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Previous issue date: 2009-03-06 / A epilepsia atinge cerca de 1% da popula??o mundial, sendo que aproximadamente 30% desses pacientes n?o respondem ao tratamento medicamentoso. Por sua vez, as c?lulas tronco representam uma esperan?a de tratamento da epilepsia, porquanto t?m grande capacidade de prolifera??o, diferencia??o e regenera??o de tecidos, podendo restaurar circuitos neurais e restabelecer a excitabilidade neuronal fisiol?gica. O objetivo deste estudo foi verificar se as c?lulas tronco mesenquimais (CTM) ou se c?lulas lisadas (Lise Celular) obtidas da medula ?ssea apresentam potencial terap?utico no controle das crises epil?pticas e do dano neuronal progressivo induzido pela epilepsia experimental. Os animais foram injetados com l?tio-pilocarpina (127 mg/kg e 60 Mg/kg i.p., respectivamente) para indu??o de status epilepticus (SE). As crises comportamentais foram classificadas de acordo com a escala de Racine e a dura??o do SE foi controlada com diazepam (10 mg/kg, i.p., 90 minutos). Os animais controle receberam solu??o salina. Ap?s 22 dias, o total dos animais foi dividido em cinco grupos: PILO; PILO+CTM, PILO+Lise, Salina e Salina+CTM. Os grupos CTM receberam transplante de c?lulas tronco mesenquimais, obtidas da medula ?ssea de camundongos EGFP C57BL/6. O grupo PILO+Lise recebeu c?lulas tamb?m provenientes da medula ?ssea desses animais, mas que passaram previamente por um processo de lise celular. Os animais dos grupos Salina e PILO receberam solu??o salina. Todos os transplantes foram feitos via veia da cauda (104-6 c?lulas, 200μL). Os animais tratados com pilocarpina (PILO) foram monitorados por v?deo durante sete dias pr?-transplante, e outros catorze dias ap?s o procedimento, para observa??o e computa??o de crises espont?neas recorrentes (CERs). Ainda, 45 dias depois da inje??o das c?lulas os animais foram avaliados nas seguintes tarefas: labirinto aqu?tico de Morris (LAM), reconhecimento de objetos, campo aberto e labirinto em cruz elevado. Decorridos 24 horas, 07 dias, 14 dias, 21 dias, 60 dias e 135 dias do transplante os animais foram sacrificados, e foram coletados os hipocampos direito e esquerdo para an?lise da presen?a de EGFP por PCR. Para a avalia??o histol?gica, os animais foram sacrificados 04 meses ap?s o transplante, tendo sido analisados o volume hipocampal, o volume dos n?cleos CA1, CA2, CA3 e CA4, bem como a densidade e o n?mero total de c?lulas nestes n?cleos. Finalmente, as c?lulas provenientes da medula ?ssea de camundongos C57/BL6 antes e ap?s serem cultivadas foram avaliadas por citometria de fluxo. Nossos resultados demonstram que as c?lulas mesenquimais injetadas n?o reduzem as CERs. J? para os animais tratados com lisado celular, verificamos que h? redu??o na freq??ncia de crises. A administra??o de CTM aos animais tratados com PILO promoveu melhora cognitiva no paradigma do reconhecimento de objetos, sem, por?m, melhorar a performance destes animais no LAM. O tratamento com lisado celular, por sua vez, n?o levou a melhor desempenho em quaisquer dos paradigmas cognitivos citados acima. Por meio da an?lise histol?gica podemos observar que os animais tratados com l?tio-pilocarpina apresentavam contagem total de c?lulas, densidade e volume inferiores aos animais controle. Ainda, CTM ou Lise n?o produziram aumento significativo em nenhuma das vari?veis analisadas, com exce??o do volume hipocampal, que se apresentou maior nos grupos PILO+CTM no hemisf?rio direito e PILO+Lise em ambos os hemisf?rios. Por outro lado, a an?lise dos dados obtidos na citometria de fluxo revelou que as CTM s?o positivas para os seguintes marcadores de superf?cie CD45, CD19, CD34, CD117 e Sca-1. Finalmente, detectamos a presen?a de EGFP em amostras obtidas do hipocampo de animais transplantados com CTM, resultado que demonstra que as c?lulas administradas intravenosamente migram ao sistema nervoso central. Nos ?ltimos anos, estudos que buscam tratamentos baseados em c?lulas tronco para as mais diversas doen?as neurodegenerativas foram vistos com muito interesse. Este tipo de tratamento pode, no futuro, ser ?til tamb?m no tratamento da epilepsia cr?nica, embora ainda seja preciso estabelecer com mais clareza o tipo de c?lula tronco ideal.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:tede2.pucrs.br:tede/1498 |
| Date | 06 March 2009 |
| Creators | Camozzato, Tatiane |
| Contributors | Costa, Jaderson Costa da |
| Publisher | Pontif?cia Universidade Cat?lica do Rio Grande do Sul, Programa de P?s-Gradua??o em Medicina e Ci?ncias da Sa?de, PUCRS, BR, Faculdade de Medicina |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS, instname:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul, instacron:PUC_RS |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 7620745074616285884, 500, 600, -8624664729441623247 |
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