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Pre-mRNA splicing by the spliceosome requires the precise and regulated efforts of the five snRNAs (U1, U2, U4, U5, and U6) and numerous associated proteins. Following assembly and activation of the spliceosome, two consecutive reactions result in intron removal and exon ligation from pre-mRNA substrates. It has been established that several members of the DExH/D-box family of helicases act transiently on the spliceosome prior to the chemical steps to authorize the successive reactions by hydrolyzing ATP and consequently inducing structural rearrangements. While it has been suggested that these changes produced in the structure of the spliceosome result in optimal positioning of the reactive species, the mechanisms and products of these reorganizations remain uncharacterized. The work presented here describes the genetic strategy for accumulating and purifying spliceosomes arrested in vivo, during the catalytic steps of the splicing cycle. Using these complexes, we have defined the components required to proceed through the first and second steps of splicing, in addition to the factors required for the release of the spliced message. Analysis of these functional, synchronized particles has also allowed us to define a function for Prp2p in initiating the first step of pre-mRNA splicing. Our data suggest that Prp2p may act in an ATP-independent manner to remodel the spliceosome prior to using its ATPase function to displace the SF3 complex. We propose that the SF3 complex, in addition to its role in identification of the branchpoint, also acts to sequester the reactive 2’OH of the branchpoint adenosine to prevent premature reactivity. Following the two catalytic steps of the splicing cycle, the spliceosome must disassemble and recycle its snRNPs for further rounds of splicing. The essential U6 snRNP component Prp24p, mediates one of the early assembly events - the annealing between the U4 and U6 snRNAs. We have discovered that although Prp24p is essential for viability, its function(s) can be bypassed by overexpressing the U6 snRNA. Additionally, biochemical characterizations of various forms of the U4/U6 snRNP provide evidence that Prp24p must be released before other components of the U4/U6 snRNP are permitted to interact and facilitate tri-snRNP formation. / text

Utifrån temat Hållbart Samhälle och aspekten Socialt Hållbart Samhälle, är denna uppsats en berättelse om ett examensarbete som tagit sig an leken i förhållande till funktionsnedsättningen autism hos barn och där frukten av examensarbetet blivit en leksaksprodukt. Med hjärta, hjärna och engagemang har jag undersökt utifrån mina användare hur jag kan skapa en artefakt med potential att ge mina användare förutsättningar som de behöver för att leka, samspela och kommunicera. Men även andra barns behov i lek, samspel och kommunikation har varit viktiga att tillgodose då målet har varit att möjliggöra det sociala samspelet mellan båda dessa parter. Med andra barn menas barn oavsett funktionsnedsättning eller ej. Målet har därmed även varit att formge en leksaksprodukt som möter dessa två parters behov, såväl till form som funktion. Visuellt ska leksaksprodukten inte ge något uttryck av hjälpmedel, utan ska snarare vara en leksak som dolt kan tillgodose behoven hos barn med autism. Examensarbetet har även varit en möjlighet för mig som designstudent att få lära mig om hur företag arbetar med design för barn, vilket har lett mig till företaget BRIO AB som givit sina erfarenheter samt åsikter till leksaksprodukten. Leksaksprodukten har även på så sätt haft utgångspunkten i vad jag som designer tror skulle kunna passa in i BRIOs sortiment av leksaker. Som designer har jag ambitionen att arbeta med lekfull och hållbar design för barn. Barn med autism var ett steg för mig att ge mitt område större komplexitet för att ge mig en möjlighet att utvecklas. / Kiwi Bird Box - Leksaker för alla

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La floraison, une des étapes cruciales du cycle de vie des plantes, est influencée par les facteurs environnementaux tels que la température et la durée d'ensoleillement. La majorité des espèces végétales évoluant en zones tempérées ont fort avantageusement développé des mécanismes d'adaptation leur permettant de mieux synchroniser leur développement en condition de basses températures et de courte durée d'ensoleillement. En réponse au stress causé par une longue exposition aux basses températures, les plantes induisent un processus nommé vernalisation qui consiste à induire une floraison précoce chez les plantes sensibles. Cette capacité à promouvoir la floraison peut également être acquise selon la sensibilité de chaque plante par une longue ou courte exposition de lumière (photopériode). Ces mécanismes d'adaptation favorisent une floraison au moment opportun et assurent une bonne reproduction. Chez Arabidopsis, des analyses génétiques et moléculaires ont démontré que l'expression de nombreux gènes était modulée en réponse aux variations de basses températures et de lumière afin de bien synchroniser la transition florale. La plupart des gènes ayant un rôle majeur dans la régulation de la floraison en réponse aux variations de températures et de lumière code pour des protéines conservées chez les eucaryotes et impliquées dans divers aspects du développement et la reproduction des espèces: les facteurs de transcription de type MADS-box. D'ailleurs, toutes les voies de régulation de la floraison chez Arabidopsis convergent vers un répresseur central, le gène FLC (Flowering locus C) qui code pour un facteur de transcription de type MADS-box. Chez les céréales, aucun homologue de FLC n'est, à ce jour, identifié et très peu de gènes MADS-box ont une fonction connue. Afin de pousser la caractérisation des gènes MADS-box chez les céréales et d'élucider leurs rôles lors de la régulation de la floraison, l'identification de cette famille de gènes a été entreprise chez le blé. Le blé hexaploïde a été choisi comme modèle d'étude à cause de sa grande variabilité de réponses face aux stress, ce qui lui confère une grande résistance et aptitude à pousser dans des zones où le climat et les saisons sont variables. De plus. il est plus intéressant au niveau agronomique, nutritif et économique qu'Arabidopsis. Par contre, ce choix s'accompagne d'un grand défi du fait de la taille et de la complexité du génome du blé. mais également des caractéristiques structurales et évolutives de la famille de gènes MADS-box. Pour ces raisons, une approche génomique combinant des outils bioinformatiques et des études moléculaires a été utilisée. L'identification d'ADNc de MADS-box chez le blé hexaploïde, par recherche de bases de données, par PCR ou criblage de banques, montre que plus d'une cinquantaine de facteurs MADS-box sont codés par ses génomes. En général, ces facteurs présentent une grande conservation de structures et de fonctions durant l'évolution chez les angiospermes. Une analyse moléculaire sommaire de membres de la famille MADS-box, en réponse à la vernalisation et à la photopériode, a permis d'identifier et d'associer un de ces facteurs, nommé TaVRT-2, à la régulation de la floraison. En réponse à la vernalisation, l'ARNm de TaVRT-2 s'accumule seulement durant la phase végétative du blé d'hiver et ce profil est inversement proportionnel à celui du gène majeur de vernalisation VRNl/TaVRT-l. Ce résultat suggérait que TaVRT-2 pouvait retarder la transition florale en réprimant l'expression de TaVRT-l ou bien que Ta VRT-I induisait la floraison après la répression de TaVRT-2. Or, les études génétiques indiquaient que l'accumulation de TaVRT-l était un des événements les plus tardifs dans l'induction de la floraison. De plus, les études d'interactions protéiques indiquent que TaVRT-2 est capable de former des hétérodimères, surtout avec TaVRT-l. Enfin, la présence au niveau de son promoteur d'un élément cis spécifique au MADS-box suggérait plutôt que TaVRT-2 régule négativement l'expression de TaVRT-l. Toutes ces données soutenaient l'hypothèse que TaVRT-2 est un régulateur négatif de TaVRT-l et donc de la transition florale chez le blé. Grâce à des études de liaisons in vitro et par expression transitoire in vivo, il est démontré que la protéine TaVRT-2 réprime la transcription du gène TaVRT-l en se liant directement sur le promoteur et probablement en recrutant d'autres facteurs importants. Des études chez des plantes transgéniques confirment que TaVRT-2 est capable de retarder la floraison et qu'il est impliqué dans la voie autonome de régulation de la floraison. Le clonage des gènes MADS-box de blé a permis de voir que les acteurs majeurs impliqués dans la régulation de la vernalisation sont différents entre espèces monocotylédones et dicotylédones. En ce sens, l'identification de TaVRT-2 constitue une contribution importante dans l'étude des mécanismes de régulation de la floraison. L'implication de TaVRT-2 dans les voies de régulation de la floraison (vernalisation, photopériode et autonome) démontre qu'il est un répresseur central de la floraison chez les céréales à l'instar de FLC chez Arabidopsis. Ces résultats montrent à quel point une meilleure compréhension des mécanismes d'adaptation des plantes face aux changements environnementaux peut contribuer à une bonne synchronisation de la floraison et du développement chez les céréales. En perspective, cette étude offre des avenues intéressantes sur le plan de l'amélioration des stratégies agricultrices et de l'augmentation de la productivité céréalière. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Blé hexaploïde, Facteurs de transcription, MADS-box, Floraison, Vernalisation, Photopériode.

Transverse load distribution behavior amongst bridge girders is influenced by many parameters including girder material properties, spacing, skew, deck design, and stiffening element interactions. In order to simply and conservatively approximate the bridge superstructure load distribution between girders, the American Association of State Highway and Transportation Officials (AASHTO) LRFD Bridge Design Specifications contain load distribution factor (LDF) equations for many common bridge types. The Texas Department of Transportation (TxDOT) had recently developed a new design for bridge superstructures that utilizes a spread configuration of prestressed concrete slab beams. AASHTO does not contain LDFs for this type of bridge so the load sharing behavior of this superstructure must be investigated further. TxDOT has funded the Texas A&M University Transportation Institute (TTI) to design, model, construct, test, and analyze a full scale spread slab beam bridge. In addition to this testing, an existing slab beam bridge in Denison, Texas will be instrumented and observed for supplementary slab beam behavior data. To predict bridge behavior, computer models of the Riverside experimental bridge and of the Denison field bridge were developed using both the grillage and finite element methods of analysis. The experimental results from the Riverside and Denison bridges will not be collected by the conclusion of this thesis so a third bridge with existing experimental data, the Drehersville, Pennsylvania bridge, was also modeled for calibration purposes. The work presented by this thesis focuses on how to accurately model transverse load distribution relationships and LDFs for use in bridge design. The analysis covered is concentrated primarily on the grillage method, with the finite element analysis as part of the larger project scope. From this analysis it was determined that the grillage method was able to accurately model bridge LDFs as compared to FEM modeling and experimental results, for spread slab beam and spread box beam bridges. The critical loading configurations for all bridges placed two trucks side by side and as far to one edge of the bridge as possible. It was also determined that at an ultimate loading case, the load is distributed much more evenly across the deck than at service loading.

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Denna studie belyser svårigheten för teknik och virtuell geografi att nå ut till mottagaren genom en kartläggning av e-postens geografi. För att skapa förståelse och fånga den osynliga processen bakom e-postens geografi  utgår uppsatsen dels från teorin Actor Network Theory (ANT) och dels från intervjuer.Under studiens gång uppstod ny förståelse för e-postens komplexitet och ledde fram till en reviderad syn. I början av uppsatsarbetet betraktades e-posten enbart utifrån sin funktion som aktant och intermediarie men i takt med att undersökningen fortgick framkom att den samtidigt, utöver dessa funktioner, fungerar e-posten som ett heterogent nätverk med betydelsefulla komponenter såsom aktörer och aktanter. Enligt uppsatsens konklusioner är e-postens trajektoria beroende av den strategi som producenten använder under skapandet av elektroniska meddelanden. Ett kontinuerligt arbete mellan producent och konsument krävs för att e-postens trajektoria ska upprätthållas och leda fram till att det elektroniska meddelande som löper igenom det virtuella nätverket når sitt syfte.