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Biomonitoramento por crassostrea rhizophorae (Guilding, 1828) e percepção de risco socioambiental na Baía de Todos os Santos, Bahia

Mamede, Tainã 20 November 2012 (has links)
Submitted by Prost Catherine (cprost@ufba.br) on 2012-11-21T00:20:48Z No. of bitstreams: 1 dissertacao_Taina_Mamede.PDF: 2875938 bytes, checksum: 928b1d628d54a3053178caf37883e7a9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-11-21T00:20:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_Taina_Mamede.PDF: 2875938 bytes, checksum: 928b1d628d54a3053178caf37883e7a9 (MD5) / bolsa de mestrado da CAPES / A Baía de Todos os Santos – BTS contempla ambientes costeiros que são constituídos por diversos ecossistemas vulneráveis às atividades relacionadas à expansão urbana e ao desenvolvimento em escala industrial. As comunidades pesqueiras sofrem cada vez mais da restrição de espaços costeiros e/ou litorâneos ou por impactos ambientais causados pelos avanços destas atividades. A ostra, molusco bivalve, possue hábito alimentar filtrante, podendo adsorver e bioacumular patógenos humanos e contaminantes químicos em geral, sendo, portanto utilizada no monitoramento ambiental de áreas impactadas. O objetivo deste estudo consistiu em monitorar as concentrações de cobre (Cu), zinco (Zn), cádmio (Cd) e ferro (Fe) em ostra transplantada de um cultivo localizado em Reserva Extrativista Marinha Baía do Iguape (IGP) para um estuário sujeito a uma intensa atividade industrial - rio São Paulo (RSP) (n=82), assim como avaliar a percepção do risco socioambiental pela comunidade de marisqueiras que vivem sobre influência industrial na BTS – Candeias. Concentrações de Zn, Cu, Cd e Fe (mg.kg-¹) foram determinadas nos tecidos de ostra por absorção atômica (FAAS). Em momento anterior a retirada dos tecidos foi testada nestes indivíduos à adequação do ensaio de retenção do vermelho neutro (NRRT) para avaliar a estabilidade da membrana lisossômica em hemócitos como um biomarcador de efeito. Os resultados obtidos foram tratados de forma distinta sobre forma de artigos científicos. Inicialmente foi feita a aplicação do teste de retenção do vermelho neutro com hemócitos de ostras transplantadas (RSP) e residentes(IGP). A adequação do método para ostra Crassostrea rhizophorae mostrou-se eficaz. Apesar do tempo de retenção do vermelho neutro pela ostra transplantada ter sido menor comparado a ostra residente de IGP (p<0,05) não é possível afirmar que esteja ocorrendo neste ambiente alguma anormalidade ambiental. No artigo 2 as concentrações de metais encontradas no tecido da ostra – transplantada e residente - foram correlacionadas com as variáveis biológicas do organismo. A técnica “transplante” no período de exposição estabelecido de 180 e 270 dias mostrou-se eficaz na investigação das correlações entre as variáveis. Por fim a percepção do risco socioambiental foi avaliada através de entrevistas semi-estruturadas (n=22) com as marisqueiras que realizam extração de molusco na região de Passé - Candeias. Os dados obtidos evidenciam que a percepção do risco pelas marisqueiras é facilmente identificada através da relação das atividades de mariscagem com as crises decorrentes da atuação industrial. A exposição (hs/dia) ao manguezal via contato dérmico é influenciada pelo tipo de maré, classificadas por elas como “cedeira e tardeira. O estudo alerta também sobre potenciais riscos a saúde humana advindo do consumo de ostra local, assim como a inserção da percepção do risco pela comunidade em estudos ambientais, fortalecendo assim o elo entre saberes popular e científico.
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Efeitos biológicos da contaminação sobre bivalves filtradores de regiões do litoral de São Paulo, com ênfase na Baixada Santista / Biological effects of contamination on filter-feeding bivalves from regions of the coast of São Paulo, with emphasis on Baixada Santista

Camargo, Julia Beatriz Duarte Alves de 06 July 2018 (has links)
Este trabalho avaliou a bioacumulação de metais e as respostas biológicas em mexilhões Perna perna coletados na Praia da Cocanha, Ilha das Palmas e Ponta de Itaipu, e ostras Crassostrea brasiliana coletadas nos Estuários de Cananéia, Santos e Bertioga em diferentes estações do ano. Foram realizadas duas campanhas: 2008/09 e 2016/17. A Cocanha apresentou elevados níveis de metais, indução de EROD e DBF e efeitos peroxidativos e genotóxicos. Em Palmas houve ativação de EROD, DBF, GST e GSH. Itaipu evidenciou bioacumulação de metais, ativação de GST e GSH e danos no DNA. Em Cananéia houve bioacumulação de As e Cr, respostas das fases I e II e efeitos peroxidativos. Santos exibiu piores condições fisiológicas, com alterações bioquímicas em todas as estações do ano. Bertioga piorou em 2016/17 em relação a 2008/09, evidenciado por maior bioacumulação de metais e respostas de biotransformação e antioxidantes e efeitos neurotóxicos. Os dados evidenciam fontes de contaminação diferentes para cada local e variação de acordo com o período do ano em função de diversos fatores (e.g. pluviosidade, reprodução, turismo). Os locais escolhidos como referência demonstraram estar sob influência de fontes pontuais de contaminação. Deve-se considerar que Itaipu e Cananéia integram unidades de conservação. / The present study assessed the bioaccumulation of metals and the biological responses in mussels Perna perna from Cocanha Brach, Palmas Island and Ponta de Itaipu, and oysters Crassostrea brasiliana from the estuaries of Cananéia, Santos and Bertioga in different seasons. Two campaigns were carried out: 2008/09 and 2016/17. Cocanha showed high levels of metals, induction of EROD and DBF and peroxidative and genotoxic damages. Palmas exhibited induction of EROD, DBF, GST and GSH. Itaipu exhibited bioaccumulation of metals, activation of GST and GSH and DNA damage. Cananéia showed bioaccumulation of As and Cr, phases I and II responses and peroxidative damage. Santos exhibited the worst physiological conditions, with biochemical alterations in all seasons. Bertioga conditions worsened in 2016/17 compared to 2008/09, evidenced by the higher content of metals and biotransformation and antioxidant responses and neurotoxic damage. These data show different sources of contamination for each site and variation in accordance with the time of the year due to several factors (e.g. rainfall, reproduction, tourism). The sites chosen as reference may be influenced by point sources of contamination. It should be considered that Itaipu and Cananéia are within protected areas.
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Efeitos biológicos da contaminação sobre bivalves filtradores de regiões do litoral de São Paulo, com ênfase na Baixada Santista / Biological effects of contamination on filter-feeding bivalves from regions of the coast of São Paulo, with emphasis on Baixada Santista

Julia Beatriz Duarte Alves de Camargo 06 July 2018 (has links)
Este trabalho avaliou a bioacumulação de metais e as respostas biológicas em mexilhões Perna perna coletados na Praia da Cocanha, Ilha das Palmas e Ponta de Itaipu, e ostras Crassostrea brasiliana coletadas nos Estuários de Cananéia, Santos e Bertioga em diferentes estações do ano. Foram realizadas duas campanhas: 2008/09 e 2016/17. A Cocanha apresentou elevados níveis de metais, indução de EROD e DBF e efeitos peroxidativos e genotóxicos. Em Palmas houve ativação de EROD, DBF, GST e GSH. Itaipu evidenciou bioacumulação de metais, ativação de GST e GSH e danos no DNA. Em Cananéia houve bioacumulação de As e Cr, respostas das fases I e II e efeitos peroxidativos. Santos exibiu piores condições fisiológicas, com alterações bioquímicas em todas as estações do ano. Bertioga piorou em 2016/17 em relação a 2008/09, evidenciado por maior bioacumulação de metais e respostas de biotransformação e antioxidantes e efeitos neurotóxicos. Os dados evidenciam fontes de contaminação diferentes para cada local e variação de acordo com o período do ano em função de diversos fatores (e.g. pluviosidade, reprodução, turismo). Os locais escolhidos como referência demonstraram estar sob influência de fontes pontuais de contaminação. Deve-se considerar que Itaipu e Cananéia integram unidades de conservação. / The present study assessed the bioaccumulation of metals and the biological responses in mussels Perna perna from Cocanha Brach, Palmas Island and Ponta de Itaipu, and oysters Crassostrea brasiliana from the estuaries of Cananéia, Santos and Bertioga in different seasons. Two campaigns were carried out: 2008/09 and 2016/17. Cocanha showed high levels of metals, induction of EROD and DBF and peroxidative and genotoxic damages. Palmas exhibited induction of EROD, DBF, GST and GSH. Itaipu exhibited bioaccumulation of metals, activation of GST and GSH and DNA damage. Cananéia showed bioaccumulation of As and Cr, phases I and II responses and peroxidative damage. Santos exhibited the worst physiological conditions, with biochemical alterations in all seasons. Bertioga conditions worsened in 2016/17 compared to 2008/09, evidenced by the higher content of metals and biotransformation and antioxidant responses and neurotoxic damage. These data show different sources of contamination for each site and variation in accordance with the time of the year due to several factors (e.g. rainfall, reproduction, tourism). The sites chosen as reference may be influenced by point sources of contamination. It should be considered that Itaipu and Cananéia are within protected areas.
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Caracterização do extrato de aroeira (Myracrodruon urundeuva) e seu efeito sobre a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos

Machado, Alessandra Cury 29 August 2013 (has links)
A aroeira (Myracrodruon urundeuva) é uma árvore cujas folhas vem sendo estudadas com fins terapêuticos na medicina e odontologia por apresentar potencial antiinflamatório e antimicrobiano, além de favorecer o processo de reparo e cicatrização. O objetivo do trabalho foi caracterizar quimicamente o extrato de aroeira e avaliar seu efeito sobre fibroblastos gengivais humanos. Foi realizado a caracterização química da aroeira por meio do processo de triagem cromatográfica que consistiu na coleta das folhas sadias, maceração em metanol (MeOH) 80%, partição entre os solventes hexano, acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-(BuOH)) Em seguida, realizaram-se análises dos compostos químicos em cromatografia liquida de alta eficiência acoplado a detector de arranjo de fotodiodo HPLC-PAD, análises por espectrometria de massas MS e cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Posteriormente foi realizada a análise de citotoxicidade do extrato hidroalcoólico de aroeira em fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). Para a realização dos experimentos foram plaqueadas 2x103 células/poço em placas de 96 poços. O meio de cultivo foi substituído por meio de cultura de Eagle modificado por Dullbecco complementado por 10% soro fetal bovino (SFB) em diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (extrato bruto; 1:10; 1:100; 1:1000; 1:10000 e controle). As análises de viabilidade foram feitas nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas, por meio dos testes de redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e coloração pelo cristal violeta. A estatística foi realizada em análise de variância de 2 critérios seguido de uma análise de teste Tukey (p<0,05). Os compostos encontrados no extrato foram os derivados de ácido gálico, galotaninos, além de flavonoides. Para a redução do MTT os resultados mostraram uma ligeira oscilação da absorbância em todos os grupos nos períodos experimentais. Destaque para as diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 que apresentaram, em geral para todos os períodos, os maiores valores; enquanto os grupos de extrato bruto e diluição 1:10 apresentaram valores inferiores aos outros grupos (p<0,05). Na análise da captação do vermelho neutro também houve uma leve oscilação dos valores de absorbância, no entanto os valores obtidos para o grupo do extrato bruto foram os menores em todos os períodos estudados (p<0,05). Enquanto os grupos controle e de diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 apresentaram valores semelhantes sem diferença significante (p>0,05). Para o teste do cristal violeta, os resultados encontrados seguiram o mesmo padrão do vermelho neutro: valores de absorbância menores nos grupos do extrato bruto e 1:10, ao contrário dos outros grupos que apresentaram valores maiores (p<0,05). Em vista dos resultados, podemos concluir que o extrato metanólico de aroeira apresenta em sua composição taninos, flavonóides e derivados de ácido gálico e de galotaninos. Além disso, o extrato de aroeira é capaz de modular a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos de maneira dose-dependente. / Aroeira (M. urundeuva) is a tree whose leaves have been studied with therapeutic purpose in dentistry and medicine, due it antimicrobial and antinflamatory potencial protect, besides the repair and cicatrization processes. The aim of the study was characterize the aroeiras extract and evaluate effect over human gingival fibroblast. The aroeiras characterization was realized by means of chromatography screenuy, process that consists in healthy leaves maceration in 80% MeOH, partition in the BuOH, AcOEt and hexanes solvents. Next, the chemicals compounds were analysed in High Performance Liquide Chromatography-Photo Diode Array (HPLC-PAD), Liquide Chromatography Mass Spectrometry (LCMS) and Mass Spectrometry (MSs). Subsequently was realized the citotoxicitys analysis from the aroeira hidroalcooholic extract in human gingival fibroblast (FGH lineage). For the experiments realization was platted 2x103 cels/well in 96 wells plate. The cultives mean was substituted for Eagles means culture changed for complemented Dullbeco for 10% bovine fetal serum in aroeiras hidroalcooholic extracts concentrations different (brute extract, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000). The viability analysis was carried out in experimental times 24, 48, 72 and 96 hours, by means of MTT reductions test (brometo3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio), neutral red captation and violet crystal). The statistics were performed for analysis of variance in 2 criteria continue with a Tukey test analysis (p<0.05). The founded compounds in the extract was the galic acid, gallotanine linked to glucose, besides flavonoids. For the MTTs reduction the results display an absorbance oscillation lightness in all the groups in experimental periods. Distinction for the control group and 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution, that present, by and large, for all the periods, the biggest valuable, while the brute extract group and 1:10 dilution present valuable lower to the others groups (p<0.05). In neutral red is caption analysis there was an absorbants values light oscillation too, despite this, the gotten values for the brute extracts group was smaller in all the studied periods (p<0.05). While the control group and the 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution presented similar values without significant difference (p>0.05). In view of the results, conclude the aroeiras methanolic extract present in your composition flavonoids and gallotanine, and galic acid derivates. Then, the aroeiras extracts is able to human gingival fibroblasts viable modulate dependent dose way.
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Biocélula a combustível de glicose/oxigênio implantável

Sales, Fernanda Cristina Pena Ferreira January 2013 (has links)
Orientador: Frank Nelson Crespilho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do ABC, Programa de Pós-Graduação em Nanociências e Materiais Avançados, 2013
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Avaliação citotóxica de Amoxilina e Clavulanato de Potássio em mexilhões Perna perna / Cytotoxical evalution of amoxicillin and potassium clavulanate to Perna perna mussel

Souza, Amanda de 30 March 2016 (has links)
Compostos farmacêuticos são identificados em matrizes ambientais em ordens de grandeza de ng.L-1 a &mu;g.L-1. Dentre os fármacos, os antibióticos têm recebido atenção especial devido aos problemas que podem causar à biota aquática. O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade de Amoxicilina e Clavulanato de Potássio isolados e em associação para mexilhões Perna perna utilizando o ensaio do tempo de retenção do corante vermelho neutro, que avalia a estabilidade da membrana lisossômica de hemócitos dos organismos teste. A Amoxicilina causou citotoxicidade aos mexilhões nas concentrações de: CEO: 1 ng.L-1, CI25-24h: 0,44 ng.L-1, CI25-48h: 1,19 ng.L-1 e CI25-72h: 0,85 ng.L-1, o Clavulanato de Potássio foi citotóxico nas concentrações de: 10 ng.L-1 em 24h e 50 ng.L-1 e 100 ng.L-1 em 48h e 72h. Os valores de concentração inibitória foram de CI25-24h: 3,11 ng.L-1, CI25-48h: 3,45 ng.L-1 e CI25-72h: 3,43 ng.L-1. No ensaio realizado com a associação dos fármacos todas as concentrações foram citotóxicas aos mexilhões em 48h e em 72h apenas 40 ng.L-1 de Amoxicilina + 10 ng.L-1 de Clavulanato de Potássio e 200 ng.L-1 de Amoxicilina + 50 ng.L-1 de Clavulanato de Potássio. As concentrações inibitórias foram: CI25-48h: 1,67 ng.L-1 e CI25-72h: 1,36 ng.L-1 a partir dos dados de Amoxicilina e CI25-48h: 0,42 ng.L-1 e CI25-72h: 0,34 ng.L-1 a partir dos dados de Clavulanato de Potássio. / Pharmaceutical compounds are identified in environmental matrices in orders of magnitude from ng.L-1 to &mu;g.L-1. Among the drugs, antibiotics have received special attention due to the problems that can cause to aquatic biota. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity of Amoxicillin and Potassium Clavulanate in isolated and associated forms to marine mussels Perna perna through the neutral red retention time assay which assesses the stability of hemocytes lisossomal membrane of test organisms. Amoxicillin caused cytotoxicity to the mussels in concentrations of: OEC: 1 ng.L-1, IC25-24h: 0.44 ng.L-1, IC25- 48h: 1.19 ng.L-1 and IC25-72h: 0.85 ng.L-1, Potassium Clavulanate was cytotoxic at concentrations of 10 ng.L-1 in 24h; 50 ng.L-1 and 100 ng.L-1 at 48h and 72h. The inhibitory concentration values were IC25-24h: 3.11 ng.L-1, IC25-48h: 3.45 ng.L-1 and IC25-72h: 3.43 ng.L- 1. The test conducted with the combination of drugs all concentrations were cytotoxic to mussels in 48h and 72h only 40 ng.L-1 Amoxicillin + 10 ng.L-1 and Potassium Clavulanate 200 ng.L-1 Amoxicillin + 50 ng.L-1 Potassium Clavulanate. The inhibitory concentrations were IC25-48h: 1.67ng.L-1 and IC25-72h: 1.36 ng.L-1 from the data of Amoxicillin and IC25- 48h: 0.42 ng.L-1 and IC25-72h: 0.34 ng.L-1 from the Potassium Clavulanate data.
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Avaliação citotóxica de Amoxilina e Clavulanato de Potássio em mexilhões Perna perna / Cytotoxical evalution of amoxicillin and potassium clavulanate to Perna perna mussel

Amanda de Souza 30 March 2016 (has links)
Compostos farmacêuticos são identificados em matrizes ambientais em ordens de grandeza de ng.L-1 a &mu;g.L-1. Dentre os fármacos, os antibióticos têm recebido atenção especial devido aos problemas que podem causar à biota aquática. O objetivo do presente estudo foi avaliar a citotoxicidade de Amoxicilina e Clavulanato de Potássio isolados e em associação para mexilhões Perna perna utilizando o ensaio do tempo de retenção do corante vermelho neutro, que avalia a estabilidade da membrana lisossômica de hemócitos dos organismos teste. A Amoxicilina causou citotoxicidade aos mexilhões nas concentrações de: CEO: 1 ng.L-1, CI25-24h: 0,44 ng.L-1, CI25-48h: 1,19 ng.L-1 e CI25-72h: 0,85 ng.L-1, o Clavulanato de Potássio foi citotóxico nas concentrações de: 10 ng.L-1 em 24h e 50 ng.L-1 e 100 ng.L-1 em 48h e 72h. Os valores de concentração inibitória foram de CI25-24h: 3,11 ng.L-1, CI25-48h: 3,45 ng.L-1 e CI25-72h: 3,43 ng.L-1. No ensaio realizado com a associação dos fármacos todas as concentrações foram citotóxicas aos mexilhões em 48h e em 72h apenas 40 ng.L-1 de Amoxicilina + 10 ng.L-1 de Clavulanato de Potássio e 200 ng.L-1 de Amoxicilina + 50 ng.L-1 de Clavulanato de Potássio. As concentrações inibitórias foram: CI25-48h: 1,67 ng.L-1 e CI25-72h: 1,36 ng.L-1 a partir dos dados de Amoxicilina e CI25-48h: 0,42 ng.L-1 e CI25-72h: 0,34 ng.L-1 a partir dos dados de Clavulanato de Potássio. / Pharmaceutical compounds are identified in environmental matrices in orders of magnitude from ng.L-1 to &mu;g.L-1. Among the drugs, antibiotics have received special attention due to the problems that can cause to aquatic biota. The aim of this study was to evaluate the cytotoxicity of Amoxicillin and Potassium Clavulanate in isolated and associated forms to marine mussels Perna perna through the neutral red retention time assay which assesses the stability of hemocytes lisossomal membrane of test organisms. Amoxicillin caused cytotoxicity to the mussels in concentrations of: OEC: 1 ng.L-1, IC25-24h: 0.44 ng.L-1, IC25- 48h: 1.19 ng.L-1 and IC25-72h: 0.85 ng.L-1, Potassium Clavulanate was cytotoxic at concentrations of 10 ng.L-1 in 24h; 50 ng.L-1 and 100 ng.L-1 at 48h and 72h. The inhibitory concentration values were IC25-24h: 3.11 ng.L-1, IC25-48h: 3.45 ng.L-1 and IC25-72h: 3.43 ng.L- 1. The test conducted with the combination of drugs all concentrations were cytotoxic to mussels in 48h and 72h only 40 ng.L-1 Amoxicillin + 10 ng.L-1 and Potassium Clavulanate 200 ng.L-1 Amoxicillin + 50 ng.L-1 Potassium Clavulanate. The inhibitory concentrations were IC25-48h: 1.67ng.L-1 and IC25-72h: 1.36 ng.L-1 from the data of Amoxicillin and IC25- 48h: 0.42 ng.L-1 and IC25-72h: 0.34 ng.L-1 from the Potassium Clavulanate data.
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Caracterização do extrato de aroeira (Myracrodruon urundeuva) e seu efeito sobre a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos

Alessandra Cury Machado 29 August 2013 (has links)
A aroeira (Myracrodruon urundeuva) é uma árvore cujas folhas vem sendo estudadas com fins terapêuticos na medicina e odontologia por apresentar potencial antiinflamatório e antimicrobiano, além de favorecer o processo de reparo e cicatrização. O objetivo do trabalho foi caracterizar quimicamente o extrato de aroeira e avaliar seu efeito sobre fibroblastos gengivais humanos. Foi realizado a caracterização química da aroeira por meio do processo de triagem cromatográfica que consistiu na coleta das folhas sadias, maceração em metanol (MeOH) 80%, partição entre os solventes hexano, acetato de etila (AcOEt) e n-butanol (n-(BuOH)) Em seguida, realizaram-se análises dos compostos químicos em cromatografia liquida de alta eficiência acoplado a detector de arranjo de fotodiodo HPLC-PAD, análises por espectrometria de massas MS e cromatografia liquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS). Posteriormente foi realizada a análise de citotoxicidade do extrato hidroalcoólico de aroeira em fibroblastos gengivais humanos (linhagem FGH). Para a realização dos experimentos foram plaqueadas 2x103 células/poço em placas de 96 poços. O meio de cultivo foi substituído por meio de cultura de Eagle modificado por Dullbecco complementado por 10% soro fetal bovino (SFB) em diferentes concentrações do extrato hidroalcoólico de aroeira (extrato bruto; 1:10; 1:100; 1:1000; 1:10000 e controle). As análises de viabilidade foram feitas nos tempos experimentais de 24, 48, 72 e 96 horas, por meio dos testes de redução do MTT (brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazólio), captação do vermelho neutro e coloração pelo cristal violeta. A estatística foi realizada em análise de variância de 2 critérios seguido de uma análise de teste Tukey (p<0,05). Os compostos encontrados no extrato foram os derivados de ácido gálico, galotaninos, além de flavonoides. Para a redução do MTT os resultados mostraram uma ligeira oscilação da absorbância em todos os grupos nos períodos experimentais. Destaque para as diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 que apresentaram, em geral para todos os períodos, os maiores valores; enquanto os grupos de extrato bruto e diluição 1:10 apresentaram valores inferiores aos outros grupos (p<0,05). Na análise da captação do vermelho neutro também houve uma leve oscilação dos valores de absorbância, no entanto os valores obtidos para o grupo do extrato bruto foram os menores em todos os períodos estudados (p<0,05). Enquanto os grupos controle e de diluições de 1:100, 1:1000 e 1:10000 apresentaram valores semelhantes sem diferença significante (p>0,05). Para o teste do cristal violeta, os resultados encontrados seguiram o mesmo padrão do vermelho neutro: valores de absorbância menores nos grupos do extrato bruto e 1:10, ao contrário dos outros grupos que apresentaram valores maiores (p<0,05). Em vista dos resultados, podemos concluir que o extrato metanólico de aroeira apresenta em sua composição taninos, flavonóides e derivados de ácido gálico e de galotaninos. Além disso, o extrato de aroeira é capaz de modular a viabilidade de fibroblastos gengivais humanos de maneira dose-dependente. / Aroeira (M. urundeuva) is a tree whose leaves have been studied with therapeutic purpose in dentistry and medicine, due it antimicrobial and antinflamatory potencial protect, besides the repair and cicatrization processes. The aim of the study was characterize the aroeiras extract and evaluate effect over human gingival fibroblast. The aroeiras characterization was realized by means of chromatography screenuy, process that consists in healthy leaves maceration in 80% MeOH, partition in the BuOH, AcOEt and hexanes solvents. Next, the chemicals compounds were analysed in High Performance Liquide Chromatography-Photo Diode Array (HPLC-PAD), Liquide Chromatography Mass Spectrometry (LCMS) and Mass Spectrometry (MSs). Subsequently was realized the citotoxicitys analysis from the aroeira hidroalcooholic extract in human gingival fibroblast (FGH lineage). For the experiments realization was platted 2x103 cels/well in 96 wells plate. The cultives mean was substituted for Eagles means culture changed for complemented Dullbeco for 10% bovine fetal serum in aroeiras hidroalcooholic extracts concentrations different (brute extract, 1:10, 1:100, 1:1000, 1:10000). The viability analysis was carried out in experimental times 24, 48, 72 and 96 hours, by means of MTT reductions test (brometo3-(4,5-dimetiltiazol-2-yl)-2,5-difeniltetrazolio), neutral red captation and violet crystal). The statistics were performed for analysis of variance in 2 criteria continue with a Tukey test analysis (p<0.05). The founded compounds in the extract was the galic acid, gallotanine linked to glucose, besides flavonoids. For the MTTs reduction the results display an absorbance oscillation lightness in all the groups in experimental periods. Distinction for the control group and 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution, that present, by and large, for all the periods, the biggest valuable, while the brute extract group and 1:10 dilution present valuable lower to the others groups (p<0.05). In neutral red is caption analysis there was an absorbants values light oscillation too, despite this, the gotten values for the brute extracts group was smaller in all the studied periods (p<0.05). While the control group and the 1:100, 1:1000 and 1:10000 dilution presented similar values without significant difference (p>0.05). In view of the results, conclude the aroeiras methanolic extract present in your composition flavonoids and gallotanine, and galic acid derivates. Then, the aroeiras extracts is able to human gingival fibroblasts viable modulate dependent dose way.
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Avaliação de corantes para a detecção da viabilidade do fitoplâncton marinho / Staining evaluation for detection of marine phytoplankton viability

Mattiello, Izadora De La Volpe 22 May 2014 (has links)
O fitoplâncton é sensível às perturbações ambientais e identificar a viabilidade destes organismos é importante para o monitoramento aquático. O termo viabilidade tem sido usado neste contexto para determinar basicamente se o organismo está vivo ou morto. O uso de corantes vitais e mortais tem sido uma das técnicas aplicadas neste tipo de análise, mas ainda não se conhece a potencialidade de alguns corantes que se apliquem a espécies de fitoplâncton. Neste trabalho, foram utilizadas espécies de diferentes grupos taxonômicos mantidas em cultivo, as quais foram submetidas a uma série de corantes vitais e mortais com o objetivo de detectar a viabilidade do fitoplâcton marinho. Dentre os corantes testados, o vermelho neutro, azul de Evans e o fluorescente CMFDA tiveram os melhores resultados (observado x esperado) em testes com diferentes porcentagens de células vivas e mortas. A combinação entre o corante vital vermelho neutro e o mortal azul de Evans não foi efetiva para análise simultânea. Alexandrium tamiyavanichii foi a espécie que teve menor afinidade com os corantes. Também foram comparados diferentes métodos de observação e registro de células coradas e não coradas, provando que é possível substituir a observação direta da microscopia pela filmagem no microscópio ou pela FlowCAM. A vantagem do uso destes métodos é que além de serem mais rápidos, é possível salvar as imagens capturadas e não é necessário fazer a análise instantaneamente. O método da filmagem é vantajoso, pois é fácil de ser desenvolvido em qualquer laboratório. / Phytoplankton cells are sensitive to environmental perturbations and, therefore, identifying their viability is important for aquatic monitoring. The term viability has been used in this context to determine whether an organism is alive or dead. The use of vital and mortal stains to detect phytoplankton viability is a promising approach. In this study we investigated the efficiency of several vital and mortal dyes in detecting marine phytoplankton viability. Best results were achieved with neutral red, Evans blue and the fluorescent stain in tests with different percentages of live and dead cells. The combination of neutral red and Evans blue (vital and a mortal stains, respectively) was not effective in simultaneous analysis. Alexandrium tamiyavanichii had low affinity for any given stain. Different observational methods were compared, suggesting that direct microscopic counts can be replaced by image acquisition methods using either a microscope-mounted camera or a FlowCAM. Such imaging methods are fast, allow image archiving, and image processing can be performed on a later stage, which is useful when several experiments need to be run in a short period of time.
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Avaliação de corantes para a detecção da viabilidade do fitoplâncton marinho / Staining evaluation for detection of marine phytoplankton viability

Izadora De La Volpe Mattiello 22 May 2014 (has links)
O fitoplâncton é sensível às perturbações ambientais e identificar a viabilidade destes organismos é importante para o monitoramento aquático. O termo viabilidade tem sido usado neste contexto para determinar basicamente se o organismo está vivo ou morto. O uso de corantes vitais e mortais tem sido uma das técnicas aplicadas neste tipo de análise, mas ainda não se conhece a potencialidade de alguns corantes que se apliquem a espécies de fitoplâncton. Neste trabalho, foram utilizadas espécies de diferentes grupos taxonômicos mantidas em cultivo, as quais foram submetidas a uma série de corantes vitais e mortais com o objetivo de detectar a viabilidade do fitoplâcton marinho. Dentre os corantes testados, o vermelho neutro, azul de Evans e o fluorescente CMFDA tiveram os melhores resultados (observado x esperado) em testes com diferentes porcentagens de células vivas e mortas. A combinação entre o corante vital vermelho neutro e o mortal azul de Evans não foi efetiva para análise simultânea. Alexandrium tamiyavanichii foi a espécie que teve menor afinidade com os corantes. Também foram comparados diferentes métodos de observação e registro de células coradas e não coradas, provando que é possível substituir a observação direta da microscopia pela filmagem no microscópio ou pela FlowCAM. A vantagem do uso destes métodos é que além de serem mais rápidos, é possível salvar as imagens capturadas e não é necessário fazer a análise instantaneamente. O método da filmagem é vantajoso, pois é fácil de ser desenvolvido em qualquer laboratório. / Phytoplankton cells are sensitive to environmental perturbations and, therefore, identifying their viability is important for aquatic monitoring. The term viability has been used in this context to determine whether an organism is alive or dead. The use of vital and mortal stains to detect phytoplankton viability is a promising approach. In this study we investigated the efficiency of several vital and mortal dyes in detecting marine phytoplankton viability. Best results were achieved with neutral red, Evans blue and the fluorescent stain in tests with different percentages of live and dead cells. The combination of neutral red and Evans blue (vital and a mortal stains, respectively) was not effective in simultaneous analysis. Alexandrium tamiyavanichii had low affinity for any given stain. Different observational methods were compared, suggesting that direct microscopic counts can be replaced by image acquisition methods using either a microscope-mounted camera or a FlowCAM. Such imaging methods are fast, allow image archiving, and image processing can be performed on a later stage, which is useful when several experiments need to be run in a short period of time.

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