Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-27T12:46:48Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gasparetti_AlessandraLia_M.pdf: 4999232 bytes, checksum: c851a9dc6708c86cf15232a9f456e2ca (MD5) Previous issue date: 2000 / Resumo: Os neuropeptídeos liberados dos neurônios sensoriais modulam as funções cardíacas. Recentemente, sugeriu-se a existência de uma interação funcional entre as fibras simpáticas, parassimpáticas e sensoriais em corações e vasos. O objetivo deste trabalho foi investigar os efeitos do tratamento neonatal com capsaicina sobre a potência do isoproterenol, carbacol, pilocarpina e/ou CGRP em átrio direito isolado de rato, bem como, o cronotropismo, inotropismo e fluxo coronariano em resposta aos agonistas a- e J3¬ adrenérgicos em coração isolado de rato. Ratos Wistar neonatos foram tratados com capsaicina (50 mg/Kg, subcutâneo) ou seu volume correspondente de veículo no segundo dia de vida. O coração e o átrio direito foram isolados 30, 60 e/ou 90 dias após tratamento. O tratamento com capsaicina determinou dessensibilização da resposta cronotrópica ao isoproterenol em átrios direitos de ratos de 30 dias, mas nenhuma alteração significativa foi observada nos animais com 60 ou 90 dias de idade. As respostas ao CGRP, carbacol e pilocarpina em átrios direitos não foram afetadas pelo tratamento neonatal com capsaicina em nenhum dos tempos estudados. A potência ao CGRP nos animais sacrificados aos 30 dias, para ambos os grupos, foi significativamente maior do que nos animais sacrificados aos 60 e 90 dias após o tratamento. O tratamento com capsaicina reduziu os conteúdos de CGRP 110 coração, em cerca de 74% em todos os tempos estudados; no entanto, a resposta funcional (cronotropismo positivo) à capsaicina exógena só foi significativamente atenuada aos 60 e 90 dias após tratamento. Em corações isolados, o fluxo coronariano basal foi reduzido aos 60 dias após tratamento, mas nenhuma alteração foi observada l1as respostas cronotrópicas e inotrópicas positivas ao isoproterenol e na vasoconstricção coronariana em resposta à fenileftina. Em resumo, a dessensibilização da resposta cronotrópica de átrios direitos nos animais com 30 dias de idade pode ser devido à intensa ativação do sistema simpato-adrenal acarretada pela capsaicina no período neonatal / Abstract: Sensory nerves in the heart are known to modulate cardiac functions by releasing neuropeptides. A functional cross-talk among sympathetic, parasympathetic and sensory nerves have been suggested in the heart and vascular beds. The aim of this work was to evaluate the effects of capsaicin treatment on the cardiac parameter changes, such as the potency of isoproterenol, carbachol, pilocarpine and/or CGRP in the rat isolated right atria, as well as, the changes of chronotropism, inotropism and/or coronary flow in response to a- (phenylephrine) and/or j3-(isoproterenol) adrenoceptor agonists using the Langendorff apparatus. Neonatal Wistar rats of both sexes were treated on the second day of life with capsaicin (50 mglkg, sc.) or the corresponding volume of vehicle solution. The heart and right atria were isolated at 30, 60 and/or 90 days after neonatal capsaicin¬treatment. The neonatal capsaicin-treatment caused a four-fold rightward shift at pECso leveI on the concentration-response curve (CRC) to isoproterenol at 30 days, whereas no changes were observed at 60 and 90 days. The CRC to CGRP, carbachol, and pilocarpine were not changed in all studied time. The potency of CGRP in isolated right atria in 30¬day-old rats was significantly higher than 60- and 90-day-old rats, as observed in both control and capsaicin groups. The increase of basal rate to addition of capsaicin on 90-day¬ old rats was markedly lower than 30- and 60-day-old animaIs in both studied groups. The CGRP receptor antagonist CGRP8-37 abolished the increased chronotropism to capsaicin in all studied groups. The neonatal capsaicin treatment reduced by aproximately 74% the CGRP content in the heart and the depletion percent was similar in all studied time. yv e found that neonatal capsaicin-treatment caused a significant reduction in basal coronary flow only at 60 days post-treatment. The positive chronotropic and inotropic responses to isoproterenol and the contractile response to phenilephrine were unaffected by the neonatal capsaicin-treatment at either 60 or 90 days. Our findings suggest that the desensitization.of chronotropic response mediated by j3-adrenoceptors observed at 3 O days after neonatal capsaicin-treatment is due to a massive activation of the sympato-adrenal system. It can not be attributed to sensory reinriervation since similar CGRP depletion was detected in all capsaicin-treated groups. No changes on the negative chronotropic responses to muscarinic agonists in isolated right atria were seen in neonatal capsaicin-treated rats indicating that sensory fibers do not influence parasympathe~ic fibers in rat cardiac tissue. The blockade of positive chronotropic responses to capsaicin by the CGRP8-37 indicate that capsaicin actions are fully mediated by CGRP. The highest potency for both CGRP and exogenous capsaicin, as well as, the basal rate in 30-day-old rats suggest that the density of CGRP¬containing fibers in young rats is greater than aged ones. The reduction of basal coronary flow at 60 days after capsaicin-treatment is a consequence of CGRP depletion. The restoration of coronary flow at 90 days post-capsaicin-treatment can be indicative of adaptive mechanisms to reverse this effect. The absence of changes on the cardiac parameters of isolated heart in response to adrenergic agents after neonatal capsaicin¬treatment at 60 and 90 days, exclude the existence of a cross-talk between sensory and sympathetic fibers at aged rats / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Orientador : Regina Celia Spadari-Bratfisch / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-31T17:39:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Souza_AlexandreReisTaveirade_M.pdf: 4201034 bytes, checksum: a52fe09fd32389f3d9588212e677cdef (MD5) Previous issue date: 2001 / Resumo: Considerando que tecidos isolados de ratos submetidos a estresse apresentam alterações de sensibilidade às catecolaminas, os objetivos deste trabalho foram verificar se tecidos isolados de cobaias submetidas aos mesmos protocolos experimentais também apresentam alterações similares, levando-se em conta que a proporção de subtipos de adrenoceptores difere entre átrios direitos das duas espécies. Nossos resultados mostraram que o estresse por natação ou por choque nas patas induziu alterações na sensibilidade aos efeitos cronotrópicos das catecolaminas, cujas características dependem da intensidade do agente estressor. Átrios direitos de cobaias e de ratos submetidos a estresse por natação apresentaram supersensibilidade à isoprenalina, o que poderia ser causado por redução na captação extraneuronal do agonista. No entanto, cobaias mostraram subsensibilidade à noradrenalina, após uma sessão de natação, o que só ocorre em ratos após a terceira sessão. Nós sugerimos que os mecanismos envolvidos neste processo poderiam ser similares àqueles descritos em ratos, ou seja, diminuição da resposta mediada por adrenoceptores do subtipo b1 e/ou aumento da eficiência da captação neuronal do agonista. Estresse por choques nas patas determinou alterações semelhantes em átrios direitos de ratos e de cobaias, com supersensibilidade à isoprenalina e subsensibilidade à noradrenalina, sugerindo dessensibilização dos adrenoceptores do subtipo b1, acompanhado de aumento da participação do subtipo b2 na resposta. A análise computacional dos dados e o uso de agonista seletivo para o subtipo b2 de adrenoceptores não confirmaram esta hipótese / Abstract: Considering that isolated tissues of stressed rats show alterations on sensitivity to catecholamines, the objectives of this work was to verify whether isolated tissues from guinea-pigs submitted to the same experimental protocols also show similar alterations. Our results show that the swimming or footshock stress induce sensitivity alterations of the chronotropic response to catecholamines, which features depend on the intensity of the stressor agent. Right atria from guinea-pigs and rats submitted to swimming stress shows supersensitivity to isoproterenol, probably due to a reduction of the extraneuronal uptake of the agonist. However, atria from guinea pigs show subsensitivity to norepinephrine after one swimming session, whereas atria from rats only shows subsensitivity to noradrenaline after the third swimming session. We suggest that the mechanisms involved in this process could be similar to those described in rats, i.e., increase in the agonist neuronal uptake efficiency. Footshock stress induced similar alterations in rats and guinea-pigs right atria; supersensitivity to isoproterenol and subsensitivity to norepinephrine, suggesting b1-adrenoceptor desensitization and increase in the b2-adrenoceptor participation in the response. The analysis of data performed by Graph Pad Prism on the response to TA2005 did not confirm this hypothesis / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Regina Celia Spadari-Bratfisch, Dora Maria Grassi-Kassisse / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T14:08:15Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Moura_AndreLuizde_M.pdf: 4831255 bytes, checksum: 89a79fa25a0a6831c383781d8adbb2ce (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: O estresse por choque nas patas promove supersensibilidade ao efeito cronotrópico positivo da isoprenalina em átrios direitos isolados de ratos e ratas sacrificadas em diestro, a qual está associada a aumento da proteína do adrenoceptor P2 naquele tecido. Em átrio direito de fêmeas ocorre também subsensibilidade ao efeito cronotrópico da noradrenalina. O objetivo deste trabalho é avaliar se a resposta inotrópica a agonistas Padrenérgicos também é alterada em tecido cardíaco de ratos submetidos a estresse por choque nas patas para ampliar nosso conhecimento da extensão em que a fisiologia cardíaca é alterada pelo estresse. Utilizamos átrios esquerdos isolados de ratos machos adultos da linhagem Wistar submetidos ou não a três sessões consecutivas de choques nas patas (30 minutos de duração, 120 pulsos aplicados aleatoriamente a intervalos que variavam de 5 a 25 seg; intensidade de 1 mA e duração de 1 seg). Todos os átrios receberam pré-tratamento in vitro para inibir os processos de recaptação neuronal e captação extra-neuronal. Em seguida foram obtidas curvas concentração-efeito aos agonistas isoprenalina, na presença ou ausência dos antagonistas CGP20712A, IC1118.551 ou ambos; noradrenalina, na presença ou ausência de CGP20712A; TA-2005; BRL37344 e CGP12177. Analisamos a sensibilidade do tecido aos agonistas (pD2) e a afinidade dos antagonistas (pKB). Para determinar se a população de adrenoceptores P é homogênea ou heterogênea, realizamos análise de regressão linear de Schild. Os valores foram expressos como médias: erros padrão da média. Átrios esquerdos isolados de ratos submetidos a estresse quando comparados aos átrios esquerdos isolados de ratos controle apresentaram supersensibilidade à isoprenalina (pD2: 8,44 :t 0,16 para controles e 8,85 :t 0,09 para estresse, p < 0,05; teste t de Student) e sem alteração de sensibilidade à noradrenalina (pD2: 8,00 :t 0,03 para o grupo controle e 7,83 :t 0,01 para o grupo estresse, p > 0,05; teste t de Student). Não foi observada diferença de sensibilidade para os agonistas TA-2005, BRL37344 e CGP12177. A supersensibilidade para isoprenalina foi cancelada pelo antagonista ICI118.551, sendo que os valores pD2 neste caso foram: 8,43 1: 0,11 para o grupo controle e 8,60 1: 0,11 para o grupo estresse (p > 0,05; teste t de Student). Os valores pKB do IC1118.551 foram iguais a: 7,191: 0,08 para o grupo controle e 7,13 1: 0,31 para o grupo estresse. Análise de regressão linear de Schild para o antagonismo entre CGP20712A e isoprenalina ou noradrenalina demonstrou que átrios esquerdos isolados de ratos controle e ratos submetidos a estresse apresentam uma população heterogênea de receptores-adrenérgicos. Nós concluímos que átrios esquerdos de ratos submetidos a estresse apresentam supersensibilidade à isoprenalina devido ao aumento da participação dos adrenoceptores _2. A resposta aos demais agonistas não se altera. Esta alteração na sensibilidade à isoprenalina desencadeada pelo estresse é semelhante ao que ocorre em átrio direito e em tecido adiposo de ratos submetidos ao mesmo protocolo de estresse. Estes resultados indicam que não apenas o cronotropismo mas também o inotropismo cardíaco são afetados pelo estresse o que provavelmente resulta em alterações funcionais cardíacas, de caráter adaptativo / Abstract: Following foot shock stress white adipocytes and right atria from male and right atria from female rats sacrificed at diestrous, are supersensitive to the chronotropic effect of isoprenaline. Right atria from female rats are also subsensitive to noradrenaline. In the present study, we investigated whether the inotropic response to B-adrenergic agonists was altered in cardiac tissue from stressed rats. Left atria isolated from control or stressed male Wistar rats submitled to three 30 min foot shock sessions (120 pulses of 1.0 mA and 1.0 s duration, applied at random intervals of 5-25 s) were mounted in organ baths under a tension of 4,9 mN (0,5 gf) and stimulated with pulses of 2 Hz and 5 ms duration at voltage 20% above threshold. Concentration-response curves were obtained for the Badrenoceptor agonists isoprenaline, noradrenaline, TA2005, BRL37344 and CGP12177. Curves were also obtained for isoprenaline and noradrenaline in the presence of the selective antagonist CGP20712A (10, 30 and 100 nM), and for isoprenaline in the presence of the antagonist IC1118,551 (50 nM) or both antagonists. The sensitivity to noradrenaline, TA2005, BRL37344 and CGP12177 was unaltered in atria from foot shock stressed rats. The pD2 for isoprenaline was significantly higher in atria from stressed rats (8.85 :t 0.09) compared to control rats (8.44 :t 0.15; P < 0.05, Student's t-test). Treatment with IC1118,551 (50 nM) abolished this difference (pD2 in the presence of ICI118,551: 8.43:t 0.11 and 8.60:!: 0.11 for atria from control and stressed rats, respectively. The pKs for IC1118.551 was 7.19:t 0.08 in control atria and 7.13:t 0.31 in atria from stressed rats (p > 0.05, Student's t-test). Schild analyses for the antagonism between CGP20712A and isoprenaline or noradrenaline indicated that the B-adrenoceptor population in left atria from control and stressed rats was heterogeneous. We conclude that the supersensitivity of atria from foot shock stressed rats to isoprenaline resulted from an increase in B2-adrenoceptor mediated responses. These results were similar to those previously reported for right atria and adipocytes from rats submitted to the same stress protocol and indicate that not only the cardiac chronotropism also the inotropism was affected by stress what probably causes. adaptative alterations in the heart function / Mestrado / Fisiologia / Mestre em Biologia Funcional e Molecular

Orientador: Lourenço Gallo Junior / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-21T05:51:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Golfetti_Roseli_D.pdf: 4644875 bytes, checksum: c9a3c4cc6ee6ea0a15525a2e7add39d4 (MD5) Previous issue date: 1996 / Resumo: Os organismos vivos caracterizam-se por apresentarem grande capacidade de resposta aos estímulos internos e ou externos, no sentido de se adaptarem às condições vigentes. O sistema adrenérgico desempenha papel expressivo em muitos destes processos adaptativos. Alterações funcionais dos adrenoceptores quanto ao número, ou sensibilidade às catecolaminas apresentam repercussões fisiológicas e fisiopatológicas, restritas ou abrangentes em todos os sistemas orgânicos. O coração, por ter um expressivo número de diferentes tipos de receptores adrenérgicos, pode ser alvo de substanciais modificações das suas duas. propriedades básicas: inotrópica e cronotrópica. Neste cqntexto este trabalho teve como objetivo estudar as respostas inotrópicas à noradrenalina ( NA ) do átrio esquerdo ( AE ) isolado, de ratos adultos jovens e velhos, submetidos a estímulos provocativos ( modelo: natação de ratos ). Os grupos estudados foram: controles ( C) jovens ( n = 7 ) e, velhos ( n = 6 ); Stress Intermitente (SI) - sessões de 5, 15, 30 minutos de natação em três dias consecutivos - jovens ( n = 8) e velhos (n = 6 ); e Stress Agudo (SA) sessão única de 50 minutos de natação - jovens ( n = 6 ) e velhos ( n = 6 ). As variáveis registradas foram: Tensão, [T ( gf)]; primeira derivada temporal de T, [dT/dt ( gf / s )] e a segunda derivada temporal T, [ d2T/de ( gf / S2 )]. A resposta contrátil do átrio à NA foi avaliada por meio das curvas dose-resposta. A tensão máxima ( T max ) e a dose correspondente à concentração molar do agonista, que determina um efeito correspondente a 50% do efeito máximo ( EC50 ), foram empregadas como parâmetros para análise do ciclo contração relaxamento. Verificou-se, que os valores iniciais de T max ( antes das doses de NA ) não apresentaram diferença estatística nas três condições estudadas ¿Observação: O resumo, na íntegra poderá ser visualizado no texto completo da tese digital / Abstract: Not informed. / Doutorado / Doutor em Ciências

Orientador: Jose Wilson Magalhães Bassani / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia Eletrica e de Computação / Made available in DSpace on 2018-08-03T15:12:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Soares_GentilSilveira_M.pdf: 4340899 bytes, checksum: 87654ba18137f1d9c072dbe8453f8127 (MD5) Previous issue date: 2003 / Resumo: Este trabalho teve como objetivo investigar os efeitos da estimulação de alta intensidade sobre a atividade contrátil do tecido atrial isolado de rato. Procurou-se estabelecer a relação do efeito encontrado com a atividade do retículo sarcoplasmático (RS), utilizando como ferramenta a contração induzida por resfriamento rápido (RCC). Após o choque, a amplitude das contrações reduziu 3±:3 % a 60V/cm, 13±5 % a 130V/cm e 73±13 % a 220V/cm (P<0,001), assim como a amplitude da RCC induzida logo após o choque que apresentou diminuição de ±:4 % a 60V/cm, 64±8 % 130V/cm e 90±:2 % a 220V/cm (P<0,001). Portanto, verificou-se que o campo elétrico de alta intensidade provoca depressão da atividade contrátil e afeta a carga de cálcio do RS, transitoriamente, de modo dependente da amplitude da estimulação. A recaptação de Ca2+ pelo RS não foi, aparentemente, afetada. Um aumento significativo da tensão diastólica pós-choque (P<0,0001) pode ter sido causado por um acúmulo de Ca2+ ocasionado não só por perda temporária de Ca2+ reticular, mas também pela entrada de Ca2+ do meio extracelular através da membrana, visto que tal reação é intensamente reduzida na ausência de Ca2+ externo. Analisando a influência da duração do pulso de alta intensidade na depressão pós-choque constatamos que, embora este fator também contribua para o aumento dos efeitos adversos da estimulação de alta intensidade, o aumento da duração do choque é menos crítico que a elevação da amplitude do mesmo. Os resultados são concordantes com a literatura e tem aplicação direta para o entendimento dos mecanismos de ação envolvidos na depressão da atividade contrátil cardíaca após a desfibrilação e por outros métodos de estimulação com campos de alta intensidade / Abstract: The objective of the present work was to investigate the effect of high intensity electric field stimulation on the contractile activity of the isolated rat atrial tissue. We have used Rapid Cooling Contractures (RCCs) to study the relationship between the effect produced by the electrical shocks and the activity of the sarcoplasmic reticulum (RS). After high intensity shocks, the amplitude of twitch contractions dropped to 3±:3% at 60V/cm, 13±5% at 130V/cm and as much as 73±13% at 220V/cm (P<0,001). In parallel, the amplitude of the RCCs, induced soon after a given shock, presented a reduction of 10±4% at 60V/cm, 64±:8% at 130V/cm and 90±2% at 220V/cm (P<0,001). These results indicate that high intensity electric field stimulation causes depression of the contractile activity and transiently reduces the RS Ca2+ load. The SR Ca2+ uptake was not significantly affected. A significant (P<0,0001) increase of resting (diastolic) tension was found to be attributed to both the intracellular Ca2+ overload, caused by an intense although temporary SR Ca2+ loss, and to Ca2+ influx from the extracellular media, the later markedly reduced by external Ca2+ removal. We also analyzed the combined effects of shock duration and field intensity on the contractile depression. We found that an increased duration may facilitate contractile depression for a given amplitude but duration is less critical than amplitude in producing the adverse effects. The results may be useful to help understand the basic mechanisms involved in cardiac depression after defibrillation and other methods of cardiac stimulation with high intensity electric fields / Mestrado / Engenharia Biomedica / Mestre em Engenharia Elétrica

La radiología es una herramienta útil en la detección de patologías cardiacas caninas, especialmente cuando éstas afectan al lado izquierdo del corazón (atrio izquierdo). En la actualidad, el criterio radiográfico más objetivo para detectar cardiomegalia es el Vertebral Heart Scale o Vertebral Heart Size, sin embargo, éste únicamente permite concluir si existe o no cardiomegalia , sin precisar qué cámara está incrementada. La patología cardiaca más frecuente en el perro es la insuficiencia de la válvula mitral que produce incrementos de atrio izquierdo visibles radiográficamente. Los objetivos del presente estudio fueron, por un lado, proponer nuevas medidas radiográficas que permitieran detectar de forma precisa los incrementos de atrio izquierdo en el perro: dimensión radiográfica del atrio izquierdo o RLAD (Radiographic Left Atrial Dimension), distancia entre el atrio izquierdo y la columna o RLAD-Spine y la distancia entre la carina y la columna o Bronchus-Spine (Br-Spine). Para ello, se evaluó la utilidad clínica de estas medidas para detectar incremento del atrio izquierdo y se estudió la correlación de todas ellas con el VHS y con el criterio ecocardiográfico más fiable para la detección de atrio izquierdo, la ratio LA/Ao, que es la relación entre el diámetro de la arteria Aorta y el tamaño del atrio izquierdo (ratio LA/Ao). También se estudió la correlación de las nuevas medidas radiográficas entre sí. Por otro lado, se propuso una nueva metodología para la obtención del VHS para fomentar su uso en la práctica clínica y su adaptación a la radiología digital (VHS Objetivo u Objective VHS). Para ello, se comparó la nueva metodología, basada en una fórmula matemática, con la metodología original (VHS de Buchanan o Buchanan VHS). / Radiology is a useful tool in detecting canine cardiac enlargement, particularly when it involves the left size of the heart (left atrium). Currently, the most objective radiographic criterion to detect cardiomegaly is the Vertebral Heart Size (Vertebral Heart Scale); however, this allows us to conclude whether or not cardiomegaly, without specifying which camera is increased. The most common heart disease in dogs is the mitral valve insufficiency that results in increases in left atrium visible radiographically. The objectives of this study were, first, to propose new radiographic measurements to enable accurate detection of left atrium enlargement in the dog: radiographic left atrial dimension or RLAD, distance between the left atrium and the spine or RLAD-Spine and the distance between the carina and the spine or Bronchus-Spine. To do this, we evaluated the clinical usefulness of these measures to detect left atrial enlargement and studied the correlation of all of them with the VHS and the most reliable echocardiographic criteria in detecting left atrial enlargement, LA/Ao ratio, which is the relationship between the diameter of the Aorta artery and left atrium size. We also studied the correlation of new radiographic measurements between them. On the other hand, we proposed a new methodology for obtaining VHS to encourage its use in clinical practice and its adaptation to digital radiography (Objective VHS). To do this, we compared the new methodology, based on a mathematical formula, with the original methodology (Buchanan VHS).

Orientador : Regina Celia Spadari-Bratfisch / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-02T01:36:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Santos_IraidesNunesdos_D.pdf: 7548506 bytes, checksum: 72a227b9811309940d6956b22299967d (MD5) Previous issue date: 2002 / Resumo: Átrios direitos de ratos machos e de fêmeas sacrificadas em diestro submetidos a estresse por choques nas patas apresentam supersensibilidade a agonistas não-seletivos e seletivos P2 acompanhada por aumento na expressão da proteína do receptor pz. Este tecido também apresenta subsensibilidade a agonistas seletivos PI, sem alteração na expressão da proteína do receptor PI. Estes resultados sugerem que a supersensibilidade pode ser devida a aumento na expressão do subtipo P2 mas que a subsensibilidade à noradrenalina demonstrada em experimentos farmacológicos, deve-se, provavelmente, a alterações na sinalização intracelular deste receptor e/ou nos processos de recaptação e de metabolização dos agonistas e não a alterações no próprio receptor. Não houve alteração na resposta cronotrópica ao CGP12177 em átrio direito de ratos, machos ou fêmeas, submetidos a estresse por choques nas patas, indicando que o receptor que medeia esta resposta é mais resistente ao estresse do que as isoformas clássicas PI e P2, e não é influenciado pelas fases do ciclo estral. Em átrio direito de ratos submetidos à desnervação sinoaórtica houve dicotomia na sensibilidade deste tecido aos agonistas clássicos noradrenalina, isoprenalina e CGP12177, sugerindo que o sítio receptor que responde ao CGP12177 se comporta de modo independente da isoforma clássica de adrenoceptor PI, embora nossos dados não permitam esclarecer se esta resposta é mediada por um novo subtipo de adrenoceptor, denominado P4, ou a uma nova isoforma do receptor PI, com baixa afinidade pelos agonistas convencionais. Ratos e ratas sacrificadas em diestro ou estro e submetidos a estresse por choques nas patas apresentaram aumento de cerca de duas vezes na concentração sérica de corticosterona. Nenhuma alteração foi observada na expressão das proteínas dos receptores de glicocorticóides em átrios direitos destes mesmos animais, comparados com ratos controle. Nossos resultados permitem concluir que em átrios direitos de ratos submetidos a estresse por choque nas patas ocorre aumento da expressão do adrenoceptor f32 e que este resulta em aumento da sensibilidade a agonistas não-seletivos para os subtipos de adrenoceptores f3 e para agonistas seletivos para o subtipo f32, o que confere importância fisiológica ao processo. Permitem concluir também que a isoforma clássica do adrenoceptor f31 apresenta comportamento independente da isoforma não-convencional, uma vez que a resposta mediada por adrenoceptores f31 sofre dessensibilização, mas a expressão dos adrenoceptores f31, assim como a resposta a agonistas não convencionais permanece inalterada. A expressão de receptores para glicocorticóides também não se apresentou alterada, embora a concentração de corticosterona estivesse aumentada em ratos submetidos a estresse por choque nas patas / Abstract: Right atria of male or female rats sacrificed at diestrus and submitted to foot shock stress show supersensitivity to non-selective and selective Bz-adrenoceptor agonists. This supersensitivity was due to increased Bz-adrenoceptor protein level expression. This tissue also showed subsensitivity to non selective Bl-adrenoceptor agonist, but no changes in BI adrenoceptor protein leveI was observed, suggesting that the subsensitivity showed in the phamacological approches is probably due to changes in intracelullar sinalying rather than in alterations at the receptor leveI. The chronotropic response to (:t)-CGP12177 was not changed in right atria from male or female rats sacrificed at estrus or diestrus, indicating that the response is more resistant to stress than the response to conventional agonists, and it is not influenced by the estrous cycle phase. Additionally we observed that in right atria from sinoaortic denervated rats there was a dichotomy between sensitivity to the classical agonists and CGP12177. Our data do not clarify whether the chronotropic response to (:t) CGP12177 was mediated by the putative B4-adrenoceptor or by a Bl-adrenoceptor i soform , with low affinity for the conventional agonists. Moreover, our data show that this receptor shows a behavior independent from the Bl-adrenoceptor classical isoform. Male or female rats sacrificed at diestrus or at estrus and submitted to foot shock stress showed an increase of around 2-fold in the serum corticosterone leveI. No alteration was observed in the glucocorticoid receptor protein expression in right atria of stressed compared to control rats. We conclude that in right atria from rats submitted to foot shock stress the Bz-adrenoceptor enhanced expression results in increased sensitivity to B-adrenoceptor non-selective agonists and to r32-adrenoceptor selective agonists, that confers physiological importance to this processo We also conclude that the r31-adrenoceptor classical isoform shows a behavior independent from the non-conventional isoform, because the response to agonists mediated by r31-adrenoceptor was desensitizated but the response to the non conventional agonist was not altered. The expression of glucocorticoid receptor was not altered by foot shock stress, although the corticosterone levels increased in rats submitted to foot shock stress. Moreover, the adaptive mechanisms triggered by stress were not dependent on gender but they are infIuenced by the estrous cycle / Doutorado / Fisiologia / Doutor em Biologia Funcional e Molecular

Orientadores: Edson Antunes, Angelina Zanesco / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-07-25T01:01:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Riado_SoniaRegina_M.pdf: 2336612 bytes, checksum: 055072902e1d16daa20f32c9ccb9136b (MD5) Previous issue date: 1999 / Resumo: A administração crônica do inibidor da síntese de óxido nítrico N?-nitro-L arginina metil ester (L-NAME) em ratos induz à hipertensão arterial acompanhada por hipertrofia ventricular esquerda e lesões miocárdicas. O aumento do tônus simpático, a participação do sistema renina-angiotensina e o aumento do tônus vascular têm sido implicados na gênese elou manutenção do estado hipertensivo nesse modelo experimental de hipertensão. O objetivo deste estudo foi determinar a potência de agonistas ß adrenérgicos e muscarínicos nas respostas cronotrópicas e a potência de agonistas a e ß adrenérgicos nas respostas inotrópicas de átrios de ratos tratados cronicamente com L-NAME. Estudos histológicos também foram empregados para avaliar possíveis lesões atriais induzidas pelo tratamento com L-NAME. Nossos resultados mostraram que a potência do isoproterenol, noradrenalina, BRL 37344, carbacol e pilocarpina em átrios direitos de átrios isolados de ratos tratados com L-NAME por 7, 15, 30 e 60 dias não foram afetadas quando comparadas com os valores obtidos de animais do grupo controle. Átrios esquerdos isolados de animais tratados com L-NAME por 7, 15, 30 e 60 dias também não apresentaram alterações das respostas inotrópicas aos agonistas fenilefrina e isoproterenol. A adição de L-NAME "in vitro" não afetou a freqüência basal ou as respostas cronotrópicas ao isoproterenol e noradrenalina em átrios direitos. As análises estereológicas em átrios direitos e esquerdos mostraram um aumento significativo na porcentagem de tecido conjuntivo nos animais tratados com L-NAME por 15 e 30 dias nos átrios direitos quando comparados com os grupos controle. No entanto, o porcentual de tecido conjuntivo nos átrios esquerdos mostrou-se ser similar ao grupo controle. Nossos resultados indicam que a inibição da síntese do óxido nítrico não interfere nas respostas crontrópicas e inotrópicas mediadas pelos receptores adrenérgicos e muscarínicos e que as lesões apresentadas nos átrios direitos após o tratamento crônico com L-NAME não são suficientes para alterar as respostas dessa preparação / Abstract: Chronic administration of nitric oxide synthesis inhibitors induces arterial hypertension accompanied by left ventricular hypertrophy and myocardial ischaemic lesions. Since the enhancement of sympathetic drive has been implicated in these phenomena, the current study was carried out to determine the potency of adrenergic- and muscarinic-agonists on chronotropic and inotropic responses of isolated atria from rats treated chronically with the NO inhibitor N?-nitro-L-arginine methyl ester (L-NAME). Atriallesions induced by the chronic treatment with L-NAME were also evaluated. Our results showed that the potency of isoproterenol, norepinephrine, carbachol, pilocarpine and BRL 37344 in isolated right atria from rats treated chronically with L -NAME was not affected as compared to control animais. Addition of L NAME in vitro (100 µmoI/L) affected neither basal rate nor chronotropic response for isoproterenol and norepinephrine in rat heart. Addittionally, the inotropic responses of isoproterenol and phenylephrine were not affected by L-NAME treatment. Stereological analysis of the right atria at 15 and 30 days revealed a significant increase on amount of fibrous tissues in L-NAME treated groups (27±2.3% and 28±1.3%, for 15 and 30 days, respectively; P<.05) as compared to the control group (22±1.1 %). In left atria there were no changes on the amount of fibrous tissue. Our results indicate that nitric oxide does not to interfere with ß-adrenoceptors and muscarinic receptors mediated-chronotropic and inotropic responses / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Ciências

Orientador: Stephen Hyslop / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-13T23:44:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dias_Lourdes_D.pdf: 2781638 bytes, checksum: 00a6161d21fa428051e65ae4993b92c1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: As peçonhas do gênero bothrops causam hipotensão, no entanto as alterações cardíacas e hemodinâmicas, associadas com este fenômeno não têm sido bem investigadas. Neste estudo, analisamos as alterações cardiovasculares causadas pela peçonha de Bothrops alternatus (urutu) em cães e, avaliamos a cardiotoxicidade desta peçonha em átrio direito isolado de rato. Em cães anestesiados com isoflurano, a peçonha (0,3 mg/kg, i.iv.) causou hipotensão imediata atingindo o ápice aos 5 minutos, seguida por uma lenta recuperação para níveis não significativamente diferentes do basal após 2h. Não foi observada recuperação no grupo tratado com a dose de 1,0 mg/kg. A hipotensão foi acompanhada por uma queda abrupta do débito cardíaco, dos trabalhos tanto do ventrículo direito quanto do esquerdo, bem como do volume e índice sistólico, os quais permaneceram reduzidos até o final do experimento. Não ocorreu alteração significativa na freqüência cardíaca, no ECG, nos valores pressóricos pulmonares, nos níveis dos gases sanguíneos (pO2, pCO2, HCO3, SBCe e SBEc), e nem nos parâmetros metabólicos (pH, lactato, glicose e creatinoquinase), porém, foi observado um aumento significativo nos níveis de lactato desidrogenase logo no início do envenenamento. Nenhuma alteração histológica no tecido cardíaco foi observada, no entanto, observou-se microaneurismas e alguma descamação epitelial nos túbulos renais. Houve uma diminuição rápida da peçonha circulante, após a administração i.v., que ainda foi detectada aos 240 minutos. A peçonha de B. alternatus (0,5; 1,0 e 2,0 mg/ml) não alterou a frequência atrial, mas reduziu significativamente a força contrátil (redução máxima de ~76%) e aumentou acentuadamente a liberação de creatinoquinase (CK) e creatinoqunase - MB (CK-MB). A análise histopatológica mostrou extensa mionecrose dos cardiomiócitos. A peçonha dialisada (1,0 mg/ml, membrana de 2000 Da) contra NaCl 0,9 % (24h a 4 °C) não alterou a redução progressiva na força contrátil, enquanto que o aquecimento (100 °C, 20 min) aboliu esta redução; A liberação de CK e CK-MB não foi alterada pela diálise e pelo aquecimento. A atropina, o atenolol e propranol, a cimetidina ou a indometacina não alteraram a força contrátil atrial, no entanto o L-NAME - inibidor da NOS, atenuou a redução na contratilidade, sugerindo um possível envolvimento do NO na resposta induzida pela peçonha. Estes resultados mostram que em cães, a peçonha de B. alternatus produziu acentuadas alterações cardiovasculares, envolvendo uma ação cardíaca direta, com poucas alterações metabólicas. A peçonha é também tóxica para átrio isolado de rato, provavelmente em função dos efeitos proteolíticos e/ou de PLA2. / Abstract: Bothrops snake venoms cause hypotension, but the hemodynamic and cardiac alterations associated with this phenomenon have not been extensively investigated. In this study, we examined the cardiovascular changes caused by Bothrops alternatus (urutu) venom in anesthetized dogs and examined the cardiotoxicity of the venom in rat isolated rat atria. In isofluorane-anesthetized dogs, venom (0.3 mg/kg, i.v.) caused immediate hypotension that was maximal within 5 min followed by a slow recovery to levels not significantly different from pre-venom values after 2 h; no recovery was seen with a venom dose of 1 mg/kg. The hypotension was accompanied by an abrupt decrease in cardiac output, left and right ventricular systolic work, and systolic indices and volume that persisted without recovery until the end of the experiment. There were no significant changes in heart rate, ECG, pulmonary hemodynamics, blood gas levels (pO2, pCO2, HCO3, SBCe and SBEc) and metabolic parameters (blood pH, lactate, glucose and creatine kinase); however, a slight, significant increase in lactate dehydrogenase was seen soon after venom. There were no histological alterations in cardiac tissue, but microaneurysms and epithelial desquamation were seen in renal tubules. Circulating venom decreased rapidly after i.v. administration, but was still detectable after 240 min. Venom (0.5, 1.0 and 2.0 mg/ml) did not affect the beating rate of rat isolated right atria but significantly reduced the contractile force (maximal reduction of ~76%) and markedly increased the release of creatine kinase (CK) and CK-MB. Histological analysis revealed extensive myonecrosis. Venom dialysis (1.0 mg/ml; membrane nominal MW cut-off = 2000 Da) against 0.9% NaCl (24 h, 4°C) did not affect the decrease in contractile force whereas heating (100°C, 20 min) abolished the venom-induced reduction; CK and CK-MB release was also unaltered by dialysis but attenuated by heating. The decrease in atrial contractility was unaffected by atropine, atenolol, propranolol, cimetidine or indomethacin, but was attenuated by L-NAME, an inhibitor of nitric oxide synthase, indicating a possible role for nitric oxide in the venom-induced response. These results show that in dogs B. alternatus produces marked cardiovascular alterations involving a direct cardiac action, with little role for metabolic changes. The venom is also toxic to rat atria, probably as a result of venom proteolytic and/or phospholipase A2 activity. / Doutorado / Farmacologia / Doutor em Farmacologia

Orientador: Stephen Hyslop / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-15T05:11:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigues_MarianaAcedoPitocco_M.pdf: 2686415 bytes, checksum: 93b2ceba582a84158f4ce0d23348a829 (MD5) Previous issue date: 2010 / Resumo: Serpentes do gênero Bothrops são a principal causa de acidentes ofídicos no Brasil. Acidentes envolvendo a Bothrops jararacussu (jararacuçu) resultam em envenenamento moderado e grave, devido principalmente à grande quantidade de peçonha injetada por esta espécie. Entre os efeitos observados, o quadro de hipotensão e de choque são fatores importantes a serem considerados. Neste trabalho, avaliamos as alterações cardíacas causadas pela peçonha de B. jararacussu em átrio direito isolado de rato. A incubação das preparações com peçonha (0,025, 0,050, 0,1 e 0,2 mg/ml) resultou em uma marcada contratura atrial em altas concentrações que levou a uma redução progressiva da força contrátil e a freqüência atrial, especialmente na maior concentração utilizada (0,2 mg/ml). A maior concentração da peçonha também causou uma marcada liberação de CK-BM e desorganização das fibras musculares atriais. A peçonha aquecida (100°C, 20 min) aboliu esta atividade enquanto a diálise não alterou significativamente essas respostas. O fracionamento da peçonha de B. jararacussu em cromatografia por gel filtração e troca iônica nos forneceu a fração (III3) que reproduziu todas as alterações funcionais e morfológicas vistas com a peçonha bruta. SDS-PAGE da fração III3, na presença e ausência de ditiotreitol e ß-mecaptoetanol revelaram uma massa molecular de ~28 KDa e 14 KDa, respectivamente, semelhantes às bothropstoxinas, as principais PLA2 miotóxicas desta peçonha. Os antivenenos comerciais utilizados (botrópico e botrópico/crotálico) se mostraram eficientes em neutralizar os efeitos produzidos pela peçonha bruta tanto na força e freqüência atriais como na liberação de CK-MB e nas alterações histológicas. A pré-incubação com antagonistas farmacológicos (bloqueadores de receptores adrenérgicos, histaminérgicos, muscarínicos, e inibidores da ciclooxigenase e óxido nítrico sintase) não afetou significativamente as alterações induzidas pela peçonha. Estes resultados indicam que as alterações induzidas pela peçonha de B. jararacussu estão envolvidas diretamente com o dano a fibra muscular atrial mediada provavelmente através da atividade das PLA2 miotóxicas. / Abstract: The genus Bothrops is the principal cause of snakebite in Brazil. Bites by Bothrops jararacussu (jararacuçu) result in moderate to severe envenoming partly because of the large amount of venom injected by this species. Hypotension and circulatory shock are important systemic manifestations associated with bites by this species. In this work, we examined the cardiac alterations caused by B. jararacussu venom in rat isolated right atria. Incubation of atria with venom (0.025, 0.050, 0.1 and 0.2 mg/ml) resulted in marked muscle contracture at high concentrations that led to a progressive decrease in contractile force and beating rate, especially at the highest concentration (0.2 mg/ml). The highest venom concentrations also caused a marked release of CK-MB and disorganization of atrial muscle fibers. Heating the venom (100ºC, 20 min) abolished this activity whereas dialysis did not significantly alter the responses. Fractionation of B. jararacussu venom by gel filtration and ion exchange chromatographies yielded a peak (III-3) that reproduced all of the morphological and functional changes seen with the venom. SDS-PAGE of the peak III-3 protein in the absence and presence - mercaptoethanol revealed a molecular mass of ~28 KDa and 14 KDa, respectively, similar to bothropstoxins, the main myotoxic PLA2 of this venom. Bothropic and bothropic/crotalic antivenoms prevented the venom (0.2 mg/ml)-induced decrease in contractile force and atrial rate, as well as the tissue damage (CK-MB release and histological alterations). Pre-incubation with adrenergic, histaminergic and muscarinic receptor antagonists, or with cyclooxygenase and nitric oxide synthase inhibitors, did not significantly affect the venom-induced changes. These results indicate that the B. jararacussu venom-induced alterations probably involve direct to atrial muscle fibers mediated by venom myotoxic PLA2. / Mestrado / Mestre em Farmacologia