Orientador: Débora Cristina Damasceno / Banca: Marilza Vieira Cunha Rudge / Banca: Estela Maris Andrade Forell Bevillacqua / Banca: Renée Laufer Amorim / Banca: Teresa Cristina França Sartori / Resumo: Avaliar os efeitos do diabete moderado nos parâmetros reprodutivos maternos e no desenvolvimento placentário-fetal em ratas Wistar. Metodologia: No dia do nascimento, 147 ratas Wistar foram distribuídas aleatoriamente em dois grupos experimentais: Grupo não-diabético (Controle, n=45) - recebeu o veículo; Grupo diabético (STZ, n=102) - recebeu 100 mg streptozotocin/kg. Na fase adulta, as ratas foram acasaladas e, no dia 0 de prenhez, foram incluídas ratas controle que apresentassem glicemia abaixo de 120 mg/dL e, para o grupo diabete moderado, glicemia entre 120 e 300 mg/dL. Em diferentes momentos da prenhez, glicemia e peso corpóreo foram verificados. No 21º dia de prenhez, as ratas foram anestesiadas para coleta de sangue para dosagem de insulina e, em seguida, foi realizada laparotomia para retirada e pesagem dos fetos e placentas. Os dados maternos e fetais foram analisados por Twoway ANOVA seguida do Teste t. Os recém-nascidos (RN) foram classificados em pequenos, adequados e grandes para idade de prenhez e as comparações entre os grupos foram realizadas segundo o Teste de Qui-quadrado. As ratas STZ apresentaram glicemias maiores nos dias 0 e 14 de prenhez, menor número médio de fetos vivos, implantações e de corpos lúteos, aumento nas taxas de perdas embrionárias pós-implantação, no peso placentário e na proporção de RN pequenos (PIP) e grandes (GIP) para idade de prenhez, redução de RN AIP e inalteração nas concentrações de insulina. Portanto, o diabete de intensidade moderada alterou a glicemia materna no início da prenhez, que deflagrou alterações no organismo materno e/ou no desenvolvimento inicial do embrião, afetando sua implantação e futuro desenvolvimento placentário e fetal. / Abstract: To evaluate the mild diabetes effects on the maternal reproductive outcome and placental-fetal development in female Wistar rats. Methodology: At the birth day, 147 female rats were randomly distributed in two experimental groups: 1) Non-diabetic Group (Control, n=45) - received the vehicle; 2) Diabetic Group (STZ, n=102) - received 100 mg streptozotocin/kg. At the adult phase, the female rats were mated and, at the day 0 of pregnancy, they were included in the control group when presented glycemia below 120 mg/dL and, in the group STZ when showed glycemia between 120 and 300 mg/dL. In different moments of the pregnancy, glycemia and body weight were verified. At day 21 of pregnancy, the rats were anaesthetized to collect blood samples for insulin determination and, soon afterwards, the laparotomy was carried out to withdraw and weigh the fetuses and placentas. The maternal and fetal dates were analyzed by Two-way ANOVA followed by t Test. The newborns (NB) were classified in small, appropriate and large for gestational age and the comparisons between the groups were accomplished according to Qui-square Test. Rats STZ presented higher glycemia at days 0 and 14 of pregnancy, lower numbers of alive fetuses; implantations and corpora lutea; increased rate of embryonic losses, placental weight and proportion of small NB (SGA) and large (LGA); reduced rate of AGA NB and unaltered insulin concentrations. Therefore, the mild diabetes altered the maternal glycemia in the early pregnancy, which caused changes in the maternal organism and/or in the early development of the embryo, impairing its implantation and future placental and fetal development. / Doutor

Orientador: Ramon Kaneno / Banca: Sílvio Luis de Oliviera / Banca: Maria Notomi Sato / Banca: Ana Lúcia Spinardi-Barbisan / Banca: Marcelo de Franco / Resumo: Animais selecionados de acordo com a intensidade da sua resposta inflamatória aguda (AIR) à poliacrilamida, foram inoculados s.c. com células de melanoma B16F10 ou S91. Aos 7, 14 ou 30 dias, os animais foram sacrificados para obtenção do baço e avaliação do número de células T, Treg, NK e NKT, por citometria de fluxo, e do perfil de algumas citocinas (ELISpot). Os resultados demonstraram que os animais AIRmax apresentaram maior incidência do melanoma B16F10, associado ao aumento do número de células Treg, e também incidência elevada do melanoma S91, associada ao aumento da produção IL-10 e redução de IFN-g, em relação aos animais AIRmin. Estes resultados permitem inferir que a sensibilidade ao desenvolvimento de melanomas pode ser resultado de alterações nos mecanismos regulatórios da resposta imune, que neste caso, inibiram o desenvolvimento de uma resposta eficiente nos animais AIRmax. / Abstract: Not available. / Doutor

Orientador: José Maurício Sforcin / Banca: Renata Dellalibera-Joveliano / Banca: Maria Terezinha Serrão Peraçoli / Resumo: A própolis tem sido motivo de intensa investigação científica e sua ação imunomoduladora vem sendo mencionada. A recente descoberta e caracterização da família dos receptores semelhantes a Toll (TLR) tem desencadeado grande interesse no campo da imunidade inata. Tal interesse deve-se ao fato de estes receptores proporcionarem um papel vital no reconhecimento microbiano e no desenvolvimento da resposta imune adaptativa. Tendo em vista que há muito a ser investigado no tocante à relação imunomodulação-TLR, o objetivo deste projeto foi avaliar o efeito da própolis na expressão dos mesmos, bem como determinar a produção de citocinas próinflamatórias (IL-1b e IL-6) por macrófagos e esplenócitos de camundongos BALB/c. A expressão e a produção de citocinas do perfil Th1 (IL-2 e IFN-g) e Th2 (IL-4 e IL-10) por esplenócitos também foram avaliadas. A própolis induziu aumento na produção basal de IL-1b e na expressão de TLR-2 e TLR-4 em macrófagos peritoneais. A expressão de TLR-2 e TLR-4 e a produção de IL-1b e IL-6 também apresentaram valores aumentados em esplenócitos de camundongos tratados com própolis. Estes dados sugerem que a administração de própolis a curto prazo a camundongos pode estimular os eventos iniciais da resposta imune. A própolis não afetou a expressão e produção de IL-2, IL-4 e IL-10; contudo, a produção basal e estimulada de IFN-g foi inibida após a administração deste produto apícola, o que sugere seu efeito antiinflamatório in vivo / Abstract: Propolis has been the subject of intense scientific research and its immunomodulatory action has been mentioned. The recent discovery and characterization of Toll like receptors (TLR) has triggered a great interest in the field of innate immunity. This interest is due to the fact that these receptors provide a vital role in microbial recognition and development of the adaptive immune response. Considering that there is much to be investigated regarding the relationship TLRimmunomodulation, the goal of this project was to evaluate propolis effect on TLR-2 and TLR-4 expression, and to determine the production of proinflammatory cytokines (IL-1b and IL-6), in macrophages and spleen cells from BALB/c mice. Th1 (IL-2 and IFN-g) and Th2 (IL-4 and IL-10) cytokines' expression and production were also assessed in spleen cells. IL-1b basal production and TLR-2 and TLR-4 expression were increased in peritoneal macrophages of mice treated with propolis. TLR-2 and TLR-4 expression and IL-1b and IL-6 production were also increased in spleen cells of propolis-treated mice. These data suggest that propolis administration over a short-term to mice stimulates the initial steps of the immune response. Propolis did not affect IL-2, IL-4 and IL-10 expression and production, but both basal and Con A-stimulated IFN-g production were inhibited after propolis administration, what suggests its antiinflammatory action in vivo / Mestre

Resumo: O ensaio imunoenzimático de ELISA foi utilizado para avaliar, acompanhar e comparar a resposta imune humoral de camundongos SWISS durante o processo de hiperimunização com veneno nativo e irradiado com Cobalto-60 (60Co) obtido das serpentes Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu e Bothrops moojeni. A potência e a capacidade de neutralização foram avaliadas por meio de desafios "in vitro". A imunidade obtida ao final do processo de hiperimunização foi verificada mediante desafio "in vivo" e os efeitos colaterais foram avaliados. A imunização dos animais, com uma DL50 de cada veneno, ocorreu nos dias um, 15, 21, 30 e 45, quando foram colhidas amostras de sangue. No 60º dia ocorreram os desafios. Os resultados demonstraram que o teste de ELISA mostrou-se eficiente na avaliação, acompanhamento e comparação da resposta imune dos camundongos durante o processo de hiperimunização. Os títulos do soro produzido com veneno nativo foram semelhantes aos títulos do soro obtido com veneno irradiado. A capacidade imunogênica foi mantida após a irradiação com 60Co. O soro produzido a partir do veneno irradiado de Crotalus durissus terrificus apresentou potência e capacidade de neutralização maiores, quando comparado ao soro obtido a partir do veneno nativo.Os anticorpos antiveneno nativo e irradiado, mediante os desafios "in vitro", mostraram-se igualmente eficazes na neutralização dos venenos de Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu e Bothrops. Todos anticorpos foram capazes de neutralizar cinco DL50 dos respectivos venenos. As alterações clínicas foram mínimas durante o processo de hiperimunização com veneno irradiado e evidentes com veneno bruto. / Abstract: ELISA was used to evaluate, follow, and compare the humoral immune response of Swiss mice during hyperimmunization with natural and Cobalt-60- irradiated (60Co) Crotalus durissus terrificus, Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu, and Bothrops moojeni venoms. Potency and neutralization were evaluated by in vitro challenges. After hyperimmunization, immunity was observed by in vivo challenge and the side effects were assessed. The animals' immunization with one LD50 of each venom was on days one, 15, 21, 30, and 45, when blood samples were collected; the challenges occurred on the 60th day. Results showed that ELISA was efficient in evaluating, following, and comparing mouse immune response during hyperimmunization. Serum titers produced with natural venom were similar to those with irradiated venom. Immunogenic capacity was maintained after 60Co irradiation. Serum produced from Crotalus durissus terrificus irradiated venom showed higher potency and neutralization capacity than that from natural venom. Antibodies from natural and irradiated venom by in vitro challenges were also efficient in neutralizing Bothrops jararaca, Bothrops jararacussu, and Bothrops moojeni venoms. All antibodies were capable of neutralizing five LD50 from these venoms. Clinical alterations were minimum during hyperimmunization with irradiated venom and evident with natural venom. / Orientador: Domingos Alves Meira / Coorientador: Benedito Barraviera / Mestre

Orientador: Luiz Sebastião Prigenzi / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-17T15:50:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_CelsoPaulinoda_M.pdf: 5690792 bytes, checksum: 27711e35c9b82250c2cd587269f4097a (MD5) Previous issue date: 1979 / Resumo: Considerando níveis de parasistemia e mortalidade, a resistencia e suscetibilidade das raças C3H e C57/BL6 infectados por t. cruzi foram estudados em ralação a cepa y deste parasita. Lotes de camundongos de ambas as raças, foram inoculados respectivamente com 50.000, 5.000 e 500 T. cruzi forma tripomastigota, por via intra peritioneal. A parasitemia foi determinada em diferentes dias de infecção através de amostras de sangue colhidos na estremidade da cauda dos camundongos. A produção de anticorpos específicos anti T cruzi, na fase inicial da infecção, que poderia estar relacionada a resistência e suscetibilidade deste animais foi estudada através de reação de aglutinação e imunoflurescencia. No soro destes camundongos foram também estudados o título e natureza de anticorpos heterófilos. O comportamento do peso do baço, assim como observações histológicas de baço, fígado e coração foram realizadas nestes camundongos. Os resultlados obtidos sugerem que: 1- A resistência de camundongos da raça C57/BL6 é dependente do número de parasitas inoculados. Assim para inóculos de 50.000 T. cruzi estes camundongos são suscetíveis. 2- Quando foram utilizados inóculos de 5.000 e 500 T. cruzi respectivamente, os camundongos da raça C57/BL6 se comportaram como resistentes e os CH3 como suscetíveis. 3- Com todos os inóculos estudados, camundongos da raça C57/BL6 apresentaram níveis de parasistemia mais elevadoas que os da raça C3H ...Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

Orientador: Gisele Fabrino Machado / Banca: Mary Marcondes / Banca: Antonio Carlos Alessi / Resumo: Para investigar a patogênese das alterações encefálicas durante a leishmaniose visceral, a expressão gênica das citocinas pró-inflamatórias IL-1, IL-6, IL-12p40, IFN-e TNF-e das citocinas anti-inflamatórias IL-10 e TGF- foi avaliada por meio de RT-qPCR no encéfalo de cães naturalmente infectados por Leishmania infantum (= chagasi). No encéfalo dos cães infectados houve aumento da expressão gênica de IL-1, IL-6, IFN- e TNF-, associada ao decréscimo da expressão de IL-10 e TGF-. Por outro lado, a expressão gênica da citocina pró-inflamatória IL-12p40 mostrou-se reduzida no encéfalo de cães com LV. Esses dados indicam a presença de um ambiente pró-inflamatório no encéfalo de cães com leishmaniose visceral, já que IL-1, IL-6 e TNF-, principalmente, é tida como um fator chave para a iniciação, manutenção e persistência da inflamação. Ainda, não foi detectada correlação entre o perfil de citocinas expresso com a manifestação clínica ou com a carga parasitária periférica de Leishmania, sugerindo que as alterações encefálicas são decorrentes da própria resposta imune do hospedeiro, independentemente da fase em que a doença se encontra / Abstract:To investigate the pathogenesis of the brain alterations during visceral leishmaniasis, the gene expression of the pro-inflammatory cytokines IL-1, IL- 6, IL-12p40, IFN-and TNF-, and the anti-inflammatory cytokines IL-10 and TGF-was evaluated in the brain of dogs naturally infected with Leishmania infantum (syn. chagasi) by means of RT-qPCR. In the brain of the infected dogs, there was noticed up-regulation of IL-1, IL-6, IFN- and TNF-gene expression, in association with down-regulation of IL-10 and TGF-. On the other hand, the gene expression of IL-12p40 was down-regulated in the brain of the dogs with visceral leishmaniasis. These data indicate the presence of a pro- inflammatory milieu in the brain of dogs with visceral leishmaniasis, since IL-1, IL-6 and TNF-are considered key factors for the initiation, maintenance and persistence of inflammation. Furthermore, it was not detected correlation between the cytokine profile with the clinical manifestation or with the peripherical parasite density of Leishmania, which suggests that the brain alterations are due to the host immune response, regardless of the stage of the disease / Mestre

Orientador: Winston Bonetti Yoshida / Coorientador: Marcos Augusto de Moraes Silva / Banca: Marcello Laneza Felicio / Banca: Nelson Leonardo Kerdahi Leite de Campos / Banca: Reinaldo Ayer de Oliveira / Banca: Nilson Antunes / Resumo: Objetivo: Relatar de forma simples e resumida o desenvolvimento da circulação extracorpórea. Métodos: Realizada revisão de literatura sobre a evolução da circulação extracorpórea, seu papel fundamental para cirurgia cardiovascular e as complicações que podem surgir após o seu uso, dentre elas, a hemólise e a inflamação. Resultados: O processo de desenvolvimento da circulação extracorpórea foi fundamental diminuindo as complicações desencadeadas por ela, que acabam por repercutir no paciente, variando de lesões de graus variados até falência de múltiplos órgãos. Os pesquisadores estudaram quais as agressões que a CEC poderia suscitar no organismo humano. Possíveis soluções surgiram e consequentemente, meios mais adequados para uma condução mais segura do pós-operatório foram propostas. Conclusão: A CEC progrediu a passos firmes e seguros ao longo destas últimas décadas desde a sua concepção por Gibbon. Apesar da sua evolução e das condutas realizadas na tentativa de amenizar as complicações, o respeito aos detalhes das funções fisiológicas do paciente são fundamentais / Abstract: Objective: To provide a brief review of the development of cardiopulmonary bypass. Methods: A review of the literature on the development of extracorporeal circulation techniques, their essential role in cardiovascular surgery, and the complications associated with their use, including hemolysis and inflammation. Results: The advancement of extracorporeal circulation techniques has played an essential role in minimizing the complications of cardiopulmonary bypass, which can range from various degrees of tissue injury to multiple organ dysfunction syndrome. Investigators have long researched the ways in which cardiopulmonary bypass may insult the human body. Potential solutions arose and laid the groundwork for development of safer postoperative care strategies. Conclusion: Steady progress has been made in cardiopulmonary bypass in the decades since it was first conceived of by Gibbon. Despite the constant evolution of cardiopulmonary bypass techniques and attempts to minimize their complications, it is still essential that clinicians respect the particularities of each patient's physiological function / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:57Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-03-08Bitstream added on 2014-06-13T21:01:42Z : No. of bitstreams: 1 pedrini_scb_dr_botfm.pdf: 905602 bytes, checksum: e7f0ba6f8ec19cb6910c250e4ca919fe (MD5) / A hanseníase é, ainda hoje, um problema global de saúde pública. O Brasil e a Índia são os países com maior prevalência da doença. A existência de tatus Dasypus novemcinctus naturalmente infectados por Mycobacterium leprae foi relatada nos Estados Unidos, México, Argentina e no Brasil, no Estado do Espírito Santo. Micobactérias potencialmente patogênicas e algumas ambientais já foram isoladas destes animais. A identificação do bacilo é dificultada, particularmente pela sua incapacidade de crescimento in vitro. Portanto, o uso de ferramentas moleculares representa uma alternativa mais rápida e sensível para diagnóstico de micobacterioses. Neste trabalho foram feitas baciloscopia, cultura e PCR com primers específicos para seqüências repetitivas de M. leprae, a partir de DNA extraído de amostras de fígado, baço, linfonodos e pele de 21 tatus D. novemcinctus, Euphractus sexcintus e Cabassous tatouay provenientes da região Centro-Oeste do Estado de SP, dos quais 17 eram provenientes do Banco de DNA do Laboratório de Biologia de Fungos do Departamento de Microbiologia e Imunologia - IBB. Para a padronização da metodologia foram utilizados hamsters experimentalmente infectados por M. avium e o modelo experimental para hanseníase (D. novemcinctus) do Biotério de Experimentação Animal do Instituto Lauro de Souza Lima, Bauru-SP. Com exceção de dois tatus, cujas amostras fezes foram positivas pela PCR, nenhum tatu selvagem apresentou infecção natural por micobactérias. Somente o tatu inoculado com biópsia de paciente virchowiano foi positivo, tanto na PCR, quanto no seqüenciamento genômico, que revelou 100% de identidade com o M. leprae. Os resultados preliminares deste estudo, com base na metodologia empregada, sugerem que existe um indicativo de que os tatus selvagens podem apresentar papel de reservatório de M. leprae na cadeia epidemiológica da doença, na região estudada. / Leprosy is still a worldwide public health problem. Brazil, in addition to India, show the highest prevalence rates of the disease. Natural infection of armadillos Dasypus novemcinctus with Mycobacterium leprae has been reported in the United States, Mexico, Argentina and Brazil, in the State of Espírito Santo. Potentially pathogenic and ambiental mycobacteria have been isolated from these animals. Identification of bacilli is difficult, particularly because its inability to grow in vitro. The use of molecular tools represent a fast and sensitive alternative method for diagnosis of mycobacteriosis. In the present study, the diagnostic methods used were bacilloscopy, culture and PCR using specific primers for M. leprae repetitive sequences. The PCR were performed using genomic DNA extracted from liver, spleen, lymphnodes and skin of 21 D. novemcinctus, Euphractus sexcintus and Cabassous tatouay armadillos from the Middle Western region of the State of São Paulo. From those, 17 samples were taken from the DNA Bank of the Fungal Biology Laboratory at Department of Microbiology and Immunology IB - Botucatu, UNESP. Standardization of the technique was done in M. avium experimentally infected hamsters and M. leprae experimentally infected D. novemcinctus tissue from the Laboratory Animal House at Instituto Lauro de Souza Lima, Bauru-SP. No one of the wild armadillos showed natural mycobacterial infection. Only the armadillo inoculated with material collected from untreated multibacillary leprosy patient was PCR positive. The genomic sequencing revealed 100% identity with M. leprae. According to these preliminary studies, based on the methodology, we may conclude that wild armadillos seem play a role on epidemiology of leprosy in the Middle Western region of the State of São Paulo.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-02-22Bitstream added on 2014-06-13T19:40:58Z : No. of bitstreams: 1 francischetti_i_dr_botfm.pdf: 3036523 bytes, checksum: 16d5951b642a829416e73e1b1c9c6644 (MD5) / O uso da circulação extracorpórea desencadeia uma resposta inflamatória sistêmica, que somada às reações em cadeia relacionadas à isquemia-reperfusão de coração e pulmões pode levar a lesões celulares e até falência de órgãos no pós-operatório de cirurgia cardíaca. Vários estudos foram feitos visando melhor entendimento desses processos inflamatórios associados à circulação extracorpórea. Assim, esta revisão abordará os mecanismos de isquemia-reperfusão cardiopulmonar a ativação da cascata inflamatória por esse processo e o papel dos leucócitos na fisiopatologia destas lesões. Serão consideradas as interações de proteínas imunomoduladoras na resposta leucocitária e o bloqueio das mesmas por meio de filtros biológicos, do uso de anticorpos monoclonais e do estímulo à apoptose. / The use of extracorporeal circulation starts a whole body inflammatory response that when added with a chain reactions related to heart and lung ischemia-reperfusion may cause cellular injuries and organ failures in the cardiac surgery pos-operative period. Many studies were made to achieve better comprehension of the inflammatory process that occur with use of extracorporeal circulation. So, this review discusses the ischemia- reperfusion events, their large activated inflammatory cascade as well as the leukocytes role on the pathophysiology of their associated injuries. The interactions of immunomodulatory proteins with the leukocitary response and their blockade through leukocytes filters, the monoclonal antibody use and the apoptosis stimuli will be approached too.

Orientador: Winston Bonetti Yoshida / Banca: Carlos Eli Piccinato / Banca: Marcone Lima Sobreira / Banca: Ana Terezinha Guilaumon / Banca: Valter Castelli / Resumo: O uso da circulação extracorpórea desencadeia uma resposta inflamatória sistêmica, que somada às reações em cadeia relacionadas à isquemia-reperfusão de coração e pulmões pode levar a lesões celulares e até falência de órgãos no pós-operatório de cirurgia cardíaca. Vários estudos foram feitos visando melhor entendimento desses processos inflamatórios associados à circulação extracorpórea. Assim, esta revisão abordará os mecanismos de isquemia-reperfusão cardiopulmonar a ativação da cascata inflamatória por esse processo e o papel dos leucócitos na fisiopatologia destas lesões. Serão consideradas as interações de proteínas imunomoduladoras na resposta leucocitária e o bloqueio das mesmas por meio de filtros biológicos, do uso de anticorpos monoclonais e do estímulo à apoptose. / Abstract: The use of extracorporeal circulation starts a whole body inflammatory response that when added with a chain reactions related to heart and lung ischemia-reperfusion may cause cellular injuries and organ failures in the cardiac surgery pos-operative period. Many studies were made to achieve better comprehension of the inflammatory process that occur with use of extracorporeal circulation. So, this review discusses the ischemia- reperfusion events, their large activated inflammatory cascade as well as the leukocytes role on the pathophysiology of their associated injuries. The interactions of immunomodulatory proteins with the leukocitary response and their blockade through leukocytes filters, the monoclonal antibody use and the apoptosis stimuli will be approached too. / Doutor