Orientador: Aparecida Machado de Moraes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-05T09:26:57Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodriguez_SylviaIpirangadeSouzaDantase_M.pdf: 623979 bytes, checksum: 17286e5a33fc87f5f8e05eb4538b7b2b (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Objetivo: Identificar o DNA do herpesvirus humano tipo 1 (HHV 1) em neoplasias cutâneas epiteliais malignas (NCEM), comparando com pele normal dos mesmos pacientes e de outro grupo de pacientes livres de neoplasia de pele e estudar o seu impacto sobre a carcinogênese. Pacientes e Métodos: Colheu-se um fragmento do tumor e outro de pele aparentemente sã de 41 pacientes portadores de NCEM, incluindo carcinomas epidermóide (CEC), basocelular (CBC) e queratose actínica (QA). Num segundo grupo, sem neoplasia, fez-se 41 biópsias de pele aparentemente sã. O DNA foi extraído e realizou-se a reação em cadeia da polimerase, com a identificação de uma banda de 199 pares de base à eletroforese. Aplicou-se o teste do Qui-quadrado ou o teste exato de Fischer, para estudo estatístico. Como medida de concordância utilizou-se o coeficiente kappa. Resultados: O HHV 1 foi identificado em 21 pacientes portadores de NCEM e em 20 pacientes do grupo controle. Dentre os pacientes do grupo de estudo, o HHV 1 foi identificado na pele acometida pela neoplasia em 17 pacientes, sendo exclusivo neste tecido em 11 pacientes; enquanto, na sua pele normal de controle, foi identificado em 10 pacientes, dos quais 4 não o expressaram no tumor. O coeficiente kappa foi 0,198. Dentre os padrões tumorais, 24 tumores foram CEC/QA e 17 CBC. Destes, 13 CEC/QA (32%) e 4 (10%) dos CBC expressavam HHV 1. Discussão e Conclusões: O HHV 1 foi identificado em alta prevalência nos dois grupos estudados, sendo mais importante a sua identificação na pele acometida por tumor, em relação à pele sã de controle. Isto denota uma possível participação, dentro de um contexto multifatorial do HHV 1 na oncogênese cutânea, sem entretanto ter sido identificada uma relação direta de causalidade / Abstract: Objective: To identify human herpesvirus 1 DNA in skin samples of epithelial tumors, comparing normal skin of the same patients and other no cancer group. Settings: Division of Dermatology, Laboratory of Molecular Genetics of Cancer and Laboratory of Rheumatology, Campinas University, Campinas, Sao Paulo, Brazil. Patient and Methods: Forty-one patients with epithelial tumors were submitted to biopsies from tumor and normal skin. At control group, it was collected 41 biopsies from patients with others dermatosis. After DNA extraction, polymerase chain reaction was performed to identify a 199-bp band. The results were statistically evaluated by Chi square test or Fisher test, as statistical analysis. Results: HHV 1 was identified in 21 patients with skin cancer and 20 control group patients. The virus was present at 17 samples of epithelial skin tumor biopsies (41%). From these 17 patients with tumor, 6 have presented the virus at normal skin control and 11 do not. Among those patients who had not presented the HHV 1 at tumor samples, only 4 had had expressed at normal sample. The kappa coefficient was 0,198. There were 24 SSC/AQ and 17 BCC. Thirteen SCC and 4 BCC had presented with HHV 1. Conclusions: The prospective study evidenced the presence of human herpesvirus 1 in skin, especially in tumor samples. There is no evidence of its causative effect, but at this group, there was an increased prevalence of HHV 1 at tumor samples than over normal control skin. This study may lead others in intent to verify the herpesvirus participation in oncogenesis of epithelial skin tumors / Mestrado / Clinica Medica / Mestre em Clinica Medica

Made available in DSpace on 2014-06-12T18:04:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo6195_1.pdf: 1143920 bytes, checksum: 0d0ca55cd7599cecc0ad08a953f1ec9b (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2007 / O câncer apresenta-se como uma das grandes causa mortis na vida contemporânea, principalmente o de adulto que tem aumentado em função do aumento da expectativa de vida, mudança de hábitos alimentares e modo de vida. O câncer pediátrico está mais claramente relacionado a fatores genéticos herdados ou ligado a embriogênese. Os tipos mais prevalentes são as leucemias, os tumores do sistema nervoso e os linfomas. Os linfomas apresentam-se divididos em: doença de Hodgkin (HD) e linfomas não-Hodgkin (NHL), sendo o segundo responsável por mais da metade dos casos. Os NHL se destacam por várias características morfológicas, fenotípicas e por eventos moleculares que alteram a configuração cromossômica e a expressão de diversos genes, eventos moleculares estes que têm sido relacionados a vírus, porém de uma forma não muito clara e sem um modelo definitivo. No presente trabalho a relação entre a infecção por EBV, a transcrição de RNA do referido vírus e a superexpressão do proto-oncogene c-myc em amostras de linfoma foram estudadas. Analisamos biopsias de tumor de 49 pacientes, dos quais 34 (69,4%) eram do sexo masculino e 15 (31,6%) eram do sexo feminino. Os linfomas não-Hodgkin estudados eram de localização principalmente abdominal e em 63,4% o EBV foi detectado, com transcrição ativa do RNA viral em 29,3%. Já os linfomas de Hodgkin somaram apenas sete e em dois deles foi encontrada infecção por EBV. Nossos estudos indicam forte relação do EBV com o NHL, principalmente de localização abdominal, sendo necessários mais estudos da relação do vírus com a expressão elevada do proto-oncogene c-myc

Orientador: Fernando Ferreira Costa / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-19T01:33:53Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Melo_MonicaBarbosade_M.pdf: 4379761 bytes, checksum: 1b75f2a795acb21d8e8f920565c81f50 (MD5) Previous issue date: 1994 / Mestrado / Genetica Medica / Mestre em Ciências Biológicas

O potencial oncogênico do papilomavírus humano (HPV) baseia-se na capacidade das oncoproteínas virais E6 e E7 alterarem o ciclo celular, levando à imortalização e malignidade das células. O importante papel das oncoproteínas na progressão tumoral e na interação com inúmeros alvos celulares tem relevância em estudos para o desenvolvimento de vacinas e terapias contra os cânceres associados ao HPV. Este estudo investigou a localização intracelular das oncoproteínas E6 e E7 de HPV16/18 e seus possíveis alvos celulares. Demonstrou a presença de E6 nuclear, citoplasmática e intramitocondrial, tanto em células naturalmente transformadas por HPV, como em células transfectadas com o oncogene E6 viral. E7 foi detectada no núcleo e citoplasma, porém nunca ocorreu E7 intramitocondrial. Confirmou a hipótese da presença intramitocondrial da oncoproteína viral E6 de HPV16/18 de alto risco. Dado inédito cuja relevância está relacionada com a aplicação clínica, no desenvolvimento de imunobiológicos e fármacos capazes de neutralizar a ação deste importante alvo terapêutico. / The oncogenic potential of HPV is based on the capacity of viral oncoproteins E6 and E7 to change cellular cycle leading to immortality and malignancy. The important role of oncoproteins in tumor progression and its interaction with numerous cellular targets have relevance in studies to the development of vaccines and therapies against HPV associated cancers. This study investigated intracellular localization of E6 and E7 HPV16/18 oncoproteins and its possible cellular targets. It showed the presence of E6 in the cellular nucleus, cytoplasm, and intramitochondrial in naturally HPV transformed cell, as well as in cells transfected with E6 viral oncogene. E7 was detected inside nucleus and cytoplasm, but E7 intramitochondrial did not occur. This study confirmed the hypothesis of the intramitochondrial presence of E6 viral oncoprotein from high risk HPV. This is an original data whose relevance is directly related to clinical application in the development of immunobiologicals and drugs, which are able to neutralize the action of this important therapeutic target.

Os papilomavírus humanos (HPVs) oncogênicos são importantes agentes na etiologia do câncer ginecológico e atualmente tem sido relacionados também a algumas lesões cancerizáveis e a alguns tipos de cânceres de boca. Com o objetivo de avaliar a relação entre os HPVs e um tipo de lesão cancerizável de boca que acomete os lábios chamada queilite actínica crônica (QAC), foram avaliados e considerados aptos para a pesquisa 29 pacientes portadores de QAC. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para detectar a presença do HPV em amostras de tecido fresco, provenientes de lábios doentes onde todos os casos apresentaram resultados negativos. A QAC ocorreu em 100% nos indivíduos da raça branca, em 19 homens e 10 mulheres e na idade média de 56,14 anos. Foram avaliados também os aspectos clínicos e histológicos da QAC sendo encontrados 14 casos de atipia epitelial discreta (48,27%), 10 casos de atipia epitelial moderada (34,49%) e 5 casos de atipia epitelial severa (17,24%). Através de análise estatística concluímos que clinicamente a presença de áreas leucoplásicas e o tempo de evolução da lesão superior a 5 anos estão diretamente relacionados aos casos de atipias epiteliais mais graves. O hábito de fumar e de beber parecem contribuir, mas não obtiveram resultados estatisticamente significativos ao aparecimento da QAC. / The oncogenic human papillomaviruses (HPVs) are important agents in the etiology of gynecological cancer and have been recently related to some premalignant lesions and to some types of mouth cancer. In order to evaluate the relation between HPVs and one type of precancerous lesion that affects the lips called chronic actinic cheilitis (CAC), 29 CAC patients were assessed and considered eligible for the study. The polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the presence of HPV in fresh tissue samples of affected lips. All results were negative. All CAC patients were Caucasian, 19 males and 10 women, mean age of 56.14 years. The clinical and histological aspects of CAC were also assessed - there were 14 cases of discreet (48.27%), 10 cases of moderate (34.49%) and 5 cases of severe epithelial atypia (17.24%). By statistical analysis we concluded that, clinically, the presence of leukoplastic areas and progression of the lesion for over five years are directly related to more severe epithelial atypia. Smoking and drinking habits seem to contribute to the condition but achieved no statistical significance regarding onset of CAC.

Bacillus subtilis é uma bactéria gram-positiva, não patogênica, formadora de esporos e com um grande conhecimento disponível a cerca de sua genética e fisiologia, comparável apenas à Escherichia coli K12. Recentemente, linhagens geneticamente modificadas de B. subtilis foram utilizadas como veículos vacinais mas, até o momento, não se havia avaliado a indução de respostas imunológicas citotóxicas (linfócitos T CD8+) específicas em camundongos imunizados com esporos ou células vegetativas. No presente trabalho, avaliouse a indução de linfócitos T CD8+ em animais imunizados com linhagens vacinais de B. subtilis. Inicialmente empregou-se como alvo a proteína E7 de vírus papiloma humano tipo 16 (HPV-16) fusionada ou não à proteína gD do vírus herpes simples tipo 1 (HSV-1). Em uma segunda estratégia, empregou-se como alvo a subunidade B da toxina termolábil (LTB) de E. coli enterotoxicogênica (ETEC) co-expressa ou fusionada à proteína GroEL2 de Mycobacterium bovis. As quantidades de E7 e gDE7 expressas pelas linhagens recombinantes de B.subtilis ficaram abaixo do limite de detecção e não foram suficientes para ativação de células T CD8+ específicas. Por outro lado, linhagens de B. subtilis capazes de expressar LTB e GroEL2 promoveram a ativação de linfócitos T CD8+ específicos. De um modo geral, o presente trabalho representa uma contribuição inédita sobre a ativação de respostas imunológicas de base celular em camundongos imunizados com linhagens recombinantes de B. subtilis e os resultados obtidos certamente contribuirão para a geração de veículos vacinais mais efetivos na profilaxia e tratamento de diferentes doenças infecciosas, como infecções virais, ou degenerativas, como o câncer. / Bacillus subtilis is a sporulated, non pathogenic, gram-positive bacterial species with a large amount of information concering its genetics and physiology, comparable only to Escherichia coli K12. Recently, genetically modified B.subtilis strains were successfully employed as vaccine vehicles but there is no information concerning the activation of antigen specific cytotoxic immune responses (T CD8+ lymphocytes) in mice vaccinated with either vegetative cells or spores. In the present report, we evaluated the activation of CD8+ T cell responses in mice immunized with B. subtilis vaccine strains genetically modified in order to express the human papillomavirus type 16 (HPV-16) E7 protein as a target antigen, isolated or genetically fused to the type I herpes simplex vírus (HSV-1) gD protein. In a second approach, we have also tested the B subunit heat labile toxin, produced by enterotoxigenic E. coli (ETEC) strains, coexpressed or genetically fused to the Mycobacterium bovis GroEL2 protein. E7 and gDE7 expression by B.subtilis vaccine strains were bellow the detection limits and did not allow the activation of antigen-specific CD8+ T cell responses in vaccinated mice. On the other hand, LTB-specific CD8+ T cell responses were detected in mice immunized with B. subtilis expressing both LTB and GroEL2. Collectively, the present study respresents an important contribution on the activation of cellular immune responses in mice immunized with genetically modified B.subtilis and should direct further analyses aiming the development of more effective vaccine vehicles employed both for preventive and therapeutic treatment of infectious and degenerative diseases, such as virus infections and cancer.

Bacillus subtilis é uma bactéria gram-positiva, não patogênica, formadora de esporos e com um grande conhecimento disponível a cerca de sua genética e fisiologia, comparável apenas à Escherichia coli K12. Recentemente, linhagens geneticamente modificadas de B. subtilis foram utilizadas como veículos vacinais mas, até o momento, não se havia avaliado a indução de respostas imunológicas citotóxicas (linfócitos T CD8+) específicas em camundongos imunizados com esporos ou células vegetativas. No presente trabalho, avaliouse a indução de linfócitos T CD8+ em animais imunizados com linhagens vacinais de B. subtilis. Inicialmente empregou-se como alvo a proteína E7 de vírus papiloma humano tipo 16 (HPV-16) fusionada ou não à proteína gD do vírus herpes simples tipo 1 (HSV-1). Em uma segunda estratégia, empregou-se como alvo a subunidade B da toxina termolábil (LTB) de E. coli enterotoxicogênica (ETEC) co-expressa ou fusionada à proteína GroEL2 de Mycobacterium bovis. As quantidades de E7 e gDE7 expressas pelas linhagens recombinantes de B.subtilis ficaram abaixo do limite de detecção e não foram suficientes para ativação de células T CD8+ específicas. Por outro lado, linhagens de B. subtilis capazes de expressar LTB e GroEL2 promoveram a ativação de linfócitos T CD8+ específicos. De um modo geral, o presente trabalho representa uma contribuição inédita sobre a ativação de respostas imunológicas de base celular em camundongos imunizados com linhagens recombinantes de B. subtilis e os resultados obtidos certamente contribuirão para a geração de veículos vacinais mais efetivos na profilaxia e tratamento de diferentes doenças infecciosas, como infecções virais, ou degenerativas, como o câncer. / Bacillus subtilis is a sporulated, non pathogenic, gram-positive bacterial species with a large amount of information concering its genetics and physiology, comparable only to Escherichia coli K12. Recently, genetically modified B.subtilis strains were successfully employed as vaccine vehicles but there is no information concerning the activation of antigen specific cytotoxic immune responses (T CD8+ lymphocytes) in mice vaccinated with either vegetative cells or spores. In the present report, we evaluated the activation of CD8+ T cell responses in mice immunized with B. subtilis vaccine strains genetically modified in order to express the human papillomavirus type 16 (HPV-16) E7 protein as a target antigen, isolated or genetically fused to the type I herpes simplex vírus (HSV-1) gD protein. In a second approach, we have also tested the B subunit heat labile toxin, produced by enterotoxigenic E. coli (ETEC) strains, coexpressed or genetically fused to the Mycobacterium bovis GroEL2 protein. E7 and gDE7 expression by B.subtilis vaccine strains were bellow the detection limits and did not allow the activation of antigen-specific CD8+ T cell responses in vaccinated mice. On the other hand, LTB-specific CD8+ T cell responses were detected in mice immunized with B. subtilis expressing both LTB and GroEL2. Collectively, the present study respresents an important contribution on the activation of cellular immune responses in mice immunized with genetically modified B.subtilis and should direct further analyses aiming the development of more effective vaccine vehicles employed both for preventive and therapeutic treatment of infectious and degenerative diseases, such as virus infections and cancer.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:50:38Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2006-12-31 / Os papilomavírus humanos (HPVs) oncogênicos são importantes agentes na gênese do câncer ginecológico e têm sido implicados também nos cânceres da boca. Com objetivo de avaliar a relação entre o HPV e o carcinoma espinocelular (CEC) da língua, foram selecionados 50 pacientes do sexo masculino, da raça branca, fumantes e com diagnóstico histológico de CEC, e um grupo controle composto por 10 pacientes sem evidências clínicas de lesão na língua. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para detectar a presença do genoma HPV em amostras de tecido fresco, provenientes CEC da margem da língua. Trinta e sete pacientes (74%) apresentaram resultado positivo de PCR para papilomavírus oncogênicos, sendo que no grupo controle apenas uma amostra (10%) foi positiva para os papilomavírus não-oncogênicos. Pôde-se concluir através de análise estatística deste trabalho que o paciente portador de papilomavírus oncogênico na cavidade bucal possui 25,6 vezes mais chance de desenvolver o CEC da língua devendo, portanto ser acompanhado de forma sistemática, através de exames clínico e complementar. / The oncogenic human papillomavirus (HPVs) are important agents in the genesis of gynecological cancer and have been also related to mouth cancer. Aiming to assess the relation between HPV and squamous cell carcinoma (SCC) of the tongue, 50 white male smokers with a histological diagnosis of SCC and a control group composed of 10 subjects with no clinical evidence of lesions in the tongue were selected. Polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the presence of the HPV genome in fresh tissue samples from SCC in the edge of the mouth. Thirty-seven patients (74%) had a positive PCR for oncogenic papillomavirus, and in the control group only one sample (10%) was positive for non-oncogenic papillomavirus. Based on the statistical analysis, we concluded patients with oncogenic papillomavirus in the oral cavity are 25.6-fold more likely to develop SCC of the tongue and must be systematically followed-up by clinical and complementary tests. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Os papilomavírus humanos (HPVs) oncogênicos são importantes agentes na etiologia do câncer ginecológico e atualmente tem sido relacionados também a algumas lesões cancerizáveis e a alguns tipos de cânceres de boca. Com o objetivo de avaliar a relação entre os HPVs e um tipo de lesão cancerizável de boca que acomete os lábios chamada queilite actínica crônica (QAC), foram avaliados e considerados aptos para a pesquisa 29 pacientes portadores de QAC. A reação em cadeia pela polimerase (PCR) foi utilizada para detectar a presença do HPV em amostras de tecido fresco, provenientes de lábios doentes onde todos os casos apresentaram resultados negativos. A QAC ocorreu em 100% nos indivíduos da raça branca, em 19 homens e 10 mulheres e na idade média de 56,14 anos. Foram avaliados também os aspectos clínicos e histológicos da QAC sendo encontrados 14 casos de atipia epitelial discreta (48,27%), 10 casos de atipia epitelial moderada (34,49%) e 5 casos de atipia epitelial severa (17,24%). Através de análise estatística concluímos que clinicamente a presença de áreas leucoplásicas e o tempo de evolução da lesão superior a 5 anos estão diretamente relacionados aos casos de atipias epiteliais mais graves. O hábito de fumar e de beber parecem contribuir, mas não obtiveram resultados estatisticamente significativos ao aparecimento da QAC. / The oncogenic human papillomaviruses (HPVs) are important agents in the etiology of gynecological cancer and have been recently related to some premalignant lesions and to some types of mouth cancer. In order to evaluate the relation between HPVs and one type of precancerous lesion that affects the lips called chronic actinic cheilitis (CAC), 29 CAC patients were assessed and considered eligible for the study. The polymerase chain reaction (PCR) was used to detect the presence of HPV in fresh tissue samples of affected lips. All results were negative. All CAC patients were Caucasian, 19 males and 10 women, mean age of 56.14 years. The clinical and histological aspects of CAC were also assessed - there were 14 cases of discreet (48.27%), 10 cases of moderate (34.49%) and 5 cases of severe epithelial atypia (17.24%). By statistical analysis we concluded that, clinically, the presence of leukoplastic areas and progression of the lesion for over five years are directly related to more severe epithelial atypia. Smoking and drinking habits seem to contribute to the condition but achieved no statistical significance regarding onset of CAC.

O potencial oncogênico do papilomavírus humano (HPV) baseia-se na capacidade das oncoproteínas virais E6 e E7 alterarem o ciclo celular, levando à imortalização e malignidade das células. O importante papel das oncoproteínas na progressão tumoral e na interação com inúmeros alvos celulares tem relevância em estudos para o desenvolvimento de vacinas e terapias contra os cânceres associados ao HPV. Este estudo investigou a localização intracelular das oncoproteínas E6 e E7 de HPV16/18 e seus possíveis alvos celulares. Demonstrou a presença de E6 nuclear, citoplasmática e intramitocondrial, tanto em células naturalmente transformadas por HPV, como em células transfectadas com o oncogene E6 viral. E7 foi detectada no núcleo e citoplasma, porém nunca ocorreu E7 intramitocondrial. Confirmou a hipótese da presença intramitocondrial da oncoproteína viral E6 de HPV16/18 de alto risco. Dado inédito cuja relevância está relacionada com a aplicação clínica, no desenvolvimento de imunobiológicos e fármacos capazes de neutralizar a ação deste importante alvo terapêutico. / The oncogenic potential of HPV is based on the capacity of viral oncoproteins E6 and E7 to change cellular cycle leading to immortality and malignancy. The important role of oncoproteins in tumor progression and its interaction with numerous cellular targets have relevance in studies to the development of vaccines and therapies against HPV associated cancers. This study investigated intracellular localization of E6 and E7 HPV16/18 oncoproteins and its possible cellular targets. It showed the presence of E6 in the cellular nucleus, cytoplasm, and intramitochondrial in naturally HPV transformed cell, as well as in cells transfected with E6 viral oncogene. E7 was detected inside nucleus and cytoplasm, but E7 intramitochondrial did not occur. This study confirmed the hypothesis of the intramitochondrial presence of E6 viral oncoprotein from high risk HPV. This is an original data whose relevance is directly related to clinical application in the development of immunobiologicals and drugs, which are able to neutralize the action of this important therapeutic target.