As interações que ocorrem entre as bactérias e amebas podem dar-se através de relações mútuas, onde ambos os organismos se beneficiam da associação ou parasitárias em que um organismo se beneficia em detrimento do outro. A convivência de vários microrganismos que compartilham o mesmo ambiente pode produzir alterações seja no crescimento dos organismos, nos padrões de adaptação, na morfologia, no seu desenvolvimento, ou até mesmo na sua capacidade para sintetizar proteínas e metabólitos secundários. Neste estudo, é avaliada a interação entre Acanthamoeba polyphaga e Streptomyces sp. através de cocultivo, com objetivo de obter extratos brutos com ação antimicrobiana. No cocultivo, as amebas inviabilizaram na presença da bactéria. Após contato com as amebas houve alteração morfológica em Streptomyces sp. em todos os tempos de incubação, com produção de hifas, diferente do controle que permaneceu na fase de esporos. A partir do cocultivo foi possível obter extrato bruto em 50 dias, sendo avaliados em diferentes tempos de incubação (1º, 7º, 14º, 21º e 28º dias), contra bactérias multirresistentes como Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, mostrando atividade antimicrobiana, tanto no cocultivo quanto no controle. Com análise estatística foi possível verificar que os extratos produzidos em 24 horas (1º) apresentaram maior atividade, especialmente contra P. aeruginosa. Os extratos produzidos pelo cocultivo e controle se comportaram diferentemente um do outro, porém as diferenças não foram estatisticamente significativas. Em relação à biomassa produzida, foi observado maior volume de biomassa no cocultivo, do que no controle, indicando que o contato entre os dois microrganismos favoreceu a produção de massa celular, porém não houve diferença significativa, somente quando comparado entre dias. Estes resultados mostram que há interação entre Acanthamoeba e Streptomyces uma vez que, a bactéria se beneficiou da ameba auxiliando no seu desenvolvimento. Esta interação entre os microrganismos pode ser importante na modulação da produção de substâncias de ação antimicrobiana, fato que ainda necessita investigação. / The interactions that occur between bacteria and amoebas can give through mutual relations, where both organisms benefit from the association or parasitic in which one organism benefits at the expense of the other. The coexistence of various microorganisms share the same environment can produce alterations in the growth of the organisms is, patterns of adaptation in morphology, development, or even in their ability to synthesize proteins and secondary metabolites. This study evaluates the interaction between Acanthamoeba polyphaga and Streptomyces sp. through cocultivation, in order to obtain crude extracts with antimicrobial action. In cocultivation, amoebas made it impossible in the presence of the bacteria. After contact with amoebae were morphological changes in Streptomyces sp. All incubation times with hyphae production, different control spores this remained in phase. From the cocultivation it was possible to obtain crude extract in 50 days, being evaluated in different incubation times (1º, 7º, 14º, 21º and 28º days), against multiresistant bacteria such as Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, showing antimicrobial activity in both the cocultivation and in control. With statistical analysis found that the extracts in 24 hours (1º) showed greater activity, especially against P. aeruginosa. The extracts produced by the coculture and control behaved differently from one another, but the differences were not statistically significant. Regarding the biomass produced, there was a higher volume of biomass in cocultivation, than in the control, indicating that the contact between the two organisms favored the cell mass production, but there was no significant difference only when compared between days. These results show that there is interaction between Acanthamoeba and Streptomyces since the bacteria benefited amoeba assisting in their development. This interaction between microorganisms may be important in modulating the production of antimicrobial substances, a fact that still requires investigation.

Com o crescimento do setor de lentes de contato houve também um aumento de casos de ceratite por Acanthamoeba spp. A falta de cuidados na limpeza e manutenção de lentes pode levar à ocorrência dessa doença. Nesse estudo avaliou-se o perfil de 196 usuários de lentes de contato de clínicas particulares e do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), através de entrevistas, para conhecer os tipos de lentes usadas, soluções de limpeza, conhecimento da patologia, entre outros, no período de maio de 2015 a outubro de 2016. No HCPA, 112 usuários (57,1%) responderam ao questionário enquanto nas clínicas particulares 84 usuários (42,9%) participaram da pesquisa. A maioria dos entrevistados eram mulheres 116 (59,2%), brancas 173 (89,6%) e com ensino superior 91 (46,4%). O uso de lentes de contato gelatinosas foi mais frequente nas clínicas particulares (78,6%) enquanto no HCPA as lentes mais usadas eram Rígidas Gás Permeáveis (RGP) (60,7%). A maioria dos pacientes usava solução multiuso na limpeza de suas lentes 131 (66,8%). Desconheciam que uma ameba poderia ser causadora da patologia 143 entrevistados (73,0%). Além disso, paralelamente, foi pesquisada a ocorrência de 25 casos de ceratite por Acanthamoeba spp. (nos anos de 1994 a 2015) em uma clínica particular e no HCPA. Foram analisados dados encontrados nos prontuários médicos, como os citados acima entre outros. A maioria eram mulheres (68,0%), brancas (44,0%) e com curso superior (40,0%). Em relação ao uso de lentes de contato a maioria dos pacientes usava lentes gelatinosas (66,7%). Sobre a limpeza e desinfecção, 64,0% utilizavam solução multiuso, mas usavam também soro fisiológico (48,0%) e água (36,0%). A falta de suspeição e a corrente confusão devido aos achados biomicroscópicos leva a um diagnóstico errado quase sempre confundido com herpes simples (36,0%) como mostra o resultado encontrado. Ações que auxiliem os usuários de lentes de contato e a continuidade do levantamento de casos de ceratite por Acanthamoeba spp. seriam necessárias para um conhecimento maior da patologia e consequente sucesso no tratamento. / The growth of the contact lens sector is responsible by the increase Acanthamoeba spp. keratitis cases. The lack of care in cleaning and maintenance of lenses can lead to the occurrence of this disease. In this study, the profile of 196 users of contact lenses from private clinics and Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) was evaluated through interviews, to know the kind of lenses used, cleaning solutions, knowledge of pathology, among others from May 2015 to October 2016. At the HCPA, 112 users (57.1%) answered the questionnaire while in the private clinics 84 users (42.9%) participated of the survey. Most of the interviewees were women 116 (59.2%), white 173 (89.6%) and higher education 91 (46.4%). Soft contact lenses were the most frequent in private clinics (78.6%) while in HCPA the most used lenses were Rigid Permeable Gas (RGP) (60.7%). Most patients wore a multipurpose lens cleaning solution (66.8%), 143 (73.0%) of the interviewees, did not know that an amoeba could be the causer of keratitis. In addition, a survey the occurrence of 25 cases of keratitis caused by Acanthamoeba spp. was investigated (from 1994 to 2015) in a private clinic and at the HCPA. We analyzed data found in medical records, such as those cited above, among others. The majority were women (68.0%), white (44.0%) and higher education (40.0%). Regarding to the use of contact lenses, most patients used gel lenses (66.7%). Regarding to the cleaning and disinfection, 64.0% used multipurpose solution, but they also used saline solution (48.0%) and water (36.0%). Lack of suspicion and the current confusion due to the biomicroscopic findings leads to a misdiagnosis ordinarily confused with herpes simplex (36.0%) we found. Actions that assist the wearers of contact lenses and the continuity of the survey of Acanthamoeba keratitis cases would be necessary for a better knowledge of the pathology and consequent success in the treatment.

Com o crescimento do setor de lentes de contato houve também um aumento de casos de ceratite por Acanthamoeba spp. A falta de cuidados na limpeza e manutenção de lentes pode levar à ocorrência dessa doença. Nesse estudo avaliou-se o perfil de 196 usuários de lentes de contato de clínicas particulares e do Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA), através de entrevistas, para conhecer os tipos de lentes usadas, soluções de limpeza, conhecimento da patologia, entre outros, no período de maio de 2015 a outubro de 2016. No HCPA, 112 usuários (57,1%) responderam ao questionário enquanto nas clínicas particulares 84 usuários (42,9%) participaram da pesquisa. A maioria dos entrevistados eram mulheres 116 (59,2%), brancas 173 (89,6%) e com ensino superior 91 (46,4%). O uso de lentes de contato gelatinosas foi mais frequente nas clínicas particulares (78,6%) enquanto no HCPA as lentes mais usadas eram Rígidas Gás Permeáveis (RGP) (60,7%). A maioria dos pacientes usava solução multiuso na limpeza de suas lentes 131 (66,8%). Desconheciam que uma ameba poderia ser causadora da patologia 143 entrevistados (73,0%). Além disso, paralelamente, foi pesquisada a ocorrência de 25 casos de ceratite por Acanthamoeba spp. (nos anos de 1994 a 2015) em uma clínica particular e no HCPA. Foram analisados dados encontrados nos prontuários médicos, como os citados acima entre outros. A maioria eram mulheres (68,0%), brancas (44,0%) e com curso superior (40,0%). Em relação ao uso de lentes de contato a maioria dos pacientes usava lentes gelatinosas (66,7%). Sobre a limpeza e desinfecção, 64,0% utilizavam solução multiuso, mas usavam também soro fisiológico (48,0%) e água (36,0%). A falta de suspeição e a corrente confusão devido aos achados biomicroscópicos leva a um diagnóstico errado quase sempre confundido com herpes simples (36,0%) como mostra o resultado encontrado. Ações que auxiliem os usuários de lentes de contato e a continuidade do levantamento de casos de ceratite por Acanthamoeba spp. seriam necessárias para um conhecimento maior da patologia e consequente sucesso no tratamento. / The growth of the contact lens sector is responsible by the increase Acanthamoeba spp. keratitis cases. The lack of care in cleaning and maintenance of lenses can lead to the occurrence of this disease. In this study, the profile of 196 users of contact lenses from private clinics and Hospital de Clínicas de Porto Alegre (HCPA) was evaluated through interviews, to know the kind of lenses used, cleaning solutions, knowledge of pathology, among others from May 2015 to October 2016. At the HCPA, 112 users (57.1%) answered the questionnaire while in the private clinics 84 users (42.9%) participated of the survey. Most of the interviewees were women 116 (59.2%), white 173 (89.6%) and higher education 91 (46.4%). Soft contact lenses were the most frequent in private clinics (78.6%) while in HCPA the most used lenses were Rigid Permeable Gas (RGP) (60.7%). Most patients wore a multipurpose lens cleaning solution (66.8%), 143 (73.0%) of the interviewees, did not know that an amoeba could be the causer of keratitis. In addition, a survey the occurrence of 25 cases of keratitis caused by Acanthamoeba spp. was investigated (from 1994 to 2015) in a private clinic and at the HCPA. We analyzed data found in medical records, such as those cited above, among others. The majority were women (68.0%), white (44.0%) and higher education (40.0%). Regarding to the use of contact lenses, most patients used gel lenses (66.7%). Regarding to the cleaning and disinfection, 64.0% used multipurpose solution, but they also used saline solution (48.0%) and water (36.0%). Lack of suspicion and the current confusion due to the biomicroscopic findings leads to a misdiagnosis ordinarily confused with herpes simplex (36.0%) we found. Actions that assist the wearers of contact lenses and the continuity of the survey of Acanthamoeba keratitis cases would be necessary for a better knowledge of the pathology and consequent success in the treatment.

As interações que ocorrem entre as bactérias e amebas podem dar-se através de relações mútuas, onde ambos os organismos se beneficiam da associação ou parasitárias em que um organismo se beneficia em detrimento do outro. A convivência de vários microrganismos que compartilham o mesmo ambiente pode produzir alterações seja no crescimento dos organismos, nos padrões de adaptação, na morfologia, no seu desenvolvimento, ou até mesmo na sua capacidade para sintetizar proteínas e metabólitos secundários. Neste estudo, é avaliada a interação entre Acanthamoeba polyphaga e Streptomyces sp. através de cocultivo, com objetivo de obter extratos brutos com ação antimicrobiana. No cocultivo, as amebas inviabilizaram na presença da bactéria. Após contato com as amebas houve alteração morfológica em Streptomyces sp. em todos os tempos de incubação, com produção de hifas, diferente do controle que permaneceu na fase de esporos. A partir do cocultivo foi possível obter extrato bruto em 50 dias, sendo avaliados em diferentes tempos de incubação (1º, 7º, 14º, 21º e 28º dias), contra bactérias multirresistentes como Escherichia coli e Pseudomonas aeruginosa, mostrando atividade antimicrobiana, tanto no cocultivo quanto no controle. Com análise estatística foi possível verificar que os extratos produzidos em 24 horas (1º) apresentaram maior atividade, especialmente contra P. aeruginosa. Os extratos produzidos pelo cocultivo e controle se comportaram diferentemente um do outro, porém as diferenças não foram estatisticamente significativas. Em relação à biomassa produzida, foi observado maior volume de biomassa no cocultivo, do que no controle, indicando que o contato entre os dois microrganismos favoreceu a produção de massa celular, porém não houve diferença significativa, somente quando comparado entre dias. Estes resultados mostram que há interação entre Acanthamoeba e Streptomyces uma vez que, a bactéria se beneficiou da ameba auxiliando no seu desenvolvimento. Esta interação entre os microrganismos pode ser importante na modulação da produção de substâncias de ação antimicrobiana, fato que ainda necessita investigação. / The interactions that occur between bacteria and amoebas can give through mutual relations, where both organisms benefit from the association or parasitic in which one organism benefits at the expense of the other. The coexistence of various microorganisms share the same environment can produce alterations in the growth of the organisms is, patterns of adaptation in morphology, development, or even in their ability to synthesize proteins and secondary metabolites. This study evaluates the interaction between Acanthamoeba polyphaga and Streptomyces sp. through cocultivation, in order to obtain crude extracts with antimicrobial action. In cocultivation, amoebas made it impossible in the presence of the bacteria. After contact with amoebae were morphological changes in Streptomyces sp. All incubation times with hyphae production, different control spores this remained in phase. From the cocultivation it was possible to obtain crude extract in 50 days, being evaluated in different incubation times (1º, 7º, 14º, 21º and 28º days), against multiresistant bacteria such as Escherichia coli and Pseudomonas aeruginosa, showing antimicrobial activity in both the cocultivation and in control. With statistical analysis found that the extracts in 24 hours (1º) showed greater activity, especially against P. aeruginosa. The extracts produced by the coculture and control behaved differently from one another, but the differences were not statistically significant. Regarding the biomass produced, there was a higher volume of biomass in cocultivation, than in the control, indicating that the contact between the two organisms favored the cell mass production, but there was no significant difference only when compared between days. These results show that there is interaction between Acanthamoeba and Streptomyces since the bacteria benefited amoeba assisting in their development. This interaction between microorganisms may be important in modulating the production of antimicrobial substances, a fact that still requires investigation.

No description available.

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Acanthamoeba culbertsoni is an opportunistic free-living amoeba that is causative of granulomatous amoebic encephalitis (GAE), a chronic and often fatal central nervous system (CNS) disease that is most prevalent in immune compromised individuals. One hallmark of this disease is the formation of granulomas within the CNS, which are commonly absent in immune compromised individuals. Granulomas are usually composed of amoebae, microglia (CNS macrophages), macrophages, T cells, B cells, and neutrophils. Previous studies have demonstrated that microglia respond to Acanthamoeba by producing pro-inflammatory cytokines such as tumor necrosis factor alpha (TNF)-α, interleukin (IL)-1α, and IL-1β. In addition, activated microglia and macrophages have been demonstrated to be cytolytic (i.e., amoebicidal) to Acanthamoeba. Furthermore, previous studies also indicated that Acanthamoeba secrete a myriad of factors including proteases. The role of these proteases during GAE has not been fully elucidated; however, it is thought that these factors may aid in the chronic persistence of Acanthamoeba within the CNS by modulating the host immune response. Using two-dimensional (iso-dalt) gel electrophoresis, we demonstrated that A. culbertsoni secrete factors that degrade culture medium proteins. Initial gelatin zymography studies demonstrated that propagation of A. culbertsoni in medium with high iron content leads to augmentation of protease activity. Gelatin zymography in concert with protease inhibitors demonstrated that A. culbertsoni secrete proteases predominantly of the serine protease class. Using an in vitro co-culture model, we demonstrated that co-culture of A. culbertsoni with mouse microglial-like cells (BV-2 cells) results in the augmentation of A. culbertsoni serine protease activity and stimulation of pro-inflammatory cytokine and chemokine protein expression by microglial-like cells. However, the A. culbertsoni-elicited proteases were shown to degrade microglial-like cell elicited cytokines and chemokines. Collectively, our results suggest that A. culbertsoni- secreted serine proteases may play a role in A. culbertsoni CNS immune evasion by increasing A. culbertsoni CNS dissemination via the diminution of granuloma formation and by dampening microglial-dependent cytokine response.

Family 6 Glycosyltransferases (GT6s) are involved in the biosynthesis of complex glycans and can be found in all vertebrates, cyanophages, and some bacteria and unicellular eukaryotes. Understanding variations within family 6 GTs is important because of the roles of their products in cellular recognition, intercellular interactions, pathogenicity, and immunity and is likewise important for understanding the evolution of GTs. PaGT6 (from Parchlamydia acanthamoebae) and α3GT (from Bos taurus) both require a divalent metal ion for catalysis which binds to a DXD motif. In BoGT6a from Bacteroides ovatus a NXN motif replaces DXD, and activity is metal-independent. However, mutating the NXN motif in BoGT6a to DXD did not introduce metal-dependency, indicating that metal-dependency is linked to additional differences. Calorimetric studies have shown that the presence of a divalent metal ion enhances UDP and donor substrate binding to PaGT6 and causes an increase in the entropy of the interaction. Protein modelling of PaGT6 has revealed that the presence of Mn2+ allows a hydrogen bond to form between Asp 97 and UDP-GalNAc, causing the donor substrate to bend and form hydrogen bonds with His 119, Asn 229, Lys 228, and Arg 234. These interactions do not occur in the absence of Mn2+. Investigation of acceptor substrate binding revealed that the presence of UDP enhances acceptor substrate binding to BoGT6a and PaGT6. Calorimetric titrations of BoGT6a with 2-fucosyllactose in the absence and presence of UDP showed that UDP increases the affinity of 2-fucosyllactose 16-fold with little effect on ΔH. Measurements of ΔCp for 2-fucosyllactose binding indicate that there is not a hydrophobic effect for the binding of 2-fucosyllactose. The preferred acceptor substrate for the bovine and Bacteroides GT6 has a β-1,4 linked galactose, but P. acanthamoebae GT6 prefers an acceptor substrate with a β-1,3 linked galactose. The N-terminus of the catalytic domain of bacterial GT6s is truncated by 47 residues relative to the catalytic domain of bovine α3GT. Removal of this region from α3GT results in an unfolded protein, indicating that although this region is not directly involved in substrate binding, it forms interactions necessary for the stability of the catalytic domain. / Includes bibliography. / Dissertation (Ph.D.)--Florida Atlantic University, 2018. / FAU Electronic Theses and Dissertations Collection

Acanthamoeba é uma ameba de vida livre, capaz de causar raras e graves infecções oportunistas em olhos, pele e sistema nervoso de humanos e animais. É um protozoário ubiquitário e frequentemente isolado do ambiente. Pode infectar humanos através do uso de lentes de contato, cortes ou feridas na pele assim como ser inalada e conduzida aos pulmões. Possui duas formas em seu ciclo de vida: trofozoíto móvel e infectiva capaz de causar ceratite assim como uma fatal encefalite e de cisto resistente ao ambiente e ao ataque do sistema imune, facilitando a ocorrência da infecção. Existem vários fatores que contribuem na patogênese de Acanthamoeba, sendo a proteína de união à Manose (MBP) a única proteína de superfície descrita como principal fator de patogenicidade. Não existem trabalhos sobre o papel funcional ou patogênico de outras proteínas de superfície que poderiam ser relevantes na invasão ou infecção do hospedeiro por esta ameba. O objetivo geral deste estudo é identificar e analisar uma proteína de superfície de Acanthamoeba castellanii e avaliar seu potencial para utilização em diagnóstico da ceratite amebiana ou encefalite granulomatosa. Predições in silico deste estudo demostram que a calreticulina é uma proteína de superfície. A clonagem da sequência codificadora da calreticulina por recombinação homóloga in vivo foi realizada no vetor pGEX4T1 para permitir a expressão em Escherichia coli BL21 pLysE da proteína recombinante em fusão com a Glutariona-STransferase nas condições de 14°C por 16 horas tendo um rendimento final de 3,64 mg/L de proteína purificada. O potencial imunodiagnóstico foi avaliado através de ELISA usando soros de pacientes com encefalite e soros de rato com ceratite e encefalite testando como antígeno a proteína recombinante. A proteína foi reconhecida pelos soros de pacientes infectados e saudáveis, diferentemente dos soros de ratos, em que só foi reconhecida pelos ratos infectados. Estes resultados preliminares apontam que a proteína calreticulina de A. castellanii poderia ser um candidato para imunodiagnóstico das doenças causadas pelo protozoário em ratos; no caso dos resultados em pacientes humanos ainda são necessárias maiores investigações. / Acanthamoeba is a microscopic free-living amoeba able to cause rare and serious opportunistic infections in eyes, skin and nervous system in humans and animals. It’s one of the most common protist widely distributed and it has been isolated from the environment, including water and soil. The amoeba can infect contact-lenses wearers through skin lesions or via the nasal route. Acanthamoeba exists in two distinct forms: an active-infective trophozoite form during which Acanthamoeba reproduces being capable of cause Acanthamoeba keratitis and a fatal granulomatous amoebic encephalitis, and a dormant cyst form resistant to immune system defense making easier the recurrence of these infections. Several factors contribute with the pathogenesis of Acanthamoeba. The mannose bindingprotein (MBP) is the only surface protein as a main pathogenicity factor in Acanthamoeba; however, there are no evidence of any scientific work that describes the functional nor pathogenic role of another surface protein that could be relevant in the host-parasite invasion or infection by this amoeba. The general objective of this study is identify and analyze an Acanthamoeba castellanii surface protein and test its potential for use in diagnosis of amoebic keratitis or granulomatous encephalitis. In silico predictions showed that, A. castellanii calreticulin is a surface protein. In vivo homologous recombination cloning of the coding sequence was performed using the pGEX4T1 vector for expressing the GST fusion recombinant protein using an Escherichia coli BL21 pLysE strain at 14°C for 16 hours obtaining a final efficiency of 3,64 mg/L of purified protein. The immunodiagnostic potential was tested with specific antibody responses in serum from patients with encephalitis and infected rats with keratitis and encephalitis against recombinant calreticulin by ELISA. The protein was recognized by both infected and healthy patients serum, whereas the infected rat serum was the only recognized by the recombinant protein. These results would conclude that A. castellanii calreticulin probably could be an immunodiagnostic prospect of Acanthamoeba diseases in animals but in human further immunoassays are required.

As interações que ocorrem entre as bactérias e amebas podem dar-se através de relações mútuas, onde ambos os organismos se beneficiam da associação ou parasitárias, em que um organismo se beneficia em detrimento do outro. Quando esses organismos compartilham o mesmo ambiente, pode resultar em algumas alterações, seja no crescimento dos organismos, nos padrões de adaptação, na morfologia, no seu desenvolvimento ou até mesmo na sua capacidade para sintetizar proteínas e outras substâncias. No presente estudo, avaliou-se a interação entre Acanthamoeba polyphaga e Staphylococcus aureus (MRSA) através de um modelo de cocultivo em diferentes tempos de incubação. A partir deste, 89% das células amebianas permaneceram viáveis após contato com a bactéria. O isolado bacteriano foi visualizado no interior da ameba através de microscopia confocal e de fluorescência em até 216 horas de cocultivo, sendo considerado um microrganismo resistente à ameba. O contato de A. polyphaga com S. aureus (MRSA) não demonstrou alteração fenotípica da ameba através dos testes fisiológicos de osmo e termotolerância. O lisado da cultura amebiana aumentou o crescimento de S. aureus (MRSA) nos diferentes tempos de incubação, porém houve diferença significativa apenas entre o controle e 96 horas de cocultivo. O crescimento de S. aureus (MRSA) foi inibido ao longo dos tempos de incubação pelo efeito do sobrenadante da cultura amebiana apresentando diferença significativa entre o controle e 96 horas de cocultivo, sugerindo-se que A polyphaga tenha secretado algum tipo de metabólito, que inibiu o crescimento da bactéria. A interação dos microrganismos não apresentou alterações significativas no perfil de susceptibilidade aos antibióticos testados. S. aureus (MRSA) permaneceu viável em cistos de A. polyphaga, reforçando a hipótese de que Acanthamoeba pode desempenhar um papel crucial na propagação de S. aureus (MRSA) na comunidade e ambiente hospitalar. O maior percentual de amebas encistadas deu-se em 96 horas de incubação quando cocultivadas com o isolado de S. aureus (MRSA), apresentando um aumento progressivo deste percentual a cada período de incubação. A partir disso, estudos devem intensificar-se para melhor compreender os mecanismos de virulência envolvidos na interação entre ambos os microrganismos. / The interactions that occur between bacteria and amoebae can give through mutual relations, where both organisms benefit from the association or parasitic in which one organism benefits at the expense of the other. When these organisms share the same environment, can result in some changes in the growth of organisms, in adaptation patterns, in morphology, development or even in their ability to synthesize proteins and other substances. In the present study, we evaluated the interaction between Acanthamoeba polyphaga and Staphylococcus aureus (MRSA) using a coculture model at different incubation times. From this, 89% of amoebic cells remain viable after contact with the bacteria. The bacterial isolate was visualized inside the amoeba through confocal microscopy and fluorescence for up to 216 hours of cocultivation, being considered a resistant microorganism to the amoeba. The contact of A. polyphaga with S. aureus (MRSA) showed no phenotypic changes of amoeba through physiologic osmo or thermotolerance tests. The lysate of amoebic culture increased the growth of S. aureus (MRSA) in the different incubation times, but there was a significant difference only between the control and 96 hours of cocultivation. The growth of S. aureus (MRSA) has been inhibited over the incubation times for the effect of amoebic culture supernatant showing a significant difference between the control and 96 hours of coculture, suggesting tha A. polyphaga has some kind of secreted metabolites inhibiting the growth of bacteria. The interaction of microorganisms showed no significant changes in the susceptibility profile of the tested antibiotics. S. aureus (MRSA) remained viable cysts of A. polyphaga, reinforcing the hypothesis that Acanthamoeba can play a crucial role in the spread of S. aureus (MRSA) in the community and hospital. The highest percentage of encysted amoebae occurred in 96 hours of incubation when cocultured with the isolate of S. aureus (MRSA), with a progressive increase in this percentage to each incubation period. From this, studies should be intensified to better understand the virulence mechanisms involved in the interaction between these two organisms.