Informe de Seminario para optar al grado de Licenciado en Historia

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Made available in DSpace on 2014-10-09T12:24:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 00438.pdf: 1056627 bytes, checksum: aad5d4ec248967230e54594927266b27 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IEA/D / Instituto de Quimica, Universidade de Sao Paulo - IQ/USP

Tesis para optar al grado de Magíster en Historia mención Etnohistoria / Entre los principales desvelos que inquietaban al colonialismo español en los andes de la primera mitad del siglo XVIII se encontraba la búsqueda de fórmulas para la obtención de mayores ingresos de sus súbditos andinos. Las autoridades metropolitanas y virreinales coincidían en que las elites provinciales e instituciones intermedias del gobierno colonial se habían apropiado en gran medida de los excedentes y fuerza de trabajo. Las altas esferas de la administración colonial pensaban que corregidores, curas doctrineros y caciques se las arreglaban para impedir una correcta contabilidad de los indios tributarios, en desmedro finalmente de la Real Hacienda. De ahí que a partir de la segunda mitad del siglo XVIII los borbones se plantearon la necesidad de mejorar y centralizar los cobros y recaudación de los tributos como parte un plan mayor de reorganización fiscal y reconquista de América. En ese contexto la Revisita de tributarios se transformó en un instrumento fundamental. Y lo mismo sucedió con los Libros parroquiales donde cuidadosamente fueron anotados los nombres y edades de los varones andinos que pasarían a formar parte de la categoría de los tributarios del Rey de España.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:49:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo1527_1.pdf: 1835283 bytes, checksum: 1f1ad67f95038279850ea3b3eec8c441 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2008 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / O câncer cervical tem sido uma patologia grave no Brasil e no mundo com cerca de 18.680 mulheres infectadas anualmente. O Papilomavírus Humano (HPV) tem sido biologicamente associado ao desenvolvimento de lesões cervicais, devido a sua capacidade de infectar células epiteliais, e progressão ao câncer do colo de útero. O diagnóstico tardio pode inviabilizar o tratamento e levar a óbito muitas mulheres. Este diagnóstico poderia ser antecipado pelo uso de biossensores de DNA, que são dispositivos analíticos que resultam da integração entre uma sonda seqüência específica e um sinal transdutor. Entre outras técnicas eletroquímicas, os biossensores amperométricos têm sido descritos como atrativos devido à sua simplicidade, baixos custos de instrumentação, possibilidade de realização em tempo real e geralmente alta sensibilidade. Neste trabalho, foi desenvolvido um genossensor para detecção de seqüências do vírus HPV usando azul de metileno (AM) como mediador químico. Os sinais biológicos captados foram transduzidos por Voltametria de Pulso Diferencial (VPD). Os eletrodos de trabalho e referência foram produzidos através de técnica de impressão sob uma superfície de polivinil álcool. Os mesmos foram constituídos de carbono e Ag\AgCl, respectivamente. O eletrodo de trabalho foi modificado com quitosana para a imobilização de pequenas seqüências de DNA para hibridização com uma seqüência alvo. A seqüência alvo usada para hibridização foi o gene E6 do HPV18, uma cadeia extensa com 500 pares de bases disponíveis para anelamento com seqüências de 20 bases. Análises de bioinformática foram realizados para verificar possíveis regiões de anelamento destas seqüências curtas ao genoma viral. Os resultados demonstraram um aumento no sinal do AM quando a hibridização ocorreu, evidenciado pelo aumento dos picos de corrente de VPD analisados graficamente. As diferenças entre os sinais emitidos a partir de um eletrodo contendo reações de hibridização e outro isento das mesmas, foi usada para detectar seqüências de DNA viral obtidas de amostras clínicas. Os resultados indicaram ser o método passível de aplicações em diagnósticos clínicos, e a técnica de impressão, um instrumento viável para a construção dos biossensores de DNA utilizando o azul de metileno como indicador de sinais de hibridização

Made available in DSpace on 2014-10-09T12:24:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 / Made available in DSpace on 2014-10-09T14:05:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 00438.pdf: 1056627 bytes, checksum: aad5d4ec248967230e54594927266b27 (MD5) / Dissertacao (Mestrado) / IEA/D / Instituto de Quimica, Universidade de Sao Paulo - IQ/USP

This study purposes to examine extracellular proteases of the anaerobic rumen bacterium, Bacteroides amylophilus H-18. An enzyme was isolated and purified from 29 litres of 23 hr cell-free culture supernatant using DEAE Sephadex A-50, Sephadex G-200 and isoelectrofocusing techniques. Although proteolytic activity in the supernatant had a peak of activity at pH 6.7, there was activity at pH values from 4.5 to 11.5. Therefore, an attempt was made to purify the pH 6.7 activity and to follow the activity at other pH values as an index of purity. It was found that separation of the activities at different pH values was not achieved, even though the enzyme was purified 1265 times. Gel filtration of this purified material revealed the presence of two proteases, one of 60,000 and the other of 30,000 molecular weight. Since these enzymes were otherwise identical, they could have represented the monomeric and dimeric forms of a single protein. If the protease of 30,000 molecular weight was separated and resubjected to gel filtration, protease activity of molecular weight 60,000 reappeared. Ultracentrifugation of the 30,000 molecular weight protease demonstrated only one component. Therefore, if the two forms were in equilibrium, it appeared that the dimer was the more stable form of the enzyme. The purified protease did not contain cysteine, so that any tertiary structure in the enzyme could not involve disulfide bridges. All attempts to dissociate the dimeric into the monomeric form were unsuccessful. Examination of the inhibition of Nα benzoyl-L-arginine methyl ester esterase and protease activities with Nα tosyl-L-chloromethane revealed a complete inhibition of esterase activity at pH 8.0 but only a 30% inhibition of protease activity at the same pH, suggesting that more than one enzyme was responsible for the proteolytic activity exhibited by the purified enzyme. Because it was not possible to achieve separation of proteolytic activities at different pH values after a 1265 times purification, it must be assumed that if there are actually different proteases present they must have very similar structures. / Science, Faculty of / Microbiology and Immunology, Department of / Graduate

Informe de Seminario para optar al grado de Licenciado en Historia / Proyecto Fondecyt N° 1120083

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