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Caracteriza??o estrutural de um novo condroitim antitromb?tico altamente sulfatado contendo o res?duo de GlcA 2,3-O-dissulfato do Litopenaeus vannamei

Cavalcante, R?mulo dos Santos 07 August 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-26T19:16:13Z No. of bitstreams: 1 RomuloDosSantosCavalcante_DISSERT.pdf: 19913619 bytes, checksum: c0413e2c652526308cb5aab3f26e66c5 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-28T23:13:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 RomuloDosSantosCavalcante_DISSERT.pdf: 19913619 bytes, checksum: c0413e2c652526308cb5aab3f26e66c5 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-28T23:13:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 RomuloDosSantosCavalcante_DISSERT.pdf: 19913619 bytes, checksum: c0413e2c652526308cb5aab3f26e66c5 (MD5) Previous issue date: 2015-08-07 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / Por muitos anos as doen?as cardiovasculares e os dist?rbios tromboemb?licos v?m representando a principal causa de mortes por doen?as no mundo. Diante desta realidade e das complica??es do uso da heparina, v?rios estudos relatando a ocorr?ncia de glicosaminoglicanos com potencial antitromb?tico j? foram descritos. No entanto, com o aprimoramento e o surgimento de novas t?cnicas de caracteriza??o estrutural, tem sido poss?vel identificar novas mol?culas antitromb?ticas e compreender outros aspectos da rela??o estrutura-atividade destes compostos. Nesse contexto, este trabalho descreve a ocorr?ncia de um condroitim sulfato altamente sulfatado (CSAS) e com grande potencial terap?utico no cefalot?rax do camar?o Litopenaeus vannamei. Essa mol?cula foi isolada mediante prote?lise, tratamento com acetona e purificado por cromatografias de troca-i?nica e gel filtra??o. Estruturalmente, o CSAS do camar?o apresentou uma massa molecular m?dia de ~ 26 kDa e n?o foi completamente digerido pelas condroitinases AC e ABC liases. A partir dos espectros de RMN unidimensional TOCSY seletivo e bidimensional ?H/??C HSQC foi poss?vel identificar a presen?a do raro res?duo de ?cido glucur?nico 2,3-O-disulfatado (GlcA,2,3S), al?m dos 2-O- e 3-O-sulfatado. A avalia??o do CSAS do camar?o sobre o sistema de coagula??o mostrou uma grande capacidade de inibi??o da trombina (~ 94% de inibi??o) e uma insignificante atividade anticoagulante pelos m?todos de TTPA, TP e atividade anti-Xa. Esses dados, somados a incapacidade de estabiliza??o da antitrombina III pelo CSAS do camar?o, sugerem que sua atividade anticoagulante ? mediada pelo cofator II da heparina. Al?m disso, foi observado que esta mol?cula tamb?m apresenta um baixo efeito hemorr?gico e um grande potencial antitromb?tico observado pelos m?todos de indu??o de trombose venosa em ratos (~ 70% de redu??o dos trombos formados) e de est?mulo da s?ntese de GAGs antitromb?ticos em c?lulas endoteliais. Este trabalho relata pela primeira vez a ocorr?ncia de um CSAS
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Propriedades antioxidante, anti-hemost?stica e antiproliferativa de galactanas sulfatadas da alga vermelha hypnea musciformis (wulfen) j. V. Lamouroux

Alves, Monique Gabriela das Chagas Faustino 18 July 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MoniqueGCFA_DISSERT_PARCIAL.pdf: 1765775 bytes, checksum: 3815c2c3560cb6ce59df27ea29b474ca (MD5) Previous issue date: 2011-07-18 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Cient?fico e Tecnol?gico / Marine algae are one of the major sources of biologic compounds. In extracellular matrix of these organisms there are sulfated polysaccharides that functions as structural components and provides protection against dehydration. The fraction 1.0 (F1.0) rich in sulfated galactans obtained from red seaweed Hypnea musciformis was physicochemical characterized and evaluated for pharmacologic activity through antioxidant activity, cytotoxic action on erythrocytes, anticoagulant, stimulatory action under antithrombotic heparan sulfate synthesis and their effects on cell proliferation and cycle cell progression. The main components of F1.0 were carbohydrates (49.70 ? 0.10%) and sulfate (44.59 ? 0.015%), presenting phenolic compounds (4.79 ? 0.016%) and low protein contamination (0.92 ? 0.001%). Fraction 1.0 showed polidisperse profile and signs in infrared analysis in 1262, 1074 and 930, 900 and 850 attributed to sulfate esters S=O bond, presence of a 3,6- anidrogalactose C-O bond, non-sulfated ?-D-galactose and a C-O-SO4 bond in galactose C4, respectively. The fraction rich in sulfated galactans exhibited strong antioxidant action under lipid peroxidation assay with IC50 of 0.003 mg/mL. Besides the inhibition of hemolysis induced by H2O2 in erythrocytes treated with F1.0, this fraction did not promote significant cytotoxity under erythrocytes membranes. F1.0 exhibited low anticoagulant activity causing moderate direct inhibition of enzimatic activity of thrombin. This fraction promoted stimulation around of 4.6 times on this synthesis of heparan sulfate (HS) by rabbit aortic endothelial cells (RAEC) in culture when was compared with non treated cells. The fraction of this algae displayed antiproliferative action under RAEC cells causing incresing on cell number on S fase, blocking the cycle cell progression. Thus F1.0 presented cytostatic and no cytotoxic action under this cell lineage. These results suggest that F1.0 from H. musciformis have antioxidant potential which is a great effect for a compound used as food and in food industry which could be an alternative to food industry to prevent quality decay of lipid containing food due to lipid peroxidation. These polysaccharides prevent the lipid peroxidation once the fraction in study exhibited strong inhibitory action of this process. Furthermore that F1.0 present strong antithrombotic action promoting the stimulation of antithrombotic HS synthesis by endothelial cells, being important for thrombosis preventing, by its inhibitory action under reactive oxygen species (ROS) in some in vitro methods, being involved in promotion of hypercoagulability state. / Algas marinhas s?o uma das principais fontes de compostos biologicamente ativos. Na matriz extracelular desses organismos existem os polissacar?deos sulfatados que funcionam como componente estrutural prevenindo-a contra desidrata??o. A fra??o 1,0 (F1,0) rica em galactanas sulfatadas obtida da alga vermelha Hypnea musciformis foi caracterizada fisicoquimicamente e avaliada quanto a atividade farmacol?gica por meio de ensaios de atividade antioxidante, a??o citot?xica sobre hem?cias, atividade anticoagulante, a??o estimulat?ria sobre a s?ntese de heparam sulfato antitromb?tico e seus efeitos na prolifera??o e progress?o do ciclo celular. Os principais componentes da F1,0 foram carboidratos (49,70 ? 0,10%) e sulfato (44,59 ? 0,015%), apresentando compostos fen?licos (4,79 ? 0,016%) e baixa contamina??o prot?ica (0,92 ? 0,001%). F1,0 mostrou perfil polidisperso e sinais na an?lise de infravermelho em 1262, 1074 e 930, 900 e 850 cm-1 atribu?dos a liga??es S=O de ?steres de sulfato, presen?a de liga??o C-O de 3,6-anidrogalactose, ?-D-galactose n?o sulfatada e liga??o C-O-SO4 no C4 da galactose, respectivamente. A fra??o rica em galactanas sulfatadas exibiu forte a??o antioxidante sobre o ensaio de peroxida??o lip?dica com IC50 de 0,003 mg/mL. Al?m da alta inibi??o da hem?lise induzida por H2O2 em hem?cias humanas tratadas com F1,0, esta fra??o n?o promoveu citotoxicidade significativa sobre a membrana de hem?cias. F1,0 exibiu baixa atividade anticoagulante, causando moderada inibi??o direta da atividade enzim?tica da trombina. Esta fra??o promoveu estimula??o de cerca de 4,6 vezes na s?ntese de heparam sulfato (HS) pelas c?lulas endoteliais da aorta de coelho (RAEC), em cultura, quando comparadas com as c?lulas n?o tratadas com F1,0. A fra??o dessa alga mostrou atividade antiproliferativa sobre as c?lulas RAEC, causando aumento no n?mero de c?lulas na fase S, impedindo a progress?o do ciclo celular. Assim, F1,0 apresentou a??o citost?tica e n?o citot?xica sobre esta linhagem celular. Esses resultados sugerem que F1,0 de H. musciformis tem potencial antioxidante, efeito importante para um composto utilizado como alimento e na ind?stria aliment?cia, podendo ser uma alternativa na ind?stria aliment?cia para a preven??o do decaimento da qualidade dos alimentos contendo lip?dio devido a peroxida??o lip?dica, uma vez que a fra??o em estudo exibiu forte a??o inibit?ria sobre a peroxida??o lip?dica. Al?m disso F1,0 apresenta forte a??o antitromb?tica promovendo a estimula??o da s?ntese de HS antitromb?tico pelas c?lulas endoteliais, sendo ?til na preven??o da trombose, devido tamb?m a sua a??o inibit?ria sobre as esp?cies reativas do oxig?nio (ROS) em alguns sistemas in vitro, estando envolvidos na promo??o de estado de hipercoagulabilidade.
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Caracteriza??o estrutural e avalia??o das atividades farmacol?gicas da fucana B extra?da da alga Dictyota menstrualis

Costa, Thiago Gomes 06 February 2014 (has links)
Made available in DSpace on 2014-12-17T14:03:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 ThiagoGC_DISSERT.pdf: 2736665 bytes, checksum: 120a3ba44fefe1ccd9373aeb0ff1629f (MD5) Previous issue date: 2014-02-06 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior / Seaweeds are a major source of biologically active compounds . In the extracellular matrix of these organisms are sulfated polysaccharides that functions as structural components preventing it against dehydration. The fraction 0.9 (FucB) rich in sulfated fucans obtained from brown seaweed Dictyota menstrualis was chemical characterized and evaluated for pharmacological activity by testing anticoagulant activity, stimulatory action on the synthesis of an antithrombotic heparan sulfate, antioxidant activity and its effects in cell proliferation. The main components were FucB carbohydrates (49.80 ? 0.10 %) and sulfate (42.30 ? 0.015 %), with phenolic compounds ( 3.86 ? 0.016 %) and low protein contamination ( 0.58 ? 0.001 % ) . FucB showed polydisperse profile and analysis of signals in the infrared at 1262, 1074 and 930 cm -1 and 840 assigned to S = O bonds sulfate esters , CO bond presence of 3,6- anhydrogalactose , β -D- galactose non- sulfated sulfate and the axial position of fucose C4 , respectively. FucB exhibited moderate anticoagulant activity , the polysaccharides prolonged time (aPTT ) 200 ug ( > 90s ) partial thromboplastin FucB no effect on prothrombin time (PT), which corresponds to the extrinsic pathway of coagulation was observed. This stimulation promoted fraction of about 3.6 times the synthesis of heparan sulfate (HS) by endothelial cells of the rabbit aorta ( RAEC ) in culture compared with cells not treated with FucB . This has also been shown to compete for the binding site with heparin. The rich fraction sulfated fucans exhibited strong antioxidant activity assays on total antioxidant (109.7 and 89.5 % compared with BHT and ascorbic acid standards ) , reducing power ( 71 % compared to ascorbic acid ) and ferric chelation ( 71 , comparing with 5 % ascorbic acid). The fraction of algae showed cytostatic activity on the RAEC cells revealed that the increase of the synthesis of heparan sulfate is not related to proliferation. FucB showed antiproliferative action on cell lines modified as Hela and Hep G2 by MTT assay . These results suggest that FucB Dictyota menstrualis have anticoagulant , antithrombotic , antioxidant potential as well as a possible antitumor action, promoting the stimulation of the synthesis of antithrombotic HS by endothelial cells and is useful in the prevention of thrombosis, also due to its inhibitory action on species reactive oxygen ( ROS ) in some in vitro systems , being involved in promoting a hypercoagulable state / Algas marinhas s?o uma das principais fontes de compostos biologicamente ativos. Na matriz extracelular desses organismos existem os polissacar?deos sulfatados que funcionam como componente estrutural prevenindo-a contra desidrata??o. A fra??o 0,9 (FucB) rica em fucanas sulfatadas obtida da alga marrom Dictyota menstrualis foi caracterizada quimicamente e avaliada quanto a atividade farmacol?gica por meio de ensaios de atividade anticoagulante, a??o estimulat?ria sobre a s?ntese de heparam sulfato antitromb?tico, atividade antioxidante e seus efeitos na prolifera??o celular. Os principais componentes da FucB foram carboidratos (49,80 ? 0,10%) e sulfato (42,30 ? 0,015%), apresentando compostos fen?licos (3,86 ? 0,016%) e baixa contamina??o prot?ica (0,58 ? 0,001%). FucB mostrou perfil polidisperso e sinais na an?lise de infravermelho em 1262, 1074 e 930 e 840 cm-1 atribu?dos a liga??es S=O de ?steres de sulfato, presen?a de liga??o C-O de 3,6-anidrogalactose, β-D-galactose n?o sulfatada e sulfato na posi??o axial do C4 da fucose, respectivamente. FucB exibiu moderada atividade anticoagulante, este polissacar?deo prolongou o tempo de tromboplastina parcial activada (aPTT) a 200 ug (>90s) n?o foi observado qualquer efeito de FucB sobre o tempo de protrombina (PT), que corresponde a via extr?nseca da coagula??o. Esta fra??o promoveu estimula??o cerca de 3,6 vezes na s?ntese de heparam sulfato (HS) pelas c?lulas endoteliais da aorta de coelho (RAEC), em cultura, quando comparadas com as c?lulas n?o tratadas com FucB. Esta tamb?m demonstrou competir pelo s?tio de liga??o com a heparina. A fra??o rica em fucanas sulfatadas exibiu forte a??o antioxidante sobre os ensaios de antioxidante total (109,7 e 89,5% comparados com padr?es BHT e ?cido asc?rbico), poder redutor (71% comparado ao ?cido asc?rbico) e quela??o f?rrica (71,5% comparando com ?cido asc?rbico). A fra??o dessa alga mostrou atividade citost?tica sobre as c?lulas RAEC revelando que o aumento da s?ntese de heparan sulfato n?o est? relacionado ? prolifera??o. FucB apresentou a??o antiproliferativa sobre linhagens celulares modificadas como Hela e Hep G2 pelo ensaio de MTT. Esses resultados sugerem que FucB de Dictyota menstrualis tem potencial anticoagulante, antitromb?tico, antioxidante bem como uma poss?vel a??o antitumoral, promovendo a estimula??o da s?ntese de HS antitromb?tico pelas c?lulas endoteliais, sendo ?til na preven??o da trombose, devido tamb?m a sua a??o inibit?ria sobre as esp?cies reativas do oxig?nio (ROS) em alguns sistemas in vitro, estando envolvidos na promo??o de estado de hipercoagulabilidade

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