CAVALCANTE, Beatriz Torres de Melo. Pré-condicionamento nutracêutico com misturas de óleos ômega 3, 6 e 9 na artrite aguda induzida por zymosan em ratos. 2014. 112 f. Dissertação (Mestrado em Cirurgia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Medicina, Fortaleza, 2014. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-08-13T13:45:01Z No. of bitstreams: 1 2014_dis_btmcavalcante.pdf: 11821033 bytes, checksum: 4f9314cdcf3672a4bce295324a1f9acc (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-08-13T13:46:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2014_dis_btmcavalcante.pdf: 11821033 bytes, checksum: 4f9314cdcf3672a4bce295324a1f9acc (MD5) / Made available in DSpace on 2014-08-13T13:46:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2014_dis_btmcavalcante.pdf: 11821033 bytes, checksum: 4f9314cdcf3672a4bce295324a1f9acc (MD5) Previous issue date: 2014 / Artritis is an inflammatory condition that affects synovial articulations. The most relevant manifestations are decreased pain threshold and edema. A possible alternative as adjuvant therapy to this disease is the inclusion of nutraceutics in the diet. In the present study preconditioning with mixes of oils omega 3, 6 and 9 was used at an experimental model of acute artritis induced by zymosan (Zy) in rats. The objective of this study was to evaluate the antiinflammatory and antinociceptive effects of these mixes which contain high omega- 9:omega-6 ratio (3.4:1) and low omega-6:omega-3 ratio (1.4:1). These oil mixes contained different sources of omega-3: Mix 1 with alfa-linolenic acid, Mix 2 with alfa-linolenic, eicosapentanoic and docosaexanoic acids, and Mix 3 with alfa-linolenic and docosaexanoic acids. The monoinsaturated omega-9 fatty acids present antioxidant action whereas the poliinsaturated fatty acids omega-3 present antiinflammatory effects and the omega-6 fatty acids are proinflammatory. Thirty male wistar rats weighing 180-200g were used, for each experimental group. The animals were randomly distributed in two groups: Control (=12) and Test (n=18). The Control group was subdivided into groups: Negative Control whose animals received water orogastrically during 7 days (n=6), and Positive Controls whose animals received no oil mixes during 7 days but were treated with either dexametazone (DEXA – n=6) at the experiment day (day 8). The Test group was distributed into three groups of 6 rats subjected to orgastric administration of mixes 1, 2 and 3. On day 8 all animals had artritis induction by intraarticular injection of zymosan (1mg/50microlitters) in the right knee. Analised variables were articular incapacitation (A.I.), leucocyte migration, mieloperoxidase (MPO) activity, articular edema, vascular permeability, articular capsule immunostain for iNOS and NF-kB and histopathological analysis. Hypernociception was induced by carrageenan and PGE2. Results demonstrated a significant decrease (p<0.05) in A.I. during the third hour in animals preconditioned with mixes 1, 2 and 3, to level similar to that of those treated with DEXA. As concerned to leucocyte migration, there was a significant reduction (p<0.05) in the number of leucocytes in the aticular wash in rats preconditioned with all three mixes, as well as decreased activity of MPO (p<0.05) similar to what was found in animals treated with DEXA. Edema was inhibited and vascular permeability diminished in all groups preconditioned with all mixes (p<0.05). In animals of Mix 3 the decrease in vascular permeability was even more pronounced as compared to all other groups (p<0.001). Histopathology analysis showed a decrease in cellular inflitration and prevention from loss of articular capsule integrity in rats preconditioned with mixes 1 and 2. Immunohistochemical stain for iNOS and NFkB was significantly smaller in rats of groups 1, 2 and 3, similar to that of DEXA group. All oil mixes showed a significant inhibitory effect (p<0.05) as concerned to antinociception through the use of a model of plantar mecanic hiperalgia induced by carrageenan, similar to that of rats of INDO group, a drug used in the positive control . On the other hand, the same did not occur when hiperalgia was induced by PGE2. The results therefore suggest that preconditioning with mixes 1, 2 and 3 present antiinflammatory and antinociceptive effects, as well as decreases synovial expression of iNOS and NFkB. However, the observed antinociceptive effect appears to be indirect and due to the antiinflammatory effect. / A artrite é uma condição inflamatória que afeta as articulações sinoviais. Os sintomas mais relevantes são aumento da sensibilidade à dor nas articulações e edema. Uma possível alternativa para o tratamento adjuvante da doença é a inclusão de nutracêuticos na dieta oral. No presente estudo foi realizado o pré-condicionamento com misturas de óleos ômega 3, 6 e 9 em um modelo experimental de artrite aguda em ratos por zymosan (Zy). O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos anti-inflamatório e antinociceptivo das misturas (MIX) de óleos, contendo elevada relação -9/ -6 (3,4:1) e baixa relação -6/ -3 (1,4:1) na artrite por Zy. As misturas oleosas continham diferentes fontes de -3: MIX-1, contendo o ácido -linolênico; MIX-2, os ácidos -linolênico, eicosapentaenóico e docosaexaenóico, e o MIX-3, os ácidos - linolênico e docosaexaenóico. Os ácidos graxos monoinsaturados -9 têm ação antioxidante, os poliinsaturados -3 possuem ação anti-inflamatória, enquanto os -6 são próinflamatórios. Foram utilizados 30 ratos Wistar machos com peso médio corporal de 180-200 gramas, para cada grupo experimental. Os animais foram distribuídos, aleatoriamente, em dois grupos: o Controle (n=12) e o Teste (n=18). O grupo controle foi subdividido em dois grupos: Controle negativo cujos animais receberam água, por via orogástrica, durante 7 dias (n=6). Controle positivo, cujos animais não receberam nenhum dos MIX, durante esses sete dias e foram tratados com dexametasona (DEXA- n=6) no dia do experimento (dia 8). O grupo Teste foi subdividido em três grupos de 6 animais submetidos à administração orogástrica de MIX-1, MIX-2 e MIX-3, respectivamente. No 8o dia, em todos os grupos (Controle e Teste) foi induzida a artrite por meio de uma injeção intrarticular (i.a.) de zymosan (1mg/50μL) no joelho direito. As variáveis avaliadas foram: a incapacitação articular (I.A.), migração de leucócitos, atividade de mieloperoxidase (MPO), edema articular, permeabilidade vascular, imunomarcação de iNOS e NF-kB e análise histopatológica. Ainda foram realizados os testes de hipernocicepção induzida por carragenina e PGE2. Os resultados demonstraram uma diminuição significante (p<0,05), durante a 3ª hora da I.A. (pico de incapacitação) de todos os grupos pré-condicionados com as misturas (MIX-1, 2 e 3) à semelhança do controle positivo por DEXA. Em relação à migração de leucócitos para o líquido sinovial, todos os grupos pré-condicionados com (MIX-1, 2, e 3) apresentaram significante redução da migração (p<0,05) acompanhado da diminuição do número de neutrófilos e da atividade da MPO (p<0,05) à semelhança do grupo tratado com DEXA. O edema foi inibido (p<0,05) assim como, também, houve uma redução da permeabilidade vascular em todos os grupos pré-condicionados com diferenças significantes (p<0,05), sendo o efeito maior do MIX-3 (p<0,001) em relação aos outros. A análise histopatológica demonstrou uma diminuição do infiltrado celular e prevenção da perda da integridade da cápsula articular de forma significante (p<0,05) para os MIX-1 e 2. A marcação para iNOS e NF-kB mostrou uma diminuição nos grupos MIX-1, 2 e 3, igualmente como no grupo da DEXA. Na análise do efeito antinociceptivo no modelo de hiperalgesia mecânica plantar induzido por carragenina, todos os MIX demonstraram efeito inibitório significante (p<0,05), assim como a indometacina, fármaco usado no controle positivo. Entretanto, isso não foi observado na hiperalgesia induzida por PGE2. Os resultados sugerem que o précondicionamento com os MIX- 1, 2 e 3 possuem efeitos antinociceptivos e anti-inflamatórios, diminuindo, também, a expressão de iNOS e NF-kB no tecido sinovial. Porém, o efeito antinociceptivo parece ser indireto e decorrente do seu efeito anti-inflamatório.

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-24Bitstream added on 2015-01-26T13:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000793393_20160630.pdf: 58766 bytes, checksum: 28d73643330edc921da6c93a84455f3d (MD5) Bitstreams deleted on 2016-07-01T13:02:15Z: 000793393_20160630.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-07-01T13:03:14Z : No. of bitstreams: 1 000793393.pdf: 451608 bytes, checksum: d0d0415afd5814c83407f5972fe8d9fc (MD5) / O objetivo do presente estudo foi analisar de forma comparativa o perfil lipídico sérico e de ácidos graxos do tecido adiposo entre cadelas controle e com tumores mamários. Foram utilizados 20 cadelas hígidas, não castradas, sem evidência à palpação de nódulos mamários, e 20 cadelas com neoplasia mamária já sugerida pelo exame de citologia aspirativa por agulha fina. Todos os animais foram submetidos à anamnese geral e específica do histórico nutricional e reprodutivo. Foi realizado o exame físico para a determinação do escore corporal, e no grupo com tumor de mama a classificação clínica (TNM) e o exame histopatológico dos tumores mamários. Para a avaliação do perfil lipídico sérico foi realizada a dosagem do colesterol total e triglicérides. Foi utilizada a cromatografia gasosa para a identificação dos ésteres metílicos dos ácidos graxos do tecido adiposo abdominal das cadelas submetidas à cirurgia. Os ácidos graxos foram expressos em porcentagem da fração lipídica de cada ácido graxo em relação ao conteúdo total de ácidos graxos da amostra de cada animal. Os dois grupos avaliados eram alimentados, em sua maioria (80%), por ração comercial e alimento caseiro. A alimentação caseira, em sua maior parte, era a mesma preparada para os proprietário, em sua maioria foi relatado o uso de óleo de soja e a carne mais fornecida era a bovina. Houve uma número maior de animais que recebiam alimentação caseira preparada com óleo de soja no grupo de cadelas com tumores mamários. Não houve uma associação da obesidade e dos níveis séricos de colesterol total e triglicérides com o risco de desenvolvimento de tumores mamários em cadelas. A quantificação relativa dos níveis de ácido alfa-linolênico (C 18:3) e cis-linoleico (C18:2) não apresentaram diferença quando comparado o grupo controle e com tumor de mama. A relação de ômega-6/ômega-3 no grupo controle foi 21:1 e no grupo com tumor de ... / The aim of this study was to analyze comparatively the lipid profile in serum and fatty acid profile in adipose tissue from dogs with and without mammary tumors. Twenty bitches, all healthy, none spayed, and that had non mammary tumor evidence during palpation (control group) and twenty bitches with mammary tumor, already diagnosed using fine needle aspiration cytology, were used in this study. All animals were submitted to anamnesis, general and specific to nutritional and reproductive history. A physical exam was performed in order to determine the body condition of those animals, and in the group of animals with neoplasia, a clinical (TNM) and a histopathology exam were performed in the tumors. To evaluate the serum lipid profile the triglycerides and total cholesterol were measured. Gas chromatography was used to identify methyl esters from fatty acid obtained from abdominal adipose tissue from the dogs during surgery. All fatty acids were expressed in percentage of lipid fraction of each fatty acid in relation to total content in each sample from each animal. Both groups (80%) were fed with commercial dog food adding homemade food. When homemade food was used, usually it was the same prepared for the human consumption, most of them used soy oil to prepare and beef was the most provided kind of protein. None association between obesity, serum total cholesterol levels and triglycerides increasing the risk of development mammary tumors were observed in this study. Total cholesterol and triglycerides serum levels average had higher values in animals that were overweight or morbid obese. Alfa-linoleic (C 18:3) and cis-linoleic acid (C 18:2) levels did not had any difference when comparing control group and tumor group. The proportion of omega6/omega3 in control group was 21:1 and in tumor group it was 23:1. None correlation was found between the fatty acid profile in the adipose tissue with histopathology classification of tumors and ...

Orientador: Nereu Carlos Prestes / Banca: Maria Denise Lopes / Banca: Maria Isabel Mello Martins / Resumo: O objetivo do presente estudo foi analisar de forma comparativa o perfil lipídico sérico e de ácidos graxos do tecido adiposo entre cadelas controle e com tumores mamários. Foram utilizados 20 cadelas hígidas, não castradas, sem evidência à palpação de nódulos mamários, e 20 cadelas com neoplasia mamária já sugerida pelo exame de citologia aspirativa por agulha fina. Todos os animais foram submetidos à anamnese geral e específica do histórico nutricional e reprodutivo. Foi realizado o exame físico para a determinação do escore corporal, e no grupo com tumor de mama a classificação clínica (TNM) e o exame histopatológico dos tumores mamários. Para a avaliação do perfil lipídico sérico foi realizada a dosagem do colesterol total e triglicérides. Foi utilizada a cromatografia gasosa para a identificação dos ésteres metílicos dos ácidos graxos do tecido adiposo abdominal das cadelas submetidas à cirurgia. Os ácidos graxos foram expressos em porcentagem da fração lipídica de cada ácido graxo em relação ao conteúdo total de ácidos graxos da amostra de cada animal. Os dois grupos avaliados eram alimentados, em sua maioria (80%), por ração comercial e alimento caseiro. A alimentação caseira, em sua maior parte, era a mesma preparada para os proprietário, em sua maioria foi relatado o uso de óleo de soja e a carne mais fornecida era a bovina. Houve uma número maior de animais que recebiam alimentação caseira preparada com óleo de soja no grupo de cadelas com tumores mamários. Não houve uma associação da obesidade e dos níveis séricos de colesterol total e triglicérides com o risco de desenvolvimento de tumores mamários em cadelas. A quantificação relativa dos níveis de ácido alfa-linolênico (C 18:3) e cis-linoleico (C18:2) não apresentaram diferença quando comparado o grupo controle e com tumor de mama. A relação de ômega-6/ômega-3 no grupo controle foi 21:1 e no grupo com tumor de ... / Abstract: The aim of this study was to analyze comparatively the lipid profile in serum and fatty acid profile in adipose tissue from dogs with and without mammary tumors. Twenty bitches, all healthy, none spayed, and that had non mammary tumor evidence during palpation (control group) and twenty bitches with mammary tumor, already diagnosed using fine needle aspiration cytology, were used in this study. All animals were submitted to anamnesis, general and specific to nutritional and reproductive history. A physical exam was performed in order to determine the body condition of those animals, and in the group of animals with neoplasia, a clinical (TNM) and a histopathology exam were performed in the tumors. To evaluate the serum lipid profile the triglycerides and total cholesterol were measured. Gas chromatography was used to identify methyl esters from fatty acid obtained from abdominal adipose tissue from the dogs during surgery. All fatty acids were expressed in percentage of lipid fraction of each fatty acid in relation to total content in each sample from each animal. Both groups (80%) were fed with commercial dog food adding homemade food. When homemade food was used, usually it was the same prepared for the human consumption, most of them used soy oil to prepare and beef was the most provided kind of protein. None association between obesity, serum total cholesterol levels and triglycerides increasing the risk of development mammary tumors were observed in this study. Total cholesterol and triglycerides serum levels average had higher values in animals that were overweight or morbid obese. Alfa-linoleic (C 18:3) and cis-linoleic acid (C 18:2) levels did not had any difference when comparing control group and tumor group. The proportion of omega6/omega3 in control group was 21:1 and in tumor group it was 23:1. None correlation was found between the fatty acid profile in the adipose tissue with histopathology classification of tumors and ... / Mestre

O glioblastoma multiforme (GBM) é a forma mais maligna de tumor cerebral, originado de células astrocíticas e caracterizado pela intensa proliferação, angiogênese e invasão celular pelo parênquima cerebral normal. O ácido gama-linolênico (GLA) mostrou ter ações anti-tumorais, nos processos de proliferação, migração e angiogênese. Utilizou-se o modelo ortotópico de GBM de rato (C6) e o modelo ex vivo tratados com GLA para análise de migração e proliferação celular. Foi observada uma redução da imunomarcação do fator de crescimento para endotélio vascular (VEGF), seu receptor Flt-1 e da metaloproteinase-2 de matriz, com consequente diminuição de vasos após o tratamento com GLA. No modelo ex vivo observou que o GLA reduziu a distância de migração e a mitose das células tumorais e também causou aumento das células tumorais em processo de apoptose. Os resultados revelaram que o GLA foi capaz de modular a expressão de algumas proteínas envolvidas nos processos angiogênico, migratório e proliferativo do GBM, o que sugere a sua utilização no tratamento desta patologia. / Glioblastoma multiforme (GBM) is the most malignant form of brain tumour originating from astrocytes and is characterized by intense proliferation, angiogenesis and cell invasion through the normal brain parenchyma. Gamma-linolenic acid (GLA) has anti-tumour activities in the processes of proliferation, migration and angiogenesis. This study used the orthotopic GBM rat model (C6) and ex vivo model treated with GLA to analyze cell migration and proliferation. Decreased immunostaining was observed for vascular endothelial growth factor (VEGF), its receptor Flt-1 and matrix metalloproteinase-2, with consequent reduction of blood vessels after treatment with GLA. In the ex vivo model GLA reduced the migration distance and mitosis of tumor cells and increased tumour cell apoptosis. The results revealed that GLA was able to modulate the expression of several proteins involved in angiogenesis, migration and proliferation in GBM, supporting the use of GLA in the treatment of this disease.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-06-05T19:27:04Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1771019 bytes, checksum: b262604d234aeca157bb65df2932b25d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-05T19:27:04Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1771019 bytes, checksum: b262604d234aeca157bb65df2932b25d (MD5) Previous issue date: 2005-09-28 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / A introdução de características agronomicamente importantes em soja pode ser realizada por transformação genética de plantas como um método alternativo ao melhoramento tradicional. Alterações nas proporções relativas dos ácidos graxos na fração óleo podem ser alcançadas por meio do silenciamento gênico de enzimas dessaturases, responsáveis pela síntese de ácidos graxos polinsaturados. Os objetivos deste trabalho foram: isolar um fragmento do gene da oleoil dessaturase de soja, construir cassete de expressão para a co-supressão deste gene e estabelecer metodologias para a extração e quantificação de ácidos graxos de embriões somáticos. A análise por RT-PCR mostrou que o gene Fad2-1 é expresso em todos os estádios de desenvolvimento da semente. A expressão desse gene aumentou a partir dos estádios iniciais de desenvolvimento e diminuiu em sementes maduras. Um fragmento de cDNA de cerca de 1 kb foi clonado nos vetores binários pCAMBIA 3301 e 1304, cujos T- DNAs apresentam genes para resistência a herbicida e antibiótico, respectivamente. A clonagem foi confirmada por meio de PCR, restrição enzimática e seqüenciamento. A construção clonada no vetor pCAMBIA 3301 foi utilizada para a transformação de soja via Agrobacterium. Embriões somáticos foram originados a partir de cotilédones imaturos cultivados na presença de 40 mg/L de 2,4-D. Agregados de embriões globulares foram transformados com suspensão bacteriana mediante sonicação e adição de acetoseringona e mantidos em meio seletivo com 3 mg/L e 5 mg/L do herbicida Finale → . A maioria dos embriões germinou normalmente em meio sem regulador de crescimento, embora alguns não tenham sido capazes de regenerar plantas. Apenas cinco plantas foram aclimatadas em casa de vegetação, mas não eram transgênicas. As análises moleculares com plântulas e/ou embriões somáticos cotiledonares permitiram a detecção de vários eventos de transformação. O conteúdo de ácidos graxos dos diferentes estádios de desenvolvimento embrionário foi determinado por cromatografia gasosa. Foram observadas mudanças na composição de ácidos graxos no estádio globular, com aumento dos conteúdos de ácido oléico (18:1) e linoléico (18:2) e diminuição de ácido linolênico (18:3). A partir do estádio torpedo, a composição de ácidos graxos não variou significativamente até o final do desenvolvimento, apresentando resultados similares aos de sementes maduras. A análise por RT-PCR mostrou um aumento no acúmulo de transcritos do gene Fad2-1 do estádio globular para torpedo. A expressão desse gene permaneceu relativamente constante até o estádio cotiledonar maduro, com redução da expressão após o processo de dessecação. Os dados quanto aos perfis de ácidos graxos de 138 embriões cotiledonares transformados foram analisados por meio de estatística descritiva para verificar a freqüência dos diferentes eventos de transformação. Oitenta e quatro embriões apresentaram conteúdo de 18:1 semelhante ao controle não transformado (13-21%), 18 apresentaram níveis inferiores (9-13%) e 36 apresentaram níveis aumentados (22-61%), provavelmente como possível conseqüência de silenciamento gênico. Em relação ao conteúdo de 18:2, 88 embriões apresentaram conteúdo semelhante ao controle não transformado (49-59%), 17 apresentaram níveis superiores (59-64%) e 33 apresentaram níveis inferiores de 18:2 (6-49%). Em 101 embriões o conteúdo de 18:3 foi semelhante ao controle não transformado (8-15%), 30 mostraram níveis superiores (15-27%) e 7 mostraram níveis inferiores (4-8%). Os resultados mostraram a existência de modificação na composição de ácidos graxos nos embriões cotiledonares analisados, mas não se pode afirmar que essas alterações sejam causadas por fenômenos de silenciamento gênico. Estes resultados podem ter sofrido a influência de variações somaclonais ou da auxina 2,4-D. / The introduction of agronomically important traits into soybean may be accomplished by genetic transformation of the plants as an alternative method to traditional breeding. Alterations in the relative proportions of the fatty acids in the oil fraction may be reached through gene silencing of desaturase enzymes that are responsible for the synthesis of the polyunsaturated fatty acids. The objectives of this work were: to isolate a fragment of the soybean oleoil desaturase gene; to construct expression cassettes for co-suppression of this gene; and to establish methodologies for the extraction and quantification of fatty acids in soybean somatic embryos. The analysis based on RT-PCR showed that the Fad2-1 gene is expressed in all developmental stages of the seed. The expression of the gene increases after the first stages of development and decreases in the dry seeds. One cDNA fragment around 1 kb was cloned in the binary vectors pCAMBIA 3301 and 1304, in which the T-DNAs harbor genes for resistance to herbicide and antibiotic, respectively. Cloning was confirmed through PCR, enzymatic restriction and sequencing. The constructs cloned in pCAMBIA 3301 were used for the soybean transformation via Agrobacterium. Somatic embryos were obtained from immature cotyledons cultivated in the presence of 2,4-D (40 mg/L). The globular embryo clusters were transformed with bacterial suspension using sonication and addition of acetosyringone and kept in selective medium with 3 mg/L and 5 mg/L of the Finale ® herbicide. Most embryos germinated in medium without growth regulator, however, some of them were not able to regenerate plants. Only five plants were acclimated in the greenhouse, but they were not transgenic. The molecular analyses of seedlings and/or cotyledone somatic embryos allowed the detection of several transformation events. Fatty acid content at different stages of the embryonic development was determined by gas chromatography. Changes in the fatty acid xcompositions at the globular stage were observed. There was an increase on oleic (18:1) and linoleic (18:2) acids contents and a decrease on linolenic acid (18:3) content. From the torpedo stage, the composition of the fatty acids did not vary significantly until the end of the development. The values obtained were similar to those of the dry seeds. The RT-PCR analysis showed an increase on the accumulation of transcripts for the Fad2-1 gene from globular to the torpedo stage. The expression of this gene remained relatively constant until the ripe cotyledonal stage, but there was a reduction on expression after the desiccation process. The data relative to the fatty acid profiles of 138 cotyledonal transformed embryos were analyzed by descriptive statistics in order to verify the frequency of the different transformation events. Eighty-four embryos showed a content of 18:1 similar to the non-transformed control (13-21%), 18 presented lower levels (9- 13%) and 36 presented increased levels (22-61%), probably a possible consequence of gene silencing. In relation to 18:2, 88 embryos presented a content similar to that of the non-transformed control (49-59%), 17 presented higher levels (59-64%) and 33 presented lower levels of 18:2 (6-49%). In 101 embryos, the content of 18:3 was similar to the non-transformed control (8-15%), 30 showed higher levels (15-27%) and 7 showed lower levels (4-8%). The results show that the cotyledonal embryos analyzed had a modified fatty acid composition, but one cannot state that these alterations were caused by the gene silencing phenomenon. These results might have been affected by the influence of either somaclonal variations or the auxin 2,4-D .

Made available in DSpace on 2018-07-27T18:26:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-14. Added 1 bitstream(s) on 2018-07-27T18:30:15Z : No. of bitstreams: 1 000866549.pdf: 1249047 bytes, checksum: fb12f6b451fca36393121a26b2c8f5b5 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A ceratoconjuntivite seca (CCS) é uma afecção de caráter inflamatório, comum em cães. O uso do ômega 3 e 6 no tratamento de humanos e coelhos com CCS tem sido pesquisado devido ao potencial efeito imunomodulador desses ácidos graxos, porém não há relatos do seu uso em cães com essa afecção. Objetivou-se avaliar o efeito dos óleos de linho e peixe, produtos ricos em ômega 3 e 6, administrados por via oral, na produção lacrimal e inflamação ocular de cães com CCS. Foram utilizados 45 cães, sendo 15 sem CCS, constituindo o grupo controle (GC), e 30 com CCS. Estes foram divididos de forma randomizada e cega em dois grupos: grupo tratado com óleo de linho (GL) e grupo tratado com óleo de peixe (GP); cada animal recebeu, por via oral, uma cápsula a cada 24 horas durante 60 dias, de acordo com o seu grupo. Exame clínico, teste lacrimal de Schirmer 1, teste de ruptura do filme lacrimal e teste de fluoresceína foram realizados antes do início do tratamento (M0) e aos 15 (M15), 30 (M30), 45 (M45) e 60 (M60) dias de tratamento. A citologia de impressão de superfície ocular foi realizada no M0, M30 e M60, enquanto a biópsia conjuntival para histopatologia foi obtida antes do tratamento e no momento final de avaliação. Houve diminuição significativa da hiperemia conjuntival nos cães de ambos os grupos tratados aos 60 dias. Na análise histopatológica, detectou-se diminuição da espessura epitelial no GL e GP, diminuição da queratinização no GL e diminuição do infiltrado de células inflamatórias no GP ao final do tratamento. Não houve diferença significativa nas demais avaliações. Conclui-se que os óleos de linho e peixe não aumentam a produção lacrimal até 60 dias do tratamento, porém melhoram a qualidade da superfície ocular. O óleo de peixe reduz o quadro inflamatório. Desta forma, o tratamento com óleo de linho ou peixe pode ser indicado como terapia adjuvante para cães com CCS / The keratoconjunctivitis sicca (KCS) is inflammatory and a common disease in dogs. The use of omega 6 and 3 for treatment in humans and rabbits has been researched because of the potential immunomodulatory effect of these fatty acids, but there are no reports of its use in dogs with this condition. The aim of this study was to investigate the effect of linseed oil and fish oil, products rich in omega 3 and 6, administered orally on tear production and ocular inflammation in dogs with KCS. For this study we used 45 dogs: 15 without KCS, constituting the control group (CG) and 30 with KCS. A randomized, double-blind clinical study was performed in assigned to treatment orally with oil fish (FO) or linseed oil (LO), both once daily for 60 days. More 15 dogs with no KCS were evaluated for a control group (CG). Clinical examination of the eye, Schirmer tear tests I, tear film breakup time, fluorescein test were performed prior to treatment (M0) and at days 15 (M15), 30(M30), 45(M45) and 60(M60) after initiation of treatment. The impression cytology on ocular surface was performed at M0, M30 and M60. The conjunctival histopathological analysis was only performed prior to treatment and at day 60 after treatment. That was a significant decrease in conjunctival hyperemia in dogs of both treatments at day 60. The histopathological analysis revealed a decrease in the epithelial thickness both in FO and LO, a decrease on the degree of keratinization in LO and a decrease inflammatory cell infiltration in FO. There were no significant differences in the others evaluations in both groups. The analyzed results demonstrate that although both treatments administered orally do not increase tear production within 60 days of treatment, it improve the ocular surface. Thus, fish oil reduces eye inflammation. Therefore, treatment with linseed oil or fish may be indicated as adjunctive therapy for dogs with KCS

O glioblastoma multiforme (GBM) é a forma mais maligna de tumor cerebral, originado de células astrocíticas e caracterizado pela intensa proliferação, angiogênese e invasão celular pelo parênquima cerebral normal. O ácido gama-linolênico (GLA) mostrou ter ações anti-tumorais, nos processos de proliferação, migração e angiogênese. Utilizou-se o modelo ortotópico de GBM de rato (C6) e o modelo ex vivo tratados com GLA para análise de migração e proliferação celular. Foi observada uma redução da imunomarcação do fator de crescimento para endotélio vascular (VEGF), seu receptor Flt-1 e da metaloproteinase-2 de matriz, com consequente diminuição de vasos após o tratamento com GLA. No modelo ex vivo observou que o GLA reduziu a distância de migração e a mitose das células tumorais e também causou aumento das células tumorais em processo de apoptose. Os resultados revelaram que o GLA foi capaz de modular a expressão de algumas proteínas envolvidas nos processos angiogênico, migratório e proliferativo do GBM, o que sugere a sua utilização no tratamento desta patologia. / Glioblastoma multiforme (GBM) is the most malignant form of brain tumour originating from astrocytes and is characterized by intense proliferation, angiogenesis and cell invasion through the normal brain parenchyma. Gamma-linolenic acid (GLA) has anti-tumour activities in the processes of proliferation, migration and angiogenesis. This study used the orthotopic GBM rat model (C6) and ex vivo model treated with GLA to analyze cell migration and proliferation. Decreased immunostaining was observed for vascular endothelial growth factor (VEGF), its receptor Flt-1 and matrix metalloproteinase-2, with consequent reduction of blood vessels after treatment with GLA. In the ex vivo model GLA reduced the migration distance and mitosis of tumor cells and increased tumour cell apoptosis. The results revealed that GLA was able to modulate the expression of several proteins involved in angiogenesis, migration and proliferation in GBM, supporting the use of GLA in the treatment of this disease.

Orientador: Cláudia Valéria Seullner Brandão / Banca: Claudia Helena Pellizzon / Banca: Karina Preising Aptekmann / Resumo: A ceratoconjuntivite seca (CCS) é uma afecção de caráter inflamatório, comum em cães. O uso do ômega 3 e 6 no tratamento de humanos e coelhos com CCS tem sido pesquisado devido ao potencial efeito imunomodulador desses ácidos graxos, porém não há relatos do seu uso em cães com essa afecção. Objetivou-se avaliar o efeito dos óleos de linho e peixe, produtos ricos em ômega 3 e 6, administrados por via oral, na produção lacrimal e inflamação ocular de cães com CCS. Foram utilizados 45 cães, sendo 15 sem CCS, constituindo o grupo controle (GC), e 30 com CCS. Estes foram divididos de forma randomizada e cega em dois grupos: grupo tratado com óleo de linho (GL) e grupo tratado com óleo de peixe (GP); cada animal recebeu, por via oral, uma cápsula a cada 24 horas durante 60 dias, de acordo com o seu grupo. Exame clínico, teste lacrimal de Schirmer 1, teste de ruptura do filme lacrimal e teste de fluoresceína foram realizados antes do início do tratamento (M0) e aos 15 (M15), 30 (M30), 45 (M45) e 60 (M60) dias de tratamento. A citologia de impressão de superfície ocular foi realizada no M0, M30 e M60, enquanto a biópsia conjuntival para histopatologia foi obtida antes do tratamento e no momento final de avaliação. Houve diminuição significativa da hiperemia conjuntival nos cães de ambos os grupos tratados aos 60 dias. Na análise histopatológica, detectou-se diminuição da espessura epitelial no GL e GP, diminuição da queratinização no GL e diminuição do infiltrado de células inflamatórias no GP ao final do tratamento. Não houve diferença significativa nas demais avaliações. Conclui-se que os óleos de linho e peixe não aumentam a produção lacrimal até 60 dias do tratamento, porém melhoram a qualidade da superfície ocular. O óleo de peixe reduz o quadro inflamatório. Desta forma, o tratamento com óleo de linho ou peixe pode ser indicado como terapia adjuvante para cães com CCS / Abstract: The keratoconjunctivitis sicca (KCS) is inflammatory and a common disease in dogs. The use of omega 6 and 3 for treatment in humans and rabbits has been researched because of the potential immunomodulatory effect of these fatty acids, but there are no reports of its use in dogs with this condition. The aim of this study was to investigate the effect of linseed oil and fish oil, products rich in omega 3 and 6, administered orally on tear production and ocular inflammation in dogs with KCS. For this study we used 45 dogs: 15 without KCS, constituting the control group (CG) and 30 with KCS. A randomized, double-blind clinical study was performed in assigned to treatment orally with oil fish (FO) or linseed oil (LO), both once daily for 60 days. More 15 dogs with no KCS were evaluated for a control group (CG). Clinical examination of the eye, Schirmer tear tests I, tear film breakup time, fluorescein test were performed prior to treatment (M0) and at days 15 (M15), 30(M30), 45(M45) and 60(M60) after initiation of treatment. The impression cytology on ocular surface was performed at M0, M30 and M60. The conjunctival histopathological analysis was only performed prior to treatment and at day 60 after treatment. That was a significant decrease in conjunctival hyperemia in dogs of both treatments at day 60. The histopathological analysis revealed a decrease in the epithelial thickness both in FO and LO, a decrease on the degree of keratinization in LO and a decrease inflammatory cell infiltration in FO. There were no significant differences in the others evaluations in both groups. The analyzed results demonstrate that although both treatments administered orally do not increase tear production within 60 days of treatment, it improve the ocular surface. Thus, fish oil reduces eye inflammation. Therefore, treatment with linseed oil or fish may be indicated as adjunctive therapy for dogs with KCS / Mestre

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-14T16:15:19Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3336095 bytes, checksum: 95e091fc2de36640318c4cb1a88e5114 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-14T16:15:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3336095 bytes, checksum: 95e091fc2de36640318c4cb1a88e5114 (MD5) Previous issue date: 2012-08-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A utilização de métodos de melhoramento genético pode levar à obtenção de genótipos de soja com características de interesse econômico e composição ideal de ácidos graxos na fração óleo. Para isso, é necessário o maior entendimento dos mecanismos que levam à alteração do conteúdo de ácidos graxos frente a diferentes condições de cultivo e a avaliação das substituições dos alelos dos genes que controlam essas características. Neste contexto, o objetivo desse trabalho foi avaliar o efeito da temperatura no conteúdo de óleo, composição de ácidos graxos e expressão gênica das ω-6 e ω-3 dessaturases em genótipos contrastantes para o conteúdo de ácido oléico e linolênico e avaliar o efeito da substituição alélica das ω-3-dessaturases de ácidos graxos insaturados em soja, com base em marcadores SNPs. Para os experimentos do efeito da temperatura na via de biossíntese de ácidos graxos, foram utilizados os genótipos: CD219, variedade comercial com concentrações normais de ácido oléico (~19%) e ácido linolênico (~8%); A29, com baixa concentração de ácido linolênico (~1%) e FA22, com elevada concentração de ácido oléico (~50%). O experimento foi conduzido em duas casas de vegetação: i) com aquecimento, que permitiu a obtenção de temperaturas médias (máxima e mínima) de 32/27°C; ii) sem aquecimento, que permitiu a obtenção de temperaturas médias de 26/14°C. As sementes em desenvolvimento foram subdivididas em dez estádios de acordo com o seu peso úmido, tendo o valor de incremento entre estádios de 50 mg. O conteúdo de óleo foi determinado no extrator soxhlet e composição de ácidos graxos por cromatografia gasosa. Os possíveis genes das dessaturases foram identificados no banco de dados Phytozome e a partir dessas sequências foram desenhados primers para experimentos de expressão gênica nas sementes dos 5° e 8° estádios de desenvolvimento. Não foi observado efeito significativo da temperatura de cultivo no teor de óleo bruto em sementes maduras dos genótipos CD219, A29 e FA22. Os perfis do acúmulo de ácidos graxos insaturados durante a ontogenia das sementes variaram em função do genótipo. FA22 apresentou maior conteúdo de ácido oléico e menor conteúdo de ácido linolênico em sementes cultivadas em alta temperatura em todos os estádios de desenvolvimento. Enquanto que em CD219 esse efeito foi observado apenas nos estádios finais. Quinze genes foram identificados como potenciais constituintes da família das dessaturases: 8 referentes às ω-6-dessaturases e 7 referentes às ω-3-dessaturases. Dentre os genes das ω-6- dessaturases Glyma10g42470 e Glyma20g24530 apresentaram maior expressão relativa em sementes de soja em desenvolvimento. Dentre os genes das ω-3-dessaturases genes Glyma02g39230; Glyma14g37350 e Glyma18g06950 apresentaram os maiores valores de expressão relativa em sementes de soja em desenvolvimento. Contrariamente ao esperado, os genes das ω-6-dessaturases Glyma10g42470, Glyma15g23200 e Glyma20g24530 apresentaram maior acúmulo de transcritos na maior temperatura (32/27°C) de cultivo. O gene da ω-3-dessaturases Glyma18g06950 apresentou perfil de expressão compatível com as alterações no conteúdo de ácido linoléico/linolênico nos genótipos FA22 e CD219 em função da temperatura em sementes em desenvolvimento. Para o experimento de avaliação do efeito da substituição alélica das ω-3-dessaturases de ácidos graxos insaturados em soja com base em marcadores SNPs, foram genotipadas 185 progênies F2 derivadas do cruzamento entre A29 (mutante para três genes FAD3, 1% de 18:3∆3,6,9) e Tucunaré (genótipo normal, 11% de 18:3∆3,6,9). Os resultados demonstram que os marcadores moleculares para os genes FAD3A, FAD3B e FAD3C foram eficientes no monitoramento do conteúdo de ácido linolênico nas populações segregantes F2 e F2:3. Além disso, as substituições dos alelos no loco FAD3A proporcionam maiores variações no conteúdo de ácido linolênico que as substituições nos outros dois locos. A partir desses dados, espera-se que seja possível introduzir os alelos recessivos dos genes FAD3A, FAD3B e FAD3C da linhagem A29 em genótipos elites do Programa de Melhoramento da Qualidade da Soja (PMQS) do BIOAGRO/UFV e desenvolver linhagens de soja especiais para a agroindústria apresentando baixos teores do ácido linolênico. / The use of genetic breeding may lead to the development of soybean genotypes with traits of economic interest and improved composition of fatty acids in the oil fraction. To achieve this goal, a better understanding of the mechanisms that lead to changes in fatty acid contents under different growing conditions and evaluation of allelic substitutions of genes that control these traits are needed. In this context, the aim of this study was to evaluate the effect of temperature on oil content, fatty acid composition and gene expression of ω-6 and ω-3 desaturases in genotypes contrasting for oleic and linolenic acid contents. In addition, the effect of allelic substitutions of fatty acid ω-3-desaturases genes was also evaluated. For the experiments on the effect of temperature on fatty acid biosynthesis the following genotypes were used: CD219, commercial variety with normal concentrations of oleic acid (~ 19%) and linolenic acid (~ 8%); A29, with low concentration of linolenic acid (~ 1%) and FA22, with a high concentration of oleic acid (~ 50%). The experiment was conducted in two greenhouses: one with heating, with average temperatures (maximum and minimum) of 32/27 °C, and the other with no heating, with average temperatures of 26/14 °C. The developing seeds were divided into ten stages according to the fresh weight, and the increment value between stages of 50 mg. The oil content was determined by soxhlet extractor and the fatty acid composition by gas chromatography. Possible desaturase genes were identified in the Phytozome database and from these sequences primers were designed for gene expression experiments. There was no significant effect of temperature on oil content in mature seeds of genotypes CD219, A29 and FA22. The accumulation profiles of the unsaturated fatty acids during seed ontogeny varied according the genotype. FA22 showed higher oleic and low linolenic acid contents in plants grown under high temperature at all stages of development. While in CD219 this effect was observed only in the later stages. Fifteen genes were identified as potential components of the desaturase family: 8 for ω-6-desaturases and 7 for ω-3 desaturases. Among the ω-6- desaturase genes, Glyma10g42470 and Glyma20g24530 showed higher relative expression in developing soybean seeds. Among the genes of ω-3-desaturase genes, Glyma02g39230, Glyma14g37350 and Glyma18g06950 showed higher relative expression during seed development. Contrary to expectation, ω-6-desaturases genes Glyma10g42470, Glyma15g23200 and Glyma20g24530 showed higher accumulation of transcripts under higher temperatures (32/27 °C). The ω-3-desaturase gene Glyma18g06950 showed expression profile compatible with the changes in the linoleic/ linolenic acid contents of genotypes FA22 and CD219 as a function of temperature during seed development. To evaluate the effect of allelic substitution of ω-3 desaturases genes SNP markers were genotyped in 185 F2 and F2:3 progenies derived from a cross between A29 (mutant for the three FAD3 genes, 1% 18:3∆3,6,9) and Tucunaré (normal genotype, 11% 18:3∆3,6,9). The results demonstrate that the molecular markers for genes FAD3A, FAD3B and FAD3C were efficient in monitoring the linolenic acid content in segregating populations F2 and F2:3. In addition, substitutions at the FAD3A locus provided greater variations in the linolenic acid content than substitutions in the other two loci. From these data, it is expected that it is possible to introduce the recessive alleles of genes FAD3A, FAD3B and FAD3C of A29 in elite genotypes of the Breeding Program for Soybean Quality of BIOAGRO/UFV and to develop special soybean lines for the agroindustry with low linolenic acid content.

oucos estudos avaliaram a associação da ingestão de ácidos graxos ômega 3 e transtornos de ansiedade. O presente estudo utilizou dados transversais do exame de linha de base (2008-2010) do Estudo Longitudinal Brasileiro de Saúde do Adulto - ELSA-Brasil para avaliar essa associação. A exposição dietética foi medida por um questionário quantitativo de frequência alimentar validado para a população brasileira e adaptado para o estudo, e os diagnósticos mentais foram avaliados pelo Clinical Interview Schedule-Revised Version - CIS-R, diagnosticando transtornos mentais de acordo com a Classificação Internacional de Doenças - CID-10. Modelos de regressão logística foram construídos utilizando quintis do consumo de ácidos graxos ômega 3, ácidos graxos ômega 6, razão de consumo n-6/n-3, e ácidos graxos poli-insaturados, usando o primeiro quintil como referência. Dos 15.105 sujeitos participantes do ELSA-Brasil, foram excluídos aqueles que relataram ingestão de menos de 500 ou mais de 4000 kcal, aqueles que relataram ingestão de suplementos n-3 ou n-6 e aqueles que foram submetidos a cirurgia bariátrica. Após as exclusões, 12268 participantes permaneceram na análise, dos quais 1893 (15,4%) apresentaram transtornos de ansiedade. Os indivíduos com transtorno de ansiedade eram mais jovens, de sexo feminino, menor escolaridade e renda, referiram tabagismo atual e atividade física mais leve. Valores mais altos de IMC e de proteína C reativa de alta sensibilidade foram observados nos indivíduos com ansiedade. A ingestão diária média de ácido eicosapentaenoico (EPA), ácido docosapentanoico (DPA) e ácido docosaexaenoico (DHA) foi significativamente menor em participantes com ansiedade. Um maior consumo desses três ácidos graxos da família ômega-3 foi observado em indivíduos com mais idade, maior renda e escolaridade, com dislipidemia, consumo de álcool e tabagismo atuais, e prática de atividade física vigorosa. Após o ajuste para variáveis sociodemográficas (idade, sexo, etnia e educação) fatores de risco cardiovascular (hipertensão, diabetes, dislipidemia, tabagismo, ingestão de álcool e atividade física), calorias totais, qualidade da dieta e depressão, os participantes do quinto quintil de ingestão de EPA, DHA e DPA mostraram associação inversa com transtornos de ansiedade: OR 0,82 (IC 95%, 0,69-0,98), OR 0,83 (IC 95%, 0,69-0,98) e OR 0,82 (IC 95%, 0,69-0,98), respectivamente. Participantes no quinto quintil de razão ômega-6/ômega-3 tiveram associação positiva com transtornos de ansiedade. Nenhuma associação foi encontrada com a ingestão de PUFA, ou ômega-3 e ômega-6 isoladamente com ansiedade após os ajustes. Nesta análise, uma alta ingestão de ômega-3 EPA, DHA e DPA foi inversamente associada com a presença de transtornos de ansiedade, enquanto que a alta razão ômega-6/ômega-3 foi diretamente associada à presença desses transtornos, sugerindo um possível efeito protetor dos ácidos graxos omega-3 EPA, DPA e DHA contra a ansiedade / Few studies have evaluated the association of omega-3 fatty acids intake and anxiety disorders. The present study used cross-sectional data from the baseline (2008-2010) examination of the Brazilian Longitudinal Study of Adult Health - ELSA-Brazil to evaluate this association. The dietary exposure was measured by a quantitative food frequency questionnaire validated for the brazilian population and adapted for the study, and the mental diagnoses were assessed by the Clinical Interview Schedule-Revised Version (CIS-R), diagnosing mental disorders according to the International Classification of Diseases - ICD-10. Logistic regression models were built using quintiles of omega-3 fatty acids, omega-6 fatty acids, omega-6/omega-3 ratio, and polyunsaturated fatty acids consumption, using the first quintile as a reference. Of the 15,105 subjects participating in ELSA-Brazil, those who reported ingestion of less than 500 or more than 4000 kcal, those who reported ingestion of omega-3 or omega-6 supplements and those had undergone bariatric surgery were excluded. After exclusions, 12,268 participants remained in the analysis, of whom 1893 (15.4%) had anxiety disorders. Subjects with anxiety disorder were younger, female, had lower education and income, reported current smoking and mild physical activity. Higher values of BMI and high sensibility C reactive protein were observed in subjects with anxiety. The mean daily intakes of eicosapentaenoic acid (EPA), docosapentaenoic acid (DPA) and docosahexaenoic acid (DHA) were significantly lower in subjects with anxiety. A higher intake of these three omega-3 fatty acids was observed in older individuals with higher income and education, with current dyslipidemias, alcohol consumption and smoking, and vigorous physical activity. After adjustment for socio-demographic variables (age, sex, ethnicity and education), cardiovascular risk factors (hypertension, diabetes, dyslipidemia, smoking, alcohol intake and physical activity), total calories, diet quality and depression, EPA, DHA and DPA intakes showed an inverse association with anxiety disorders: OR 0.82 (95% CI, 0.69-0.98), OR 0.83 (95% CI, 0.69-0.98) and OR 0.82 (95% CI, 0.69-0.98), respectively. Participants in the fifth quintile of omega-6/omega-3 ratio had a positive association with anxiety disorders. No association was found with ingestion of PUFA, or omega-3 and omega-6 alone with anxiety after adjustments. In this analysis, a high intake of omega-3 EPA, DHA and DPA was inversely associated with the presence of anxiety disorders, while the higher omega-6 omega-3 ratio was directly associated with the presence of these disorders, suggesting a possible protector effect of omega-3 fatty acids EPA, DPA and DHA against anxiety