Made available in DSpace on 2018-08-01T22:56:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 tese_9382_Darcy Adriann.pdf: 1067264 bytes, checksum: 04c6250a2beb7cde0fdce121daa52a0f (MD5) Previous issue date: 2015-02-25 / O carrapato bovino tem sido responsável por grandes perdas econômicas na pecuária pela transmissão de doenças e redução da produção de carne e leite. Neste contexto, os produtos naturais constituem uma alternativa potencial aos carrapaticidas comerciais quepodem gerar acúmulo no meio ambiente e resíduos nos alimentos. Sendo assim, objetivou-se determinar o teor de fenóis totais e flavonoides totais e avaliar a eficácia carrapaticida de extratos vegetaisassociados ou não a biofilme sobre Rhipicephalus (Boophilus) microplus (CANESTRINI, 1887). As soluções extrativas deCapsicum chinense, Nicotiana tabacum, Chenopoide ambrosioides, Melia azedarach e Allium sativumforam testadas a 15%. A eficácia carrapaticida foi avaliada pela imersão de teleóginas nas soluções extrativas segundo Drummond (1973). O teste foi realizado em triplicata com 10 carrapatos por repetição. As soluções extrativas que apresentaram a maior eficiência carrapaticida foram incorporadas a 5% em soluções filmogênicas e avaliadas no controle, in vitro, de R. microplus utilizando a metodologia supracitada.Os maiores teores de fenóis totais e flavonóides totais foram encontrados nas soluções extrativas preparadas a partir da casca de cinamomo e das folhas de erva-de-santa-maria. As soluções extrativas a 15%com maior eficácia carrapaticida foram as de fumo (89,02%), casca de cinamomo (85,33%) e alho orgânico (58,36%). O biofilme incorporado com extrato de cinamomo a 5% apresentou o maior efeito carrapaticida (76,41%) quando comparado ao biofilme associado aos extratos de fumo (58,31 %), alho (34,16 %) e biofilme não associado (60,86%). Estudos futuros são importantes para determinar o efeito residual do extrato de cinamomo associado ao biofilme para avaliar seu potencial em assegurar a liberação controlada dos princípios ativos desse extrato.

Th.--Pharm.--Paris 5, 1982. N°: 73.

Made available in DSpace on 2015-05-14T12:59:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 1203751 bytes, checksum: aa735a67a46b6e6bf78ec4314df6b87b (MD5) Previous issue date: 2011-02-21 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Introduction: Garlic (Allium sativum L) has been used for thousands of years for various therapeutic purposes, including the anti-parasite activity. Aims: The aim of this work is, to analyze the possible anti-parasite effects of Allium sativum through in vitro studies by electron scanning microscopy using Schistosoma mansoni and investigates the Allium sativum L activities in patients with ascariasis, ancylostomiasis, amebiasis and giardiasis, as well to determine the profile of a coproparasitologic community in Cabedelo-PB, location of patient selection. Methodology: To perform in vitro tests, adult male worms of Schistosoma mansoni obtained from infected Swiss Webster mice were treated with Allium sativum L oil at concentrations of 0, 5, 10, 15, 20 mg /ml. Then, they were analyzed by scanning electron microscopy. For tests in vivo, studies were conducted with the selection of infected volunteers, and the PSF III of Renascer in Cabedelo, a suitable place to the project. The first step towards to the achievement consisted of educational speeches and, after signing the free consent form, were distributed fecal-test cups. The fecal examinations were performed at the Laboratory of Clinical Parasitology at the Federal University of Paraíba. In the next step we selected women with ascariasis, ancylostomiasis, giardiasis and amebiasis without anti-parasite treatment. Later, physical examinations and medical tests were performed to determine the biochemical and hematological parameters in order to select individuals able to participate in our research. After selection, the volunteer subjects were treated daily in the morning during 15 days with Allium sativum L oil capsules (Soybean Oil 247.4 mg and 2.6 mg of Allium sativum L essential oil) and were followed and monitored for ingestion. In previously scheduled dates, the feces were collected at the 8th and 16th days after the initial intake for the examinations using the methods of Hoffman, Kato-Katz and Ritchie. Results: In vitro tests, treatment with Allium sativum L oil caused damage to the integument of the worm at all concentrations. A concentration of 5 mg/mL caused wrinkling in the tegument; a concentration of 10 mg/mL resulted in changes to tubercles and loss or modification of spines. With 15 and 20 mg/mL increasing damage to the tegument could be seen, such as vesicle formation and the presence of ulcers. The profile of the coproparasitology community of Renascer III revealed the following results: Of 130 samples analyzed, 104 (80%) were female and 26 (20%) were male. There were 64 (49,2%) negative end 66 (50,8%) positive. The frequency of intestinal parasites were: A. lumbricoides 13,1%; T. trichiura 3,8%; Ancylostomidae 2,3%; S. stercoralis 0,7%; S. mansoni 0,7%; E. nana 30,8%; E. histolytica/E. dispar 13,8%; E. coli 10,0%; G. intestinalis 3,1%; I. bustchlii 1,5%. For treatment with Allium sativum L oil capsules during 15 days, was selected a sample of 23 infected patients, of whom 11 with amebiasis, 9 with ascariasis, 2 with giardiasis and with 1 ancylostomiasis. In vivo tests on the 8th day of treatment, all patients had positive results. On the 16th day, 2 patients had negative results, being parasitized by E. histolytica / E. dispar. Conclusions: Allium sativum acts on the adult worms of Schistosoma mansoni without inducing their death, but being able to promote major skin disorders. Oral administration of Allium sativum L oil capsules, showed no anti-parasite action in the experimental conditions of this study. / Introdução: O alho (Allium sativum L.) tem sido utilizado há milhares de anos para diversas finalidades terapêuticas, entre elas a atividade antiparasitária. Objetivos:Pretende-se com este trabalho, analisar os possíveis efeitos antiparasitários do Allium sativum através de estudos in vitro por microscopia eletrônica de varredura utilizando o Schistosoma mansoni e investigar as atividades do Allium sativum L. em portadores de ascaridíase, ancilostomíase, giardíase e amebíase, bem como determinar o perfil coproparasitológico de uma comunidade em Cabedelo-PB, local de seleção dos pacientes. Metodologia: Para a realização dos ensaios in vitro, vermes adultos machos de Schistosoma mansoni obtidos de camundongos Swiss Webster infectados foram tratados com óleo de Allium sativum L. nas concentrações de 0, 5, 10, 15, 20 mg/mL. Em seguida, foram analisados por microscopia eletrônica de varredura. Para os testes in vivo, os estudos foram conduzidos com a seleção de voluntários parasitados, sendo o PSF do Renascer III em Cabedelo-PB, o local apto a execução do projeto. Na primeira etapa do trabalho foram feitas palestras educativas e após a assinatura do consentimento livre e esclarecido foram distribuídos coletores de fezes. Os exames coproparasitológicos foram realizados no Laboratório de Parasitologia Clínica/CCS da Universidade Federal da Paraíba. Na etapa seguinte, selecionaram-se mulheres portadoras de ascaridíase, ancilostomíase, giardíase e amebíase sem tratamento antiparasitário. Posteriormente, realizaram-se exames físicos e exames de análises clínicas para determinação de parâmetros bioquímicos e hematológicos com a finalidade de selecionar indivíduos aptos a participar da nossa investigação. Após a seleção, as voluntárias foram submetidas ao tratamento diário, pela manhã, durante 15 dias, com as cápsulas de óleo de Allium sativum L. (Óleo de Soja -247,4mg e óleo essencial de Allium sativum L.2,6mg) e foram acompanhadas e monitoradas quanto a ingestão. Em datas previamente agendadas, as fezes foram coletadas no 8º e 16º dia após o início da ingestão das mesmas para a realização de exames pelos métodos de Hoffman, Kato-katz e Ritchie. Resultados: Nos testes in vitro, O tratamento com óleo de Allium sativum L. promoveu danos no tegumento do verme em todas as concentrações. O produto na concentração de 5 mg/mL causou formação de projeções no tegumento; na concentração de 10 mg/mL resultou em danos no tubérculos e os espinhos tornaram-se menores em tamanho além de haver redução na quantidade e nas concentrações de 15 e 20 mg/mL permitiram verificar um aumento no dano ao tubérculo com formação de úlceras, expondo a musculatura do verme. O perfil coproparasitológico da comunidade do Renascer III revelou os seguintes resultados: das 130 amostras analisadas, 104 (80%) foram do sexo feminino e 26 (20%) do sexo masculino. Houve 64 (49,2%) amostras negativas e 66 (50,8%) positivas. A freqüência dos enteroparasitas foi: A. lumbricoides 13,1%; T. trichiura 3,8%; Ancylostomidae 2,3%; S. stercoralis 0,7%; S. mansoni 0,7%; E. nana 30,8%; E. histolytica/E. dispar 13,8%; E. coli 10,0%; G. intestinalis 3,1%; I. bustchlii 1,5%. Para o tratamento com as cápsulas de óleo de Allium sativum L., durante 15 dias, foi selecionada uma amostra de 23 pacientes parasitadas, das quais, 11 com amebíase, 9 com ascaridíase, 2 com giardíase e 1 com ancilostomíase. Nos testes in vivo, no 8º dia de tratamento, todas as pacientes apresentaram exames positivos. No 16º dia, 2 pacientes apresentaram exames negativos, estando parasitadas por E. histolytica/E. dispar.Conclusões: O Allium sativum age sobre os vermes adultos de Schistosoma mansoni sem induzir a morte dos mesmos, mas sendo capaz de promover alterações tegumentares importantes. A administração das cápsulas de óleo de Allium sativum L., por via oral, não apresentou ação antiparasitária nas condições experimentais deste estudo.

Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Twenty four Holstein calves and heifers naturally infected were used to evaluate the effect of garlic supply on helminth control. The preparation consisted to triturated garlic, 50%, plus water or alcohol 92º, 50%, orally-administrable on the animals. Treatments (T) consisted of a negative control (T1), garlic at 60 (T2) and 120g on alcoholic extract (T3); 60 (T4) and 120g on aqueous extract/100kg of life weight (T5) and the positive control with Albendasole at 10% (T6). The phitotherapic treatments were repeated after 14th day if the infection was superior to 400 eggs per gram of faeces (EPG). The quantitative and qualitative coproculture technique was performed to evaluate the anthelmintic efficacy of the treatments. During all experimental period (54 days) the mean efficacy of EPG were 43 (T2), 50 (T3), 41 (T4), 61 (T5) and 85% (T6). Differences between treated and control groups was observed in EPG and in relative percentage of infective larvae and the larval development. Partial control was found with the garlic solutions on gastrointestinal nematodes. Better results were found with 120g aqueous extract solution. / Para avaliar a atividade anti-helmíntica do alho suplementado, foram utilizadas 24 bezerras e novilhas da raça Holandesa, naturalmente infectadas. As soluções foram preparadas triturando-se o alho, 50%, mais água ou álcool 92º, 50%, administrando-se oralmente aos animais. Os tratamentos (T) foram constituídos pelo grupo controle negativo (T1); alho a 60 (T2) e 120g em extração alcoólica (T3); 60 (T4) e 120g em extrato aquoso/100kg de peso vivo (T5); e o grupo controle positivo com Albendasole a 10% (T6). Os tratamentos fitoterápicos foram repetidos a cada 14 dias, caso a infecção fosse superior a 400 ovos por grama de fezes (OPG). A técnica de coprocultura quantitativa e qualitativa foi empregada para avaliar a eficácia anti-helmíntica dos tratamentos. Durante todo o período experimental (54 dias), a eficácia média de OPG foi de 43 (T2), 50 (T3), 41(T4), 61 (T5) e 85% (T6). Foram observadas diferenças entre os grupos controle e tratados para OPG e na porcentagem relativa de larvas infectantes e desenvolvimento larval. O uso das soluções de alho demonstraram controle parcial de nematódeos gastrintestinais. Os melhores resultados foram encontrados com a solução de 120g de extrato aquoso.

Th.--Pharm.--Paris 5, 1978. N°: 14.

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2018-04-05T13:47:09Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3088307 bytes, checksum: 4b163e4d0f5dca4558d0d8ce38a51f36 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-04-05T13:47:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 3088307 bytes, checksum: 4b163e4d0f5dca4558d0d8ce38a51f36 (MD5) Previous issue date: 2018-02-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Análises de crescimento de plantas são importantes, pois geram informações sobre a demanda e os cuidados necessários para cada etapa de seu desenvolvimento. Modelos de regressão não linear são apropriados para descrever curvas interpretação de crescimento prática biológica. por apresentarem Entretanto, estes parâmetros com modelos apresentam informações em termos médios, e estão sujeitos a problemas no ajuste proporcionados por possíveis valores extremos ou assimetria na distribuição dos dados. A regressão quantílica pode contornar estes problemas, e ainda permite estimativas em diferentes quantis, gerando resultados mais completos e robustos. Assim, o objetivo deste trabalho foi ajustar modelos de regressão quantílica não linear para o estudo do acúmulo de matéria seca em plantas de alho ao longo do tempo e classificar cada acesso de alho de acordo com sua taxa de crescimento e peso assintótico. O modelo de regressão não linear ajustado foi o Logístico. Para tanto, utilizou-se 30 acessos de alho pertencentes ao Banco de Germoplasma de Hortaliças da Universidade Federal de Viçosa (BGH/UFV). Foram ajustados modelos para todos os acessos em três diferentes quantis, e um modelo de regressão quantílica mediana para cada acesso. Para avaliar a qualidade de ajuste dos modelos, foram utilizados o coeficiente de determinação, o quadrado médio do resíduo, o desvio médio absoluto dos resíduos, e o critério de Akaike. Os 30 acessos foram divididos de acordo com o quantil de estimativas mais próximas, sendo classificados 12 acessos como de baixo interesse para plantio, 6 de interesse intermediário e 12 como de alto interesse para plantio. A regressão quantílica não linear foi eficiente para descrição do acúmulo de matéria seca em plantas de alho ao longo do tempo, mesmo quando os dados apresentam assimetria, variâncias heterogêneas ou valores discrepantes. / Plant growth analyses are important because they generate information on the demand and the necessary cares for each of its development stages. Nonlinear regression models are appropriate to describe curves of growth, since they present parameters with biological practical interpretation. However, these models present information in terms of conditional mean, and they are subject to problems in the adjustment provided by possible outliers or asymmetry in the distribution of the data. The quantile regression can outline these problems, and it allows estimates of different quantiles, generating more complete and robust results. The objective of this work was to adjust nonlinear quantile regression models for the study of dry matter accumulation in garlic plants over time, and classify each garlic accession according to its growth tax and asymptotic weight. The nonlinear regression model fitted was the Logistic. 30 garlic accessions belonging to the Vegetable Germplasm Bank of Universidade Federal de Viçosa (BGH/UFV) were used. Models were adjusted for all of the accessions in three different quantiles, and one model of median quantile regression for each access. To evaluate the goodness of fit of the models, the coefficient of determination, the mean squared error, the absolute average residual error and the Akaike information criterion were used. The 30 accessions were divided, considering the closest quantile estimates: 12 accessions were classified as less productive, 6 of intermediate productivity and 12 as more productive. Nonlinear quantile regression was efficient for the description of dry matter accumulation in garlic plants over time, even in presence of outliers, asymmetry, or heterocedasticy in the distribution of the data.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-06-07T15:50:24Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 529758 bytes, checksum: e0a1fb9bdf2a529f544d5eb55b51bf3d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-07T15:50:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 529758 bytes, checksum: e0a1fb9bdf2a529f544d5eb55b51bf3d (MD5) Previous issue date: 2016-03-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Fundação de Amparo a Pesquisa do Estado de Minas Gerais / A população de plantas e o arranjo das linhas de plantio podem modificar o formato, a massa e número de bulbilhos por bulbo, o que consequentemente influencia a produtividade. Assim objetivou-se avaliar a produtividade e tamanho de bulbos em função de populações e arranjos de plantas de alho da cultivar Ito. Os experimentos foram conduzidos no município de Rio Paranaíba - MG, nos anos de 2014 e de 2015. Dois experimentos em 2014 e dois em 2015. Os tratamentos consistiram de cinco populações 280, 320, 360, 400 e 440 mil plantas ha -1 e dois arranjos de plantas fileiras duplas ou simples, distribuídos em esquema fatorial (5 x 2), delineamento em blocos com quatro repetições. Avaliou-se o número de folhas verdes por planta, diâmetro do pseudocaule, teores de nutrientes na folha, classificação dos bulbos e a produtividade. Verificou-se diferença significativa para o diâmetro do pseudocaule, classificação comercial e produtividade em relação a população. Observaram-se valores menores e maiores no diâmetro do pseudocaule nos cultivos de alta e baixa população de plantas, respectivamente. A variação da população de plantas altera a produtividade e a classificação comercial dos bulbos de alho, onde quanto maior a população menor é o diâmetro médio dos bulbos e quanto menor a população maior é o diâmetro médio dos bulbos. As melhores populações de plantas, buscando-se o mercado de mesa são 280.000 e 320.000 plantas ha -1, pois produziram maior parte dos bulbos nas classes 6 acima. / The population of plants and the planting arrangement of lines can change the shape, mass and number of cloves per bulb, which in turn influences productivity. Thus aimed to evaluate the productivity and bulbs size depending on population and garlic plant arrangements cultivar Ito. The experiments were conducted in the municipality of Rio Paranaiba - MG, in the years 2014 and 2015. Two experiments in 2014 and two in 2015. The treatments consisted of five populations 280, 320, 360, 400 and 440 000 plants ha -1 and two arrangements of plants or simple double rows in a factorial scheme (5 x 2), block design with four replications. We evaluated the number of green leaves per plant, pseudostem diameter, nutrient concentration in leaves, classification of bulbs and productivity. There was a significant difference to the neck diameter, commercial classification and productivity in relation to population. They observed lower and higher values in the neck diameter in high crops and low plant population, respectively. The variation of plant population changes the productivity and commercial classification of garlic bulbs, where the higher the smallest population is the average diameter of the bulbs and the smaller the larger population is the average diameter of the bulbs. The best populations of plants, seeking the table market are 280,000 and 320,000 plants ha -1 as produced most of the bulbs in grades 6 above. / O autor citou três empresas que contribuíram com bolsas para o desenvolvimento do seu projeto.

During the past decade there has been an explosion in the probiotic industry due to an increase in concern for health. It is well known that these probiotic products offer consumers numerous health benefits and that viability of cultures in these products need to be maintained at high levels. It is therefore important to test for antimicrobial compounds or substances that may come into contact with probiotics and thereby negatively affect and decrease their viability. Garlic (Allium sativum) has been used as a natural medicinal remedy for thousands of years and research has shown that it has antimicrobial activity against a wide variety of microorganisms. Although it has been tested against numerous pathogenic microorganisms, there have been few studies on its effect on beneficial bacteria, specifically probiotic Bifidobacterium species. A great amount of work and money is put into preparing probiotic products with sufficient numbers of viable bacterial cells. All these are devoted to ensure that the consumers seize the optimal purported health benefits from probiotic cultures incorporated within the different products. Hence it is necessary to recognize any compound or substance that poses a threat to viability of these probiotic cells, thereby rendering them ineffective. Therefore, the current study aimed at determining whether garlic had any antibacterial activity towards selected Bifidobacterium spp. In vitro studies revealed that garlic has an inhibitory effect on these specific probiotic bacteria. The disk diffusion assay revealed antibacterial activity of garlic preparations characterized by inhibition zones ranging from 13.0 ± 1.7 to 36.7 ± 1.2 mm. Minimum inhibitory concentration (MIC) values for garlic clove extract ranged from 75.9 to 303.5 mg/ml (estimated to contain 24.84 to 99.37 μg/ml allicin) while the minimum bactericidal concentration (MBC) ranged from 10.24 to 198.74 μg/ml xix allicin. Susceptibility of the tested Bifidobacterium species to garlic varied between species as well as between strains even within a small numbers of the tested bifidobacteria. Among the tested Bifidobacterium spp., B. bifidum LMG 11041 was most susceptible to garlic, whereas B. lactis Bi-07 300B was the most resistant. These results were contrary to what has been generally published in literature, that garlic selectively kills pathogens without negatively affecting beneficial bacteria. Garlic clove, garlic powder, garlic paste and garlic spice showed varying degrees of potency, with fresh garlic clove extract and garlic paste extract having the highest and lowest antibifidobacterial activity, respectively. It became necessary to investigate the actual antibacterial mechanism of action of garlic on Bifidobacterium spp., upon realization that its extracts inhibits growth of or kills some of these bacteria, whose contribution to health and well being of consumers is to a large extent dependent on their viability. This was determined by using scanning electron microscopy (SEM) and Fourier-transform infrared (FT-IR) spectroscopy. Scanning electron microscopy was used to investigate the effect of garlic on the morphology and cell surface properties of the tested strains while FT-IR spectroscopy was used to determine any biochemical changes taking place in garlic-treated bifidobacteria. Scanning electron microscopy showed various morphological changes such as cell elongation, distorted cells with bulbous ends and cocci-shaped cells. Behavioural changes were also observed such as swarming of cells was also observed. FT-IR spectra confirmed that garlic damaged Bifidobacterium cells by inducing biochemical changes within the cells. It identified some of the main targets sites of garlic on bifidobacteria, mainly, the nucleic acids and fatty acids (lipids) in the cell membrane. Flow cytometry analysis was used to determine the level at which the garlic decreased the viability of Bifidobacterium cells as well as the extent of damage induced by the garlic. Results revealed a drop in viability with associated decrease in stainability of some the cells, for all strains upon treatment with garlic clove extract. The inability of cells to be stained by nucleic acid stains, hence presence of cells referred to as ‘ghost cells’, has been associated with extensive damage and lysis of cellular membranes resulting in loss nucleic acids. Interestingly, re-inoculation of the cells analysed by flow cytometry into a fresh growth medium and their subsequent reanalysis using the same technique showed an increase in percentage of viable cells and a decrease in percentages of damaged, unstained and dead cells. This suggested that injured cells were able to recover and regress to their active state. Therefore, Bifidobacterium cells exposed to sub lethal amounts of garlic can repair any damage and regrow. However, it was not determined how long active compounds of garlic remain stable within the gastrointestinal tract. This study is the first, according to our knowledge, to show that garlic exhibits antibacterial activity against beneficial bacteria specifically, probiotic bifidobacteria. Furthermore, the results revealed that the mechanism of action of garlic towards bifidobacteria is similar to that which was reported for pathogenic bacteria. Bacterial death and growth inhibition occurs due to damage to the fatty acids/lipids in the cell membrane, modification of the nucleic acids (DNA and RNA). This study is of significant importance to consumers, medical practitioners as well as to the probiotic industry. It suggests that if garlic comes into contact with probiotic bifidobacteria, they die and thus become unable to deliver the promised health benefits to the consumers. Therefore, consumers should be advised against ingestion of probiotic products and garlic simultaneously, as this study reveals that garlic does indeed inhibit some probiotic Bifidobacterium spp. The probiotic industry should also consider including this information on their product labels to make consumers aware of this fact. Failure to include this information may lead to market deterioration due to loss of interest in the products as soon as consumers realize they do not get their money’s worth from the products. Lastly, medical practitioners should also be made aware of this as they also prescribe probiotics to patients for various health reasons. The effect of food matrices on the antibacterial effects, as well as determination of how long the active compounds of garlic remain within the gastrointestinal tract, in relation to levels of garlic ingested will confirm whether indeed there is concern. But for now, in light of results of the current study, caution needs to be taken in simultaneous use of probiotics and garlic, until further testing indicates otherwise. / Dissertation (MSc)--University of Pretoria, 2013. / gm2014 / Microbiology and Plant Pathology / unrestricted

O melhoramento do alho (Allium sativum L.) está limitado à seleção clonal de genótipos mutantes, uma vez que a quase totalidade do germoplasma da espécie é sexualmente estéril, não florescendo nas condições padrões de cultivo. A esterilidade do alho tem implicações não somente no melhoramento da espécie, mas também influi diretamente nos custos de produção. A necessidade de propagação vegetativa utilizando-se bulbilhos (\"dentes\") como material propagativo facilita a transmissão de doenças por vírus e pragas. A manipulação genética do alho com genes associados ao florescimento via Agrobacterium tumefaciens poderia permitir o desenvolvimento de um sistema mais eficaz para propagação da cultura e habilitar novas combinações genéticas. Portanto, o objetivo desse trabalho foi estabelecer protocolos de regeneração para cultivares comerciais brasileiras de alho, bem como de transformação genética mediada por A. tumefaciens de calos oriundos de segmentos radiculares. Foram utilizadas oito cultivares de alho, divididas em três grupos: semi-nobres de ciclo médio (\'Amarante-Embrapa\'; \'Roxinho 5063\'; \'IAC 75 - Gigante de Curitibanos\'; \'IAC 63 - Mexicano Br\'; e \'Lavínia 1632\'); comum, de ciclo médio (\'Cateto Roxo\') e de ciclo precoce (\'Cajuru 2315\'); e nobre vernalizado (\'Jonas\'). Para cada cultivar, foram isolados segmentos radiculares de bulbilhos cultivados in vitro. Esses explantes foram mantidos em cultura durante 60 dias em meio MS, adicionado de 4,5 \'mü\'M 2,4-D e 0,5 \'mü\'M iP para obtenção de calos. Os calos obtidos foram transferidos para meio MS suplementado com 8,8 \'mü\'M BAP e 0,1 \'mü\'M ANA, e avaliados quanto à freqüência de regeneração. Inicialmente, foram analisados diversos fatores durante a introdução dos bulbilhos e na obtenção de calo para cada cultivar. Esses resultados permitiram realizar testes para avaliar o potencial de regeneração dos calos obtidos, e a cultivar \'Jonas\' apresentou a melhor taxa de regeneração via organogênese indireta (84%), seguida da cultivar \'Amarante\' (52%), \'IAC 63\' e \'Cajuru\' (47%) e a cultivar que apresentou a menor taxa foi a \'Lavínia\' (30%). Foi analisada a dose letal de higromicina ou canamicina, testando concentrações crescentes visando identificar os níveis ótimos de uso como agentes seletivos para a transformação. As doses acima de 50 mg/L de higromicina ou 200 mg/L de canamicina foram letais ao cultivo de calos de todas cultivares. A cultivar \'Jonas\' foi utilizada para o estabelecimento do procedimento de transformação via A. tumefaciens LBA4404(pCAMBIA1303), empregando como repórter o gene uidA (\'beta\'-glucuronídase) para determinação da eficiência da transformação. Foi demonstrado que a cultivar foi a \'Jonas\' apresentou o melhor potencial de calogênese e de regeneração, sendo o meio de cultura proposto por Kondo, Hasegawa e Suzuki (2000) o melhor para regeneração das cultivares brasileiras. Além disso, as cultivares brasileiras de alho parecem ser passíveis de transformação via A. tumefaciens / Garlic (Allium sativum L.) breeding has been limited to clonal selection of mutant genotypes, since almost all the species germplasm is sterile, not flowering under standard culture conditions. Garlic sterility affects not only breeding but also directly influences production costs. Further, the requirement of vegetative propagation using small bulbs as propagules increases the risk of pest and viral disease transmission. Genetic manipulation of garlic introducing genes associated with flowering by Agrobacterium tumefaciens would allow the development of an efficient system for propagation and enable new genetic recombination. Thus, the objective of this work was to establish an in vitro regeneration protocol for commercial Brazilian cultivars of garlic, as well as genetic transformation by A. tumefaciens using calli derived from root segments. Eight garlic cultivars were used, derived from three groups: medium cycle semi-noble (\'Amarante-Embrapa\'; \'Roxinho 5063\'; \'IAC 75 - Gigante de Curitibanos\'; \'IAC 63 - Mexicano Br\'; and \'Lavínia 1632\'); common garlic with medium (\'Cateto Roxo\'), or early cycle (\'Cajuru 2315\'); and from vernalized noble (\'Jonas\'). From each cultivar, root segments from small bulbs cultivated in vitro were isolated. These explantes were maintained in MS media supplemented with 4,5 \'mü\'M 2,4-D e 0,5 \'mü\'M iP for 60 days to develop callus. The calli were then transferred to fresh MS media containing 8,8 \'mü\'M BAP e 0,1 \'mü\'M ANA, and evaluated for regeneration frequency. Initially, diverse factors were analyzed for each cultivar during the introduction of the small bulbs and during calli development. These results enabled to conduct test of callus regeneration potential, with \'Jonas\' showing the best regeneration rate via indirect organogenesis (84%), followed by cultivar \'Amarante\' (52%), \'IAC 63\' and \'Cajuru\' (47%). The cultivar with less regeneration was \'Lavínia\' (30%). The lethal dosis of hygromycin or kanamycin were estimated, testing increasing concentrations to establish optimum levels to be adopted as selective agents for transformation. Doses above 50 mg/L hygromycin or 200 mg/L kanamycin were lethal to callus of all cultivars. Cultivar \'Jonas\' was chosen for the establishment of the genetic transformation protocol via A. tumefaciens LBA4404 (pCAMBIA1303), using uidA as a reporter gene (\'beta\'-glucuronídase) to determine the transformation efficiency. \'Jonas\' was the best cultivar in terms of callus and regeneration potential using the regeneration media proposed by Kondo, Hasegawa and Suzuki (2000). Moreover, the Brazilians garlic cultivars appeared to be amenable to transformation via A. tumefaciens

Made available in DSpace on 2015-03-26T13:32:13Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1211050 bytes, checksum: ef3f5f575d905c3bcac49eef49b02816 (MD5) Previous issue date: 2012-02-13 / This study aimed to assess, as the consistency of the grouping, hierarchical clustering methods UPGMA and Ward and optimization Tocher and modified Tocher by application of Fisher discriminant analysis in groups obtained with each method in the study of genetic divergence among garlic accessions, also identifying the most dissimilar access. The groupings were based on the Mahalanobis distance, which also allowed to quantify the relative importance of characters. The accessions with the highest dissimilarity accesses were 13 (BGH 4505) and 61 (BGH 5958), especially in relation to the average weight of the bulb and productivity. Modified Tocher methods, UPGMA and Ward algorithm presented results agree with each other and form groups. However, the Fisher discriminant analysis applied to groups of hierarchical methods (UPGMA and Ward) showed the lowest apparent error, therefore, more consistent methods for studying the genetic diversity of garlic accessions. / Este estudo teve por objetivo avaliar, quanto a consistência do agrupamento, os métodos de agrupamentos hierárquicos UPGMA e Ward e os de otimização de Tocher e Tocher modificado, pela aplicação da análise discriminante de Fisher aos grupos obtidos com cada método, em estudo da divergência genética entre acessos de alho, identificando também os acessos mais dissimilares. Os agrupamentos foram realizados com base na distância generalizada de Mahalanobis, que também permitiu quantificar a importância relativa dos caracteres. Os acessos que apresentaram maior dissimilaridade foram os acessos 13 (BGH 4505) e 61 (BGH 5958), principalmente em relação ao peso médio do bulbo e produtividade. Os métodos de Tocher modificado, UPGMA e algoritmo de Ward apresentaram resultados concordantes entre si quanto a formação dos grupos. No entanto, pela análise discriminante de Fisher aplicada aos grupos dos métodos hierárquicos (UPGMA e Ward) observou-se as menores taxas de erro aparente, sendo, portanto, os métodos mais consistentes para o estudo da diversidade genética de acessos de alho.