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Efeitos da Terapia Fotodinâmica mediada por laser de emissão vermelha e azul de metileno em vaginite induzida por Candida albicans / Effects of photodynamic therapy mediated by red laser and methylene blue aplied in induced vaginitis by Candida albicans

Sena, Rosa Maria Machado de 28 November 2013 (has links)
A candidíase vaginal (CV) é uma doença causada por fungos do gênero Candida spp. que acomete milhares de mulheres no mundo. Estima-se que 75% das mulheres sofrerão CV pelo menos uma vez durante a vida fértil, 40 a 50% terão o segundo episódio e 5 a 8% sofrerão a forma recorrente, caracterizada pela ocorrência de quatro ou mais episódios durante um ano. O tratamento ainda permanece um desafio para as candidíases complicadas. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica que utiliza substâncias fotossensibilizadoras (FS) e uma fonte de luz, que juntas, produzem espécies reativas de oxigênio, tóxicas para micro-organismos e inofensivas para a célula animal hospedeira. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos antifúngicos e anti-inflamatórios da TFD mediada por azul de metileno (AM) e laser de emissao vermelha (LEV) no tratamento da CV em modelo animal. Fêmeas de camundongos BALB/c, com 6 a 10 semanas foram estrogenizadas e, 72h após, receberam via intravaginal 20μL de suspensão contendo 107 UFC/mL de C. albicans ATCC 90028. Cinco dias após, a TFD foi aplicada na vagina das fêmeas, utilizando AM 1000μM e laser (100mW, 660nm, energia de 36J por 6 min ou duas aplicações de 18J por 3min, com intervalo de 24h entre sessões). Após 0, 24 e 96h foram feitas lavagens vaginais para recuperação fúngica, cultivo microbiológico, eutanásia para remoção das vaginas e estudo histológico. Lâminas coradas por hematoxilina e eosina foram utilizadas para contagem da área de células inflamatórias (ACI), utilizando o programa ImageJ. Os resultados mostraram que TFD in vivo reduziu a carga fúngica em aproximadamente 1,6 log UFC/mL e, quando aplicada em duas sessões de 18J por 3min, diminuiu a ACI. A TFD mediada por LEV e AM 1000μM mostra-se como alternativa promissora para o desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para vaginites fúngicas. / Vaginal candidiasis (VC) is a disease caused by fungi of the genus Candida spp. that affects thousands of women worldwide. It is estimated that 75% of women in childbearing age will have VC at least once, 40 to 50% will have a second episode and 5 to 8 % will suffer recurrent form, characterized by the occurrence of four or more episodes during one year. Treatment remains a challenge for complicated candidiasis. Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic modality that uses photosensitizing (FS) substances and a light source, which together produce reactive oxygen species, toxic to microorganisms and harmless to host animal cell. The aim of this study was to evaluate antifungal and anti - inflammatory effects of PDT mediated by methylene blue (MB) and red laser (RL) in the treatment of CV in an animal model. Female BALB/c mice 6 to 10 weeks were estrous and 72h after received intravaginally 20μL of suspension containing 107 CFU/mL of C. albicans ATCC 90028. Five days after, PDT was applied in the vagina of females using MB 1000μM and laser (100mW, 660nm, 36J for 6 min or two applications of 18J for 3 min, with an interval of 24h between sessions). Vaginal washes for fungal recovery and microbiological culture, and euthanasia for removal of vaginas and histological study were made after 0, 24 and 96h. Glass slides stained by hematoxylin and eosin were used for counting the area of inflammatory cells (AIC) using ImageJ software. PDT in vivo reduced the fungal burden in approximately 1.6 log CFU/mL, and, when applied in two sessions with 18J for 3min, decreased the AIC. PDT mediated by RL and MB 1000μM shown as a promising alternative for the development of new therapeutic modalities for yeast vaginitis.
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Efeitos da Terapia Fotodinâmica mediada por laser de emissão vermelha e azul de metileno em vaginite induzida por Candida albicans / Effects of photodynamic therapy mediated by red laser and methylene blue aplied in induced vaginitis by Candida albicans

Rosa Maria Machado de Sena 28 November 2013 (has links)
A candidíase vaginal (CV) é uma doença causada por fungos do gênero Candida spp. que acomete milhares de mulheres no mundo. Estima-se que 75% das mulheres sofrerão CV pelo menos uma vez durante a vida fértil, 40 a 50% terão o segundo episódio e 5 a 8% sofrerão a forma recorrente, caracterizada pela ocorrência de quatro ou mais episódios durante um ano. O tratamento ainda permanece um desafio para as candidíases complicadas. A terapia fotodinâmica (TFD) é uma modalidade terapêutica que utiliza substâncias fotossensibilizadoras (FS) e uma fonte de luz, que juntas, produzem espécies reativas de oxigênio, tóxicas para micro-organismos e inofensivas para a célula animal hospedeira. O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos antifúngicos e anti-inflamatórios da TFD mediada por azul de metileno (AM) e laser de emissao vermelha (LEV) no tratamento da CV em modelo animal. Fêmeas de camundongos BALB/c, com 6 a 10 semanas foram estrogenizadas e, 72h após, receberam via intravaginal 20μL de suspensão contendo 107 UFC/mL de C. albicans ATCC 90028. Cinco dias após, a TFD foi aplicada na vagina das fêmeas, utilizando AM 1000μM e laser (100mW, 660nm, energia de 36J por 6 min ou duas aplicações de 18J por 3min, com intervalo de 24h entre sessões). Após 0, 24 e 96h foram feitas lavagens vaginais para recuperação fúngica, cultivo microbiológico, eutanásia para remoção das vaginas e estudo histológico. Lâminas coradas por hematoxilina e eosina foram utilizadas para contagem da área de células inflamatórias (ACI), utilizando o programa ImageJ. Os resultados mostraram que TFD in vivo reduziu a carga fúngica em aproximadamente 1,6 log UFC/mL e, quando aplicada em duas sessões de 18J por 3min, diminuiu a ACI. A TFD mediada por LEV e AM 1000μM mostra-se como alternativa promissora para o desenvolvimento de novas modalidades terapêuticas para vaginites fúngicas. / Vaginal candidiasis (VC) is a disease caused by fungi of the genus Candida spp. that affects thousands of women worldwide. It is estimated that 75% of women in childbearing age will have VC at least once, 40 to 50% will have a second episode and 5 to 8 % will suffer recurrent form, characterized by the occurrence of four or more episodes during one year. Treatment remains a challenge for complicated candidiasis. Photodynamic therapy (PDT) is a therapeutic modality that uses photosensitizing (FS) substances and a light source, which together produce reactive oxygen species, toxic to microorganisms and harmless to host animal cell. The aim of this study was to evaluate antifungal and anti - inflammatory effects of PDT mediated by methylene blue (MB) and red laser (RL) in the treatment of CV in an animal model. Female BALB/c mice 6 to 10 weeks were estrous and 72h after received intravaginally 20μL of suspension containing 107 CFU/mL of C. albicans ATCC 90028. Five days after, PDT was applied in the vagina of females using MB 1000μM and laser (100mW, 660nm, 36J for 6 min or two applications of 18J for 3 min, with an interval of 24h between sessions). Vaginal washes for fungal recovery and microbiological culture, and euthanasia for removal of vaginas and histological study were made after 0, 24 and 96h. Glass slides stained by hematoxylin and eosin were used for counting the area of inflammatory cells (AIC) using ImageJ software. PDT in vivo reduced the fungal burden in approximately 1.6 log CFU/mL, and, when applied in two sessions with 18J for 3min, decreased the AIC. PDT mediated by RL and MB 1000μM shown as a promising alternative for the development of new therapeutic modalities for yeast vaginitis.
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Prospecção tecnológica de óleos essenciais de Schinus terebinthifolius e desenvolvimento de um creme vaginal à base de Ocimum basilicum para tratamento de candidíase

Almeida, Mônica Batista de 19 April 2013 (has links)
Vaginal candidiasis is a disease with high prevalence in adult women. This study aimed to : ( i ) assess the antiCandida activity of essential oil ( EO ) of S. terebinthifolius front lines of cases of recurrent vaginal candidiasis ; ( II ) produce a antiCandida vaginal cream from OE O. basilicum and evaluate the technological process and this cream antiCandida activity in vitro . The major compounds of OE leaves and dried fruits of S. Terebinthifolius were, respectively, the (+) - camphene (20.1%) and R- ? - pinene (22.1%). In terms of minimum inhibitory concentration (MIC ) and minimum fungicidal , OE Fruit S. terebinthifolius showed bands between 25-200 mg / ml , demonstrating activity against C. parapsilosis ( ATCC 22019 ) and a clinical strain , C. albicans (ATCC 18804) and C. glabrata (ATCC 2001) , not being active on these clinical isolates. Regarding OE leaves, no significant action was observed. The OE dried fruit showed fungistatic , however , no fungicide both OE action, in contrast, leaves and fresh fruits showed antiCandida activity, unless the standard strain of C. glabatra the essential oil from fresh fruits . The major compound of OE O. basilicum (Maria - Bonita) was linalol (72.08%). MIC values ranged between this SO 0.78 to 1.56 mg / ml. Before its antifungal action, was produced a vaginal cream. The samples were stored in these distinct conditions: controlled, refrigerator and oven temperature. In controlled and cooler temperatures, no changes in the formula, however, samples at 45 ° C showed slight changes in texture from the 15th day. It can be concluded that the EO of dried leaves and fruits of S.terebinthifolius Raddi not have antiCandida activity, however, the EO extracted from fresh material Botanical demonstrate such activity . The O. basilicum presents antiCandida action. Tests for antimicrobial activity of vaginal cream in its various concentrations showed satisfactory results compared to a synthetic antifungal.Keywords: Vaginal candidiasis, essential oils, Candida spp., Schinus terebinthifolius Raddi, Ocimum basilicum, vaginal cream, anti-candida. / A candidíase vaginal é uma doença com alta prevalência em mulheres na idade adulta. Este trabalho teve como objetivos: (I) avaliar a atividade antiCandida do óleo essencial (OE) de S. terebinthifolius frente a linhagens de casos de candidíase vaginal recorrente; (II) produzir um creme vaginal antiCandida a partir do OE do O. basilicum e avaliar o processo tecnológico e a atividade antiCandida deste creme in vitro. Os compostos majoritários do OE das folhas e frutos secos de S. terebinthifolius, foram respectivamente, o (+) -Camphene (20,1%) e o R-?-pinene (22,1%). Em se tratando das concentrações inibitórias mínimas (CIM) e fungicidas mínimas, o OE do fruto de S. terebinthifolius apresentou faixas entre 25 - 200 mg/ml, demonstrando atividade contra C. parapsilosis (ATCC 22019) e sua linhagem clínica, C. albicans (ATCC 18804) e C. glabrata (ATCC 2001), não sendo ativo aos isolados clínicos destas. Em relação ao OE das folhas, nenhuma ação significativa foi observada. O OE dos frutos secos apresentou ação fungistática, porém, não houve ação fungicida de ambos os OE, em contrapartida, as folhas e frutos frescos apresentaram atividade antiCandida, salvo, a linhagem padrão de C. glabatra pelo óleo essencial dos frutos frescos. O composto majoritário do OE de O. basilicum (Maria-Bonita) foi o linalol (72,08%). Os valores das CIM deste OE variaram entre 0,78 a 1,56 mg/ml. Diante de sua ação fungicida, foi produzido um creme vaginal. As amostras deste foram armazenadas em condições distintas: temperatura controlada, refrigerador e estufa. Em temperatura controlada e refrigerador, não houve modificações na fórmula, entretanto, as amostras à 45º C, apresentaram modificações leves na textura a partir do 15º dia. Pode-se concluir que os OE de folhas e frutos secos da S.terebinthifolius Raddi não apresentam atividade antiCandida, porém, os OE extraídos do material botânico fresco demonstram tal atividade. O O. basilicum apresenta ação antiCandida. Os testes de atividade antimicrobiana do creme vaginal em suas concentrações distintas demonstraram resultados satisfatórios em comparação a um antifúngico sintético. Palavras-Chave: Candidíase vaginal, óleos essenciais, Candida spp., Schinus terebinthifolius Raddi, Ocimum basilicum, creme vaginal, anti-Candida.

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