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Congelamento de sêmen suíno: estudo de crioprotetores intra e extracelulares, metodologias de congelamento e marcador molecular de congelabilidade / Freezing of boar semen: study of penetrating and nonpenetrating cryoprotectants, freezing methods and freezability molecular marker

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Previous issue date: 2007-02-27 / Although boar semen is available in the frozen format since 1975, its use has been
restricted to very specific situations for many reasons: it requires spermatozoa
concentration per dose twice to three times higher than that for cooled semen; semen
processing is labor intensive; and farrowing rate and litter size are reduced. Thus,
most of the artificial inseminations in swine are performed at the day of semen
collection or at most at the following day, using liquid semen conditioned between 15
and 18 ºC. The aims of this thesis were: to evaluate distinct extenders for cooling
semen, methods for freezing, centrifugation temperatures, the use of amides as
penetrating cryoprotectants and of low density lipoprotein as nonpenetrating
cryoprotectants, and the presence of specific protein factors in seminal plasma in the
results that could be associated with boar semen freezability. Five experiments have
been executed: four with evaluations in vitro (motility and cell membrane integrity);
and one with fertilization in vivo. The control treatment was the freezing with glycerol
at 3% concentration. The semen processing method that provide more efficient
results consisted of semen cooling during 120 min up to a centrifugation temperature
of 15 °C. We also identified a 26 kDa factor in the seminal plasma that is associated
with maintenance of the integrity of the sperm cell membrane post-thawing.
Additionally, parameters of semen quality in vitro with the use of dimetilacetamide at
5% were better than those observed with the most used penetrating cryoprotectant
(glycerol 3%) as control, although no difference between those cryoprotectants was
observed in vivo. This study demonstrated the association of components in the
seminal plasma with the sperm quality, and presenting an alternative protocol of
semen freezing-thawed boar semen based in the use of dimetilacetamide at 5%. / Apesar do sêmen suíno congelado estar disponível comercialmente deste 1975, o
seu uso tem ocorrido somente em ocasiões específicas, pois, em relação ao uso de
sêmen refrigerado, requer duas a três vezes maior número de espermatozóides por
dose, o processamento do sêmen é trabalhoso, o tamanho da leitegada é diminuído
em um a três leitões por parto e a taxa de parição é menor. Dessa forma, a grande
maioria das inseminações artificiais nessa espécie utiliza sêmen diluído e
acondicionado no estado líquido entre 15 e 18 ºC. Os objetivos desta tese foram:
avaliar diferentes diluidores de resfriamento, metodologias de congelamento,
temperaturas de centrifugação, uso de crioprotetores intracelulares a base de
amidas e extracelulares baseados em lipoproteína de baixa densidade, além do
estudo de fatores protéicos presentes no plasma seminal nos resultados de
avaliações in vitro e in vivo de sêmen suíno congelado-descongelado. Foram
executados cinco experimentos com avaliações da qualidade do sêmen congeladodescongelado,
quatro experimentos com avaliações in vitro (motilidade e integridade
de membrana) e um experimento com fertilização in vivo. O tratamento utilizado
como controle foi o congelamento com glicerol na concentração de 3%. A melhor
curva de resfriamento após a coleta até 15 °C, foi atingida com o tempo de 120 min.
Foi identificado um fator de 26 kDa no plasma seminal, cuja ausência proporcionou
melhores resultados de integridade de membrana plasmática após o
descongelamento. O uso do crioprotetor intracelular dimetilacetamida na
concentração de 5%, proporcionou nas avaliações in vitro, resultados superiores ao
tratamento controle (glicerol 3%), não diferindo na avaliação in vivo. O presente
estudo demonstrou a relação de componentes do plasma seminal com a qualidade
espermática, além de apresentar um novo protocolo de congelamentodescongelamento
de sêmen suíno baseado no uso de dimetilacetamida 5%.

Identiferoai:union.ndltd.org:IBICT/oai:repositorio.ufpel.edu.br:123456789/1229
Date27 February 2007
CreatorsBianchi, Ivan
ContributorsCPF:70417121091, http://buscatextual.cnpq.br/buscatextual/visualizacv.do?id=K4796653E9, Deschamps, João Carlos, Lucia Junior, Thomaz, Corrêa, Márcio Nunes
PublisherUniversidade Federal de Pelotas, Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia, UFPel, BR, Biotecnologia
Source SetsIBICT Brazilian ETDs
LanguagePortuguese
Detected LanguagePortuguese
Typeinfo:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis
Formatapplication/pdf
Sourcereponame:Repositório Institucional da UFPEL, instname:Universidade Federal de Pelotas, instacron:UFPEL
Rightsinfo:eu-repo/semantics/openAccess

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