Salmonella Gallinarum (SG) et Salmonella Enteritidis (SE) sont deux sérotypes génétiquement proches. Pourtant, chez la volaille, SG induit une infection systémique létale tandis que SE est responsable d’une infection systémique transitoire et d’un portage intestinal asymptomatique. De plus, SE est un sérotype ubiquiste tandis que SG est spécifique d’hôte. Outre ces différences in vivo, ces deux sérotypes présentent des différences in vitro. Nous avons montré que SG est in vitro moins invasif que SE. Ce phénotype est indépendant de l’origine aviaire ou non-aviaire des cellules en dépit du tropisme de SG pour la volaille. LeT3SS-1, le facteur d’invasion majeur chez Salmonella, est composé d’un appareil de sécrétion et des effecteurs transloqués par celui-ci. Nous avons montré que les composants du T3SS-1 sont autant exprimés chez SG que chez SE et que tous deux possèdent un appareil de sécrétion fonctionnel. Pourtant, l’étude des capacités d’invasion dépendantes du T3SS-1 suggère que ce facteur est impliqué dans le défaut d’invasion de S. Gallinarum. L’analyse des gènes codant les effecteurs transloqués par le T3SS-1 a montré qu’il existe des mutations chez SG pouvant être à l’origine de ce défaut d’invasion. / Salmonella Gallinarum and Salmonella Enteritidis are genetically closed. However, whereas SG induces lethal systemic infection in poultry, SE is responsible for transient systemic infection and asymptomatic intestinal carriage. Moreover, SE is ubiquitous whereas SG is poultry specific. These serotypes also present in vitro differences. We have shown that SG is in vitro less invasive than SE whatever the avian or non-avian cell origin, in spite of SG’s tropism for avian species. T3SS-1, the main invasion factor in Salmonella, is composed of a secretion apparatus and its translocated effectors. We have shown that T3SS-1 components a expressed in a similar way by SE and SG and both harbor a functional secretion apparatus. However, study of T3SS-1 dependent invasion abilities suggested that T3SS-1 is involved in SG’s invasion defect. Sequence analysis has revealed that SG possesses several mutations in genes encoding main T3SS-1 effectors, that could explain the low invasive phenotype.

A Salmonella sp. é uma das principais causas de doenças transmitidas por alimentos, principalmente de origem animal. Os suínos podem ser portadores assintomáticos de Salmonella sp. e, nessa condição, serem levados ao abate. Desta forma, a entrada de Salmonella sp. na cadeia de produção é uma preocupação para a indústria. Sabendo-se da importância deste microrganismo, pelo seu impacto na indústria e na saúde pública, este trabalho teve como objetivo determinar a prevalêncía de Salmonella sp. em suínos levados ao abate em um frigorífico sob inspeção federal no Rio Grande do Sul, e correlacionar com a contaminação de cortes de pernil. Para tanto, 64 amostras de conteúdo intestinal e 121 amostras de cortes de pernil coletadas em 4 visitas, foram submetidas ao isolamento e identificação de Salmonella sp. As amostras de Salmonella sp. foram avaliadas quanto a resistência a 14 antimicrobianos, através da técnica de difusão em ágar. Salmonella sp. foi isolada de 46,87% das amostras de conteúdo intestinal e de 49,59% dos cortes de pernil. Foi encontrado grande número de sorovares, sendo os mais prevalentes Panama e Bredeney. Das amostras isoladas, 60,8% apresentaram perfil de multiresistência, sendo os maiores índices de resistência a sulfonamida, ácido nalidíxico e tetraciclina. Utilizando o perfil de resistência a antimicrobianos de amostras de um mesmo sorovar forma comparadas quanto a sua similaridade e agrupadas em dendrogramas, observou-se grande diversidade nas linhagens isoladas. Os resultados demonstraram que a entrada de animais no frigorífico excretando Salmonella sp., pode contribuir para a contaminação do produto final. A diversidade de sorovares e linhagens pode representar que são várias as fontes de contaminação, tanto dos animais quanto do produto final. / Salmonella sp. is one of the main causes of food bome disease, being the products of animal origin the most often implicated in outbreaks. Pigs are often asymptomatic carriers of Salmonella sp., and the slaughter of positive animais has been a great concern for the swine industry. Thus, the introduction of Salmonella sp. in the food chain is of importance for the swine industry and for the food safety as well. The aim of this study was to evaluate the prevalence of Salmonella sp. in pigs at slaughter and to correlate with the contamination of pork processed in one slaughterhouse in Rio Grande do Sul. For this purpose, 64 samples of intestinal content and 121 samples of pork cuts, collected in 4 visits, were submitted to Salmonella isolation and identification protocol. Furthermore, the resistance profile of the isolated Salmonella strains were evaluated against 14 antimicrobials, using the agar diffusion test. Salmonella sp. was isolated from 46,87% of intestinal content samples and 49,59% of pork cuts. The isolated Salmonella strains belonged to nine different sorovars, being the sorovar Panama and Bredeney most prevalent. Most strains (60,8%) showed a multiresistance profile. Furthermore, resistance profiles against sulfonamides, nalidixic acid and tetracyclin were the most found. Using the resistance profile, strains belonging to the same sorovar were compared and dendrograms were constructed. In spite of belonging to the same sorovar and being isolated in the same visit to the slaughter plant, Salmonella strains showed a great diversity. These results demonstrated that the slaughter of pigs shedding Salmonella sp. in the feces, can result in the contamination of the final product in this slaughter plant. The diversity of sorovars and strains of Salmonella sp. indicated the multiple sources of contamination for animais and for the product.

Salmonella enterica serovar Enteritidis (S. Enteritidis) es un bacilo Gram negativo, perteneciente a la familia Enterobacteriaceae que infecta una gran variedad de hospederos, incluyendo aves de corral, roedores (ratones) y humanos. S. Enteritidis es un patógeno intracelular facultativo, capaz de invadir células epiteliales y generar una enfermedad sistémica en aves y ratones, mientras que en el hombre provoca un cuadro de enterocolitis con diarrea, fiebre y dolor abdominal. La transmisión de la bacteria al humano ocurre principalmente a través del consumo de huevos contaminados. Por su parte, la contaminación de los huevos puede ocurrir por vía transovárica (vertical) o a través de la cáscara (horizontal). En la actualidad, S. Enteritidis representa la causa mayoritaria de salmonelosis asociada a alimentos a nivel mundial y es el serovar de Salmonella aislado con mayor frecuencia en Chile. Este problema se ha tratado de abordar mediante el diseño de vacunas para aves de postura, ya sea utilizando mutantes vivas atenuadas o bacterias muertas por agentes químicos o calor. En las primeras se ha obtenido una menor colonización intestinal, en tanto que bacterias muertas no han tenido efecto alguno sobre la liberación del patógeno en las deposiciones, lo cual no es suficientemente eficaz para interferir en la transmisión del patógeno. Los mecanismos moleculares de patogenicidad utilizados por Salmonella enterica involucran una gran cantidad de genes, generalmente agrupados en regiones denominadas islas genómicas. Éstas pueden contribuir directamente a la virulencia del patógeno (islas de patogenicidad) u otorgar nuevas características que le permitan cursar un ciclo infectivo exitoso. Se piensa que existe similitud entre los mecanismos de patogenicidad utilizados por S. Enteritidis en aves y roedores y los utilizados por S. Typhimurium para causar una enfermedad sistémica en el ratón. No obstante, el papel que cumplenmuchas de las islas genómicas y de patogenicidad de S. Enteritidis en virulencia sigue siendo desconocido. Este desconocimiento, sumado a la aparición de cepas resistentes a los antibióticos empleados en el tratamiento de la enfermedad, determina que aún no se cuente con una vacuna eficaz. Considerando los antecedentes mencionados, en el presente proyecto se propuso identificar genes codificados en islas genómicas de S. Enteritidis que participaran en virulencia. Para ello se realizó un análisis global de cepas mutantes que presentaron deficiencias en la colonización de órganos internos de ratón mediante hibridaciones en un “microarreglo” genómico diseñado para Salmonella y una posterior confirmación del fenotipo por análisis de mutantes con deleciones específicas de los genes previamente identificados. Como resultado de este trabajo, se identificaron genes necesarios para la colonización de hígado y bazo en ratones BALB/c. Algunos de ellos se encontraron en islas genómicas pertenecientes a S. Enteritidis. Dentro de este grupo, existen genes que no han sido relacionados previamente con la virulencia del patógeno, como genes que codifican: un sistema de restricción y modificación de tipo I, los componentes de una fimbria no descrita en la literatura e islas genómicas que podrían codificar factores de virulencia hipotéticos. También se encontraron genes individuales y otros codificados en islas de patogenicidad conservados entre los distintos serovares de Salmonella. El análisis global de genes involucrados en la enfermedad sistémica realizada en esta tesis, permitió identificar genes o regiones genómicas específicas de S. Enteritidis que participarían en virulencia. Estos resultados ayudarán a detectar nuevos blancos para el potencial desarrollo de vacunas.

Salmonella enterica serovar Typhimurium (S. typhimurium) is a gram-negative bacteria capable of infecting a variety of warm-blooded vertebrate hosts. In humans, consumption of S. typhimurium through contaminated food or water typically leads to an acute but self-limiting gastroenteritis and oftentimes an enlargement of the spleen (splenomegaly). Splenomegaly has been attributed to the expansion of phagocytes, B and T lymphocytes, and immature CD71+Ter119+ red blood cells (RBCs). The spleen is an important organ with distinct roles in RBC recycling, the capture of blood-borne pathogens, and as a site of initiation of the adaptive immune response. The spleen has a characteristic tissue architecture composed of three compartments. The white pulp (WP), largely populated by B and T lymphocytes is surrounded by the red pulp (RP), which primarily contains F4/80+ macrophages. The border between the WP and RP, the marginal zone (MZ), is populated by MOMA+ and MARCO+ macrophages which are important for the capture of blood-borne pathogens. This precise organization of the spleen allows for efficient antigen capture and activation of adaptive immunity, due to the close proximity of antigen presenting cells and lymphocytes. It is known that Salmonella spp. infections delay the adaptive immune response in comparison to other bacteria, such as Listeria monocytogenes. Therefore, we investigated the effect of an attenuated S. typhimurium strain (÷9088) on in situ splenic organization. We utilized four-color immunofluorescence microscopy (IFM) in combination with flow cytometry to characterize the in situ changes of spleen architecture and cell population profiles during S. typhimurium infection in mice. Within the first week of infection, splenomegaly is evident and after three weeks of infection, the spleen comprises over 5% of the mouse's total body weight. During this time S. typhimurium has not been cleared from the spleen and mice are anemic with decreased pack cell volume. We confirmed previous studies that reported extramedullary erythropoiesis was a major cause of splenomegaly. However, we also show that RP F4/80+ macrophages significantly expand and take over the WP regions of the spleen, increasingly co-localizing with immature (CD71+Ter119+) and mature (CD71-Ter119+) RBC subsets. As a result of these dramatic changes in cell proportions and their in situ distribution, the splenic architecture becomes unrecognizable. The boundary between WP and RP is lost as proportions of MOMA+ macrophages of the MZ are reduced following infection. Likewise, B and T cell zones of the WP are also drastically reduced, most likely due to their increased co-localization with F4/80+ macrophages. As a result of infection, the increased cellularity of splenomegaly results in changing proportions of cell populations, potentially disrupting the link between infection and immune response. Together, these data provide further insight into the disease process of S. typhimurium infection in mice. Understanding how the changes in splenic architecture affect the adaptive immune response has implications for the design of more effective Salmonella-based vaccines and therapies.

Orientador: Angelo Berchieri Júnior / Banca: Antônio Carlos Paulillo / Banca: Carlos Tadeu Pippi Sali / Resumo: Com o objetivo de investigar a presença de Salmonella em galinhas destinadas à postura comercial, cinco lotes de aves brancas e leves, visto que em quatro deles isolou-se Salmonella ao chegarem à granja com um dia de idade, sendo examinados durante 52 semanas, através de exame bacteriológico das fezes frescas do ceco. Observou-se a presença de Salmonella no lote 1 nas 1ª, 11ª, 34ª e 42ª semanas de idade, no lote 2 nas 1ª, 4ª e 11ª semanas de idade, no lote 3 na 1ª e da 17ª à 52ª semana de idade e no lote 4, somente na 1ª semana de idade. O lote 5 que era negativo com um dia de idade, permaneceu assim durante as 52 semanas. Foram isoladas S. enterica sorovar Enteritidis e S. enterica cepa Rugosa das amostras de fezes dos quatro lotes positivos. A Salmonella enterica sorovar Infantis foi isolada nas amostras de fezes dos lotes 1, 2 e 3 e Salmonella enterica sorovar Javiana e Salmonella enterica sorovar Mbandaka foram isoladas nas amostras do lote 3. Foi realizado o exame bacteriológico de 500 ovos de cada lote, sendo que 0,2% do lote 1 e 2,0% do lote 3 estavam contaminados por S. Enteritidis e S. enterica cepa Rugosa. / Summary: The presence of Salmonella was investigated through bacteriological exams of fresh feces from cecum in five laying hen farms over a period of 52 weeks since the arrival of the day-old birds. All flocks examined were varieties of light white-egg chickens. Salmonella enterica serovar Enteritidis and S. enterica rough strain were isolated from the transporting boxes of the day-old birds received by four farms. In the farm number five Salmonella was not detected in the transporting boxes and also was not detected in the feces over the 52 weeks. In the farm 01 Salmonella was isolated from the feces examined at 1st, 11th, 34th and 42nd weeks; in the farm 02 it was detected at 1st, 4th and 11th weeks; in the farm 03 Salmonella was isolated in the first week and from the 17th to 52nd week. In the farm 04 Salmonella was isolated from the feces collected in the first week only. Besides S. Enteritidis and the rough strains, S. enterica serovar Infantis, S. enterica serovar Mbandaka and S. enterica serovar Javiana were also isolated. Bacteriological exams of 500 eggs from each farm were performed, showing that 0.2% of farm 1 and 2.0% of farm 3 were contaminated by S. Enteritidis and S. Enterica rough strain. / Mestre

Salmonella Enteritidis es actualmente el serovar de Salmonella más prevalente a nivel mundial. Mediante el análisis bioinformático de los genomas de distintos serovares de Salmonella identificamos una región genómica que se encuentra presente en S. Enteritidis, así como en S. Gallinarum y S. Dublin (serovares filogenéticamente cercanos a S. Enteritidis). Esta región corresponde a una Isla de Patogenicidad, la cual denominamos IG-asnT. Resultados obtenidos en nuestro laboratorio sugieren que varias de las proteínas codificadas en IG-asnT de S. Enteritidis participarían en la colonización de órganos internos de ratón en un modelo de virulencia in vivo. Entre ellas se encuentran proteínas estructurales de un pilus tipo IV (SEN1977), una proteína involucrada en movilización de plasmidios (SEN1980) y TlpA (TIR-like protein A), la cual presenta un dominio con homología a proteínas que participan en respuestas inflamatorias de células del sistema inmune. Debido a que la capacidad de Salmonella para sobrevivir en los macrófagos de su hospedero es un factor indispensable para su diseminación sistémica y la posterior colonización de órganos blanco, en este proyecto nos propusimos determinar si la isla IG-asnT codifica productos génicos que cumplen un papel en la interacción de S. Enteritidis con macrófagos murinos y definir si al menos uno de ellos participa en la producción y/o secreción de la proteína TlpA. Para esto, se estudió la capacidad de varias mutantes de genes presentes en IG-asnT para sobrevivir al interior de macrófagos murinos, de las cuales las mutantes SEN1977, SEN1980 y tlpA presentaron una capacidad disminuida de supervivencia en estos macrófagos en comparación a la cepa silvestre. Por otra parte, nuestros resultados indican que tlpA participa en el proceso que lleva a la muerte celular de los macrófagos infectados con S. Enteritidis. Pudimos determinar que TlpA se produce en distintas condiciones de cultivo in vitro, además de expresarse al interior de los macrófagos infectados. El resto de los genes presentes en la isla no participan en la expresión ni en la producción de la proteína TlpA en las condiciones estudiadas. Estos resultados entregan nueva evidencia sobre factores de virulencia de S. Enteritidis involucrados en su adaptación a células hospederas, que podrían explicar en parte su prevalencia sobre otros serovares.

A Salmonella sp. é uma das principais causas de doenças transmitidas por alimentos, principalmente de origem animal. Os suínos podem ser portadores assintomáticos de Salmonella sp. e, nessa condição, serem levados ao abate. Desta forma, a entrada de Salmonella sp. na cadeia de produção é uma preocupação para a indústria. Sabendo-se da importância deste microrganismo, pelo seu impacto na indústria e na saúde pública, este trabalho teve como objetivo determinar a prevalêncía de Salmonella sp. em suínos levados ao abate em um frigorífico sob inspeção federal no Rio Grande do Sul, e correlacionar com a contaminação de cortes de pernil. Para tanto, 64 amostras de conteúdo intestinal e 121 amostras de cortes de pernil coletadas em 4 visitas, foram submetidas ao isolamento e identificação de Salmonella sp. As amostras de Salmonella sp. foram avaliadas quanto a resistência a 14 antimicrobianos, através da técnica de difusão em ágar. Salmonella sp. foi isolada de 46,87% das amostras de conteúdo intestinal e de 49,59% dos cortes de pernil. Foi encontrado grande número de sorovares, sendo os mais prevalentes Panama e Bredeney. Das amostras isoladas, 60,8% apresentaram perfil de multiresistência, sendo os maiores índices de resistência a sulfonamida, ácido nalidíxico e tetraciclina. Utilizando o perfil de resistência a antimicrobianos de amostras de um mesmo sorovar forma comparadas quanto a sua similaridade e agrupadas em dendrogramas, observou-se grande diversidade nas linhagens isoladas. Os resultados demonstraram que a entrada de animais no frigorífico excretando Salmonella sp., pode contribuir para a contaminação do produto final. A diversidade de sorovares e linhagens pode representar que são várias as fontes de contaminação, tanto dos animais quanto do produto final. / Salmonella sp. is one of the main causes of food bome disease, being the products of animal origin the most often implicated in outbreaks. Pigs are often asymptomatic carriers of Salmonella sp., and the slaughter of positive animais has been a great concern for the swine industry. Thus, the introduction of Salmonella sp. in the food chain is of importance for the swine industry and for the food safety as well. The aim of this study was to evaluate the prevalence of Salmonella sp. in pigs at slaughter and to correlate with the contamination of pork processed in one slaughterhouse in Rio Grande do Sul. For this purpose, 64 samples of intestinal content and 121 samples of pork cuts, collected in 4 visits, were submitted to Salmonella isolation and identification protocol. Furthermore, the resistance profile of the isolated Salmonella strains were evaluated against 14 antimicrobials, using the agar diffusion test. Salmonella sp. was isolated from 46,87% of intestinal content samples and 49,59% of pork cuts. The isolated Salmonella strains belonged to nine different sorovars, being the sorovar Panama and Bredeney most prevalent. Most strains (60,8%) showed a multiresistance profile. Furthermore, resistance profiles against sulfonamides, nalidixic acid and tetracyclin were the most found. Using the resistance profile, strains belonging to the same sorovar were compared and dendrograms were constructed. In spite of belonging to the same sorovar and being isolated in the same visit to the slaughter plant, Salmonella strains showed a great diversity. These results demonstrated that the slaughter of pigs shedding Salmonella sp. in the feces, can result in the contamination of the final product in this slaughter plant. The diversity of sorovars and strains of Salmonella sp. indicated the multiple sources of contamination for animais and for the product.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:58Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2001Bitstream added on 2014-06-13T20:17:36Z : No. of bitstreams: 1 gama_nmsq_me_jabo.pdf: 590409 bytes, checksum: a4fb917677032980d71f25ad83e1b5d5 (MD5) / Com o objetivo de investigar a presença de Salmonella em galinhas destinadas à postura comercial, cinco lotes de aves brancas e leves, visto que em quatro deles isolou-se Salmonella ao chegarem à granja com um dia de idade, sendo examinados durante 52 semanas, através de exame bacteriológico das fezes frescas do ceco. Observou-se a presença de Salmonella no lote 1 nas 1ª, 11ª, 34ª e 42ª semanas de idade, no lote 2 nas 1ª, 4ª e 11ª semanas de idade, no lote 3 na 1ª e da 17ª à 52ª semana de idade e no lote 4, somente na 1ª semana de idade. O lote 5 que era negativo com um dia de idade, permaneceu assim durante as 52 semanas. Foram isoladas S. enterica sorovar Enteritidis e S. enterica cepa Rugosa das amostras de fezes dos quatro lotes positivos. A Salmonella enterica sorovar Infantis foi isolada nas amostras de fezes dos lotes 1, 2 e 3 e Salmonella enterica sorovar Javiana e Salmonella enterica sorovar Mbandaka foram isoladas nas amostras do lote 3. Foi realizado o exame bacteriológico de 500 ovos de cada lote, sendo que 0,2% do lote 1 e 2,0% do lote 3 estavam contaminados por S. Enteritidis e S. enterica cepa Rugosa. / Summary: The presence of Salmonella was investigated through bacteriological exams of fresh feces from cecum in five laying hen farms over a period of 52 weeks since the arrival of the day-old birds. All flocks examined were varieties of light white-egg chickens. Salmonella enterica serovar Enteritidis and S. enterica rough strain were isolated from the transporting boxes of the day-old birds received by four farms. In the farm number five Salmonella was not detected in the transporting boxes and also was not detected in the feces over the 52 weeks. In the farm 01 Salmonella was isolated from the feces examined at 1st, 11th, 34th and 42nd weeks; in the farm 02 it was detected at 1st, 4th and 11th weeks; in the farm 03 Salmonella was isolated in the first week and from the 17th to 52nd week. In the farm 04 Salmonella was isolated from the feces collected in the first week only. Besides S. Enteritidis and the rough strains, S. enterica serovar Infantis, S. enterica serovar Mbandaka and S. enterica serovar Javiana were also isolated. Bacteriological exams of 500 eggs from each farm were performed, showing that 0.2% of farm 1 and 2.0% of farm 3 were contaminated by S. Enteritidis and S. Enterica rough strain.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2003Bitstream added on 2014-06-13T19:51:01Z : No. of bitstreams: 1 barros_mr_me_botfmvz.pdf: 1922025 bytes, checksum: a9234f32614518b9eccd2d82de578880 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A colonização da mucosa intestinal por grande e diversificado número de bactérias é achado normal no homem e nos animais, incluindo as aves. Produtos de exclusão competitiva e/ou probióticos quando administrados às aves, devem promover a redução na colonização de patógenos potencialmente perigosos à saúde avícola e humana, como bactérias do gênero Salmonella e conseqüente equilíbrio na microbiota intestinal normal. O presente trabalho teve por objetivos verificar a presença de Lactobacillus spp. na microbiota do inglúvio e cecos de aves, identificar as espécies através dos métodos PCR e bioquímico e avaliar a capacidade da atividade inibitória in vitro das espécies isoladas frente a oito sorotipos de Salmonella. Utilizou-se aves reprodutoras e de postura comercial como doadoras de inglúvio e cecos para o isolamento e identificação de Lactobacillus. As amostras isoladas foram caracterizadas como pertencentes ao gênero Lactobacillus através dos testes de coloração de Gram positiva, catalase negativa, produção de gás em glicose e H2S em Tríplice Sugar Iron (TSI) negativo. Posteriormente, submetidas ao padrão de fermentação dos carboidratos e a PCR, para identificação das espécies de Lactobacillus. O método da PCR apresentou-se mais sensível mostrando resultados diferentes do método bioquímico. No bioquímico identificou-se L. acidophilus, L. fermentum, L. reuteri, L. salivarius e L. sp., enquanto na PCR, L. reuteri, L. salivarius e L. sp. Todas as espécies de Lactobacillus isoladas do inglúvio e cecos de aves apresentaram amostras que inibiram Salmonella Enteritidis fagotipo 4, S. Enteritidis fagotipo 28, S.Typhimurium, S. Pullorum, S. Agona, S. Anatum, S. Dublin e S. Senftenberg. Palavras chaves: Identificação, Lactobacillus, PCR, inibição, Salmonella, aves. / Intestinal mucosa colonization by a diverse and great number of bacteria is considered normal among men and animals including poultry. Competitive exclusion products and \or probiotics when given to poultry should promote pathogen colonization reduction which is potentially danger to human and poultry health like Salmonella and consequently a balance on normal intestinal microbiota The present work aimed at verifying Lactobacillus spp on crop microbiota and poultry cecum, identifying species through PCR and biochemical methods and to evaluate in vitro inhibitory activity ability from species isolated against eight Salmonella serotypes Production delivery and reproduction poultry were used as crop and cecum donors to isolate and identify Lactobacillus. Isolated samples were characterized as belonging to Lactobacillus species through coloration gram positive tests, negative catalase, glucose gas production and H2S in negative triple sugar iron (TSI). Afterwards, samples were subjected to carbohydrate fermentation pattern and to PCR to identify Lactobacillus species. PCR method has shown to be more sensitive presenting different results of biochemical methods. On biochemical method one identified: L. acidophilus, L. fermentum, L. reuteri, L. salivarius, and L. sp, while in PCR, L. reuteri, L. salivarius and L.sp. All Lactobacillus species isolated from poultry crop and cecum showed samples which inhibited Salmonella Enteritidis fagotype 4, S. Enteritidis fagotype 28, S.Typhimurium, S. Pullorum, S. Agona, S. Anatum, S. Dublin and S. Senftenberg.

Orientador: Raphael Lucio Andreatti Filho / Resumo: A colonização da mucosa intestinal por grande e diversificado número de bactérias é achado normal no homem e nos animais, incluindo as aves. Produtos de exclusão competitiva e/ou probióticos quando administrados às aves, devem promover a redução na colonização de patógenos potencialmente perigosos à saúde avícola e humana, como bactérias do gênero Salmonella e conseqüente equilíbrio na microbiota intestinal normal. O presente trabalho teve por objetivos verificar a presença de Lactobacillus spp. na microbiota do inglúvio e cecos de aves, identificar as espécies através dos métodos PCR e bioquímico e avaliar a capacidade da atividade inibitória in vitro das espécies isoladas frente a oito sorotipos de Salmonella. Utilizou-se aves reprodutoras e de postura comercial como doadoras de inglúvio e cecos para o isolamento e identificação de Lactobacillus. As amostras isoladas foram caracterizadas como pertencentes ao gênero Lactobacillus através dos testes de coloração de Gram positiva, catalase negativa, produção de gás em glicose e H2S em Tríplice Sugar Iron (TSI) negativo. Posteriormente, submetidas ao padrão de fermentação dos carboidratos e a PCR, para identificação das espécies de Lactobacillus. O método da PCR apresentou-se mais sensível mostrando resultados diferentes do método bioquímico. No bioquímico identificou-se L. acidophilus, L. fermentum, L. reuteri, L. salivarius e L. sp., enquanto na PCR, L. reuteri, L. salivarius e L. sp. Todas as espécies de Lactobacillus isoladas do inglúvio e cecos de aves apresentaram amostras que inibiram Salmonella Enteritidis fagotipo 4, S. Enteritidis fagotipo 28, S.Typhimurium, S. Pullorum, S. Agona, S. Anatum, S. Dublin e S. Senftenberg. Palavras chaves: Identificação, Lactobacillus, PCR, inibição, Salmonella, aves. / Abstract: Intestinal mucosa colonization by a diverse and great number of bacteria is considered normal among men and animals including poultry. Competitive exclusion products and \or probiotics when given to poultry should promote pathogen colonization reduction which is potentially danger to human and poultry health like Salmonella and consequently a balance on normal intestinal microbiota The present work aimed at verifying Lactobacillus spp on crop microbiota and poultry cecum, identifying species through PCR and biochemical methods and to evaluate in vitro inhibitory activity ability from species isolated against eight Salmonella serotypes Production delivery and reproduction poultry were used as crop and cecum donors to isolate and identify Lactobacillus. Isolated samples were characterized as belonging to Lactobacillus species through coloration gram positive tests, negative catalase, glucose gas production and H2S in negative triple sugar iron (TSI). Afterwards, samples were subjected to carbohydrate fermentation pattern and to PCR to identify Lactobacillus species. PCR method has shown to be more sensitive presenting different results of biochemical methods. On biochemical method one identified: L. acidophilus, L. fermentum, L. reuteri, L. salivarius, and L. sp, while in PCR, L. reuteri, L. salivarius and L.sp. All Lactobacillus species isolated from poultry crop and cecum showed samples which inhibited Salmonella Enteritidis fagotype 4, S. Enteritidis fagotype 28, S.Typhimurium, S. Pullorum, S. Agona, S. Anatum, S. Dublin and S. Senftenberg. / Mestre