Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-11T11:41:28Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 304047 bytes, checksum: 4e23692c7fdbfe1c817637c3a0c1997d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-11T11:41:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 304047 bytes, checksum: 4e23692c7fdbfe1c817637c3a0c1997d (MD5) Previous issue date: 2003-10-14 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O presente trabalho foi desenvolvido a partir de seis experimentos. No primeiro, avaliaram-se o pH, a relação nitrogênio amoniacal/nitrogênio total (N- NH 3 /Ntotal), a composição química e a digestibilidade in vitro da matéria seca (DIVMS) e as populações microbianas de silagens de capim-elefante produzidas com inoculantes ênzimo-bacterianos, em seis períodos de fermentação (01, 03, 07, 14, 28 e 56 dias), usando-se silos laboratoriais. Para a proteína bruta (PB) das silagens, nenhuma equação de regressão ajustou-se aos dados, registrando-se valor médio de 6,28% na MS. Para a FDN observou- se efeito quadrático, estimando-se valor mínimo de 74,83%, aos 44,85 dias de fermentação e para a FDA estimou-se decréscimos de 0,039 unidades percentuais por dia de fermentação. Observou-se efeito quadrático de período, sobre a DIVMS da silagem controle, estimando-se valor máximo de 52,99%, aos 33,99 dias de fermentação. Observou-se efeito de inoculante e de período, para o pH estimando-se reduções de 0,5769; 0,62327 e 0,80218 unidades/ dia de fermentação para as silagens controle e tratadas com Sil All e Bacto Silo, respectivamente. A população máxima de lactobacilos foi da ordem de 10 8 ufc/g de silagem, para a silagem controle, aos 14 dias de fermentação, e para as silagens tratadas com inoculantes, aos 7 dias. As enterobactérias não foram detectadas a partir do terceiro dia, apresentando valor máximo de 10 4 , < 10 e 10 3 ufc/g para as silagens controle, Sil All e Bacto Silo C Tropical, respectivamente. Num segundo experimento, avaliaram-se o consumo e a digestibilidade aparente total dos nutrientes de silagens de capim-elefante produzidas com inoculantes ênzimo-bacterianos, em ensaios com ovinos. O consumo médio de nutrientes não foi influenciado pelas silagens, excetuando- se o de EE e CNF. A digestibilidade aparente total dos nutrientes, também não foi influenciada pelas silagens. Em um terceiro experimento, avaliaram-se o pH, a relação nitrogênio amoniacal/nitrogênio total (N-NH 3 /Ntotal), a composição química e a DIVMS de silagens de milho produzidas com inoculantes ênzimo- bacterianos, em seis períodos de fermentação (01, 03, 07, 14, 28 e 56 dias), usando-se silos laboratoriais. Para o teor de matéria seca (MS) das silagens, detectou-se efeito da interação inoculante x período. Já para o teor de PB observou-se efeito de inoculante, registrando-se menor valor (6,23%) para a silagem não tratada. A DIVMS foi influenciada apenas pelo período, estimando- se incrementos de 0,0546305 unidades/dia de fermentação. Num quarto experimento, avaliaram-se o consumo e a digestibilidade aparente total dos nutrientes das silagens do experimento 3, em ensaio com ovinos. O consumo dos nutrientes não foi influenciado pelas dietas experimentais, registrando-se valores médios de 1,26; 0,14 e 0,84 kg/dia, para os consumos de MS, PB, e nutrientes digestíveis totais, respectivamente. Quanto à digestibilidade aparente dos nutrientes, apenas a da PB, foi influenciada pelas silagens. Em um quinto experimento, avaliaram-se o pH, a relação nitrogênio amoniacal/nitrogênio total (N-NH 3 /Ntotal), a composição química e a DIVMS de silagens de sorgo produzidas com inoculantes ênzimo-bacterianos, em seis períodos de fermentação (01, 03, 07, 14, 28 e 56 dias), usando-se silos laboratoriais. Para os teores de FDN e FDA estimaram-se valores máximos de 61,05 e 35,22%, aos 26,1 e 37,20 dias de fermentação, respectivamente. Para a DIVMS observou-se efeito da interação inoculante x período. Por sua vez, ixpara o pH observou-se efeito de inoculante e de período, enquanto que a relação nitrogênio amoniacal/Ntotal foi influenciada pela interação inoculante x período. Num sexto experimento, avaliaram-se o consumo e a digestibilidade aparente total dos nutrientes das silagens do experimento 5, em ensaio com ovinos. O consumo médio dos nutrientes, em g/dia, não foi influenciado pelos inoculantes, excetuando-se o de EE e FDN. Todavia, o consumo de matéria seca, expresso em %PV, foi influenciado pela inoculação, registrando-se menor valor na silagem não tratada. Contudo, a digestibilidade aparente total dos nutrientes não foi influenciada pelas silagens. / The present work was based on six experiments. In the first one, pH, ammonia nitrogen in relation to total nitrogen (N-NH3/Total N), chemical composition, in vitro dry matter digestibility (IVDMD) and microbial populations of elephantgrass silages produced with enzimatic-bacterial inoculants, were evaluated in six fermentation periods (1, 3, 7, 14, 28 and 56 days), using laboratory silos. The crude protein (CP) of silages showed mean value of 6.28% on dry matter basis. It was observed inoculant and period effect on pH being considered reductions of 0.5769; 0.62327 and 0.80218 units/day of fermentation for the control silage and those treated with Sil All and Bacto Silo, respectively. It was observed a quadratic effect for NDF, being considered minimum value of 74.83%, at 44.85 days of fermentation and for ADF it was considered decreasing values of 0.039 units/day of fermentation. It was observed a quadratic effect of period on IVDMD of the control silage, being considered maximum value of 52.99% at 33.99 days of fermentation. The maximum population of lactobacilli was 10 8 cfu/silage gram, to the control silage xiafter 14 days of fermentation, and to the inoculated silages after 7 days of fermentation. The enterobacter microrganisms were not detected after the third day, showing the maximum value of 10 4 , <10 and 10 3 cfu/g to control, Sil All and Bacto Silo Tropical C silages, respectively. In the second experiment, intake and total apparent digestibility of nutrients of elephantgrass silages produced with enzymatic-bacterial inoculants were evaluated in trials with rams. The mean intake of nutrients was not influenced by silages, except for intake of ether extract. The observed mean values for total apparent digestibilities of OM, CP and NDF were 52.4; 70.5 and 47.5%, respectively. In the third experiment, pH value, ammonia nitrogen in relation to total nitrogen (N-NH3/Total nitrogen), chemical composition and in vitro dry matter digestibility of corn silages produced with enzymatic-bacterial inoculants, were evaluated in six fermentation periods (1, 3, 7, 14, 28 and 56 days), using laboratory silos. It was observed interaction effect of inoculant x period in the silages dry matter (DM) content, registering greater values to inoculated silages, regardless the fermentation period. It was observed inoculant effect on the silages crude proteins (CP) contents, registering lower value (6.23%) to control silage. The in vitro dry matter digestibility was also influenced by the fermentation period, being considered increments of 0.0546305 units/fermentation day. In the fourth experiment, intake and total apparent digestibility of nutrients of silages from the experiment 3 were evaluated in a trial with rams. The nutrients intakes were not influenced by the experimental diets, registering mean values of 1.26; 0.14 and 0.84 kg/day, for dry matter, crude protein and total digestible nutrients (TDN), respectively. In the fifth experiment, pH value, ammonia nitrogen in relation to total nitrogen (N-NH3/Total N), chemical composition and in vitro dry matter digestibility of sorghum silages produced with enzymatic-bacterial inoculants were evaluated in six fermentation periods (1, 3, 7, 14, 28 and 56 days), being used laboratory silos. Neutral detergent fiber (NDF) and acid detergent fiber (ADF) reached maximum values of 61.05 and 35.22%, at 26.1 and 37.20 days of fermentation, respectively. There was interaction between inoculant and fermentation period on in vitro dry matter digestibility and inoculant and period effects on pH, while ammonia nitrogen/Total N value was influenced by the interaction between inoculant and fermentation period. In the sixth experiment, xiiintake and total apparent digestibility of nutrients of silages of the experiment 5 were evaluated in a trial with rams. The mean intake of nutrients, in g/day, was not influenced by inoculants, except for intake of EE and NDF. Though dry matter intake expressed in %BW, was influenced by inoculation, registering greater value to the inoculated silages. However, the total apparent digestibilities of nutrients were not influenced by the silages.

A região amazônica apresenta grande quantidade de plantas perenes, com particular relevância para as espécies frutíferas. Os frutos amazônicos são conhecidos pelo seu grande potencial energético e são usados como fonte de alimento nas grandes regiões do país. Dentre esses frutos, destaca-se o açaí, fruto do açaizeiro (Euterpe oleracea Martius), a copaíba (Copaifera officinalis L.) e a castanha do Pará (Bertholletia excelsa). Esses frutos são importantes para o desenvolvimento agroindustrial da região amazônica. Os mesmos contêm na sua composição proteínas, fibras e ácidos graxos. Os frutos possuem ácidos graxos são usados na área farmacêutica, com finalidade clínica e dermatológica. O projeto tem como objetivo apresentar técnicas analíticas de caracterização e quantificação dos ácidos graxos presente na composição oleosa dos frutos e descrever a ação farmacológica. Esses ácidos são o oléico, linoleico e palmítico. As técnicas analíticas com características de quantificação deverão gerar informações confiáveis e interpretáveis sobre a amostra, sendo o critério de avaliação denominado validação. A validação foi estudada neste trabalho, visando ter confiabilidade e reprodutibilidade nos resultados. Os processos analíticos com características de identificação e quantificação aplicados nesse projeto são: a cromatografia a gás acoplada a espectrometria de massas (CG/MS), a espectrometria de massas Tanden (MS/MS) e cromatografia líquida de alta eficiência com detector ultra violeta (HPLC/UV). Os resultados demonstram que os três frutos amazônicos comtem ácidos oléico, linoleico e palmítico em proporções diferentes potencializando seu uso em aplicações farmacêuticas, específicamente em tratamentos dermatológicos. / The Amazon region presents a great amount of perennial plants, with particular relevance to the fruit species. The Amazonian fruits are known for their high energy potential and are used as a food source in large regions of the country. Among these fruits, there is acai, the fruit of the açai palm (Euterpe oleracea Martius), copaiba (Copaifera officinalis L.) and Brazil nut (Bertholletia excelsa). These fruits are important for agro-industrial development in the Amazon region. They contain in their composition of protein, fiber and fatty acids. The fruits are fatty acids are used in the pharmaceutical field, with clinical and dermatological purposes. The project aims to provide analytical techniques for characterization and quantification of fatty acids present in the composition of the oily fruits and describe the pharmacological action. These acids are oleic, linoleic and palmitic acids. Analytical techniques for quantifying characteristics should generate reliable and interpretable information about the sample, and the evaluation criteria called validation. The validation was studied in this work, aiming to have reliability and reproducibility of the results. The analytical procedures to identify and quantify features implemented in this project are: a gas chromatography-mass spectrometry (GC / MS), Tanden mass spectrometry (MS / MS) and high performance liquid chromatography with UV detector (HPLC / UV). The results show that the three Amazon fruits did contain oleic, linoleic and palmitic acids at different increasing its use in pharmaceutical applications, specifically in dermatological treatments.

A aterosclerose é classificada como enfermidade crônica não transmissível e é considerada uma das principais causas de morte e morbidade em vários países, incluindo o Brasil. Entre as possíveis causas de sua gênese está o hábito alimentar, especificamente o consumo de ácidos graxos, principalmente saturados e trans. Ácidos graxos saturados possuem características biológicas e fisico-químicas diferentes dos insaturados. Os mais abundantes na dieta humana são o palmítico e esteárico. Sua associação com acometimentos cardiovasculares vem sendo cada vez mais investigada, principalmente os que possuem mais de dez carbonos em sua cadeia interferindo no metabolismo de lipoproteínas podendo desencadear todo o processo aterosclerótico. A indústria de alimentos vem desenvolvendo algumas tecnologias opcionais para reduzir ou eliminar ácidos graxos trans, em especial, o elaídico, dentre elas a modificação no processo de hidrogenação que aumenta a quantidade de ácidos graxos saturados. Alguns alimentos industrializados necessitam de uma grande quantidade de ácidos graxos saturados promovendo um aumento no teor de ácido palmítico e esteárico, sendo este último considerado um ácido graxo saturado neutro, mas dependendo da concentração utilizada, pode contribuir no decréscimo da HDL-c (High Density Lipoprotein), dentre outras alterações deletérias. Desta forma, investigar as alterações de determinados parâmetros biológicos diante da mudança da proporção de ácidos graxos saturados, respeitando o teor total de lipídios de uma dieta é a base deste estudo. Foram realizados ensaios em material biológico para a determinação dos seguintes parâmetros: 1) Atividade de enzimas antioxidantes; 2) Peroxidação lipídica em tecidos; 3) Lipidograma; 4) Determinação do perfil de ácidos graxos de tecidos e rações e 5) Expressão de genes relacionados com o processo aterosclerótico (ICAM-1, VCAM-1, CD36 e MCP-1). A determinação da atividade de enzimas antioxidantes foi realizada considerando somente as enzimas Catalase (CAT) e Superóxido Dismutase (SOD), por se tratarem de enzimas com alteração expressiva no processo aterogênico, na ocorrência de disfunção endotelial. Neste trabalho, foi analisada a atividade das referidas enzimas no tecido hepático e cardíaco, onde não foram constatadas alterações. O mesmo processo biológico que estimula a produção excessiva de espécies reativas pode levar ao aumento da peroxidação lipídica, principalmente de ácidos graxos polinsaturados das membranas celulares, em tecidos como fígado, cérebro e coração. A peroxidação lipídica apresentou diferenças significativas no tecido hepático. O grupo alimentado com ração enriquecida com tripalmitato apresentou peroxidação lipídica aumentada em relação ao grupo controle. Correlacionando com o perfil de ácidos graxos do tecido hepático, notamos que houve maior incorporação de ácido palmítico nesse tecido, que por apresentar configuração linear, quando incorporado à membrana celular, pode levar à disfunção e possível suscetibilidade a danos, como a peroxidação. No tecido cardíaco e no tecido cerebral não foram observadas alterações e diferenças entre os tratamentos. O lipidograma consiste na quantificação de lipoproteínas e frações lipídicas, compondo o perfil lipídico no plasma sanguíneo. Os resultados obtidos mostraram que o colesterol total foi significativamente menor no grupo controle, assim como triacilglicerol e LDL colesterol (LDL-c). Já HDL colesterol (HDL-c) está reduzida no grupo que recebeu ração suplementada com ácido palmítico, assim como este grupo apresentou parâmetros aumentados nas dosagens de triacilglicerol e colesterol total. Os grupos alimentados com ração suplementada com triestearato e trioleato apresentaram resultados intermediários para a dosagem de HDL-c, com valores tendendo ao grupo suplementado com tripalmitato. Em relação à dosagem de LDL-c, foi constatada diferença entre os grupos suplementados e o grupo controle. Destaca-se que não houve diferença entre a dosagem entre os grupos suplementados. Portanto, o grupo alimentado com dieta enriquecida com ácido oleico (monoinsaturado) equipara-se aos grupos alimentados com dietas enriquecidas com ácido esteárico e palmítico (saturados). O perfil de ácidos graxos do tecido hepático mostrou uma porcentagem elevada de ácido palmítico no grupo alimentado com ração enriquecida com o mesmo ácido graxo, com diferença estatística em relação aos demais grupos. Já em relação ao ácido esteárico, não houve diferenças significativas entre os grupos. Em compensação, o teor de ácido oleico no grupo suplementado com este mesmo ácido graxo e com ácido palmítico foi significativamente diferente em relação aos demais, com valores superiores. Este resultado demonstra que não houve dessaturação do ácido esteárico a oleico, ao menos neste modelo. No tecido cardíaco, foi observado o mesmo comportamento. No tecido cardíaco não houve diferença estatística significativa da concentração de ácidos graxos, indicando que não houve incorporação ou dessaturação. Ressalta-se que de acordo com determinação realizada utilizando a técnica de cromatografia gasosa, as rações apresentavam em sua composição o teor de lipídios adequado ao modelo animal e as proporções de ácidos graxos alteradas como proposto no objetivo deste trabalho. Em relação às moléculas de adesão e quimiocinas (VCAM-1, ICAM-1, CD-36 e MCP-1) relacionadas com o processo aterosclerótico, houve somente alteração na molécula CD-36 no grupo alimentado com ração enriquecida com trioleato, com redução em relação aos demais. Mas, as moléculas de adesão relacionadas com o processo inicial da aterogênese, a expressão gênica realizada através da técnica de q-RT-PCR não foi relevante, não apresentando diferença entre os tratamentos. Conclui-se, portanto, que os tratamentos aplicados ao modelo animal selecionado possui o potencial de alterar lipoproteínas plasmáticas, mas não de manter a continuidade e desencadear o processo inflamatório relacionado à aterogênese. / Atherosclerosis is chronic a non-communicable disease considered one of a major cause of morbidity and mortality in several countries, including Brazil. Among all the possible causes of their genesis the dietary habit of high fatty acid intake, especially saturated and trans fatty acids is the most important. Saturated and unsaturated fatty acids possess different biological and physicochemical characteristics. The most abundant fatty acid in the human diet are palmitic and stearic and they association with cardiovascular events has been increasingly investigated, especially those one with more than ten carbons in its chain which interfers in the lipoproteins metabolism and can initiate the atherosclerotic process. The food industry has developed some optional technologies to reduce or eliminate the presence of trans fatty acids in foods, in particular elaidic, which after the hydrogenation process increases the saturated fatty acids content. Some industrialized foods requires a large amount of saturated fatty acids that promote an increase of palmitic and stearic content, the last fatty acid mentioned is considered a neutral saturated fatty acid that can contribute to the decrease in HDL-c (High Density lipoprotein), depending on the concentration used, among other deleterious changes. Thus, investigate changes of specifics biological parameters in response to consumption of different saturated fatty acids, respecting the total content of lipids in a normolipidic diet is the aim of this study. Assays were conducted to determine the following parameters in the tissues: 1) Activity of antioxidant enzymes, 2) Lipid peroxidation, 3) Lipidogram; 4) Fatty acid composition 5) Expression of genes related the atherosclerotic process (ICAM-1, VCAM-1, CD36 and MCP- 1). The determination of the activity of antioxidant enzymes was carried out considering only the enzymes Catalase (CAT) and Superoxide Dismutase (SOD), because they are enzymes more sensitive and readily available in changes resulted of an atherosclerotic process with endothelial dysfunction. In the study, no changes were observed in activity of these enzymes in the liver and heart. The same biological process that stimulates the overproduction of reactive species can lead to increased lipid peroxidation, especially of polyunsaturated fatty acids present in cell membranes of tissues such as liver, brain and heart. The group fed with diet enriched with tripalmitate showed increased lipid peroxidation compared to control group. Correlating this information with the fatty acid profile in liver tissue, we noted that there was a greater incorporation of palmitic acid, which exhibit linear configuration when incorporated into the cell membrane and can lead to dysfunction and higher susceptibility to damages such as oxidation. No differences were observed in the others tissues analyzed. The lipidogram is the quantification of lipoprotein and lipid fractions, composing the lipid profile in blood plasma. The results showed that total cholesterol was significantly lower in the control group, as well triglyceride and LDL cholesterol (LDL-c). HDL cholesterol (HDL-C) concentration is reduced and triacylglycerol and cholesterol increased n the group fed with diet supplemented with palmitic. The groups fed with diets supplemented with tristearate and trioleate presented intermediate results for the measurement of HDL-c, with values tending to the group supplemented with tripalmitate. Regarding LDL-c levels, significant differences were observed between the supplemented groups and the control group. Emphasis that there was no difference between the dosage between the supplemented groups. Therefore, the group fed with oleic acid (monounsaturated) supplemented diet equates to the groups fed with diets enriched with stearic and palmitic acid (saturated). The fatty acid profile of liver tissue showed a high percentage of palmitic acid in the group fed with diet enriched with the same fatty acid, with a statistical difference compared to the other groups. In relation to stearic acid, there were no significant differences between groups. As compensation, the oleic acid content in the group supplemented with the same fatty acid and palmitic acid was significantly higher when compared to the others. This result demonstrates that no desaturation of stearic acid to oleic happened in this experimental model. In cardiac tissue there was no statistically significant difference in the concentration of fatty acids, indicating no incorporation or desaturation. Regarding adhesion molecules and chemokines (VCAM-1, ICAM- 1, CD-36 and MCP-1) related to the atherosclerotic process, there was only change in the gene expression of CD-36 molecule in the group fed diet enriched with trioleate, with reduction in relation to others. No other alterations were observed. In conclusion, we verified that the consumption of the different fatty acids in this experimental model has potential to alter lipoproteins levels but not to iniciate or maintain the inflammatory process associated with atherogenesis.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / En el presente trabajo se realizó un estudio comparativo, in vitro, al Microscopio Electrónico de Barrido, con el objetivo de evaluar si existen diferencias morfológicas significativas entre la superficie de un adhesivo autograbante, Adper Easy Bond (3M ESPE) y un adhesivo colocado con la técnica de grabado ácido, Adper Single Bond 2 (3M ESPE). Resumen Para ello se utilizaron tres coronas dentarias, donde se desgastó la superficie para eliminar el esmalte aprismático. En la corona n°1 solo se aplicó una capa de adhesivo Single Bond 2 (3M ESPE) y una capa de resina compuesta Filtek Z350 (3M ESPE). En la corona n°2 se aplicó el adhesivo autograbante Easy Bond (3M ESPE) y se aplicó una capa de resina compuesta Filtek Z350 (3M ESPE). En la corona n°3 la superficie del esmalte fue tratada con ácido ortofosfórico al 37% en gel. Luego se aplicó una capa de adhesivo Single Bond 2 (3M ESPE) y una capa de resina compuesta Filtek Z350 (3M ESPE). De cada corona se tomaron trozos de la restauración, que abarcaron resina, adhesivo y esmalte, obteniendo tres muestras. Luego para desmineralizar el esmalte las muestras fueron sumergidas en 25 ml de HCL al 30% por dos días, en el Laboratorio de Química de la Facultad de Odontología de la Universidad de Chile. Las tres muestras fueron observadas y luego fotografiadas al Microscopio Electrónico de Barrido y se concluyó que existen diferencias morfológicas entre la superficie de un adhesivo autograbante y un adhesivo colocado con la técnica de grabado ácido.

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Dentro de las patologías buco dentales, una de las enfermedades con mayor prevalencia en nuestro país es la caries dental, enfermedad multifactorial que ataca a los tejidos duros del diente. Si la caries no se detecta a tiempo provoca un deterioro irreversible de los tejidos dentarios, siendo necesario eliminarlos lo que inevitablemente dejará una cavitación, la cual debe repararse para permitir recuperar la forma, función y estética, preservando así la salud y equilibrio del ecosistema bucal. Para cumplir este propósito es necesario recurrir a elementos que permiten su restauración artificialmente. (1) Existe una gama de materiales usados en la odontología restauradora, los cuales pueden tener una aplicación o procedimientos para su uso, de tipo directo o indirecto. (2) Si la pérdida de tejido dentario es pequeña se utilizan las restauraciones directas, pero cuando la pérdida de tejido abarca una gran superficie, o bien se debe reconstruir una o más cúspides, se prefiere realizar con materiales indirectos, debido a que poseen mejor resistencia a la abrasión, aumentada resistencia a la fractura y en el caso de los materiales poliméricos reforzados, mayor control de la contracción por polimerización (3) y además, gracias a que se trabajan fuera de la cavidad bucal, se puede obtener una mejor anatomía, contornos y puntos de contactos.

El propósito de este estudio fue evaluar la influencia del grabado ácido previo a la aplicación de cuatros sistemas autograbantes, Adper Easy Bond (AEB), Futurabond DC (F), Go! (G) y OneCoat Self Etching Bond (OC), sobre esmalte dental de bovino. Se utilizaron 24 dientes anteriores de bovino, los cuales fueron colocados en bloques de resina acrílica de 1.5 cm x 1.5 cm, dejándose expuesta la cara vestibular la cual fue posteriormente desgastada ligeramente y pulida. Las piezas dentales fueron dividas en dos grupos experimentales y un grupo control, al primer grupo experimental se le aplicó el sistema adhesivo autograbante según las indicaciones del fabricante, mientras que al segundo grupo se le realizó grabado con ácido ortofosfórico al 35% previamente, el grupo control fue tratado con un sistema adhesivo convencional de grabado total; finalmente se colocó un bloque de resina compuesta Z350 (3M) utilizando un molde de teflón de 8mm de diámetro x 4 mm de altura. Los dientes se almacenaron durante 24 horas en saliva artificial a 37°C. Se obtuvieron cortes de entre 0.8 y 1.00 mm2 de área transversal, los especímenes obtenidos fueron sometidos a Test de Microtensión a una velocidad de 0.5 mm/min. Para el análisis estadístico se utilizaron las pruebas de Kruskall Wallis (p menor a 0.05) y Mann Whitney. Los valores de adhesión resultantes en MPa para los grupos experimentales sin grabado ácido fueron: AEB: 14.6 ± 3.8; F: 14.3 ± 8.7; G: 9.5 ± 3.8 y OC: 10.5 ± 6.2; para los grupos con grabado ácido previo fueron: AEB: 24.7 ± 14.2; F: 15.6 ± 4.8; G: 16.2 ± 8.9; OC: 14.9 ± 7.1. El grupo control All Bond 2 obtuvo valores de adhesión de 18.6 ± 7.3 MPa. Se encontraron diferencias estadísticamente significativas entre los grupos experimentales, mientras que en relación al grupo control, el grupo experimental con grabado ácido previo obtuvo valores similares a este a excepción del sistema AEB el cual obtuvo un valor significativamente mayor. / The aim of this study was to evaluate the influence of prior acid etching to application of four self-etching adhesive systems, Adper Easy Bond (AEB), Futurabond DC (F), Go!(G) And OneCoat Self Etching Bond (OC), on bovine enamel. Twenty four bovine lower incisors were used, which were mounted in cold – cure acrylic blocks of 1.5 x 1.5 cm, keeping exposed the buccal enamel surface subsequently abraded and polished. The teeth were divided in two experimental groups and a control group. In the first experimental group the adhesive system was applied following manufactures’ instructions, meanwhile the second experimental group was etched with ortophosphoric acid 35% prior to application of the adhesive. Control group was treated with a conventional total etch system. Finally a composite resin restoration Z350 (3M) was built using a Teflon mold of 8 mm diameter and 4 mm height. The teeth were stored in artificial saliva at 37°C during 24 hours. Specimens between 0.8 and 1.00 mm of cross-sectional area were obtained and stressed in tension at 0.5 mm/min cross-head speed. The statistical analysis was developed using Kruskall Wallis (p less than 0.05) and Mann Whitney tests. The bond strengths in MPa obtained for the experimental groups without prior acid etching were: AEB: 14.6 ± 3.8; F: 14.3 ± 8.7; G: 9.5 ± 3.8 y OC: 10.5 ± 6.2; for the groups with prior acid etching the results were: AEB: 24.7 ± 14.2; F: 15.6 ± 4.8; G: 16.2 ± 8.9; OC: 14.9 ± 7.1. Control Group All Bond 2 obtained bond strengths of 18.6 ± 7.3 MPa. Statistically significant differences of bond strengths values were found between both experimental gropus, the experimental group with prior acid etching obtained similar bond strength values to the control group, except for the AEB adhesive which obtained higher significant values.

Doctor en Bioquímica / En las tres regiones más australes de Chile, existen especies endémicas de microalgas productoras de toxinas del veneno diarreico de mariscos (DSP). El florecimiento de estas microalgas afecta severamente a la acuicultura, una de las principales actividades comerciales de esta zona, pues los mariscos contaminados, al ser consumidos, producen una intoxicación severa que incluye diarrea, vómitos y náuseas, y actualmente está en discusión si es que las toxinas del DSP pueden incrementar el riesgo de contraer cáncer gastrointestinal ya que actúan como promotores tumorales. Es por ello que la legislación internacional ha fijado un límite máximo de 160 g de toxinas del DSP totales/kg de carne de mariscos. Se consideran toxinas del DSP el ácido okadaico (OA) y sus derivados, las dinophysistoxinas (DTXs) 1, 2 y 3. Desde el punto de vista químico, estas toxinas son largas cadenas de poliéteres cíclicos de 38 carbonos como estructura base, con carácter lipofílico y termoestables. En Chile, las principales toxinas detectadas en los moluscos son DTX-1 y DTX-3, a diferencia de los países europeos donde las toxinas predominantes son OA y DTX-2. El blanco molecular de las toxinas del DSP son las proteínas fosfatasas, principalmente la PP2A, la cual participa en múltiples vías de señalización. A través de su inhibición, generan desregulación celular por hiperfosforilación, que puede llevar a la célula a apoptosis, así como también puede generar proliferación. Nosotros planteamos que, a dosis sub-letales, las toxinas del DSP pueden activar vías de transducción de proliferación, sobre vida e inflamación, en epitelios gástricos y de colon, lo que generaría en exposiciones crónicas, un ambiente tumorigenico, ya que estas toxinas tendrían un efecto acumulativo. Confirmamos nuestra hipótesis al demostrar un efecto positivo de OA y DTX-1 sobre la proliferación en dos modelos de epitelio gástrico (AGS y MKN-45) y de colon (Caco 2), a dosis sub letales, activándose el ciclo celular y dos vías canónicas de proliferación, diferenciación y sobrevida, como AKT y ERK; siendo las células Caco 2 más resistentes al efecto de estas toxinas. Además, demostramos que ambas toxinas gatillan la secreción de señales pro-inflamatorias en macrófagos y células dendríticas, a dosis subletales. La concentración en la cual generan un efecto proliferante y de secreción de factores pro-inflamatorios no es igual en ambas toxinas: DTX-1 es un orden de magnitud más potente que OA, lo cual comprueba que no son equivalentes como lo establece la legislación. Nuestro trabajo aporta antecedentes para que nuestra legislación establezca la no presencia de toxinas del DSP en los alimentos; dado el riesgo de sus efectos crónicos / In the three southern regions of Chile, there are endemic species of toxin-producing microalgae of diarrhetic shellfish poison (DSP). The algae blooms affect severely the aquaculture, a major commercial activities in this area, because the seafood contaminated, when it is consumed, can produce a intoxication that includes diarrhea, vomiting and nausea. It is currently in discussion if the DSP toxins may increase the risk of colon and gastric cancer as they act as tumor promoters. That is why international law has set a maximum limit of 160 g of total toxin / kg shellfish meat DSP. Okadaic acid (OA) and its derivatives, the dinophysistoxinas (DTXs) 1, 2 and 3 are considered DSP toxins. From a chemical viewpoint, these toxins are long chain of cyclic polyethers with a base structure of 38 carbons and are lipopylic and thermosets molecules. In Chile, the major toxins detected in shellfish are DTX-1 and DTX-3, unlike European countries where the predominant toxins are OA and DTX-2. The molecular target of DSP toxins are the protein phosphatases, PP2A majorly, which is involved in multiple signaling pathways. Through its inhibition, cell deregulation generated by hyperphosphorylation can lead to cell apoptosis and also proliferation. We believe that DSP toxins at sub-lethal doses, can activate transduction pathways of proliferation, survival and inflammation in gastric and colon epithelia, at chronic exposures, generate a tumorigenic environment, as these toxins could have a cumulative effect. For demonstrating our hypothesis, we analyzed the effect of OA and DTX-1 on the viability of two models of gastric epithelial (AGS and MKN-45) and colon epithelium (Caco 2), since both epithelia are physiological targets of these toxins. We studied the cell cycle and activation of canonical pathway of proliferation, differentiation and survival as AKT and ERK; and the effect on cells secreting pro-inflammatory signals, comparing both toxins, in order to prove that they are not equivalent as indicated by the legislation. Our work provides background for our legislation to set the absence of DSP toxins in food; given the risks of their chronic effects / FONDECYT

Trabajo de Investigación Requisito para optar al Título de Cirujano Dentista / Introducción: El sistema adhesivo de grabado ácido total sigue siendo muy utilizado, por ello se realizó un estudio descriptivo cuantitativo del pH del conducto radicular al utilizar protocolos de lavado, con el fin de eliminar el ácido ortofosfórico residual del conducto radicular, el cual puede interferir en la adhesión del poste intraradicular y por ende en la restauración final. Objetivo: Determinar si los protocolos de lavado propuestos, son una herramienta adecuada para eliminar el ácido ortofosfórico del conducto radicular. Material y método: 9 dientes humanos unirradiculares sanos, con endodoncia, aportados por el preclínico de Endodoncia de la Universidad de Chile, fueron desobturados, dejando un sello apical de 5 mm y con el posterior corte coronal de 2 mm sobre el límite amelocementario. Los dientes fueron divididos en 3 grupos, a los cuales fue aplicada la técnica de grabado ácido total y luego un protocolo de lavado diferente para cada grupo. Los protocolos fueron: lavado con agua jeringa triple, lavado con spray jeringa triple y lavado con dos jeringas hipodérmicas. Los protocolos fueron desarrollados con agua potable y en un tiempo de 30 segundos. La medición de pH se realizó con microelectrodo y pHmetro EZDO® PL-600, y los resultados fueron analizados, a través de media aritmética y diferencias significativas entre pH inicial y el pH posterior a la aplicación de cada protocolo. Resultados: Posterior a los protocolos aplicados se obtuvo un pH promedio de 6,24900 con agua jeringa triple, 6,33900 con spray de jeringa triple, y 5,79767 con dos jeringas hipodérmicas. Asimismo se encontró diferencias significativas entre el pH inicial y el posterior a cada protocolo. Conclusión: Los tres protocolos de lavado analizados son eficientes en el retiro correcto del ácido ortofosfórico del conducto radicular. Palabras claves: Adhesión, cementación, grabado ácido total y pH.

Foi estudado na região de Itapetininga-SP, Brasil, o efeito de pulverizações foliares de ácido giberélico (AG) sobre a dormência de tubérculos-sementes de batata da cv. Atlantic. Foram usadas as concentrações de 100, 300 e 700 ppm pulverizadas, 10 e 7 dias antes da dessecação da folhagem. As condições de armazenamento utilizadas foram as seguintes: temperatura ambiente e câmara frigorífica, nesta última e aplicou inicialmente uma faixa entre 7 e 9ºC, e posteriormente se elevou entre 15 e 20ºC até o fim do armazenamento. Observou-se que o AG proporcionou uma mudança no perfil de produção, obtendo-se uma maior quantidade de tubérculos-sementes. O conteúdo de matéria seca e a densidade específica dos tubérculos não foram afetados. A quebra de dormência foi mais intensa a medida que se aumentavam as doses de AG sob temperatura ambiente. A resposta do AG é fortemente condicionada pelo tipo de temperatura de armazenamento empregado. A pulverização foliar de AG na dose de 100 ppm 10 dias antes da dessecação da folhagem e posterior armazenamento a temperatura ambiente foi mais efetiva / not available

Apesar do amplo e histórico uso de produtos da biodiversidade brasileira com fins medicinais, pouco se sabe sobre o destino destes produtos após a sua absorção no organismo; quais são os produtos de metabolismo formados, sua toxicidade e cinética de eliminação. Neste trabalho foi estudado o metabolismo in vitro do diterpeno ácido caurenoico. Este terpeno está amplamente distribuído no reino vegetal tendo sua ocorrência destacada em dois dos maiores produtos fiterápicos consumidos pela população brasileira: o óleo de copaíba (Copaifera ssp.) e o xarope de guaco (Mikania glomerata e Mikania leavigata). Entre as principais reações do metabolismo em humanos, as reações de oxidação mediadas pelo citocromo P450(CIP450) têm um papel chave na detoxificação de xenobióticos. O objetivo deste trabalho foi estudar modelos biomiméticos in vitro das reações realizadas pelo CIP450 utilizando metaloporfirinas e reagentes de salen como catalisadores. Foram empregados sete catalisadores em meio homogêneo: Cloreto de 5,10,15,20-tetraquis(pentafluorofenil)porfirina ferro e manganês III (FeTFPP) e (MnTFPP), Cloreto de 5,10,15,20-tetraquis(2,6-diclorofenil)porfirina ferro e manganês III (FeTDCPP) (MnTDCPP), Cloreto de (R,R)-(-)N,N\'-bis(3,5-di-terc-butil-salicilideno)- 1,2-diaminociclo-hexil manganês III (R-Salen), Cloreto de (S,S)-(-)N,N\'-bis(3,5-di-tercbutil- salicilideno)-1,2-diaminociclo-hexil manganês III (S-Salen) e o Cloreto de 5,10,15,20- tetraquis(fenil)porfirina ferro III (FeTPP). Como doadores de oxigênio foram avaliados o iodosilbenzeno (PhIO), peróxido de hidrogênio (H2O2), terc-butil-hidroperóxido (TBHP) e (ácido 3-cloro-peroxibenzoico (MCPBA). Nos sistemas estudados foi observada a formação predominante de três produtos de oxidação: Um derivado epoxidado, um mono- e um di-hidroxilado, que tiveram sua estrutura proposta com base na análise do seu perfil de fragmentação em espectrometria de massas e comparação com dados previamente publicados na literatura. Foi observado que a natureza do oxidante influencia de forma mais pronunciada tanto a reatividade como a formação dos produtos. Foram avaliados também os catalisadores FeTFPP e o cloreto de 5,10,15,20-tetraquis-(4-N-metilpiridil)porfirina ferro III( FeTMPyP) imobilizados em suportes inorgânicos. A utilização destes catalisadores imobilizados resultou na maior reatividade do ácido caurenoico com a formação dos mesmos três produtos, mas em maior proporção em relação ao substrato. Por fim, foi realizada a catalise em meio biológico utilizando microssomas de ratos. Neste sistema foi gerado somente um produto que apresentou espectro de massas e tempo de retenção similar ao derivado di-hidroxilado obtido nas reações que utilizaram metaloporfirinas. Este trabalho trouxe evidências da rota de metabolismo de um importante produto natural, além de reforçar a capacidade de metaloporfirinas em realizar catálises biomiméticas, que serão úteis para a geração de metabólitos de fase um para estudos pré-clínicos. / In spite of the widespread and historical use of products of the Brazilian biodiversity for medical purposes, little is known about the fate of these products after their absorption into the organism; which are the products of metabolism, their toxicity and elimination kinetics. In this master thesis the in vitro metabolism of the diterpene kaurenoic acid was studied. This terpene is widely spread in the plant kingdom. Its presence can especially be highlighted in two of the most consumed phytotherapeutics by the brazilian population: the copaíba oil (Copaifera ssp.) and the guaco syrup (Mikania glomerata and Mikania leavigata. Among the principal metabolic reactions in humans, the oxidation reactions catalyzed by cytochrome P450 (CYP450) have a key role in the detoxification of xenobiotics. The objective of this thesis was the study of in vitro biomimetic models of the reactions carried out by CYP450 using metalloporphyrins and salen catalysts as analogs of the CYP450. Seven catalysts were applied in a homogeneous medium: 5,10,15,20-tetrakis(pentafluorophenyl)porphyrin iron and manganese III chloride (FeTFPP) and (MnTFPP), 5,10,15,20-tetrakis(2,6-dichlorophenyl)porphyrin iron and manganese III chloride (FeTDCPP) and (MnTDCPP), (R,R)-(-)N,N-bis(3,5-di-tertbutylsalicylidene)- 1,2-diaminocyclohexyl manganese III (R-Salen) chloride, (S,S)-(-)N,Nbis( 3,5-di-terc- butylsalicylidene)-1,2-diaminocyclohexyl manganese III (S-Salen) chloride and 5,10,15,20-tetrakis(phenyl)porphyrin iron III chloride (FeTPP). As oxygen donors iodosylbenzene (PhIO), hydrogen peroxide (H2O2), tert-butyl hydroperoxide (TBHP) and metachlorperoxybenzoic acid (MCPBA) have been tested. In the majority of the systems the formation of three predominant oxidation products was observed: An epoxidated, a mono- and a dihydroxylated derivative, of which the chemical structure was proposed based on the analysis of the mass spectrometric fragmentation pattern. It was observed that the nature of the oxidant influences more markedly the reactivity as well as the formation of the products. The catalysts FeTFPP and 5,10,15,20-tetrakis- (4-N-methyl pyridine)porphyrin iron III chloride (FeTMPyP) immobilized with inorganic supports were assessed as well. Using these immobilized catalysts, a higher proportion of oxidation products of the kaurenoic acid was observed. Finally, the oxidation of kaurenoic acid was assessed using rat microsomes. In this system only one product was produced that showed a similar mass spectrum and retention time as the dihydroxylated derivative obtained in the reactions using metalloporphyrins.This thesis showed evidences of the route of metabolization of an important natural product, and additionally reinforces the capacity of metalloporphyrins in attaining biomimetic catalysis.