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Previous issue date: 2012 / Os papilomavirus bovino (BPV) são oncovirus com DNA circular dupla fita e
usualmente espécie-específico. Embora o BPV cause doenças de importância
veterinária, o conhecimento sobre sua diversidade e biologia ainda é limitado. Esse
trabalho objetivou estudar a biologia e diversidade da infecção por BPV em lesões
cutâneas de bovinos e sítios não epiteliais de bovinos e equinos. No capítulo I,
buscou-se avaliar a diversidade de PV em lesões cutâneas. Foram encontrados os
BPV 1, 2, 3, 6 e o Papilomavírus associado ao sarcóide felino (FeSarPV) e a
presença de co-infecções. No capítulo II, foram avaliados mecanismos
etiopatogênicos em lesões papilomatosas induzidas por BPV. Foi observada a
expressão da oncoproteína E5 em todos os fibropapilomas analisados e uma
superexpressão da conexina 26 nos fibropapilomas, comparado com o tecido
normal. No capítulo III, foi verificada a presença do DNA de BPV em espermatozoide
e líquido seminal de sêmen comercial de touros e seu efeito na função espermática.
O DNA do BPV2 foi encontrado em todas as amostras avaliadas, porém sem causar
redução na função espermática. No Capítulo IV, foi avaliada a presença e expressão
de BPV em sangue de bovinos sadios e afetados por papilomatose. Os BPV 1 e 2
foram encontrados em animais assintomáticos e com papilomatose assim como sua
expressão. No Capítulo V, foi verificada a presença e expressão de BPV em sêmen
fresco de touros saudáveis. O DNA de BPV2 foi encontrado em 35% das amostras e
a expressão das proteínas E2 e E5 foi verificada em 55% das amostras de sêmen
positivas para BPV2. No capítulo VI foi investigada a presença e expressão genes
de BPV em células do sangue e sêmen de cavalos saudáveis por PCR e RT-PCR.
Os BPV 1 e 2 foram encontrados no sangue de 20% dos cavalos avaliados e no
sêmen 35% dos animais. A expressão da oncoproteína E5 foi verificada em 36% das
amostras de sangue e em sêmen positivas para o BPV. No Capítulo VII, foram
comparados dois sistemas de detecção de BPV por PCR, um com primers tipo
específico e outro com primers consenso em lesões cutâneas e fuidos de bovinos.
Os primers tipo específico para detecção de BPV mostraram-se mais sensíveis do
que os primers consenso, além disso, através destes foi verificada a alta prevalência
de co-infecções nas amostras estudadas. Porém, os primers consenso, amplificaram
alta diversidade de BPV, e prováveis novos tipos de BPV nas amostras estudadas.
Desta forma, os trabalhos oriundos desta tese, permitiram descrever a diversidade
de BPV nas lesões cutâneas de bovinos do Brasil e um de seus prováveis
mecanismos de ação, além disso, contribuem para fortalecer a hipótese de que os
BPV são capazes de infectar tecidos não-epiteliais, através da verificação da
presença e expressão de genes virais em células sanguíneas e do sêmen de
bovinos e equinos. Os resultados obtidos nesta tese vêm contribuir para o melhor
conhecimento de ferramentas moleculares que podem ser empregadas nos estudos
de presença e caracterização do BPV nos diversos tecidos bovinos. / Bovine papillomavirus (BPV) are double-stranded circular DNA oncovirus and usually
species-specific. Although BPV causes diseases of veterinary importance,
knowledge about their biology and diversity is still limited. This study investigated the
natural history of BPV infection in cattle and cutaneous epithelial sites of cattle and
horses. In Chapter I, we sought to evaluate the diversity of PV in cutaneous lesions.
We found BPV 1, 2, 3, 6 and papillomavirus associated with feline sarcoid (FeSarPV)
and co-infections. In Chapter II, we detected the BPV DNA in sperm and seminal fluid
of trade bull semen and its effect on sperm function. The DNA of BPV2 was found in
all samples, without causing a reduction in sperm function. In Chapter III, we
evaluated etiopathogenic mechanisms of BPV induced lesions. We observed the
expression of E5 oncoprotein in all analyzed fibropapillomas and an overexpression
of connexin 26 in fibropapillomas compared to normal tissue. In Chapter IV, we
evaluated the presence and expression of BPV in blood of healthy and affected cattle
by papillomatosis. The BPV 1 and 2 were found in asymptomatic and papillomatosisaffected
animals as well as its expression. In Chapter V, we detected the presence
and expression of BPV in fresh semen of healthy bulls. BPV2 DNA was found in 35%
of samples and the expression of E2 and E5 proteins was found in 55% of BPV2-
positive semen. In Chapter VI was investigated the presence and expression of BPV
genes in blood and semen cells of healthy horses by PCR and RT-PCR. BPV 1 and 2
were found in 20% of blood horses and in 35% of semen evaluated. Expression of
E5 oncoprotein was found in 36% of blood and semen samples positive for BPV. In
Chapter VII, we compared two PCR methods for BPV detection in skin lesions and
fluids: the use of BPV type-specific and consensus primers. The type-specific primers
for detection of BPV were more sensitive than consensus primers and could detect
co-infection of BPV in the samples. Consensus primers amplified a high diversity of
BPV, and probable new BPV types in the samples studied. Thus, this thesis allowed
describing the diversity of BPV in the skin lesions of Brazillian cattle and one of its
possible mechanisms of action and also contributes to strengthen the hypothesis that
BPV may infect non-epithelial sites, by verifying the presence and expression of viral
genes in blood and semen cells of cattle and horses. The results obtained in this
thesis contribute to a better understanding of molecular tools that can be employed in
studies of presence and characterization of BPV in various bovine tissues.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpe.br:123456789/18533 |
| Date | January 2012 |
| Creators | SILVA, Maria Angélica Ramos da |
| Contributors | FREITAS, Antonio Carlos de |
| Publisher | Universidade Federal de Pernambuco, Programa de Pos Graduacao em Genetica, UFPE, Brasil |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Breton |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPE, instname:Universidade Federal de Pernambuco, instacron:UFPE |
| Rights | Attribution-NonCommercial-NoDerivs 3.0 Brazil, http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/3.0/br/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
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