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Previous issue date: 2018-04-11 / A hipercolesterolemia se caracteriza pela elevação patológica da taxa de colesterol sanguínea
aumentando a formação de radicais livres, o qual provoca oxidação e danos nos lipídios
celulares causando crescimento da atividade inflamatória e progressão negativa da função
cognitiva. O consumo de vinho tinto atua minimizando estes efeitos, inibindo a expressão de
citocinas e modulando os níveis do fator neurotrófico derivado do cérebro (BDNF), da
proteína cíclica de ligação ao elemento AMPc-resposta (CREB), dos microRNAs (miARN), e
a ação da enzima acetilcolinesterase (AChE). Os antioxidantes, os flavonóides e os polifenóis
tornaram-se as primeiras substâncias contidas no vinho tinto com efeitos benéficos
comprovados em várias doenças, como a inibição da oxidação de LDL e parâmetros
envolvidos na resposta inflamatória. A ingestão regular de bebidas ricas em polifenóis
demonstra exercer consequências favoráveis à saúde humana, como diminuição da incidência
de doenças cardiovasculares, câncer e proteção contra doenças neurodegenerativas, entre
outras. Portanto, o presente estudo teve como objetivo investigar o potencial efeito
neuroprotetor do vinho Ruby Carbenet em camundongos nocaute para o receptor LDLr-/-
expostos à dieta hipercolesterolêmica. O vinho foi submetido a análise em vitro para
quantificação de polifenóis, antocianinas, ácido cafeico, ácido gálico, epicatequina e
resveratrol. Foram utilizados 40 camundongos adultos com 90 dias, de 20 a 25 gramas. Os
animais foram divididos em 4 grupos (n=10) e para a indução da hipercolesterolemia foi
borrifado colesterol diluído em álcool puro 96° C, sobre a dieta comercial (Puro Trato PB 22)
durante 90 dias. Ao final do tratamento foi realizado teste comportamental de memória, tarefa
do labirinto aquático de Morris (MWMT), logo após, o sangue foi coletado por punção
cardíaca e o córtex pré-frontal e o hipocampo foram removidos para os ensaios bioquímicos.
Foram determinados os níveis de lipídios plasmáticos e as citocinas pró-inflamatórias,
interferon gama (IFN-γ), fator de necrose tumoral-α (TNF-α), interleucina-1β (IL-1β) e
interleucina-6 (IL-6) no hipocampo e córtex pré-frontal. Também foram avaliadas a atividade
da AChE e os níveis das proteínas estruturais BDNF e CREB, e os biomarcadores
microRNAs. Nossos resultados mostraram que a dieta hipercolesterolemica causa um
aumento nos lipídios plasmáticos, nas citocinas pró-inflamatórias e na atividade da enzima
AChE nos camundongos LDLr-/-, o que foi atenuado pelo consumo de vinho tinto através da
diminuição do estado inflamatório. A dieta com elevado índice de colesterol diminuiu os
níveis de BDNF, CREB e microRNAs cerebrais, e o consumo moderado de vinho tinto foi
capaz de reverter estas proteínas estruturais BDNF e CREB, e os biomarcadores miRNA146a
e 155, promovendo a neuroproteção e a melhora da memória. O vinho Ruby Cabernet
apresentou potencial antioxidante confirmado pelos seus teores de ácido gálico 135, 3 mg/L,
ácido caféico 91,2 mg/L, epicatequina 242,2 mg/L e resveratrol 102,2 mg/L. O consumo
moderado do vinho proporcionaram aos camundongos melhora no déficit cognitivo e
plasticidade, corroborando com o resultado do teste comportamental, no qual o MWMT está
relacionado com o sistema de aprendizado e memória. Com isso, verificou-se que o vinho
Ruby Carbenet demonstrou efeito neuroprotetor e reduziu os níveis dos lipídios plasmáticos,
modulando as citocinas, agindo na manutenção da neuroplasticidade e regulação da atividade
da acetilcolinesterase em camundongos hipercolesterolêmicos.
Palavras-chave: Compostos fenólicos. Déficit cognitivo. Dieta com elevado índice de
colesterol. Camundongos nocaute para receptor LDLr-/-. Neuroplasticidade. / Hypercholesterolemia is characterized by the pathological elevation of the blood cholesterol
level, increasing the formation of free radicals, which causes oxidation and damage to the
cellular lipids causing inflammatory activity growth and negative progression of cognitive
function. Red wine consumption minimizes these effects by inhibiting cytokine expression
and modulating levels of brain-derived neurotrophic factor (BDNF), cyclic cAMP-binding
element (CREB), microRNAs (miRNA), and the action of the enzyme acetylcholinesterase
(AChE). Antioxidants, flavonoids and polyphenols have become the first substances
contained in red wine with proven beneficial effects in various diseases, such as the inhibition
of LDL oxidation and parameters involved in the inflammatory response. Regular ingestion of
polyphenol-rich beverages has a positive effect on human health, such as reducing the
incidence of cardiovascular diseases, cancer and protection against neurodegenerative
diseases, among others. Therefore, the present study aimed to investigate the potential
neuroprotective effect of Ruby Carbenet wine in knockout mice for the Ldlr-/- receptor
exposed to the hypercholesterolemic diet. The wine was submitted to in vitro analysis for
quantification of polyphenols, anthocyanins, caffeic acid, gallic acid, epicatechin and
resveratrol. 40 adult mice with 90 days, from 20 to 25 grams were used. The animals were
divided into 4 groups (n=10) and for the induction of hypercholesterolemia cholesterol was
diluted in pure alcohol 96 ° C, on the commercial diet (Puro Trato PB 22) for 90 days. At the
end of the treatment was performed memory behavioral test, Morris water maze task
(MWMT), soon after, blood was collected by cardiac puncture and the prefrontal cortex and
hippocampus were removed for biochemical assays. The levels of plasma lipids and
proinflammatory cytokines, interferon gamma (IFN-γ), tumor necrosis factor-α (TNF-α),
interleukin-1β (IL-1β) and interleukin-6 (IL-6) in the hippocampus and prefrontal cortex. We
also evaluated the activity of AChE and the levels of the structural proteins BDNF and CREB,
and the biomarkers microRNAs. Our results showed that the hypercholesterolemic diet causes
an increase in plasma lipids, proinflammatory cytokines and AChE enzyme activity in Ldlr-/-
mice, which was attenuated by the consumption of red wine through the reduction of the
inflammatory state. The high cholesterol diet decreased levels of BDNF, CREB and brain
microRNAs, and moderate consumption of red wine was able to revert these structural
proteins BDNF and CREB, and the miRNA146a and 155 biomarkers, promoting
neuroprotection and the improvement of memory. Ruby Cabernet wine showed antioxidant
potential confirmed by its content of gallic acid 135.3 mg/L, caffeic acid 91.2 mg/L,
epicatechin 242.2 mg/L and resveratrol 102.2 mg/L. The moderate consumption of wine gave
the mice an improvement in cognitive deficit and plasticity, corroborating with the result of
the behavioral test, in which MWMT is related to the learning and memory system. Thus, it
was verified that Ruby Carbenet wine demonstrated neuroprotective effect and reduced
plasma lipid levels, modulating cytokines, acting to maintain neuroplasticity and regulate
acetylcholinesterase activity in hypercholesterolemic mice.
Keywords: Phenolic compounds. Cognitive deficit. Diet with high cholesterol. Knockout
mice for Ldlr-/- receptor. Neuroplasticity.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:10.1.0.46:riu/3377 |
| Date | 11 April 2018 |
| Creators | Viana, Cristini Escobar |
| Contributors | Jesse, Cristiano Ricardo, Prigol, Marina |
| Publisher | Universidade Federal do Pampa, Mestrado Acadêmico em Bioquímica, UNIPAMPA, Brasil, Campus Uruguaiana |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UNIPAMPA, instname:Universidade Federal do Pampa, instacron:UNIPAMPA |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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