No presente trabalho verificamos o papel dos Leucotrienos na modulação da resposta imune durante a fase aguda da infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi, usando como modelo camundongos deficientes da enzima 5-lipoxigenase (5-LOko). Os nossos dados demonstram que camundongos infectados pelo T. cruzi produzem metabólitos do ácido aracdônico como PGE2, LTB4 e LTC4. Comparados aos animais controles, os animais 5-LOko apresenta parasitemia mais tardia e menor, tem menor parasitismo tissular, menor infiltrado de células inflamatórias no coração e musculatura esquelética e apresenta menor taxa de mortalidade durante a fase aguda, indicando que animais deficientes de leucotrienos são mais resistentes a infecção pelo parasito. Animais 5-LOko está relacionado com a manutenção de números elevados de células F4/80+ e redução de células CD11b+ durante a infecção e menor número de células T ativadas expressando os marcadores CD4+CD69+, CD4+CD25+, CD4+CD44+ e CD8+CD69+, números inalterados de células T regulatórias CD4+CD25+GITR+ e menor produção de anticorpos parasito-específicos do isotipo IgG2a. O controle eficiente de parasitas por animais 5-LOko está associado ao aumento de células Gr-1+ e CD11c+GR-1+, produção aumentada IL-12, IFN-g, e produzirem menos PGE2, IL-10, ao contrario, animais controles, incapazes de controlar parasitas circulantes, produzem mais PGE2 e IL-10 e menos IL-12 e IFN-g. A baixa mortalidade de animais 5-LOko correlaciona com a produção de PGE2 e IL-10, produzir muita IL-12 e menos IFN-g e NO e baixíssima parasitemia. A mortalidade maior de animais controles envolve a produção IFN-g e altos níveis de LTB4, LTC4, NO e ausência de IL-10, IL-1b, PGE2 e números elevados de parasitas circulantes. Ainda macrófagos de animais 5-LOko apresentam maior capacidade de adesão/internalização de tripomastigotas e alta atividade tripanocida por mecanismo independente da geração de NO. Estes dados em conjunto demonstram que mediadores lipídicos produzidos pela enzima 5-lipoxigenase como LTB4 e LTC4 modulam negativamente a capacidade dos camundongos para geração de uma resposta imune capaz de controlar os parasitos durante a fase aguda da infecção pelo T. cruzi. / Accumulating studies have indicated that 5-lipoxigenase (5-LO) converted lipid mediators as leukotrienes acts modulating the host immune response against infectious diseases. The precise role of leukotrienes during the protozoan infection is unknown. In this work we evaluate the role of leukotrienes during the acute phase of Trypanosoma cruzi infection using as model the 5-lypoxigenase deficient mice (5-LOko). Our results show that PGE2, LTB4 and LTC4 are produced during the Trypanosoma cruzi infection. 5-LOko infected mice are more resistant than control mice as judge by the lower parasitemia, decreased number of parasite nest and inflammatory cells in the heart and skeletal muscle and low rate of mortality. The resistance of 5-LOko mice is associated with the increased capacity of spleen cells to produce cytokines as IL-12 and IFN-g; sustained capacity to produce detectable levels of IL-10 and PGEe and low NO serum levels than control mice. In contrast, the wild type mice are extremely susceptible and are unable to control parasites efficiently. The susceptibility is associated with increased levels of IL-10 and PGE2 and low IL-12 and IFN-g production. The high mortality rate in wild type mice is related with high LTB4, LTC4 and NO levels and bias to produce only type 1 cytokines. Also we shown that resistant 5-LOko mice present increased number of spleen cells expressing GR-1+, GR-1+CD11c+, F4/80+ and lower numbers o spleen cells expressing CD4+CD69+, CD4+CD25+, CD4+CD44+, CD8+CD69+ and CD11b+ and low serum levels of parasite-specific IgG2a than wild type mice and do not present alteration in TREG expressing CD4+CD25+GITR+. Importantly, IFN-g and- LPS activated macrophage from 5-LOko mice but not from wild type mice, present high capacity to recognize typomastigotes, internalize them and strong capacity to kill intracellular parasite as NO independent pathway. The results implicate that high levels leukotrienes, NO and pure type 1 cytokines production is associated to susceptibility to parasite. In contrast, leukotrienes deficiency led to an balanced immune response with relative high levels of type 1 cytokines and relative low levels of NO, type 2 cytokines and PGE2 that efficiently control the parasites. Also indicate that 5-lipoxigenase converted lipid mediators contribute negatively to generation of an effective immune response during the acute phase of T. cruzi infection.

No presente trabalho verificamos o papel dos Leucotrienos na modulação da resposta imune durante a fase aguda da infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi, usando como modelo camundongos deficientes da enzima 5-lipoxigenase (5-LOko). Os nossos dados demonstram que camundongos infectados pelo T. cruzi produzem metabólitos do ácido aracdônico como PGE2, LTB4 e LTC4. Comparados aos animais controles, os animais 5-LOko apresenta parasitemia mais tardia e menor, tem menor parasitismo tissular, menor infiltrado de células inflamatórias no coração e musculatura esquelética e apresenta menor taxa de mortalidade durante a fase aguda, indicando que animais deficientes de leucotrienos são mais resistentes a infecção pelo parasito. Animais 5-LOko está relacionado com a manutenção de números elevados de células F4/80+ e redução de células CD11b+ durante a infecção e menor número de células T ativadas expressando os marcadores CD4+CD69+, CD4+CD25+, CD4+CD44+ e CD8+CD69+, números inalterados de células T regulatórias CD4+CD25+GITR+ e menor produção de anticorpos parasito-específicos do isotipo IgG2a. O controle eficiente de parasitas por animais 5-LOko está associado ao aumento de células Gr-1+ e CD11c+GR-1+, produção aumentada IL-12, IFN-g, e produzirem menos PGE2, IL-10, ao contrario, animais controles, incapazes de controlar parasitas circulantes, produzem mais PGE2 e IL-10 e menos IL-12 e IFN-g. A baixa mortalidade de animais 5-LOko correlaciona com a produção de PGE2 e IL-10, produzir muita IL-12 e menos IFN-g e NO e baixíssima parasitemia. A mortalidade maior de animais controles envolve a produção IFN-g e altos níveis de LTB4, LTC4, NO e ausência de IL-10, IL-1b, PGE2 e números elevados de parasitas circulantes. Ainda macrófagos de animais 5-LOko apresentam maior capacidade de adesão/internalização de tripomastigotas e alta atividade tripanocida por mecanismo independente da geração de NO. Estes dados em conjunto demonstram que mediadores lipídicos produzidos pela enzima 5-lipoxigenase como LTB4 e LTC4 modulam negativamente a capacidade dos camundongos para geração de uma resposta imune capaz de controlar os parasitos durante a fase aguda da infecção pelo T. cruzi. / Accumulating studies have indicated that 5-lipoxigenase (5-LO) converted lipid mediators as leukotrienes acts modulating the host immune response against infectious diseases. The precise role of leukotrienes during the protozoan infection is unknown. In this work we evaluate the role of leukotrienes during the acute phase of Trypanosoma cruzi infection using as model the 5-lypoxigenase deficient mice (5-LOko). Our results show that PGE2, LTB4 and LTC4 are produced during the Trypanosoma cruzi infection. 5-LOko infected mice are more resistant than control mice as judge by the lower parasitemia, decreased number of parasite nest and inflammatory cells in the heart and skeletal muscle and low rate of mortality. The resistance of 5-LOko mice is associated with the increased capacity of spleen cells to produce cytokines as IL-12 and IFN-g; sustained capacity to produce detectable levels of IL-10 and PGEe and low NO serum levels than control mice. In contrast, the wild type mice are extremely susceptible and are unable to control parasites efficiently. The susceptibility is associated with increased levels of IL-10 and PGE2 and low IL-12 and IFN-g production. The high mortality rate in wild type mice is related with high LTB4, LTC4 and NO levels and bias to produce only type 1 cytokines. Also we shown that resistant 5-LOko mice present increased number of spleen cells expressing GR-1+, GR-1+CD11c+, F4/80+ and lower numbers o spleen cells expressing CD4+CD69+, CD4+CD25+, CD4+CD44+, CD8+CD69+ and CD11b+ and low serum levels of parasite-specific IgG2a than wild type mice and do not present alteration in TREG expressing CD4+CD25+GITR+. Importantly, IFN-g and- LPS activated macrophage from 5-LOko mice but not from wild type mice, present high capacity to recognize typomastigotes, internalize them and strong capacity to kill intracellular parasite as NO independent pathway. The results implicate that high levels leukotrienes, NO and pure type 1 cytokines production is associated to susceptibility to parasite. In contrast, leukotrienes deficiency led to an balanced immune response with relative high levels of type 1 cytokines and relative low levels of NO, type 2 cytokines and PGE2 that efficiently control the parasites. Also indicate that 5-lipoxigenase converted lipid mediators contribute negatively to generation of an effective immune response during the acute phase of T. cruzi infection.

Submitted by Tatiana Oliveira (tsilva@icict.fiocruz.br) on 2012-06-02T21:21:04Z No. of bitstreams: 1 daniele_p_castro_ioc_bp_0003_2009.pdf: 3267511 bytes, checksum: 7b658c7e6da7e158039b1155918729e9 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-06-02T21:21:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 daniele_p_castro_ioc_bp_0003_2009.pdf: 3267511 bytes, checksum: 7b658c7e6da7e158039b1155918729e9 (MD5) Previous issue date: 2009 / Fundação Oswaldo Cruz.Instituto Oswaldo Cruz. Rio de janeiro, RJ, Brasil / Nesta tese, foram investigados fatores que interferem no desenvolvimento dos parasitas, Trypanosoma cruzi e T. rangeli, no inseto-vetor, Rhodnius prolixus, com a administração de substâncias extraídas de Physalis angulata, fisalinas, bem como fatores relacionados a microbiota bacteriana intestinal do inseto, como Serratia marcescens. As fisalinas B, D, F e G administradas junto ao sangue alimentar não alteraram a fisiologia de ninfas de 5° estádio de R. prolixus, entretanto quando inoculados com T. rangeli ou Enterobacter cloacae b12 causaram alta mortalidade. Nos insetos tratados com fisalina B e infectados com parasita observou-se diminuição na formação de microagregados de hemócitos e produção de óxido nítrico. As fisalinas B e F reduziram a atividade de lisozima e a fisalina D reduziu a atividade antibacteriana, ambas de insetos inoculados com bactéria. Insetos tratados com as fisalinas B, D, F e G exibiram reduç§es significativas na atividade fagocitária. O tratamento dos insetos com as fisalinas B, F e G e inoculação de bactéria ocasionou menor contagem na formação de microagregados de hemócitos e o tratamento com as fisalinas B e F menor n·mero de hemócitos circulantes na hemolinfa. As atividades de fagocitose e microagregação de hemócitos inibidas pelo tratamento oral com fisalina B foram revertidas pela inoculação de ácido. O tratamento dos insetos com fisalina B não alterou a atividade da PLA2, porém aumentou a atividade de PAF-AH. Noutro enfoque da interação inseto-parasita, foram estudados os efeitos citotóxicos da S. marcescens. Ensaios in vitro, de incubação da bactéria com T. cruzi ou T. rangeli juntamente com o carboidrato D-manose (0,2M) resultaram na proteção dos parasitas da adesão e da lise de S. marcescens (variantes SM365 e RPH) numa relação dose dependente. Entretanto, a D-manose não interferiu na atividade hemolítica das variantes SM365 e RPH de S. marcescens. Enquanto com estas variantes a adesão das bactérias ao parasita ocorria em apenas alguns segundos, a variante DB11 não aderiu e não lisou o parasita. A adesão bacteriana é densa e compacta e ocorre por finos filamentos que com o tempo se desenvolve formando biofilme em volta da superfície do parasita lisado. Portanto, concluímos que dentre os fatores que interferem na interação entre inseto e T. cruzi e T. rangeli estudados, podemos citar as fisalinas e S. marcescens por suas atividades imunosupressoras e lítica contra os parasitas, respectivamente. Enquanto a fisalina B atua diminuindo os níveis de análogo de PAF (iPAF) na hemolinfa e elevando os níveis de PAF-AH, com ação inibitória sobre o sistema imune de R. prolixus, a bactéria S. marcescens lisa parasitas resultando em formação de biofilme, os quais regulam, direta ou indiretamente, o desenvolvimento do parasita no inseto vetor / In this thesis, we investigated factors affecting the development of the parasite, Trypanosoma cruzi and T. rangeli in the insect vector, Rhodnius prolixus, with the administration of substances extracted from Physalis angulata, physalins as well as factors related to intestinal bacterial microbiota of the insect, such as Serratia marcescens. Physalins B, D, F and G given by the blood feeding did not alter the physiology of fifth instar nymphs of R. prolixus, however, when inoculated with T. rangeli or Enterobacter cloacae b12 caused high mortality. In insects treated with physalin B and infected with parasites observed decrease in the formation of microaggregates of hemocytes and production of nitric oxide. Physalins B and F decreased the activity of lysozyme and physalin D reduced the antibacterial activity of both insects inoculated with bacteria. Insects treated with physalins B, D, F and G § s exhibited significant reduction in phagocytic activity. Treatment of insects with physalins B, F and G and inoculation caused lower counts of bacteria in the formation of hemocyte microaggregates and treatment with physalins B and F minor · n number of circulating hemocytes in the hemolymph. The activities of hemocyte phagocytosis and microaggregation inhibited by treatment with oral physalin B were reversed by the injection of acid Treatment of insects with physalin B did not affect PLA2 activity, but increased the activity of PAF-AH. In another approach to insect-parasite interaction, we studied the cytotoxic effects of S. marcescens. In vitro assays, incubation of bacteria with T. or T. cruzi rangeli together with the carbohydrate D-mannose (0.2 M) resulted in protection of parasites adhesion and lysis of S. marcescens (SM365 and RPH variants) in a dose dependent. However, the D-mannose did not affect the hemolytic activity of SM365 and RPH variants of S. marcescens. While these variants with bacteria from adhering to the parasite occurred in only a few seconds, the variant has not adhered DB11 and not lysed the parasite. The bacterial adhesion is dense and compact and thin filaments occurs with time forming biofilm grows around the surface of the parasite lysate. Therefore, we conclude that among the factors that influence the interaction between insect and T. and T. cruzi rangeli studied, we can cite physalins and S. marcescens for their immunosuppressive and lytic activities against the parasites, respectively. While physalin B acts by decreasing the levels of PAF analogue (IPAF) in the hemolymph and raising levels of PAF-AH, with an inhibitory effect on the immune system of R. prolixus bacteria S. marcescens smooth parasites resulting in biofilm formation, which regulate, directly or indirectly, the development of the parasite in the insect vector.Desfazer edições

Submitted by Marlene Santos (marlene.bc.ufg@gmail.com) on 2014-10-02T20:53:47Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Sueli Meira da Silva Dias - 2006.pdf: 822890 bytes, checksum: 1982b1c5fbad1e0a077fcf7876d69f21 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Jaqueline Silva (jtas29@gmail.com) on 2014-10-02T21:07:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Sueli Meira da Silva Dias - 2006.pdf: 822890 bytes, checksum: 1982b1c5fbad1e0a077fcf7876d69f21 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-10-02T21:07:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Sueli Meira da Silva Dias - 2006.pdf: 822890 bytes, checksum: 1982b1c5fbad1e0a077fcf7876d69f21 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2006-06-28 / Thirty cronic chagasic pacients were submitted to specific treatment against Chaga’s disease. The drug of choice was Benznidazole. After treatment laboratorial exams such as parasitological and imunological aiming terapheutic validation were performed. The parasitological analysis is represented by post-treatment hemoculture of 30 cronic chagasic pacients and demonstrated the presence of promastigotes and epimastigotes in 10% (3/30) of pacients, probably characterizing a mixed infection. These hemocultures were named 371, 437 and 438. From these three pacients two were from Goias (GO) and one from Minas Gerais (MG) which are endemic regions to Chaga’s disease as well as to Leishmaniasis which justified the study of this probable co-infection. The work was developed in two phases: in the first phase it was made the biological experimental study of the mixed sotck and in the second phase it was made the confirmation of the Leishmania spp gender through PCR technique. In the experimental biological study the model used was Balb/c isogenic mice and we made an intraperitoneal inoculation of the stocks and we analysed the following parameters: parasitism, hemoculture, sorology by IFI and histopathology. The parasitism observation occured between 48 hours periods through 90 days, and the hemoculture observations occured weekly through 120 days and resulted positive only in mice innoculated with stock 371. The sorology showed anti-T. cruzi antibodies titers in mice innoculated with stocks 371 and 437. The histopathology revealed the presence of amastigotes in tissues cardiac slides from mice innoculated with stock 438, showing that only the epimastigotes forms are present in the mixed stocks and are viable to infect the experimental model used in this work. The confirmation of the Leishmania subgenus envolved in this co-infection was possible through molecular biology techniques. In PCRRFLP, after digestion of PCR products by Hae III restriction enzymes which has specific clivage sites for L. (Viannia) subgender. The samples represented by 371, 437 and 438 stocks and the controls of L. (L.) amazonensis and L. (L.) chagasi did not suffer clivage of its amplified segments in PCR. Only the control constituted by L. (V.) braziliensis suffered clivage resulting in fragments of aproximately 40 and 80 bp confirming undoubtfully that the samples represented by the mixed stocks 371, 437 and 438 isolated from cronic chagasic pacients cantained L. (Leishmania) spp. / Trinta pacientes chagásicos crônicos foram submetidos ao tratamento específico para a doença de Chagas. A droga utilizada foi o Benznidazol. Após o tratamento foram realizados exames laboratoriais compreendendo análises parasitológicas e imunológicas, com a finalidade de validação terapêutica. A análise parasitológica representada pela hemocultura evidenciou a presença concomitante de promastigotas e epimastigotas em 10% (3/30) delas, caracterizando uma provável infecção mista. Essas hemoculturas foram denominadas 371, 437 e 438. Dos três pacientes, dois são procedentes do estado de Goiás (GO) e um do estado de Minas Gerais (MG), regiões endêmicas tanto para a doença de Chagas como para a leishmaniose, o que justificou o estudo desta provável co-infecção. O presente trabalho foi desenvolvido em duas etapas. Na primeira etapa, foi realizado o estudo biológico experimental dos estoques mistos e na segunda, a confirmação do gênero Leishmania spp nos estoques mistos, através da técnica de PCR. No estudo biológico experimental, foram utilizados como modelos camundongos Balb/c isogênicos, realizando-se inoculação intraperitoneal dos estoques. Posteriormente foi analisada a parasitemia, hemocultura, sorologia por IFI e histopatologia. A observação da parasitemia ocorreu a cada 48 horas pelo período de 90 dias, e a hemocultura foi analisada semanalmente por 120 dias, resultando positiva apenas nos camundongos inoculados com o estoque 371. A IFI detectou apenas anticorpos anti-T. cruzi, nos camundongos inoculados com os estoques 371 e 437. A análise histopatológica revelou presença de ninhos de amastigotas nos cortes cardíacos dos camundongos inoculados com o estoque 437, demonstrando no conjunto dessas análises, que apenas as formas epimastigotas presentes nos estoques mistos se mostraram viáveis em infectar o modelo experimental utilizado. A presença de protozoários do gênero Leishmania nos estoques foi confirmada mediante realização de PCR. Na PCR-RFLP, o produto da amplificação foi tratado com a enzima de restrição Hae III que tem sítios específicos de clivagem para o subgênero L. (Viannia). As amostras representadas pelos estoques 371, 437 e 438 e os controles de L. (L.) amazonensis e L. (L.) chagasi não sofreram clivagem de seus segmentos amplificados na PCR. Apenas o controle constituído de L. (V.) braziliensis sofreu clivagem, resultando fragmentos de aproximadamente 40 e 80 pb, confirmando inequivocamente que as amostras representadas pelos estoques mistos 371, 437 e 438 isoladas de pacientes chagásicos crônicos realmente continham L. (Leishmania) spp.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-10-19T13:04:45Z No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarlotaJosefoviczBelisário.pdf: 4313033 bytes, checksum: 60ab172cbc6f3043ea324ea72968567a (MD5) / Approved for entry into archive by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2016-10-19T13:13:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarlotaJosefoviczBelisário.pdf: 4313033 bytes, checksum: 60ab172cbc6f3043ea324ea72968567a (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-19T13:13:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_BCM_CarlotaJosefoviczBelisário.pdf: 4313033 bytes, checksum: 60ab172cbc6f3043ea324ea72968567a (MD5) Previous issue date: 2012 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas René Rachou. Belo Horizonte, MG, Brasil / A doença de Chagas (DC) é uma enfermidade causada pelo protozoário Trypanosoma cruzi, cuja principal forma de transmissão é através das fezes de triatomíneos infectados. O Panstrongylus megistus atualmente é o principal vetor do Brasil, sendo responsável pela transmissão da DC na região da Serra do Cipó, MG, na década de 80. O P. megistus possui alta capacidade de reinfestação das casas, exigindo permanente vigilância contra a instalação de novos focos. O peridomicílio apresenta grande importância para a manutenção de triatomíneos e do T. cruzi circulando entre barbeiros e os animais que o frequentam. O objetivo do trabalho foi avaliar o cenário ecoepidemiológico da doença de Chagas no entorno do Parque Nacional da Serra do Cipó (ParnaCipó), visando subsidiar o programa de controle do P. megistus. O estudo se realizou nos municípios de Jaboticatubas e Santana do Riacho que, juntamente com Morro do Pilar e Itambé do Mato Dentro, integram o ParnaCipó. O perfil de infestação pelo P. megistus foi determinado através de captura de triatomíneos nas unidades domiciliares (setembro de 2007 a setembro de 2010) e capturas silvestres, que também incluiram avaliação da infecção em marsupiais e roedores. Cães levados à campanha de vacinação antirrábica de Jaboticatubas foram examinados a fim de determinar sua importância epidemiológica na região. Exemplares de P. megistus capturados foram utilizados para análise populacional pela morfometria geométrica. Os exemplares provenientes de Jaboticatubas foram ainda analisados por RAPD para estudo populacional. As cepas isoladas dos reservatórios e vetores foram caracterizadas como pertencentes ao grupo T. cruzi I ou T. cruzi II utilizando‐se DNA satélite como alvo. A maioria dos exemplares P. megistus foi capturada em galinheiros; no intradomicílio o ecótopo preferencial foi o quarto. Foram realizadas pesquisas em 15 áreas silvestres com a captura de 105 mamíferos, com taxa de infecção de 6,7%; todas as cepas foram caracterizadas como T. cruzi I. A prevalência em cães foi de 2,4%. Em palmeiras foram capturados Rhodnius neglectus, P. megistus e Triatoma sordida. Dentre as cepas isoladas de triatomíneos domiciliados e silvestres, apenas uma cepa proveniente do ambiente domiciliar foi caracterizada como T. cruzi II, as demais, T. cruzi I. A morfometria diferenciou a população silvestre das domiciliares. A RAPD demonstrou grande variabilidade dos P. megistus de Jaboticatubas, entretanto, sem diferenciação populacional. Frente aos resultados, podemos concluir que a população rural dos dois municípios permanece sob o risco de infecção pelo T. cruzi, uma vez que são encontrados vetores e reservatórios infectados no ambiente artificial e natural, e podem infestar as habitações a partir de diversos focos, domiciliares ou silvestres. / Chagas disease (CD) is caused by the protozoan Trypanosoma cruzi, whose main mode of transmission is through the feces of infected bugs. Panstrongylus megistus is currently the main vector in Brazil, being responsible for the CD transmition in Serra do Cipo, MG, in the 80s. P. megistus has high capacity to reinfestate the houses, requiring constant vigilance against the installation of new focus. The peridomicile has great importance for the maintenance of triatomine bugs and the T. cruzi circulating among triatomines and the animals that occure in this environment. The objective of this study was to evaluate the ecoepidemiologic scenario of Chagas disease in the surrounding of the National Park of Serra do Cipo (ParnaCipó), aiming to support the control program of the P. megistus. The study was conducted in the municipalities of Jaboticatubas and Santana do Riacho, which together with Morro do Pilar and Itambé do Mato Dentro, integrate the ParnaCipó. P. megistus infestation profile was determined by capturing triatomines in the households (September 2007 to September 2010) and in wild captures, which were also performed to evaluate the rodents and marsupials infection. Dogs carried to the anti‐rabies vaccination campaign of the Jaboticatubas were examined to determine their prevalence in the region. The P. megistus exemplaries captured were used to the geometric morphometry analisis. Specimens from Jaboticatubas were further analyzed by RAPD for population study. The strains isolated from reservoirs and vectors were characterized as T. cruzi I or T. cruzi II using satellite DNA as target. Most P. megistus was captured in chicken coops; inside the houses the preferred ecotope was the bedroom. Were investigated 15 wild areas with the capture of 105 mammals, with infection rates of 6.7%, all strains were characterized as T. cruzi I. The prevalence in dogs was 2.4%. In the palm trees examined were captured Rhodnius neglectus, P. megistus and Triatoma sordida. Among the strains isolated from the domiciled and wild triatomines, only one from the intradomicile was characterized as T. cruzi II, the others were T. cruzi I. The morphometric analysis differentiated the wild from the domestics populations. The RAPD showed great variability of P. megistus in Jaboticatubas, however, without population differentiation. Based on the results, we conclude that the rural population of both municipalities remains at risk of infection by T. cruzi, since the infected vectors in artificial and natural environment follow to be found, and can infest the dwellings from various domestic or wild focus.