Resumo: O objetivo com este trabalho foi realizar um estudo farmacocinético da cumarina (CUM), 7-hidroxicumarina (7-HC), ácido o-cumárico (AOC) e ácido caurenóico (CAU) em voluntários sadios. Para quantificação em plasma dessas substâncias, dois métodos por CLAE-EM/EM foram desenvolvidos e validados. A pré-purificação dos analitos foi realizada por meio de extração líquido-líquido com tert-butil metil éter e através da técnica de precipitação de proteínas com acetonitrila. A cumarina, a 7-hidroxicumarina e o padrão interno (PI) 6-metilcumarina foram monitorados no modo positivo de ionização enquanto que os ácidos o-cumárico, caurenóico, isoferúlico (PI) e a prednisona (PI) no modo negativo de ionização. A separação cromatográfica foi realizada em uma coluna XBridge Shield RP18 150 x 2,1 mm (tamanho de partícula 5 ?m). Para o modo positivo de ionização a fase móvel foi composta de uma mistura de acetonitrila/água/ácido fórmico (65:35:0.05, v/v/v) eluída em modo isocrático. Para o modo negativo de ionização a fase móvel foi composta de um gradiente entre água e acetonitrila/água (95:5, v/v), ambos contendo 1 mM de formiato de amônio. Os resultados de validação mostraram que os novos métodos são seletivos e livres de efeito residual e de matriz. Os baixos limites de detecção (1,5 ng/mL para CAU, 3,0 ng/mL para CUM e 2,5 ng/mL para 7-HC e AOC) e de quantificação (5,0 ng/mL para CAU, 7,5 ng/mL para 7-HC e 10,0 ng/mL para AOC e CUM) indicaram que os novos métodos são muito sensíveis. As curvas de calibração apresentaram uma excelente correlação (r ? 0,99) nas faixas de 10,0 - 1500 ng/mL para CUM, 7,5 - 1000 ng/mL para 7-HC, 10,0 - 1000 ng/mL para AOC e 5,0 - 750 ng/mL para AOC. Nos diferentes níveis de concentração as variações de precisão e exatidão foram < 10,2%. A recuperação dos analitos e PI (> 70%) foi obtida com elevada precisão (CV < 5,0%). Sob as condições normais de trabalho, uma excelente estabilidade dos analitos foi observada tanto em plasma quanto em solução. Os métodos foram aplicados na análise da CUM, 7-HC, AOC e CAU no plasma de voluntários que receberam via oral o xarope de guaco, ou xarope de guaco fortificado com CUM. O estudo conduzido com 60 mL de xarope de guaco, em dose única, monstrou que a quantidade destas substâncias presentes no xarope não proporciona níveis plasmáticos suficientes para serem detectados pelos métodos bioanalíticos validados. A administração de 60 mL de xarope fortificado com 1500 mg de cumarina resultou em níveis plasmáticos de CUM, 7-HC e AOC suficientes para a determinação de seus parâmetros farmacocinéticos. Neste estudo foi possível verificar que a eliminação de AOC é dependente da sua taxa de formação e que AOC é um dos principais metabolitos biodisponíveis da CUM. Esses resultados reforçam a necessidade da condução de novos estudos para avaliar o potencial tóxico e terapêutico do AOC. O estudo também demonstrou que os níveis plasmáticos de 7-HC são extremamente baixos e o seu perfil farmacocinético sugere significativo metabolismo sequencial hepático com baixo acesso à circulação sistêmica. Esse estudo ainda reuniu evidências de que a administração do xarope de guaco na dose recomendada não proporciona níveis plasmáticos suficientes de CUM, 7-HC e AOC para o efeito broncodilatador esperado. Esse resultado sugere que estudos clínicos devem ser realizados para validar a eficácia deste fitoterápico. Só assim será possível garantir os benefícios do guaco, ou quem sabe impedir que recursos públicos sejam alocados para compra de medicamentos que não trazem nenhum benefício à população.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:dspace.c3sl.ufpr.br:1884/31866 |
| Date | 26 August 2013 |
| Creators | Gasparetto, Joao Cleverson |
| Contributors | Pontarolo, Roberto, 1954-, Universidade Federal do Paraná. Setor de Ciencias da Saúde. Programa de Pós-Graduaçao em Ciencias Farmaceuticas |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Repositório Institucional da UFPR, instname:Universidade Federal do Paraná, instacron:UFPR |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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