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Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz, Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / As interações entre flebótomo, parasita e hospedeiro desempenham um papel importante na
transmissão da leishmaniose. As moléculas provenientes do vetor são relevantes para estas
interações e incluem as proteínas da saliva e do intestino médio. Nos flebótomos, as
Leishmanias passam por um ciclo de desenvolvimento complexo dentro do intestino médio
sob a proteção da matriz peritrófica, necessário para a geração de formas metacíclicas
infectantes. As Leishmanias são transmitidas pelos flebótomos que co-injetam parasitas
juntamente com a saliva, na derme do hospedeiro. Estudos anteriores demonstraram que a
imunização de cães com duas proteínas salivares (LJM17 ou LJL143) de L. longipalpis,
resultaram em uma imunidade mediada por células Th1 sistêmica e local afetando a
sobrevivência do parasita in vitro. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunidade
conferida pela imunização de cães com DNA e rCanarypoxvirus expressando o gene que
codifica para as proteínas salivares de L. longipalpis (LJM17 e/ou LJL143). A imunização
com ambas LJL143 e/ou LJM17 induziu uma forte resposta imune humoral. A produção
específica do IFN-γ foi observada apenas nas CMSP dos grupos imunizados estimuladas com
a proteína. Trinta dias após a última imunização, os cães foram desafiados por via
intradérmica com 107 de L. infantum na presença de saliva de L. longipalpis, e a infecção foi
detectada no segundo mês após o desafio em todos os grupos. Os cães imunizados com a
LJM17 apresentaram maior produção de IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-7, IL-15, IL-18, TNF-α, IP-10
e GM-CSF durante a infecção quando comparados com os controles, indicando que o efeito
da imunização induzida por LJM17 persistiu mesmo após o desafio. Adicionalmente, diversos
estudos realizados no controle da malária, têm demonstrado o uso de antígenos provenientes
do vetor para o desenvolvimento de vacinas bloqueadoras de transmissão. Esta estratégia
altruísta de imunização visa criar anticorpos que interfiram no desenvolvimento do parasita no
interior do vetor. Assim, na segunda etapa do nosso trabalho, foi testada em cães uma
estratégia de imunização utilizando uma proteína extraída do intestino médio do L.
longipalpis (Luloper1) para induzir a produção de anticorpos em cães saudáveis e infectados e
a interrupção da transmissão no flebótomo. Dessa forma, a imunização de cães saudáveis não
infectados ou infectados assintomáticos induziu uma potente produção de anticorpos, porém
nenhum efeito de bloqueio de transmissão foi detectado em flebótomos alimentados com o
sangue desses animais contendo promastigotas de L. infantum. / Sand fly, parasite, host interactions play an important role in the transmission of
leishmaniasis. Vector molecules are relevant for such interactions and include midgut and
salivary proteins. In vector sand fly species, Leishmania parasites undergo a complex
developmental cycle within the midgut, protected by the peritrophic matrix that is necessary
for generation of infectious metacyclics. Leishmania parasites are transmitted by sand flies
that co-inject parasites and saliva, in the host’s skin. Previous studies showed immunization
of dogs with two proteins (LJM17 or LJL143) from Lutzomyia longipalpis, resulted in a
systemic and local Th1 cell-mediated immunity affecting parasite survival in vitro. In this
work we evaluated the immunity conferredbyimmunization of dogs with DNA and
recombinant Canarypoxvírusexpressing the gene encoding the salivary ofL.longipalpis
(LJM17and/orLJL143). Immunization with both LJL143 and LJM17 induced a strong
specific humoral response. Specific production of IFN-γ was observed only in protein
stimulated PBMC immunized groups. Thirty days after last immunization, dogs were
challenged intradermally with 107L. infantum in the presence of L. longipalpis saliva and
infection was detected in the second month after challenge in all the groups. It was observed
that dogs immunized with LJM17 presented higher IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-7, IL-15, IL-18,
TNF-α, IP-10 and GM-CSF production during infection when compared with controls,
indicating that the effect of immunization induced by LJM17 persisted even after challenge.
Adittionally, previous studies, mostly with malaria control, have shown the use of several
vector antigens for the development of transmission blocking vaccines. This altruist strategy
of immunization aims to raise antibodies that could affect the development of the parasite
inside the vector. Thus, in the second stage of our work we tested in dogs an immunization
using a protein extracted from L. longipalpis midgut (Luloper1) to evaluate antibodies
production in healthy and infected dogs and the interruption of transmission in the sand fly.
Immunization of either healthy non infected or asymptomatic infected dogs induced a potent
antibodies production, but no blocking transmission effect was detect in sand flies fed with
blood of these animals containing L. infantum promastigotes
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.arca.fiocruz.br:icict/12697 |
| Date | January 2015 |
| Creators | Abbehusen, Melissa Moura Costa |
| Contributors | Reis, Alexandre Barbosa, Fujiwara, Ricardo Toshio, Laranjeira, Daniela Farias, Fraga, Deborah Bittencourt Mothé, Brodskyn, Cláudia Ida, Brodskyn, Cláudia Ida |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | Portuguese |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/doctoralThesis |
| Source | reponame:Repositório Institucional da FIOCRUZ, instname:Fundação Oswaldo Cruz, instacron:FIOCRUZ |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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