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Ação da fração polissacarídica de Agaricus blazei sobre o desenvolvimento tumoral, a atividade linfoproliferativa e a produção de citocinas por esplenócitos de camundongos com tumor subcutâneo de Ehrlich /

Belik, Andréa Vanessa Ferreira. January 2003 (has links)
Orientador: Ramon Kaneno / Resumo: A ATF é uma fração polissacarídica extraída do cogumelo Agaricus blazei, rica em (1®6)-b-D-glucana, à qual se atribui ação imunoestimulante. No presente trabalho avaliamos os efeitos antitumoral e imunomodulador da ATF em camundongos BALB/c com tumor subcutâneo de Ehrlich. O tratamento consistiu de 3 aplicações de ATF (0,5ug/0,1ml) no sítio de implantação tumoral (Ehr/ATF), enquanto os animais do grupo Ehr foram tratados do mesmo modo com solução salina estéril. No período de 7 ou 14 dias após a implantação do tumor, os animais foram sacrificados para a avaliação do peso tumoral, análise histopatológica, avaliação da atividade proliferativa de esplenócitos e produção de citocinas in vitro. O tratamento foi capa z de inibir o crescimento do tumor em relação ao grupo Ehr e a análise histopatológica indica diferenças entre os 2 grupos em relação à presença de células gigantes, freqüência de figuras mitóticas e de células apoptóticas. Em relação aos parâmetros imunológicos, observamos que os animais tratados com ATF (grupos Ehr/ATF e ATF) apresentaram menor atividade linfoproliferativa que o grupo controle e essa supressão foi observada também nos animais com tumor tratados com solução salina (Ehr). A capacidade de pr odução de IL-10 mostrou-se aumentada no grupo Ehr, fenômeno parcialmente revertido pela administração de ATF. Não se observou, entretanto, efeito sobre a produção de IFN-g ou de TNF-a. Avaliações in vitro indicam que a ATF não apresenta atividade citotóxica direta sobre esplenócitos de animais normais e nem sobre as células tumorais, embora apresente atividade anti-proliferativa quando em concentração elevada (25 ug). Assim, nossos resultados sugerem que a ação antitumoral da fração ATF não se reflete em imunoestimulação das células do baço, entretanto podemos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Not available. / Mestre
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Fatores de crescimento e citocinas envolvidos na angiogênese de melanoma em animais selecionados pela intensidade da resposta inflamatória aguda /

Romagnoli, Graziela Gorete. January 2007 (has links)
Resumo: Camundongos AIRmax e AIRmin selecionados de acordo com a intensidade da resposta inflamatoria aguda apresentam variacoes na suscetibilidade ou resistencia ao desenvolvimento de tumores. Considerando a importancia da resposta inflamatoria no desenvolvimento tumoral e que mediadores desta resposta influenciam a angiogenese, o presente trabalho avaliou os perfis de expressao no baco de mRNA de VEGF, FGF-2 e TGF-ß pela tecnica da PCR em tempo real e o numero de celulas produtoras das citocinas IL-6, TNF-alfa, IL-10, IL-2, IL-12 e IFN-y pela tecnica de ELISpot envolvidas na neovascularizacao nos animais AIRmax e AIRmin. Para tanto, estes animais foram implantados com celulas de melanomas murino B16F10 e S91 e avaliados quanto ao crescimento tumoral, presenca de metastases e expressao dos mediadores citados aos 7, 14 e 30 dias apos inoculo subcutaneo. Nossos resultados demonstraram que os animais AIRmin tiveram maior capacidade de conter o crescimento de melanoma B16F10 do que os animais AIRmax, embora diferencas significativas em relacao ao fatores envolvidos na angiogenese nao tenham sido encontradas. Os animais AIRmin implantados com melanoma S91 tambem apresentaram menor frequencia de crescimento tumoral, ainda que esses animais tenham apresentado mais fatores envolvidos na angiogenese, como maior expressao de mRNA de VEGF e maior numero de celulas produtoras de IL-6 e TNF-alfa. Assim, e possivel que o melhor controle do crescimento tumoral em animais AIRmin seja decorrente de sua capacidade de gerar maior numero de celulas produtoras de IFN-y e menor numero daquelas produtoras de IL-10. / Not available. / Orientador: Ramon Kaneno / Coorientador: Luís Fernando Barbisan / Banca: Denise Fecchio / Banca: José Alexandre Marzagão Barbuto / Mestre
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Atividade de monócitos em gestantes normais e com pré-eclâmpsia /

Martins, Rosana Aparecida Rodrigues. January 2002 (has links)
Orientador: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A pré-eclâmpsia é uma complicação grave da gestação, caracterizada por hipertensão e proteinúria. Os sintomas desta síndrome aparecem durante a segunda metade da gestação. A literatura sugere que a pré-eclâmpsia resulta de uma resposta inflamatória excessiva à gestação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade de monócitos de sangue periférico através da produção de citocinas, atividade fungicida e liberação de peróxido de hidrogênio por essas células em gestantes normais e com pré-eclâmpsia. Foram estudadas 25 mulheres não-grávidas e normotensas e 50 gestantes sendo 20 normotensas e 30 com pré-eclâmpsia. Monócitos foram cultivados com ou sem 10 ug/mL de lipopolissacáride (LPS) durante 24 h a 37oC e os níveis de fator de necrose tumoral alfa (TNF-a), de Interleucina-10 (IL -10) e de fator transformador do crescimento beta (TGF-b1) foram determinados no sobrenadante de cultura por ensaio imunoenzimático. A atividade fungicida foi avaliada pela recuperação de células viáveis de Candida albicans após plaqueamento e contagem de unidades formadoras de colônias em meio ágar Sabouraud. A liberação de peróxido de hidrogênio (H2O2) foi determinada antes e após estímulo dos monócitos com phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). Os resultados mostraram que os níveis endógenos de TNF-a, IL -10 e de TGF-b1 produzidos por monócitos, cultivados sem estímulo, foram significativamente mais elevados tanto em gestantes normais como nas com pré-eclâmpsia. Resultados semelhantes foram observados com relação à produção de IL-10 e TGF-b1 por monócitos após estímulo com LPS. A liberação de H2O2 após estímulo com PMA foi mais elevada em gestantes normais do que nas com pré-eclâmpsia. Além disso, monócitos de gestantes com... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Pre-eclampsia is a severe complication of pregnancy, characterized by hypertension and proteinuria. The symptoms of this syndrome appear during the second half of the pregnancy. The literature suggests that pre-eclampsia results from an excessive maternal inflammatory response to pregnancy. The objective of this study was to evaluate the activity of peripheral blood monocytes by cytokine production, fungicidal activity and hydrogen peroxide liberation in normotensive pregnant women and with pre-eclampsia. The study included 25 normotensive non-pregnant and 50 pregnant women being 20 normotensive and 30 with preeclampsia. Monocytes from these women were cultivated with or without 10 ug/mL lipopolysaccharide (LPS) during 24h at 37oC, and the levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-a), Interleukin-10 (IL -10) and transforming growth factor beta 1 (TGF-b1) were determined in culture supernatants by enzyme immunoassay. The fungicidal activity was determined by the recovery of viable Candida albicans after co-culture of yeasts with monocyte and plating in Sabouraud medium with enumeration of colony forming units. Hydrogen peroxide (H2O2) liberation was determined before and after monocyte stimulation with phorbol 12-myristate 13- acetate (PMA). The results showed that endogenous levels of TNF-a, IL-10 and TGF-b1 detected in supernatants of monocytes cultivated without stimulus were significantly higher in both normal and pre-eclampsia pregnant patients than in non-pregnant women. Similar results were observed in relation to IL -10 and TGF- b1 production after monocyte stimulation with LPS. Monocytes from normotensive pregnant women released higher levels of H2O2 after PMA stimulation than cells from patients with pre-eclampsia. Besides monocytes from women with preeclampsia produced lower levels of TNF-a suggesting an impairment in the... (Complete abstract click electronic address below) / Mestre
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Interferência dos anticorpos colostrais em bezerros vacinados aos dois, quatro e seis meses de idade, filhos de vacas revacinadas contra a raiva bovina

Augusto Filho, Otávio [UNESP] 12 April 2010 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-04-12Bitstream added on 2014-06-13T19:03:34Z : No. of bitstreams: 1 augustofilho_o_dr_botfmvz.pdf: 3263131 bytes, checksum: 3dff38635500878cf1ed7a081766be74 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / Bezerros nascidos de vacas revacinadas contra raiva no terço final de gestação foram vacinados aos dois, quatro e seis meses de idade e revacinados 30 dias após. Os títulos de anticorpos (Ac) foram mensurados nas mães e em seus descendentes 48 horas após o parto. Os bezerros foram separados em quatro lotes com dez animais, sendo representados por bezerros não vacinados, vacinados com dois meses, quatro meses e seis meses de idade. O título de Ac antirrábicos nos bezerros dos diferentes grupos foi avaliado mensalmente e 15 dias pós vacinação e revacinação até completarem 12 meses de vida. Todas as vacas apresentaram titulo de anticorpos antirrábicos soroneutralizantes (AcSN) superiores a 0,5UI/mL 48 horas após o parto. Anticorpos transferidos pelo colostro com títulos semelhantes ao materno foram observados em todos os bezerros estudados 48 horas após o nascimento. Títulos de AcSN superiores a 0,5UI/mL se mantiveram até o 5º mês nos bezerros vacinados aos dois meses sendo que nos demais lotes houve queda nos títulos a partir do 3º mês de vida apresentando um período de desproteção decorrente de queda de anticorpos colostrais superior ao grupo vacinado aos dois meses de idade. Nenhum dos grupos de bezerros estudados apresentou resposta sorológica satisfatória a primo vacinação, porém, todos apresentaram resposta adequada após a revacinação. O estudo demonstrou que é recomendável a vacinação antirrábica em bezerros aos dois meses de idade independentemente do estado vacinal materno seguida de revacinação 30 dias após, e ao completarem 12 meses de vida / Calves born from cows revaccinated against rabies in the final third of pregnancy were vaccinated at two, four and six months of age and revaccinated 30 days later. Seraneutralizing antibody titers (AcSN) against rabies were measured in mothers and their calves 48 hours after delivery. The calves were separated into four groups of 10 animals, represented by non-vaccinated and vaccinated calves with two months, four months and six months of age. The AcSN titers was evaluated monthly and 15 days after vaccination and revaccination until 12 months of life in each group. All cows had AcSN greater than 0,5 UI/mL 48 hours after delivery. Antibodies trasnferred by colostrum with similar titers were observed in all calves studied 48 hours after birth. AcSN titers higher than 0,5UI/mL remained to the 5th month in calves vaccinated at two month of age in contrast to the others groups that presented decrease of AcSN begining at 3th month of age until 30 days after first vaccination representing a longer period of lack of protection comparatively to the group vaccinated at two month of age. Absence of satisfatory antibody response was observed in all groups after the first vaccination, however, all calves had an adequate response after revaccination. The study demonstrated that antirabies vaccination can be recommended in calves at two months of age regardless of vaccination status of mothers being mandatory the revaccination 30 days after and at 12 months of life
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Atividade de monócitos em gestantes normais e com pré-eclâmpsia

Martins, Rosana Aparecida Rodrigues [UNESP] January 2002 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:19Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002Bitstream added on 2014-06-13T18:47:26Z : No. of bitstreams: 1 martins_rar_me_botfm.pdf: 360919 bytes, checksum: cbb7d98cabd32fdfd936feb6aba67c10 (MD5) / A pré-eclâmpsia é uma complicação grave da gestação, caracterizada por hipertensão e proteinúria. Os sintomas desta síndrome aparecem durante a segunda metade da gestação. A literatura sugere que a pré-eclâmpsia resulta de uma resposta inflamatória excessiva à gestação. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade de monócitos de sangue periférico através da produção de citocinas, atividade fungicida e liberação de peróxido de hidrogênio por essas células em gestantes normais e com pré-eclâmpsia. Foram estudadas 25 mulheres não-grávidas e normotensas e 50 gestantes sendo 20 normotensas e 30 com pré-eclâmpsia. Monócitos foram cultivados com ou sem 10 ug/mL de lipopolissacáride (LPS) durante 24 h a 37oC e os níveis de fator de necrose tumoral alfa (TNF-a), de Interleucina-10 (IL -10) e de fator transformador do crescimento beta (TGF-b1) foram determinados no sobrenadante de cultura por ensaio imunoenzimático. A atividade fungicida foi avaliada pela recuperação de células viáveis de Candida albicans após plaqueamento e contagem de unidades formadoras de colônias em meio ágar Sabouraud. A liberação de peróxido de hidrogênio (H2O2) foi determinada antes e após estímulo dos monócitos com phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA). Os resultados mostraram que os níveis endógenos de TNF-a, IL -10 e de TGF-b1 produzidos por monócitos, cultivados sem estímulo, foram significativamente mais elevados tanto em gestantes normais como nas com pré-eclâmpsia. Resultados semelhantes foram observados com relação à produção de IL-10 e TGF-b1 por monócitos após estímulo com LPS. A liberação de H2O2 após estímulo com PMA foi mais elevada em gestantes normais do que nas com pré-eclâmpsia. Além disso, monócitos de gestantes com... / Pre-eclampsia is a severe complication of pregnancy, characterized by hypertension and proteinuria. The symptoms of this syndrome appear during the second half of the pregnancy. The literature suggests that pre-eclampsia results from an excessive maternal inflammatory response to pregnancy. The objective of this study was to evaluate the activity of peripheral blood monocytes by cytokine production, fungicidal activity and hydrogen peroxide liberation in normotensive pregnant women and with pre-eclampsia. The study included 25 normotensive non-pregnant and 50 pregnant women being 20 normotensive and 30 with preeclampsia. Monocytes from these women were cultivated with or without 10 ug/mL lipopolysaccharide (LPS) during 24h at 37oC, and the levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF-a), Interleukin-10 (IL -10) and transforming growth factor beta 1 (TGF-b1) were determined in culture supernatants by enzyme immunoassay. The fungicidal activity was determined by the recovery of viable Candida albicans after co-culture of yeasts with monocyte and plating in Sabouraud medium with enumeration of colony forming units. Hydrogen peroxide (H2O2) liberation was determined before and after monocyte stimulation with phorbol 12-myristate 13- acetate (PMA). The results showed that endogenous levels of TNF-a, IL-10 and TGF-b1 detected in supernatants of monocytes cultivated without stimulus were significantly higher in both normal and pre-eclampsia pregnant patients than in non-pregnant women. Similar results were observed in relation to IL -10 and TGF- b1 production after monocyte stimulation with LPS. Monocytes from normotensive pregnant women released higher levels of H2O2 after PMA stimulation than cells from patients with pre-eclampsia. Besides monocytes from women with preeclampsia produced lower levels of TNF-a suggesting an impairment in the... (Complete abstract click electronic address below)
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Fatores de crescimento e citocinas envolvidos na angiogênese de melanoma em animais selecionados pela intensidade da resposta inflamatória aguda

Romagnoli, Graziela Gorete [UNESP] 19 July 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:26:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-19Bitstream added on 2014-06-13T20:55:08Z : No. of bitstreams: 1 romagnoli_gg_me_botfm.pdf: 1061911 bytes, checksum: 3363fb5297f797d2a3f168ea7e01bdb0 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Camundongos AIRmax e AIRmin selecionados de acordo com a intensidade da resposta inflamatoria aguda apresentam variacoes na suscetibilidade ou resistencia ao desenvolvimento de tumores. Considerando a importancia da resposta inflamatoria no desenvolvimento tumoral e que mediadores desta resposta influenciam a angiogenese, o presente trabalho avaliou os perfis de expressao no baco de mRNA de VEGF, FGF-2 e TGF-ß pela tecnica da PCR em tempo real e o numero de celulas produtoras das citocinas IL-6, TNF-alfa, IL-10, IL-2, IL-12 e IFN-y pela tecnica de ELISpot envolvidas na neovascularizacao nos animais AIRmax e AIRmin. Para tanto, estes animais foram implantados com celulas de melanomas murino B16F10 e S91 e avaliados quanto ao crescimento tumoral, presenca de metastases e expressao dos mediadores citados aos 7, 14 e 30 dias apos inoculo subcutaneo. Nossos resultados demonstraram que os animais AIRmin tiveram maior capacidade de conter o crescimento de melanoma B16F10 do que os animais AIRmax, embora diferencas significativas em relacao ao fatores envolvidos na angiogenese nao tenham sido encontradas. Os animais AIRmin implantados com melanoma S91 tambem apresentaram menor frequencia de crescimento tumoral, ainda que esses animais tenham apresentado mais fatores envolvidos na angiogenese, como maior expressao de mRNA de VEGF e maior numero de celulas produtoras de IL-6 e TNF-alfa. Assim, e possivel que o melhor controle do crescimento tumoral em animais AIRmin seja decorrente de sua capacidade de gerar maior numero de celulas produtoras de IFN-y e menor numero daquelas produtoras de IL-10. / Not available.
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Pesquisa do antígeno eritrocitário canino 1.1 em plaquetas de cão

Lucidi, Cynthia de Assumpção [UNESP] 20 September 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:47Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-09-20Bitstream added on 2014-06-13T18:20:01Z : No. of bitstreams: 1 lucidi_ca_me_botfmvz.pdf: 1789993 bytes, checksum: 1be9205c888eae8b214b252b5790367e (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A expressão de antígenos eritrocitários do sistema ABO em plaquetas humanas pode causar baixo incremento plaquetário pós-transfusional e refratariedade no receptor. Na Medicina Veterinária, o antígeno eritrocitário canino (DEA) 1.1 causa as reações transfusionais hemolíticas mais importantes clinicamente, e se presente nas plaquetas caninas pode estar envolvido em reações imunológicas levando à baixa sobrevida das plaquetas transfundidas ou aloimunização do paciente receptor. O objetivo deste estudo foi investigar a presença do DEA 1.1 em plaquetas de cão. Para tanto, plaquetas de 110 cães DEA 1.1 positivos e 62 cães DEA 1.1 negativos foram incubadas com soro policlonal anti-DEA 1.1, e então com o anticorpo policlonal anti-IgG canina marcado com FITC, e posteriormente avaliadas pelo método de citometria de fluxo. As hemácias de todos os cães foram testadas da mesma forma, a fim de demonstrar a eficácia da técnica de citometria de fluxo para detecção deste antígeno. Além disso, todas as amostras foram tipadas para o DEA 1.1 pelo teste convencional da aglutinação em tubo, para confirmação dos resultados obtidos pela citometria de fluxo em hemácias. Os resultados demonstraram que o DEA 1.1 não está presente nas plaquetas caninas e que parece não haver a necessidade de transfusão de plaquetas compatíveis para este tipo sanguíneo em cães. Foi observado ainda, que a citometria de fluxo é um teste mais sensível e acurado para a tipagem sanguínea do DEA 1.1 do que o teste de aglutinação em tubo. / The expression of erythrocyte antigens, from the ABO system, by human platelets can cause post-transfusional low platelet increment and refractoriness on the receptor. In Veterinary Medicine, the dog erythrocyte antigen (DEA) 1.1 causes the most clinically important hemolytic transfusion reactions, and if present on canine platelets may be the cause of immunologic platelet transfusion reactions, leading to short survival of the transfused platelets or alloimmunization of the recipient. The purpose of this study was to investigate the presence of the DEA 1.1 antigen in canine platelets. For that, platelets from 110 DEA 1.1 positive dogs and 62 DEA 1.1 negative dogs were incubated with anti-DEA 1.1 polyclonal sera, and then with anti-canine IgG FITC-labeled polyclonal antibody, to be evaluated by flow cytometry. All canine erythrocytes were tested the same way, to demonstrate the efficacy of the flow cytometric technique to detect this antigen. Moreover, all samples were typed for DEA 1.1 by the gold-standard tube typing test, to confirm the results obtained to the red cells by flow cytometry. The results showed that the DEA 1.1 antigen is not present on canine platelets, and that it seems to not be necessary the transfusion of DEA 1.1 compatible platelets in dogs. Further observation also showed that the flow cytometric test is more sensitive and accurate than the tube typing test for the detection of DEA 1.1 antigen.
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Efeito da IL-15 sobre a atividade fungicida de neutrófilos humanos contra Paracoccidioides brasiliensis

Tavian, Elisandra Garcia [UNESP] 20 July 2007 (has links) (PDF)
Made available in DSpace on 2014-06-11T19:24:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-07-20Bitstream added on 2014-06-13T20:12:20Z : No. of bitstreams: 1 tavian_eg_me_botfm.pdf: 871930 bytes, checksum: 342b3c01d67e8458e6f2f4a552e5764b (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A IL-15 é uma citocina próinflamatória produzida principalmente por monócitos e macrófagos em resposta a agentes infecciosos, desempenhando importante papel modulador na imunidade inata e adaptativa. No caso de infecções por microrganismos intracelulares como algumas bactérias, protozoários e fungos destaca-se o papel da IL-15 no mecanismo de ativação de monócitos/ macrófagos e neutrófilos, processo que representa um importante mecanismo de defesa já em períodos precoces da infecção durante o desenvolvimento da resposta imune inata. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da IL-15 sobre a atividade fungicida de neutrófilos humanos desafiados com cepa virulenta do P. brasiliensis (Pb 18). Adicionalmente, testamos se essa atividade seria mediada por produtos do metabolismo oxidativo como anion superóxido e H2O2 e se estaria associada a alterações nos níveis das citocinas IL-8 e TNF- alfa. Neutrófilos do sangue periférico de indivíduos saudáveis , foram incubados na ausência ou presença de IL-15 (12,5 a 250 ng/mL) por 18h a 370C em tensão de 5% de CO2, infectados com Pb 18 por 4h e avaliados quanto a atividade fungicida , produção de ânion superóxido, H2O2 e quantificação nos sobrenadantes das citocinas TNF-a e IL-8. A préincubação de neutrófilos com IL-15 induziu um aumento significativo na atividade fungicida dessas células de maneira dose dependente. Adicionalmente após a ativação, foi detectado um aumento na produção de 51 anion superóxido e H2O2 por essas células, sugerindo a participação desses metabólitos como moléculas efetoras da atividade fungicida. O desafio das células em presença de catalase, levou a uma diminuição significativa da atividade fungicida comprovando o papel da H2O2 nesse processo. No entanto, os níveis de... / Interleukin-15 is a cytokine produced by a wide range of different cell types, including macrophages in response to lipopolysaccharide or microbial infection. This cytokine may play a crucial role in the activation of phagocytic cells against pathogens, mainly during innate immune response. The effects of IL-15 on human polimorphonuclear leukocyte fungicidal activity against high virulent P. brasiliensis strain were investigated. Prétreatment with IL-15 for 18h, increased neutrophils fungicidal activity in a concentration dependent manner. In addition, exposure to IL-15 induced enhanced neutrophil oxidative burst evaluated by superóxide anion and H2O2 release. Catalase inhibits fungicidal activity confirming a role for H2O2 in fungus Killing. In contrast, IL-8 and TNF-alfa levels were not affected by IL-15 suggesting that its effects were not mediated by these cytokines. Together, the results showed that IL-15 is a potent stimulant of antifungal activities of human neutrophils, at least in part, by a mechanism dependent on oxidative metabolism.
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Efeito da IL-15 sobre a atividade fungicida de neutrófilos humanos contra Paracoccidioides brasiliensis /

Tavian, Elisandra Garcia. January 2007 (has links)
Orientador: Ângela Maria Victoriano de Campos Soares / Banca: Wafa Hanna Koury Cabrera / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A IL-15 é uma citocina próinflamatória produzida principalmente por monócitos e macrófagos em resposta a agentes infecciosos, desempenhando importante papel modulador na imunidade inata e adaptativa. No caso de infecções por microrganismos intracelulares como algumas bactérias, protozoários e fungos destaca-se o papel da IL-15 no mecanismo de ativação de monócitos/ macrófagos e neutrófilos, processo que representa um importante mecanismo de defesa já em períodos precoces da infecção durante o desenvolvimento da resposta imune inata. O objetivo do presente trabalho foi avaliar o efeito da IL-15 sobre a atividade fungicida de neutrófilos humanos desafiados com cepa virulenta do P. brasiliensis (Pb 18). Adicionalmente, testamos se essa atividade seria mediada por produtos do metabolismo oxidativo como anion superóxido e H2O2 e se estaria associada a alterações nos níveis das citocinas IL-8 e TNF- alfa. Neutrófilos do sangue periférico de indivíduos saudáveis , foram incubados na ausência ou presença de IL-15 (12,5 a 250 ng/mL) por 18h a 370C em tensão de 5% de CO2, infectados com Pb 18 por 4h e avaliados quanto a atividade fungicida , produção de ânion superóxido, H2O2 e quantificação nos sobrenadantes das citocinas TNF-a e IL-8. A préincubação de neutrófilos com IL-15 induziu um aumento significativo na atividade fungicida dessas células de maneira dose dependente. Adicionalmente após a ativação, foi detectado um aumento na produção de 51 anion superóxido e H2O2 por essas células, sugerindo a participação desses metabólitos como moléculas efetoras da atividade fungicida. O desafio das células em presença de catalase, levou a uma diminuição significativa da atividade fungicida comprovando o papel da H2O2 nesse processo. No entanto, os níveis de... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Interleukin-15 is a cytokine produced by a wide range of different cell types, including macrophages in response to lipopolysaccharide or microbial infection. This cytokine may play a crucial role in the activation of phagocytic cells against pathogens, mainly during innate immune response. The effects of IL-15 on human polimorphonuclear leukocyte fungicidal activity against high virulent P. brasiliensis strain were investigated. Prétreatment with IL-15 for 18h, increased neutrophils fungicidal activity in a concentration dependent manner. In addition, exposure to IL-15 induced enhanced neutrophil oxidative burst evaluated by superóxide anion and H2O2 release. Catalase inhibits fungicidal activity confirming a role for H2O2 in fungus Killing. In contrast, IL-8 and TNF-alfa levels were not affected by IL-15 suggesting that its effects were not mediated by these cytokines. Together, the results showed that IL-15 is a potent stimulant of antifungal activities of human neutrophils, at least in part, by a mechanism dependent on oxidative metabolism. / Doutor
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Pesquisa do antígeno eritrocitário canino 1.1 em plaquetas de cão /

Lucidi, Cynthia de Assumpção. January 2007 (has links)
Orientador: Regina Kiomi Takahira / Banca: Patrícia Mendes Pereira / Banca: Elenice Deffune / Resumo: A expressão de antígenos eritrocitários do sistema ABO em plaquetas humanas pode causar baixo incremento plaquetário pós-transfusional e refratariedade no receptor. Na Medicina Veterinária, o antígeno eritrocitário canino (DEA) 1.1 causa as reações transfusionais hemolíticas mais importantes clinicamente, e se presente nas plaquetas caninas pode estar envolvido em reações imunológicas levando à baixa sobrevida das plaquetas transfundidas ou aloimunização do paciente receptor. O objetivo deste estudo foi investigar a presença do DEA 1.1 em plaquetas de cão. Para tanto, plaquetas de 110 cães DEA 1.1 positivos e 62 cães DEA 1.1 negativos foram incubadas com soro policlonal anti-DEA 1.1, e então com o anticorpo policlonal anti-IgG canina marcado com FITC, e posteriormente avaliadas pelo método de citometria de fluxo. As hemácias de todos os cães foram testadas da mesma forma, a fim de demonstrar a eficácia da técnica de citometria de fluxo para detecção deste antígeno. Além disso, todas as amostras foram tipadas para o DEA 1.1 pelo teste convencional da aglutinação em tubo, para confirmação dos resultados obtidos pela citometria de fluxo em hemácias. Os resultados demonstraram que o DEA 1.1 não está presente nas plaquetas caninas e que parece não haver a necessidade de transfusão de plaquetas compatíveis para este tipo sanguíneo em cães. Foi observado ainda, que a citometria de fluxo é um teste mais sensível e acurado para a tipagem sanguínea do DEA 1.1 do que o teste de aglutinação em tubo. / Abstract: The expression of erythrocyte antigens, from the ABO system, by human platelets can cause post-transfusional low platelet increment and refractoriness on the receptor. In Veterinary Medicine, the dog erythrocyte antigen (DEA) 1.1 causes the most clinically important hemolytic transfusion reactions, and if present on canine platelets may be the cause of immunologic platelet transfusion reactions, leading to short survival of the transfused platelets or alloimmunization of the recipient. The purpose of this study was to investigate the presence of the DEA 1.1 antigen in canine platelets. For that, platelets from 110 DEA 1.1 positive dogs and 62 DEA 1.1 negative dogs were incubated with anti-DEA 1.1 polyclonal sera, and then with anti-canine IgG FITC-labeled polyclonal antibody, to be evaluated by flow cytometry. All canine erythrocytes were tested the same way, to demonstrate the efficacy of the flow cytometric technique to detect this antigen. Moreover, all samples were typed for DEA 1.1 by the gold-standard tube typing test, to confirm the results obtained to the red cells by flow cytometry. The results showed that the DEA 1.1 antigen is not present on canine platelets, and that it seems to not be necessary the transfusion of DEA 1.1 compatible platelets in dogs. Further observation also showed that the flow cytometric test is more sensitive and accurate than the tube typing test for the detection of DEA 1.1 antigen. / Mestre

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