Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas, Programa de Pós-Graduação em Farmacologia, Florianópolis, 2011 / Made available in DSpace on 2012-10-25T15:16:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 294660.pdf: 695818 bytes, checksum: 2128261eca476036c03b157b3843ff7e (MD5) / A associação de medicamentos no tratamento da hipertensão arterial pode, através de efeitos sinérgicos e aditivos, atingir mais rapidamente o ajuste pressórico. Este estudo objetiva analisar a interação farmacocinética e o comportamento farmacodinâmico do maleato de enalapril e da hidroclorotiazida, administrados em associação fixa, para indivíduos sadios, em comparação à sua administração isolada. Selecionou-se dados dos medicamentos de referência no Brasil para os fármacos maleato de enalapril (20 mg), hidroclorotiazida (50 mg) e sua associação (10 mg/ 25 mg, respectivamente), obtidos em 8 estudos de bioequivalência farmacêutica, realizados entre janeiro de 2006 e setembro de 2009. Formaram-se 3 grupos: o do enalapril isolado (n=69); o da hidroclorotiazida isolada (n=68); e da associação (n=49). Calculou-se, para cada fármaco, os parâmetros farmacocinéticos, e registrou-se os sinais vitais dos indivíduos - pressão sistólica, diastólica e pulso - 1 hora antes da administração, e nos tempos relacionados à concentração máxima de cada medicamento, neste caso, tempo de 1 hora para o enalapril e de 5 horas para seu metabólito ativo (enalaprilato), e tempo de 3 horas para a hidroclorotiazida. Realizou-se curva de monitoramento plasmático das medicações, nos 3 grupos, a fim de comprovar o comportamento farmacocinético linear, e permitir comparação de diferentes dosagens dos fármacos. Os parâmetros de Cmax, Tmax e ASC 0-t foram comparados entre os grupos, para cada fármaco. Os dados clínicos foram analisados entre os grupos e também dentro de cada grupo. Em todas as análises se utilizou nível de significância de 5% (?=0,05). O enalapril não apresentou diferença farmacocinética entre o uso isolado ou associado. A hidroclorotiazida apresentou ASC 0-t significativamente maior quando associada (p=0,0077), mas não se alterou quanto a Cmax e Tmax. Todos os indi-víduos apresentaram elevação significativa do pulso após a tomada das medicações. No Tmax do enalapril, não houve alteração na pressão arterial, porém, no Tmax do enalaprilato, seu metabólito ativo, houve queda significativa, tanto isolado quanto associado. A queda de pressão sistólica no grupo relacionado ao enalaprilato associado foi significativamente maior (p<0,002) do que quando isolado, mesmo sob efeito de metade da dosagem do enalapril. Apenas a hidroclorotiazida associada apresentou impacto de queda significativa nos níveis tensionais. Concluiu-se que a hidroclorotiazida sofreu interferência na sua farmacocinética na presença do enalapril, com aumento da ASC 0-t, ampliando seu potencial de ação. Os valores de pressão arterial sofreram redução nos tempos correspondentes ao efeito máximo do enalaprilato isolado e associado, e da hidroclorotiazida associada. Os efeitos sinérgicos encontrados incentivam a utilização desta associação fixa no tratamento da hipertensão, principalmente por manter a ação hipotensora, mesmo com redução de dose e riscos.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2012-10-26T09:07:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 302354.pdf: 2351869 bytes, checksum: 19679640ad46cea7efde3376272772db (MD5) / A tuberculose (TB) é uma infecção das vias aéreas causada pela inalação de gotículas em suspensão do Mycobacterium tuberculosis (Mtb). Em 2010, estima-se que aproximadamente 8,8 milhões de pessoas tenham desenvolvido a doença, levando a morte de 1,1 milhões de pessoas em todo o mundo. O tratamento farmacológico para TB apresenta-se efetivo na maioria dos casos, porém o prolongado tempo da terapia associado aos efeitos adversos e a toxicidade diminuem a adesão dos pacientes, tendo como consequência o aumento no número de recidivas e o potencial desenvolvimento de resistência bacteriana. O desenvolvimento de análogos da isoniazida, com propriedades químicas mais favoráveis a sua penetração celular pode ser considerada uma estratégia na busca de novos tratamentos para a TB. A síntese de um análogo lipofílico da INH, denominado JVA, apresentou atividade antimicobacteriana in vitro semelhante à isoniazida e o tratamento de macrófagos infectados com cepa de Mtb por nanopartículas (NPs) poliméricas de PLGA que continham o JVA demonstrou atividade antimicobacteriana superior à forma livre. No presente trabalho, investigamos a capacidade de interação de NPs poliméricas na superfície do bacilo e também a sua interação com a bactéria no meio intracelular, além da análise da farmacocinética do JVA livre e em sistemas de liberação poliméricos administrado em camundongos. Técnicas de citometria de fluxo, MALDI-TOF/MS, imagens por AFM e microscopia confocal revelaram que NPs poliméricas de PLGA são capazes de interagir diretamente com a superfície do bacilo no meio intra e extracelular, podendo aumentar a exposição do bacilo aos antimicobacterianos, resultando em uma maior eficácia terapêutica. Para a realização dos estudos farmacocinéticos, desenvolveu-se e validou-se uma metodologia analítica por cromatografia líquida de fase-reversa. A validação do método demonstrou seletividade, linearidade, exatidão e precisão, sendo adequado para a sua utilização nos estudos farmacocinéticos subsequentes. As análises farmacocinéticas realizadas após a administração de JVA livre em camundongos pelas vias intraperitoneal (IP) e oral (VO) demonstraram que este composto apresenta uma rápida absorção (Tmax = 10 e 15 min.), com uma meia-vida de eliminação curta (ca. 15 min.), alto volume de distribuição (~ 100 mL) e depuração plasmática (~5 mL/min.), resultando em uma rápida eliminação deste composto da circulação sistêmica. A administração pela VO reduziu sua biodisponibilidade em cerca de 40% quando comparado à via IP. Testes farmacocinéticos preliminares com a utilização de NPs poliméricas pela via IP não se mostraram capazes de modificar o perfil farmacocinético observado com a administração do JVA livre. A partir disso, micropartículas poliméricas de PLGA, com um tamanho médio de 2 µm, foram produzidas para encapsular JVA e mostraram uma eficiência de encapsulação acima de 80%, com alto teor de JVA associado ao carreador. Ensaios de liberação de JVA a partir destes carreadores revelaram uma liberação praticamente nula do JVA em pH ácido e uma rápida e quase completa liberação quando em pH alcalino. A administração desses carreadores pela via IP e oral não foram capazes de modificar os parâmetros farmacocinéticos de meia-vida de eliminação, volume de distribuição e depuração de maneira significativa, porém, reduziram a biodisponibilidade do JVA. De maneira interessante, constatou-se que parte da dose administrada de JVA foi biotransformada em isoniazida, independente da via de administração escolhida e se este foi administrado livre ou em MPs. Porém, a conversão pela via oral foi mais significativa do que aquela observada pela via IP, ocorrendo de maneira semelhante com a administração de JVA livre ou encapsulado em MPs. Desta maneira, apesar de os parâmetros farmacocinéticos do JVA não terem sido considerados ideais para uma substância que se pretende usar na terapia antimicobacteriana este ainda deve ser investigado quanto a sua efetividade bactericida em modelos animais de TB. Devido a sua facilidade de permeação através de membranas e sua alta distribuição entre os tecidos espera-se observar um aumento no aporte de fármaco ao sítio da infecção, com redução no risco de desenvolvimento de resistência bacteriana e possibilidade de aumento da efetividade terapêutica. / Tuberculosis (TB) is an infection primarily caused by inhalation of droplets of Mycobacterium tuberculosis (Mtb). In 2010, it has been estimated that approximately 8.8 million people have developed the disease, leading to death of 1.1 million people worldwide. Pharmacological treatment for TB is thought to be effective in most cases, but the prolonged therapy associated with adverse effects and toxicity decreases patient compliance, resulting in an increased number of recurrences and the potential development of bacterial resistance. The development of isoniazid (INH) analogs, with enhanced chemical properties for cellular penetration can be considered a strategy in the research for new treatments for TB. We have recently demonstrated that an INH lipophilic analog, named JVA, displays an in vitro antimycobacterial activity similar to that of INH and the nanoenabled system using JVA within PLGA nanoparticles (NPs) enhanced Mtb killing inside macrophages. In this study, we investigated the interaction of polymeric NPs with the surface of the bacillus and also their interaction with the bacteria in the intracellular environment, as well as pharmacokinetic analysis of the free JVA and polymeric delivery systems administered in mice. Flow cytometry, MALDI-TOF/MS, confocal and atomic force microscopy analyses revealed that JVA-NPs associate with both intracellular Mtb and cell-free bacteria, indicating that NPs directly interact with the bacterium. Regarding pharmacokinetic studies, we developed and validated an analytical method using reverse phase liquid chromatography. The method validation showed specificity, linearity, accuracy and precision and is suitable for use in subsequent pharmacokinetic studies. The pharmacokinetic analysis carried out after the administration of free JVA by intraperitoneal (IP) and oral route in mice demonstrated that this compound exhibits rapid absorption (Tmax = 10 and 15 min.), with a short elimination half-life ( ~15 min.), high volume of distribution (~ 100 mL) and total clearance (~ 5 mL / min.), resulting in rapid elimination of this compound from circulation. Oral bioavailability is reduced by 40% compared to the IP route. Preliminary pharmacokinetic analyses with the IP polymeric NPs administration were not able to alter the pharmacokinetic profile observed with administration of free JVA. Furthermore, PLGA microparticles (MPs) were produced to encapsulate JVA, which displayed an entrapment efficiency above 80%, with high content of JVA associated with the carrier, and the average diameter of MPs-JVA was approximately 2 ìm. In vitro drug release studies for MPs-JVA have shown a very low drug release at acid pH and rapid and nearly complete when alkaline pH. The IP and oral administration of these carriers were not able to modify significantly the pharmacokinetic parameters of the elimination half-life, volume of distribution and clearance, but reducing the bioavailability of JVA. Interestingly, it was found that part of the administered JVA dose was biotransformed to isoniazid, independently of the administration routes and formulations. However, the JVA to INH conversion was higher by the oral than IP route, occurring in a similar way for free JVA or MPs-JVA administration. Although the pharmacokinetic parameters of JVA have not shown an extended half-life as expected, it deserves complementary investigations for their putative antimicrobial activity in animal models of TB. It is expected that its high permeation through the membrane and high distribution between tissues may increase the drug bioavailability to the site of infection, decreased risk of development bacterial resistance and increased therapeutic effectiveness.

Made available in DSpace on 2014-12-02T11:16:36Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-09-18Bitstream added on 2014-12-02T11:21:11Z : No. of bitstreams: 1 000792594.pdf: 3227993 bytes, checksum: 9f387e067c18e8091c14edcc97728e4a (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Instituto Nacional de Ciência e Tecnologia para Inovação Farmacêutica (INCT-if) / O composto 5-(4-cloro-benzilideno)-3-(4-metil-benzil)-tiazolidina-2,4-diona (GQ- 2), novo fármaco da classe das tiazolidinadionas, apresenta atividade hipoglicemiante e reduz os níveis basais de insulina, glicose e leptina, associados com o aumento da sensibilidade à insulina. Além disso, reduz o ganho de peso corporal devido à menor retenção de líquidos. Esses resultados torna o GQ-2 uma possível alternativa terapêutica para o tratamento do Diabetes Mellitus tipo 2. Nesse trabalho foi investigado o perfil farmacocinético e a toxicidade preliminar hepática e renal do composto GQ-2. Esse composto foi administrado em dose única pela via oral (12mg/Kg) e pela via intraperitoneal (12mg/Kg), e pela via intravenosa (3mg/Kg) em ratos wistar (n=25). Após a administração foram realizadas coletas seriadas de sangue pela artéria femoral. As amostras foram processadas e analisadas por método bioanalítico validado, utilizando um sistema UPLC. O sistema consistiu de um UPLC Acquity® equipado com um detector UV-Visível operando a 330 nm. A separação foi realizada com coluna BEH (2,1 x 50 mm, 1,7 μm) sob eluição da fase móvel constituída de acetonitrila: água (80:20), em modo isocrático e fluxo de 0,4 mL/min. As médias dos parâmetros farmacocinéticos foram calculadas pelas curvas de concentração plasmática versus tempo e expressos através da média, mediana e IC (95). A administração do GQ-2 em dose única (3mg/Kg) pela via intravenosa possibilitou a construção da curva de concentração plasmática versus tempo. Os parâmetros farmacocinéticos obtidos foram: Cmax (ng/mL): 786,2 (534,62-1037,76), tmax (h) 0,08, ASC0-t (ng/mL/h) 390,84 (282,28-499,41), ASC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r áreas (%) 0,95 (0,94-0,95), k ou (min-1) 5,51 (4,7-6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k ou (min-1) 0,24 (0,08-0,39) t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). Para a administração do ... / The compound 5-(4-chloro-benzylidene)-3-(4-methyl-benzyl)-thiazolidine-2,4- dione (GQ-2), new thiazolidinedione drug, presents hypoglycemic activity by lowering the basal levels of insulin, glucose and leptin, associated with the increased insulin sensitivity. In addition, reduces body weight gain due to minor liquid retention. These results ratify GQ-2 as possible therapeutic alternative for the treatment of type 2 diabetes. In this work we investigated the pharmacokinetic profile and primary hepatic and renal toxicity of the compound GQ-2. This compound was administered in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) and intravenously (3 mg/Kg) in Wistar rats (n=25). After administration serial blood collections were taken through the femoral artery. The samples were processed and analyzed by a validated bioanalytical method, using UPLC system. The system consisted of an Acquity UPLC® equipped with a UV-visible detector operating at 330 nm. The separation was performed with BEH column (2.1 x 50 mm, 1,7 μm) as the eluting mobile phase consisted of a acetonitrile:water (80:20) in isocratic mode and flow of 0,4 mL/min. The mean pharmacokinetic parameters were calculated by the curves of plasma concentration versus time and expressed through the mean, median and IC (95). The administration of the GQ-2 single dose (3 mg/Kg) intravenously enables the construction of the plasma concentration versus time curve. The pharmacokinetic parameters were obtained: Cmax (ng/mL) 786,2 (534,62-1037,76), tmáx (h) 0,08, AUC0-t (ng/mL/h) 390, 84 (282,28-499,41), AUC0-inf (ng/mL/h) 411,60 (296,41-526,79), Cl (L/h/Kg) 8,0 (5,45-10,55), Vd (L/Kg) 45,6 (23,9-67,3), r areas (%) 0,95 (0,94-0,95), k or (min-1) 5,51 (4,7- 6,3), t½ (min) 0,13 (0,11-0,14), k or (min-1) 0,24 (0,08-0,39), t½ (min) 4,44 (2,14-6,74). For the administration of GQ-2 in a single dose orally (12 mg/Kg) and intraperitoneally (12 mg/Kg) was not possible to construct ...

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:28:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-06-28Bitstream added on 2014-06-13T18:32:32Z : No. of bitstreams: 1 pinto_lsr_me_arafcf.pdf: 1125998 bytes, checksum: d180b32c1876b87cf52761d5cd5e4873 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O etambutol é preconizado no tratamento da meningite tuberculosa sempre associado a outro fármaco tuberculostático. Mas, embora útil quanto à sua ação, o fármaco não atravessa satisfatoriamente a barreira hematoencefálica. Desta forma, este trabalho propôs a síntese e caracterização estrutural de um pró-fármaco de etambutol (DEREMB) para melhorar a sua penetração no SNC; assim como a realização de estudos de atividade antibacteriana, estabilidade in vitro e ex vivo e, ainda, investigação da disposição cinética do composto; comparando-a com a do etambutol, em ratos wistar (machos, n=20, peso~200g) tratados com dose única via endovenosa (25 mg/kg) e via gavagem (100 mg/kg). A modificação molecular do etambutol alterou a lipossolubilidade do composto, expressa pelo log P, aumentando a possibilidade de penetração no sistema nervoso central, e o aumento da permeabilidade celular, haja vista que o DEREMB apresentou atividade, ainda que menor contra o M. tuberculosis quando comparada ao fármaco matriz. Os resultados obtidos nos ensaios de hidrólise em diferentes pHs (1,2 e 7,4) e na submissão à ação de enzimas plasmáticas permitem observar estabilidade do produto no período de 24 horas. Os parâmetros farmacocinéticos expressos através das médias (IC95%) foram: DEREMB (endovenoso): Cmax (ug/mL)= 10,4; AUC 0-t(ug/mL.min)=252,7; AUC 0-µ(ug/mL.min)= 294,3; Vd (L/kg)=4,3 ; CIT (mL/min/kg)=86,4 ; t ½ (min) =43,1;b (min-1)= 0,021. As baixas concentrações plasmáticas obtidas na administração oral do DEREMB não permitiram o calculo do parâmetros farmacocinéticos por esta via. Apenas os parâmetros Cmax e Vd do DEREMB não apresentaram diferenças estatísticas significativas quando comparados ao etambutol / Ethambutol is a tuberculostatic drug indicated for tuberculous meningitis treatment. But, although useful as for its action, the drug does not cross the blood-brain barrier satisfactorily; certainly reducing its effectiveness in the treatment of the tuberculous meningitis. In this way, this work proposed the synthesis and structural characterization of a prodrug of ethambutol (DEREMB) to improve its penetration in SNC; as well as the accomplishment of studies of antibacterial activity, in vitro and ex vivo stability studies and, still, the investigation of the kinetic disposition of the compound comparing it with the pharmacokinetic profile of ethambutol, in rats wistar (males, n=20, weigth~200g) treated with single iv dose(25 mg/kg) and by gavage (100 mg/kg). The produced prodrug presents a greater lipophilicity – expressed by logp - what could increase its permeation through the blood-brain barrier and its cellular permeability, once the DEREMB presented antimycobacterial activity, although smaller when compared to ethambutol. The in vitro and ex vivo (plasma) hydrolysis studies demonstrates that ethambutol derivative is stable and is not converted to ethambutol in the different pHs which occur in digestory tract or by plasmatic enzymes.. The pharmacokinetic parameters of DEREMB (iv) were: Cmax (ug/mL) = 10,4; AUC 0-t(ug/mL.min)=252,7; AUC 0 - (ug/mL.min) = 294,3; Vd (L/kg)=4,3; CIT (mL/min/kg)=86,4; t ½ (min) =43,1; (min-1) = 0,021. The low plasmatic concentrations obtained in the oral administration of DEREMB did not allow to calculate its pharmacokinetic parameters. Only Cmax and Vd parameters of DEREMB did not present significant statistical differences when compared to ethambutol

Orientador: Ronilson Agnaldo Moreno / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-03T17:07:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Vanunci_MoisesLuisPirasol_M.pdf: 2801673 bytes, checksum: f020d28f1de1f25d888dbb5f6ab8f6ed (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: o objetivo desse estudo foi avaliar, em voluntários humanos sadios, a farmacocinética de uma formulação do diclofenaco de potássio revestido (Clofenak 50 mg, Medley S/A Indústria Farmacêutica) em comparação com a formulação referência, Diclofenaco de Potássio comprimido (Cataflam 50 mg, Novartis Biociências S/A., Brasil). O estudo foi aberto, cruzado, randomizado com duas fases, onde vinte e quarto voluntários sadios de ambos os sexos receberam uma dose única de cada medicamento. Foram coletadas amostras de plasma em tempos regulares para a quantificação do fármaco. As amostras do Diclofenaco foram obtidas na pré-dose, em intervalos determinados e 12 h após a medicação. As concentrações plasmáticas totais foram quantificadas, pelo método validado usando, a cromatrografia líquida de alta precisão acoplada ao espectrômetro de massa (LC-MS-MS). Através da análise estatística e os parâmetros da EMEA concluiu-se que a formulação do Clofenak 50 mg, produzido pela Medley S/A Indústria Farmacêutica é bioequivalente em relação ao Diclofenaco de Potássio comprimido Cataflam 50 mg, medicamento referência, produzido pela Novartis Biociências S/A / Abstract: The aim of this study was to evaluate, on human volunteers, the performance of Potassium Diclofenac tablet formulation (Clofenak coated tablets 50 mg, by Medley S/A Indústria Farmacêutica) as opposed to standard Potassium Diclofenac dragee formulation (Cataflam dragees 50 mg, by Novartis Biociências S/A., Brazil). Twenty-four healthy volunteers, as assessed by clinical and laboratory test evaluations, were enrolled in the study. The study was a single dose, two-way randomized crossover design comparing Potassium Diclofenac tablet formulation (Clofenak coated tablets 50 mg, by Medley S/A Indústria Farmacêutica) to standard Potassium Diclofenac dragee formulation (Cataflam dragees 50 mg, by Novartis Biociências S/A., Brazil). Plasma samples for determination of Diclofenac were obtained during pre-dose in frequent intervals up to 12h afier dosing. Total Diclofenac plasma concentrations were quantified by a validated method mploying high-performance liquid chromatography coupled to mass spectrometry (LC-MS-MS) / Mestrado / Mestre em Farmacologia

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:03Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-03-05Bitstream added on 2014-06-13T20:49:53Z : No. of bitstreams: 1 santos_mb_me_botib.pdf: 406376 bytes, checksum: e3bf80284bc0601811da0e5c76ccb445 (MD5) / Os ensaios na area de farmacologia cl nica envolvem coletas sangu neas e medidas da informação (concentração de um fármaco) em horários pré estabelecidos. A prática atual, na maioria das vezes, estabelece os tempos de coleta arbitrariamente, o que pode resultar em dados pouco informativos para ajustar um modelo. Uma metodologia para resolver este tipo de problema e a construcão de delineamentos otimos. Em geral, os modelos envolvem equações não lineares. Sendo que um modelo popular e o modelo monocompartimental (de primeira ordem de absorção e eliminação) que possui três parâmetros. O problema principal de delineamento para modelos não lineares e que a matriz de variâncias e covariâncias dos estimadores dos parâmetros depende dos valores destes, dificultando o planejamento. Outra dificuldade é que várias coletas são realizadas num mesmo sujeito e portanto as respostas são correlacionadas. Assim, a matriz de variâncias e covariâncias depende também das correlações que podem ser incorporadas considerando-se um modelo não linear com efeitos aleatórios. Esse trabalho visa o estudo da teoria de delineamentos... / Trials in clinical pharmacology involves colleting blood samples and measuring the concentration of a drug at pre-especi ed moments. Current practice, usually xes the point times arbitrarily, which can result in uninformative data to t the aimed model. A methodology for solving such problems is the construction of optimum designs. In general, the models involve nonlinear equations. A popular model is the one-compartment model ( rst-order absorption and elimination). This model has three parameters. The main problem of design for nonlinear models is that the matrix of variances and covariances of the estimators of the parameters depends on the values of these, making the planning more di cult. Another di culty is that several samples are performed in the same subject and therefore the responses are correlated. The matrix of variances and covariances also depends on the correlations. The correlations can be incorporated by considering a nonlinear model with random e ects. This work aims to study the theory of optimal designs and the construction of algorithm to optimize designs under the nonlinear model with xed e ects and random e ects. The methodology can produce local optimum designs at some prior value of the parameters or try to reach global optimum through the incorporation of probability distributions of the parameters which are taken into account when calculating the value of the criterion used such designs are called Bayesians. Based on the results of an experiment from the literature D and Aw local and Bayesian optimum designs were obtained. To compare designs their e ciencies were calculated

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia / Made available in DSpace on 2013-03-04T19:58:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 309417.pdf: 3595166 bytes, checksum: b6e48ae70a6fa8f624beb4e094cb8e9e (MD5) / As doenças inflamatórias intestinais (IBD) são classificadas como um grupo de disfunções do trato gastrointestinal e representam importante problema de saúde pública mundial. Atualmente, as opções terapêuticas de primeira escolha para o tratamento das IBDs apresentam eficácia limitada, além de diversos efeitos adversos. Por essa razão, a busca por terapias mais promissoras para o tratamento dessas doenças é extremamente necessária. Os flavonoides são compostos fenólicos amplamente distribuídos na natureza e possuem inúmeras propriedades biológicas, dentre elas, atividade antinociceptiva e anti-inflamatória, e dessa forma, são apontados na literatura, como alvo potencial para o tratamento das IBDs. O flavonoide miricitrina é encontrado em uma grande variedade de vegetais, especialmente nas folhas da espécie Eugenia uniflora. O presente estudo avaliou a ação anti-inflamatória da miricitrina no modelo de colite induzida pelo sulfato sódico de dextrana (DSS), bem como, alguns dos mecanismos envolvidos em seus efeitos em camundongos. Além disso, para que a atividade farmacológica da miricitrina, no modelo de colite experimental, fosse corretamente interpretada, desenvolvemos e validamos um método analítico, o qual foi aplicado com sucesso para a determinação do perfil farmacocinético da miricitrina em plasma de roedores. Nossos resultados demonstraram que o tratamento oral com miricitrina (1, 3, e 10 mg / kg) causou ação anti-inflamatória na colite aguda induzida pelo DSS, através da prevenção das lesões macro- e microscópicas do cólon, bem como, pela inibição da migração de neutrófilos para o local inflamado. Além disso, a miricitrina reduziu significativamente os níveis de citocinas/quimiocinas pró-inflamatórias, como, TNF-?, CXCL1/KC e IL-6 e a expressão das enzimas, NOS2 e COX-2, em tecido colônico dos animais com colite experimental. O tratamento oral com a miricitrina inibiu importantes vias inflamatórias após o tratamento DSS, incluindo a proteína quinase PKC?, proteínas quinases ativadas por mitógeno, e o fator de transcrição nuclear kB. Por fim, os métodos analíticos validados neste trabalho mostraram-se seletivos, lineares, sensíveis, reprodutíveis e, apresentaram precisão e exatidão dentro dos limites preconizados pelas agências regulamentadoras e, por esta razão, puderam ser corretamente aplicados para a determinação do perfil farmacocinético deste composto em ratos e camundongos. Os resultados do perfil farmacocinético da miricitrina em plasma de roedores nos permitem sugerir que, tanto a forma glicosilada da miricitrina, como os seus metabólitos formados, parecem ser os responsáveis pela sua ação anti-inflamatória e antinociceptiva após a administração oral do composto. / Inflammatory bowel diseases (IBD) are classified as a group of gastrointestinal disorders representing an important public health problem. The current therapy used for the management of human inflammatory bowel disease has limited efficacy and many adverse effects. For this reason, the search for most promising therapies for the treatment of these diseases is extremely needed. Flavonoids are phenolic compounds widely distributed in nature and have a number of biological properties, including, antinociceptive and antiinflammatory activities. Therefore, the flavonoids are cited in the literature as a potential target for the treatment of IBDs. The flavonoid myricitrin is found in a wide variety of plants, especially in the leaves of the species Eugenia uniflora. In order to better understanding the biological activity of the compound, the determination of its pharmacokinetic profile is extremely important. Thus, this study aimed to investigate the antiinflamatory and antinociceptive actions of myricitrin in the model of acute colitis induced by dextran sulfate sodium (DSS). Furthermore, we have also developed and validated an analytical method which was successfully applied to determine the pharmacokinetic profile of myricitrin in the plasma of rodents. Our results showed that oral treatment with myricitrin (1, 3, and 10 mg/kg) exerted a marked anti-inflammatory action in DSS-induced acute colitis in mice, by preventing macro- and microscopic damage to the colon and the migration of neutrophils to the infected site. Furthermore, myricitrin significantly impaired the levels of pro-inflammatory cytokines/chemokines, namely TNF-?, CXCL1/KC and IL-6 and the expression of NOS2 and COX-2 enzymes in murine colon tissue. Moreover, the oral treatment with myricitrin also prevented important inflammatory pathways following DSS treatment, including the protein kinase PKC?, mitogen-activated protein kinases, and the ?B nuclear transcription factor. The analytical methods validated in this work were selective, linear, sensitive, reproducible, and showed precision and accuracy within the limits preconized by regulatory agencies. Thus, it could be properly used to determine the pharmacokinetic profile of myricitrin in rats and mice. The pharmacokinetic profile in plasma of rodents allows us to suggest that both, the glycosylated form of myricitrin, as well as, their metabolites, seem to be the responsibles for its pharmacological activity in the present study.

Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2012. / Made available in DSpace on 2013-06-25T21:19:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 314215.pdf: 2574522 bytes, checksum: 4ba47b6a17e454568012a0badb0d0c6a (MD5) / Chalconas sintéticas da série 6-quilonil chalcona (QC2 e QC10) são capazes de reduzir a glicemia de ratos hiperglicêmicos atuando em múltiplos alvos de ação. Com objetivo de melhorar o perfil biofarmacêutico e o potencial terapêutico destas chalconas, um estudo de formulação foi conduzido no sentido de otimizar um sistema microparticulado pela técnica de emulsificação o/a seguida de evaporação/extração do solvente. Este estudo foi baseado em um planejamento fatorial fracionado 25-1, no qual foram avaliados os efeitos da concentração de surfactante, quantidade de chalcona QC2, volume de fase orgânica volume de fase externa e volume de fase de extração sobre rendimento, tamanho das partículas, polidispersão e eficiência de encapsulação (EE). O rendimento foi de cerca de 93 %. O tamanho de partícula variou entre 84,1 a 191,8 m, com uma baixa polidispersão. A EE variou entre 78,5 a 97,8 %, sendo influentes sobre este parâmetro a concentração de chalconas e polímero, bem como a utilização de extração para eliminação do solvente. A partir deste estudo foram estabelecidas as condições de obtenção de uma formulação otimizada com máxima EE e teor de chalcona. Em um segundo estudo de formulação foram desenvolvidos, a partir da formulação otimizada, micropartículas incluindo a chalcona QC10 e o polímero Eudragit® RS100 (PLGA/QC2 ou QC10 e Eudragit/QC2 ou QC10). O tamanho de partícula variou em função do tipo de polímero. As partículas apresentaram forma esférica e lisa, exceto o sistema PLGA/QC10, no qual foi evidenciado deposição de cristais na superfície. Na análise por TGA a chalcona QC10 apresentou maior estabilidade térmica em relação à QC2. Nas análises por CED apenas o sistema Eudragit/QC2 apresentou evento de fusão relativo à chalcona, sugerindo amorfização das chalconas encapsuladas nos demais sistemas. O perfil de liberação para PLGA/QC10 foi correlacionado à presença desta chalcona na superfície da partícula, liberando 80% da chalcona, enquanto que na formulação PLGA/QC2 não houve liberação. Os sistemas preparados com Eudragit apresentaram 95 % de liberação para QC10 e 78 % de liberação para a QC2 após 24 horas. A avaliação in vivo em modelos de ratos hiperglicêmicos demonstrou que o sistema Eudragit/QC10 (15 mg) possibilitou a redução da glicemia após a sobrecarga de glicose em relação ao grupo tratado com a mesma dose de chalcona QC10 não encapsulada.<br> / Abstract : Synthetic chalcones of the 6-quinolyl chalcone (QC2 and QC10) series are able to reduce the glycemia in hyperglycemic rats acting on multiple targets. In order to improve the biopharmaceutical profile and the therapeutic potential of these chalcones, a preformulation study was conducted to optimize a microparticulate system developed using oil-in-water emulsion/solvent evaporation technique. This study was based on a fraction factorial design 2 5-1, which evaluated the effect of the surfactant concentration, amount of chalcone QC2, organic phase volume, external phase volume and extraction phase volume on the yield, particle size, size distribution and encapsulation efficiency (EE). The yield was around 93 %. The particle size ranged from 84.1 to 191.8 um, with a narrow particles size distribution. EE was from 78.5 to 97.8 %, influenced by the chalcone and polymer concentration and the use of the extraction for solvent elimination. From this study were established the conditions to obtain an optimized formulation with maximum values of EE and QC2-loading. In a second formulation study were developed microparticles including the chalcone QC10 and Eudragit RS100 polymer (PLGA/QC2 or QC10 and Eudragit/QC2 or QC10). The particle size were affected by polymer type, the microparticles were spherical and smooth, except the system PLGA/QC10 that presented free chalcone in the microparticles surface. The analysis of the chalcone QC10 by TGA showed a higher thermal stability compared to QC2. The release behavior of the PLGA/QC10 can be correlated with the chalcone presence in the microparticles surface, however the PLGA/QC2 formulation was not released. The systems prepared with Eudragit showed 95 % and 78 % of the QC10 and QC2 were released after 24 hours, respectively. The in vivo evaluation in hyperglycemic rats demonstrated that the system Eudragit/QC10 (15 mg/kg) had a significantly major reduction of glycemia after the glucose administration, when compared to the group treated with free QC10 chalcone.

Resumo: O objetivo com este trabalho foi realizar um estudo farmacocinético da cumarina (CUM), 7-hidroxicumarina (7-HC), ácido o-cumárico (AOC) e ácido caurenóico (CAU) em voluntários sadios. Para quantificação em plasma dessas substâncias, dois métodos por CLAE-EM/EM foram desenvolvidos e validados. A pré-purificação dos analitos foi realizada por meio de extração líquido-líquido com tert-butil metil éter e através da técnica de precipitação de proteínas com acetonitrila. A cumarina, a 7-hidroxicumarina e o padrão interno (PI) 6-metilcumarina foram monitorados no modo positivo de ionização enquanto que os ácidos o-cumárico, caurenóico, isoferúlico (PI) e a prednisona (PI) no modo negativo de ionização. A separação cromatográfica foi realizada em uma coluna XBridge Shield RP18 150 x 2,1 mm (tamanho de partícula 5 ?m). Para o modo positivo de ionização a fase móvel foi composta de uma mistura de acetonitrila/água/ácido fórmico (65:35:0.05, v/v/v) eluída em modo isocrático. Para o modo negativo de ionização a fase móvel foi composta de um gradiente entre água e acetonitrila/água (95:5, v/v), ambos contendo 1 mM de formiato de amônio. Os resultados de validação mostraram que os novos métodos são seletivos e livres de efeito residual e de matriz. Os baixos limites de detecção (1,5 ng/mL para CAU, 3,0 ng/mL para CUM e 2,5 ng/mL para 7-HC e AOC) e de quantificação (5,0 ng/mL para CAU, 7,5 ng/mL para 7-HC e 10,0 ng/mL para AOC e CUM) indicaram que os novos métodos são muito sensíveis. As curvas de calibração apresentaram uma excelente correlação (r ? 0,99) nas faixas de 10,0 - 1500 ng/mL para CUM, 7,5 - 1000 ng/mL para 7-HC, 10,0 - 1000 ng/mL para AOC e 5,0 - 750 ng/mL para AOC. Nos diferentes níveis de concentração as variações de precisão e exatidão foram < 10,2%. A recuperação dos analitos e PI (> 70%) foi obtida com elevada precisão (CV < 5,0%). Sob as condições normais de trabalho, uma excelente estabilidade dos analitos foi observada tanto em plasma quanto em solução. Os métodos foram aplicados na análise da CUM, 7-HC, AOC e CAU no plasma de voluntários que receberam via oral o xarope de guaco, ou xarope de guaco fortificado com CUM. O estudo conduzido com 60 mL de xarope de guaco, em dose única, monstrou que a quantidade destas substâncias presentes no xarope não proporciona níveis plasmáticos suficientes para serem detectados pelos métodos bioanalíticos validados. A administração de 60 mL de xarope fortificado com 1500 mg de cumarina resultou em níveis plasmáticos de CUM, 7-HC e AOC suficientes para a determinação de seus parâmetros farmacocinéticos. Neste estudo foi possível verificar que a eliminação de AOC é dependente da sua taxa de formação e que AOC é um dos principais metabolitos biodisponíveis da CUM. Esses resultados reforçam a necessidade da condução de novos estudos para avaliar o potencial tóxico e terapêutico do AOC. O estudo também demonstrou que os níveis plasmáticos de 7-HC são extremamente baixos e o seu perfil farmacocinético sugere significativo metabolismo sequencial hepático com baixo acesso à circulação sistêmica. Esse estudo ainda reuniu evidências de que a administração do xarope de guaco na dose recomendada não proporciona níveis plasmáticos suficientes de CUM, 7-HC e AOC para o efeito broncodilatador esperado. Esse resultado sugere que estudos clínicos devem ser realizados para validar a eficácia deste fitoterápico. Só assim será possível garantir os benefícios do guaco, ou quem sabe impedir que recursos públicos sejam alocados para compra de medicamentos que não trazem nenhum benefício à população.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:05Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-01-21Bitstream added on 2014-06-13T21:07:07Z : No. of bitstreams: 1 campagnol_d_dr_botfm.pdf: 3603129 bytes, checksum: 6016b81a7cfcb53dc9f89a2b1a5dfcbe (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A metadona é um opióide que possui potência analgésica semelhante à da morfina. Doses elevadas de metadona intravenosa (0,5-1,0 mg/kg), apesar de reduzirem a concentração alveolar mínima do isoflurano (CAMISO), resultam em maior depressão cardíaca que a observada com a morfina intravenosa (1,0 mg/kg) em cães. Com a hipótese de que a metadona peridural poderia proporcionar vantagens clínicas em relação à metadona intravenosa (maior potencialização da anestesia inalatória e maior eficácia analgésica), os estudos apresentados objetivaram comparar aspectos farmacocinéticos e farmacodinâmicos destas vias de administração da metadona em cães. Nos dois estudos iniciais (Capítulos 1 e 2), os mesmos seis animais foram anestesiados com isoflurano e tratados com metadona (0,5 mg/kg) peridural ou intravenosa em ocasiões distintas. No primeiro estudo (Capítulo 1), para comparação da farmacocinética destas duas vias de administração, a concentração de metadona foi determinada no plasma e no líquor da cisterna magna antes e durante 450 minutos após a administração do opióide. No segundo estudo (Capítulo 2), a CAMISO foi mensurada antes e após 2,5 e 5 horas da administração da metadona, mediante a aplicação da estimulação nociceptiva em membro pélvico e torácico (via peridural) ou em membro pélvico apenas (via intravenosa). No último estudo (Capítulo 3), cadelas apresentando tumores mamários, após serem tratadas de forma preemptiva com metadona (0,5 mg/kg) peridural ou intravenosa (10 animais por grupo), foram submetidas à mastectomia unilateral. Nesta etapa, avaliou-se a concentração expirada de isoflurano (ETISO) necessária à realização da mastectomia e, no período pós-operatório, avaliou-se os escores de dor, limiares nociceptivos mecânicos (LNM) das cadeias mamárias e requerimento de resgates analgésicos. No estudo do Capítulo 1, a via... / Methadone is an opioid that has analgesic potency comparable to that of morphine. High doses of intravenous methadone (0.5-1.0 mg/kg), in spite of reducing the minimum alveolar concentration of isoflurane (MACISO), cause greater cardiac depression than intravenous morphine (1 mg/kg) in dogs. The studies presented here aimed to compare some pharmacokinetic and pharmacodynamic aspects of peridural and intravenous methadone in dogs, testing the hypothesis that peridural methadone could result in clinical advantages when compared to intravenous methadone (greater reduction in anesthetic requirements and greater analgesic efficacy). In the first 2 studies (Chapters 1 and 2), the same six animals underwent isoflurane anesthesia and were treated with methadone (0.5 mg/kg) administered via the peridural or intravenous routes during different occasions. During the first study (Chapter 1), in order to compare the pharmacokinetics of these two administration routes, methadone concentrations were determined in plasma and in the cisternal cerebrospinal fluid before and for 450 minutes after opioid injection. During the second study (Chapter 2), MACISO was measured before, 2.5 and 5 hours after methadone injection via nociceptive stimulation of the thoracic and pelvic limb (peridural) or the pelvic limb (intravenous). During the last series of studies (Chapter 3), bitches presented with mammary gland tumors were preemptively treated with peridural or intravenous methadone (0.5 mg/kg) (10 animals per group) and underwent unilateral mastectomy. The end-tidal isoflurane concentration (ETISO) necessary for maintaining surgical anesthesia was evaluated and, during the postoperative period, parameters evaluated included Glasgow pain scores, mechanical nociceptive thresholds (MNT) in the mammary glands, and requirement for supplemental analgesia. In first study (Chapter 1), peridural methadone prolonged... (Complete abstract click electronic access below)