Orientador: Dora Maria Grassi-Kassisse / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T16:45:10Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Francesconi_ElainePatriciaMaltezSouza_D.pdf: 3201819 bytes, checksum: 12b57dbd9c491f94ccbc38e657b254fe (MD5) Previous issue date: 2008 / Resumo: O adipócito é a unidade funcional do tecido adiposo branco e o principal reservatório de energia, tendo um papel chave na investigação fisiológica dos mecanismos controladores da estocagem e mobilização de lipídeos e hoje sabe-se ser um importante sítio produtor de lactato. A obesidade e o diabetes tipo II estão associados, no homem, com um aumento na concentração de lactato sanguíneo e é mediado pelo adrenoceptor subtipo a1. Iniciamos este trabalho avaliando a relação das concentrações plasmáticas de glicose, insulina e lactato em indivíduos normais e indivíduos obesos mórbidos antes e durante a realização do clamp euglicêmico-hiperinsulinêmico. Apenas a insulinemia no jejum estava aumentada significativamente no grupo de homens obesos o que sugere fortemente que existe uma menor sensibilidade à insulina neste grupo experimental. O índice de HOMA neste estudo apontou para uma maior resistência insulinica no grupo de homens obesos, que foi significativamente maior principalmente ao final do clamp, sendo inclusive maior para homens obesos em relação a mulheres obesas. Verificamos uma inter-relação importante com a hiperinsulinemia, pois á medida que a insulina aumenta ao longo do clamp, a concentração de lactato decresce significativamente. As concentrações plasmáticas de lactato apresentaram-se bastante elevadas em indivíduos com IMC entre 40-55 Kg/m2, diminuindo â medida que o IMC estava próximo de 70 kg/m2. No tempo 180 de clamp do grupo obeso, a concentração de lactato caiu a ponto de alcançar numericamente os valores basais do seu respectivo grupo controle. Os adipócitos isolados de obesos mórbidos produziram mais glicerol em todas as concentrações utilizadas de noradrenalina em relação ao grupo de eutróficos, inclusive no basal. Quando foi adicionado o prazosin (mM), houve um aumento na produção de glicerol. Em nossos ensaios observamos que o tecido adiposo isolado de obesos apresenta uma produção basal de lactato significativamente elevada. Quando o estímulo utilizado foi a noradrenalina, a produção foi significativamente maior em adipócitos isolados de obesos quando comparados a eutróficos. A quantidade de lactato produzida pela noradrenalina em adipócitos isolados de obesos foi semelhante àquela produzida pela cirazolína, agonista seletivo de adrenoceptores a1. Nenhum antagonista utilizado, prazosin, WB4I04 ou BMY7378, produziu qualquer efeito sobre a produção de lactato, seja em eutróficos ou obesos. Quando a produção de lactato em adipócitos isolados foi induzida pela insulina, não houve diferença significativa na quantidade de lactato produzida por adipócitos de obesos quando comparados com eutróficos, exceto na concentração de 500 mU/ml. A estimulação máxima induzida pela insulina em eutróficos foi de 3 vezes e foi maior que aquela observada em adipócitos isolados de obesos que foi de 2,4 vezes. Estes resultados permitem inferir que não é a insulina o principal secretagogo de lactato responsável pela produção aumentada em adipócitos isolados de obesos. Por outro lado, quando co-íncubamos noradrenalina com crescentes concentrações de insulina pudemos observar uma produção de lactato significativamente mais elevada, em todos os pontos, proveniente de adipócitos isolados de obesos. Podemos concluir que os adipócitos de indivíduos obesos produzem lactato diferencial mente em relação ao gênero, e este lactato pode estar sendo usado em outras vias metabólicas auxiliando no desencadeamento das patologias relacionadas à obesidade / Abstract: The adipocyte is the functional unit of fat white and the main reservoir of energy, taking a key role in research physiological mechanisms of control of storage and mobilization of lipids and today it is known to be an important site producer of lactate. Obesity and type II diabetes are associated, in humans, with an increase lactate concentration in the blood. We started this work lactate and is mediated by adrenoceptor subtype evaluating the relationship plasma concentrations of glucose, insulin and lactate in normal and morbid obese subjects before and during the clamp euglicemico-hiperinsulinemico. Only in fasting insulin was increased significantly in the group of obese men which strongly suggests that there is less sensitivity to insulin in this group experimental. The HOMA index of this study pointed to a larger group of insulin resistance in obese men, which was significantly higher mainly the end of the clamp, and even higher for obese men regarding obesity women. We find an important inter-relationship with hyperinsulinemia, because that will measure the insulin increases over the clamp, the concentration of lactate decreases significantly. Plasma concentrations of lactate had to be quite high in individuals with BMI between 40-55 Kg/m2, decreasing as a BMI of 70 kg/m2 was next. At the time 180, clamp the obese group, the concentration of lactate fell about to reach numerically the baseline of their respective control group. The isolated adipocytes of obese morbid produced more glycerol concentrations used in all of norepinephrine in the group of eutrophic, including the basement. When the addition of prazosin (1 M) there was an increase in the production of glycerol. In our tests found m. that the fat isolated from obese presents a production base of lactate significantly high. When the stimulation was used to norepinephrine, the production was significantly higher in isolated adipocytes of obese compared to eutrophic. The amount of lactate produced by norepinephrine in isolated adipocytes of obese was similar to that produced by cirazolina, of selective I. None antagonist used, prazosin, WB4104 or BMY7378,a adrenoceptor agonist produced no effect on the production of lactate, in eutrophic or obese. When the production of lactate in isolated adipocytes was induced by insulin, there was no significant difference in the amount of lactate produced by adipocytes of mU / ml. The obese compared with eutrophic, except to the concentration of 500 maximum stimulation induced by insulin in eutrophic was 3 times and was higher than that observed in isolated adipocytes of obese which was 2.4 times. These results indicate that it is not the main insulin secretagogo of lactate responsible for increased production in isolated adipocytes of obese. On the other hand, when co-incubated with noradrenaline the concentrations of insulin have seen a lactate production significantly higher, at all points, from isolated adipocytes of obese. We can conclude that adipocytes of obese individuals produce lactate differentially in relation to gender, and this lactate may be being used in other metabolic pathways helping to trigger the diseases related to obesity / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: André Sampaio Pupo / Resumo: Primordialmente, o epidídimo funciona para proteger e realizar a maturação de espermatozoides. A cauda do epidídimo (CE), região que armazena espermatozoides maduros até a ejaculação, recebe densa inervação de fibras pós-ganglionares simpáticas que liberam noradrenalina para contrair o músculo liso do epidídimo via ativação de adrenoceptores alfa-1A (alfa-1A-ARs). As contrações da musculatura lisa têm papel importante no transporte dos espermatozoides ao longo do ducto epididimário, bem como na contração da CE distal durante a fase de emissão seminal da ejaculação. Recentemente, foi demonstrado que a epididimite, a condição inflamatória do epidídimo, induz aceleração do tempo de trânsito espermático em ratos. Nesta tese, testamos a hipótese de que essa aceleração do trânsito espermático induzida pela epididimite é resultado de alterações na contratilidade do ducto epididimário. Dessa forma, o objetivo deste estudo foi investigar a contração da CE distal mediada por alfa-1-ARs em um modelo experimental de epididimite aguda induzida pelo lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli em ratos. Após 6 e 24 h da injeção intraductal de LPS (25 µg) para indução da epididimite (in vivo), estudos de contração indicaram que a potência da noradrenalina aumentou ~6 vezes na CE distal inflamada. As contrações induzidas pela noradrenalina foram competitivamente antagonizadas pelo prazosin, um antagonista não-seletivo de alfa-1-ARs, com afinidades semelhantes nos grupos tratados com LPS e salina (pA2... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The epididymis works primarly to protect and mature the spermatozoon. The cauda epididymis (CE), which stores mature spermatozoa until ejaculation, is densely innervated by sympathetic postganglionic fibers that release noradrenaline to contract epididymal smooth muscle via activation of alpha-1A adrenoceptors (1A-ARs). The smooth muscle contractions have an important role for the adequate transport of spermatozoa within the epididymal duct, as well as for distal CE contraction during the seminal emission phase of ejaculation. It was recently shown that epididymitis, the inflammatory condition of the epididymis, induces acceleration of the sperm transit time in the rat epididymis. We hypothesize that this epididymitis-induced sperm transit time acceleration is due to changes in the contractility of the epididymal duct. Thus, the aim of this study was to investigate the 1-ARs-mediated contraction of the distal CE in an experimental model of acute epididymitis in rats induced by lipopolysaccharide (LPS) from E. coli. Contraction studies indicated that the potency of noradrenaline increased ~6-fold in the inflamed distal CE at 6 h post-intravasal LPS injection. Noradrenaline-induced contractions were competitively antagonized by prazosin, a non-selective 1-ARs antagonist, with similar affinities in both LPS- and saline-treated groups (pA28.9). However, the potency of BMY 7378, a selective 1D-ARs antagonist, was ~50-fold higher in the distal CE treated with LPS (pA2 LPS = 8.... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: André Sampaio Pupo / Resumo: A Pré-eclâmpsia (PE) é uma desordem hipertensiva gestacional, cuja fisiopatologia tem sido atribuída a forte resposta inflamatória, disfunção endotelial, agregação plaquetária e aumento da resistência vascular. Estudos com PE relatam inadequado aumento na ação de vários vasoconstritores, incluindo endotelina, adenosina, angiotensina II, e noradrenalina ocasionando aumento da pressão arterial. De fato, o sistema nervoso autonômo simpático através do neurotransmissor noradrenalina regula a pressão arterial mediante a ativação dos adrenoceptores-alfa-1 (ARs-alfa-1). No presente estudo, foi investigado através do uso de agonistas e antagonistas seletivos os subtipos de ARs-alfa1 envolvidos na contração da aorta abdominal de ratas prenhes submetidas à um modelo experimental de PE por redução da pressão de perfusão uterina (RUPP), e esses receptores foram comparados com aqueles envolvidos na contração da artéria de ratas virgens. Os resultados indicam que as contrações da artéria aorta abdominal de ratas virgens em resposta à noradrenalina resultam da ativação de AR-alfa-1A e AR-alfa-1D, mas que na artéria da fêmea há uma maior contribuição de AR-alfa-1A do que na respectiva artéria de machos. Além disso, a prenhez induziu plasticidade nos subtipos de ARs-alfa-1 envolvidos na contração da artéria aorta abdominal, uma vez que houve menor participação de AR-alfa-1A nas contrações de ratas prenhes do que aquela observada na artéria de ratas virgens. Por outro lado, na artéria aorta ab... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Preeclampsia (PE) is a gestational hypertensive disorder, for which the physiopathology has been attributed to an intense inflammatory response, endothelial disfunction, platelet aggregation and increased vascular resistance. Previous studies reported that in PE there is an inadequate increase in the action of several vasoconstrictors, including endothelin, adenosine, angiotensin II and noradrenaline. In fact, the sympathetic nervous system by releasing the neurotransmitter noradrenaline regulates the arterial pressure through activation of 1-adrenoceptors (1-ARs). The present study investigated the 1–ARs subtypes involved in the contractions of the abdominal aortae from pregnant rats submitted to an experimental model of PE, the reduced in uterine perfusion pressure (RUPP), compared these receptors with those involved in the contractions of abdominal aortae from non-pregnant (virgin) and pregnant female rats. The results indicate that there are both 1A–ARs and 1D– ARs in abdominal aortae from non pregnant females, but that the 1A–ARs is more important in the contraction of the female than in the contraction of the respective artery from male rats. Pregnancy induces plasticity in the 1 – ARs of the abdominal aortae, since there was a less significant participation of 1A-AR in the contraction of abdominal aortae from pregnant rats than in the artery of virgin females. In the other hand, selective agonists and antagonists presented complex behaviours in the abdominal ao... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientadores: Jose Wilson Magalhães Bassani, Rosana Almada Bassani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-06T07:47:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Boer_DenileCominato_M.pdf: 557480 bytes, checksum: e378c01e865d04a595d3f0e7ad3c60dd (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: Embora haja demonstração de que a estimulação simpática tenha efeito facilitatório sobre a indução de atividade espontânea em miocárdio há controvérsia sobre a participação dos tipos de adrenoceptores na mediação deste efeito. No presente trabalho, descrevemos um método desenvolvido para determinação, em átrio esquerdo isolado (AE) de rato, da relação concentração-efeito para agentes que exercem efeito arritmogênico por aumento da mobilização celular de 'Ca POT. 2+¿. O método baseou-se na interposição de pausas estimulatórias, durante as quais registraram-se contrações espontâneas (CE), precedidas ou não por trens estimulatórios de alta freqüência (5 Hz). O protocolo estimulatório foi repetido na presença de diferentes concentrações de agonistas. Para cada concentração de agonista, a resposta arrítmica foi considerada como a soma dos números de CE/min, no total de preparações. Foi analisada também a resposta inotrópica, como sendo o incremento de força ou encurtamento de pico, desenvolvidos em AE e miócitos ventriculares (MV), respectivamente. A relação foi ajustada por uma função sigmóide para cálculo de Min (i.e., valor da variável na ausência do agonista), Rmax (resposta máxima) e pD2 (-log da concentração do agonista que produziu uma resposta igual a 50% de Rmax). Este método foi aplicado no estudo dos tipos de adrenoceptores envolvidos na resposta arrítmica a catecolaminas em AE e MV. A Rmax inotrópica à ativação de adrenoceptores 'alfa IND. 1¿ + 'beta IND. 1¿ foi comparável àquela por ativação de apenas receptores 'beta IND. 1¿, em ambos AE e MV. Já a ativação de adrenoceptores 'alfa IND. 1¿ produziu uma Rmax inotrópica de apenas metade daquela observada pela estimulação 'alfa IND. 1¿ + 'beta IND. 1¿. Da mesma forma, a resposta arrítmica foi semelhante para estimulação de adrenoceptores a1+ß1 e de apenas receptores 'beta IND. 1¿. Entretanto, nenhuma resposta foi obtida pela estimulação de receptores adrenérgico do tipo 'alfa IND. 1¿. Estes resultados indicam que a estimulação de adrenoceptores 'alfa IND. 1¿, apesar de evocar uma resposta inotrópica positiva em ambos AE e MV, não é arritmogênica. A ativação do tipo 'beta¿, por outro lado, parece ser a principal via para estimulação inotrópica simpática e na indução de arritmias. Além disso, concluímos que parece existir antagonismo funcional entre os subtipos de adrenoceptores 'beta¿, manifestado por ações pró- e anti-arrítmicas dos subtipos 'beta IND. 1¿ e 'beta IND. 2¿, respectivamente, em miocárdio (tanto atrial, quanto ventricular) de rato / Abstract: Although it has been shown that sympathetic stimulation facilitates the appearance of myocardial spontaneous activity, it is still not clear which types of adrenoceptors mediate this effect. In this study, we describe a method developed for determination, in isolated rat atria (AE), of the concentration-effect relationship for arrhythmogenic agents that act via promotion of cell 'Ca POT. 2+¿ overload. The method was based on the interposition of stimulatory rest periods, during which spontaneous contractions (CE) were recorded, preceded or not by high frequency (5 Hz) stimulus trains. The stimulation protocol was applied at each agonist concentration, and the arrhythmic response was taken as the sum of the number of CE/min in all preparations. The positive inotropic response was considered as the agonist-dependent increment of developed force or peak shortening in AE and isolated ventricular myocytes (MV), respectively. Concentration-effect curves were determined by fitting a sigmoid function, from which the following parameters were estimated: Min (i.e., value of the variable in the absence of the agonist), Rmax (maximal response) e 'pD IND. 2¿ (-log of the molar agonist concentration that evokes a response equal to 50% of Rmax). This method was applied to investigate the adrenoceptor types involved in the mediation of catecholamine-induced arrhythmogenesis in AE and MV. Inotropic Rmax to activation of 'alfa IND. 1¿ + 'beta IND. 1¿ adrenoceptors was comparable to that of activation of solely 'beta IND. 1¿ adrenoceptors in both AE and MV. However, Rmax to selective 'alfa IND. 1¿ adrenoceptor activation was only half of that produced by 'alfa IND. 1¿ + 'beta IND. 1¿ adrenoceptor stimulation. The arrhythmic responses to 'alfa IND. 1¿ + 'beta IND. 1¿ and 'beta IND.1¿ receptor stimulation were similar, but selective a1 adrenoceptor activation was unable to evoke any spontaneous activity. The results indicate that a1 adrenoceptors, although able to mediate stimulation in both AE and MV, are not involved in arrhythmogenesis. 'beta¿-adrenoceptor activation, thus, seems the main type involved in both inotropic and arrhythmic responses to catecholamines. In addition, our results point out a functional antagonism between 'beta¿-adrenoceptor subtypes: i.e., pro- and anti-arrhythmic effects mediated by 'beta IND. 1¿ and 'beta IND. 2¿-adrenoceptors, respectively in both atrial and ventricular rat myocardium / Mestrado / Engenharia Biomedica / Mestre em Engenharia Elétrica