A radiação ultravioleta ao atingir os seres humanos em grande quantidade e durante uma longa exposição pode provocar danos específicos ao DNA, sendo causa de várias lesões como o carcinoma epidermoide de lábio e a queilite actínica, que é considerada uma lesão precedente ao aparecimento da primeira. Entre os danos causados pela radiação UV está a alteração genética do TP53, provocando anomalias na proteína por ele codificada. A produção da proteína p53 somente é recrutada em situações de estresse como: radiação ionizante, hipoxia ou ativação de oncogenes, nas quais sua função é regular o ciclo celular e ativar vias de apoptose. Contudo, sabe-se que no processo de carcinogênese não somente as alterações não reparadas do DNA são responsáveis pelo aparecimento de uma lesão. Outro fator de extrema importância nesse processo são os mecanismos de apoptose, entre os quais estão as vias do Bcl2 e do Fas. A queilite actínica normalmente é classificada segundo seus graus de displasia, o que para alguns sugeriria os passos percorridos por essa lesão até o carcinoma epidermoide de lábio já que esta lesão possui um potencial de malignização. Os resultados deste trabalho demonstraram que não há diferença estatística na expressão gênica e imuno-histoquímica de p53 entre os diversos graus de displasia. Demonstraram ainda que as vias de apoptose de Bcl2 e Fas estavam ocorrendo normalmente. Sugere-se então que não há comprovação de que ocorra uma progressão para a malignização passando por todos os graus de displasia da queilite actínica tendo, todos a mesma possibilidade de se transformarem em um carcinoma epidermoide de lábio. / The long exposition of the human tissues to the ultraviolet radiation causes DNA damages and consequently several lesions might appear. Among them, lip squamous cell carcinoma and actinic cheilitis which is considered to be a condition that precedes squamous cell carcinomas. The TP53 mutation is a well-known effect of UV radiation, leading to the synthesis of an anomalous protein. The p53 production is only recruit in stress conditions like: ionizing radiation, hypoxia or oncogene activation, where it plays a role in cell cycle regulation and apoptosis activation. Apoptosis is also a fundamental mechanism associated to carcinogenesis. Bcl2 e Fas pathways are central in the regulation of this process. It is usual to classify the epithelial dysplasia degree in actinic cheilitis as a prognosticator. This type of classification suggests a one way path towards malignization. Our results have shown that there is no statistical difference in TP53 status and p53 expression among the different degrees of actinic cheilitis epithelial dysplasia and squamous cell carcinoma. Based on the findings, there is no prove that the malignant transformation occurs as the epithelial dysplasia progresses. Therefore, should be considered that any degree has the same probability to become a lip squamous cell carcinoma

A intensa exposição ao Sol sujeita o lábio, principalmente o inferior, aos danos provocados pela absorção de radiação ultravioleta (UV). O carcinoma epidermoide é a neoplasia maligna que se desenvolve nos lábios após exposição crônica prolongada aos raios UV e acredita-se que todos os casos sejam precedidos pela desordem potencialmente maligna denominada queilite actínica. Ambas as lesões são causados pelos efeitos nocivos da radiação UV agindo diretamente sobre o DNA, por meio do fenômeno da fotocarcinogênese. Nesse processo, a radiação provoca mutações que são capazes de causar a iniciação, progressão e a promoção de neoplasias. No entanto, é também importante considerar que outros eventos moleculares, além das mutações, estão envolvidos na iniciação e progressão do câncer. Alterações moleculares com ganho ou perda de função de componentes da via de sinalização Notch estão envolvidas em diferentes tipos de cânceres hematológicos e sólidos. Entretanto, a participação da sinalização Notch em câncer de lábio ainda é desconhecida. Assim, o objetivo desse trabalho foi investigar se a via Notch está relacionada às lesões de queilite actínica e de carcinoma epidermoide de lábio e sua participação na fotocarcinogênese bucal. Para isso, foram utilizados 45 casos de queilite actínica, 15 casos de carcinoma epidermoide de lábio e 05 casos de lábio com aspecto de normalidade, nos quais foi analisada a expressão de Notch1 e Jagged1 por meio da técnica de imuno-histoquímica. Os resultados demonstraram que houve perda da expressão de Notch1 em 40% dos carcinomas epidermoides de lábio, sugerindo que a expressão reduzida de Notch1 pode converter os queratinócitos a um estado ativado e imaturo. Observou-se ainda, diferença nos padrões de marcação de Nocth1 e Jagged1 nas células epiteliais sugerindo que o sinal da via Notch seja transmitido a partir de uma célula apical para uma célula basal devido a localização das células que expressam o receptor e das que expressam o ligante. Concluiu-se, assim, que os resultados imuno-histoquímicos não apontam a uma regulação diferencial da expressão da proteína Notch1 e Jagged1 em lesões UV induzidas. / The intense exposure to the sun subject the lips, particularly the lower, the damage caused by the absorption of ultraviolet (UV) radiation. The squamous cell carcinoma is a malignant tumor that develops on the lips after prolonged chronic exposure to UV rays and it is believed that all cases are preceded by potentially malignant disorder called actinic cheilitis. Both lesions are caused by the harmful effects of UV radiation acting directly on the DNA, through the phenomenon of photocarcinogenesis. In this process, the radiation causes mutations that are capable of causing the initiation, progression and promotion of cancer. However, it is also important to consider that other molecular events, apart from the mutations are involved in the initiation and progression of cancer. Molecular abnormalities with gain or loss of Notch pathway components function are involved in several types of hematological and solid cancer. However, the participation of Notch signaling in lip cancer is still unknown. The objective of this study was to investigate whether the Notch pathway is related to injuries actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lip and participation in oral photocarcinogenesis. For this, were used 45 cases of actinic cheilitis, 15 cases of squamous cell carcinoma of the lip and lip 05 cases with normal aspect in which we analyzed the expression of Notch1 and Jagged1 by immunohistochemistry. The results showed loss of Notch1 expression in 40% of squamous cell carcinomas of the lip, suggesting that reduced expression of Notch1 can convert to an activated keratinocytes and immature state. There was also a difference in labeling patterns of Notch 1 and Jagged1 epithelial cells suggesting that the Notch pathway signal is transmitted from an apical cell to a basal cell due to localization of cells expressing the receptor and expressing the ligand. In summary, the immunohistochemical results do not show a differential regulation of Notch 1 and Jagged1 expression in UV induced lesions.

A localização da podoplanina e da ezrina nas células malignas sugere uma ligação dessas proteínas nos processos de migração e invasão tumoral, ativadas mediante a fosforilação de Rho-A. O objetivo desse estudo foi avaliar a distribuição e a correlação da podoplanina, da ezrina e da Rho-A em 91 carcinomas espinocelulares de lábio inferior, e verificar a associação dessas proteínas com as variáveis clínicas e patológicas, com a evolução e com o prognóstico dos pacientes. Os pacientes foram analisados quanto ao gênero, idade, tabagismo, etilismo, classificação pelo sistema TNM, tratamento, ocorrência de recidivas locorregionais, segundo tumor primário, além da presença de embolização vascular, infiltração perineural, muscular, glandular e comprometimento linfonodal histopatológico. Analisou-se também as expressões imuno-histoquímicas de podoplanina, ezrina e Rho-A no front de invasão tumoral e o índice de malignidade tumoral. A associação entre a podoplanina, a ezrina e a Rho-A com as variáveis clínico-patológicas e a correlação entre as proteínas foram analisadas pelos testes do qui-quadrado e de Spearman, respectivamente. A análise da sobrevivência global em 5 e 10 anos foi feita pelo estimador produto-limite Kaplan-Meier e a comparação da curva de sobrevivência pelo teste log-rank. Os resultados demonstraram uma forte expressão de podoplanina, de ezrina e de Rho-A no front de invasão dos carcinomas espinocelulares de lábio inferior. Houve uma associação significativa entre a expressão citoplasmática de podoplanina com o etilismo (p=0,024), com a recidiva locorregional (p=0,028) e com comprometimento linfonodal histopatológico (p=0,010), porém não foi detectada nenhuma associação significativa entre a ezrina e a Rho-A com as variáveis clínicas e microscópicas analisadas. Uma correlação positiva e estatisticamente significativa entre a expressão de podoplanina membranosa (p=0,000 e r =0,384) e citoplasmática (p=0,000 e r=0,344) com a expressão de ezrina, e da podoplanina membranosa com a expressão de Rho-A (p=0,006 e r=0,282) foi detectada. Nenhuma das três proteínas se mostrou fator de prognóstico significativo para os pacientes com câncer de lábio. Concluímos que a forte expressão membranosa de podoplanina nos carcinomas espinocelulares de lábio inferior pode ajudar a identificar pacientes com menor risco de recidiva locorregional. Além disso, a correlação entre as expressões da podoplanina, da ezrina e da Rho-A pelas células neoplásicas sugere uma participação conjunta destas proteínas nos processos de movimentação celular e invasão tumoral do câncer de lábio. / Immunolocalization of podoplanin and ezrin suggests a connection between these proteins in migration and tumoral invasion process, activated through Rho-A phosphorylation. The aim of this study was to evaluate the distribution and the correlation of podoplanin, ezrin and Rho-A in 91 squamous cells carcinomas of the lower lip and to verify its association with clinical and pathological features, evolution and prognostic of the patients. Patients were analyzed concerning gender, age, tobacco, alcohol, TNM classification, local and regional recurrences, second primary tumor, perineural, muscle and glandular infiltration, and histopahological lymph node metastasis. The association of podoplanin, ezrin and Rho-A expressions at tumoral invasion front and histological risk assessment of tumors were verified by chi-square test. The association between podoplanin, ezrin and Rho-A expressions with clinical and pathological variables, and the correlation of these variables were analyzed by chi-square and Spearman test, respectively. Overall survival in 5 and 10 years was calculated by Kaplan Meier method and overall curves were compared by log rank test. The results showed strong expression of podoplanin, ezrin and Rho-A at tumoral invasion front of squamous cell carcinomas of the lower lip. A significant association of strong cytoplasmic podoplanin expression and alcoholism (p=0,024), local recurrences (p=0,028) and lymph node metastasis (p=0,010) was found, although ezrin and Rho-A expressions were not associated with clinical and microscopic features analyzed. A statistically significant correlation between membranous (p=0,000 e r =0,384) and cytoplasmic (p=0,000 e r=0,344) podoplanin expressions and ezrin, and membranous podoplanin and Rho-A (p=0,006 e r=0,282) was observed. None of the proteins analyzed can be considered as prognostic factor for lip cancer. We can conclude that strong membranous podoplanin expression in squamous cell carcinoma of the lower lip can help to identify patients with lower risk of local and regional recurrences. Furthermore, the correlation of podopolanin, ezrin and Rho-A expressions suggest a cooperative participation in cell movement and tumoral invasion.

Um dos objetivos da pesquisa científica, atualmente, é encontrar biomarcadores que possam auxiliar na definição da probabilidade de progressão das lesões orais displásicas, e ainda sejam capazes de identificar os principais agentes moleculares envolvidos na carcinogênese de um determinado tipo de tumor. Assim, o objetivo deste estudo foi investigar a expressão de β-catenina, ciclina D1 e Ki-67 em 15 espécimes de epitélio oral normal, 45 queilites actínicas displásicas e em 30 carcinomas espinocelulares de lábio. Essa amostra foi constituída por pacientes tratados na Faculdade de Medicina de Botucatu (Brasil) e no Hospital Clínico San Cecílio de Granada (Espanha). O grau de displasia epitelial e de diferenciação tumoral foi classificado com base nos critérios definidos pela Organização Mundial da Saúde. A avaliação dos biomarcadores foi realizada por meio da técnica imunohistoquímica, dividindo a espessura do epitélio em quatro compartimentos (basal, suprabasal, terço médio e terço superior) para o grupo controle e para as queilites actínicas e em três compartimentos (basal, suprabasal e região interna) para o grupo dos carcinomas espinocelulares de lábio. Para a comparação da média de expressão de cada marcador, nas diferentes localizações do epitélio foi utilizado o teste estatístico de Kruskal-Wallis. Para a correlação da expressão dos três marcadores entre os grupos foi utilizada a correlação de Spearman, com nível de significância de 5%. Os resultados demonstraram uma perda discreta da expressão membranosa de β-catenina na camada basal das queilites actínicas com displasia epitelial intensa (Cis) e nos carcinomas espinocelulares de lábio, assim como uma expressão citoplasmática e nuclear, discreta e diretamente proporcional à desorganização epitelial nas camadas basal e suprabasal das queilites actínicas e carcinomas espinocelulares de lábio. Notou-se também um aumento da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada basal à medida que aumentava a desorganização epitelial. Houve uma associação estatisticamente significativa da expressão de ciclina D1 e Ki-67 na camada suprabasal do grupo controle (p=0,030) e das queilites actínicas (p=0,001) e ainda na região interna dos carcinomas espinocelulares de lábio (p=0,000). Não houve correlação significativa entre as expressões nucleares de ß-catenina e de ciclina D1. Nossos resultados reforçam que a β-catenina, a ciclina D1 e o Ki-67, podem ser utilizados como biomarcadores preditivos para o câncer de lábio. Além disso, sugerem que a β-catenina e a ciclina D1 participam da carcinogênese labial, em eventos independentes da via de sinalização/Wnt. / One of the goals of scientific research today is to find predictive biomarkers that can help define the probability of progression of dysplastic oral lesions, and are still able to identify key molecular agents involved in the carcinogenesis of a particular type of tumor. The objective of this study was to investigate β-catenin, cyclin D1 and Ki-67 expression in 15 specimens of normal oral epithelium, 45 dysplastic actinic cheilitis and 30 squamous cell carcinoma of the lip. This sample consisted of patients treated at the Botucatu Medicine School (Brazil) and the Clinical Hospital San Cecilio of Granada (Spain). The degree of epithelial dysplasia and tumor differentiation was classified based on the criteria defined by the World Health Organization. The evaluation of biomarkers was performed by immunohistochemical technique, dividing the thickness of the epithelium into four compartments (basal, suprabasal, middle third and upper third) for the control group and actinic cheilitis and three compartments (basal, suprabasal and inner region) to the group of squamous cell carcinoma of the lip. For comparing the average expression of each marker in different locations of the epithelium we used the statistical test of Kruskal-Wallis. For the correlation of the three markers expression between the groups was used Spearman, with 5% significance level. The results showed a slight loss of membranous expression of β-catenin in the basal layer of actinic cheilitis with severe epithelial dysplasia (Cis) and squamous cell carcinoma of the lip, and a cytoplasmic and nuclear expression, slight and directly proportional to the epithelial disorganization in layers basal and suprabasal of actinic cheilitis and squamous cell carcinoma of the lip. It was also noted an increase in expression of cyclin D1 and Ki-67 in the basal layer as increased epithelial disorganization. There was a statistically significant association of cyclin expression D1 and Ki-67 in the suprabasal layer of the control group (p=0.030) and actinic cheilitis (p=0.001) and also in the inner region of squamous cell carcinoma of the lip (p=0.000). There was no significant correlation between the nuclear expression of ß-catenin and cyclin D1. Our results emphasize that β-catenin, cyclin D1 and Ki-67 can be used as predictive biomarkers for lip cancer. Moreover, they suggest that β-catenin and cyclin D1 acts on the lip carcinogenesis, in independent events signaling pathway/Wnt.

Para se avaliar a cronologia, a seqüência de erupção e a prevalência de agenesias dentárias em indivíduos portadores de fissura transforame incisivo unilateral. examinou-se 477 pacientes regularmente matriculados no HRAC - USP, brasileiros, leucodermas, de ambos os sexos, na faixa etária de 5 a 14 anos. Foram realizados exames clínico e radiográfico. A cronologia e a seqüência de erupção foram estabelecidas para cada sexo. Os indivíduos do sexo feminino mostraram, para todos os dentes superiores e inferiores, idade média de erupção menor em relação aos indivíduos do sexo masculino. O incisivo lateral e o canino, ambos superiores e adjacentes à fissura apresentaram idade média de erupção significantemente maior em relação aos seus homólogos do lado não fissurado. A prevalência de agenesias dentárias foi de 63,86% para o sexo feminino e de 50,5% para o sexo masculino, sendo estatisticamente significante. Os indivíduos portadores de fissura apresentaram idade média de erupção maior em relação aos indivíduos não fissurados para a maioria dos dentes permanentes, em todos os hemiarcos e em ambos os sexos. / Clinical and radiographic examination of 477 patients with unilateral cleft lip and palate, age 5 to 14 years, were performed to determine the chronology, sequence of eruption, and frequency of missing permanent teeth. Female subjects showed a lower mean age of tooth eruption than males. Superior lateral incisors and canines on the affected side showed mean age of eruption significantly higher than their similar on the non-affected side. The frequency of hypodontia was significant higher in girls (63,86%) than in boys (50,5%). The mean tooth eruption age for cleft lip and palate patients compared with the general population was delayed for most permanent teeth, on all quadrants and both sex.

Objetivos: Verificar a ocorrência de emissões otoacústicas evocadas por estímulo transiente (EOAT) em crianças com fissura labiopalatina (FLP) e associar esses resultados com os da entrevista audiológica (EA), medidas de imitância acústica (IMIT), audiometria de observação comportamental (AOC) e audiometria de reforço visual (VRA). Local: Setor de Fonoaudiologia e de Genética Clínica - HRAC - USP. Participantes: 82 crianças com FLP não operada, de ambos os gêneros, idade entre 3 e 12 meses. Intervenções: EA, meatoscopia, AOC, VRA, IMIT, EOAT. Resultados: Os achados mostraram: presença de indicadores de risco, além da FLP, em 77% das crianças do grupo 1 (fissura transforame e pós-forame incisivo, N=48), 52% do grupo 2 (fissura pré-forame incisivo, N=29) e 40% do grupo 3 (fissura de palato submucosa, N=5); maior ocorrência de alteração na IMIT nas crianças com fissura transforame e pós-forame incisivo e a partir dos 6 meses de idade; AOC alterada em 50% das crianças do grupo 1 e 14% do grupo 2; maior ocorrência de alteração na VRA nas crianças do grupo 1, seguidas pelo grupo 2; ocorrência de EOAT em 1% das crianças do grupo 1, 55% do grupo 2 e 70% do grupo 3. Conclusões: verificamos maior ocorrência de EOAT nas crianças com fissura de palato submucosa e pré-forame incisivo; a associação entre os resultados da EOAT com os dos outros procedimentos, mostrou diferença estatisticamente significante na associação das EOAT com as IMIT das crianças de 3 a 6 meses de idade dos grupos 2 e 3 ; o uso das EOAT não mostrou ser um método adequado para a avaliação da audição de bebês com fissura de palato não operada. / Objectives: To determine the occurrence of transient evoked otoacoustic emissions evoked (TEOA) in infants with cleft lip (CL)and palate (P) and to correlate these results with those of the audiologic interview (AI), acoustic imitance (IMIT) measurements, behavioral observation audiometry (BOA), and visual reinforcement audiometry (VRA). Place: Sector of Speech Pathology and Audilogy and Clinical Genetics - HRAC - USP. Participants: 82 infants of both sexes with non-operated CLP aged 3 to 12 months. Interventions: AI, meatoscopy, BOA, VRA, IMIT, TEOA. Results: The findings showed the presence of risk indicators in addition to CLP in 77% of group 1 infants (CLP, N=48), 52% of infants of group 2 (CL, N=29 ) and 40% of children in group 3 (submucous cleft, N=5 ); a more frequent occurrence of altered IMIT in children with CLP and CP and starting at 6 months of age; altered BOA in 50% of group 1 children and 14% of group 2 children; a more frequent occurrence of altered VRA in group 1 children, followed by group 2; occurrence of EOAT in 1% of group 1 children, in 55% of group 2 children, and in 70% of group 3 children. Conclusions: we detected a more frequent occurrence of EOAT in children with submucous and CL. TEOA was significantly correlated with IMIT in children aged 3 to 6 months of groups 2 and 3; the use of TEOA did not prove to be an adequate method to assess the hearing of babies with non-operated CP.

Made available in DSpace on 2016-04-28T14:59:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2009 - Isabel das Neves Oiticica de Carvalho.pdf: 531618 bytes, checksum: e6976c9635271ba2b019d8da4188b04d (MD5) Previous issue date: 2009-02-18 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / This test was conducted to evaluate residual soybean oil (comes from restaurants after the frying process) as a source of fat in the feeding crossbred goats (Saanem X Boer) were distributed in completely randomized design. Treatments evaluated included levels of 0; 2,5; 5 e 10% of oil in the concentrate dry matter. The performance was evaluated by average daily weight gain, slaughter weight and measures of carcass yield and commercial joint: shoulder, ham, loin, rib, neck and the parameters: carcass weight, length of the leg, cushion thickness, weight and hot carcass yield, head weight, legs, hard and v?sceras, slaughter yield, rib eye area and fat thickness. Twenty animals was evaluated weight gain and slaughter weight. For determination the carcass yield and this parameters sixteen goats were slaughtered. There was no difference between weight gain, slaughter weight and carcass parameters. Yield rib was higher when added 5% soybean oil. There was difference in more intake when 10% soybean oil was included than 2,5%. Levels of soybean oil were 10% does not change weight gain, carcass yield compared to did not receive. Inclusion of the soybean oil cause the reduction of production costs with the decrease animal intake and in addition to reducing pollution caused by this by product of the food industries. / O trabalho foi conduzido para avalia??o do efeito de uma fonte de lip?deo, o ?leo de soja residual (?leo oriundo de restaurantes ap?s processo de fritura), na alimenta??o de cabritos mesti?os (Saanen x Boer) distribu?dos em delineamento inteiramente casualizado. Foram testados quatro n?veis de inclus?o de ?leo sobre a mat?ria seca total do concentrado (0%; 2,5%; 5% e 10%), para avalia??o do ganho de peso m?dio di?rio (GMD), peso de abate (PA) e para an?lise de cortes comerciais (paleta e rendimento de paleta; pernil e rendimento de pernil; lombo e rendimento de lombo; costilhar e rendimento de costilhar; carr? e rendimento de carr?; pesco?o e rendimento de pesco?o) e de par?metros da carca?a (comprimento de carca?a; comprimento de perna; espessura de cox?o; peso e rendimento de carca?a quente; peso de cabe?a, pernas, cora??o e v?sceras; rendimento de abate; ?rea de olho de lombo e espessura de gordura de cobertura). Foram utilizados 20 cabritos para avalia??o de ganho de peso e peso de abate, desses 20 cabritos, 16 foram abatidos para as an?lises de cortes comerciais e de par?metros da carca?a. Os resultados foram submetidos ao teste de Newman Keuls a 5% de probabilidade. N?o foram observadas diferen?as de ganho de peso m?dio di?rio, peso de abate e par?metros de carca?a e entre os animais submetidos aos diferentes tratamentos, j? para os par?metros de cortes comerciais, apenas o rendimento de costilhar diferiu entre os tratamentos, sendo o maior rendimento de costilhar encontrado com 5% de adi??o de ?leo na mat?ria seca total do concentrado. Houve diferen?a de consumo alimentar entre os tratamentos, sendo o menor consumo atribu?do ao grupo que recebeu 10% de inclus?o de ?leo e o maior consumo para o grupo que recebeu 2,5% de inclus?o de ?leo na mat?ria seca do concentrado. Esses resultados indicam que a inclus?o de ?leo de soja na alimenta??o de cabritos de corte pode ser recomendada at? o n?vel de 10% de inclus?o sobre a mat?ria seca total do concentrado, sem alterar o ganho de peso, o rendimento e as caracter?sticas da carca?a, em compara??o com os cabritos que n?o recebem ?leo de soja. O ?leo de soja residual tamb?m promove a redu??o dos custos de produ??o uma vez que diminui o consumo de alimento pelos animais submetidos a essa dieta, al?m de diminuir a polui??o causada por esse subproduto das ind?strias aliment?cias.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-06-09T16:27:04Z No. of bitstreams: 1 ISABELE DA COSTA ANGELO.pdf: 4140152 bytes, checksum: bbd35489ea24b040be77df36cd797987 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T16:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ISABELE DA COSTA ANGELO.pdf: 4140152 bytes, checksum: bbd35489ea24b040be77df36cd797987 (MD5) Previous issue date: 2011-03-03 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / The study evaluated the protein and lipid profiles of Rhipicephalus microplus engorged females after infection by Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana and Fusarium oxysporum. The treatments were immersion or inoculation of conidial suspension in R. microplus. The hemolymph was collected 24 and 48 hours after treatment. The cell-free hemolymph was separated of hemocytes by centrifugation and hemocytes resuspended in phosphate buffer pH 7.2. The amount of total protein was determined in both fractions of hemolymph and hemocytes were quantified. The cell-free hemolymph was filtered through a 100 kDa and 10 kDa membranes, and analyzed by electrophoresis and liquid chromatography (HPLC). The proteome of cell-free hemolymph (treatment by injection) was evaluated by 2DPAGE. Changes were observed in amount total protein and the amount of hemocytes, but no difference was observed in the electrophoretic profile (1D-PAGE) of the cell-free hemolymph. In haemocytes, the entomopathogens reduced the amount of serpins, while F. oxysporum caused increased. In 2D-PAGE variations were observed in both expression and presence/absence of protein between the groups. The cell-free hemolymph antimicrobial activity was tested against Escherichia coli and Staphylococcus aureus and against the fungus used in the treatment of engorged ticks. The hemolymph collected 48 hours after the immersion treatment with B. bassiana apresented activity anti-B. bassiana with 48 hours of evaluation. This hemolymph was subjected to Superose column to HPLC and peak was collected and analyzed on the analytical column C18. The fractions were collected from the C18 and its apresented activity anti-B. bassiana, but showed no activity against Candida albicans. These fractions were analyzed by Maldi-Tof and most of them had in common an ion with m/z 1,119.5; however, other ions may be involved with this activity antimicrobial. The lipids present in cell-free hemolymph, in the hemocyte and fat body were extracted and analyzed by thin layer chromatography (TLC) or HPTLC for neutral lipids and phospholipids. The classes of neutral lipids in the cell-free hemolymph were cholesterol ester, cholesterol (CHO) and fatty acids (FA), which have varied depending on the fungus used, type of treatment and observation time. Phospholipids found were phosphatidylcholine and phosphatidylethanolamine, its were not significantly altered after the fungal infection. In hemocytes, the same classes of lipids were found and B. bassiana modified phospholipids, while M. anisopliae s.l. altered FA and CHO. The fat body showed, in addition to these classes of neutral lipids, the triglycerides, which increased significantly 48 hours after inoculation with M. anisopliae s.l. The lipase activity in fat body was measured and it was demonstrated that increased activity 48 hours after inoculation, mainly in the group inoculated with Metarhizium. Therefore, the results showed alterations related to the proteins expression in the hemocytes and the cell-free hemolymph after inoculation with fungi, immunosuppression of hemocytes and antimicrobial peptides induction after infection with B. bassiana, besides changes in the lipid profile of R. microplus after infection. However, further studies are necessary to understand these changes. / O trabalho avaliou os perfis prot?ico e lip?dico de f?meas ingurgitadas de Rhipicephalus microplus ap?s infec??o com Metarhizium anisopliae s.l., Beauveria bassiana ou Fusarium oxysporum. Os tratamentos foram imers?o ou inocula??o da suspens?o conidial em R. microplus. A hemolinfa foi coletada 24 e 48 horas ap?s os tratamentos. O plasma foi separado dos hem?citos por centrifuga??o e os hem?citos resuspensos em tamp?o fosfato pH 7,2. A concentra??o de prote?na total foi determinada em ambas as fra??es da hemolinfa e os hem?citos quantificados. O plasma da hemolinfa foi filtrado em membrana de 100 kDa e 10 kDa, sendo analisados por eletroforese e cromatografia l?quida de alta efici?ncia (CLAE). O proteoma do plasma da hemolinfa (tratamento por inocula??o) foi avaliado por gel 2D. Foram observadas varia??es na quantidade de prote?na total de ambas as fra??es da hemolinfa, na quantidade de hem?citos bem como na intensidade de prote?nas/pept?deos expressos no plasma da hemolinfa. Nos hem?citos, os entomopat?genos reduziram a quantidade de serpinas, enquanto F. oxysporum causou aumento. No gel 2D foram observadas varia??es na express?o bem como na aus?ncia/presen?a de prote?nas entre os grupos. O plasma da hemolinfa teve sua atividade antimicrobiana testada contra Escherichia coli e Staphylococcus aureus e contra o fungo utilizado no tratamento das f?meas ingurgitadas. A hemolinfa coletada 48 horas ap?s o tratamento por imers?o com B. bassiana apresentou atividade anti-B. bassiana com 48 horas de avalia??o. Esta hemolinfa foi submetida ? coluna Superose de CLAE e o pico coletado analisado na coluna anal?tica C18. As fra??es coletadas da C18 apresentaram atividade anti-B. bassiana, por?m n?o apresentaram atividade contra Candida albicans. Essas fra??es foram analisadas por Maldi-Tof e a maioria delas apresentou um ?on com raz?o m/z 1.119,5; no entanto, outros ?ons podem estar envolvidos com essa atividade antimicrobiana. Os lip?deos presentes no plasma da hemolinfa, nos hem?citos e no corpo gorduroso foram extra?dos e analisados por cromatografia em camada delgada (CCD) ou CCD de alta performance para lip?deos neutros e fosfolip?deos. As classes de lip?deos neutros encontradas no plasma da hemolinfa foram colesterol-?ster, colesterol (CHO) e ?cidos graxos (AG), que sofreram altera??es em fun??o do fungo utilizado, tipo de tratamento e tempo de observa??o. Os fosfolip?deos encontrados foram fosfatidilcolina e fosfatidiletanolamina, que n?o foram significativamente alterados ap?s a infec??o f?ngica. Nos hem?citos, as mesmas classes de lip?deos foram encontradas e B. bassiana alterou os fosfolip?deos, enquanto M. anisopliae s.l. alterou os AG e CHO. O corpo gorduroso apresentou, al?m destas classes de lip?deos neutros, o triacilglicerol, que aumentou significativamente 48 horas ap?s a inocula??o com M. anisopliae s.l. A atividade lipase no corpo gorduroso foi mensurada, sendo evidenciado um aumento 48 horas ap?s a inocula??o, principalmente no grupo inoculado com Metarhizium. Portanto, os resultados demonstraram altera??es na express?o de prote?nas no plasma da hemolinfa e nos hem?citos ap?s inocula??o com os fungos, imunossupress?o dos hem?citos, indu??o de pept?deos com atividade antimicrobiana ap?s infec??o com B. bassiana, al?m de altera??es no perfil lip?dico de R. microplus ap?s infec??o. No entanto, maiores estudos s?o necess?rios para o entendimento dessas altera??es.

Submitted by Sandra Pereira (srpereira@ufrrj.br) on 2016-09-09T11:45:13Z No. of bitstreams: 1 2011 - Vanessa de Almeida Raia.pdf: 1415435 bytes, checksum: 6553cdee2bd5a5f2a363cb3cd11f812d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-09T11:45:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011 - Vanessa de Almeida Raia.pdf: 1415435 bytes, checksum: 6553cdee2bd5a5f2a363cb3cd11f812d (MD5) Previous issue date: 2011-01-28 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / To fill some gaps about the intrinsic mechanisms of the biology of oviposition of R. (B.) microplus, we evaluated the concentration of lipids and carbohydrates, as well as the variability of lipid in eggs per day of posture. For this, engorged females weighing between 151 and 360 mg were placed in controlled environment (27 ? 1 ? C, 80 ? 5% RH, darkness), and after beginning of laying, three samples of the eggs pool were daily collected, packed and preserved at -20 ? C. Samples 1 and 2, weighing 50 mg each, were used to quantitate lipids and glucose, and to evaluate the lipid profile, respectively; and the third sample, containing 1 g of eggs, was used to quantitate glycogen. The determination of total lipids was performed using phospho-vanillin reagent, while the concentrations of cholesterol, triglycerides and glucose were obtained by colorimetric determination using endpoint enzymatic kit. The level of glycogen was performed using the acid 3,5 dinitrosalicylic reactive . The results were analyzed by nonparametric Kruskal-Wallis and the relationship between the concentrations of substrates and the days of laying was assessed by polynomial regression. There was no significant difference in the concentrations of these substrates in eggs from different days of oviposition, as there was no relationship of these concentrations with the days of laying. After lipid extraction, the samples were performed in thin layer chromatography, high-performance (HPTLC) for neutral lipids and phospholipids. Then, densitometry was performed using the Image Master Total Lab and the daily percentage of each lipid in the samples was calculated. Among the neutral lipids were identified the hydrocarbons, esterified cholesterol, triglycerides, fatty acids, free cholesterol and diacylglycerol. Of these, the cholesterol ester showed the highest variation, it was not detected in eggs at the fifth day of oviposition. Among the phospholipids were detected the phosphatidic acid, phosphatidylethanolamine, phosphatidylcholine and sphingomyelin fosfatidilinusitol. This latter was absent in eggs of the seventh day onwards. Thus, the different rates of hatchability of eggs from different laying days cannot be attributed to the concentrations of total lipids, although some specific lipids such as cholesterol ester and sphingomyelin might influence the difference in larval hatchability, more researches are needed for clarify the role of these substrates in embryogenesis / Objetivando preencher algumas lacunas sobre os mecanismos intr?nsecos da biologia da oviposi??o de R. (B.) microplus, foram avaliadas as concentra??es de lip?dios e carboidratos, assim como a variabilidade lip?dica dos ovos postos em diferentes dias de postura. Para isso, f?meas ingurgitadas pesando entre 151 e 360 mg foram colocadas em estufa biol?gica sob condi??es controladas (27 ? 1oC, 80 ? 5% UR, escotofase), e ap?s in?cio da postura, tr?s amostras di?rias do ?pool? de ovos foram coletadas, acondicionadas e preservadas a ?20?C. As amostras 1 e 2, pesando 50 mg cada, foram utilizadas para dosar lip?dios e glicose, e avaliar o perfil de lip?dios, respectivamente; a amostra 3, contendo 1 g de ovos foi utilizada para dosar glicog?nio. A dosagem de lip?dios totais foi realizada atrav?s do reagente de fosfo-vanilina, enquanto as concentra??es de colesterol, triglicer?dios e glicose foram obtidas atrav?s de determina??o colorim?trica com a utiliza??o de kit enzim?tico de ponto final. A dosagem de glicog?nio foi realizada atrav?s do reativo ?cido 3,5 dinitrosalic?lico. Os resultados das dosagens foram analisados pelo teste n?o param?trico de Kruskal-Wallis e a rela??o entre as concentra??es dos substratos e os dias de postura foi avaliada atrav?s de Regress?o polinomial. N?o foram constatadas diferen?as significativas entre as concentra??es destes substratos nos ovos de diferentes dias de oviposi??o, assim como n?o houve rela??o dessas concentra??es com os dias de postura. Ap?s extra??o dos lip?dios das amostras, foram realizadas cromatografias em camada delgada de alto desempenho (HPTLC) para lip?dios neutros e fosfolip?dios. Em seguida, a densitometria foi realizada atrav?s do programa Image Master Total Lab e o percentual di?rio de cada lip?dio nas amostras foi calculado. Dentre os lip?dios neutros foram identificados hidrocarbonetos, colesterol esterificado, triglicer?dios, ?cidos graxos, colesterol livre e diacilglicerol. Destes, o colesterol esterificado foi o que apresentou maior varia??o, n?o sendo detectado nos ovos do quinto dia de oviposi??o. Dentre os fosfolip?dios foram detectados o ?cido fosfat?dico, fosfatidiletanolamina, fosfatidilcolina, fosfatidilinusitol e esfingomielina. Sendo este ?ltimo ausente nos ovos do s?timo dia de postura em diante. Assim, as diferentes taxas de eclodibilidade por dia de postura n?o podem ser atribu?das ?s concentra??es de lip?dios totais, embora alguns lip?dios espec?ficos como o colesterol esterificado e a esfingomielina possam ter influ?ncia na diferen?a de eclodibilidade larval, sendo necess?rios mais estudos para eclarecer o papel desses substratos na embriog?nese

Objetivo: Descrever e analisar a visão dos professores de ensino regular a respeito da inclusão da criança com fissura labiopalatina na classe comum; caracterizar os professores quanto a formação e experiência profissional; verificar o conhecimento dos professores sobre FLP e experiências com crianças com estas malformações e verificar o conhecimento dos mesmos sobre inclusão escolar. Modelo: Aplicação do questionário que teve como base o questionário utilizado por Buffa (2002), abrangendo questões referentes à educação inclusiva mediante o seguinte zoneamento: caracterização dos professores quanto à formação e experiência profissional; conhecimento dos professores sobre FLP e experiências com crianças com estas malformações; conhecimento dos professores sobre inclusão escolar. Local de execução: Os questionários foram entregues pessoalmente nas escolas da rede estadual, municipal e particular. Participantes: Responderam o questionário 159 (12,5% do universo) professores que nunca atuaram, que atuaram ou que atuam com crianças com FLP, sendo 46 da rede estadual, 43 da rede municipal e 70 da rede particular. Avaliação: Foi verificada a visão dos professores a respeito da inclusão da criança com FLP em classe comum do ensino regular, sua formação e experiência com estas crianças e o conhecimento dos mesmos sobre FLP e inclusão escolar. Resultados: As respostas mostraram que 94,97% (151) dos professores responderam favoravelmente à inclusão dessas crianças; 84,91% (135) têm formação em nível superior, sendo que 55,35% (88) são graduados em Pedagogia. Mesmo com esta formação, 76,73% (122), dos professores sentem-se despreparados para receber uma criança com FLP em sua sala de aula, apesar de 25,79% (40) deles já terem atuado ou estarem atuando com estes alunos, cujas respostas foram analisadas separadamente. Observou-se que 95,30% (88) dos professores têm pouco conhecimento sobre as FLP, e 72,96% (116) ainda não perceberam a inovação dos princípios da educação inclusiva que defendem o direito de todos os alunos estarem juntos aprendendo e sem nenhum tipo de discriminação. Conclusão: Os resultados permitiram concluir que: a visão dos professores de ensino regular a respeito da inclusão da criança com FLP na classe comum é favorável, sendo aceita pela maioria dos professores, independente da criança estar operada ou não; a maioria dos professores tem formação em nível superior e em Pedagogia, com atuação entre 10 e 20 anos, sem preparo para lidar com a diversidade em sala de aula; os professores de uma forma geral têm pouco conhecimento sobre fissura labiopalatina, e pouca atuação profissional com crianças com esta malformação; os professores em sua maioria têm pouco conhecimento sobre inclusão escolar. / Objective: To describe and analyze the perception of regular education teachers towards the inclusion of cleft lip and palate children in regular classroom; to characterize the teachers regarding their instruction and professional experience; to verify the teachers knowledge on CLP and their experience with children with these malformations and to verify their knowledge on scholar inclusion. Model: Application of a questionnaire that was based on the questionnaire used by Buffa (2002), comprising questions regarding inclusive education through the following areas: teachers characterization regarding instruction and professional experience; teachers knowledge on CLP and experience with children with these malformations; teachers knowledge on scholar inclusion. Site: The questionnaires were personally delivered in the schools of the state, municipal and private network. Participants: The questionnaire was answered by 159 teachers (12.5% of the total) who either never worked, or worked or have worked with CLP children, comprising 46 teachers of state network, 43 of municipal network, and 70 of private network. Assessment: It was verified the teachers perception towards the inclusion of the CLP children in regular classroom, their instruction and experience with these children besides their knowledge on both CLP and scholar inclusion. Results: The results showed that 94.97% (151) of the teachers answered favorably to the inclusion of these children; 84.91% (135) had higher education, with 55.25% (88) graduated in Pedagogy. Even with this instruction, 76.73% (122) of the teachers felt unprepared to receive a CLP child in their classrooms, although 25.79% (40) of them either worked or have worked with these students, whose answers were separately analyzed. It was observed that 95.30% (88) of the teachers presented little knowledge on CLP, and 72.96% (116) still did not realize the innovation of the inclusive education principles, which have defended the right of all students to learn together without any type of discrimination. Conclusion: The results allowed concluding that: the perception of regular education teachers towards the inclusion of CLP children in regular classroom is favorable and it is accepted by the majority of the teachers, regardless either presence or absence of the surgery; the majority of the teachers has higher education in Pedagogy, working from 10 to 20 years, without preparing for handling with diversity in classroom; generally, teachers have both little knowledge on cleft lip and palate and little professional experience with children with this malformation; the majority of teachers has little knowledge on scholar inclusion.