos perfis eletroforéticos mostrou haver diferenças entre machos e fêmeas. Apesar da ampla variação das concentrações de proteínas entre os animais, o grupo dos portadores de IRC apresentou proteinúria intensa. Os resultados dos portadores de IRC foram agrupados de acordo com o sexo ou em função do tipo de lesão renal predominante, para comparação dos eletroforetogramas. As análises revelaram que os perfis eletroforéticos seguem um padrão para os machos e outro pra as fêmeas. Ainda, o padrão o perfil eletroforético observado quando há predomínio de lesões glomerulares difere do observado quando há predomínio de lesões túbulo-intersticiais. / This trial was conducted in 20 adult health dogs (10 male and 10 female) and in 24 adult dogs (16 male and 8 female) in chronic renal failure (CRF), in order to study urinary protein loss. Determination of total urinary proteins and their separation with SDS-PAGE were employed. The results show that CRF dogs had higher proteinuria when compared to controls and the amount of detected protein had large difference among them. In the CRF there are different patterns of protein bands occurrence and distribution according to the patient sex and predominant renal lesion. The difference between protein bands occurrence of male and female already exists in normal dogs.

A Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) é uma doença genética recessiva e hereditária, ligada ao cromossomo X, caracterizada pela ausência ou insuficiência da proteína distrofina no sarcolema das fibras musculares. É uma doença muscular progressiva, que afeta um em cada 3.500 meninos. Atualmente, os cães da raça Golden Retriever, portadores da distrofia muscular do Golden Retriever (GRMD), que exibem mudanças musculares, patogenia, bem como o fenótipo, comparáveis aos vistos nos casos de DMD, vêm sendo considerados o melhor modelo animal para o estudo da DMD. Nos GRMDs a fraqueza muscular inicia-se a partir do segundo mês de vida e é progressiva, portanto, a expectativa de vida destes cães é muito reduzida. Histologicamente, os músculos mostram necrose, fibrose e regeneração. As manifestações patológicas da GRMD já se iniciam na vida intra-uterina com o desenvolvimento de lesões nos músculos da língua. A hipertrofia da língua está associada com disfunção da faringe e do esôfago, o que resulta em disfagia,regurgitação e sialorréia. O objetivo desse estudo foi avaliar no modelo animal, utilizando cães golden retrievers normais e afetados pela distrofia muscular de duchenne, a proteína na urina e o peso molecular das proteínas urinárias, além de acompanhar a bioquímica sérica. Durante quatro meses seis cães machos com distrofia muscular e idade entre dois e seis anos tiveram amostras de urina coletadas a cada duas semanas e amostras de sangue coletadas uma vez por mês, e três cães normais foram avaliados para estabelecer uma comparação. Nas amostras sanguíneas foram realizados exames para avaliar a função renal e a urina foi usada para a mensuração de proteína, creatinina e a realização da eletroforese. Não foi encontrado indício de lesão renal nos exames realizados nas amostras de sangue e também na relação proteína:creatinina nas amostras de urina. Na análise das eletroforeses, foi encontrado diferenças na quantidade de bandas protéicas apresentadas entre os animais normais e os cães com distrofia muscular. Os cães com distrofia apresentam uma maior distribuição de bandas de alto peso molecular que não são encontradas nos cães normais, além de terem ainda uma maior quantidade de proteínas de baixo peso molecular. Apesar de se manterem dentro dos parâmetros estabelecidos para lesão renal, os cães com distrofia, tem bandas protéicas que não são vistas em animais normais e que mantém a integridade do parênquima renal. / Duchennes Muscular Dystrophy (DMD) is a lethal childhood disease, a X-linked recessive disorder, caused by mutations of the dystrophyn gene, a protein that has a vital role in maintaining muscle structure and function. DMD is a progressive muscular disease, which affects 1:3500 born boys. At this moment, the dogs with Golden Retriever Muscular Dystrophy (GRMD), are the best animal model to study DMD. GRMD dog exhibits muscle changes, pathogenesis and phenotype comparable with the DMD boys. In GRMDs, the muscular weakness beginning with 60 days of life and this is progressive. Histologically, the muscles show necrosis, fibrosis, degeneration and regeneration. The pathogenesis manifests in utero with the development of lingual muscle lesions. The tongue hypertrophy is associated with pharyngeal and esophageal dysfunction, and results in dysphagia, regurgitation and drooling. The aim of this research was investigates in normal dogs and in dogs affected by the Duchene muscular dystrophy the protein in the total urinary proteins and their separation with SDS-PAGE. During four months, six male dogs between two and six years were evaluated. The blood was examined once a month and the urine twice a month, three normal dogs were examined to establish a comparison between both. In blood samples were carried out tests to evaluate renal function and urine was used for the measurement of protein, creatinine and for electrophoresis. We found no evidence of kidney damage in tests performed on blood samples and also in the protein: creatinine ratio in urine samples. In the analysis of electrophoresis, we found differences in the amount of protein bands presented between normal dogs and dogs with muscular dystrophy. GRMD dogs have a wider distribution of bands with high molecular weight, which are not found in normal dogs. In addition they have a greater amount of protein with low molecular weight. While staying within the parameters established for renal injury, the dogs with dystrophy, has protein bands not seen in normal animals that maintains the integrity of the renal parenchyma.