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Previous issue date: 2006-06-28 / Thirty cronic chagasic pacients were submitted to specific treatment against Chaga’s disease.
The drug of choice was Benznidazole. After treatment laboratorial exams such as parasitological and
imunological aiming terapheutic validation were performed. The parasitological analysis is
represented by post-treatment hemoculture of 30 cronic chagasic pacients and demonstrated the
presence of promastigotes and epimastigotes in 10% (3/30) of pacients, probably characterizing a
mixed infection. These hemocultures were named 371, 437 and 438. From these three pacients two
were from Goias (GO) and one from Minas Gerais (MG) which are endemic regions to Chaga’s
disease as well as to Leishmaniasis which justified the study of this probable co-infection. The work
was developed in two phases: in the first phase it was made the biological experimental study of the
mixed sotck and in the second phase it was made the confirmation of the Leishmania spp gender
through PCR technique. In the experimental biological study the model used was Balb/c isogenic
mice and we made an intraperitoneal inoculation of the stocks and we analysed the following
parameters: parasitism, hemoculture, sorology by IFI and histopathology. The parasitism observation
occured between 48 hours periods through 90 days, and the hemoculture observations occured
weekly through 120 days and resulted positive only in mice innoculated with stock 371. The
sorology showed anti-T. cruzi antibodies titers in mice innoculated with stocks 371 and 437. The
histopathology revealed the presence of amastigotes in tissues cardiac slides from mice innoculated
with stock 438, showing that only the epimastigotes forms are present in the mixed stocks and are
viable to infect the experimental model used in this work. The confirmation of the Leishmania
subgenus envolved in this co-infection was possible through molecular biology techniques. In PCRRFLP,
after digestion of PCR products by Hae III restriction enzymes which has specific clivage
sites for L. (Viannia) subgender. The samples represented by 371, 437 and 438 stocks and the
controls of L. (L.) amazonensis and L. (L.) chagasi did not suffer clivage of its amplified segments in
PCR. Only the control constituted by L. (V.) braziliensis suffered clivage resulting in fragments of
aproximately 40 and 80 bp confirming undoubtfully that the samples represented by the mixed
stocks 371, 437 and 438 isolated from cronic chagasic pacients cantained L. (Leishmania) spp. / Trinta pacientes chagásicos crônicos foram submetidos ao tratamento específico para a
doença de Chagas. A droga utilizada foi o Benznidazol. Após o tratamento foram realizados exames
laboratoriais compreendendo análises parasitológicas e imunológicas, com a finalidade de validação
terapêutica. A análise parasitológica representada pela hemocultura evidenciou a presença
concomitante de promastigotas e epimastigotas em 10% (3/30) delas, caracterizando uma provável
infecção mista. Essas hemoculturas foram denominadas 371, 437 e 438. Dos três pacientes, dois são
procedentes do estado de Goiás (GO) e um do estado de Minas Gerais (MG), regiões endêmicas
tanto para a doença de Chagas como para a leishmaniose, o que justificou o estudo desta provável
co-infecção. O presente trabalho foi desenvolvido em duas etapas. Na primeira etapa, foi realizado o
estudo biológico experimental dos estoques mistos e na segunda, a confirmação do gênero
Leishmania spp nos estoques mistos, através da técnica de PCR. No estudo biológico experimental,
foram utilizados como modelos camundongos Balb/c isogênicos, realizando-se inoculação
intraperitoneal dos estoques. Posteriormente foi analisada a parasitemia, hemocultura, sorologia por
IFI e histopatologia. A observação da parasitemia ocorreu a cada 48 horas pelo período de 90 dias, e
a hemocultura foi analisada semanalmente por 120 dias, resultando positiva apenas nos
camundongos inoculados com o estoque 371. A IFI detectou apenas anticorpos anti-T. cruzi, nos
camundongos inoculados com os estoques 371 e 437. A análise histopatológica revelou presença de
ninhos de amastigotas nos cortes cardíacos dos camundongos inoculados com o estoque 437,
demonstrando no conjunto dessas análises, que apenas as formas epimastigotas presentes nos
estoques mistos se mostraram viáveis em infectar o modelo experimental utilizado. A presença de
protozoários do gênero Leishmania nos estoques foi confirmada mediante realização de PCR. Na
PCR-RFLP, o produto da amplificação foi tratado com a enzima de restrição Hae III que tem sítios
específicos de clivagem para o subgênero L. (Viannia). As amostras representadas pelos estoques
371, 437 e 438 e os controles de L. (L.) amazonensis e L. (L.) chagasi não sofreram clivagem de seus
segmentos amplificados na PCR. Apenas o controle constituído de L. (V.) braziliensis sofreu
clivagem, resultando fragmentos de aproximadamente 40 e 80 pb, confirmando inequivocamente
que as amostras representadas pelos estoques mistos 371, 437 e 438 isoladas de pacientes chagásicos
crônicos realmente continham L. (Leishmania) spp.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.bc.ufg.br:tede/3261 |
| Date | 28 June 2006 |
| Creators | Dias, Sueli Meira da Silva |
| Contributors | Castro, Ana Maria de, Soares, Joanna D’arc A. Herzog |
| Publisher | Universidade Federal de Goiás, Programa de Pós-graduação em Medicina Tropical e Saúde Publica (IPTSP), UFG, Brasil, Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública - IPTSP (RG) |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFG, instname:Universidade Federal de Goiás, instacron:UFG |
| Rights | http://creativecommons.org/licenses/by-nc-nd/4.0/, info:eu-repo/semantics/openAccess |
| Relation | 6085308344741430434, 600, 600, 600, -7769011444564556288, -4544576747271574306 |
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