Le psoriasis est une maladie inflammatoire chronique affectant principalement la peau. Au niveau cutané, cette pathologie est caractérisée par une hyperprolifération de l'épiderme ainsi qu'un déséquilibre du métabolisme des acides gras polyinsaturés (AGPIs) contribuant à la boucle d'inflammation chronique. Les AGPIs oméga-3, dont l'acide eicosapentaénoïque (EPA), possèdent des propriétés anti-inflammatoires bénéfiques pour le psoriasis. Toutefois, leur potentiel thérapeutique préserve une faible crédibilité, d'une part parce que certaines observations découlant des études cliniques demeurent contradictoires, et d'une autre part parce que leurs mécanismes d'action dans le psoriasis demeurent peu connus à ce jour. D'une autre part, l'équipe de recherche du Dre Roxane Pouliot a antérieurement démontré le potentiel thérapeutique des oméga-3 sur un modèle de psoriasis *in vitro*. Dans ces travaux, il a été observé que l'EPA était fortement converti en un certain médiateur lipidique anti-inflammatoire, soit l'acide 18-hydroxy-eicosapentaénoïque (18-HEPE). Sur la base de cette observation, il a été suggéré que le 18-HEPE pourrait jouer un rôle pivot dans le mécanisme d'action des oméga-3 dans le psoriasis. C'est pourquoi l'objectif principal de ce projet de recherche était d'évaluer la bio-action du médiateur lipidique 18-HEPE dans le contexte du psoriasis *in vitro*. Pour ce faire, des substituts cutanés sains et psoriasiques ont été produits par génie tissulaire. Les substituts psoriasiques ont reçu des milieux de culture supplémentés ou non avec 0,1 µM de 18-HEPE. Une co-culture de kératinocytes psoriasiques et de lymphocytes T activés a également été réalisée en administrant des milieux de culture supplémentés ou non avec des doses de 18-HEPE allant de 0,1 à 1 µM de 18-HEPE. Les analyses ont révélé que le 18-HEPE ne module pas l'hyperprolifération ni certains marqueurs dérégulés dans l'épiderme des substituts psoriasiques. Également, le 18-HEPE a modulé le profil lipidique des substituts psoriasiques, et ce probablement en s'insérant dans les phospholipides membranaires et en modulant l'activité des enzymes de conversion. De plus, le 18-HEPE a modulé le profil sécrétoire des kératinocytes psoriasiques en présence de lymphocytes T activés, et ce en diminuant la sécrétion des cytokines pro-inflammatoires CXCL10 et IL-8. Finalement, il est suggéré que le 18-HEPE pourrait générer ses effets observés en induisant l'apoptose des lymphocytes T par une hausse d'expression du récepteur Fas à leur surface, puis en diminuant la phosphorylation du récepteur CXCR4. En bref, ce projet de recherche a mis en lumière la bio-action du médiateur lipidique 18-HEPE dans le contexte du psoriasis. Sur la base des observations avec nos modèles *in vitro*, il est conclu que le 18-HEPE ne joue pas un rôle pivot dans le psoriasis, mais qu'il pourrait tout de même contribuer en partie aux effets bénéfiques des oméga-3 dans le psoriasis. / Psoriasis is a chronic inflammatory disease primarily affecting the skin. Psoriatic skin is characterized by hyperproliferation of the epidermis as well as an imbalance in the metabolism of polyunsaturated fatty acids (PUFAs) contributing to the chronic inflammation loop. N-3 PUFAs, including eicosapentaenoic acid (EPA), have beneficial anti-inflammatory properties for psoriasis. However, their therapeutic potential retains low credibility, on the one hand because certain observations resulting from clinical studies remain contradictory, and on the other hand because their mechanisms of action in psoriasis remain little known to date. Dr. Roxane Pouliot's research team previously demonstrated the therapeutic potential of n-3 PUFAs on a model of psoriatic skin reconstructed *in vitro* by tissue engineering. In this work, it was observed that EPA was highly converted into a specific anti-inflammatory lipid mediator, namely 18-hydroxyeicosapentaenoic acid (18-HEPE). Based on these observations, it has been suggested that 18-HEPE may play a pivotal role in the mechanism of action of n-3 PUFAs in psoriasis. Therefore, the main goal of this research project was to evaluate the bio-action of the lipid mediator 18-HEPE in the context of psoriasis *in vitro*. To do this, healthy and psoriatic skin substitutes were produced by tissue engineering. The psoriatic substitutes received culture media supplemented or not with 0.1 µM of 18-HEPE. A co-culture of psoriatic keratinocytes and activated T lymphocytes was also carried out by administering culture media supplemented or not with doses of 18-HEPE ranging from 0.1 to 1 µM of 18-HEPE. Analyzes revealed that 18-HEPE does not modulate hyperproliferation nor some of the dysregulated markers in the epidermis of psoriatic skin substitutes. Also, 18-HEPE modulated the lipid profile of psoriatic substitutes, probably by inserting itself into membrane phospholipids and modulating the activity of converting enzymes. Also, 18-HEPE modulated the secretory profile of psoriatic keratinocytes in the presence of activated T cells, mainly by decreasing the secretion of the pro-inflammatory cytokines CXCL10 and IL-8. Finally, it is suggested that the observed effects of 18-HEPE could be mediated by the induction of T cell apoptosis by an increase in expression of the Fas receptor on their surface and by a decrease in the phosphorylation of the CXCR4 receptor. In summary, this research project shed light on the bio-action of the lipid mediator 18-HEPE in the context of psoriasis. Based on observations with our *in vitro* models, it is concluded that 18-HEPE does not play a pivotal role in psoriasis but may still contribute in part to the beneficial effects of n-3 PUFAs in psoriasis.

Tableau d'honneur de la FÉSP / La famille des acides gras oméga-3 à longue chaîne (AGn3-LC) est composée principalement de deux acides gras qui exercent des effets physiologiques connus, soit les acides eicosapentaénoïque (EPA, C20:5n3) et docosahexaénoïque (DHA, C22:6n3). La grande majorité des études cliniques menées jusqu’à maintenant ont observé l’effet d’un supplément alimentaire qui combine l’EPA et le DHA sous différentes formes et proportions. Alors que les études épidémiologiques tendent à montrer un effet protecteur des AGn3-LC sur le risque cardiovasculaire, la plupart des études cliniques qui ont été menées jusqu’à maintenant tendent à montrer un effet neutre de la supplémentation en AGn3-LC sur le risque d’évènements cardiovasculaires. L’utilisation de suppléments d’AGn3-LC en prévention des évènements cardiovasculaires est donc un sujet plutôt controversé à ce jour. De plus en plus d’évidences suggèrent que l’EPA et le DHA exercent des effets différents sur les facteurs de risque cardiovasculaire. Ainsi, la proportion d’EPA et de DHA contenus dans les suppléments utilisés dans les études pourrait en partie expliquer les résultats plutôt neutres observés quant à l’effet des AGn3-LC sur le risque d’évènements cardiovasculaires. De plus, certaines études ont rapporté une importante variabilité dans la réponse aux AGn3-LC, ce qui suggère que la supplémentation en AGn3-LC pourrait être bénéfique seulement chez une certaine proportion d’individus en ce qui concerne la santé cardiovasculaire. L’objectif général de ce doctorat était de comparer les effets de l’EPA et du DHA sur le risque cardiométabolique. Plus spécifiquement, nous avons comparé l’effet de l’EPA et du DHA sur les lipides sanguins, les biomarqueurs inflammatoires, le métabolisme des lipides, l’expression des gènes impliqués dans le métabolisme des lipides, la variabilité inter- et intra-individuelle dans la réponse des triglycérides et du cholestérol dans les lipoprotéines de faible densité (C-LDL), ainsi que les déterminants de la réponse aux AGn3- LC. Ce doctorat a été rendu possible grâce à une étude clinique randomisée en chassé-croisé et à double insu qui a été menée à l’Institut sur la nutrition et les aliments fonctionnels. Un total de 154 participants ont été assignés de façon aléatoire à une séquence de trois phases expérimentales de 10 semaines et séparées par une période libre de 9 semaines. Chaque participant a été supplémenté avec 2,7 g par jour d’EPA, 2,7 g par jour de DHA et 3 g par jour d’huile de maïs à titre de témoin. Les résultats de ce projet de recherche ont permis d’observer que l’EPA et le DHA exerçaient des effets différents sur les lipides sanguins, certains biomarqueurs inflammatoires, l’Indice Oméga-3, le métabolisme de l’apolipoprotéine B100 des LDL et la taille des LDL. Une importante variabilité inter- et intra-individuelle a également été observée dans la réponse des triglycérides et du cholestérol dans les LDL sériques suite à la supplémentation en EPA et en DHA. Les résultats de ce projet de doctorat supportent l’hypothèse que l’EPA et le DHA pourraient exercer des effets différents sur le risque cardiovasculaire. De plus, l’EPA et/ou le DHA pourraient exercer des effets cardioprotecteurs chez certains individus, mais pourraient aussi exercer des effets neutres ou néfastes sur la santé cardiovasculaire. / Most clinical trials to date have used the two main types of long-chain omega-3 polyunsaturated fatty acids (LCn3-PUFAs), docosahexaenoic acid (DHA, C22:6n3) and eicosapentaenoic acid (EPA, C20:5n3) in various forms and proportions. While LCn3-PUFA consumption tends to exert a cardioprotective effect in epidemiological studies, most clinical studies have shown a neutral effect of LCn3-PUFA supplementation on the risk of cardiovascular events and mortality. Thus, the use of LCn3-PUFA to prevent cardiovascular events remains controversial. The inconsistent effect of LCn3-PUFAs on cardiovascular events might be because EPA and DHA have distinct effects on cardiovascular risk. The proportion of EPA and DHA contained in supplements may influence the effects of LCn3-PUFA supplements. Moreover, inter-individual variability in the plasma triglyceride response to LCn3-PUFA supplementation has been fairly well documented in several clinical studies, suggesting that some but not all individuals benefit from DHA and EPA supplementation. The general objective of this thesis was to compare the individual effect of EPA and DHA on cardiometabolic risk. Specifically, we compared the effect of EPA and DHA on blood lipids, markers of inflammation, lipids metabolism, gene expression of lipid metabolism, the inter- and intra-individual variability of triglyceride and lowdensity lipoprotein cholesterol (LDL-C) response as well as the determinants of the response. A randomized controlled crossover and double-blind trial was conducted at the Institute of Nutrition and Functional Foods. A total of 154 participants were randomized to difference sequences of three experimental phases of 10 weeks and separated with 9-week washouts. Each participant was supplemented with 2,7 g per day of EPA, 2,7 g per day of DHA and 3 g per day of corn oil as the control. The results of this study have shown that EPA and DHA exert differential effects on blood lipids, on some inflammation markers, on the Omega-3 Index, on the LDLapolipoproptein B100 metabolism and on LDL particle size. An important inter- and intra-individual variability in the triglyceride and the LDL-C response to EPA and DHA has also been observed. Altogether, these observations support the hypothesis that EPA and DHA may exert differential effects on the risk of cardiovascular events. Moreover, data on the variability in the triglyceride and LDL-C response suggest that some but not all individuals may benefit from DHA and EPA supplementation in terms of cardiovascular prevention.

Diverses fractions d'huiles marines hydrolysées ont été concentrées en certains acides gras grâce à une méthode multi-étape de fractionnement par urée utilisant le méthanol comme solvant. Ces fractions incluent les acides gras saturés (AGS), les mono insaturés (AGMI) et les polyinsaturés à longues chaînes (AGPI) tels que les acides eicosapentaénoïque (AEP), docosapentaénoïque (ADP) et docosahexaénoïque (ADH). Ainsi le but de cette étude était de vérifier les effets du ratio urée/acides gras/méthanol et de la procédure multi-étapes sur les produits finaux. Les données sur la composition en acides gras indiquent que le fractionnement multi-étape par urée est une méthode efficace pour la séparation des fractions d'huiles marines et que cette méthode produit des fractions AGS, AGMI et AGPI fortement concentrées. Après complexion des AGSet des acides gras libres (AGL) à faible insaturation, des concentrations (Cm) de AGPI allant jusqu'à 93,2%, 88,4% et 73,4% ont été obtenues avec les huiles de maquereau, de phoque et d'hareng, respectivement; les ratios AGLlUréelMéthanol étant de 1:3:10 à 3:5:20 à une température de 4°C. Les cristaux formés ont été enrichis en AGS et AGMI. Des valeurs Cm pour les SA de 70,0 59,5 et 50,5% ont été obtenues avec des ratios AGL/Urée/Méthanol de 1:3:10 à 3:5:20 à une température de 4°C; alors que la seconde étape du fractionnement a fourni des valeurs de Cm pour les AGMI de 51,6%, 73,2% et 69,6% pour les huiles de maquereau, phoque et harengs, respectivement, avec des ratios AGL/Urée/Méthanol de 2:1:5 à 3:2:10 à une température de 4°C. L'approche multi-étape développée s'avère donc prometteuse pour la valorisation intégrale des huiles marines.

Thèse numérisée par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

Les dernières données de consommation alimentaire de la population française démontrent que les apports nutritionnels en acide eicosapentaénoïque (EPA) et en acide docosahexaénoïque (DHA) sont nettement inférieurs aux recommandations fixées par l’Agence nationale de sécurité sanitaire, de l’alimentation, de l’environnement et du travail (ANSES). Compte tenu de leurs rôles physiologiques, l’amélioration de leur biodisponibilité est devenue une priorité nutritionnelle. La maitrise des formes de vectorisation des acides gras polyinsaturés à longue chaine de la série n-3 (AGPI-LC n-3) représente une piste d’intérêt afin de répondre à cette problématique. C’est dans ce contexte que s’inscrit ce travail de thèse, visant à étudier l’influence de la forme moléculaire (phospholipides (PL) vs triglycérides (TG)) et/ou supramoléculaire (phase continue, émulsion, liposomes) de vectorisation des AGPI-LC n-3 sur leur devenir métabolique.La démarche expérimentale adoptée a consisté, dans un premier temps, à caractériser les différentes formes de vectorisation des AGPI-LC n-3 par un couplage de méthodes d’analyse physico-chimiques (microscopie optique, granulométrie, mesure des produits primaires et secondaires d’oxydation, lipolyse enzymatique). Les données obtenues ont permis de poser des hypothèses mécanistiques pour l’étude de la biodisponibilité chez le rat. Ainsi, dans un deuxième temps, l’étude in vivo a permis d’aborder (1) l’absorption intestinale des acides gras (AG) suite à un apport en bolus de lipides et (2) l’accrétion tissulaire suite à un régime de 8 semaines.Les résultats indiquent que la forme moléculaire de vectorisation des AGPI-LC n-3 (TG marins vs PL marins, en phase continue) n’influence pas leur absorption intestinale mais plutôt leur incorporation dans les lipides lymphatiques, principaux transporteurs des AG alimentaires dans l’organisme. A l’inverse, la structuration des PL marins en milieu aqueux (émulsion ou liposomes), permet d’améliorer l’absorption de l’EPA et du DHA, de façon spécifique à la nature de la structuration supramoléculaire. Les résultats de l’accrétion tissulaire montrent qu’au terme des 8 semaines de régime, l’enrichissement tissulaire en AGPI-LC n-3 s’effectue de façon différente selon leur forme moléculaire de vectorisation. Ainsi, la consommation de TG marins favorise l’incorporation des AGPI-LC n-3 dans les lipides hépatiques, alors que la supplémentation des régimes en PL marins permet d’orienter le DHA vers le cerveau et la rétine.L’ensemble de ces résultats montre que le choix de la forme moléculaire de vectorisation des AGPI-LC n-3 (PL vs TG) peut être un moyen d'orienter leur incorporation tissulaire, alors que leur structuration supramoléculaire (émulsion ou liposomes), une stratégie pour moduler leur absorption intestinale. / The latest data from the cross-sectional national French dietary study show that dietary intakes of eicosapentaenoic acid (EPA) and docosahexaenoic acid (DHA) are significantly lower than those recommended by the French Agency for Food, Environmental and Occupational Health & Safety (ANSES). Considering their physiological roles, improving their dietary intake has became a nutritional priority. The control of the different forms of n-3 long chain polyunsaturated fatty (n-3 LC-PUFA) intake represents an interesting way to address this issue. In this context, this thesis aims at studying the influence of the molecular form (phospholipids (PL) vs triglycerides (TG)) and/or supramolecular form (continuous phase, emulsion, liposomes) of n-3 LC-PUFA towards their bioavailability.The experimental approach consisted in characterizing the different forms of n-3 LC-PUFAs by coupling various physicochemical methods (optical microscopy, granulometry, measurement of primary and secondary oxidation products, enzymatic lipolysis). The data obtained made it possible to propose some mechanistic hypothesis for the bioavailability studies conducted in rat. Thus, in a second step, the in vivo study made addresses (1) the intestinal absorption of fatty acids following a single dose of lipids and (2) the lipid tissue accretion following an 8-week diet.The data obtained from the intestinal absorption study indicate that the molecular form of n-3 LC-PUFA targeting (marine TG vs marine PL, in continuous phase) does not influence their intestinal absorption but rather their incorporation into lymphatic lipids, which are the main carriers for dietary fatty acids in the organism. Conversely, structuring marine PL (emulsion or liposomes) improves the EPA and DHA absorption, but differently according to the supramolecular form. The results concerning tissue accretion show that, after 8-week diet, the tissue enrichment in n-3 LC-PUFA is different according to the molecular form of targeting. The consumption of marine TG favours the incorporation of n-3 LC-PUFA into hepatic lipids, while the supplementation of diets with marine PL targets DHA preferentially to brain and retina.All these results show that the molecular form of targeting (PL vs TG) of n-3 LC-PUFA can be a way for managing their tissue incorporation, whereas the supramolecular organization (emulsion or liposomes) can be envisaged to monitor their intestinal absorption.

<p>\ / Doctorat en Sciences médicales / info:eu-repo/semantics/nonPublished

Le premier objectif de cette thèse était d'évaluer l'association entre la complexité du travail par rapport aux données, personnes et objets, et le risque de la démence et de ses soustypes, en tenant compte de l'activité physique au travail. Le deuxième objectif était d'évaluer l'association entre le niveau sanguin des acides gras polyinsaturés oméga-3 (AGP n-3) totaux, de l'acide eicosapentaénoïque (EPA), de Vacide docosahexaénoïque (DHA) et l'incidence de la démence et de la maladie d'Alzheimer (MA), en tenant compte des niveaux sanguins de mercure. Le troisième objectif était d'approfondir l'étude de l'association entre le niveau sanguin de mercure et le risque de démence et de MA, en tenant compte des AGP n-3. Les analyses ont été réalisées à partir des données de l'Étude sur la santé et le vieillissement au Canada, une étude de population réalisée entre 1991 et 2001 sur un échantillon représentatif de personnes âgées de 65 ans et plus. Des modèles de régression de Cox, incluant 3 557 sujets et intégrant l'âge comme échelle de temps, ont montré qu'un niveau élevé de complexité du travail par rapport aux personnes et aux objets est associé à un risque diminué de démence de toutes causes et de démence vasculaire, mais pas de MA. D'autres modèles de Cox, incluant 664 sujets pour qui des échantillons de sang étaient disponibles, ont montré que ni les niveaux sanguins d'AGP n-3 totaux, ni ceux de DHA ou de EPA n'étaient associés au risque de démence ou de MA après ajustement pour le mercure. Finalement, des modèles de Cox, incluant 669 sujets dont les échantillons de sang ont permis des analyses toxicologiques, ont montré qu'un niveau élevé de mercure n'est pas associé à un risque accru de démence ou de MA. Au contraire, les sujets avec un niveau de mercure dans les deux quartiles supérieurs avaient un risque de démence et de MA significativement diminué, après ajustement pour les AGP n-3. Ces analyses auront permis d'évaluer avec un devis prospectif l'effet de la complexité du travail, des niveaux sanguins des AGP n-3, du DHA, de l'EPA et du mercure sur le risque de démence.

La dépression est une maladie chronique et récurrente qui affecte deux fois plus les femmes que les hommes. Les périodes entourant la ménopause sont marquées par des fluctuations hormonales qui sont associées à des bouffées de chaleur, des troubles psychologiques et du sommeil qui affectent significativement la qualité de vie des femmes. Toutefois, il n'existe pas actuellement de consensus de traitements dans les cas de troubles dépressifs moins sévères. Cette lacune est particulièrement problématique, car leur prévalence dépasse celle de la dépression majeure, laissant ainsi les cliniciens sans recommandations de traitement de base pour la majorité des patients. Parallèlement au manque de confiance des femmes envers les thérapeutiques conventionnelles, plusieurs d'entre elles se tournent vers des pratiques alternatives non médicamenteuses qui n'ont pas été validées. Les suppléments d'acides gras oméga-3 connaissent une popularité grandissante, notamment pour leurs effets cardiovasculaires protecteurs, mais également pour leurs supposés bénéfices dans l'amélioration des symptômes dépressifs. Nos résultats auprès de la population québécoise montrent qu'effectivement la prévalence de consommation de supplément d'oméga-3 est élevée. Notre essai clinique de 8 semaines mené auprès de 120 femmes d'âge moyen n'a pas démontré d'avantages du supplément enrichi en éthyl-EPA par rapport au placebo dans le traitement de la détresse psychologique et les symptômes dépressifs. Toutefois, à la suite de sous-analyses selon le diagnostic d'épisode dépressif majeur (EDM) à la randomisation, nous nous sommes aperçus que les changements à 8 semaines dans les échelles de détresse psychologique et de dépression étaient significativement plus importants dans le groupe EEPA comparativement au placebo chez les femmes sans EDM. De plus, d'autres sousanalyses réalisées auprès des femmes ayant des bouffées de chaleur ont indiqué que la supplémentation en oméga-3 réduirait significativement leurs fréquences et scores comparativement au placebo. En somme, les résultats obtenus dans cette thèse de doctorat indiqueraient que dans les cas de détresse psychologique et de symptômes dépressifs légers chez des femmes d'âge moyen, la supplémentation d'acides gras oméga-3 enrichie d'éthyl- EPA pourrait procurer certains avantages au placebo. Puisque le présent essai clinique est le premier du genre à être réalisé lors de ces périodes importantes de la vie féminine, nos résultats devront être confirmés.

L’optimisation du statut tissulaire en acides gras polyinsaturés à longues chaines n-3 (AGPILC n-3) fait partie des objectifs actuels en nutrition humaine. En effet, de nombreux effets bénéfiques sur la santé humaine ont été démontrés pour ces différents AGPILC n-3. Néanmoins, la bioconversion de ces dérivés à partir de leur précurseur alimentaire, l’acide α-linolénique, est limitée chez l’Homme et ne permet pas de subvenir aux besoins. Parmi cette famille d’acides, l’acide docosahexaénoïque (DHA) et de l’acide eicosapentaénoïque (EPA) ont été largement étudiés à l’inverse de ceux de l’acide docosapentaénoïque n-3 (DPA). Le premier objectif de ces travaux a été d’étudier l’impact d’une supplémentation nutritionnelle en DPA sur le métabolisme des acides gras et le métabolisme lipidique chez le rat sain. Pour cela, une méthode de purification du DPA à haute pureté et en grande quantité par chromatographie liquide a tout d’abord été mise en place. Ce résultat participe à faciliter la recherche future des effets in vivo du DPA dont la disponibilité commerciale est faible. Après sa supplémentation nutritionnelle, le DPA a été incorporé dans de multiples tissus et a impacté les compositions tissulaires en AGPILC n-3 de certains organes spécifiques comme le foie, le cœur, le poumon, la rate et le rein. Ainsi, la supplémentation en DPA pourrait être une source d’EPA, de DPA, et dans une moindre mesure de DHA. Enfin, comparé à une supplémentation en EPA ou en DHA, le DPA a été l’AGPILC n-3 le plus puissant pour améliorer la triglycéridémie et la cholestérolémie des animaux. Ces informations participeront certainement à une prise en compte plus importante du DPA tant dans les études nutritionnelles ainsi que dans l’installation des futures recommandations nutritionnelles. Le deuxième axe de recherche a porté sur la capacité d’une incorporation partielle de lipides laitiers dans le régime à augmenter le statut tissulaire en AGPI-LC n-3. L’incorporation de lipides laitiers a augmenté le statut en DHA cérébral et rétinien et le statut en DPA dans les autres tissus étudiés. De plus, l’induction de la conversion des AGPILC n-3 à partir de leur précurseur par les lipides laitiers a été complémentaire avec la supplémentation en DPA pour augmenter le statut tissulaire en AGPI-LC n-3. Ces résultats s’insèrent dans un contexte de nutrition infantile, période pendant laquelle l’incorporation des AGPI-LC n-3 est maximale dans les tissus nerveux. Ainsi, ces résultats apportent des données intéressantes tant pour les entreprises que pour les professionnels de santé pour recommander à la consommation des formules infantiles contenant des lipides laitiers. / The optimization of tissue status in n-3 long-chain polyunsaturated fatty acids (n-3 LCPUFA) is one of the current goals in human nutrition. Indeed, many beneficial effects on human health have been demonstrated for these different n-3 LCPUFA. However, the bioconversion of these derivatives from their food precursor, α-linolenic acid, is limited in humans and it does not meet the needs of the organism. Among this family of fatty acids, docosahexaenoic acid (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA) have been widely studied in contrast to those of n-3 docosapentaenoic acid (DPA). The first objective of this work was to study the impact of dietary supplementation with DPA on fatty acid metabolism and lipid metabolism in healthy rats. For this, a method for purifying DPA with high purity and in large quantities by liquid chromatography was first established. This result helps future research of the in vivo effects of DPA, poorly commercially available. After its nutritional supplementation, DPA was incorporated into multiple tissues and it has affected the n-3 LCPUFA tissue compositions of specific organs such as the liver, heart, lung, spleen and the kidney. Thus, supplementation with DPA could be a source of EPA, DPA, and to a lesser extent DHA. Finally, compared to supplementation with EPA or DHA, DPA was the most potent n-3 LCPUFA to improve triglyceridemia and cholesterolemia in animals. This information will certainly contribute to a greater consideration of DPA both in nutritional studies and in the direction of future nutritional recommendations. The second area of ​​research focused on the ability of a partial incorporation of dairy lipids in the diet to increase the tissue status in n-3 LCPUFA. Incorporation of dairy lipids in the diet increased DHA status in brain and retina and DPA status in the other studied tissues. In addition, the induction of conversion of n-3 LCPUFA from their precursor by dairy lipid was complementary with the DPA supplementation to increase n-3 LCPUFA status in tissues. These results fit into a context of infant nutrition, during which the incorporation of n-3 LCPUFA is maximal in nervous tissues. Thus, these results provide interesting data for both companies and health professionals to recommend infant formulas containing dairy lipids for consumption.

I. DESCRIPTION DE PROJET DE RECHERCHE<p><p>Le canal sodium épithélial bloquable par l’amiloride (ENaC) est une protéine intégrale de la membrane apicale des épithéliums impliqués dans l’absorption du sodium. Deux fonctions majeures sont directement liées au fonctionnement d’ENaC. D’une part, la régulation de la balance sodée par le rein et donc de la pression artérielle et d’autre part, la clairance du fluide alvéolaire pulmonaire.<p>Le transport vectoriel de sel et d’eau à travers ces épithéliums à jonctions serrées repose sur un transport actif de sodium entraînant un flux osmotique d’eau. Ce transport de sodium s’effectue en deux étapes: l’entrée apicale, par diffusion, facilitée via ENaC, et la sortie basolatérale, active, par les pompes Na+/K+ ATPases.<p><p>Ces dernières années, un intérêt grandissant est porté sur les acides gras polyinsaturés à longues chaînes de type oméga 3 (PUFAs) et leurs implications dans divers processus physiologiques. Entre autres effets, les PUFAs modulent différents types de canaux ioniques (canaux Na+ dépendant du voltage, Ca++ L-type, K+).<p>Les études in vivo impliquant un effet à long terme des PUFAs décrivent des mécanismes inhibiteurs. Cependant, lors d’une étude précédente, axée sur la composition lipidique des membranes de cellules rénales en culture et l’influence de l’ajout d’acides gras saturés et insaturés sur le transport du sodium, nous avons constaté que les acides gras polyinsaturés à longues chaînes de type oméga 3 augmentaient la réabsorption du sodium. Ces résultats pourraient être intéressants, car les canaux sodiques de l’épithélium alvéolaire sont en contact direct avec le surfactant, dont la composition lipidique varie en fonction de l’apport alimentaire en PUFAs. Chez les prématurés humains, le syndrome de détresse respiratoire est une des causes les plus fréquentes de mortalité. Dans un certain nombre de cas, on peut restaurer une fonction pulmonaire satisfaisante par l’administration de surfactant.<p><p>Dans ce travail, nous avons opté pour une approche fondamentale des mécanismes de régulation du canal sodium épithélial par l’acide eicosapentanoïque (EPA, C 20:5, n-3). Des études électrophysiologiques, biochimiques et d’imagerie cellulaire ont été réalisées sur la lignée cellulaire A6 de rein d’amphibien, qui sert d’épithélium modèle pour l’étude d’ENaC depuis plus de 25 ans. Cette lignée exprime des canaux sodiques très sélectifs et possède des propriétés électrophysiologiques facilitant l’étude de leur régulation.<p><p>Ce travail nous a permis de mettre en évidence de nouveaux mécanismes fondamentaux dont la pertinence physiologique et /ou clinique ne pourra être établie qu’en transposant cette étude sur un modèle in vivo, comme nous le proposons dans les perspectives.<p><p>Dans le présent travail, nous avons étudié :<p><p>1.\ / Doctorat en Sciences biomédicales et pharmaceutiques / info:eu-repo/semantics/nonPublished