Early pregnancy is characterized by complex interactions between blood vessels, leukocytes, and conceptus-derived trophoblasts within the gestational uterus. Uterine Natural Killer (uNK) cells become the most abundant leukocyte during decidualization and produce a wide array of angiogenic factors, yet little is known regarding their early pregnancy functions. To characterize the role(s) of uNK cells, whole mount in situ immunohistochemistry of live early implant sites was performed. A timecourse examination of murine early pregnancy (virgin, and gd4.5-9.5) implantation sites was performed. Comparison of Gd6.5, 8.5 and 9.5 implant sites from BALB/c+/+ controls (BALB/c) and BALB/c-Rag2-/-Il2rg-/- (alymphoid) identified anomalies that result from the absence of lymphocytes. In alymphoid decidua basalis, mesometrial angiogenesis was widespread but pruning of nascent vessels within alymphoid decidua basalis was deficient. As early gestation progressed, vessels of alymphoid decidua basalis showed no evidence for remodeling. Alymphoid implantation sites showed ~24h delay in uterine lumen closure and embryonic development. To determine if uNK cells would normalize the anomalies observed in alymphoid implantation sites, adoptive cell transfer of NK+ B- T- marrow to alymphoid mice was performed. All of the above anomalies were reversed by adoptive transfer of NK+B-T- marrow. My results suggest that uNK cells support vascular growth and development which ensures the decidua can support the growing conceptus early in pregnancy prior to formation and function of the placenta. Human decidual NK cells may fill similar roles and be important targets for strategies designed to correct intra-uterine growth restriction. / Thesis (Master, Anatomy & Cell Biology) -- Queen's University, 2013-08-02 08:42:06.487

El presente estudio constituye una importante contribución al conocimiento de la ultraestructura de la espermiogénesis y del espermatozoide de los Platelmintos parásitos. Los caracteres ultraestructurales de la reproducción, particularmente los del espermatozoide, son de gran utilidad para la Sistemática, la Taxonomía y la Filogenia de diversos grupos zoológicos, entre ellos el de los Platelmintos. Por ello, se ha estudiado ultraestructuralmente la espermiogénesis y el espermatozoide de siete especies de Platelmintos parásitos de distintas familias: cuatro Digénidos [Scaphiostomum palaearcticum Mas-Coma, Esteban et Valero, 1986 (Brachylaimidae), Fasciola hepatica, Linnaeus, 1758 y Fasiola gigantica Cobbold, 1856 (Fasciolidae) y Notocotylus neyrai González Castro, 1945 (Notocotylidae)] y tres Cestodos Cyclophyllidea [Joyeuxiella pasqualei (Diamare, 1893) y Joyeuxiella echinorhynchoides (Sonsino, 1899) (Dipylidiidae) y Taenia parva Baer, 1926 (Taeniidae)].Los helmintos, aislados tras disección de los hospedadores, han sido procesados según la metodología pertinente para los estudios ultraestructurales a que van encaminados. En el caso de F. gigantica se ha aplicado la técnica citoquímica de Thiéry para evidenciar la presencia de glucógeno en el gameto masculino. En el estudio de F. hepatica, dada la procedencia del material de la rata negra (Rattus rattus), hemos podido diseccionar el hospedador en el laboratorio y aplicar más fácilmente otras técnicas como son: 1) las técnicas inmunocitoquímicas para evidenciar la tubulina en el citoesqueleto del espermatozoide y 2) las de "whole mount" y de microscopía electrónica de barrido destinadas a la observación de espermatozoides enteros. Las técnicas inmunocitoquímicas de inmunomarcaje ultraestructural nos han permitido de detectar la presencia de las tubulinas contenidas en el citoesqueleto del espermatozoide mediante la utilización de anticuerpos monoclonales (anti-alfa-tubulina, anti-beta-tubulina, anti-tubulina acetilada y anti-tubulina tirosinada).Los resultados obtenidos en relación las especies estudiadas forman parte de las seis publicaciones expuestas en la Memoria. El estudio de S. palaearcticum es el cuarto trabajo realizado sobre la ultraestructura del gameto masculino en la familia Brachylaimidae y el primero de la subfamilia Ityogoniminae. En el caso de N. neyrai, el presente estudio constituye la primera aportación ultraestructural para la familia Notocotylidae. En la familia Fasciolidae se ha realizado un estudio comparado de la ultraestructura de la espermiogénesis y del espermatozoide de F. hepatica (parásito de Bos taurus en España y de Rattus rattus en Córcega) con la de F. gigantica (parásito de Bos indicus en Senegal). Para el género Joyeuxiella y, por extensión, para la familia Dipylidiidae, se establece el modelo general de la espermiogénesis y del espermatozoide dada la existencia de datos en dos de los tres géneros incluidos en esta familia. En el caso de T. parva, los resultados aportados contribuyen a la determinación de las características ultraestructurales del espermatozoide para las especies de la familia Taeniidae.Se efectua una completa revisión y discusión al respecto de diversos caracteres ultraestructurales del espermatozoide de los Digénidos, como son las ornamentaciones externas de la membrana y los cuerpos espinosos. Por otra parte, se describe la formación de una expansión citoplasmática dorso-lateral en el transcurso de la espermiogénesis en F. gigantica y F. hepatica. En el caso de los Cestodos, se describe por primera vez la formación de la vaina periaxonemal durante la espermiogénesis de Joyeuxiella spp. Además, ciertos caracteres de la espermiogénesis de los Digénidos y de los Cestodos primitivos como son la presencia de raíces estriadas y de rotación flagelar son igualmente observados respectivamente en los Cyclophyllidea Joyeuxiella spp. y T. parva.

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