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Ácido linoleico conjugado em cortes bovinos e laticínios: avaliação de metodologias analíticas para a quantificação dos isômeros conjugados majoritários / Conjugated linoleic acid in beef and dairy products: assessment of analytical methodologies for majority conjugated isomers quantification.Felipe Gomes Pinheiro 08 March 2010 (has links)
Os ácidos linoléicos conjugados (CLAs) consistem de um grupo de isômeros geométricos e posicionais do ácido linoléico aos quais tem sido atribuídos efeitos anticarcinogênico, antidiabético, antiaterogênico e modulador da composição corporal. As principais fontes naturais de CLA são o leite e a carne de ruminantes, uma vez que microorganismos ruminais são capazes de formar CLAs e seus precursores como intermediários da biohidrogenação. Para sua identificação e quantificação por cromatografia gasosa (CG) deve se tomar cuidado ao decidir um procedimento apropriado de metilação, a fim de evitar a isomerização dos CLAs. Dessa forma, o objetivo do presente trabalho foi de avaliar criticamente metodologias analíticas para caracterizar os isômeros conjugados c-9, t-11 e t-10, c-12 do ácido linoléico, identificando o melhor método para a esterificação e a melhor programação por cromatografia gasosa para a separação, identificação e quantificação dos CLAs através de sua análise em suplementos, cortes bovinos e laticínios. Para tanto, foram empregadas as técnicas de esterificação ácida com trifluoreto de boro metanólico, esterificação alcalina com metóxido de sódio metanólico e uma esterificação mista usando a combinação dos dois catalisadores na metilação de uma amostra comercial de suplemento de ácido linoléico conjugado na forma de triacilglicerol, o Tonalin® CLA TG 80, da Cognis. Os ésteres metílicos foram identificados sob três condições cromatográficas CLA01, CLA02 e CLA03. Também foram realizadas quantificações dos isômeros c-9, t-11 e t-10, c-12 CLA no Tonalin® CLA TG 80 e FFA 80 através de ressonância magnética nuclear do carbono 13 (13C-RMN). Os resultados obtidos permitiram decidir pelo emprego da técnica de esterificação alcalina, seguido da análise cromatográfica pelo método CLA03 para análise de cinco cortes bovinos fracionados em músculo e capa de gordura, creme de leite, iogurte integral e três tipos de queijo. O método de esterificação alcalina, seguido de separação por CG pelo método CLA03 mostrou-se o mais adequado para uma quantificação segura do perfil de ácidos graxos de alimentos que contenham os isômeros conjugados do ácido linoléico, uma vez que os resultados obtidos concordam com a literatura atual. / Conjugated linoleic acids (CLAs) are a group of geometric and positional isomers of linoleic acid which have been attributed to present anticarcinogenic, antidiabetic, antiaterogenic and body composition modulation effects. Major natural sources of CLA are ruminants milk and meat, since rumen microorganisms are able to produce CLAs and their precursors as intermediates of biohydrogenation. Before identification and quantification by gas chromatography (GC), the methylation procedure should be carefully decided to avoid isomerization of CLAs. Thus, the objective of this study was to critically evaluate analytical methods for characterizing conjugated linoleic acid isomers c-9, t-11 and t-10, c-12, by identifying the best method for esterification and the best gas chromatography programming for separation, identification and quantification of CLAs through quantification of CLAs in supplements, beef and dairy products. In order to accomplish this objetive, the techniques of acid esterification with boron trifluoride methanol, alkaline esterification with methanolic sodium methoxide and mixed esterification using a combination of the two catalysts were employed in the methylation of a commercial sample of conjugated linoleic acid supplement in triacylglycerol form, the CLA Tonalin® TG 80, from Cognis. The methyl esters were identified in 3 chromatographic conditions CLA01, CLA02 and CLA03. CLA isomers c-9, t-11 and t-10, c-12 were also quantified in CLA Tonalin® TG 80 and FFA 80 by carbon 13 nuclear magnetic resonance (13C-NMR). The results indicated the alkaline esterification technique followed by chromatographic analysis by CLA03 method as the best method for analyzing five cuts of beef fractionated in muscle and fat layer, cream, full yoghurt and three types of cheese. The alkaline esterification method followed by GC separation method CLA03 proved to be the most suitable for safe quantification of fatty acid profile in foods that contain conjugated linoleic acid isomers, once the results agreed with the data available in the current literature.
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Efeito de doses crescentes do ácido linoleico conjugado trans-10, cis-12 sobre a produção, composição e perfil de ácidos graxos do leite e parâmetros sanguíneos de cabras leiteiras da raça Toggenburg / Effect of increasing doses of trans-10, cis-12 conjugated linoleic acid on milk production, milk composition, milk fatty acids profile and blood parameters in Toggenburg dairy goatsFernandes, Diego 10 April 2012 (has links)
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Previous issue date: 2012-04-10 / Feeding trans-10, cis-12 CLA has resulted in milk fat depression in dairy cows, ewes and
goats. However, its effects in goats are less understood in comparison with other ruminant
species. Therefore, the objective of the present study was to evaluate the effect of
increasing doses of a rumen unprotected trans-10, cis-12 CLA supplement on milk
production, secretion of milk components and milk fatty acid profile in dairy goats. Eight
Toggenburg non pregnant goats (135 ± 21 DIM) were used in a duplicate 4 x 4 Latin
Square design (12-d treatment periods separated by 6-d intervals) according to the order of
lactation (primiparous and multiparous). The animals within each group were randomly
assigned to the following dietary treatments: CLA0: 45 g/d of Megalac-E; CLA15: 30 g/d
of Megalac-E+15 g/d CLA; CLA30: 15 g/d of Megalac-E+30 g/d of CLA; CLA45: 45 g/d
of CLA. The lipid supplements were mixed in the concentrate and fed individually to the
animals after morning and afternoon milkings. The CLA supplement (Luta-CLA 60) had
29.9% of trans-10, cis-12 CLA as methyl esters, resulting in doses of 0, 4.48, 8.97 and
13.45 g/d of this CLA isomer for CLA0, CLA15, CLA30 and CLA45 treatments,
respectively. Dry matter intake, milk yield, content and secretion of milk protein and
lactose, body condition score and body weight were unaffected by the dietary treatments.,
The comparison of milk fat content and yield observed on the last day of each treatment
period (d 12) with those found on day 0 showed that CLA0 treatment increased the milk fat
content. Thus, milk fat content and yield on day 0 were considered as 100%. The CLA15,
CLA30 and CLA45 treatments reduced milk fat yield by 8.1, 26.1 e 32.7% and milk fat
content by 4.5, 21.5 e 28.3%, respectively. The increase in dietary trans-10, cis-12 CLA
dose reduced the concentration of milk fatty acids arising from de novo synthesis and
increased the concentration of those derived from blood circulation. However, the milk
secretions of both classes of fatty acids were reduced linearly as the CLA dose increased.
The increase in dietary trans-10, cis-12 CLA also caused a linear reduction in milk fat
C14:1/C14:0, C16:1/C16:0, C17:1/C17:0 and C18:1/C18:0 dessaturase indexes. Milk fat
trans-10, cis-12 CLA content and secretion increased in goats fed increasing doses of
trans-10, cis-12 CLA, which, corresponded to transfer efficiencies from diet to milk of
1.18, 1.17 and 1.21% for CLA15, CLA30 and CLA45 treatments, respectively. The energy
balance (EB) increased linearly in goats fed increasing doses of trans-10, cis-12 CLA / O fornecimento de CLA trans-10, cis-12 através da dieta tem resultado na depressão da
gordura do leite de bovinos, ovinos e caprinos. No entanto, os seus efeitos em caprinos são
menos compreendidos perante as outras espécies de ruminantes. Assim, o objetivo do
presente estudo foi avaliar o efeito de doses crescentes de CLA trans-10, cis-12
desprotegido da bio-hidrogenação ruminal sobre a produção, secreção dos componentes e
perfil de ácidos graxos do leite de cabras leiteiras. Para isso, foram utilizados 8 animais da
raça Toggenburg não prenhes com 135 ± 21 dias em lactação, separadas de acordo com o
número de lactações para compor dois Quadrados Latinos 4 X 4 (12 dias de tratamento
separados por 6 dias de intervalo), um formado por primíparas e o outro por multíparas. Os
animais foram submetidos aleatoriamente aos seguintes tratamentos: CLA0) 45 g/d de
Megalac-E; CLA15) 30 g/d de Megalac-E+15 g/d de CLA; CLA30) 15 g/d de Megalac-
E+30 g/d de CLA; CLA45) 45 g/d de CLA. Os tratamentos foram inclusos no concentrado
fornecido aos animais, assim, todos os tratamentos continham 45 g/d de suplemento
lipídico. O suplemento de CLA (Luta-CLA 60) continha 29,9% do isômero trans-10, cis-
12 na forma de ésteres metílicos, perfazendo doses de 0, 4,48, 8,97 e 13,45 g/d deste ácido
graxo para os respectivos tratamentos citados anteriormente. O consumo de matéria seca
de silagem, a produção de leite, a produção e o teor de proteína e lactose do leite, o escore
de condição corporal e o peso vivo não foram afetados pelas doses de CLA trans-10, cis-
12. Ao final de cada período experimental (d 12), a avaliação do teor e produção de
gordura do leite em relação ao encontrado no dia 0, demonstrou que o tratamento CLA0
levou ao aumento da gordura do leite. Assim, as comparações de produção e teor de
gordura do leite foram feitas considerando os valores obtidos no dia 0 como 100%. Os
tratamentos CLA15, CLA30 e CLA45 reduziram, respectivamente, a produção de gordura
do leite em 8,1, 26,1 e 32,7% e o teor de gordura do leite em 4,5, 21,5 e 28,3%. O uso de
doses crescentes de CLA trans-10, cis-12 na dieta alterou o perfil de ácidos graxos do leite,
com reduções da concentração dos ácidos graxos oriundos da síntese de novo e aumento da
concentração dos provenientes da circulação sanguínea. Porém, quando a secreção destes
mesmos ácidos graxos foi avaliada houve redução da secreção de ambas as classes de
ácidos graxos. A suplementação de CLA trans-10, cis-12 também acarretou na redução dos
índices de dessaturação C14:1/C14:0, C16:1/C16:0, C17:1/C17:0 e C18:1/C18:0. Tanto a
concentração como a secreção do CLA trans-10, cis-12 aumentaram conforme o seu
aumento na dieta, e correspondeu a uma eficiência de transferência da 1,18, 1,17 e 1,21%
para os tratamentos CLA15, CLA30 e CLA45 (respectivamente), sendo que as mesmas
não diferiram entre si. Quando o balanço energético (BE) dos animais foi avaliado, as
inclusões crescentes do CLA trans-10, cis-12 na dieta aumentaram linearmente o BE
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Métodos rápidos para análise de ácidos graxos em alimentos e seleção de biomarcadores para aterosclerosePorto, Brenda Lee Simas 16 July 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-07-16 / FAPEMIG - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de Minas Gerais / Foi proposto um método alternativo para a determinação de ácidos graxos trans expressos em ácido elaídico por CZE com detecção direta no UV. A solução de eletrólito consistiu de 12,0 mmol L-1 de tetraborato de sódio, 12,0 mmol L-1 de brij 35 e MeOH/ACN na proporção de 33:17 v:v. Os ácidos graxos trans foram quantificados com sucesso em amostras de bala de caramelo, mistura para bolo, waffer recheado, chocolate e mistura para pão de queijo em 13 minutos de análise com a estatística baseada no cálculo de uma fator de resposta usando o ácido cis-nonadecaenóico como padrão interno. A comparação estatística entre CZE-UV e o método clássico de análise por GC-FID não apresentou diferenças significativas no intervalo de 95% de confiança. Também foi proposto um método alternativo para análise target de CLA por fast GC usando a coluna SLB-IL111 com 15 m de comprimento e 0,10 mm de diâmetro interno. A separação ocorreu em isoterma a 168 º C e os isômeros de CLA cis-9, trans-11 e trans-10, cis-12 eluiram em 4,6 e 4,7 minutos, respectivamente. Duas amostras de leite com diferentes teores de CLA em sua composição foram analisadas e quantificadas por adição de padrão. A comparação estatística entre o método proposto com a coluna SLB-IL11 e o método clássico de análise por GC-FID com a coluna CPSil-88 não apresentou diferenças significativas no intervalo de 95% de confiança. O terceiro foco deste trabalho envolve a busca de biomarcadores para aterosclerose instável, utilizando a abordagem de fingerprint em metabolomica. Foi selecionado um grupo de 38 pacientes, entre homens e mulheres, metade diagnosticada com aterosclerose instável e metade com aterosclerose estável. A partir da análise do plasma deses pacientes, por LC-MS e GC-MS, foi possível selecionar 25 metabólitos como candidatos a biomarcadores para a enfermidade. Destes, apenas 18 puderam ser identificados e classificados como ácidos graxos, aminoácidos e carnitinas. Sua variação entre as amostras testadas sugere que a alimentação humana pode estar relacionada com as diferenças no metabolismo de pacientes diagnosticados com aterosclerose estável e instável. / An alternative method for determination of trans fatty acids expressed as elaidic acid in CZE-UV with direct detection was proposed. The background electrolyte used consisted of 12,0 mmol L-1 of sodium tetraborate buffer, 12,0 mmol L-1 of brij 35 and MeOH/ACN in ratio 33:17 v:v. Trans fatty acids in different samples such as butter toffee, cake mix, stuffed wafers, chocolate and a mix for brazilian cheese bread were successfully quantified within an analysis time of 13 min, considering the statistical approach based on response factor calculation using cis-nonadecaenoic acid as internal standard. The statistical comparison between CZE-UV and the classical GC method for the analyzed samples did not present significant differences within the 95% confidence interval. Also was proposed an alternative method for the target analysis of CLA by fast GC using the SLB-IL111 column with 15 m length and 0.10 mm in internal diameter. The separation occurred with isotherm at 168 ° C and the CLA isomers cis-9, trans-11 and trans10, cis-12 eluting at 4.6 and 4.7 minutes, respectively. Two samples of milk with different CLA content in its composition was analyzed and quantified by standard addiction. The statistical comparison between the proposed method with the column SLB-IL111 and the classical GC method with the column CPSil-88 did not present significant differences within the 95% confidence interval. The third focus of this work involves the search of biomarkers for unstable atherosclerosis, using fingerprint approach in metabolomics. It selected a group of 38 patients, men and women, half diagnosed with unstable atherosclerosis and half with stable atherosclerosis. From the plasma analysis of these patients, by LC-MS and GC-MS, 25 metabolites as biomarkers candidate for this disease were selected. In which, only 18 could be identified and classified as fatty acids, amino acids, and carnitines. Its variation between samples suggests that human food may be related to the differences in the metabolism of patients diagnosed with stable and unstable atherosclerosis.
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Efeito da sazonalidade e do nível tecnológico de unidades produtoras na qualidade e potencialidade nutracêutica do leite bovino / Effect of seasonality and technological level in quality and nutraceutical potential of milk cowVargas, Diego Prado de 16 December 2015 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The effect of technological levels of production systems and seasons in the microbiological (somatic cell count and total bacterial count) and chemical quality of milk (fat, protein, nutraceutical potentiality in relation to the fatty acids profile and pesticides) was evaluated. Through multivariate statistical techniques, it was reduced dimensionality of 1,541 units producing milk (UPM) for the 15 municipalities in the Rio Grande do Sul, Brazil, 15 homogeneous groups and evaluated three UPL per quadrant of the Cartesian plane, in different seasons, which were characterized in four levels of specialization: highly specialized, specialized, partially specialized, and not specialized. After, milk samples from each farm were collected for analysis of microbiological quality and milk chemistry, including the fatty acid profile and index for evaluating the quality lipid fraction, especially the index proposed by the study, called nutraceutical index (NI); and also, the safety of the milk in respect of 93 pesticide residues and efficacy of degradation or elimination of these pesticides front of industrial heat treatments. The production systems and the seasons jointly interfere in the fatty acids profile, and singly interfere in chemical and microbiological quality of the milk. The lowest somatic cell count and the highest protein content were observed in summer, and the specialization level of production units had inverse relationship with total bacterial count. During winter, not specialized systems produced milk with the best nutraceutical index, with the highest values of polyunsaturated fatty acids, rumenic acid (CLA, 18:2n7 - c9, t11) and t10, c12 octadecadienoic acid (CLA, 18:2n6 t10, c12). In addition, with increasing levels of specialization of UPM and especially in the spring, summer and autumn were increased agrochemical residue levels in the milk. However, the industrial heat treatments were effective to degrade or eliminate the pesticides present in refrigerated raw milk, highlighting the importance of these different binomials of time and temperature for the safety of the milk consumed. / Foi avaliada a influência de níveis tecnológicos de sistemas de produção e estações do ano na qualidade microbiológica (contagem de células somáticas e contagem bacteriana total) e química do leite (gordura, proteína, potencialidade nutracêutica em relação ao perfil de ácidos graxos e agrotóxicos), além de avaliar a eficiência dos tratamentos térmicos industriais (pasteurização e ultrapasteurização) na degradação ou eliminação dos agroquímicos presentes no leite cru refrigerado. Através de técnicas estatísticas multivariadas, reduziu-se a dimensionalidade de 1.541 unidades produtoras de leite (UPL) referentes a 15 municípios do Rio Grande do Sul, Brasil, a 15 grupos homogêneos, sendo avaliadas três UPL por quadrante do plano cartesiano, nas distintas estações climáticas, as quais foram caracterizadas em quatro níveis de especialização: altamente especializado, especializado, semiespecializado e não especializado. Posteriormente foram coletadas amostras de leite de cada propriedade, para análise da qualidade microbiológica e química do leite, incluindo o perfil de ácidos graxos e índices de avaliação da fração lipídica, destacando-se o índice proposto pelo estudo, denominado índice nutracêutico (IN); e ainda, à inocuidade do leite em relação a 93 resíduos de agrotóxicos e a eficácia de degradação ou eliminação destes praguicidas frente aos tratamentos térmicos industriais. Através dos resultados deste estudo, observa-se que os sistemas de produção e as estações do ano interferem de forma conjunta no perfil de ácidos graxos, e de forma isolada na qualidade química e microbiológica do leite. As maiores contagens de células somáticas e os menores conteúdos de proteína foram observados no verão, e o grau de especialização das unidades produtivas esteve indiretamente relacionado com a contagem bacteriana total no leite. No inverno, sistemas não especializados produziram leite com melhor IN, com os maiores teores de ácidos graxos poli-insaturados, ácido rumênico (CLA, 18:2n7 - c9, t11) e ácido t10,c12-octadecadienoico (CLA, 18:2n6 t10, c12). Em adição, com a elevação dos níveis de especialização das UPL e principalmente na primavera, verão e outono aumentaram-se os valores de resíduos de agroquímicos no leite. No entanto, os tratamentos térmicos industriais mostraram-se eficientes para degradar ou eliminar os agrotóxicos presentes no leite cru refrigerado, evidenciando-se a importância destes distintos binômios de tempo e temperatura para a inocuidade do leite consumido.
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Perfil de ácidos graxos, estabilidade oxidativa e aspectos sensoriais do leite de vacas suplementadas com óleo de linhaça na dieta e selenito de sódio injetável / Fatty acid profile, oxidative stability and sensory aspects of milk from cows fed with linseed oil in the diet and sodium selenite injectionCardozo, Leila 17 January 2011 (has links)
Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The objective of the present work was to evaluate the effect of dietary linseed oil with or without injection of sodium selenite upon fatty acid profile and oxidative stability of milk from dairy cows as well as the acceptance of the milk and the increasing order of preference by the evaluators. Chapter 1 describes the experiment where fourteen cows were allocated into four treatments: Group 1 which received daily 400 mL of linseed oil (LIN); Group 2, 400 mL of linseed oil + 0.2 mg/BW sodium selenite IM (LINSe); Group 3, untreated controls (C). The oil was supplied daily after 15 days of de single application of sodium selenite. Treatments lasted 4 weeks. Linseed oil supplemented animals produced milk with higher
levels of conjugated linoleic acid and omega 3 but also more susceptible to oxidation. The application of sodium selenite was effective to prevent premature oxidation of milk. Chapter 2 describes the acceptance and increasing order of preference by the evaluators. The evaluators
were not able to identify differences in color, odor and flavor among samples of milk from treated and control groups in relation to a known standard. The inclusion of linseed oil on the cows diet promotes and increase in CLA and omega 3 in milk, which in turn becomes more
susceptible to oxidation, requiring the use of antioxidants. Even though causing biochemicals
alterations, the addition of 400 mL daily of linseed oil in the diet of dairy cows is not capable of causing sensory changes in milk. / O presente trabalho descreve as avaliações feitas no leite de vacas leiteiras submetidas a suplementação com óleo de linhaça na dieta, com ou sem injeção de selenito de sódio, quanto ao perfil de ácidos graxos, estabilidade oxidativa e em relação às propriedades organolépticas do leite. O capítulo 1 descreve o experimento em que catorze vacas foram distribuídas em três tratamentos: Grupo 1, que recebeu diariamente 400 mL de óleo de linhaça (LIN); Grupo 2,
400 mL de óleo de linhaça + 0,2 mg / Kg de selenito de sódio IM (LINSe) e Grupo 3 controles não tratados (C). O óleo foi fornecido diariamente após 15 dias da aplicação única
de selenito de sódio, e o experimento teve duração de quatro semanas. Foram feitas análises do perfil de ácidos graxos e de reações ao ácido tiobarbitúrico, que mede a estabilidade
oxidativa do produto. Os animais suplementados com o óleo de linhaça produziram leite com altos níveis de ácido linoleico conjugado e de ômega 3, contudo, mais suscetível à oxidação.
A aplicação injetável de selenito de sódio mostrou-se eficaz ao impedir a oxidação prematura do leite. O capítulo 2 descreve o experimento onde se verificou a aceitação e a ordem crescente de preferência pelos avaliadores, de amostras de leite, através de análises de cor, odor e sabor. Catorze vacas foram distribuídas em três tratamentos: Grupo 1, que recebeu diariamente 400 mL de óleo de linhaça (LIN), Grupo 2, 400 mL de óleo de linhaça + 0,2 mg /Kg de selenito de sódio IM (LINSe) e Grupo 3 controles não tratados (C). O óleo foi fornecido diariamente após 15 dias da aplicação única de selenito de sódio, e o experimento teve duração de dez semanas. O resultado deste estudo foi de que os avaliadores não foram capazes de identificar diferenças de cor, odor e sabor entre as amostras de leite dos grupos tratados e do controle, em relação a um padrão conhecido. Assim, concluiu-se que a inclusão do óleo de linhaça na dieta de vacas leiteiras resulta em aumento do CLA, ômega 3 e consequentemente da oxidação do leite, necessitando assim o uso de substâncias antioxidantes ou promotores antioxidantes, como o selenito de sódio injetável para retardar a oxidação. Entretanto, a inclusão de 400 mL diários de óleo de linhaça na dieta de vacas leiteiras não é capaz de provocar alterações sensoriais no leite.
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