Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Físicas e Matemáticas. Programa de Pós-Graduação em Química / Made available in DSpace on 2013-07-15T23:51:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 225104.pdf: 1611150 bytes, checksum: 8c3eeea7c09987ed908e8712fa9d73b9 (MD5) / A aplicação da técnica de adsorção sólido-líquido usando adsorventes de baixo custo tem mostrado resultados promissores na redução de substâncias coloridas em efluentes têxteis. Neste trabalho usamos o barro branco (BB) como adsorvente e o azul de metileno (AM) como soluto modelo na adsorção. O BB é um subproduto da extração do carvão mineral da Mina Esperança, da Carbonífera Metropolitana, Treviso, SC. Diversas técnicas foram empregadas na caracterização: microscopia eletrônica de varredura (MEV), fluorescência de raios X (FRX), medida do potencial zeta, difratometria de raios X (DRX), análise mineralógica, análise petrográfica convencional, análise termogravimétrica e análise da área superficial (B.E.T). O BB apresenta em sua formação caolinita, esmectita, quartzo, moscovita, pirita e matéria orgânica, com predominância dos compostos SiO2 (49%) e Al2O3 (23,36%). O potencial zeta do BB é negativo em toda faixa de pH. As adsorções ocorreram em frascos termostatizados e as soluções de AM (50 cm3) permaneciam em contato com o BB (1,0 g) sob agitação, a 250 rpm. As equações de Lagergren, Langmuir e Freundlich foram empregadas com bom ajuste dos dados. A velocidade de adsorção diminuiu e a quantidade de AM aumentou com o aumento da concentração inicial. O aumento da temperatura provocou a elevação da quantidade adsorvida e da velocidade de adsorção. A velocidade da adsorção e a quantidade adsorvida foram maiores em pH 11. A capacidade de adsorção do BB é comparável à adsorção da sílica. A energia de ativação, a entalpia, a entropia e a energia livre calculadas mostraram um processo de natureza endotérmica, favorável e espontânea.

Tese (doutorado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências Biológicas. Programa de Pós-Graduação em Farmacologia. / Made available in DSpace on 2012-10-22T06:46:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 231431.pdf: 979113 bytes, checksum: 0b9ba07d0cdee414d632647f87fb9825 (MD5) / A alta produção de óxido nítrico (NO) é um dos principais responsáveis pela hipotensão e hiporeatividade a vasoconstritores, características clínicas do choque séptico. A ativação da enzima guanilato ciclase solúvel (sGC) responde pelos principais efeitos do NO durante esta patologia. Entretanto, há controvérsias a respeito se a utilização de inibidores desta enzima é uma opção efetiva e segura para o tratamento do choque séptico. A incubação in vitro de pulmões, retirados de animais controles ou injetados com LPS 24 h antes, com nitroprussiato de sódio (SNP), gerou um aumento de 20 vezes nos níveis de cGMP. Já em tecidos de animais injetados com LPS 8 h antes, o SNP falhou em aumentar os níveis de cGMP. Os níveis protéicos da sGC foram reduzidos no tempo de 8 h após a injeção de LPS e voltaram a valores normais em ratos injetados com LPS 24 h antes. A reposta vasoconstritora para fenilefrina foi reduzida em torno de 50 % em 8 e 24 h após a injeção de LPS. O azul de metileno (MeB), inibidor da sGC, restaurou a reatividade para fenilefrina em animais injetados com LPS 24 h antes, mas falhou em animais injetados 8 h antes. Para avaliar o efeito do azul de metileno sobre a mortalidade os animais foram submetidos ao procedimento de ligadura e perfuração do ceco (CLP). Quando os animais receberam MeB 8 h após o CLP, a mortalidade dos animais piorou. Entretanto, quando os animais receberam MeB no tempo de 20 h após o procedimento de CLP, ocorreu uma redução no índice de mortalidade. Portanto, o padrão de resposta da enzima sGC durante a sepse pode determinar o sucesso ou a falha do tratamento com seus inibidores. Assim, o azul de metileno pode ser uma estratégia terapêutica útil se administrado em uma janela correta de oportunidade.

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:09Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-04-14. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:26:57Z : No. of bitstreams: 1 000840266_20160429.pdf: 112142 bytes, checksum: f753980f523bb8e5e7108026940280ab (MD5) Bitstreams deleted on 2016-05-04T13:08:27Z: 000840266_20160429.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2016-05-04T13:09:31Z : No. of bitstreams: 1 000840266.pdf: 2388303 bytes, checksum: 0cd278104ebd428e40cc96127a077555 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / A ocorrência de uma variedade de agentes patogênicos resistentes aos antibióticos atuais continua a ser um problema, especialmente quando as infecções bacterianas estão crescendo em biofilme. Neste estudo, propomos o uso da terapia fotodinâmica (TFD) como monoterapia e também associada à antibioticoterapia como um tratamento alternativo. O objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da TFD mediada pelo azul de metileno (AM) em Staphylococcus aureus (ATCC 25923) e Escherichia coli (ATCC 25922), como biofilme e em fase planctônica. Diferentes concentrações de fotossensibilizador (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25 μg/mL) e fluência (2,8; 5,6; 11.2 22,4J/cm²) foram testadas. Também realizamos experimentos que avaliaram o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica e o antibiótico ciprofloxacina. Os efeitos bactericidas da TFD como monoterapia não foram estatisticamente aumentados com a concentração de fotossensibilizador, e bactérias em biofilmes foram menos afetadas que as da fase planctônicas. Entretanto, o efeito sinérgico da terapia fotodinâmica seguida de ciprofloxacina no biofilme aumentou a redução bacteriana. Em biofilme para S. aureus, utilizando 50 ug/mL de AM, irradiação 22,4 J/cm² e a concentração de 15.625 ug/mL de antibiótico, tivemos uma redução de 61,80%. Para E. coli, houve uma erradicação bacteriana em todas as concentrações testadas na TFD combinada com antibiótico, tanto a irradiação de 11,2 J/cm², como a irradiação 22,4 J/cm². O crescimento bacteriano foi observado apenas na concentração mais baixa do antibiótico testada, de 0,125 ug/mL, em concentrações de 50 e 25 ug/mL de AM. / The occurrence of a variety of pathogens resistant to current antibiotics remains the major problem especially when bacterial infections are growing in biofilm. In this study, we propose the use of photodynamic therapy (PDT) as monotherapy and also associated with antibiotic therapy as an alternative treatment. The aim of this study was to analyze the effects of PDT mediated by methylene blue (MB) on Staphylococcus aureus (ATCC 25923) and Escherichia coli (ATCC 25922) as biofilm and planktonic phase. Different concentrations of photosensitizer (400; 200; 100; 50; 25; 12,5; 6,25g/mL), and fluency of 2.8; 5.6; 11.2 22,4J/cm2 were tested. We also carried out experiments that evaluated the synergistic effect of photodynamic therapy and antibiotic ciprofloxacin. The bactericidal effects with PDT as monotherapy were not statistically increased with the concentration of photosensitizer and bacteria in biofilms were less than affect in the planktonic phase. Although, the synergistic effect of photodynamic therapy on biofilms followed by ciprofloxacin amplified the bacterial reduction. In biofilm for S. aureus, using 50 μg/ml MB, irradiation 22,4 J/cm² and the concentration of 15,625 μg/mL of antibiotic, got a reduction of 61,80%. For E. coli, there was a bacterial eradication at all concentrations tested in PDT combined with antibiotic, both the irradiation 11,2 J/cm² as the irradiation 22,4 J/cm². Bacterial growth was observed only in the lowest tested concentration of the antibiotic, 0,125 μg/mL, at concentrations of 50 and 25 μg/mL MB.

A casca de pinhão (Araucaria angustifolia), é um resíduo alimentar, que foi usada in natura (PW) e carbonizado (C-PW), como adsorvente de baixo custo para a remoção do corante azul de metileno (MB) de soluções aquosas. O PW foi tratado quimicamente com ácido sulfúrico produzindo um material carbonizado e não ativado (C-PW). Tanto PW como C-PW foram testados como adsorventes de baixo custo para a remoção de MB de efluentes aquosos. Foi observado um aumento notável na área específica, volume médio dos poros e diâmetro médio dos poros do C-PW quando comparado a PW. Os efeitos do tempo de agitação, dosagem do adsorvente e do pH sobre a capacidade de adsorção foram estudados. Na região de pH básico (pH 8,5) a adsorção do MB foi favorável. O tempo de contato necessário para se atingir o equilíbrio foi de 6 e 4 horas a 25 °C, utilizando-se PW e C-PW como adsorventes, respectivamente. Baseado em valores de função de erro (Ferror), os dados cinéticos foram melhores ajustados para o modelo cinético de ordem fracionária quando comparado aos modelos cinéticos de pseudo-primeira ordem, pseudo-segunda ordem e quimissorção. Os dados de equilíbrio foram ajustados para os modelos de isoterma de Langmuir, Freundlich, Sips e Redlich-Peterson. Para o corante MB os dados de equilíbrio foram melhores ajustados para o modelo de isoterma de Sips utilizando PW e C-PW como adsorventes. / The Brazilian pine-fruit shell (Araucaria angustifolia) is a food residue, which was used in natural and carbonized forms, as low-cost adsorbents for the removal of methylene blue (MB) from aqueous solutions. Chemical treatment of Brazilian pine-fruit shell (PW), with sulfuric acid produced a non-activated carbonaceous material (C-PW). Both PW and C-PW were tested as low-cost adsorbents for the removal of MB from aqueous effluents. It was observed that C-PW leaded to a remarkable increase in the specific surface area, average porous volume, and average porous diameter of the adsorbent when compared to PW. The effects of shaking time, adsorbent dosage and pH on adsorption capacity were studied. In basic pH region (pH 8.5) the adsorption of MB was favorable. The contact time required to obtain the equilibrium was 6 and 4 hours at 25°C, using PW and C-PW as adsorbents, respectively. Based on error function values (Ferror) the kinetic data were better fitted to fractionary-order kinetic model when compared to pseudo-first order, pseudo-second order, and chemisorption kinetic models. The equilibrium data were fitted to Langmuir, Freundlich, Sips and Redlich-Peterson isotherm models. For MB dye the equilibrium data were better fitted to the Sips isotherm model using PW and C-PW as adsorbents.

Com o objetivo de avaliar a influência do hidróxido de cálcio e do EDTA na marcação da infiltração marginal de corante azul de metileno a 2% em canais radiculares obturados pela técnica da condensação lateral, foram empregados 188 dentes incisivos centrais superiores humanos extraídos. Após serem instrumentados e impermeabilizados, foram divididos em 3 grupos de 60 elementos cada, sendo que outros 8 dentes foram utilizados como controle. Cada grupo foi dividido em 2 subgrupos, os quais, foram subdivididos em dois, totalizando 12 subgrupos com 15 elementos cada, dessa forma descritos: Grupo I – obturação imediata; em 30 dentes foi aplicado EDTA por 3 minutos antes da obturação; em 30 dentes a obturação foi feita sem a aplicação do EDTA; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e 30 obturados com pasta de hidróxido de cálcio; Grupo II – aplicação de EDTA por 3 minutos e preenchimento de todos os canais com pasta de hidróxido de cálcio (curativo); em 30 dentes o EDTA foi reaplicado após a remoção do curativo, e nos outros 30 dentes não; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e 30 obturados com pasta de hidróxido de cálcio; Grupo III – após a instrumentação, os canais foram preenchidos com pasta de hidróxido de cálcio (curativo) sem a aplicação prévia do EDTA; após a remoção do curativo, em 30 dentes o EDTA foi aplicado e em outros 30 não; 30 dentes foram obturados com cimento de óxido de zinco e eugenol e outros 30 com pasta de hidróxido de cálcio. Posteriormente à imersão em azul de metileno a 2% por 72 horas, os dentes foram seccionados longitudinalmente e as infiltrações mensuradas com o emprego de um microscópio óptico munido de uma ocular micrometrada. Após serem empregados os testes estatísticos pertinentes, foram obtidas as seguintes conclusões: - em relação ao hidróxido de cálcio: como curativo e pasta obturadora, interfere estatisticamente na marcação da infiltração, diminuindo a sua magnitude; em relação ao EDTA: o seu emprego prévio ao curativo de hidróxido de cálcio, melhora o selamento das obturações com óxido de zinco e eugenol; o emprego antes e após o curativo, promove um aumento da infiltração em canais obturados com óxido de zinco e eugenol; em canais obturados com pasta de hidróxido de cálcio, o seu emprego não promove interferências estatisticamente significantes nos resultados. / With the objective of evaluate the influence of calcium hydroxide and EDTA in marginal infiltration of metilen blue 2% in root canals obturated by the laterally condensed technique, were used 188 central superior incisor human teeth. After they were instrumented and impatented, the 188 teeth were divided in 3 groups of 60 teeth each. Each group was divided in 2 subgroups and these were divided again in 2, resulting 12 subgroups with 15 teeth each, this way discribed: Group I: immediate obturation; in 30 teeth was applied EDTA for 3 minutes before obturation; and in the other 30 the obturation was done without application of EDTA. 30 teeth were obturated with zinc oxide and eugenol ciment and 30 were obturated with calcium hydroxide paste; Group II: application of EDTA for 3 minutes and all root canals were filled with calcium hydroxide paste (bandage). In 30 teeth the EDTA was applied again after removing the bandage, but this was not done in the other 30; 30 teeth were obturated with calcium hydroxide paste; Group III: the root canals were filled with calcium hydroxide paste (bandage), without a previous application of EDTA, after they were instrumented. After removing the bandage, the EDTA was applied in 30 teeth one more time but not the other 30; 30 teeth were obturated with zinc oxide and eugenol ciment and the other 30 with calcium hydroxide paste. After the immersion in metilen blue 2% for 72 hours, all the 180 teeth were longitudinally sectionalized and the infiltrations were measured using a stereomicroscope and a micrometric ocular. Statistics tests were done and according with those, the following conclusions were obtained: - calcium hydroxide: As a bandage and as an obturation paste, interferes in the infiltration; its use as a bandage, before obturation, with zinc oxide and eugenol ciment, improves the sealer quality of this last one; - EDTA: Its use before the calcium hydroxide bandage, improves obturation sealings with zinc oxide and eugenol ciment. It use after and before the bandage promotis an infiltration increasing in obturated root canals with zinc oxide and eugenol ciment; in root canals obturated with calcium hydroxide paste, the use of EDTA does not promote significative interferences in the result.

Submitted by Luiz Felipe Barbosa (luiz.fbabreu2@ufpe.br) on 2015-04-17T14:09:46Z No. of bitstreams: 2 Tese Artur Felipe Barbosa.pdf: 10488970 bytes, checksum: d5aacb1a88e275b87360f2bac427a18f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-17T14:09:46Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Tese Artur Felipe Barbosa.pdf: 10488970 bytes, checksum: d5aacb1a88e275b87360f2bac427a18f (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013-11-28 / A doença de Chagas e a Leishmaniose cutânea são duas doenças de grande relevância a saúde pública mundial. Acredita-se que as duas doenças juntas infectam aproximadamente 20 milhões de pessoas atualmente, em mais de 80 países. Trypanosoma cruzi e Leishmania braziliensis são os agentes etiológicos da doença de Chagas e Leishmaniose cutânea, respectivamente, e fazem parte da família dos Tripanossomatídeos. De acordo com a Organização Mundial de Saúde, são classificadas como Doenças Tropicais Negligenciada pela carência de tratamentos disponíveis, sendo os disponíveis repletos de efeitos colaterais, pelos poucos financiamentos de pesquisas para diagnóstico e tratamento das mesmas. Atualmente, estas doenças contam com medicamentos comercializados a mais de 40 anos, os quais já não são tão eficazes em várias situações, além de serem tóxicos e alguns necessitarem de uma intervenção hospitalar. A pesquisa por novos tratamentos e terapias são incentivados pela Organização Mundial de Saúde. A fotoquimioterapia antiparasitária é uma técnica que baseia-se na administração de uma substância sensível a luz (fotossensibilizador) e em seguida, a irradiação desta substância por uma fonte de luz (Laser ou LED), para que haja excitação da molécula fotossensibilizadora e esta reaja com o parasito a ser eliminado através da formação de Espécies Reativas de Oxigênio (EROs). Os derivados fenotiazínicos (azul de metileno e azul de toluidina) apresentaram-se como ótimos candidatos a moléculas fotossensibilizantes. O objetivo deste trabalho foi avaliar a capacidade tripanocida e leishmanicida da Fotoquimioterapia Antiparasitária, utilizando os derivados fenotiazínicos azul de metileno e azul de toluidina, como moléculas fotossensibilizantes, identificando as suas máximas concentrações atóxicas e a melhor configuração do laser excitante destas moléculas. Para avaliar a citotoxicidade dos compostos foram realizados três experimentos distintos (incorporação de timidina tritiada, ensaio com o cristal violeta e através do Alamarblue). Posteriormente foi realizado teste de atividade tripanocida e leishmanicida destes composto. Testou-se a ação isolada dos compostos (fase escura) contra as diversas formas evolutivas do T. cruzi e do L. braziliensis bem como com os compostos sendo excitados pelo laser (fase clara). Após estes experimentos constatou-se uma boa ação da Fotoquimioterapia Antiparasitária utilizando os derivados fenotiazínicos como fotossensibilizadores. Os resultados de citotoxicidade pelos três métodos testados, indicaram que a máxima concentração atóxica dos compostos foi equivalente a 20 μg/ml ou 25 μM. O laser em sua melhor configuração (λ = 660 nm, 40 mW, 4.2 J/cm2, CW) ocasionou modificações morfo-estruturais nas formas epimastigotas de T. cruzi, porém não apresentou estimulação ou inibição na proliferação parasitária. Foi constado apenas uma espécie de resistência dos macrófagos irradiados à infecção por amastigotas de T. cruzi. Para os T. cruzi o composto Azul de Metileno apresentou os melhores resultados como fotossensibilizador associado ao laser, com um IC50 (0,4607 μM) bem menor que o do fármaco padrão de tratamentos que é o benzonidazol (IC50 = 3,8 μM) e contra o L. braziliensis o composto Azul de Toluidina apresentou os melhores resultados (10 μg/ml) associado ao laser. Desta forma conclui-se que a Fotoquimioterapia Antiparasitária utilizando os derivados fenotiazínicos Azul de Metileno e Azul de Toluidina como fotossensibilizadores foi eficaz nos ensaios in vitro e revela-se promissora para ensaios clínicos contra a doença de Chagas e a Leishmaniose cutânea.

Submitted by Alice Araujo (alice.caraujo@ufpe.br) on 2018-05-03T22:43:49Z No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Luiza Beatriz de Medeiros Santos.pdf: 1572136 bytes, checksum: 8355a6d8912ee942f0bf2ede8ac0ebb0 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-05-03T22:43:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DISSERTAÇÃO Luiza Beatriz de Medeiros Santos.pdf: 1572136 bytes, checksum: 8355a6d8912ee942f0bf2ede8ac0ebb0 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / CAPES / A Terapia Fotodinâmica (TFD) é uma alternativa de tratamento para o câncer e para infecções microbianas e parasitárias. Na TFD, a luz, o oxigênio e um agente fotossensibilizador (FS) são combinados produzindo espécies reativas capazes de induzir danos e morte celular. Como exemplos de substâncias FS tem-se as zincoporfirinas e o azul de metileno (AM) que demonstram um grande potencial para TFD, sendo objetos deste estudo. Nesse contexto, este trabalho teve como objetivo preparar um sistema de aplicação tópica capaz de carrear os FS (Zn(II) meso-tetrakis (N-etilpiridinio-2-il) porfirina - ZnTE-2-PyP4+ e azul de metileno) para uso em terapia fotodinâmica e avaliar a capacidade de geração de espécies reativas de oxigênio (ROS) antes e após a incorporação, como também a caracterização do sistema através de análise de pH, espalhabilidade e viscosidade. Para isso, foi utilizado o gel Carbopol, comumente empregado em preparações farmacêuticas. A detecção de ROS dos FS foi então avaliada antes e após incorporação ao gel, através do método químico indireto, bem como através de caracterização por espectroscopia de absorção e emissão eletrônica. Foi observado que a ZnTE-2-PyP4+ e o azul de metileno, ainda em solução (5 µM), apresentaram boa resposta na produção de espécies reativas de oxigênio (36 e 52%, respectivamente). Ao analisar a formulação em gel contendo ZnTE-2-PyP4+, detectou-se um aumento em torno de 6% na produção de ROS se comparado à solução, enquanto que, para o gel contendo AM, houve redução em torno de 25% na geração de ROS e os resultados são discutidos em termos da interação dos FS com a estrutura do polímero formador do gel. O conjunto de resultados evidencia que existe um potencial para aplicação destes FS em gel carbopol para uso em TFD, devido à capacidade de geração de ROS. Por outro lado, como o mecanismo fotodinâmico envolve não somente a sinergia da interação da luz, do oxigênio e propriedades do fotossensibilizador, mas também o local de aplicação da formulação, mais estudos são necessários para se avaliar a aplicabilidade desses sistemas no tratamento fotodinâmico. / Photodynamic Therapy (PDT) is an alternative treatment for cancer and microbial and parasitic infections. In PDT, light, oxygen and a photosensitizer agent (PS) are combined producing reactive species capable of inducing damage and cell death. As examples of substances PS there are zinc-porphyrins and the methylene blue (MB) which demonstrate a great potential for PDT. In this context, this study aimed to prepare a topical application system capable of carrying the PS (Zn(II) meso-tetrakis (N-ethylpyridinium-2-yl) porphyrin ZnTE-2-PyP4+ - and Methylene Blue) for use in photodynamic therapy and evaluate the generation capacity of reactive oxygen species (ROS) before and after the incorporation, as well as the characterization of system by electronic absorption and emission spectroscopy, analysis of pH, viscosity and spreadability. Carbopol gel a commonly employed pharmaceutical preparations in was used for the semisolid formulation. The PS were then evaluated before and after incorporation into the gel by indirect chemical method for ROS detection and characterization of optical properties of the final systems. It was observed that aqueous solutions of 5 µM ZnTE-2-PyP4+ or MB showed a good response in the production of reactive oxygen species (36 and 52% respectively). The gel formulations containing ZnTE-2-PyP4+ displayed 6% increase in the ROS production when compared to the solution. On the other hand, the gel containing MB, showed a 25% reduction in the generation of ROS and the overall results are discussed in terms of the interaction of the FS with the polymer forming gel. The results show that there is a potential for the application of these PS in carbopol gel for use in PDT due to the ability of ROS generation. On the other hand, the photodynamic mechanism involves not only the synergistic interaction of light, oxygen and photosensitizing properties but also the application site of the formulation, and therefore, more studies are required to evaluate the applicability of these systems in topic photodynamic treatment.

Submitted by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T15:21:22Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Jéssica C. S. Gualberto.pdf: 1960791 bytes, checksum: 586705df146609482d0a33addc41d3a8 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2018-03-06T15:21:35Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Jéssica C. S. Gualberto.pdf: 1960791 bytes, checksum: 586705df146609482d0a33addc41d3a8 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-06T15:21:35Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) Dissertação_Jéssica C. S. Gualberto.pdf: 1960791 bytes, checksum: 586705df146609482d0a33addc41d3a8 (MD5) Previous issue date: 2017-03-07 / FAPEAM - Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado do Amazonas / ZnO nanoparticles were synthesized using the Pechini method and studied the effect of the annealing temperature in order to evaluate their photocatalytic activity. The structural and morphological properties of the ZnO samples were characterized by thermogravimetric (TG) analysis, X-ray diffraction (XRD), scanning electron microscopy (SEM) and diffuse reflectance spectroscopy (DRS). The XRD technique obtained the wurtzite hexagonal crystal structure and the presence of a single phase of ZnO for all samples. The SEM revealed that the morphologies of the samples change from near-spherical to nanorods with annealing the temperature of calcination. Photocatalysis tests were based on the degradation of the methylene blue (AM) dye from ZnO nanoparticles under the natural sunlight and artificial UV light. ZnO nanoparticles calcined at 400 oC degraded about 93% of the methylene blue dye (AM) in 120 minutes of solar irradiation, but the adsorption test showed a great deal of relevance in the discussion of the data. ZnO calcined at 800oC degraded almost 100% of the dye in only 15 minutes of UV irradiation. The study of the properties of ZnO was important to understand possible mechanisms of degradation of the AM and to know the effect of the structure of the semiconductor in processes of photocatalysis. / Nanopartículas de ZnO foram sintetizadas utilizando o método de Pechini e estudou-se o efeito da variação de temperatura na calcinação das amostras em 400 oC e 800 oC com o intuito de avaliar a sua atividade fotocatalítica. As propriedades estruturais e morfológicas das amostras de ZnO foram caracterizadas por meio de análise termogravimétrica (TG), difração de raio-x (DRX), microscopia eletrônica de varredura (MEV) e espectroscopia de refletância difusa (DRS). A técnica de DRX comprovou que todas as amostras obtiveram estrutura cristalina hexagonal wurtzita e a presença de uma única fase de ZnO. Através do MEV observou-se que as morfologias das amostras mudam de quase-esféricas para nanobastões conforme o aumento na temperatura de calcinação. Os ensaios de fotocatálise basearam-se na degradação do corante azul de metileno (AM) a partir de nanoparticulas de ZnO e sob o efeito de luz solar natural e luz UV artificial As nanopartículas de ZnO calcinadas a 400 oC degradaram cerca de 93% do corante azul de metileno (AM) em 120 minutos de irradiação solar, porém o teste de adsorção mostrou bastante relevância na discussão dos dados. O ZnO calcinado a 800oC degradou quase 100% do corante em apenas 15 minutos de irradiação UV.O estudo das propriedades do ZnO foram importantes para entender possíveis mecanismos de degradação do AM e conhecer o efeito da estrutura do semicondutor em processos de fotocatálise.

Orientador: Rogério Pinto Mota / Resumo: Polímeros a plasma são uma classe de materiais que possuem aplicações em diversos tipos de indústrias, como biomédica, alimentícia, embalagens, eletrônica, farmaceutica, entre outras. Esses materiais possuem características que os diferem dos polímeros convencionais, como uma estrutura química ordenada aleatoriamente, boa adesão a diferentes substratos e possuem cadeias muito entrelaçadas. Estes polímeros podem ser utilizados para a função de drug delivery, podem ser carregados com um medicamento e liberá-lo quando in vivo, este conceito de drug delivery permite a realização de um tratamento localizado e com uma dose mais segura de medicamento. O processo de polimerização a plasma também tem características que o difere da polimerização convencional, ele é capaz de realizar reações que demandam muita energia e não poderiam acontecer por química convencional, os parâmetros aplicados podem ser ajustados para customizar até certo ponto o material obtido e não gera resíduos. Inicialmente a polimerização a plasma era realizada em baixa pressão, mais recentemente a alternativa de realizar o processo em pressão atmosférica vêm ganhando destaque por ser relativamente mais barata e pelas características diferentes da descarga e dos polímeros a plasma resultantes. Existem muitas configurações de fontes de plasma em pressão atmosférico, dentre elas os jatos de plasma (APPJs), nestas fontes o plasma é gerado por descargas DBD ou corona no interior de tubos ou cavidades e é expelida para ... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

O adenocarcinoma de ducto pancreático (PDAC) é a quarta causa de morte em decorrência de neoplasias nos países ocidentais. Atualmente, a cirurgia ressectiva é a única possibilidade de cura para a doença, porém, a recidiva tumoral acontece em menos de um ano após a intervenção cirúrgica, mesmo com a quimioterapia adjuvante. A terapia fotodinâmica (PDT) é uma alternativa promissora no tratamento do câncer. No entanto, pouco se sabe sobre o uso da PDT em tumores pancreáticos. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência da PDT com o azul de metileno (MB) como fotossensibilizador (MB-PDT) em induzir a morte de linhagens de PDAC humanas (AsPC-1, Panc-1, MIAPaCa-2 e BxPC-3) e estudar a contribuição de vias de necrose regulada nos efeitos citotóxicos da terapia sobre estes modelos. Os resultados obtidos mostraram que a MB-PDT foi capaz de induzir a morte massiva das células de PDAC. Além disso, eles indicaram que há dois perfis de susceptibilidade entre as quatro linhagens estudadas quando submetidas a MBPDT com 4,5 J/cm2 de energia e 6min de irradiação. De acordo com os dados apresentados, a diferença nas sensibilidades das linhagens à terapia não está associada à diferenças na capacidade de incorporação do MB ou na localização sub-celular do fotossensibilizador nas diferentes células, uma vez que a localização é, predominantemente, lisossomal em todas elas. Adicionalmente, mostrou-se que as linhagens menos susceptíveis ao tratamento, MIAPaCa-2 e Panc-1, apresentam níveis significativamente menores de RIPK3 e MLKL, dois dos componentes do necrossomo, essenciais para a execução da necroptose. Além disso, foi visto que a MB-PDT induz um aumento de fosforilação de MLKL em AsPC-1, demonstrando a ativação da necroptose após a terapia nestas células, mas não em MIAPaCa-2 (menos responsiva à terapia com 4,5 J/cm2 deenergia e 6min de tempo de irradiação). Ainda, a inibição da via de sinalização necroptótica diminuiu significativamente as porcentagens de morte das células mais susceptíveis (BxPC-3 e AsPC-1), não alterando a resposta de Panc-1 e MIAPaCa-2, corroborando a ativação e importância da necroptose para a citotoxicidade da MB-PDT. Finalmente, neste trabalho foi mostrado que o aumento do tempo de irradiação, mantendo-se a quantidade total de energia aplicada no tratamento, melhora a eficiência da MB-PDT em induzir a morte das células que apresentam limitações para executar a necroptose, sugerindo que mais de uma via de morte esteja sendo ativada após a terapia e que o tempo de irradiação atuaria modulando esta ativação. Complementarmente, foi mostrado que os tempos maiores de irradiação aumentam o estresse oxidativo intracelular que é acompanhado por uma diminuição significativa do conteúdo intracelular de glutationa reduzida (GSH), indicando, preliminarmente, que a ferroptose pode estar sendo acionada após os protocolos mais longos de irradiação. Coletivamente, os resultados apresentados neste trabalho confirmam a eficiência da MB-PDT no tratamento de diferentes linhagens de PDAC, indicando que a necroptose está sendo ativada e contribuindo para a citotoxicidade da terapia sobre as células que não apresentam resistência à esta via de morte. Ainda, eles demonstram que o aumento do tempo de irradiação pode transpor a barreira de resistência de algumas linhagens à terapia, provavelmente por induzir a ativação de outras vias de necrose regulada, mostrando a importância da otimização do protocolo de tratamento no aumento da eficiência da MB-PDT sobre os tumores de pâncreas. Finalmente, os resultados confirmam a MB-PDT como alternativa eficaz no tratamento do PDAC, apresentando um amplo espectro de atuação sobre subtipos tumorais resistentes à vias clássicas de morte celular, uma característica importante no contexto de uma terapia anti-cancer. / Pancreatic ductal adenocarcinoma (PDAC) is the fourth leading cause of death due to neoplasms in western countries. Currently, resective surgery is the only therapetical approach to cure this disease, but tumor´s recurrence occurs less than one year after the surgery, even with adjuvant chemotherapy. Photodynamic therapy (PDT) is a promising alternative for the cancer treatment. However, the efficacy of PDT to treat pancreatic tumors as well as the mechanisms involved in the induction of tumorigenic cell death remain unclear. For this purpose, in this study, we set out to evaluate the efficacy of PDT using methylene blue (MB) as a photosensitizer (MB-PDT), in inducing death of human PDAC derived cell lines (AsPC-1, Panc-1, MIAPaCa-2 and BxPC-3) and to deeper investigate the contribution of necroptosis to the cytotoxic effects of the therapy. We observed that MB-PDT was able to induce massive death of PDAC cells. Moreover, our results indicated that upon MB-PDT (4.5 J/cm2 energy and 6min of irradiation time), there were two susceptibility profiles among the four cell lines studied. Data also showed that this differential profile of cell response was neither associated with the differences in the MB incorporation capacity nor with the subcellular location of the photosensitizer, since the localization was predominantly lysosomal in all of tested cell lines. In addition, less susceptible cells, MIAPaCa-2 and Panc-1, showed significantly lower levels of RIPK3 and MLKL, two of the necrosome components, essential for triggering necroptosis. Furthermore, while MB-PDT (4.5 J/cm2 and 6min of irradiation) has been able to increase MLKL´s phosphorylation levels, an essential step in necroptosis induction, in AsPC-1cells, less responsive MIAPaCa-2 cells presented no variations on the phosphorylation state of this pseudokinase. Moreover, pharmacological inhibition of the necroptotic signaling pathway significantly decreased cell death percentages of the most susceptible cells (BxPC-3 andAsPC-1), without altering the response of Panc-1 and MIAPaCa-2, corroborating that activation of necroptosis was strongly involved in the cytotoxicity of MB-PDT. Finally, this work showed that increasing the irradiation time improved the efficacy of MB-PDT in killing cells which display limitations to perform necroptosis, suggesting that the irradiation time would be modulating the degree of oxidative stress generated and this stimuli would in turn, be responsible for triggering other regulated cell death pathways in a RIKP3 and MLKL independent way. Indeed, this increase in oxidative stress was accompanied by a significant decrease in GSH, a global indicatior of less antioxidant cell capacity, preliminarily pointing at the induction of ferroptosis by longer irradiation protocols. In summary, we demonstrated that MB-PDT is able to induce cell death in different PDAC cell lines and that different regulated cell death mechanisms are being activated upon MB-PDT induction. Furthermore, it was demonstrated that increased irradiation time may overcome the resistance barrier of some cell lines, probably inducing the activation of other regulated cell death pathways, showing the importance of optimizing the irradiation protocol in order to maximize the efficacy of the therapy. Finally, our observations point MB-PDT as an alternative and effective therapy for pancreatic cancer treatment, displaying a broad-spectrum action on tumors displaying different resistance mechanisms to classic cell death pathways, a desired property for improving an anticancer therapy.