Orientador: Fernanda Klein Marcondes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-01T15:52:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tanno_AnaPaula_M.pdf: 2309126 bytes, checksum: dbb3c3a796d6795d34bddff7378b218b (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: o estresse pode alterar a sensibilidade de vários tecidos às catecolaminas. O objetivo deste estudo foi avaliar a sensibilidade à noradrenalina e adrenalina de átrios direitos de ratas submetidas ao estresse agudo, em diferentes fases do ciclo estral. Ratas Wistar nas fases de proestro, estro, metaestro e diestro foram submetidas a uma sessão de 50 min de natação, após a qual foram anestesiadas e sacrificadas. Os átrios direitos destes animais, e de ratas controles, foram isolados para obtenção de curvas concentração-efeito (CCE) à noradrenalina ou adrenalina, antes e após o bloqueio dos sistemas de metabolização das catecolaminas (fenoxibenzamina + estradiol). Os dados foram analisados por ANOVA bifatorial ou teste t de Student. O estresse por natação não alterou a sensibilidade à noradrenalina nas fases de estro, metaestro e diestro (p>0,05). Entretanto, no proestro, a natação induziu supersensibilidade à noradrenalina (p<0,05). Também no proestro, o bloqueio dos sistemas de metabolização das catecolaminas promoveu um desvio menor na CCE à noradrenalina no tecido de animais estressados em relação ao tecido isolado de ratas controle (1,74 x 2,45; p<0,05).A sensibilidade à adrenalina em átrios direitos de ratas controle foi maior na fase de metaestro em relação às outras fases do ciclo estral. Nos átrios direitos de ratas controle em metaestro, a inibição in vitro dos processos de metabolização não deslocou a CCE à adrenalina. O estresse por natação induziu supersensibilidade à adrenalina em átrios isolados de ratas em metaestro, após bloqueio dos sistemas de metabolização (p<0,05). Nossos resultados mostram que a supersensibilidade à noradrenalina induzida por uma sessão de natação aplicada no proestro está parcialmente relacionada à inibição da metabolização da noradrenalina, porém, outros mecanismos também parecem estar envolvidos. Durante o metaestro, a supersensibilidade à adrenalina não parece ser determinada por alterações nos processos de metabolização das catecolaminas. Pode-se concluir que o ciclo estral tem influência nas alterações de sensibilidade adrenérgica induzidas por estresse, assim como nos mecanismos que as determinam / Abstract: Stress may change the sensitivity to catecholamines of many tissues. The aim of this study was to evaluate the sensitivity to noradrenaline and adrenaline of the right atria from female rats submitted to acute stress during the different phases of the estrous cycle. Wistar female rats at proestrus, estrus, metestrus and diestrus were submitted to one 50 min-swimming session, after which they were anesthetized and sacrificed. The right atria from these and trom control animais were isolated. Concentration-effect curves (CEC) to noradrenaline or adrenaline were obtained before and after the inhibition of the catecholamine uptake systems (phenoxibenzamine + estradiol). Data were analysed by Two-Way Anova or Student t test. Swimming stress did not change the sensitivity to noradrenaline of the right atria trom rats at estrus, metestrus and diestrus (p>0.05). However at proestrus, swimming induced supersensitivity to noradrenaline (p< 0.05). Also at proestrus, the inhibition of the catecholamine uptake systems induced a lower shift to the left in the CEC to noradrenaline in the stressed group compared to the control group (1.74 x 2.45; p<0.05). Right atria from control rats at metestrus showed supersensitivity to adrenaline compared to the other estrous cycle phases. In the right atria from control rats at metestrus, the in vitro inhibition of the uptake systems did not shifted the CEC to adrenaline. Swimming stress also induced supersensitivity to adrenaline in the right atria from rats at metestrus, after the inhibition of uptake systems (p<0.05). Our results show that changes on the uptake systems are partially involved in the stress-induced supersensitivity to noradrenaline during proestrus. However other mechanisms seem also to be related to this effect. At metestrus, the supersensitivity to adrenaline seems not to be determined by alterations in the catecholamines uptake systems. In conclusion, the stress-induced alterations of the adrenergic sensitivity as well as their mechanisms are influence by the estrous cycle / Mestrado / Fisiologia Oral / Mestre em Odontologia

Orientadores: Regina Celia Spadari-Bratfisch, Dora Maria Grassi-Kassisse / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T14:08:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moura_AndreLuizde_M.pdf: 4831255 bytes, checksum: 89a79fa25a0a6831c383781d8adbb2ce (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O estresse por choque nas patas promove supersensibilidade ao efeito cronotrópico positivo da isoprenalina em átrios direitos isolados de ratos e ratas sacrificadas em diestro, a qual está associada a aumento da proteína do adrenoceptor P2 naquele tecido. Em átrio direito de fêmeas ocorre também subsensibilidade ao efeito cronotrópico da noradrenalina. O objetivo deste trabalho é avaliar se a resposta inotrópica a agonistas Padrenérgicos também é alterada em tecido cardíaco de ratos submetidos a estresse por choque nas patas para ampliar nosso conhecimento da extensão em que a fisiologia cardíaca é alterada pelo estresse. Utilizamos átrios esquerdos isolados de ratos machos adultos da linhagem Wistar submetidos ou não a três sessões consecutivas de choques nas patas (30 minutos de duração, 120 pulsos aplicados aleatoriamente a intervalos que variavam de 5 a 25 seg; intensidade de 1 mA e duração de 1 seg). Todos os átrios receberam pré-tratamento in vitro para inibir os processos de recaptação neuronal e captação extra-neuronal. Em seguida foram obtidas curvas concentração-efeito aos agonistas isoprenalina, na presença ou ausência dos antagonistas CGP20712A, IC1118.551 ou ambos; noradrenalina, na presença ou ausência de CGP20712A; TA-2005; BRL37344 e CGP12177. Analisamos a sensibilidade do tecido aos agonistas (pD2) e a afinidade dos antagonistas (pKB). Para determinar se a população de adrenoceptores P é homogênea ou heterogênea, realizamos análise de regressão linear de Schild. Os valores foram expressos como médias: erros padrão da média. Átrios esquerdos isolados de ratos submetidos a estresse quando comparados aos átrios esquerdos isolados de ratos controle apresentaram supersensibilidade à isoprenalina (pD2: 8,44 :t 0,16 para controles e 8,85 :t 0,09 para estresse, p < 0,05; teste t de Student) e sem alteração de sensibilidade à noradrenalina (pD2: 8,00 :t 0,03 para o grupo controle e 7,83 :t 0,01 para o grupo estresse, p > 0,05; teste t de Student). Não foi observada diferença de sensibilidade para os agonistas TA-2005, BRL37344 e CGP12177. A supersensibilidade para isoprenalina foi cancelada pelo antagonista ICI118.551, sendo que os valores pD2 neste caso foram: 8,43 1: 0,11 para o grupo controle e 8,60 1: 0,11 para o grupo estresse (p > 0,05; teste t de Student). Os valores pKB do IC1118.551 foram iguais a: 7,191: 0,08 para o grupo controle e 7,13 1: 0,31 para o grupo estresse. Análise de regressão linear de Schild para o antagonismo entre CGP20712A e isoprenalina ou noradrenalina demonstrou que átrios esquerdos isolados de ratos controle e ratos submetidos a estresse apresentam uma população heterogênea de receptores-adrenérgicos. Nós concluímos que átrios esquerdos de ratos submetidos a estresse apresentam supersensibilidade à isoprenalina devido ao aumento da participação dos adrenoceptores _2. A resposta aos demais agonistas não se altera. Esta alteração na sensibilidade à isoprenalina desencadeada pelo estresse é semelhante ao que ocorre em átrio direito e em tecido adiposo de ratos submetidos ao mesmo protocolo de estresse. Estes resultados indicam que não apenas o cronotropismo mas também o inotropismo cardíaco são afetados pelo estresse o que provavelmente resulta em alterações funcionais cardíacas, de caráter adaptativo / Abstract: Following foot shock stress white adipocytes and right atria from male and right atria from female rats sacrificed at diestrous, are supersensitive to the chronotropic effect of isoprenaline. Right atria from female rats are also subsensitive to noradrenaline. In the present study, we investigated whether the inotropic response to B-adrenergic agonists was altered in cardiac tissue from stressed rats. Left atria isolated from control or stressed male Wistar rats submitled to three 30 min foot shock sessions (120 pulses of 1.0 mA and 1.0 s duration, applied at random intervals of 5-25 s) were mounted in organ baths under a tension of 4,9 mN (0,5 gf) and stimulated with pulses of 2 Hz and 5 ms duration at voltage 20% above threshold. Concentration-response curves were obtained for the Badrenoceptor agonists isoprenaline, noradrenaline, TA2005, BRL37344 and CGP12177. Curves were also obtained for isoprenaline and noradrenaline in the presence of the selective antagonist CGP20712A (10, 30 and 100 nM), and for isoprenaline in the presence of the antagonist IC1118,551 (50 nM) or both antagonists. The sensitivity to noradrenaline, TA2005, BRL37344 and CGP12177 was unaltered in atria from foot shock stressed rats. The pD2 for isoprenaline was significantly higher in atria from stressed rats (8.85 :t 0.09) compared to control rats (8.44 :t 0.15; P < 0.05, Student's t-test). Treatment with IC1118,551 (50 nM) abolished this difference (pD2 in the presence of ICI118,551: 8.43:t 0.11 and 8.60:!: 0.11 for atria from control and stressed rats, respectively. The pKs for IC1118.551 was 7.19:t 0.08 in control atria and 7.13:t 0.31 in atria from stressed rats (p > 0.05, Student's t-test). Schild analyses for the antagonism between CGP20712A and isoprenaline or noradrenaline indicated that the B-adrenoceptor population in left atria from control and stressed rats was heterogeneous. We conclude that the supersensitivity of atria from foot shock stressed rats to isoprenaline resulted from an increase in B2-adrenoceptor mediated responses. These results were similar to those previously reported for right atria and adipocytes from rats submitted to the same stress protocol and indicate that not only the cardiac chronotropism also the inotropism was affected by stress what probably causes. adaptative alterations in the heart function / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores : Regina Celia Spadari-Bratfisch, Dora Maria Grassi-Kassisse / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T10:49:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ferreira_RitadeCassia_M.pdf: 7391538 bytes, checksum: 96bfc52de9d7e563ddd952c72f18a0df (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a influência do ciclo estral sobre a resposta lipolítica a agonistas adrenérgicos em adipócitos perigonadais isolados de ratas. Utilizamos ratas Wistar adultas, pesando entre 175 e 250 g. A determinação das fases do ciclo estral foi realizada diariamente por meio de lavado vaginal, durante oito dias consecutivos (dois ciclos), no mínimo. Após a identificação das fases do ciclo estral, os animais foram sacrificados e o tecido adiposo perigonadal foi removido e submetido à digestão, para isolamento das células adiposas utilizadas no ensaio. Os grupos experimentais foram estabelecidos de acordo com as fases do ciclo estral e com os agonistas adrenérgicos utilizados. Não houve influência do ciclo estral sobre o peso do tecido adiposo perigonadal e sobre a lipólise basal, avaliada in vitro. Dos adipócitos foram obtidas curvas concentração-efeito à isoprenalina (ISO), norepinefrina (NOR), epinefrina (EPI) e BRL37344 (BRL). O efeito do d-butiril-cAMP (d-AMPc) também foi avaliado. A concentração de glicerol liberado no meio de incubação foi utilizada como índice de lipólise (mmol glicerol/100 mg lipídeos totais.60 min). As curvas foram comparadas por análise de variância, seguida de teste de Fisher. Diferenças foram consideradas significativas para p<0,05. Durante o proestro, a lipólise estimulada pelo d-AMPc e o efeito lipolítico máximo dos agonistas de adrenoceptores BRL37344, isoprenalina, norepinefrina e epinefrina foram menores do que nas outras fases do ciclo. A sensibilidade das células adiposas aos agonistas endógenos não seletivos, a e b-adrenérgicos, norepinefrina e epinefrina, apresentaram-se diminuídas apenas durante o proestro, sugerindo, uma maior participação do adrenoceptor a2 nesta fase. Entretanto, as respostas máximas aos agonistas seletivos para receptores 13 adrenérgicos, isoprenalina e BRL37344, foram menores durante o proestro e o metaestro em relação ao estro e diestro. Nossos resultados obedecem à ordem de potências relativas propostas para agonistas b-adrenérgicos, exceto, na fase de metaestro, na qual a potência do BRL37344 foi menor em relação à isoprenalina e à norepinefrina. Podemos concluir que, durante o ciclo estral de ratas ocorrem oscilações da resposta aos agonistas adrenérgicos refletindo a proporção da participação dos diferentes subtipos de adrenoceptores na resposta lipolítica de adipócitos perigonadais. Outro mecanismo envolvido com estas oscilações, compreende variações da sensibilidade da lipase hormônio sensível ao AMPc / Abstract: The aim of this thesis was to examine the lipolytic effect of adrenergic agonists in white perigonadal adipocytes isolated from rats in each phase of the estrous cycle. Adult female Wistar rats (175-250 g) were used. The phases of the estrous cycle were determined from daily vaginal smears over at least eight consecutive days (two cycles). After identification of the estrous phase, the rats were killed and the perigonadal adipose tissue was removed and digested to isolate the adipocytes. The experimental groups were set up according to the phase of the estrous cycle and the agonists to be used. Concentration-response curves were obtained for isoprenaline (ISO), norepinephrine (NOR), epinephrine (EPI) and BRL37344 (BRL). The effect of d-butyryl-cAMP was also examined. The concentration of glycerol released into the incubating medium was used as an indicator of lipolysis (mmol glycerol/100 mg of total lipids.h). The concentration response curves were compared by ANOVA followed by Fisher's test. Values of p<0.05 were considered significant. There was no variation in the weight of perigonadal adipose tissue during the four phases of the estrous cycle, nor was there any difference in the basal lipolysis of isolated adipocytes. The lipolysis stimulated by d-cAMP and the maximum lipolytic effect obtained with the various adrenoceptor agonists were lower in proestrous than in the other phase of the cycle. The sensitivity to the non selective (l- and j3-adrenergic agonists norepinephrine and epinephrine was lower only during proestrous, which suggested a greater role for a2-adrenoceptors in this phase. In contrast, the maximum responses for the b-adrenergic selective agonists, isoprenaline and BRL37344, were lower in proestrous and metaestrous. These results agree with the general relative potencies of b-adrenergic agonists, except in metaestrous, when the sensitivity to BRL37344 was lower than that to isoprenaline and norepinephrine. These results show that there are oscillations in the sensitivity of perigonadal adipocytes to adrenergic agonists during the estrous cycle, with different subtypes predominating in each phase. There are also variations in the activity of the cAMP-sensitive lipase / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores : Dora Maria Grassi-Kassisse, Regina Celia Spadari-Bratfisch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-28T02:19:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Miotto_AlexandreMarcucci_M.pdf: 1836006 bytes, checksum: b52b7a8f9a6c400d33f700f71bbf9ab8 (MD5) Previous issue date: 2001 / Mestrado

Orientador: Dora Maria Grassi-Kassisse / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-07T08:09:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moreira_MariliaFrancisco_M.pdf: 1378785 bytes, checksum: dcaf29a0a3f00f96318d03ee2362989c (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: Lipídios provenientes da dieta têm um importante efeito no sistema de sinalização transmembrana presente nas células cardíacas. Um vez ingeridos em excesso ocorre aumento no conteúdo de colesterol na membrana da célula cardíaca o qual afeta a atividade da adelilil ciclase ligada ao receptor ß e conseqüentemente as respostas cronotrópicas e inotrópicas às catecolaminas causando arritmogênese. O objetivo desta tese foi analisar os efeitos de sessões de natação com o objetivo de prevenir os efeitos de dieta hiperlipídica sobre a sensibilidade de átrios direitos isolados a agonistas adrenérgicos. Ratos Wistar machos adultos foram usados após uma semana de adaptação em salas climatizadas 22±2ºC e com ciclo claro-escuro de 12 h (luzes acendendo as 6:30 da manhã). Os experimentos foram realizados de acordo com os princípios para utilização de animais em pesquisa e educação e adotado pelo COBEA (Colégio Brasileiro de Experimentação Animal). Os animais foram randomicamente divididos em dois grupos, sedentários (S) e que praticaram exercício (T). O exercício constou de sessões de natação na freqüência de 5 dias na semana com 50 minutos de duração durante 20 dias (4x5 dias) em tanque de água com temperatura de 34 ± 2oC. Estes dois grupos foram ainda subdivididos em 2 subgrupos, o que recebia ração padrão (N) e outro que recebia a dieta rica em lipídios (H). O átrio direito foi isolado e curvas cumulativas dose-resposta a noradrenalina (NA) e isoprenalina (ISO) foram obtidas, na ausência ou presença de inibição da recaptação neuronal e extraneuronal. Não houve alteração na freqüência cardíaca basal ou resposta máxima aos agonistas nos átrios isolados dos diferentes grupos experimentais (NS, NT, HS e HT). O programa de exercício físico proposto induziu em ratos que ingeriram dieta padrão uma subsensibilidade à noradrenalina e uma supersensibilidade a isoprenalina. Os átrios direitos isolados de ratos sedentários que ingeriram dieta rica em lipídios apresentaram, após quatro semanas, subsensibilidade a noradrenalina e nenhuma alteração na sensibilidade a isoprenalina. A associação da dieta rica em lipídios com o programa de exercício físico preveniu as alterações observadas tanto pela dieta hiperlipídica como pelo programa de exercício isoladamente. Os valores pD2 para NA foram: 7,44±0,09 (NS); 6,65±0,17* (HS); 6,52±0,25* (NT); 7,15±0,04**# (HT) e para ISO foram: 8,37±0,12 (NS); 8,52±0,10 (HS); 8,94±0,09* (NT); 8,55±0,08 (HT). Onde as diferenças significativas (p<0.05 ANOVA seguida de Tukey) foram indicadas como segue: * vs NS; ** vs NT, # vs HS. Este programa de exercício físico induziu alterações na resposta atrial semelhantes àquelas observadas no modelo de choques nas patas (três sessões diárias), ou seja, diminuição na resposta mediada pelos adrenoceptores ß1 (NA) e aumento na resposta mediada pelo adrenoceptor ß2 (ISO). A dieta hiperlipídica oferecida aos ratos durante 4 semanas induziu subsensibilidade a noradrenalina e esta resposta é provavelmente devida a alterações na membrana lipídica e alta atividade adrenérgica relatada neste modelo animal. O motivo da ausência de alterações cardíacas quando da associação dieta hiperlipídica e exercício físico precisa sem investigado / Abstract: Dietary lipids has an important effect on transmembrane signaling system in the heart increasing the cardiac membrane cholesterol content, which in time affect ß-adrenoceptor/adenylyl cyclase activity and the inotropic and chronotropic responses to catecholamines causing arrhytmogenesis.The aim of this work was to analyze the effect of swimming, to prevent the effects of high fat-CHO diet on the sensitivity to adrenergic agonists in rat isolated right atria. Adult male Wistar rats were used after one week of adaptation in acclimated room at 22±2ºC and 12h light-dark cycle (lights on at 6:30 a.m.). The experiments were carried out in accordance with the principles for the use of animals in research and education and adopted by COBEA (Brazilian College for Animal Experimentation). The animals were randomly divided into two groups, sedentary (S) and exercised (T) with a swimming sessions, 5 days a week (50 min. session) during 20 days (4x5 days) in a water glass tank with temperature at 34 ± 2oC. These two groups were divided into two subgroups; one of them fed a standard chow (N) and the other, a high fat-CHO diet (H). The atrium was isolated as described before and cumulative concentration-response curves to noradrenaline (NA) and isoprenaline (ISO) were obtained, in the absence or presence of inhibitors of neuronal and extraneuronal uptake. There was no alteration in the basal heart rate or maximal response to the agonists in isolated atria rats from different groups (NS, NT, HS and HT). The physical exercise program in rats fed with standard chow induced right atria subsensitivity to noradrenaline and supersensitivity to isoprenaline. Atria isolated from rats fed with high fat-CHO diet showed subsensitivity to noradrenaline and no alterations on the sensitivity to isoprenaline. Association of high fat-CHO diet and this physical exercise program prevented the alterations induced by the diet or the exercise values were: 7.44±0.09 (NS); 6.65±0.17* (HS); 6.52±0.25* (NT), 7.15±0.04**(HT) and ISO pDprograms alone. The NA pD2 # 2 values were: 8.37±0.12 (NS); 8.52±0.10 (HS); 8.94±0.09* (NT), 8.55±0.08 (HT). Significant differences (p<0.05 ANOVA plus Tukey test) were indicated as follows: *compared to the NS group, **compared to the NT group, #compared to the HS group. The uptake inhibition did not alter the responses obtained. This exercise program induced alterations in the right atria response similar to those induced by foot shock stress, it means, decrease on ß1-adrenoceptor mediated (NA) response and increase on ß2-adrenoceptor mediated (ISO) response. High fat-CHO diet offered during four weeks induced subsensitivity to noradrenaline, this response is probably due to alterations on the lipid membrane content and high adrenergic activity reported in this animal model. The absence of effects on atria response observed in rats submitted to high fat-CHO diet and exercise program needs to be investigated. / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular