Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-02-07T19:19:35Z No. of bitstreams: 1 Lizandra Moreira Góes... Caracterização dos efeitos tóxicos....pdf: 1602592 bytes, checksum: 16b9153b36fb34585abb21b40bd4bdef (MD5) / Made available in DSpace on 2014-02-07T19:19:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lizandra Moreira Góes... Caracterização dos efeitos tóxicos....pdf: 1602592 bytes, checksum: 16b9153b36fb34585abb21b40bd4bdef (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Universidade Federal da Bahia. Faculdade de Medicina. Salvador, BA, Brasil / Catecóis são derivados do benzeno, podendo apresentar citotoxicidade, que pode constituir um modelo experimental útil para o desenvolvimento de novos fármacos. No bioma brasileiro inúmeras plantas produzem metabólitos com atividades diversas, como antioxidantes, ou inibidores do crescimento celular. No Brasil, as neoplasias são a segunda causa de óbito, especialmente aquelas derivadas do sistema nervoso, aumentando o interesse por novos antineoplásicos e agentes neuroprotetores. Este trabalho caracteriza efeitos citotóxicos do 1,2-dihidroxibenzeno (CAT) e discretamina (DSC) em células do sistema nervoso in vitro. Determinou-se a EC50 de CAT e DSC usando brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium (MTT), investigou-se sua auto-oxidação por espectrofotometria, avaliou-se mudanças morfológicas e condensação/fragmentação nuclear por microscopia. Avaliou-se a proteção de DSC e 8-metoxipsoraleno (8-MOP) contra a citotoxicidade do CAT. O padrão de morte celular foi analisado por citometria de fluxo. A espoliação de glutation reduzido (GSH) foi analisada usando monoclorobimano. A toxicidade do CAT para células SH-SY5Y e C6 depende da dose e associa-se à formação de quinonas. Houve mudanças morfológicas, condensação/fragmentação da cromatina e morte apoptótica, não relacionada à espoliação de GSH. DSC não foi tóxica para células SH-SY5Y, porém protegeu contra os efeitos do CAT em baixas concentrações. DSC mostrou-se citotóxica para células de glioma (GL-15 e C6) e potencializou o CAT. Pré-tratamento por 30 minutos com DSC protegeu contra a ação do CAT após 72 horas. 8-MOP potencializou os efeitos do CAT, não revertendo seus efeitos na viabilidade celular, morfologia celular, condensação/fragmentação nuclear, e espoliação de GSH. Esses resultados caracterizam um modelo de citotoxicidade que pode ser aplicado no desenvolvimento de novos agentes farmacológicos. Estudos complementares são necessários para elucidar a proteção da DSC. / Catechols are benzene derivatives, which may exhibit cytotoxic activity that can be employed to develop new drugs. Plants are important sources of metabolites with pharmacological activities such as antioxidants, or cell growth inhibitors. In Brazil, cancer is the second leading cause of death, especially those derived from the nervous system, which increase the interest for new antineoplastic and neuroprotective drugs. The cytotoxic effects promoted by 1,2-dihydroxybenzene (CAT) and discretamine (DSC) in nervous system cells were characterized in vitro. The protective effects of DSC and 8-methoxypsoralen (8-MOP) against CAT-induced cytotoxicity were also evaluated. CAT and DSC EC50 was determined by using 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT). CAT auto-oxidation was investigated by spectrophotometry. Morphological changes and nuclear condensation/ fragmentation were evaluated by microscopy. The pattern of cell death was obtained by flow cytometry. Reduced glutathione (GSH) depletion was analyzed by using monochlorobimane. CAT induced a dose-dependent toxicity to SH-SY5Y and C6 cells, associated with reactive quinones formation. It also induced morphological changes, nuclear condensation/fragmentation, and apoptotic death not caused by GSH depletion. DSC was not toxic to SH-SY5Y cells, but protected against CAT effects at low concentrations. DSC was be cytotoxic to glioma cells (GL-15 and C6) and potentiated CAT effects. However, pretreatment for 30 minutes with DSC protected them against CAT after 72 hours. 8-MOP also potentiated CAT effects instead to protect cells. These results characterize an experimental model useful for studies searching new pharmacological agents. However, further studies are needed to elucidate the DSC protective effects.

Made available in DSpace on 2015-04-01T14:16:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 578629 bytes, checksum: 0e1eef478991e7f411dddd815ac56a75 (MD5) Previous issue date: 2013-08-09 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Furocoumarins (FCs) are an important class of photoactive compounds which may potentially bind to DNA forming intermolecular complexes, and once excited by UVA light (~ 365 nm) they re able to form photoadducts, which may result in mutagenicity and lethality. However, when the 8-methoxypsoralen (8-MOP) is added to the post-irradiation plating medium increases the sensitization probably by inhibiting repairs in damaged DNA. The FCs also have a protective effect against UVC (~254 nm) attributed to the inhibition of pyrimidine dimers. FCs associated with UVB light (312 nm), remain few known. The aim of the present study was to investigate the lethal effect of UVB light alone, and combined with solutions of 8-MOP, 4,5',8-trimethylpsoralen (TMP) and 3-carbetoxypsoralen (3-CPs) at different concentrations on Staphylococcus aureus growth. We also evaluated the effect of these FCs in the plating medium. Treatment with 8-MOP-UVB and TMP-UVB were more effective in inducing lethality than the UVB treatment alone. Increasing the solution concentration of 8-MOP resulted in a higher mortality while the increase in the concentration of the TMP led to a reduction in the lethality. For other hand, 3-CPs displayed a photoprotective effect against UVB damage in all concentrations tested. The results of FCs in the plating medium showed that the 8-MOP induzed a higher lethal effect and also increased mortality from bacterial strain treated by FC-UVB. The different behaviors shown by FCs may be related with differences in the sequence specificity of binding and photoreaction, inhibition of pyrimidine dimers formation by intercalated molecules and efficacy of repair systems. These results emphasize the need for further studies to elucidate the participation of FCs as photosensitizing and photoprotective agents in biological systems, when combined with UVB. / As furocumarinas (FCs) são uma importante classe de compostos fotoativos que potencialmente podem se ligar ao DNA formando complexos intermoleculares, e uma vez excitados por luz UVA (~365 nm) são capazes de formar fotoadições, que podem resultar em mutagênese e letalidade. Porém, quando a 8-metoxipsoraleína (8-MOP) está adicionada ao meio de plaqueamento pós-irradiação aumenta a sensibilidade provavelmente por inibir reparo de lesões no DNA. As FCs também possuem efeito protetor contra UVC (~254 nm) atribuído à inibição da formação de dímeros de pirimidina. As FCs associadas à UVB (312 nm) permanecem pouco conhecidas. O objetivo do presente estudo foi investigar o efeito da luz UVB, e combinada com soluções de 8-MOP, 4,5 ,8-trimetilpsoraleína (TMP) e 3-carbetoxipsoraleína (3-CPs) em diferentes concentrações, sobre o crescimento de Staphylococcus aureus. Avaliamos também o efeito destas FCs em meio de plaqueamento. O tratamento com 8-MOP-UVB e TMP-UVB foram mais eficazes em induzir letalidade do que o tratamento apenas com UVB. O aumento da concentração de 8-MOP resultou em mortalidade mais elevada enquanto que o aumento na concentração de TMP levou a redução na mortalidade. Por outro lado, 3-CPs exibiu efeito fotoprotetor contra danos causados por UVB em todas as concentrações testadas. Os resultados com FCs no meio de plaqueamento mostraram que a 8-MOP induziu o maior efeito letal e também aumentou a mortalidade da cepa bacteriana tratada por FC-UVB. Os diferentes efeitos apresentados pelas FCs podem estar relacionados com diferenças na especificidade por seqüência de ligação e fotorreação, a inibição da formação de dímeros de pirimidina por moléculas intercaladas e eficácia de sistemas de reparo. Esses resultados reforçam a necessidade de mais estudos para elucidar a participação das FCs como agentes fotossensibilizantes e fotoprotetores em sistemas biológicos, quando combinadas com UVB.