CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / O objetivo deste estudo foi o de avaliar o efeito do FSH sozinho ou em
combinaÃÃo com a ativina-A na sobrevivÃncia, crescimento e expressÃo de RNAm para ActR-
IB, ActR-IIB, FSH-R, PCNA e HAS1/2/3 em folÃculos secundÃrios de bovinos cultivados in
vitro por 18 dias. FolÃculos prÃ-antrais (~0,2mm) foram isolados do cÃrtex de ovÃrios bovinos
e cultivados individualmente na ausÃncia- α-MEM+
(grupo controle) ou na presenÃa de
ativina-A sozinha na concentraÃÃo de (100ng/mL); FSH sozinho em concentraÃÃes seriadas -
50ng/mL (do dia 0 ao dia 6), 100 ng/mL (do dia 7 ao dia 12), e 200ng/mL (do dia 13 ao dia
18) ou em associaÃÃo com a ativina-A nas mesmas concentraÃÃes. ApÃs 18 dias de cultivo in
vitro, folÃculos cultivados com FSH apresentaram aumento significativo no diÃmetro em
comparaÃÃo aos demais tratamentos. Por outro lado, a ativina- A sozinha nÃo induz o
crescimento folicular comparado ao grupo controle. AlÃm disso, quando combinada com
FSH, a ativina-A inibiu o crescimento folicular promovido pelo FSH. Ao final de 18 dias de
cultivo, todos os tratamentos apresentaram a formaÃÃo de antro embora sem diferenÃas
significativas entre os tratamentos. A anÃlise ultra-estrutural confirmou a integridade dos
folÃculos cultivados em FSH apÃs 18 dias de cultivo. FolÃculos cultivados na presenÃa
de ativina-A associada ao FSH, reduziram significativamente (p <0,05) os nÃveis de RNAm
para ActR-IB, ActR-IIB, FSH-R e PCNA. AlÃm disso, em folÃculos cultivados
com FSH sozinho, os nÃveis de RNAm para HAS1 e HAS 2 foram significativamente maiores
(p<0,05) que em folÃculos cultivados com ativina-A em associaÃÃo ao FSH. Ademais, o nÃvel
de expressÃo do RNAm para HAS-3 nÃo diferiu (p>0,05) entre os tratamentos. Em
conclusÃo, a ativina-A à importante para o desenvolvimento folicular inicial (atà 6 dias), mas
reduz o efeito estimulatÃrio do FSH em folÃculos prÃ-antrais bovinos apÃs 18 dias de
cultivo in vitro. Nossos resultados apontam que o FSH Ã um fator chave para a
sobrevivÃncia e crescimento de folÃculos prÃ-antrais cultivados in vitro por um longo perÃodo
(18 dias). AlÃm disso, ativina-A em associaÃÃo ao FSH reduz os nÃveis de RNAm para o
receptor de ativina do tipo IB (ActR-IB), tipo II-B (ActR-IIB), FSH-R e PCNA, apÃs
18 dias in vitro. Em adiÃÃo, folÃculos cultivados em meio suplementado com FSH sozinho,
apresentaram nÃveis de expressÃo de RNAm para HAS-1 e HAS-2 maiores que em folÃculos
cultivados em meio suplementado pela associaÃÃo de ativina-A e FSH. / The aim of this study was to evaluate the effect of FSH alone or in combination
with activin-A on survival, growth and expression of mRNA for ActR- IB, ActR- IIB, FSH-R,
PCNA, and HAS1/2/3 in bovine secondary follicles cultured in vitro for 18 days. Preantral
follicles (~0,2mm) were isolated from the cortex of bovine ovaries and individually cultured
in the absence (control medium) or presence of activin-A alone at concentrations of
(100ng/mL); FSH alone in increased concentrations - 50ng/mL (from day 0 to day 6),
100ng/mL (from day 7 to day 12), and 200ng/mL (from day 13 to day 18) or in association
with activin-A in the same concentrations. After 18 days in vitro, follicles cultured with FSH
showed a significant increase in diameter compared to the other treatments. On the other
hand, the activin-A alone did not increase follicular diameter compared to control medium.
Moreover, when combined with FSH, activin-A inhibited the growth promoted by FSH. At
the end of 18 days of culture, all treatments presented antrum formation but without
difference between treatments. Ultrastructural analysis confirmed the integrity of follicles
cultured in FSH after 18 days. Follicles cultured in the presence of activin-A in association
with FSH significantly reduced (P<0.05) levels of mRNA for ActR-IB, ActR-IIB, FSH-R and
PCNA. Moreover, in follicles cultured with FSH alone, levels of mRNA for HAS 1 and HAS
2 were significantly higher (P<0.05) that in follicles cultured with activin-A in association
with FSH. In addition, the level of mRNA expression for HAS-3 did not differ (P> 0.05)
between treatments. In conclusion, activin-A is important for early follicular development (up
to 6 days), but reduces the stimulatory effect of FSH on bovine preantral follicles after 18
days of culture in vitro. Our results also indicate that FSH is a key factor for survival and
growth of bovine preantral follicles cultured in vitro for a long period (18 days). Moreover,
activin-A in combination with FSH reduce the levels of mRNA for activin receptor type IB
(ActR-IB), type II-B (ActR-IIB), FSH-R and PCNA after 18 days in vitro. In addition,
follicles cultured in medium supplemented with FSH alone levels of mRNA for HAS-1 and
HAS-2 were higher than in follicles cultured in medium supplemented by the association of
activin-A and FSH.
| Identifer | oai:union.ndltd.org:IBICT/oai:www.teses.ufc.br:5040 |
| Date | 29 February 2012 |
| Creators | Anderson Weiny Barbalho Silva |
| Contributors | Josà Roberto Viana Silva, Alice Andrioli Pinheiro, Ana Beatriz GraÃa Duarte |
| Publisher | Universidade Federal do CearÃ, Programa de PÃs-GraduaÃÃo em Biotecnologia (Campus da UFC em Sobral-CE), UFC, BR |
| Source Sets | IBICT Brazilian ETDs |
| Language | Portuguese |
| Detected Language | English |
| Type | info:eu-repo/semantics/publishedVersion, info:eu-repo/semantics/masterThesis |
| Format | application/pdf |
| Source | reponame:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da UFC, instname:Universidade Federal do Ceará, instacron:UFC |
| Rights | info:eu-repo/semantics/openAccess |
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