Orientador: Fumio Yokoya / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos / Made available in DSpace on 2018-07-29T03:22:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Thiney_PatriciaAugustodeOliveira_D.pdf: 21304299 bytes, checksum: 1abf6ae1c3911fb9cf86ffbd98bb068e (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Frutose é o açúcar natural mais doce, sendo uma alternativa segura para substituir a sacarose. A inulinase tem um importante papel na produção de frutose através da hidrólise enzimática da inulina, que pode ser realizada em uma única etapa e render até 95% de conversão. Este trabalho teve como objetivo estudar a produção da inulinase por Kluyveromyces marxianus varo bulgaricus ATCC 16045 utilizando diferentes fontes de carbono e nitrogênio, visando obter um meio viável comercialmente, nos mesmos níveis de produção do meio convencional. Técnicas de planejamento experimental e análise de superfície de resposta foram utilizadas para otimizar o meio de cultivo para produção da enzima. Foram estudadas as variáveis concentração de melaço, água de maceração de milho e extrato de levedura. Para este estudo utilizou-se quatro planejamentos fatoriais completos, sendo alcançada uma atividade enzimática máxima de 138U/mL. Após foi possível reduzir ainda mais o custo do meio, com a substituição do extrato de levedura pelo Prodexlac, extrato de levedura produzido pela indústria Prodesa que contém 44% de proteína, e retirando-se K2HPO4 do meio, atingido-se uma atividade enzimática de 113U/mL. Verificou-se que o primeiro e segundo meios otimizados representam 13% e 1,93% do custo do meio sintético otimizado, respectivamente. Assim neste trabalho foi possível a otimização na produção da enzima, utilizando meios alternativos, sem reduzir os níveis de produção obtidos com meio sintético, tomando ainda, o meio economicamente mais viável. / Abstract: Fructose is the sweetest sugar, being a safe altemative for sucrose. Inulinase may play an important role in fructose production by enzymatic hidrolysis of inulin. The reaction occurs in a single step and it is possible to obtain up to 95% of conversion. In this work the optimization of the conditions of inulinase production by Kluyveromyces marxianus varo bulgaricus ATCC 16045 using different carbon and nitrogen sources is carried out in order to obtain more suitable culture conditions for comercial exploration, with a similar production leveI to conventional culture conditions. Factorial design and surface response analysis were used to optimize the culture conditions for inulinase production and the enzymatic reaction parameters. In the enzyme production the following variables were studied: melass, AMM and yeast extract. The use of the technique of complete factorial design, resulted in a enzymatic activity of 138U/mL After that, it was possible to minimize the cost, changing the yeast extract by Prodexlac, produced by Prodesa Inc. wich contains 44% protein and removing K2HPO4 from the medium formulation, and with this medium the activity reached 113U/mL. It has been show that the first and second medium formulation represented 13% and 1,93% ofthe cost ofthe previous synthetic optimized medium, respectively. Finally, this work made possible the enzymatic production optimization, using low cost altemative medium, without reducing the production leveI achieved with the synthetic medium, tuming this process economically more interesting. / Doutorado / Doutor em Ciência de Alimentos

Este trabalho apresenta o desenvolvimento de uma metodologia para a avaliação de critérios de outorga do uso da água na bacia do rio Santa Maria. A escolha da bacia do rio Santa Maria se deve ao fato da existência de conflitos pelo uso da água, principalmente durante o verão, quando surge a demanda de água para o cultivo do arroz. A carência de dados hidrológicos, a existência de um grande número de pequenos reservatórios e a sazonalidade das demandas fazem da bacia do rio Santa Maria um caso interessante de ser estudado. É comentado o processo de evolução da outorga através das legislações, a situação atual em que se encontra a implementação deste instrumento, quais as tendências e fica estabelecida uma forma de comparação de diferentes critérios. A análise é feita de forma sistêmica (admitindo a bacia hidrográfica como unidade de planejamento) com o uso de modelos matemáticos de avaliação e gestão, particularmente modelos de simulação hidrológica, em conjunto com dados experimentais sobre o efeito de água no rendimento das culturas. A avaliação de diversos valores de outorga levando em consideração bases econômicas como custos de plantio, preços de mercado dos produtos e recorrência das falhas de atendimento associada à probabilidade de ocorrência de rendimentos líquidos não negativos revela um modelo de utilização otimizado dos recursos hídricos superficiais da bacia.

O nitrato é um dos mais sérios contaminantes nas águas subterrâneas e estudos detalhados sobre o seu comportamento ainda são restritos sobretudo em países de clima tropical. Este trabalho tem como objetivos, estudar e avaliar os impactos causados por sistemas de saneamento \"in situ\" nas águas subterrâneas, no Parque Ecológico do Tietê - Engenheiro Goulart (PET-EG), zona leste do município de São Paulo. A área compreende um aqüífero do tipo livre, homogêneo, com valores de condutividade hidráulica variando de 6,75x10 \'POT. -5\' m/s a 1,51x10 \'POT. -7\' m/s. A recarga ocorre em toda a sua zona aflorante sendo a descarga junto às drenagens superficiais e lagos. Os mapas potenciométricos mensais referentes ao período de janeiro de 1999 a setembro de 2000 apresentam duas direções principais do fluxo da água subterrânea no local: uma a norte em direção ao Rio Tietê e outra a noroeste da área, em direção ao lago. Os métodos utilizados consistiram na caracterização físico-química das águas de 68 poços de monitoramento instalados progressivamente numa área de 2.500m². Alguns parâmetros como nitrato, nitrito, amônio, cloreto, pH, Eh, condutividade elétrica, oxigênio dissolvido foram acompanhados quinzenalmente com equipamentos de campo. Já os íons maiores (Cálcio, Magnésio, Ferro, Sódio, Potássio, Cloreto, Sulfato e a série nitrogenada) foram medidos com freqüência mensal. As análises dos parâmetros físico-químicos indicaram contaminação da água subterrânea ocasionada pelo sistema de saneamento \"in situ\", com concentrações de nitrato superiores àquelas permitidas por lei. Este monitoramento detalhado permitiu identificar dois ambientes hidroquímicos distintos: cloro-sulfatadas cálcicas e cloro-nitratadas sódicas, estas últimas decorrentes do sistema de saneamento \"in situ\". No domínio das cloro-nitratadas sódicas foi possível definir três diferentes zonas da série nitrogenada na pluma de contaminação, com ) predominância das formas reduzidas (nitrogênio orgânico + amônio) próximas ao sistema séptico e das formas oxidadas (amônio + nitrato) em locais mais distantes. Todos os parâmetros físico-químicos analisados apresentaram uma variação espacial e temporal em suas concentrações em função dos efeitos de recarga, que alteraram também o traçado da superfície equipotencial. Na época de chuvas, os tubos de fluxos que contém maiores concentrações de contaminantes provenientes da fossa séptica são deslocados para baixo pelos novos tubos de fluxos que ali se formam devido à recarga. Tal constatação foi comprovada através da modelação matemática tridimensional utilizando-se do aplicativo Visual Modflow. Vários cenários foram criados de modo a avaliar as mudanças nos traçados dos tubos de fluxo mediante variações na recarga e na condutividade hidráulica. Os resultados obtidos indicaram mudanças significativas no traçado das partículas e por conseguinte das linhas de fluxo, alcançando estas maiores profundidades quanto maior a recarga ou sofrendo maior deflexão quanto mais heterogêneo o meio. / Nitrate (NO3-) is the most common contaminant in groundwater. This work investigated the impacts on groundwater caused by septic systems, which leak domestic effluents into a shallow, unconfined sandy alluvial aquifer at Parque Ecológico do Tietê, São Paulo, Brazil. In the study area, this aquifer is homogeneous with a hydraulic conductivity varying from 6.75x10\'POT.-7\'m/s. Recharge occurs over the entire area and is most effective during the rainy season. Monthly potentiometric maps indicate two main flow directions within this aquifer: one northwards toward the Tietê River and the other northeastwards toward the artificial lakes in the area. The present study is based on chemical analyses of 68 shallow wells (up to 5.0 m deep), each installed in an area 50x50 m, and chemical parameters as nitrate, nitrite ammonium, chloride, pH, Eh, electrical conductivity and dissolved oxygen were measured biweekly in situ using portable equipment. Major ions and nitrogen compounds (organic-N, ammonia, ammonium, nitrite, nitrate) were analysed monthly in the laboratory. This detailed monitoring program identified two different hidrochemical environments one characterized by calcium-sulfate chloride and the other by sodium-nitrate chloride. Due to the distribution of nitrogen species (organic-N, ammonium and nitrate) within the sodium - nitrate chloride water, it was possible to identify three distinct geochemical zones in the contamination plume: i) organic nitrogen + ammonium, ii) ammonium + nitrate, and iii) nitrate. Near the septic tanks, there is a predominance of reduced compounds predominate due to oxygen consumption by organic matter degradation and nitrification processes. Concentrations of nitrogen compounds and other chemical parameters change during dry and humid seasons as a consequence of the recharge and changes in geometry of streamtubes. During the rainy season, streamtubes having greater concentration of contaminants are dislocated downward by the formation of a new set of streamtubes. Simulations using a three-dimensional mathematical modeling (visual Modflow) were created to illustrate the changes in streamtube distribution due to variations in recharge and hydraulic conductivity. The results indicate significant changes in flow lines, which penetrate more deep with greater recharge on suffer greater deflection with increasing heterogeneity of the porous medium.

Neste trabalho são apresentados os resultados obtidos durante o transcurso do estudo para chegar à proteção da água subterrânea freática de Neu Halbstadt. Foram cadastrados os poços produtivos domiciliares de 12,0 metros de profundidade em média, e perfurados poços para estudos litológicos e hidrogeológicos, e feitas análises fisico-químicas e bacteriológicas da água subterrânea para avaliação da qualidade da mesma. A geologia local pertence a sedimentos quaternários. Os aqüíferos freáticos produtivos encontram-se em áreas de paleocanais, chamados localmente de \"campo\", possuindo regionalmente água salobra e localmente doce. Em quanto à proteção do aqüífero se estabeleceram diferentes áreas de vulnerabilidade natural à contaminação e seu risco potencial. O resultado específico deste trabalho foram os mapas temáticos feitos para chegar ao objetivo final, \"mapa de proteção do aqüífero freático\" acompanhado de uma \"tabela de medidas de recomendações\", que com atividades de divulgação pode ser empregada pelos usuários. Esta técnica se apresenta viável no aspecto técnico e econômicos para que seja aplicada em áreas urbanizadas rurais com características geológicas e hidrogeológicas similares; os resultados obtidos foram muito satisfatórios / This investigation presents the different results that were obtained during the course of the investigation to get to the protection of the ground water of Neu halbstadt. Most of the household wells were tested until 12 meters deep on average, and exploration wells for lithological and hydrogeological studies, as well as hydrogeochemical analyses were done. In de protection ground water did established áreas of vulnerabilities differents of the aquifer, and riesgo. The specific results of this study consisted in specif maps to archieve the final objective which is the protection map, according to priorities, accompanied by a siple list of recommendations, that activity of divulgation can be aplicaded. This presents technical are economic and of easy application in the urbanes áreas agricultural, with caractetistics lithological end hydrogeologal alike.

Um acidente ocorrido há cerca de 20 anos propiciou a contaminação da água subterrânea por compostos orgânicos parcialmente miscíveis tanto mais densos (DNAPL-Dense no Aqueous Phase Liquid) quanto menos densos (LNAPL - Light no Aqueous PhaseLiquid) que a água em área próxima à represa de Guarapiranga. Foram avaliadas as condiçòes de fluxo da água subterrânea a partir da indústria até sua chegada na zona marginal da represa de Guarapiranga, sendo que o fluxo ascendente nesta zonafoi determinado através do teste do tambor (Seepage). A amostragem de solo em sondagens permitiu a determinaçào de parâmetros físicos do aquífero, por análises laboratoriais, que em associação a dados determinados em campo, pela instalação depoços de monitoramento, permitiam calcular as velocidades de fluxo da água subterrânea entre 0,30 cm/dia e 16,37 cm/dia. As diferentes velocidades de fluxo da água subterrânea são resultantes da variação dos gradientes hidráulicos condicionadospelo padrào topográfico e por eventuais heterogeneidades. As plumas de Benzeno, Tolueno, Xilenos, 1,2 Dicloroetano e 1,1,1 Tricloroetano estão limitadas à área da indústria, não tendo sido determinado aporte de contaminante na zona marginal daempresa. Os fatores do retardamento impostos aos contaminantes durante o transporte pela água subterrânea foram determinados entre os 4,14 para clorofórmio e 55,30 para xilenos. Os valores estão relacionados à fração de carbono orgânico presenteno solo de 0,035, calculada a partir da determinaçào do coeficiente de distribuição (\'K IND.d\') do Benzeno. Os fatores de retardamento apresentam-se acima dos valores encontrados na literatura consultada. Como a literatura internacionalapresenta parâmetros relacionados ao hemisfério norte, a maior presença de matéria orgânica no solo tropical avaliado pode explicar os elevados fatores de retardamento avaliados. Estimou-se entre 26 anos (clorofórmio) e 454 anos (xilenos) o tempo de chegada dos contaminantes à represa. Como o acidente ocorreu há 20 anos, não há chegada de contaminantes na zona marginal da represa, fato comprovado pelas amostras de água dos tambores que não indicaram contaminação, permitindo desta forma a adoção de medidas preventivas de remediação. / The soil and groundwater underlying an industrial área close to the Guarapiranga Reservoir, in São Paulo, Brazil, were contaminated by light and dense non-aqueous phase liquid organic solvents (LNAPLs and DNAPLs) spilled from anaccident. The groundwater flow pattern for the area limited by the groundwater divider upgradient of the industry limits was determined by seepage tests for the discharge area at the border of the Guarapiranga Reservoir. The average linear velocity of the groundwater was estimated to be between 0,30 cm/dia e 16,37 cm/dia using slug tests and laboratory tests to determine physical parameters of the aquifer. This interval of velocities depends on local hydraulic gradientsand heterogeneities, the contaminat plumes of Benzene, Toluene , Xvlenes, 1,2 Dichloroethane and 1,1,1 Trichloroethane are limited to the industry limits and no contaminant load was detected at the discharge area. Retardation factors were determined to be between 4.14 (chloroform) and 55.30 (xylenes) based on the organic carbon fraction obtained from the laboratory measured distribution coefficient (\'K IND. D\') for benzene. The reatardation factor interval determined in this work is higher than the values usually found in literature, and this may be explained by higher organic content in tropical soils when compared to the northern hemisphere based values found in literature. The expected average time interval for the arrival of contaminants to the Guarapiranga Reservoir was calculated to be 26 years for chloroform (minimum time interval) and 454 years for xylenes (macimum time interval). This fact was partially confirmed by the water samples collected from the seepage tests, were no contaminant load was found.

O Campus USP \"Armando Salles de Oliveira\" possui 6 poços tubulares com potencial de suprir parte de sua demanda de água potável. Visando estabelecer os Perímetros de Proteção dos Poços (PPP) que exploram o aquífero sedimentar, foi efetuada uma modelagem numérica tridimensional do sistema aqüífero sedimentar da área. A área modelada é constituída por 4 unidades aquíferas: sedimentar superior e inferior, manto de alteração e cristalino; com fluxos subterrâneos predominantes de sudoeste para nordeste. A área é limitada a nordeste pelo Rio Pinheiros; a leste e sudeste pelo Córrego Pirajussara, a norte e noroeste pelo Córrego Jaguaré, e sul e sudoeste por um divisor de águas. Dos 6 poços tubulares existentes na área, 4 estão localizados no sistema aquífero sedimentar e 2 no cristalino. O modelo foi calibrado e validado para um período de 10 anos, e, através da técnica de traçado de partículas, foi estabelecido o Perímetro de Alerta Contra Poluição (PAP), correspondente a 50 dias de trânsito de partículas na zona saturada: Perímetro de Prevenção (PP), correspondente a 150 dias de trânsito e o Perímetro de Contribuição (PC), correspondente a zona de captura do referido poço em regime de equilíbrio. Foi avaliada a dinâmica de possíveis poluentes no sistema aquífero com e sem a influência do bombeamento dos poços, e definidas medidas de proteção e controle dos recursos hídricos subterrâneos. / The 6 deep wells existing at the campus \"Armando Salles of Oliveira\" of the University of São Paulo presents a potential yield of supplying part of its drinkable water demand. Four (4) of these deep wells were constructed at a sedimentary area, and two (2) deep wells at a crystalline context. Seeking to establish the Well Protection Perimeters of the deep wells of the sedimentary context, a three-dimensional numeric modelling of the sedimentary aquifer of the area was made. The modelled area is constituted of 4 aquifer units: two sedimentary units (superior and inferior), weathered layer and crystalline rocks. These present a predominant underground flow from the Southwest to the Northeast. The area is limited at the Northeast part by Pinheiros River, at the East and Southeast by the Pirajussara Creek, the North and Northwest by the Jaguaré Creek and the South and Southwest by a topographic height. The model was calibrated and validated for a 10 years period. Using the particles path method: a) -an Alert Against Pollution Perimeter (PAP) was established, corresponding to a 50 days period of particles transit at the saturated zone (according to the São Paulo State Groundwater Protection Law); b) -a Prevention Perimeter (PP), corresponding to a 150 days period of particles transit at the saturated zone and: c) -a Contribution Perimeter (PC), corresponding to the capture zone of the referred well considering an equilibrium regime. The dynamics of the probable pollutants in aquifer system was evaluated, considering both, with or without the influence of pumping. Protection measures and control of the groundwater resources were defined.

O presente trabalho, teve como objetivo verificar as relações entre os coeficientes de uniformidade e a eficiência de irrigação à partir dos dados dos ensaios de aspersores. Foram utilizados dois modelos de aspersores, operando a duas pressões diferentes, à partir do qual, foram obtidas as distribuições das precipitações para treze espaçamentos, através de um programa de computador. O programa baseou-se nos dados de um teste para cada aspersor, fornecendo os coeficientes de uniformidade de Christiansen, Wilcox, Hart, Benami e a Eficiência Padrão de Criddle. Para o ajuste das curvas de distribuição de água dos aspersores, foram utilizados dois modelos matemáticos: o linear e o normal. Relacionou-se através da regressão linear, os dados das lâminas adimensionais de diversas áreas adequadamente irrigadas com os dados de coeficiente de uniformidade de Christiansen e a Eficiência Padrão de Criddle. Em função dos resultados, observou-se que o espaçamento mais adequado, pode ser determinado pelos valores dos coeficientes de uniformidade, excluindo aqueles onde encontram-se valores de precipitação nula. Verificamos, que não houve diferenças significativas entre os modelos linear e normal, para os três grupos de coeficientes de variação. A equação de regressão linear, relacionando a lâmina adimensional e os coeficientes de uniformidade de Christiansen e a Eficiência Padrão de Criddle, mostrou-se significativa. E finalmente, que a eficiência de aplicação tem relação|direta com o coeficiente de uniformidade de Christiansen e é inversamente proporcional à àrea adequadamente irrigada / This study had the scope to verify the relationship between uniformity coefficients and irrigation efficiency for sprinkler systems. It was evaluated the field pattern test data of two sprinkler types operating in two different pressures. In order to simulate the distribution pattern of 13 chosen sprinkler spacings, a computer program was uti1ized to overlap the precipitation of each field test and estimate the uniformity coefficients of Christiansen, Wilcox, Hart, Benami, and Criddle Standard Efficiency. The linear and normal models were fitted to the water distribution data. A linear regression was performed to relate the data of adimensional depths of land area adequately irrigated to the data of the Christiansen Uniformity Coefficient and the Criddle Standard Efficiency. It was observed through the results that the most adequate sprinkler spacing can be determined by the values of the uniformity coefficients excluding those values of null precipitation in the irrigated area. Also was observed that there was no significant difference between the linear and the normal models for three groups of coefficient of variation. The adimensional depths and the Christiansen Uniformity Coefficient and Standard Efficiency of Criddle showed significant 1inear relationship. Finally, it was found that application the efficiency is linearly proportional to the Christiansen uniformity Coefficient and 1inearly inversely proportional to the adequately irrigated area.

Submitted by Marcele Costal de Castro (costalcastro@gmail.com) on 2017-12-06T16:47:13Z No. of bitstreams: 1 HENRIQUE SOTOMA M.pdf: 2269998 bytes, checksum: e4ae65fc958b59ebcc624690e0be078b (MD5) / Made available in DSpace on 2017-12-06T16:47:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 HENRIQUE SOTOMA M.pdf: 2269998 bytes, checksum: e4ae65fc958b59ebcc624690e0be078b (MD5) Previous issue date: 1973-02 / O objetivo da presente estudo e prover um método apropriada para o cálculo do comportamento transiente do pressurizador de um reator a água pressurizada. Este trabalho segue um modela desenvolvido por S.G. Margolis e J.A. Redfield. O estudo mostra um programa digital de uma simulação da dinâmica do pressurizador, baseado- numa aplicação da 1º lei da Termodinâmica e leis de Transferência de Calor e Massa. Nenhuma hipótese é feita quanto ao particular processo termodinâmicao(processo isentrópica, processa saturada) que se segue durante um surto positivo (insurge) ou negativo (out surge). No modelo apresentado, o próprio programa determina o processo termodinâmico em cada instante do regime transiente. Dada a importância do pressurizador em relação à segurança operacional do reator do tipo a ser empregado na Central Nuclear de Angra dos Reis e, tendo em vista a utilização prática, procurou-se ajustar os dados do programa digital comparáveis aa de uma usina nuclear de 500 MWe de potência. O estudo serve também coma ferramenta de projeto mecânico do vaso pressurizador e das tubulações do circuito primário.

Orientador : Lucia Pereira da Silva / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T23:42:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silveira_LeonardodosReis_D.pdf: 5178373 bytes, checksum: b6a1f4dd4f5fda026138aa19f6e9deda (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Embora níveis moderados de ERas e NO possam exercer importantes funções fisiológicas no tecido muscular, como regulação do fluxo sanguíneo, angiogênese e aumento da força de contração, pouco é conhecido a respeito da formação intracelular de ERas e NO durante a atividade muscular. Por outro lado, uma excessiva produção dessas espécies pode ser prejudicial ao nosso organismo, superando a capacidade do sistema de defesa antioxidante e conduzindo a um desequilibro no estado redox intracelular. Em nosso estudo, examinamos a formação intra e extracelular do NO e H202 em culturas de células, a formação extracelular do H202 em músculo esquelético de rato in vivo e a formação de O2. - em culturas de células e músculos isolados. Para realização deste estudo nós utilizamos as sondas fluorescentes DAF-2-DA (reativa ao NO), DCFH-DA (reativa ao H2O2) e fluoróforo nitróxido (reativa ao ). Nossos resultados in vitro usando culturas de células musculares mostraram que o H2O2 e NO são formados em grandes quantidades no meio intracelular, seguido de um grande efluxo para o espaço extracelular durante atividade muscular intensa (P < 0,05). Por outro lado, durante atividade muscular moderada a produção dessas espécies é mantida em níveis basais sem nenhuma alteração significativa na sua produção (P > 0,05). Os resultados in vitro utilizando cultura de célula e músculos sóleo e EDL isolados mostraram um alto efluxo do do meio intra para o meio extracelular dirante contrações intensas (P < 0,05). O músculo EDL apresentou um maior efluxo do quando comparado que o músculo sóleo (P < 0,05). Os resultados in vivo utilizando o DCFH em combinação com a técnica de microdiálise mostraram uma alta detecção de H2O2 no meio intersticial quando os valores de repouso foram comparados com os valores durante a atividade muscular intensa, sugerindo um alto efluxo dessa espécie do meio intra para o meio extracelular. Nossos resultados mostram que estas sondas fluorescentes utilizadas em nosso estudo são de grande sensibilidade e especificidade na detecção de ERas e NO em tecido muscular submetido a contrações. Em adição, nossos resultados sugerem que a atividade muscular intensa aumenta significativamente a produção de ERas e NO e que essas espécies produzidas intracelularmente são amplamente transportadas para o meio extracelular, processo que protege as células contra os possíveis ataques oxidativos intracelulares gerados por essas espécies / Abstract: Although moderate levels of ROS and NO may exert important physiological functions in muscle tissue, such as regulation of blood flow, angiogenesis and contractile force, little is still known about ROS and NO formation in response to muscle activity. In addition, an excessive level of these species may be harmful as it may overcome the antioxidant capacity, leading to oxidative stress. In this study we examined intra- and extracellular H2O2 and NO formation during contractions in primary rat skeletal musc1e cell culture and isolated muscle. The fluorescent probes DCFH-DA/DCFH (2,7-DicWorofluoresceindiacetate/2,7-DicWorofluorescein) and DAF-2-DA/DAF-2 (4, 5-diamino fluorescein diacetate/4,5-diaminofluorescein) were used to detect H2O2 and NO, respectively. Intense electrical stimulation of musc1e cells increased the intra- and extracellular DCF fluorescence by 171% and 105% respectively, compared with control non-stimulated cells (P < 0.05). Addition of glutathione (GSH) or tiron prior to electrical stimulation inhibited the intracellular DCFH oxidation (P < 0.05), whereas addition of GSH-PX + GSH inhibited the extracellular DCFH oxidation (P < 0.05). Intense electrical stimulation also increased (P < 0.05) the intra- and extracellular DAF-2 fluorescence signal by 56% and 20%, respectively. Addition of W-nitro-L-arginine (L-NA) completely removed the intra- and extracellular DAF-2 fluorescent signal. In isolated musc1es intense estimulation increase superoxide release compared with control non-stimulated (P < 0.05). H202 detection in vivo through DCFH-BSA combined with microdia1ysis technique showed an significant increase on DCFH oxidation during intense contractions. GSH-PX antioxidant completely inhibited DCFH oxidation. The current results show that H2O2, NO and O-z are formed in skeletal musc1e cells during contractions. Our results also suggest that a rapid release of these species may constitute an important defense mechanism against the formation of intracellular 'OH and 'ONOO. Furthermore, our data show that DCFH and DAF-2 are suitable probes for the detection of ROS and NO both intra- and extra-cellulary in skeletal musc1e cell cultures / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Paulo Sergio Franco Barbosa / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Civil / Made available in DSpace on 2018-08-03T19:05:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Silva_CarlaSilvada_D.pdf: 2330255 bytes, checksum: 359bde71551f896711594d0717bf1597 (MD5) Previous issue date: 2003 / Doutorado / Recursos Hidricos / Doutor em Engenharia Civil