COUTO, José Luciano Pimenta. Estudo de parâmetros salivares em portadores de picnodisostose. 2010. 96 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2010. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-12-14T12:01:20Z No. of bitstreams: 1 2010_dis_jlpcouto.pdf: 2128077 bytes, checksum: 41ef6743abecdb86af2057605a3347ab (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2012-02-01T16:01:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_dis_jlpcouto.pdf: 2128077 bytes, checksum: 41ef6743abecdb86af2057605a3347ab (MD5) / Made available in DSpace on 2012-02-01T16:01:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_dis_jlpcouto.pdf: 2128077 bytes, checksum: 41ef6743abecdb86af2057605a3347ab (MD5) Previous issue date: 2010 / Picnodysostosis (PKND) is a skeletal displasia characterized by short stature, osteosclerosis, acrosteolisis, craniofacial deformities and bone fragility. Approximately 200 cases have been described among different ethnic groups, with an estimated incidence of 1.7: 1.000.000 live births. The use of saliva as a diagnostic tool has advanced exponentially within recent years. Unbalance in the amount and composition of saliva may generate oral diseases such as dental caries and periodontitis, and may also indicate important systemic alterations. This study has aimed to investigate the parameters of human whole saliva in patients with PKND. Our study sample consisted of 4 individuals with PKND (experimental group) and 4 healthy individuals without PKND (control group). Salivary flow rate, pH and protein profile were evaluated in this population. Non stimulated whole saliva was collected and centrifuged. The supernatant was separated and lyophilized and stored at -20°C for posterior total protein and bidimensional electroforetic analysis. Statistically significant differences were observed between groups (p<0,05) for the analyzed salivary parameters. When compared to the control group, individuals with PKND presented reduced salivary flow rate, lower pH values, reduced total protein concentration, and protein bands with differentiated expression. The results of this study suggest the existence of a differentiated pattern of salivary composition between groups. / A picnodisostose é uma displasia esquelética caracterizada por baixa estatura, osteoclerose, acrosteólise, deformidades crânio-faciais e fragilidade óssea. Aproximadamente 200 casos foram descritos em diferentes grupos étnicos, estimando-se uma incidência de 1,7: 1.000.0000 de nascidos. O uso da saliva como um método de diagnóstico avançou exponencialmente nos últimos anos. Desequilíbrios na quantidade e composição da saliva podem gerar afecções bucais tais como cáries e doença periodontal, além de ser indicativo de alteração sistêmica importante. Esse trabalho objetivou estudar parâmetros de saliva total humana em pacientes portadores de picnodisostose (PYCN). A amostra consistiu em 04 indivíduos com PYCN (grupo experimental) e 04 indivíduos não-sindrômicos (grupo controle), tendo sido avaliado fluxo salivar, pH e perfil protéico. Saliva total não estimulada foi coletada e centrifugada; o sobrenadante foi retido, liofilizado, armazenado a -20°C e analisado para contagem de proteínas totais e eletroforese bidimensional. Foi possível detectar diferenças estatisticamente significativas entre os grupos (p<0,05) para os parâmetros salivares analisados. Quando comparados com o grupo controle, portadores de PYCN apresentaram redução no fluxo salivar; pH com valores aumentados; redução na concentração total de proteínas e bandas protéicas com expressão diferenciadas. Os resultados desse estudo sugerem haver padrões diferenciados na composição salivar entre os grupos avaliados.

AMARAL, Érico Sucupira. Ánalise do perfil de proteínas salivares de crianças com sobrepeso e obesidade do instituto da primeira infância – Iprede no estado Ceará. 2015. 72 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-10-20T14:09:35Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_ésamaral.pdf: 1288817 bytes, checksum: 24ac6c815487ff8225a8b101493509b6 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-10-20T15:54:54Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_ésamaral.pdf: 1288817 bytes, checksum: 24ac6c815487ff8225a8b101493509b6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-20T15:54:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_ésamaral.pdf: 1288817 bytes, checksum: 24ac6c815487ff8225a8b101493509b6 (MD5) Previous issue date: 2015 / Obesity is a recurring theme in today's scientific literature. This is due to the exponential increase in its prevalence in all layers of society. The popularity of this theme also made matters associat ed with it emerged and gained greater notability in healthcare publications. The use of saliva as a diagnostic method has advanced considerably in recent years. Imbalances in the quantity and quality of saliva can generate both oral diseases as being indic ative of some important systemic change. This research studies the salivary protein profile and total human saliva in patients with overweight and obesity. The sample consisted of sixty patients with obesity and overweight (experimental group) and sixty pa tients with normal weight (control group) and was rated the salivary flow, the diet diary and the protein profile. Unstimulated saliva was collected and stored at - 80 ° C. Subsequently the enzyme inhibitor was added and the samples were centrifuged at 15, 000 rpm for 15 minutes at 4 ° C and the separated supernatant to perform protein dosing. The salivary concentration of total proteins was determined by the bicinchoninic acid method using a curve of bovine serum albumin (BSA). When analyzing the unstimulat ed salivary flow was observed that the study group had a mean less than the control group, and this difference was statistically significant (p = 0.006). The control group had an average total protein concentration greater than the experimental group was s tatistically significant (p = 0.002). The results of this study suggest different patterns in salivary composition between these two groups. / A obesidade é um tema recorrente na literatura científica da atualidade. Isso se deve ao aumento exponencial de sua prevalência em todas as camadas da sociedade. A popularidade deste tema fez também com que assuntos associados a ele emergissem e ganhassem maior notabilidade em publicações da área da saúde. O uso da saliva como método diagnóstico avançou consideravelmente nos últimos anos. Desequilíbrios na quantidade e na qualidade da saliva podem tanto gerar afecções bucais quanto ser indicativo de alguma alteração sistêmica importante. Este trabalho objetivou estudar o perfil de proteínas salivar e saliva total humana em pacientes com sobrepeso e obesidade. A amostra foi constituída por sessenta pacientes com obesidade e sobrepeso (grupo experimental) e sessenta pacientes com peso adequado (grupo controle), tendo sido avaliado o fluxo salivar, o diário de dieta e o perfil proteico. Saliva total não estimulada foi coletada e armazenada a – 80°C. Posteriormente foi adicionado o inibidor enzimático e as amostras foram centrifugadas a 15.000 rpm por 15 minutos a 4°C, sendo o sobrenadante separado para realização da dosagem de proteínas. A concentração de proteínas totais salivares foi determinada pelo método do Ácido Bicinconínico, usando uma curva de albumina sérica bovina (BSA). Ao analisar o fluxo salivar não estimulado foi possível observar que o grupo de estudo apresentou média menor que o grupo controle, sendo essa diferença estatisticamente significante (p=0,006). O grupo controle apresentou uma média de concentração total de proteínas maior que o grupo experimental, sendo essa diferença estatisticamente significante (p=0,002). Os resultados deste estudo sugerem haver padrões diferenciados na composição salivar entre os grupos avaliados.

MOTA, Ana Catarina de Miranda. Análise do perfil de proteínas salivares, experiência de cárie, nível de Streptococcus mutans em população de crianças desnutridas. 143 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2008. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2011-11-11T13:42:22Z No. of bitstreams: 1 2008_dis_acmmota.pdf: 1376510 bytes, checksum: f071dbf236853a15235cb00f0fc1df0b (MD5) / Approved for entry into archive by Eliene Nascimento(elienegvn@hotmail.com) on 2011-12-05T13:16:23Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2008_dis_acmmota.pdf: 1376510 bytes, checksum: f071dbf236853a15235cb00f0fc1df0b (MD5) / Made available in DSpace on 2011-12-05T13:16:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2008_dis_acmmota.pdf: 1376510 bytes, checksum: f071dbf236853a15235cb00f0fc1df0b (MD5) Previous issue date: 2008 / The aim of the present study was to compare caries experience (dmfs), severity of early childhood caries (S-ECC), salivary mutans streptococci (MS) levels, total protein concentration (TPC) and salivary protein profi le (SPP) between nourished and malnourished children. One hundred and twenty 12-70 month-old malnourished children, with and without ECC were separated into being mildly (GI, n=31), moderately (GII, n=59) or severely (GIII, n=31) malnourished, according to WHO standards. Forty-seven nourished children (GN) were used as controls. Unstimulated whole saliva was collected from all participants, subsequently centrifuged. Supernatants were lyophilized and stored at -20o C for posterior TPC analysis by the Bradford method. Salivary protein profi le was obtained by electrophoresis in SDSpoliacrilamide gel through the Laemmli method. Stimulated whole saliva was collected and used for MS detection in MSB agar medium. MS concentration in saliva was reported in cfu/ mL. Dental examination was performed and dmfs scores and S-ECC were calculated. Age (p=0,0000), MS counts (p=0,0321) and nutritional status (p=0,0316) demonstrated positive contribution for the development of dental caries. However, gender (p=0,7094) and TPC (0,2720) did not signifi cantly contribute with caries experience. When compared to GN, children in GI (p=0,0042) and GIII (p=0,0372) presented higher risk of experiencing dental caries. In addition, no differences in SPP were observed between these groups. GIII children did not express one protein band (123,56+4,35 kDa) in the presence of dental caries. TPC was not associated with caries experience (p=0,5651), severity of ECC (p=0,6015) or MS counts (p=0,2162). Our results suggest that nutritional status increases caries risk in mildly and severely malnourished children, and salivary protein profi le differs among severely malnourished children with dental caries. / O presente estudo compara experiência (ceo-s) e severidade da cárie de primeira infância (S-CPI), níveis salivares de estreptococos do grupo mutans (EGM), concentração de proteína total salivar (CPT) e perfi l protéico salivar (PPS), entre crianças nutridas e desnutridas. Cento e vinte crianças desnutridas, com 12 e 70 meses de idade, com e sem experiência de cárie, foram divididas entre os graus de desnutrição de acordo com a OMS: leve (GI, n=31), moderado (GII, n=59) e grave (GIII, n=31). Quarenta e sete crianças nutridas (GN) participaram do experimento como controle. Saliva total não estimulada foi coletada de todos os participantes e centrifugada; o sobrenadante foi retido, liofi lizado, armazenado a -20º C e analisado para CPT pelo método de Bradford e eletroforese em gel de poliacrilamida-SDS pelo método de Laemmli. Saliva total estimulada foi coletada e utilizada para detecção de EGM no meio MSB (ufc/mL). Exame dental foi realizado e calculado o índice ceo-s e S-CPI. As variáveis idade ( p= 0,0000), logaritmo da contagem de EGM (p=0,0321) e estado nutricional (p=0,0316) apresentaram contribuição positiva para o desenvolvimento da cárie dentária. As variáveis sexo (p=0,7094) e CPT (p=0,2720), no entanto, não contribuíram de forma signifi cativa para a experiência de cárie. Quando comparadas a GN, crianças GI (p=0,0042) e GIII (p=0,0372) apresentaran maior risco à cárie. Não houve alteração do PPS das crianças dos grupos GN, GI e GII. O grupo GIII não expressou uma banda protéica (123,56+4,35 kDa) na presença da doença cárie. CPT não se associou à experiência de cárie (p=0,5651), severidade da doença (p=0,6015) ou contaminação por EGM (p=0,2162). Os resultados deste estudo sugerem que o estado nutricional aumenta o risco à cárie em crianças desnutridas leve e grave, havendo um perfi l protéico diferenciado em crianças gravemente desnutridas com experiência de cárie.

Submitted by Nuzia Santos (nuzia@cpqrr.fiocruz.br) on 2013-01-25T14:36:48Z No. of bitstreams: 1 Andrezza campos chagas.pdf: 9538726 bytes, checksum: eda677be23a8d55d8d9077d3ad01a4c8 (MD5) / Made available in DSpace on 2013-01-25T14:36:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Andrezza campos chagas.pdf: 9538726 bytes, checksum: eda677be23a8d55d8d9077d3ad01a4c8 (MD5) Previous issue date: 2010 / O simulídeo Thyrsopelma guianense é o principal vetor da oncocercose no Brasil, e pouco se conhece sobre a composição e função da saliva em simulídeos. Artrópodes hematófagos contém uma “poção mágica” para interagir com à hemostase, inflamação e imunidade de seus hospedeiros. A glândula salivar de fêmeas de T. guianense é constituída de dois lobos idênticos contendo uma glândula principal (envolvida com a alimentação com sangue) e uma acessória (envolvida com a alimentação com açúcar), a última similar à glândula de macho. A análise histoquímica demonstrou uma saliva é rica em polissacarídeos, proteínas e lipídios principalmente na glândula principal. Essa região contém cavidades secretoras elétron-densas, enquanto, o lúmen da glândula acessória é elétron-lucente. Os homogenados salivares inibiram a coagulação sanguínea, atuando em fXa mas não em trombina. Esses homogenados também apresentaram atividade enzimática de lisozima em pH 7,0. O sialotranscriptoma isolou e identificou 1.772 transcritos, classificados como secretores (S) (74,7%), celulares (C) (16,2%), produtos de função desconhecida (U) (9%) e elementos de transposição (0,1%). Esse sialotranscriptoma identificou famílias de proteínas ubíquas como antígeno-5, Yellow, domínios ML, lipocalina, lisozima, cecropina, serpina, domínios Kunitz, serino proteases, hialuronidase, apirase, glicosidases, adenosina deaminase e destabilase, além de famílias de proteínas específicas para insetos como Aegyptina e a superfamília D7/OBP. Cerca de 63,4% dos produtos secretores corresponderam a famílias de proteínas encontradas somente em Simulium, como SVEP/Marydilan, proteínas ácidas ricas em His, Sv 7,8 kDa, mucinas, tipo-colágeno, básicas 7-13 kDa, Sv 7,8 kDa, 4,8 kDa, básicas 7,4 kDa, básica 13 kDa e família 5-Cys. Várias famílias de proteínas foram deorfanizadas do sialotranscriptoma de S. nigrimanum como Sn 8-10 Cys W, ácida 28 kDa, básica 28 kD, 19 kDa, básica 8 kDa e Sn básica 4,4 kDa. Transcritos com similaridade para kunitoxina foram encontrados em T. guianense. Observamos um aumento na expressão de transcritos para a classe S e expecionalmente em SVEP, e nos subgrupos síntese de proteína e metabolismo energético da classe C, em relação a outros sialotranscriptomas de Simulium. O proteoma confirmou 28 das 32 famílias de proteínas encontradas no transcriptoma e disponibilizamos 101 sequências de proteínas de interesse para o NCBI. Essa é a primeira descrição de um sialoma (do grego Greek Sialo=saliva) de um vetor de oncocercose. Assim, nossos resultados ajudam no entendimento do papel da saliva de Simulium na transmissão de Onchocerca volvulus e para a evolução de proteínas salivares em simulídeos, além de consistir numa plataforma de novos compostos antihemostáticos e candidatos a vacina contra oncocercose. / O simulídeo Thyrsopelma guianense é o principal vetor da oncocercose no Brasil, e pouco se conhece sobre a composição e função da saliva em simulídeos. Artrópodes hematófagos contém uma “poção mágica” para interagir com à hemostase, inflamação e imunidade de seus hospedeiros. A glândula salivar de fêmeas de T. guianense é constituída de dois lobos idênticos contendo uma glândula principal (envolvida com a alimentação com sangue) e uma acessória (envolvida com a alimentação com açúcar), a última similar à glândula de macho. A análise histoquímica demonstrou uma saliva é rica em polissacarídeos, proteínas e lipídios principalmente na glândula principal. Essa região contém cavidades secretoras elétron-densas, enquanto, o lúmen da glândula acessória é elétron-lucente. Os homogenados salivares inibiram a coagulação sanguínea, atuando em fXa mas não em trombina. Esses homogenados também apresentaram atividade enzimática de lisozima em pH 7,0. O sialotranscriptoma isolou e identificou 1.772 transcritos, classificados como secretores (S) (74,7%), celulares (C) (16,2%), produtos de função desconhecida (U) (9%) e elementos de transposição (0,1%). Esse sialotranscriptoma identificou famílias de proteínas ubíquas como antígeno-5, Yellow, domínios ML, lipocalina, lisozima, cecropina, serpina, domínios Kunitz, serino proteases, hialuronidase, apirase, glicosidases, adenosina deaminase e destabilase, além de famílias de proteínas específicas para insetos como Aegyptina e a superfamília D7/OBP. Cerca de 63,4% dos produtos secretores corresponderam a famílias de proteínas encontradas somente em Simulium, como SVEP/Marydilan, proteínas ácidas ricas em His, Sv 7,8 kDa, mucinas, tipo-colágeno, básicas 7-13 kDa, Sv 7,8 kDa, 4,8 kDa, básicas 7,4 kDa, básica 13 kDa e família 5-Cys. Várias famílias de proteínas foram deorfanizadas do sialotranscriptoma de S. nigrimanum como Sn 8-10 Cys W, ácida 28 kDa, básica 28 kD, 19 kDa, básica 8 kDa e Sn básica 4,4 kDa. Transcritos com similaridade para kunitoxina foram encontrados em T. guianense. Observamos um aumento na expressão de transcritos para a classe S e expecionalmente em SVEP, e nos subgrupos síntese de proteína e metabolismo energético da classe C, em relação a outros sialotranscriptomas de Simulium. O proteoma confirmou 28 das 32 famílias de proteínas encontradas no transcriptoma e disponibilizamos 101 sequências de proteínas de interesse para o NCBI. Essa é a primeira descrição de um sialoma (do grego Greek Sialo=saliva) de um vetor de oncocercose. Assim, nossos resultados ajudam no entendimento do papel da saliva de Simulium na transmissão de Onchocerca volvulus e para a evolução de proteínas salivares em simulídeos, além de consistir numa plataforma de novos compostos antihemostáticos e candidatos a vacina contra oncocercose.

Orientador: Fernanda Klein Marcondes / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-24T15:57:25Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lima_PatriciaOliveirade_D.pdf: 849171 bytes, checksum: 8d1338b60a2ebc4b9e9be0660be72427 (MD5) Previous issue date: 2014 / Resumo: Além de doenças orais, o estresse e o ciclo menstrual também têm sido relacionados à produção de compostos sulfurados voláteis (CSV), principais gases responsáveis pela halitose. O objetivo deste trabalho foi investigar a relação entre alterações emocionais, associadas a atividades acadêmicas, e produção de CSV, por meio da determinação do nível de estresse, fluxo salivar, concentrações salivares de cortisol, IgA secretória (IgAs), proteínas totais, beta-defensina ¿ 2 (?-defensin-2), atividade de alfa-amilase e expressão das proteínas mucinas 5B, 7 e lactoferrina, na cavidade oral, em mulheres (na fase menstrual do ciclo reprodutivo) e homens dos 4 anos do curso de Graduação em Odontologia da Faculdade de Odontologia de Piracicaba (UNICAMP). Os dados da análise psicológica mostraram que o estresse associado às atividades acadêmicas varia entre os anos do curso. Mulheres apresentaram maiores concentrações bucais de CSV e metil mercaptana (CH3SH), menor fluxo salivar, maiores concentrações salivares de proteínas totais e IgAs e menor expressão salivar de mucinas 5B e 7 em relação aos homens. Em relação ao ano do curso, homens e mulheres cursando o terceiro ano do curso apresentaram maiores valores de CSV, sulfeto de hidrogênio (H2S), alfa-amilase e mucina 5B, em relação a alunos cursando o primeiro ano. Não houve diferença entre os quatro anos da graduação nas concentrações bucais de CH3SH e dimetil sulfeto, concentrações salivares de proteínas totais, IgAs e cortisol e valores de fluxo salivar. Alunos do terceiro ano apresentaram menores concentrações salivares de ?-defensina -2, em relação a alunos do primeiro ano. Alunas cursando o terceiro e quarto anos do curso de graduação apresentaram maior expressão salivar de lactoferrina, em relação às alunas do primeiro e segundo anos. Houve correlação significativa entre os valores de CSV e H2S, em ambos os gêneros. Nas mulheres, observou-se correlação direta entre estresse e CSV e estresse e alfa-amilase e, nos homens, entre estresse e MUC5B. Os resultados confirmam dados anteriores, reforçando a influência do estresse sobre a produção de CSV e sugerem que a ?-defensina -2, mucina 5B e lactoferrina podem estar envolvidas na associação entre estresse e produção de CSV / Abstract: Oral diseases, stress and menstrual cycle have been related to the production of volatile sulfur compounds (VSC), main gases responsible for halitosis. The aim of this study was to evaluate the relationship between emotional alterations associated with academic activities and production of VSC. The following parameters were determined: stress levels, salivary flow, salivary concentrations of cortisol, secretory IgA (SIgA), total protein and beta-defensin-2 (?-defensin -2), alpha-amylase activity, and the expression of the proteins mucin 5B, 7 and lactoferrin, in the oral cavity. Women, during menstrual phase of the reproductive cycle, and men, enrolled at Piracicaba Dental School, University of Campinas, participated in the study. The data of psychological analysis showed that the stress associated with academic activities varies between years of the course. Women showed higher oral concentrations of VSC and methyl mercaptan (CH3SH), lower salivary flow, higher concentrations of total protein and SIgA and lower salivary expression of mucins 5B and 7 compared to men. Men and women in the third year of undergraduate course presented higher values of VSC, hydrogen sulfide (H2S), alpha-amylase and mucin 5B compared to students in the first year. There was no difference on the oral concentrations of CH3SH and dimethyl sulphide; salivary proteins, SIgA and cortisol concentrations and salivary flow values between the four years of the undergraduate course. Men scholars in the third year of the undergraduate course showed lower salivary concentrations of ?-defensin-2 compared to the first year. Women scholars in the third and fourth years of the undergraduate course presented higher lactoferrin expression compared to students in the first and second years. There was significant correlation between VSC and H2S in both gender. In women, it was observed correlation between stress and VSC and between stress and alpha-amylase. In men, stress and MUC5B presented positive correlation. The results confirm previous data strengthening the stress influence on the VSC production. Moreover, suggest that the proteins beta-defensin-2, mucin 5B and lactoferrin may be involved in the association between stress and VSC production / Doutorado / Fisiologia Oral / Doutora em Odontologia

A síndrome de Moebius (SM) é uma diplegia congênita rara caracterizada por paralisia total ou parcial do VI e VII nervos cranianos, que leva à ausência ou deficiência dos movimentos dos músculos envolvidos na mímica facial e ao estrabismo convergente. As características bucais descritas nesses indivíduos incluem o palato ogival, micrognatia, malformação de língua, filtro curto, falta de coaptação de lábios, e maior incidência de lesões de cárie. O objetivo deste estudo foi avaliar as características salivares quantitativas e qualitativas, incluindo o proteoma salivar, de indivíduos com SM, associá-las com a saúde bucal, e compará-las com as características salivares de um grupo controle, não afetado pela SM. Foram incluídos 15 indivíduos com SM e 15 controles. O comprometimento facial do individuos com a SM foi avaliada e graduada em scores 0,1 ou 2, uni ou bilateral, para os nervos II, III, IV, V, VI, VII e XI. Os pesquisadores determinaram o índice de cárie (ICDAS), de doença periodontal (PSR) e de placa (Silness Löe) nos dois grupos de estudo. Também realizaram coletas de saliva total não estimulada, estimulada e parotídea bilateral, sendo o fluxo salivar estabelecido em ml/min. A capacidade tampão foi avaliada na saliva total estimulada através da titulação de HCl 0,01N. A atividade de ?-amilase nas amostrasmfoi medida através da produção de maltose. Para a análise proteômica optou-se pela divisão das amostras de saliva de acordo com o fluxo em ml/min. Desta forma, para cada grupo, estudo e controle, os 4 tipos de saliva (estimulada, não estimulada, parotídea esquerda, parotídea direita) foram subdivididos de acordo com baixo fluxo (abaixo da média do grupo) ou alto fluxo (acima da média do grupo), resultando em 16 subgrupos. O proteoma foi obtido por duas metodologias distintas, a primeira a partir da cromatografia líquida espectrometria de massas e a segunda que utilizou a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) associada à eletroforese em gel de poliacrilamida (native cationic). A ocorrência das lesões de cárie foi significativamente mais alta entre os participantes com SM (p>0,05) no corte 2, bem como a ocorrência de doença periodontal (p>0,05), quando comparado ao grupo controle. Não houve diferença no índice de placa entre os grupos. A análise proteômica mostrou diminuição de cistatinas B, S e SN nos indivíduos com SM. Não houve diferença no perfil proteico entre os grupos de baixo e de alto fluxo salivar, para indivíduos com SM e controle. Houve aumento na quantidade de amilase salivar em e de histatina 1,3 e 5 em indivíduos com SM. Concluímos que indivíduos com SM apresentam diminuição de fluxo salivar, de capacidade tampão e alterações proteicas que colocam esses indivíduos em situação de maior risco para cárie e para doença periodontal. / The Moebius syndrome (MS) is a rare congenital diplegia characterized by total or partial palsy of the VI and VII cranial nerves, leading to the absence or disability of the movements of facial expression muscles and to convergent strabismus. The oral features described in these individuals include high-arched palate, micrognathia, tongue malformation, short filter, lack of lips coaptation, and higher incidence of caries lesions. The aim of this study was to evaluate the quantitative and qualitative salivary characteristics, including the salivary proteome of individuals with MS, associate them with the oral health, and compare them to the salivary characteristics of a control group, unaffected by SM. We included 15 subjects with MS and 15 controls. The facial involvement of individuals with MS was evaluated and graded on scores 0, 1 or 2, uni or bilateral to the nerves II, III, IV, V, VI, VII and XI. The researchers established the caries (ICDAS), periodontal disease (PSR) and plate (Silness Löe) indexes in both groups. We also performed unstimulated, stimulated and bilateral parotid saliva collections, and salivary flow was calculated (ml / min). The buffer capacity was measured in stimulated saliva by titration of 0.01N HCl. The ?-amylase activity was determined by maltose production. For proteomic analysis it was decided to split the saliva samples in accordance with the flow in ml/min. Thus, for each group, study and control, the 4 types of saliva (stimulated, unstimulated, left parotid, right parotid) were subdivided according to low flow (below the group average) or high flow (above average group), resulting in 16 subgroups. The proteome was obtained by two different methodologies, the first was liquid chromatography mass spectrometry and the second was sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) associated with cationic PAGE. The occurrence of caries lesions, related to cut-off 2, as well as the occurrence of periodontal disease, was significantly higher (p> 0.05) in participants with MS when compared to the control group. There was no statistical difference in plaque index between groups. Proteomics analysis showed decrease of cystatin B, S and SN in individuals with MS. There was no difference in protein profile between the low and high salivary flow groups, for individuals with MS and control. There was an increase in the amylase amount and histatin 1, 3 and 5 in individuals with MS. We concluded that individuals with MS present decreased salivary flow, decreased buffer capacity and protein alterations that place these individuals at increased risk for caries and periodontal disease.

A síndrome de Moebius (SM) é uma diplegia congênita rara caracterizada por paralisia total ou parcial do VI e VII nervos cranianos, que leva à ausência ou deficiência dos movimentos dos músculos envolvidos na mímica facial e ao estrabismo convergente. As características bucais descritas nesses indivíduos incluem o palato ogival, micrognatia, malformação de língua, filtro curto, falta de coaptação de lábios, e maior incidência de lesões de cárie. O objetivo deste estudo foi avaliar as características salivares quantitativas e qualitativas, incluindo o proteoma salivar, de indivíduos com SM, associá-las com a saúde bucal, e compará-las com as características salivares de um grupo controle, não afetado pela SM. Foram incluídos 15 indivíduos com SM e 15 controles. O comprometimento facial do individuos com a SM foi avaliada e graduada em scores 0,1 ou 2, uni ou bilateral, para os nervos II, III, IV, V, VI, VII e XI. Os pesquisadores determinaram o índice de cárie (ICDAS), de doença periodontal (PSR) e de placa (Silness Löe) nos dois grupos de estudo. Também realizaram coletas de saliva total não estimulada, estimulada e parotídea bilateral, sendo o fluxo salivar estabelecido em ml/min. A capacidade tampão foi avaliada na saliva total estimulada através da titulação de HCl 0,01N. A atividade de ?-amilase nas amostrasmfoi medida através da produção de maltose. Para a análise proteômica optou-se pela divisão das amostras de saliva de acordo com o fluxo em ml/min. Desta forma, para cada grupo, estudo e controle, os 4 tipos de saliva (estimulada, não estimulada, parotídea esquerda, parotídea direita) foram subdivididos de acordo com baixo fluxo (abaixo da média do grupo) ou alto fluxo (acima da média do grupo), resultando em 16 subgrupos. O proteoma foi obtido por duas metodologias distintas, a primeira a partir da cromatografia líquida espectrometria de massas e a segunda que utilizou a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio (SDS-PAGE) associada à eletroforese em gel de poliacrilamida (native cationic). A ocorrência das lesões de cárie foi significativamente mais alta entre os participantes com SM (p>0,05) no corte 2, bem como a ocorrência de doença periodontal (p>0,05), quando comparado ao grupo controle. Não houve diferença no índice de placa entre os grupos. A análise proteômica mostrou diminuição de cistatinas B, S e SN nos indivíduos com SM. Não houve diferença no perfil proteico entre os grupos de baixo e de alto fluxo salivar, para indivíduos com SM e controle. Houve aumento na quantidade de amilase salivar em e de histatina 1,3 e 5 em indivíduos com SM. Concluímos que indivíduos com SM apresentam diminuição de fluxo salivar, de capacidade tampão e alterações proteicas que colocam esses indivíduos em situação de maior risco para cárie e para doença periodontal. / The Moebius syndrome (MS) is a rare congenital diplegia characterized by total or partial palsy of the VI and VII cranial nerves, leading to the absence or disability of the movements of facial expression muscles and to convergent strabismus. The oral features described in these individuals include high-arched palate, micrognathia, tongue malformation, short filter, lack of lips coaptation, and higher incidence of caries lesions. The aim of this study was to evaluate the quantitative and qualitative salivary characteristics, including the salivary proteome of individuals with MS, associate them with the oral health, and compare them to the salivary characteristics of a control group, unaffected by SM. We included 15 subjects with MS and 15 controls. The facial involvement of individuals with MS was evaluated and graded on scores 0, 1 or 2, uni or bilateral to the nerves II, III, IV, V, VI, VII and XI. The researchers established the caries (ICDAS), periodontal disease (PSR) and plate (Silness Löe) indexes in both groups. We also performed unstimulated, stimulated and bilateral parotid saliva collections, and salivary flow was calculated (ml / min). The buffer capacity was measured in stimulated saliva by titration of 0.01N HCl. The ?-amylase activity was determined by maltose production. For proteomic analysis it was decided to split the saliva samples in accordance with the flow in ml/min. Thus, for each group, study and control, the 4 types of saliva (stimulated, unstimulated, left parotid, right parotid) were subdivided according to low flow (below the group average) or high flow (above average group), resulting in 16 subgroups. The proteome was obtained by two different methodologies, the first was liquid chromatography mass spectrometry and the second was sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) associated with cationic PAGE. The occurrence of caries lesions, related to cut-off 2, as well as the occurrence of periodontal disease, was significantly higher (p> 0.05) in participants with MS when compared to the control group. There was no statistical difference in plaque index between groups. Proteomics analysis showed decrease of cystatin B, S and SN in individuals with MS. There was no difference in protein profile between the low and high salivary flow groups, for individuals with MS and control. There was an increase in the amylase amount and histatin 1, 3 and 5 in individuals with MS. We concluded that individuals with MS present decreased salivary flow, decreased buffer capacity and protein alterations that place these individuals at increased risk for caries and periodontal disease.

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As moléculas provenientes do vetor são relevantes para estas interações e incluem as proteínas da saliva e do intestino médio. Nos flebótomos, as Leishmanias passam por um ciclo de desenvolvimento complexo dentro do intestino médio sob a proteção da matriz peritrófica, necessário para a geração de formas metacíclicas infectantes. As Leishmanias são transmitidas pelos flebótomos que co-injetam parasitas juntamente com a saliva, na derme do hospedeiro. Estudos anteriores demonstraram que a imunização de cães com duas proteínas salivares (LJM17 ou LJL143) de L. longipalpis, resultaram em uma imunidade mediada por células Th1 sistêmica e local afetando a sobrevivência do parasita in vitro. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar a imunidade conferida pela imunização de cães com DNA e rCanarypoxvirus expressando o gene que codifica para as proteínas salivares de L. longipalpis (LJM17 e/ou LJL143). A imunização com ambas LJL143 e/ou LJM17 induziu uma forte resposta imune humoral. A produção específica do IFN-γ foi observada apenas nas CMSP dos grupos imunizados estimuladas com a proteína. Trinta dias após a última imunização, os cães foram desafiados por via intradérmica com 107 de L. infantum na presença de saliva de L. longipalpis, e a infecção foi detectada no segundo mês após o desafio em todos os grupos. Os cães imunizados com a LJM17 apresentaram maior produção de IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-7, IL-15, IL-18, TNF-α, IP-10 e GM-CSF durante a infecção quando comparados com os controles, indicando que o efeito da imunização induzida por LJM17 persistiu mesmo após o desafio. Adicionalmente, diversos estudos realizados no controle da malária, têm demonstrado o uso de antígenos provenientes do vetor para o desenvolvimento de vacinas bloqueadoras de transmissão. Esta estratégia altruísta de imunização visa criar anticorpos que interfiram no desenvolvimento do parasita no interior do vetor. Assim, na segunda etapa do nosso trabalho, foi testada em cães uma estratégia de imunização utilizando uma proteína extraída do intestino médio do L. longipalpis (Luloper1) para induzir a produção de anticorpos em cães saudáveis e infectados e a interrupção da transmissão no flebótomo. Dessa forma, a imunização de cães saudáveis não infectados ou infectados assintomáticos induziu uma potente produção de anticorpos, porém nenhum efeito de bloqueio de transmissão foi detectado em flebótomos alimentados com o sangue desses animais contendo promastigotas de L. infantum. / Sand fly, parasite, host interactions play an important role in the transmission of leishmaniasis. Vector molecules are relevant for such interactions and include midgut and salivary proteins. In vector sand fly species, Leishmania parasites undergo a complex developmental cycle within the midgut, protected by the peritrophic matrix that is necessary for generation of infectious metacyclics. Leishmania parasites are transmitted by sand flies that co-inject parasites and saliva, in the host’s skin. Previous studies showed immunization of dogs with two proteins (LJM17 or LJL143) from Lutzomyia longipalpis, resulted in a systemic and local Th1 cell-mediated immunity affecting parasite survival in vitro. In this work we evaluated the immunity conferredbyimmunization of dogs with DNA and recombinant Canarypoxvírusexpressing the gene encoding the salivary ofL.longipalpis (LJM17and/orLJL143). Immunization with both LJL143 and LJM17 induced a strong specific humoral response. Specific production of IFN-γ was observed only in protein stimulated PBMC immunized groups. Thirty days after last immunization, dogs were challenged intradermally with 107L. infantum in the presence of L. longipalpis saliva and infection was detected in the second month after challenge in all the groups. It was observed that dogs immunized with LJM17 presented higher IFN-γ, IL-2, IL-6, IL-7, IL-15, IL-18, TNF-α, IP-10 and GM-CSF production during infection when compared with controls, indicating that the effect of immunization induced by LJM17 persisted even after challenge. Adittionally, previous studies, mostly with malaria control, have shown the use of several vector antigens for the development of transmission blocking vaccines. This altruist strategy of immunization aims to raise antibodies that could affect the development of the parasite inside the vector. Thus, in the second stage of our work we tested in dogs an immunization using a protein extracted from L. longipalpis midgut (Luloper1) to evaluate antibodies production in healthy and infected dogs and the interruption of transmission in the sand fly. Immunization of either healthy non infected or asymptomatic infected dogs induced a potent antibodies production, but no blocking transmission effect was detect in sand flies fed with blood of these animals containing L. infantum promastigotes

INTRODUÇÃO. A proteína Fator Inibitório da Migração de Macrófagos (MIF) é frequentemente observada com expressão elevada em tecidos tumorais quando comparados aos tecidos equivalentes normais e estudos têm sugerido seu papel como marcador prognóstico de neoplasias malignas, incluindo carcinomas hepatocelular, de ovário, de esôfago e também de cabeça e pescoço. Adicionalmente, alguns de seus mecanismos de ação já demonstrados, como a indução da proliferação e migração celular permitem implicar essa expressão diferencial no desenvolvimento tumoral e, consequentemente, no prognóstico das neoplasias malignas. OBJETIVO. Esse estudo objetivou avaliar o papel diagnóstico e prognóstico da proteína MIF em carcinoma epidermóide da cavidade bucal. METODOLOGIA. O estudo foi composto por 50 pacientes com carcinoma epidermoide da cavidade bucal coletados prospectivamente e 57 casos retrospectivos admitidos nos Serviços de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis e da Faculdade de Medicina da Fundação ABC. As análises foram feitas por meio de imunoistoquímica dos tecidos tumorais e margens epiteliais normais e de ELISA das amostras de soro e saliva, coletadas pré e pós-tratamento cirúrgico, dos pacientes participantes. Os resultados foram correlacionados aos achados clínicos e histopatológicos. RESULTADOS. A expressão da proteína MIF e seu receptor CD74 mostrou-se elevada em tecido tumoral quando comparado ao tecido epitelial livre de neoplasia (p < 0,0001). Associação entre a alta expressão da MIF no tumor e infiltração vascular linfática foi observada (p=0,005) e alta expressão da MIF no epitélio livre de tumor apresentou correlação marginalmente significativa com ocorrência de segundo tumor primário (p=0,072). A expressão positiva do receptor CD74 não apresentou associação com variáveis clínicas ou histopatológicas. A concentração sorológica da proteína MIF apresentou associação inversa com metástase linfonodal (p=0,018) e estádios patológicos avançados (p=0,040) e foi significativamente reduzida após a ressecção do tumor (p=0,001). A concentração da MIF na saliva não apresentou redução significativa após o tratamento cirúrgico, mas foi associada aos estágios pT3 e pT4 (p=0,001) e a estádios patológicos avançados (p=0,032). CONCLUSÕES. A redução significante da concentração da MIF observada no soro dos pacientes após a ressecção cirúrgica do tumor permite sugerir papel potencial dessa proteína como biomarcador para a detecção precoce de recorrência do carcinoma epidermoide da cavidade bucal. A expressão tecidual da proteína MIF e seu receptor CD74 apresentou papel controverso, mas a concentração salivar da proteína MIF parece relacionar-se a um possível papel pró-tumoral em carcinoma epidermoide da cavidade bucal / INTRODUCTION. The Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) overexpression is frequently observed in tumor tissues compared to normal tissues and some previous studies have suggested its role as a prognostic marker of malignancies, including hepatocellular, ovarian, esophageal and also head and neck carcinoma. Additionally, some of its mechanisms of action, as migration and cell proliferation induction, have been demonstrated, which allow imply a differential expression in tumor progression and therefore in the prognosis of malignant neoplasms. OBJECTIVES. This study aimed to evaluate the role of MIF protein and its receptor CD74 in prognosis and diagnostic of oral squamous cell carcinoma. METHODS. The study consisted of 50 patients with oral squamous cell carcinoma prospectively collected and 57 patients retrospectively collected admitted at the Head and Neck Surgery Service from Heliópolis Hospital and ABC Medical School. The analysis were performed by Imunohistochemistry of tumor and normal tissues and by ELISA of serum and saliva samples collected pre and post-surgical treatment. Results were correlated to clinical and histopathological data. RESULTS. The expression of MIF protein and of its receptor CD74 was higher in OSCC than in normal epithelium (p < 0,0001). Association between overexpression of MIF in tumor tissue and lymphatic vessel invasion was observed (p=0,005) and higher concentration of MIF in normal epithelium showed correlation of marginal significance with second primary tumor occurrence (p=0,072). The positive expression of the receptor CD74 did not presented association with clinical or histopathological variables. Serum MIF concentration presented inverse association with lymph node metastasis (p=0,018) and advanced pathological stage (p=0,040) and it was significantly reduced after the surgery (p=0,001). The salivary MIF concentration was not significantly reduced after the surgery, but it was associated with pT3 and pT4 stages (p=0,001) and advanced pathological findings (p=0,032). CONCLUSIONS. The results showing significant reduction of MIF concentration in post-surgical serum of patients suggest its potential role as a biomarker to early detection of oral squamous cell carcinoma recurrence. The MIF and CD74 expression presented controversial role, but the salivary concentration of MIF seems to develop a possible pro-tumoral role

INTRODUÇÃO. A proteína Fator Inibitório da Migração de Macrófagos (MIF) é frequentemente observada com expressão elevada em tecidos tumorais quando comparados aos tecidos equivalentes normais e estudos têm sugerido seu papel como marcador prognóstico de neoplasias malignas, incluindo carcinomas hepatocelular, de ovário, de esôfago e também de cabeça e pescoço. Adicionalmente, alguns de seus mecanismos de ação já demonstrados, como a indução da proliferação e migração celular permitem implicar essa expressão diferencial no desenvolvimento tumoral e, consequentemente, no prognóstico das neoplasias malignas. OBJETIVO. Esse estudo objetivou avaliar o papel diagnóstico e prognóstico da proteína MIF em carcinoma epidermóide da cavidade bucal. METODOLOGIA. O estudo foi composto por 50 pacientes com carcinoma epidermoide da cavidade bucal coletados prospectivamente e 57 casos retrospectivos admitidos nos Serviços de Cirurgia de Cabeça e Pescoço do Hospital Heliópolis e da Faculdade de Medicina da Fundação ABC. As análises foram feitas por meio de imunoistoquímica dos tecidos tumorais e margens epiteliais normais e de ELISA das amostras de soro e saliva, coletadas pré e pós-tratamento cirúrgico, dos pacientes participantes. Os resultados foram correlacionados aos achados clínicos e histopatológicos. RESULTADOS. A expressão da proteína MIF e seu receptor CD74 mostrou-se elevada em tecido tumoral quando comparado ao tecido epitelial livre de neoplasia (p < 0,0001). Associação entre a alta expressão da MIF no tumor e infiltração vascular linfática foi observada (p=0,005) e alta expressão da MIF no epitélio livre de tumor apresentou correlação marginalmente significativa com ocorrência de segundo tumor primário (p=0,072). A expressão positiva do receptor CD74 não apresentou associação com variáveis clínicas ou histopatológicas. A concentração sorológica da proteína MIF apresentou associação inversa com metástase linfonodal (p=0,018) e estádios patológicos avançados (p=0,040) e foi significativamente reduzida após a ressecção do tumor (p=0,001). A concentração da MIF na saliva não apresentou redução significativa após o tratamento cirúrgico, mas foi associada aos estágios pT3 e pT4 (p=0,001) e a estádios patológicos avançados (p=0,032). CONCLUSÕES. A redução significante da concentração da MIF observada no soro dos pacientes após a ressecção cirúrgica do tumor permite sugerir papel potencial dessa proteína como biomarcador para a detecção precoce de recorrência do carcinoma epidermoide da cavidade bucal. A expressão tecidual da proteína MIF e seu receptor CD74 apresentou papel controverso, mas a concentração salivar da proteína MIF parece relacionar-se a um possível papel pró-tumoral em carcinoma epidermoide da cavidade bucal / INTRODUCTION. The Macrophage Migration Inhibitory Factor (MIF) overexpression is frequently observed in tumor tissues compared to normal tissues and some previous studies have suggested its role as a prognostic marker of malignancies, including hepatocellular, ovarian, esophageal and also head and neck carcinoma. Additionally, some of its mechanisms of action, as migration and cell proliferation induction, have been demonstrated, which allow imply a differential expression in tumor progression and therefore in the prognosis of malignant neoplasms. OBJECTIVES. This study aimed to evaluate the role of MIF protein and its receptor CD74 in prognosis and diagnostic of oral squamous cell carcinoma. METHODS. The study consisted of 50 patients with oral squamous cell carcinoma prospectively collected and 57 patients retrospectively collected admitted at the Head and Neck Surgery Service from Heliópolis Hospital and ABC Medical School. The analysis were performed by Imunohistochemistry of tumor and normal tissues and by ELISA of serum and saliva samples collected pre and post-surgical treatment. Results were correlated to clinical and histopathological data. RESULTS. The expression of MIF protein and of its receptor CD74 was higher in OSCC than in normal epithelium (p < 0,0001). Association between overexpression of MIF in tumor tissue and lymphatic vessel invasion was observed (p=0,005) and higher concentration of MIF in normal epithelium showed correlation of marginal significance with second primary tumor occurrence (p=0,072). The positive expression of the receptor CD74 did not presented association with clinical or histopathological variables. Serum MIF concentration presented inverse association with lymph node metastasis (p=0,018) and advanced pathological stage (p=0,040) and it was significantly reduced after the surgery (p=0,001). The salivary MIF concentration was not significantly reduced after the surgery, but it was associated with pT3 and pT4 stages (p=0,001) and advanced pathological findings (p=0,032). CONCLUSIONS. The results showing significant reduction of MIF concentration in post-surgical serum of patients suggest its potential role as a biomarker to early detection of oral squamous cell carcinoma recurrence. The MIF and CD74 expression presented controversial role, but the salivary concentration of MIF seems to develop a possible pro-tumoral role