Made available in DSpace on 2019-03-30T00:25:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2018-12-07 / The northeastern region of Brazil has faced the largest outbreak of the Chikungunya virus (CHIKV) in its history in the last two years. There are still few studies on kidney involvement in CHIKV infection. The present study analyzes the clinical and epidemiological characteristics of CHIKV in the State of Ceará, Brazil, outlining the profile of the reported cases, investigating the risk factors for death. This is a cross-sectional study including all registered cases of CHIKV in the State of Ceará in 2016-2017, based on the official data of the Health Secretariat of the State of Ceará (SESA-CE). There were 182,731 cases in 2016 and 2017, with a mean age of 32.4 ± 14.6 years and a predominance of females (62%). The clinical picture was characterized by fever (88.6%), headache (72.9%), severe arthralgia (69.5%) and myalgia (65.6%). Among comorbidities, there was a predominance of systemic arterial hypertension (6.9%) and diabetes mellitus (2.9%). CKD was reported in 691 cases (0.3%). Only 3.3% of patients needed hospitalization and only 0.1% died due to infection. The majority of the patients who died were the elderly, the male and the less educated. Independent risk factors for death were: advanced age (OR 7.35, p<0.0001), male gender (OR 2.05, p<0.0001), leukopenia (OR 3.18, p<0.0001), vomiting (OR 2.19, p<0.0001), and comorbidities like hypertension (OR 3.74, p<0.0001), diabetes (OR 3.29, p<0.0001), and chronic kidney disease (OR 3.14, p<0.0001). They also had a significantly higher frequency of diabetes mellitus, hematological disorders, Liver diseases, hypertension, peptic ulcer diseases and autoimmune diseases. Mortality was significantly higher among CKD patients comparing with patients without CKD (3.0% vs. 0.2%, p<0.0001). CHIKV infection may manifest as a serious disease, especially during epidemic periods. Advanced age and low schooling were associated with a higher mortality risk. Leukopenia and vomiting were signs of severity that should be valued by the health team, as well as the presence of comorbidities, especially hypertension, diabetes and kidney disease. / A região nordeste do Brasil tem enfrentado nos últimos dois anos o maior surto de infecção pelo vírus Chikungunya (CHIKV) em sua história. Ainda existem poucos estudos sobre o envolvimento renal na infecção pelo CHIKV. O presente estudo analisa as características clínicas e epidemiológicas do CHIKV no Estado do Ceará, Brasil, delineando o perfil dos casos notificados, investigando os fatores de risco para óbito. Trata-se de um estudo transversal incluindo todos os casos registrados do CHIKV no Estado do Ceará em 2016-2017, com base nos dados oficiais da Secretaria da Saúde do Estado do Ceará (SESA-CE). Foram registrados 182.731 casos em 2016 e 2017, com média de idade de 32,4 ± 14,6 anos e predomínio do sexo feminino (62%). O quadro clínico foi caracterizado por febre (88,6%), cefaleia (72,9%), artralgia grave (69,5%) e mialgia (65,6%). Entre as comorbidades, houve predomínio de hipertensão arterial sistêmica (6,9%) e diabetes mellitus (2,9%). A DRC foi relatada em 691 casos (0,3%). Apenas 3,3% dos pacientes necessitaram de internação e apenas 0,1% foram a óbito devido à infecção. O grupo de pacientes que foi a óbito era em sua maioria composto por idosos, do sexo masculino e com menor escolaridade. Os fatores de risco independentes para óbito foram: idade avançada (OR: 7,35, p<0,0001), sexo masculino (OR 2,05, p<0,0001), leucopenia (OR: 3,18, p<0,0001), vômitos (OR: 2,19, p<0,0001) e comorbidades como hipertensão (OR: 3,74, p<0,0001), diabetes (OR: 3,29, p<0,0001) e doença renal crônica (OR: 3,14, p<0,0001). Eles também tiveram uma frequência significativamente maior de diabetes, distúrbios hematológicos, hepatopatias, hipertensão, úlcera péptica e doenças auto-imunes. A mortalidade foi significativamente maior entre pacientes com DRC em comparação com pacientes sem DRC (3,0% vs. 0,2%, p <0,0001). A infecção pelo CHIKV pode se manifestar como doença grave, especialmente durante períodos epidêmicos. Idade avançada e baixa escolaridade foram associados a maior risco de mortalidade. Leucopenia e vômitos foram sinais de gravidade que devem ser valorizados pela equipe de saúde, assim como a presença de comorbidades, especialmente hipertensão, diabetes e doença renal.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-05T15:16:37Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Alana Batista Fernandes.pdf: 1845250 bytes, checksum: 5a81b4935b1849b58c0184317d0b69cf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2017-10-05T15:17:10Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Alana Batista Fernandes.pdf: 1845250 bytes, checksum: 5a81b4935b1849b58c0184317d0b69cf (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T15:17:10Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação - Alana Batista Fernandes.pdf: 1845250 bytes, checksum: 5a81b4935b1849b58c0184317d0b69cf (MD5) Previous issue date: 2016-04-19 / CNPq - Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The Chikungunya virus (CHIKV) is an RNA virus (family Togaviridae, genus Alphavirus) transmitted to humans through the bite of female mosquitoes Aedes aegypti and Aedes albopictus. The clinical onset in CHIKV infection is most often characterized by fever and joint pain, and so far there is no specific antiviral therapy or vaccine for the treatment of the infection. The diagnosis of CHIKV infection is based on clinical and laboratory findings, with the latter being performed by virus isolation, reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR), serology, and rapid tests: To produce a recombinant antigen through the cloning and expression of the capsid protein (C) of CHIKV in order to detect anti-CHIKV antibodies in human serum samples by immunoenzymatic assay. A synthetic gene (gBlock), specifically designed for this study, corresponding to the protein C (400 base pair) of Chikungunya virus, was amplified by polymerase chain reaction (PCR) and then cloned into pGEM-T Easy system-Escherichia coli. The transformant clones were sequenced, and recombinant products were digested using the restriction endonucleases EcoRI and BamHI, and then subcloned and expressed in the vector pET-23a+ Escherichia coli BL21 (DE3). The recombinant protein C expression and the molecular weight were determined by SDS-PAGE and Dot Blot and purified by affinity chromatography using nickel column. A immunoenzymatic assay was performed using the recombinant antigen to detect IgM and IgG antibodies in sera from patients with CHIKV infection confirmed by the National Reference Laboratory of the Ministry of Health, as well as sera from patients tested positive for Mayaro virus, Dengue virus and Cytomegalovirus infection. The derived recombinant protein showed size and antigenicity compatible with the native protein C from the CHIKV; a concentration of 0.342 ng/mL of recombinant protein C was obtained using the pET-23a+ E. coli BL21 (DE3); the affinity chromatography using nickel column was effective to obtain the soluble protein C, confirmed by the Bradford method; the immunoenzymatic assay using the recombinant antigen showed cross-reactivity to others Alphavirus pathogens. The results indicate that the expression system pET-23a+ E. coli BL21 (DE3) was effective to produce the recombinant protein C of CHIKV, however the antigen was not sensitive enough to detect only the CHIKV infection. / O vírus Chikungunya (CHIKV) é um vírus de RNA (família Togaviridae, gênero Alphavirus), transmitido aos seres humanos através da picada de mosquitos fêmeas de Aedes aegypti e Aedes albopictus. O início das manifestações clínicas da infecção por CHIKV na maioria das vezes é caracterizada por febre e dor nas articulações, e até agora não existe uma terapia antiviral específico ou vacina para o tratamento da infecção. O diagnóstico da infecção CHIKV é baseado em achados clínicos e laboratoriais, com o último sendo realizada por isolamento do vírus, transcrição reversa-polimerase reação em cadeia (RT-PCR), sorologia e testes rápidos. Para produzir um antígeno recombinante através da clonagem e expressão da proteína do capsídeo (C) de CHIKV de modo a detectar anticorpos anti-CHIKV em amostras de soro humano, por ensaio imunoenzimático. Um gene sintético (gBlock), especificamente concebidos para esse estudo, correspondente à proteína C do capsídeo (400 pares de bases) do vírus Chikungunya, foi amplificado por reação em cadeia da polimerase (PCR) e, em seguida, clonado em pGEM-T Easy sistema de Escherichia coli. Os clones transformantes foram sequenciados, e os produtos recombinantes foram digeridos com as endonucleases de restrição EcoRI e BamHI, e depois subclonado e expresso no vector pET-23a+ e Escherichia coli BL21 (DE3). A expressão da proteína C recombinante e o peso molecular foram determinados por SDS-PAGE e Dot Blot e purificado por cromatografia de afinidade utilizando uma coluna de níquel. Um ensaio imunoenzimático foi realizada utilizando o antígeno recombinante para detecção de anticorpos IgM e IgG em soros de pacientes com infecção CHIKV confirmados pelo laboratório nacional de referência do Ministério da Saúde, bem como soros de pacientes positivos para o vírus Mayaro, vírus da dengue e citomegalovírus infecção. O derivado da proteína recombinante mostrou tamanho e antigenicidade compatível com a proteína C nativa do CHIKV; uma concentração de 0,342 ng / mL de proteína C recombinante foi obtido utilizando o pET-23a+ de E. coli BL21 (DE3); a cromatografia de afinidade utilizando uma coluna de níquel foi eficaz para obter a proteína C solúvel, confirmada pelo método de Bradford; o ensaio imunoenzimático utilizando o antígeno recombinante mostrou reatividade cruzada com outros agentes patogénicos de Aphavírus. Os resultados indicam que o sistema de expressão pET-23a+ de E. coli BL21 (DE3) foi eficaz para produzir a proteína C recombinante de CHIKV, no entanto, o antígeno não foi suficientemente sensível para detectar apenas a infecção CHIKV.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-04-30T14:39:02Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DISSERTAÇÃO - MARINEIDE SOUZA DA SILVA.pdf: 2429345 bytes, checksum: e0dd6988a96097cdd1e4eb856b6b2faf (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-04-30T14:39:25Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DISSERTAÇÃO - MARINEIDE SOUZA DA SILVA.pdf: 2429345 bytes, checksum: e0dd6988a96097cdd1e4eb856b6b2faf (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-30T14:39:25Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) DISSERTAÇÃO - MARINEIDE SOUZA DA SILVA.pdf: 2429345 bytes, checksum: e0dd6988a96097cdd1e4eb856b6b2faf (MD5) Previous issue date: 2017-09-04 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / Dengue is currently considered the most important arbovirose. Its main vector is the mosquito Aedes aegypti, present in several regions around the world. The serological diagnosis by means of the NS1 antigen search is the one that has greater applicability, because of easy of execution and the window for detection between the 1st and the 9th day of the onset of symptoms, with a higher frequency until the 5th day. This study aimed to investigate the presence of dengue virus in samples with non-reactive results for the NS1 antigen, assessing if there was a failure in laboratorial diagnosis, or the existence of other arboviruses circulating in the state of Amazonas. Using the RT-qPCR technique, the presence of dengue virus was investigated in 306 serum samples from patients with clinical suspicion of infection. The samples that remained negative were investigated for the presence of the Zika (ZIKV), Chikungunya (CHIKV), Mayaro (MAYV) and Oropouche (OROV) viruses with the same methodology, as well as the presence of IgG and IgM for dengue virus by ELISA. Of the 306 analyzed samples, 17 (5.5%) were positive for DENV, with three sequenced for serotype 4. Thirty-four (10.8%) were positive for ZIKV, one (0.3%) for CHIKV, thirteen 4.2%) for MAYV and nine (2.9%) for OROV. In relation to the NS1 test, all kits evaluated presented 100% agreement in negativity. For the screening of anti-DENV antibodies of the IgG class, of the 306 samples tested 134 (43.8%) had positive results. Regarding the detection of the IgM antibody, different positivities were observed for commercial kits: VIRION (n = 250) 35.6% positive; FOCUS (n = 105) 10.5% positive and PANBIO (N = 80) 20% positive. Our results confirm cases of false negative results for the NS1 tests of three commercial kits, in addition to the circulation of other arboviruses among patients from different municipalities in the state of Amazonas. / A dengue é considerada atualmente a mais importante arbovirose. O seu principal vetor é o mosquito da espécie Aedes aegypti, presente em diversas regiões do mundo. O diagnóstico sorológico por meio da pesquisa do antígeno NS1 é o que tem maior aplicabilidade, pela baixa complexidade na execução e por ser detectado entre o 1º e 9º dia de início dos sintomas, porém com frequência maior até o 5º dia. Esse estudo teve por objetivo principal investigar a presença do vírus dengue em amostras com resultados “Não Reagentes” para o antígeno NS1, avaliando se houve falha no diagnóstico laboratorial, ou a existência de outros arbovírus circulando no estado do Amazonas. Utilizando a técnica de RT-qPCR, pesquisou-se a presença do vírus dengue em 306 amostras de soros de pacientes com suspeita clínica de infecção. As amostras que continuaram negativas foram pesquisadas quanto a presença dos vírus Zika (ZIKV), Chikungunya (CHIKV), Mayaro (MAYV) e Oropouche (OROV), pela mesma metodologia, bem como foi pesquisada a presença de anticorpos das classes IgG e IgM para o vírus dengue por ELISA. Das 306 amostras analisadas 17 (5,5%) foram positivas para DENV, com três sequenciadas para o sorotipo 4. Trinta e quatro (10,8%) foram positivas para o ZIKV, uma (0,3%) para CHIKV, treze (4,2%) para MAYV e nove (2,9%) para OROV. Em relação ao teste NS1 todos os kits avaliados apresentaram 100% de concordância em negatividade. Para a pesquisa de anticorpos anti-dengue da classe IgG, das 306 amostras testadas 134 (43,8%) tiveram resultados positivos. Em relação à detecção do anticorpo IgM foram observadas diferentes positividades para os kits comerciais: VIRION (n=250) 35,6% positivas; FOCUS (n=105) 10,5% positivas e PANBIO (N=80) 20% positivas. Nossos resultados confirmam casos de resultados falso-negativos, para os testes NS1 de três kits comerciais, além da circulação de outros arbovírus entre os pacientes de diferentes municípios do estado do Amazonas.

Submitted by admin tede (tede@pucgoias.edu.br) on 2017-04-27T14:37:47Z No. of bitstreams: 1 ROSEMARY DE CARVALHO ROCHA KOGA.pdf: 1840064 bytes, checksum: 5be7272271d61789b6dc93e32af0b7a3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-27T14:37:47Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ROSEMARY DE CARVALHO ROCHA KOGA.pdf: 1840064 bytes, checksum: 5be7272271d61789b6dc93e32af0b7a3 (MD5) Previous issue date: 2017-03-15 / Introduction: Chikungunya fever (FCHIK) is a disease of abrupt onset, transmitted by arthropod mosquitoes intermediate hosts of the Chikungunya virus (CHIKV). The illness has a significant impact on the quality of life of the affected person. Since a disease causes intense and prolonged symptoms of polyarthralgia and myalgia, it requires health care, during a recovery, more than other arboviruses. The objective of this study was to study clinicians and clinicians suggestive of FCHIK, residing in the States of Amapá and Goiás, aiming to correlate the results of laboratory tests with the presented symptomatology. Materials and methods: The study was carried out at the Center for Immunological Studies and Research of the Pontifical Catholic University of Goiás, Goiânia, and in Emergency Care Units in the cities of Macapá, Oiapoque and Santana-AP. The study population consisted of 80 individuals with suspected FCHIK and for investigators of inflammatory markers, the control group consisted of 20 blood samples from healthy donors from Goiana Central de Serologia e Imunohematologia. Viral RNA extraction was performed, followed by RNA detection by Real-Time Polymerase Chain Reaction. In addition to ELISA for detection of IgM and IgG against Chikungunya virus. Participants symptoms were correlated with serology and Creactive protein (CRP), which was evaluated in healthy subjects and in people with FCHIK. Results: No data presented for detection of viral RNA by RT-qPCR for CHIKV, but three samples were positive in this technique for zika virus and one for dengue subtype 1 (DENV1). In an enzyme-linked immunosorbent assay, 26 samples were positive for IgG and 3 for IgM. Regarding the stage of the disease, 10 were in the acute phase, 04 in the subacute phase and 12 in the chronic phase. Correlated the results of the serology with a symptomatology it was observed that the acute phase, all have fever, 90% headache, 70% arthralgia and 60% edema. (100%), myalgia and edema (75%). (100%), arthralgia (92%) and myalgia (75%). When comparing participants with negative serology, n = 54, the most prevalent symptoms were rash, headache, fever, and arthralgia. The CRP levels in individuals infected with more than four symptoms were higher when compared with healthy individuals. Conclusion: The study focused on people with a clinical picture characteristic of FCHIK. The most common symptom in the three phases presented for arthralgia, followed by edema and myalgia, a fever was frequent only in the acute phase. All participants were negative in the evaluation of viral RNA by RT-qPCR for CHIKV, for the virus has a short duration in the body, and this methodology is limited to the time of symptom onset and sample collection, DENV and ZIKV. IG G. Those with negative serology for CHIKV, despite taking into account the joints, symptoms common to other arboviruses. CRP levels have been shown to be high relative to healthy subjects. / Introdução: A Febre Chikungunya (FCHIK) é uma doença de início abrupto, transmitida por mosquitos artrópodes hospedeiros intermediários do vírus Chikungunya (CHIKV). A enfermidade representa um significativo impacto na qualidade de vida da pessoa afetada. Uma vez que a doença causa sintomas intensos e prolongados de poliartralgia e mialgia, requerendo atenção de saúde, durante a recuperação, mais do que outras arboviroses. Objetivou-se estudar aspectos clínicos e sorológicos de indivíduos apresentando quadro clínico sugestivo de FCHIK, residentes nos Estados de Amapá e Goiás, visando correlacionar os resultados de testes laboratoriais com a sintomatologia apresentada. Materiais e métodos: O estudo foi realizado no Núcleo de Estudos e Pesquisa Imunológica da Pontifícia Universidade Católica de Goiás, em Goiânia, e em Unidades de Pronto Atendimento de Saúde das cidades de Macapá, Oiapoque e Santana-AP. A população de estudo foi constituída de 80 indivíduos com suspeita de FCHIK e para comparar os marcadores inflamatórios, o grupo controle foi constituído de 20 amostras de sangue de doadores saudáveis da Central Goiana de Sorologia e Imunohematologia. Foi realizada a extração do RNA viral, seguido de detecção do RNA por meio de Reação em Cadeia de Polimerase em Tempo Real. Além de ELISA para detecção de IgM e IgG específicos para o CHIKV. Os sintomas dos participantes foram correlacionados com o resultado da sorologia e da proteína C reativa (PCR), que foi avaliada em indivíduos saudáveis e em pessoas com FCHIK. Resultados: Nenhuma amostra apresentou limiar de detecção do RNA viral por RT-qPCR para CHIKV, porém três amostras foram positivas nessa técnica para vírus zika (ZIKV) e uma para dengue subtipo 1 (DENV1). Em ensaio imunoenzimático, 26 amostras foram positivas para IgG e 3 dessas para IgM. Em relação ao estágio da doença, 10 encontravam-se em fase aguda, 04 em fase subaguda e 12 em fase crônica. Correlacionados os resultados da sorologia com a sintomatologia observou-se que os de fase aguda, todos tiveram febre, 90% cefaleia, 70% artralgia e 60% edema. Enquanto que, os de fase subaguda tiveram: artralgia e cefaleia (100%), mialgia e edema (75%). Os de fase crônica tiveram edema (100%), artralgia (92%) e mialgia (75%). Quando comparados os participantes com sorologia negativa, n=54, os sintomas mais apresentados foram exantema, cefaleia, febre e artralgia. Os níveis de PCR nos indivíduos infectados e que apresentavam mais de quatro sintomas foram maiores quando comparados com indivíduos saudáveis. Conclusão: O estudo focou em pessoas com quadro clínico característico para FCHIK. O sintoma mais comum nas três fases apresentadas foi a artralgia, seguido de edema e mialgia, a febre foi frequente somente na fase aguda. Todos os participantes foram negativos na avaliação do RNA viral por RT-qPCR para CHIKV, pois o vírus tem uma curta duração no organismo, e esta metodologia é limitada ao tempo de início dos sintomas e coleta de amostra, ainda assim foi encontrado RNA viral do DENV e ZIKV. Alguns participantes foram positivos para sorologia IgG. Aqueles com sorologia negativa para CHIKV, apesar de terem dor nas articulações, tinham sintomas comuns a outras arboviroses. Os níveis de PCR demonstraram-se elevados em relação aos indivíduos saudáveis.