Submitted by Daniele Santos (danielesantos.htl@gmail.com) on 2017-02-20T20:07:46Z No. of bitstreams: 1 Brian Mayhew.pdf: 2184085 bytes, checksum: fde6f5caf45ebd8577ed334ed2f2ebb3 (MD5) / Approved for entry into archive by Janete de Oliveira Feitosa (janete.feitosa@fgv.br) on 2017-02-22T12:15:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Brian Mayhew.pdf: 2184085 bytes, checksum: fde6f5caf45ebd8577ed334ed2f2ebb3 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-03T12:58:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Brian Mayhew.pdf: 2184085 bytes, checksum: fde6f5caf45ebd8577ed334ed2f2ebb3 (MD5) Previous issue date: 2016-11-09 / Biopharmaceutical development is characterized by challenging regulations, intense competition and significant costs that result in the need for biopharmaceutical companies to consistently produce innovation biopharmaceutical products. The United States Congress has sought to provide a balanced environment that combines significant regulatory oversight by the US Food and Drug Administration (FDA) with market-based incentives (patent protection, exclusivity) and expedited pathways (accelerated approval, breakthrough designation, fast track designation, and priority review) that seek to quickly identify and move innovative new medicines through development that will address unmet medical need and treat serious or life-threatening diseases or conditions. While FDA’s expedited programs are believed to accelerate the development of innovative drug products, the programs have not been formally measured against their intended purpose: more efficient development and regulatory reviews. This thesis research project attempts to effectively measure FDA’s expedited programs by cataloguing FDA approvals from 1987-2015, measuring development and regulatory review time, and drawing conclusions and making recommendations based on the statistical analyses generated from the project.

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-06-08T16:28:29Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 141405 bytes, checksum: c7d049916d74b5446554993639916ae6 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-08T16:28:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 141405 bytes, checksum: c7d049916d74b5446554993639916ae6 (MD5) Previous issue date: 2005-12-16 / Ministério da Agricultura, Pecuária e Abastecimento / No presente estudo foi avaliada a contaminação superficial de carcaças de aves por meio da contagem padrão de aeróbios mesófilos (CPAM), do número mais provável (NMP) de coliformes totais (CT), de coliformes termotolerantes (CTT) e de Escherichia coli (EC), e da pesquisa de Salmonella spp. em um abatedouro de aves, visando sua utilização futura no sistema de controle da qualidade e Análise de Perigos e Pontos Críticos de Controle. Estes parâmetros microbiológicos foram posteriormente utilizados para a identificação dos perigos biológicos e seus pontos críticos de controle (PCC) nas diferentes etapas de abate pela quantificação de risco (“Odds Ratio” - OR). Foram coletados 135 esfregaços superficiais de carcaças de aves durante o processo de abate, após o escaldamento/depenagem (ponto A), antes da eventração mecânica (ponto B), após evisceração manual (ponto C), após o chuveiro de lavagem final (ponto D) e após o pré- resfriamento por imersão (ponto E). O ponto E apresentou contaminação significantemente menor que os pontos A, B, C e D, para CPAM (1,74 logUFC/cm 2 ), CT (0,73 logNMP/cm 2 ) e CTT (0,66 logNMP/cm 2 ). Não houve diferença significante entre os pontos analisados para EC. O ponto de maior OR foi o C, para CT e CTT, com OR ́s calculadas de 276,00 e 176,00, respectivamente. O ponto com maior OR para CPAM foi o A, com OR calculada de 144,00. A freqüência média para Salmonella spp. foi de 8,15%, para as 135 amostras. Para os pontos de coleta as freqüências foram de 3,70%, 7,41%, 11,11%, 14,81% e 3,70%, para os pontos A, B, C, D e E, respectivamente, sem que houvesse diferença estatística entre os pontos avaliados. O pré-resfriamento foi identificado como uma importante etapa para redução da contaminação microbiana, devendo ser considerado como um ponto crítico de controle. Também ficou evidente a influência da etapa de evisceração na contaminação fecal da carcaça. Todos os indicadores microbiológicos estudados podem ser úteis ao plano APPCC para abate de frangos. Os resultados semelhantes entre os parâmetros estudados, CPAM, CT e CTT, permitem flexibilidade na escolha entre eles para a verificação e monitoramento do plano APPCC, com a vantagem da rapidez de execução para a CPAM. / This study was done to evaluate the superficial contamination of poultry carcasses by mesophilic aerobic plate count (MAPC), total coliforms (TC), fecal coliforms (FC) and Escherichia coli (EC), and Salmonella spp., in a slaughterhouse, in order to verify the quality control and HACCP in this industry, identify critical control points and microbiological hazards, quantify the risk by “Odds Ratio”. 135 swabs were collected from de surface of carcasses through the slaughtering in five different points: after scalding (A), before evisceration (B), after evisceration (C), after washing (D) and after chiller (E). Point E presented lower contamination than points A, B, C and D, the average contamination in this point was MAPC (1,74 logUFC/cm 2 ), TC (0,73 logNMP/cm 2 ) and FC (0,66 logNMP/cm 2 ). There was no significant difference for EC. The Odds ratio (OR) were 276,00 and 176,00, for TC and FC, respectively, in point C. Salmonella spp. was positive in 8,15%, for all samples, and points A, B, C, D and E were positive in 3,70%, 7,41%, 11,11%, 14,81% and 3,70%, respectively, with no significant difference.. The chiller is an important stage in order to reduce microbial contamination of carcasses, this point must be considered as a critical control point. The evisceration stage has great influence on the fecal contamination of the carcass. All microbiological parameters are usefull to HACCP verification. The similar results among parameters, MAPC, TC and FC allows to use anyone of them to verify and monitor HACCP.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2016-11-03T17:04:02Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2772997 bytes, checksum: b2f11d27b3724f9b3a0a9d588d8bb051 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-11-03T17:04:02Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 2772997 bytes, checksum: b2f11d27b3724f9b3a0a9d588d8bb051 (MD5) Previous issue date: 2004-12-01 / A qualidade e a segurança alimentar são estratégias fundamentais para a comercialização e inserção de novos produtos alimentícios no mercado. O processamento mínimo de frutas vem apresentando uma expansão constante, em mercados nacionais e internacionais, que são exigentes em relação à garantia e segurança destes produtos. Neste contexto, este trabalho estudou procedimentos operacionais na cadeia produtiva do processamento mínimo de melão Cantaloupe, no sentido de aumentar a vida útil do produto sob os aspectos de qualidade e segurança. Inicialmente, estudou-se a eficácia de sanitizantes (cloramina orgânica e ácido peracético) combinados ou não com surfactantes na remoção de mesófilos aeróbios totais, coliformes a 35 e 45oC e Salmonella enteritidis da superfície do melão Cantaloupe (Cucumis melo L.). Para a avaliação da sobrevivência de mesófilos aeróbios e coliformes a 35 e 45oC, os frutos foram submetidos a nove tratamentos: imersão em água corrente (controle) e imersão em 200, 500 e 1000 mg.L-1 de cloramina orgânica, em pH 6,5, e 60 mg.L-1 ácido peracético (APA), em pH 5,5, adicionados ou não de Tween 80 a 0,1%. A imersão dos frutos nas soluções sanitizantes ocorreu à temperatura de 15oC, sob agitação, durante 10 minutos. E para avaliação da remoção da Salmonella enteritidis, inicialmente inoculou-se 107 UFC/ml destes microrganismos e em seguida procedeu-se a sanitização de uma parte dos melões em água corrente (controle) e em 1000 mg.L-1 de cloramina orgânica, em pH 6,5, adicionados ou não de Tween 80 a 0,1%, enquanto outra parte foi armazenada a 5oC. A sobrevivência dos microrganismos para os tempos 1 e 24 horas foi avaliada. Os tratamentos sanitizantes de cloramina orgânica e ácido peracético adicionados ou não de Tween 80 utilizados neste trabalho mostraram resultados positivos na redução de mesófilos, coliformes a 35 e 45oC e a redução foi maior quando adicionado o surfactante, principalmente para solução sanitizante a 1000 mg.L-1 . Para a Salmonella enteritidis o efeito positivo da solução adicionada de surfactante foi confirmado com a redução de 1,35 e 1,37 ciclos log, com 1 e 24 horas de adesão, respectivamente, em relação ao controle. Após a definição do sanitizante, estudou-se o efeito de 3 embalagens na qualidade e segurança do melão minimamente processado (MMP). Nesta etapa foram utilizados três sistemas de embalagens: 1) Bandejas de poliestiereno expandido envolvido com Poli (cloreto de vinila) (PVC); 2) Bandejas de poliestireno expandido envolvido com PVC perfurado e 3) Caixas de Polietileno tereftalato (PET) com saches absorvedor de umidade no fundo da embalagem. Após processamento mínimo do produto, estes foram acondicionados na mesma e armazenados a 5oC durante 12 dias. Realizaram-se, então, análises físico-químicas (pH, brix e acidez), cor (L*, a*, Croma (C), Hue (H)), textura e análises microbiológicas (mesófilos, psicrotróficos, fungos filamentosos e leveduras, coliformes a 35 e 45oC e Salmonella sp.) a cada quatro dias. Os produtos acondicionados na embalagem 2, foram descartados no 4odia, devido a deterioração. Os parâmetros: pH, brix e acidez, L*, a* e H apresentaram pequenas variações, não afetando a qualidade do produto. Os valores de Croma apresentaram tendência à queda, mas em magnitude que não pronunciada visualmente na cor do produto. O MMP apresentou melhor textura na embalagem 3 (caixa PET). A contagem de mesófilos, psicrotróficos e fungos filamentosos e leveduras foi menor na embalagem 3 (caixa PET) e não foi detectado coliformes e Salmonella sp. em nenhum dos tratamentos. Definindo o sanitizante e a embalagem, estudou-se o efeito do 1-metilciclopropeno (1- MCP), inibidor da ação do etileno, na qualidade e segurança do produto. Nesta etapa o MMP foi tratado com 600 ng.mL-1 em 3 etapas: 1) Tratamento do fruto inteiro em seguida submetido ao processamento mínimo; 2) Tratamento do MMP; 3) Incorporação de 1-MCP em saches que foram colocados no fundo da embalagem do MMP e 4) MMP sem tratamento (controle). Após os tratamentos, os produtos foram acondicionados em caixas PET e armazenados a 5oC por 20 dias e amostras foram coletadas a cada quatro dias, para avaliação quanto ao pH, brix, acidez, cor (L*, a*, Croma (C), Hue (H)), textura, concentração de oxigênio e de etileno, e análises microbiológicas (mesófilos, psicrotróficos, fungos filamentosos e leveduras). Os resultados mostraram que o 1-MCP apresentou efeito positivo na qualidade e segurança do MMP. Neste, o pH, brix e acidez, L*, a*, apresentaram pequenas variações, o croma (C), Hue (H) e o Hue variaram durante o tempo e apresentaram um decréscimo no final do armazenamento para todos os tratamentos, mas esta variação não afetou a cor do produto. A melhor textura e a menor concentração de etileno foi observada nos MMP provenientes do fruto inteiro tratado e dos MMP tratados após processamento mínimo, enquanto ao oxigênio a menor concentração foi no MMP controle. Em relação à microbiologia às contagens para mesófilos e psicrotróficos não ultrapassaram a 106 UFC/g no final do armazenamento, para fungos filamentosos e leveduras esta não ultrapassou 105 UFC/g. Nesta etapa o melhor produto foi obtido dos MMP provenientes do fruto inteiro tratado. A partir dos resultados das etapas anteriores, estudou-se a aceitação do MMP por meio de análise sensorial. Nesta fase experimental os melões foram divididos em quatro partidas, sendo duas para frutos tratados (600 ng.mL-1 de 1-MCP) e duas para frutos não tratados (controle). Cada parte destes melões (tratados e não tratados) foi retirada para processamento mínimo e as outras duas partes foram armazenadas em câmaras frias a 5oC, para que durante a análise sensorial processamento dos mínimo MMP, e estes fossem apresentados como submetidos também ao amostras controle. Os tratamentos foram: 1(MMP tratado); 2 (MMP não tratado); 3 (MMP tratado (controle) e 4 (MMP não tratado (controle). As amostras foram apresentados a 100 provadores, em dois supermercados, durante 15 dias de armazenamento a 5oC, e avaliados por meio da escala hedônica quanto a aparência e sabor. Os resultados sinalizaram notas referentes a gostei ligeiramente e gostei moderadamente , para aparência e sabor das amostras de MMP, durante o tempo de armazenamento. / Food quality and safety are fundamental strategies for the commercialization and introduction of new food products into the market. The minimally processed fruits have been increasingly expanding in national and international markets, highly demanding of food guarantee and safety. This work studied operational procedures in the productive chain of minimum processing of Cantaloupe melon to increase its shelf-life under the aspects of quality and safety. Initially, the efficacy of sanitizing agents (organic chloramine and peracetic acid) combined or not with surfactants were studied in removing mesophilic aerobes total, coliforms at 35 and 450 C and Salmonella enteritidis from the surface of Cantaloupe (Cucumis melo L.) melon. To evaluate the survival of mesophilic aerobes and coliforms at 35 and 45oC, the fruits were submitted to nine treatments: immersion in running water (control) and immersion in 200, 500 and 1000 mg L-1 de organic chloramine at pH 6.5, and 60 mg.L-1 peracetic acid (APA), at pH 5,5, added or not with Tween 80 at 0.1%. The immersion of the fruits in the sanitizing solutions occurred at temperature of 15oC, stirring during 10 minutes. To evaluate the removal of Salmonella enteritidis, 107 UFC.mL-1 of these microorganisms was initially inoculated, followed by sanitizing a part of the melons in running water (control) and in1000 mg L-1 of organic chloramine, at pH 6,5, added or not with Tween 80 at 0,1,%, while another part was stored at 50C. The survival of the microrganisms for the times 1 and 24 hr was evaluated. The organic chloramine and peracetic acid sanitizing treatments added or not with Tween 80 used in this work showed positive results in reducing of mesophilic and coliforms at 35 and 45oC with the reduction being greater when the surfactant was added, mainly for the sanitizing solution at 1000 mg.L-1. For Salmonella enteridis, the positive effect of the added surfactant solution was confirmed with the reduction of 1.35 and 1.37 cycles log, at 1 and 24 hrs of adesion, respectively, in relation to the control. After defining the sanitizing solution, the effect of three packages on the quality and safety of minimally processed melon (MPM) was studied. At this stage, three packaging systems were utilized: 1) expanded polyestierene trays wrapped in Polyvinyl chloride (PVC); 2) expanded polyestirene wrapped in perforated PVC and 3) Polyetilene tereftalate (PET) boxes containing humidity absorbing sachets on the bottom of the package. After undergoing minimum processing, the products were packed and stored at 5o C during 12 days. Physical chemical analyses (pH, brix and acidity), color (L*, a*, Chrome (C), Hue (H) ), texture and microbiological analyses (mesophilic, psychrotrophic bacteria, filamentous fungi and yeasts, coliforms at 35 and 45oC and Salmonella sp.) were carried out every four days. The products in package 2 were discarded on the fourth day, due to deterioration. The parameters: pH, brix and acidity, L*, a* and H displayed small variations, without affecting the quality of the product. Chrome values tended to fall, but in magnitude not visually pronounced in the color of the product. MPM showed the best texture in package 3 (PET box). Mesophilic and psychrotrophic aerobes bacteria and filamentous fungi and ash counting was lower in package 3 (PET box) with no coliforms and Salmonella sp. Being detected in any of the treatments. Having defined the sanitizing solution and the package, the effect of 1- metylcyclopropene (1-MCP), inhibitor of the ethylene action, was studied on the quality and safety of the product. At this stage, MPM was treated with 600 ng.mL 1 in 3 stages: 1) Treatment of the whole fruit followed by minimum processing; 2) Treatment of MPM; 3) Incorporation of 1-MCP into sachets which were placed on the bottom of the MPM package and 4) MPN treatment (control). After the treatments, the products were packed in PET boxes and stored at 50 C for 20 days and samples were collected every four days to evaluate pH, brix and acidity , color (L*, a*, Chrome (C), Hue (H)), texture, concentration of oxygen and ethylene, as well as microbiological analyses (mesophilic, psychrotrophic bacteria, filamentous fungi and yeasts). The results showed that 1-MCP had a positive effect on the quality and safety of MPM, with pH, brix and acidity , L*, a*, presenting small variations, chrome (C), Hue (H)) and Hue varied along time and showed a decrease at the end of storage in all the treatments, however, this variation did not affect the color of the product. The best texture and best ethylene concentration were observed in treatment of the whole fruit followed by minimum processing and Treatment of MPM, while the lowest oxygen concentration was found in the MPM control. Regarding microbiology, the mesophyle and psychrotrophic countings did not surpass 106 UFC/g at the end of the storage with filamentous fungi and yeasts counting not surpassing 105 UFC/g. At this stage, the best product was obtained from treatment 1. Based on the results of the previous stages, MPM acceptance was studied by means of sensorial analysis. In this experimental phase, the melons were divided in 4 parts, with two being for treated fruits (600 ng.mL of 1-MCP) and two for non-treated fruits (control). Each part of the melons (treated and non-treated) was removed for minimum processing and the other two parts were stored in cold chamber at 5oC, so that during sensorial analysis, the MPM could also be submitted to minimum processing and presented as control samples. The treatments were: 1) treated MPM; 2) non-treated MPM; 3) treated MPM (control) and 4 (non-treated MPM (control)). The samples were presented to 100 tasters in two supermarkets during 15 storage days at 5oC, and evaluated by means of hedonic scale regarding appearance and flavor. The results signaled references to liked a little and liked moderately for appearance and flavor of the MPM samples during storage time.

Orientador: Helio Langoni / Coorientador: Rodrigo Costa da Silva / Banca: Simone Baldini Lucheis / Banca: Aristeu Vieira da Silva / Banca: Germano Francisco Biondi / Banca: Nádia dos Reis Carvalho / Resumo: Toxoplasma gondii é um protozoário parasito intracelular obrigatório, amplamente distribuído pelo mundo, sendo responsável por perdas na produção animal e sério problema de saúde pública. Os produtos cárneos podem albergar formas infectantes de diversos agentes zoonóticos, sendo um deles os bradizoítos de T. gondii. Deste modo, o presente estudo objetivou determinar a presença de T. gondii em produtos cárneos comercializados na região de Botucatu, SP, Brasil. Foram analisados 141 cortes comerciais de carne suína, sendo 49 de pernil (34,75%); 48 de músculo traseiro bovino (34,04%) e de quibe cru (44; 31,21%), com as técnicas de bioensaio em camundongos, e pesquisa do DNA do parasito pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) do gene repetitivo 200-300x no genoma, amplificando 529pb. Todas as amostras foram negativas ao bioensaio. Das amostras positivas à PCR, foram pesquisadas a carga parasitária pela PCR quantitativa (qPCR) do mesmo gene, utilizando-se sistema SYBR Green, e genotipagem pela multiplex-, nested- e RFLP- PCR utilizando 11 marcadores: SAG1, 5'-3'SAG2, alt.SAG2, SAG3, B-TUB, GRA6, L358, c22-8, c29-6, PK1, Apico. Das amostras estudadas, nove (6,38%) foram positivas à PCR, sendo cinco (55,56%) bovinas, três (33,33%) suínas e uma (11,11%) de quibe, apresentando carga parasitária com medianas variando de zero até 390 parasitos.mL-1. A genotipagem foi possível em somente uma amostra que apresentou genótipo semelhante a outros já identificados na literatura (MAS, TgCkBr89 e TgCkBr147). Adicionalmente, nested- e RFLP-PCR do gene 18S ribossomal RNA (18S rRNA), sequenciamento dos produtos da nested-PCR e alinhamento com a base de dados do GenBank no NCBI foram realizados para todas as nove amostras positivas para verificar a possibilidade de co-infecção com outros protozoários Apicomplexa, resultando em 100% de homologia com T. gondii em quatro amostras, sendo três suínas e um quibe ... / Abstract: Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan parasite, widely distributed throughout the world, accounting for losses in animal production and serious public health problem. The meat products may harbor infectious forms of various zoonotic agents, one of them being the bradyzoites of T. gondii. Thus, the present study aimed to determine the prevalence of T. gondii in meat products marketed in Botucatu, SP, Brazil. We analyzed 141 commercial cuts of pork (ham, 49; 34.75%) and beef (muscle, 48, 34.04%), and raw kibbe (44, 31.21%) by bioassay in mice, and survey of parasite DNA by polymerase chain reaction (PCR) gene repetitive 200- 300x in the genome, amplifying 529bp. All samples were negative by bioassay. Of the PCR-positive samples were studied parasite load by quantitative PCR (qPCR) of the same gene, using the SYBR Green system and the multiplex genotyping, nested PCR and RFLP markers using 11: SAG1, 5'-3 ' SAG2, alt.SAG2, SAG3, B-TUB, GRA6, L358, c22-8, c29-6 PK1, Apico. Of the samples studied, nine (6.38%) were positive for PCR, five (55.56%) for cattle, three for pork (33.33%) and one for raw kibbe (11.11%), with median parasite load ranging from 16 to 390 parasitos.mL-1. Genotyping was possible in only one sample that showed genotype similar to those already identified in the literature (MAS, TgCkBr89 and TgCkBr147). In addition, nested PCR and RFLP gene 18S ribosomal RNA (18S rRNA) sequencing of the nested-PCR products and alignment to the GenBank database at NCBI were performed for all nine positive samples to verify the possibility of co-protozoa infection with other Apicomplexa, resulting in 100% homology with T. gondii in four samples, three from pork meat sows and one from kibbe (44.44%; GenBank accession number L37415.1), Sarcocystis hominis was foundin two samples of cattle (22.22%, GenBank accession number AF006471.1), Sarcocystis cruzi in two samples of beef (22.22%; GenBank ... / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013-05-29Bitstream added on 2014-08-13T18:01:01Z : No. of bitstreams: 1 000748720.pdf: 303977 bytes, checksum: 7ba6d61e50abff8a0af0b6c3f7aca23e (MD5) / Toxoplasma gondii é um protozoário parasito intracelular obrigatório, amplamente distribuído pelo mundo, sendo responsável por perdas na produção animal e sério problema de saúde pública. Os produtos cárneos podem albergar formas infectantes de diversos agentes zoonóticos, sendo um deles os bradizoítos de T. gondii. Deste modo, o presente estudo objetivou determinar a presença de T. gondii em produtos cárneos comercializados na região de Botucatu, SP, Brasil. Foram analisados 141 cortes comerciais de carne suína, sendo 49 de pernil (34,75%); 48 de músculo traseiro bovino (34,04%) e de quibe cru (44; 31,21%), com as técnicas de bioensaio em camundongos, e pesquisa do DNA do parasito pela Reação em Cadeia pela Polimerase (PCR) do gene repetitivo 200-300x no genoma, amplificando 529pb. Todas as amostras foram negativas ao bioensaio. Das amostras positivas à PCR, foram pesquisadas a carga parasitária pela PCR quantitativa (qPCR) do mesmo gene, utilizando-se sistema SYBR Green, e genotipagem pela multiplex-, nested- e RFLP- PCR utilizando 11 marcadores: SAG1, 5’-3’SAG2, alt.SAG2, SAG3, B-TUB, GRA6, L358, c22-8, c29-6, PK1, Apico. Das amostras estudadas, nove (6,38%) foram positivas à PCR, sendo cinco (55,56%) bovinas, três (33,33%) suínas e uma (11,11%) de quibe, apresentando carga parasitária com medianas variando de zero até 390 parasitos.mL-1. A genotipagem foi possível em somente uma amostra que apresentou genótipo semelhante a outros já identificados na literatura (MAS, TgCkBr89 e TgCkBr147). Adicionalmente, nested- e RFLP-PCR do gene 18S ribossomal RNA (18S rRNA), sequenciamento dos produtos da nested-PCR e alinhamento com a base de dados do GenBank no NCBI foram realizados para todas as nove amostras positivas para verificar a possibilidade de co-infecção com outros protozoários Apicomplexa, resultando em 100% de homologia com T. gondii em quatro amostras, sendo três suínas e um quibe ... / Toxoplasma gondii is an obligate intracellular protozoan parasite, widely distributed throughout the world, accounting for losses in animal production and serious public health problem. The meat products may harbor infectious forms of various zoonotic agents, one of them being the bradyzoites of T. gondii. Thus, the present study aimed to determine the prevalence of T. gondii in meat products marketed in Botucatu, SP, Brazil. We analyzed 141 commercial cuts of pork (ham, 49; 34.75%) and beef (muscle, 48, 34.04%), and raw kibbe (44, 31.21%) by bioassay in mice, and survey of parasite DNA by polymerase chain reaction (PCR) gene repetitive 200- 300x in the genome, amplifying 529bp. All samples were negative by bioassay. Of the PCR-positive samples were studied parasite load by quantitative PCR (qPCR) of the same gene, using the SYBR Green system and the multiplex genotyping, nested PCR and RFLP markers using 11: SAG1, 5'-3 ' SAG2, alt.SAG2, SAG3, B-TUB, GRA6, L358, c22-8, c29-6 PK1, Apico. Of the samples studied, nine (6.38%) were positive for PCR, five (55.56%) for cattle, three for pork (33.33%) and one for raw kibbe (11.11%), with median parasite load ranging from 16 to 390 parasitos.mL-1. Genotyping was possible in only one sample that showed genotype similar to those already identified in the literature (MAS, TgCkBr89 and TgCkBr147). In addition, nested PCR and RFLP gene 18S ribosomal RNA (18S rRNA) sequencing of the nested-PCR products and alignment to the GenBank database at NCBI were performed for all nine positive samples to verify the possibility of co-protozoa infection with other Apicomplexa, resulting in 100% homology with T. gondii in four samples, three from pork meat sows and one from kibbe (44.44%; GenBank accession number L37415.1), Sarcocystis hominis was foundin two samples of cattle (22.22%, GenBank accession number AF006471.1), Sarcocystis cruzi in two samples of beef (22.22%; GenBank ...

COSTA, Eveline de Alencar. Avaliação microbiológica e parasitológica nos processos de higienização de alfaces (Lactuca sativa L.) de diferentes cultivos. 2011. 115 f. : Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Ceará, Centro de Ciências Agrárias, Departamento de Tecnologia de Alimentos, Fortaleza-CE, 2011 / Submitted by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-03T14:11:52Z No. of bitstreams: 1 20011_dis_eacosta.pdf: 2296033 bytes, checksum: 50ec8fb1765aeda69ae79e6e4e5fb2c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Nádja Goes (nmoraissoares@gmail.com) on 2016-06-03T14:12:05Z (GMT) No. of bitstreams: 1 20011_dis_eacosta.pdf: 2296033 bytes, checksum: 50ec8fb1765aeda69ae79e6e4e5fb2c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-03T14:12:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 20011_dis_eacosta.pdf: 2296033 bytes, checksum: 50ec8fb1765aeda69ae79e6e4e5fb2c5 (MD5) Previous issue date: 2011 / The vegetables sanity that are eaten raw is a relevant factor to health must be ensured by sanitizing with chemicals that have effective action to eliminate, reduce and / or removal of contaminants. The traditional way of cleaning includes washing vegetables under running water followed by immersion in 200ppm chlorine solution and rinse to remove dirt and remnants of the chemical waste. However, some studies indicate that this sanitization does not guarantee the safety of vegetables, for though while reduces the microbial load, it is not efficient in the elimination of some parasitic forms. Therefore, this study aimed to detect microorganisms, protozoa, helminths and arthropods in lettuce (Lactuca sativa L.), curly variety, from conventional farming, organic and hydroponic, in its fresh form and after two methods of cleaning: test (application of detergent and chlorine solution to 200ppm) and traditional (use of only a 200ppm chlorine solution). All lettuce were contaminated by fecal coliforms, but the hydroponic and organic samples had mean values within the standard stipulated by law, 21±74NMP/g and 24±40 NMP/g, respectively) unlike the conventional (152 ± 286NMP/g). In 100% of the samples of conventional and organic lettuces were not contaminated with Salmonella sp. but 20% of hydroponic samples were contaminated by this pathogen, being classified as unfit for consumption. In parasitological analyses were detected in organisms potentially pathogenic to humans: Giardia sp cysts. (2), eggs of Ascaris sp. (6) and eggs of Taenia sp. (1), with six occurrence in three lettuces in conventional and organic. Giardia sp cysts. (2), eggs of Ascaris sp. (6) and eggs of Taenia sp. (1), with six occurrence in three lettuces in conventional and organic. Yet been detected amoeba cysts and larvae of nematodes morphologically similar to those found in man, but more likely were forms of life free from the earth. Forms were observed in abundance among free-living protozoa, nematodes, helminths, and arthropods (especially those in hydroponic lettuce) served in lettuce dirt, reflecting the composition of culture environments. Evaluating the two processes of sanitization studied it was found that the mean of fecal coliform in the different types of lettuce was lower in the test method than the traditional, with increased efficiency. The stage of pre-washing reduced by 60% the initial contamination of fecal coliform, the detergent wash was effective when compared with the reduction achieved in the next step. The traditional method promoted significant decrease in the initial contamination of fecal coliform bacteria, however, no significant difference when compared with the test method or with the step of washing with detergent alone, proving once again its effectiveness. For removal of the forms of helminths, protozoa and arthropods in general, both methods were effective, showing no significant difference. When analyzed separately the different stages of cleaning procedures, it was found that there were significant for the removal of helminths, with better efficiency of the testing procedure, which may suggest that the cleaning with detergent performed only achieve the same results of detergent and chlorine. Thus, we conclude that test hygienization, both for the removal of helminths as to reduce fecal coliform bacteria, showed greater efficacy. / A sanidade das hortaliças que são consumidas cruas é fator relevante à saúde devendo ser garantida mediante a sanitização com produtos químicos que tenham ação eficaz na eliminação, redução e/ou remoção dos contaminantes presentes. A forma tradicional de higienização de vegetais compreende a lavagem com água corrente seguida de imersão em solução de cloro a 200ppm e enxágüe para remover as sujidades remanescentes e resíduos do produto químico. No entanto, alguns estudos apontam que esta sanitização não garante a inocuidade das hortaliças, pois embora reduza a carga microbiana, não é eficiente na eliminação de algumas formas parasitárias. Diante disso, a presente pesquisa objetivou detectar microrganismos, protozoários, helmintos e artrópodes em alfaces (Lactuca sativa, L.), variedade crespa, provenientes de cultivo convencional, orgânico e hidropônico, na sua forma in natura e após dois métodos de higienização: teste (aplicação do detergente e solução clorada a 200ppm) e tradicional (uso apenas da solução clorada a 200ppm). Todas as alfaces estavam contaminadas por coliformes fecais, porém as amostras orgânicas e hidropônicas apresentaram valores médios dentro do padrão estipulado pela legislação, (21±74NMP/g e 24±40 NMP/g, respectivamente) ao contrário das convencionais (152±286NMP/g). Em 100% das amostras de alfaces convencionais e orgânicas não apresentaram contaminação por Salmonella sp., mas 20% das amostras hidropônicas estavam contaminadas por esse patógeno, sendo classificadas como impróprias para consumo. Nas análises parasitológicas foram detectados organismos potencialmente patogênicos para o homem: cistos Giardia sp. (2), ovos de Ascaris sp. (6) e ovo de Taenia sp. (1), com seis ocorrências em alfaces convencionais e três em orgânicas. Foram ainda detectados cistos de ameba e larvas de nematódeos morfologicamente análogos aos que se encontra no homem, porém mais provavelmente eram formas de vida livre provenientes da terra. Foram observadas em abundância formas de vida livre entre os protozoários, os helmintos nematódeos, e os artrópodes (estes com destaque nas alfaces hidropônicas) veiculados nas sujidades das alfaces, refletindo a composição dos ambientes de cultivo. Avaliando os dois processos de sanitização estudados constatou-se que a média dos valores de coliforme fecal nos diferentes tipos de alfaces foi menor no método teste do que no tradicional, evidenciando maior eficiência. A etapa da pré-lavagem reduziu em 60% a contaminação inicial de coliformes fecais; a lavagem com detergente foi eficaz quando comparada com a redução obtida na etapa seguinte. O método tradicional promoveu diminuição significativa na contaminação inicial de coliformes fecais, no entanto, não houve diferença significativa quando comparada com o método teste nem com a etapa da lavagem com detergente isoladamente, comprovando mais uma vez a eficácia deste último. Para a remoção das formas de helmintos, protozoários e artrópodes em geral, ambos os métodos foram eficientes, sem apresentarem diferença significativa. Quando foram analisadas separadamente as diferentes etapas dos procedimentos de higienização, constatou-se que houve significância estatística para a remoção de helmintos, com melhor eficiência do procedimento teste, podendo-se sugerir que a higienização realizada apenas com detergente alcançaria os mesmos resultados de detergente e cloro. Deste modo, concluímos que a higienização teste, tanto para a remoção de helmintos como para a redução de coliformes fecais, apresentou maior eficácia.