Orientador: Enes Furlani Júnior / Banca: Edson Lazarini / Banca: Marco Eustaquio de Sa / Banca: José Laércio Favarin / Banca: Raquel Capistrano Moreira / Resumo: Existem várias recomendações para se fazer a adubação nitrogenada, que se mal manejada traz vários problemas para a cultura e para o ambiente. Deste modo o trabalho objetivou avaliar os efeitos de doses e épocas de aplicação de nitrogênio no crescimento da planta, características tecnológicas e bioquímicas das sementes, teor foliar de nutrientes, teor de clorofila, atividade da enzima Redutase Nitrato, leitura SPAD e produtividade e determinar uma curva de recomendação da adubação nitrogenada com base na leitura SPAD, em cafeeiro em formação cv. Catuaí Vermelho , linhagem IAC 144. O presente trabalho foi instalado em uma área experimental na Fazenda de Ensino e Pesquisa da Faculdade de Engenharia de Ilha Solteira UNESP/FE, localizada no município de Selvíria- MS. O delineamento experimental empregado foi o de blocos ao acaso no esquema fatorial 5x3 com: a- doses crescentes de N (0, 50, 150, 250 e 350 kg ha-1 de N); b- sistemas de parcelamento da adubação nitrogenada (aplicação única em dezembro; parcelado em duas vezes - novembro e dezembro e parcelado em três vezes - novembro, dezembro e janeiro). Pode - se concluir que as doses crescentes de N aumentaram os teores de N, Ca, Mn, Cu, a atividade enzimática da RN, índice SPAD nas regiões medianas e basais, teste de tetrazólio, germinação e massa de 100 grãos, o medidor portátil de clorofila pode estimar a necessidade de N a ser aplicado / Abstract: There are several recommendations for making nitrogen fertilizer, which barelymanaged to bring several issues to culture and the environment. Thus the study aimedto evaluate the effects of doses and times of nitrogen application on plant growth,technological and biochemical characteristics of seeds, foliar nutrients, chlorophyll content, nitrate reductase enzyme activity, productivity and SPAD readings anddetermine a curve of nitrogen fertilizer recommendation based on SPAD readings incoffee training cv. Catuaí, IAC 144. This work was installed in an experimental area in the Farm Research and Education, Faculty of Engineering of Ilha Solteira FEIS / UNESP, located in Selvíria-MS, with geographic coordinates 20 º 20 'South Latitude and 51 º 24' West Longitude and average altitude of 344m. The climate according to Köppen, Aw is defined as tropical humid with rainy summer and dry in winter. Presents annual average temperature of 24.5 º C, average annual rainfall of 1.232mm and annual relative humidity of 64.8% (Hernandez et al., 1995). The experimental design was randomized block in factorial arrangement 5x3 with: a-increasing doses of N (0, 50, 150, 250 and 350 kg N ha-1) b-systems of split nitrogen fertilization (application only in December, divided in twice - in November and December and parceled out in three times - in November, December and January). It may - be concluded that increasing doses of N increased the concentration of Ca, Mn, Cu, the enzyme activity of NR, SPAD index in middle and basal regions, tetrazolium, germination and grain weight of 100, the portable meter chlorophyll can estimate N needs to be applied / Doutor

Orientador: Giuseppina Pace Pereira Lima / Banca: Eny Iochevet Segal Floh / Banca: João Domingos Rodrigues / Resumo: O presente trabalho teve como objetivo estabelecer o protocolo de desinfestação de estacas e sernentes e germinação de Pothomorphe umbeilata (L) e adaptar o protocolo de micropropagação de Pothomorphe umbeilata (L), incluindo a produção de calos e organogênese, além de comparar o teor de carotenóides entre calos e plântulas. O experimento foi conduzido no Laboratório de Biotecnologia Vegetal do Departamento de Química e Bioquímica, do Instituto de Biociências da UNESP - Botucatu, SP e o material vegetal (sementes e estacas) foi obtido no município de Adrianópolis-PR. Semente germinadas de P. umbeilata foram inoculadas em diferentes concentrações de BAP (0,5 mg.L’; 1,0 mgL’; 1,5 mg.L) e NAA (0,4 mg.L 0,6 mg.L’; 0,6 mg.L’) respectivamente, visando estimular a produção de calos e dosar o carotenóides. Após 60 dias do cultivo, os calos contendo algumas brotações, foram transferidos para meio de diferenciação das plântulas (GA3 0,1 mg.L’, BAP 0,5 mgL’) por um período de 40 dias, para logo serem transferidos para meio de diferenciação de plântulas. Calos (coletados aos 60 dias) e plântulas (coletadas aos 140 dias) foram congelados em nitrogênio líquido e mantidos em freezer a 80°C para posteriores análises de carotenóides. O melhor tratamento para a produção de calos e formação de gemas foi NAA 0.6 mgL’ em combinação com BAP 10 mg.L’. Nas plântulas sem adição de reguladores vegetais foi encontrada uma maior concentração de carotenõides, em comparação aos calos. / Abstract: The present research aimed at establishing a protocol of stalks and seed desinfectation, and seed germination of Pothomorphe umbeilata (L.). A protocol of micropropagation including the induction of callus formation and organogenesis was adapted. Besides, it was compared the carotenoids quantity between Porhomorphe umbeliata calius and plantlets. This experiment was carried out iii Biotechnology Vegetal Laboratory of the Chernistr and Biochemistry Department at the Instituto de Biociências of Universidade Estadual Paulista, Botucatu campus. The vegetal matenal (seed and stalks) was obtained from Adranópolis - PR. Pothomorphe umbeilata germinated seeds were inoculated in different concentrations of BAP (0,5 mg.L-l; 1,0 mg.L.-l; 1,5 mg.L-l) and NAA (0,4 mg.L-l; 0,6 mg.L-1; 0,6 mg.L-l) respectively, in order to stimulate calius induction and increase quantity of earotenoids. Afler 60 days, calius which contained shoots were inoculated in plantlets diferenciation medium GA3 0,1 mg.L4, BAP 0,5 mg.U’) during 40 days and transferred to plantlets growth medium. Plantlets were acclimatized Calius collected after 60 days and plantlets were collected afier 140 days. There were frozen in liquid nitrogen and maintained in freezer 80°C to be used in further carotenoids test. The best treatment for callus production and shoots elongation was NAA 0.6 mg.L’ in association with BAP 1.0 mg.L’. The higher carotenoids coneentration was in plantlets without growth regulators, compared with calius. / Doutor

Orientador: José Jurandir Fagliari / Banca: Raimundo Souza Lopes / Banca: Eliana Reiko Matushima / Banca: Aureo Evangelista Santana / Banca: Karin Werther / Resumo: Os Psittaciformes representam uma das ordens de aves mais comumente criadas como animais de companhia. A identificação de doenças em aves de companhia pode respresentar um desafio diagnóstico. A carência de dados a respeito de perfis normais para psitacídeos, como hemograma e perfil bioquímico sérico, são notórias no país. Pesquisas dessa natureza podem contribuir no diagnóstico e prognóstico de importantes doenças de aves criadas em cativeiro e de vida livre, dentre elas a clamidiose, zoonose de alta prevalência e com diagnóstico definitivo relativamente difícil, devido à complexa fisiopatogenia da infecção causada por Chlamydophila psittaci. Este estudo objetivou a realização do hemograma e o perfil bioquímico, inclusive as concentrações de imunoglobulinas e de proteínas de fase aguda, pela técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil sulfato de sódio - SDS-PAGE, de papagaios-verdadeiro (Amazona aestiva) e araras-canindé (Ara ararauna), de cativeiro, clinicamente saudáveis e o proteinograma em SDS-PAGE de papagaios-verdadeiro e araras-canindé de cativeiro positivos ou negativos para Chlamydophila psittaci. Os valores hematológicos, incluindo o hemograma e bioquímica sérica, foram determinados para ambas as espécies, demonstrando estar entre os intervalos de referência para as mesmas. O proteinograma sérico em SDS-PAGE permitiu a detecção de até 33 proteínas no traçado eletroforético de papagaios-verdadeiro sadios, e até 29 proteínas no traçado eletroforético de araras-canindé sadias. O proteinograma permitiu visualizar diferenças biologicamente importantes nas concentrações das proteínas de fase aguda e imunoglobulinas de papagaios-verdadeiro e araras-canindé positivos e negativos para C. psittaci, principalmente quanto a evidência da proteína de peso molecular 21 kDa, presente somente em papagaios-verdadeiro positivos... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Psittaciformes represent one of the most common orders of birds bred as pets. Disease identification in birds can represent a diagnostic challenge. The lack of data about normal ranges for psittacines, like hemogram and serum biochemistry are notorious in this country. Research regarding this subject can contribute to the diagnosis and prognosis of important diseases in captive and free-range birds. One of these diseases is clamidiosis, a zoonotic disease with high prevalence and with definitive diagnosis relatively difficult, because of the complex fisiopatogeny of the infection caused by Chlamydophila psittaci. The objective of this study was to determine the hemogram and serum biochemistry, including serum acute phase proteins and imunoglobulins using sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE), of clinically healthy, adult, captive blue fronted amazon parrots (Amazona aestiva) and blue and gold macaws (Ara ararauna) and the SDS-PAGE proteinograma of blue fronted amazon parrots and blue and gold macaws testing positive and negative for clamidiosis. The hematological values, including hemogram and serum biochemistry, were determined for both species, showing to be between the normal reference ranges. The SDS-PAGE proteinogram allowed visualization of up to 33 proteins of healthy blue fronted amazon and up to 29 proteins of healthy blue and gold macaws. The proteinogram allowed visualization of important biological differences in the concentrations of acute phase proteins and imunoglobulins of blue fronted amazon parrots and blue and gold macaws, testing positive and negative for clamidiosis. Present only in parrots positive for clamidiosis was the molecular weight 21 kDa protein / Doutor

Resumo: O conhecimento de atributos bioquímicos dos resíduos, associado à disponibilidade de metais pesados em virtude da utilização de lodo de esgoto em solos agricultáveis, tem por objetivo fornecer ferramentas para minimizar os riscos de poluições ambientais trazidos pela utilização do lodo de esgoto nos solos. Portanto, para avaliar o efeito do nível de contaminação de cádmio nas propriedades bioquímicas do lodo de esgoto e posterior disponibilidade do metal no solo, foram incubadas amostras de 500g de lodo com CdCl2, CdSO4, Cd(NO3)2 e Cd metálico em casa de vegetação. Posteriormente, lodo incubado e não incubado, na dose de 10 Mg ha-1, foram adicionados a amostras de Latossolo Vermelho distrófico e cultivado com sorgo granífero. Determinaram-se as atividades enzimáticas de amilases, arilsulfatases, desidrogenases e proteases nas amostras de lodo incubadas durante 58 dias. Após incubação e cultivo de sorgo granífero com lodo incubado e não incubado, avaliaram-se os teores de cádmio extraídos com Mehlich I e DTPA no lodo incubado e a disponibilidade do metal em amostras de terra, coletadas aos 60 e 120 dias de cultivo, com os extratores DTPA, HNO3 e HF. As fontes de cádmio adicionadas ao LE alteraram a atividade enzimática de amilases, arilsulfatases, desidrogenases e proteases. A produção de matéria seca e grãos pela cultura do sorgo granífero não foram influenciadas pelos tratamentos no lodo, assim como, pelas fontes acrescidas de cádmio. A extração de cádmio do solo foi influenciada pelo período de incubação. / Abstract: Knowing the biochemical attributes of residues, associated with the heavy metals availability due to the use of sewage sludge in cropped soils, aims to supply tools in order to minimize the risks of environmental pollution brought by the use of that residue as a fertilizer. However, in order to evaluate the effect of the contamination level by the addition of cadmium on the biochemical properties of the sewage sludge and the posterior metal availability in the soil, 500g of sludge were incubated with CdCl2, CdSO4, Cd(NO3) or metallic Cd in a green house. Incubated and no-incubated sewage sludge was then added to a Typic Haplorthox in the rate 10 mg/ha and sorghum was grown. Enzymatic activity of amylases, arylsulphatases, dehydrogenases and proteases in the sewage sludge samples incubated for 58 days were evaluated. Cadmium was evaluated in the sewage sludge incubated for 58 days using the extractors Mehlich I and DTPA and in soil samples obtained at the 60th and 120th days of sorghum cultivation using the extractors DTPA, HNO3 and HF. The results demonstrated that the time of incubation, as well as the cadmium sources, clearly influenced sewage sludge enzymatic activities by increasing and decreasing the activities. Cadmium sources did not alter significantly the amounts of metal extracted from incubated sewage sludge with Mehlich I and DTPA extractors. Cadmium extraction from soil samples treated with sewage sludge incubated with Cd was greater with DTPA and HNO3 extractors. The different Cd sources added to sewage sludge affected the activity of amylases, arylsulphatases, dehydrogenases and proteases in the residue. Dry matter and grain production by sorghum were not affected by the treatments apppied to sewage sludge (incubation and no-incubation) and by the Cd sources. Cd extracted from the soil was affected by the incubation of sewage sludge after Cd contamination. / Orientador: Wanderley José de Melo / Coorientador: Gabriel Maurício Peruca de Melo / Banca: Marcos Omir Marques / Banca: Cássio Hamilton Abreu Junior / Mestre

Orientador: Michiko Sakate / Banca: Noeme Sousa Rocha / Banca: Manoel Lima de Menezes / Banca: Mara Regina Stipp Balarin / Banca: Silvana Lima Gorniak / Resumo: O monofluoroacetato de sodio (MFAS) ou composto 1080 e um rodenticida que foi amplamente utilizado para o controle de roedores e predadores domesticos, apos sua descoberta em 1945. Este potente rodenticida age bloqueando o ciclo de Krebs por acao do seu metabolito toxico, o fluorocitrato, e como consequencia, inibe a resposta celular e a producao de ATP. O MFAS foi proibido por lei no Brasil e em diversos paises, mas seu uso indiscriminado continua causando diversos casos de intoxicacoes potencialmente fatais no homem e animais domesticos, principalmente em caes e gatos, representadas por alteracoes neurologicas e cardiacas. Pretendeu-se com este estudo caracterizar o perfil hematologico e bioquimico, as alteracoes histopatologicas e toxicologicas de gatos intoxicados experimentalmente com MFAS, com o objetivo de determinar metodos diagnosticos eficazes. Para tanto, foram utilizadas amostras de sangue de 16 gatos intoxicados experimentalmente com 0,45mg/kg de MFAS, por via oral. Estas amostras foram colhidas por puncao jugular e analisadas quanto ao perfil hematologico, bioquimica serica e analises toxicologicas em cromatografia liquida de alta eficiencia (CLAE), para deteccao e quantificacao do MFAS no soro dos animais. Avaliaram-se tambem as lesoes macro e microscopicas dos animais intoxicados que vieram a obito. Observaram-se leucopenia e trombocitopenia transitorias; hiperglicemia, aumento das enzimas musculares creatinoquinase (CK) e creatinoquinase fracao cardiaca (CK-MB); observaram-se tambem hipocalemia, hipofosfatemia e hipomagnesemia. Os achados macroscopicos e histopatologicos demonstraram lesoes caracteristicas de processos isquemicos e as analises toxicologicas demonstraram um metodo diagnostico simples e eficiente...(Resumo completo, clicar acesso eletrõnico abaixo) / Abstract: Sodium monofluoroacetate (SMFAC) or 1080 compound is a potent rodenticide, largely used since 1945 for rodent and domestic pest control. The toxic effects of SMFAC are caused by fluorocitrato, a toxic metabolite, which has a competitive action with aconitase enzyme, leading to citrate accumulation and interferes in energy production by Krebs cycle blockade. In Brazil, although prohibited by law, there is illegal use, keep causing intoxication in children and domestic animals, specially dogs and cats. The most common intoxication clinical signs are from the cardiac and neurological alterations. In the present study, 16 domestic cats were intoxicated with oral doses of monofluoroacetate (0.45mg/kg). The hematologic and biochemical profiles, and histophatological and blood serum toxicological analysis by high performance liquid chromatography (HPLC) were made to looking for a efficient diagnosis methods. The hematologic profile showed transitory leucopenia and trombocitopenia; the biochemical profile presented hiperglycemia, increase of creatinoquinase enzyme (CK) and creatinoquinase cardiac fraction (CK-MB), hypokalemia and hypophosfatemia were observed. The macrocospic and histopathological findings showed lesions characteristic of degenerative and ischemic processes. The toxicological analysis was shown to be a simple and efficient diagnostic method. SMFAC was detected in 75% of the serum samples analysed, and it was verified an average concentration of 0.32 ìg/mL in them; 4.81% of the serum samples did not show metabolized SMFAC six hours after the induced intoxication of the animals used in this study. / Doutor