CoordenaÃÃo de AperfeiÃoamento de Pessoal de NÃvel Superior / A cultura milenar do uso dos cogumelos pelos orientais como alimento funcional e medicinal tem chegado progressivamente ao ocidente, levada pelo anseio da populaÃÃo na busca de uma alimentaÃÃo mais saudÃvel. AlÃm disso, a comunidade cientÃfica tem revelado por meio de publicaÃÃes, descobertas importantes em relaÃÃo ao valor nutritivo e Ãs atividades terapÃuticas dos cogumelos. Como uma contribuiÃÃo para um melhor conhecimento das propriedades destes fungos, neste trabalho, estÃo sendo abordados os estudos realizados com o cogumelo Agaricus blazei Murill cultivado no Brasil em duas regiÃes distintas: Piedade, no Estado de SÃo Paulo e Guaramiranga, no Estado do CearÃ. Na primeira etapa, os estudos foram voltados para o cogumelo cultivado no Cearà (Cog-Ce). Os resultados das anÃlises espectroscÃpicas (FTIR e RMN) mostraram que os polissacarÃdeos purificados e fraÃÃes (F1 a F4) apresentam caracterÃsticas da presenÃa de carboidratos e proteÃnas. Na seqÃÃncia em que o fracionamento foi realizado, atravÃs de precipitaÃÃes sucessivas em etanol, observou-se nos espectros FTIR uma reduÃÃo do teor de carboidratos e aumento no conteÃdo protÃico. Espectros de absorÃÃo molecular das amostras indicaram a ausÃncia de proteÃna livre nos polissacarÃdeos purificados e suas fraÃÃes, o que aponta para a existÃncia de ligaÃÃo efetiva entre carboidrato e proteÃna, caracterÃstica dos proteoglucanos. As anÃlises revelaram a presenÃa de glucanas de configuraÃÃes 1Â6) e a(1Â4), sendo a primeira de conteÃdo mais representativo. O monossacarÃdeo glicose foi predominante entre os aÃÃcares presentes e o elemento mineral fÃsforo foi o maior constituinte entre os elementos analisados. O estudo dos polissacarÃdeos purificados e fraÃÃes isolados do Agaricus blazei Murill cultivado em SÃo Paulo (Cog-SP) foi realizado em uma segunda etapa do trabalho. Os polissacarÃdeos purificados isolados, apÃs anÃlise dos constituintes, foram caracterizados e suas propriedades em soluÃÃo investigadas, considerando-se parÃmetros fÃsico-quÃmicos e propriedades reolÃgicas. AlÃm disso, foram realizados ensaios biolÃgicos para avaliaÃÃo quanto a atividades terapÃuticas. As anÃlises por RMN 1H e 13C evidenciaram a presenÃa de glucanas (1Â6) e a(1Â4), sendo predominante a glucana (1Â6). A presenÃa de glucanas a(1Â4) foi maior em relaÃÃo ao teor apresentado pelo Cog-Ce. O monossacarÃdeo glicose e o elemento mineral fÃsforo tambÃm foram predominantes no Cog-SP, entre os aÃÃcares e os minerais presentes, espectivamente. Maior teor de proteÃna e menor conteÃdo de carboidratos foram encontrados para os polissacarÃdeos purificados do Cog-SP quando comparados ao Cog-Ce. Glucanas de configuraÃÃo (1Â6) foram isoladas atravÃs de procedimentos especÃficos de purificaÃÃo com uso de Timol. AnÃlises de FTIR e RMN 1H, 13C e os bidimensionais COSY e HMQC confirmaram a pureza do material na configuraÃÃo (1Â6) com indÃcios de ligaÃÃo com grupo protÃico (proteoglucano). O estudo dos polissacarÃdeos purificados em soluÃÃo mostrou materiais de elevadas massas molares. Uma conformaÃÃo de novelo aleatÃrio foi fortemente sugerida pelas medidas de Espalhamento de Luz, sendo, provavelmente, devida à presenÃa da proteÃna e elementos minerais. Baixas viscosidades foram observadas nos polissacarÃdeos quando comparadas Ãs das glucanas tradicionalmente usadas na alimentaÃÃo. Medidas reolÃgicas mostraram o comportamento Newtoniano dos materiais. ParÃmetros fÃsico-quÃmicos, tais como, tensÃo superficial e concentraÃÃo micelar crÃtica (cmc), entre outros, apresentaram-se semelhantes Ãqueles encontrados para polÃmeros com propriedades tensoativas. Em razÃo destas caracterÃsticas, os polissacarÃdeos purificados foram testados em relaÃÃo à capacidade de solubilizar o fÃrmaco modelo griseofulvina. Os testes preliminares sugerem que esses polissacarÃdeos, na forma de proteoglucanos, em soluÃÃo, sÃo potencialmente Ãteis para atuar como meio solubilizante para drogas aromÃticas. Os testes biolÃgicos realizados com os polissacarÃdeos e/ou proteoglucanos purificados mostraram que estes apresentam atividades antiviral in vitro, pela inibiÃÃo da replicaÃÃo do poliovÃrus e antitumoral in vivo contra o Sarcoma 180. / The use of mushrooms as nutritional and medicinal through the milenar culture in oriental has arrived progressively in the Occident, take by the necessity of the population to search of a more healthy nutrition. Further more, the scientific community has revealed through publications, important findings in relation to the nutritional values and the therapeutic activities of mushrooms. As a contribution for a better knowledge of the properties of this fungus, studies are being tackled with Agaricus blazei Murill cultivated in Brazil in two distinct regions: Piedade, in the state of SÃo Paulo and Guaramiranga, in the state of CearÃ. In the first stage, the studies were devoted to the cultivated mushrooms in Cearà (Cog-Ce). The results of the spectroscopy analysis (FTIR and NMR) demonstrated that the purified polysaccharides and fractions (F1 and F4) showed characteristics of the presence of carbohydrates and proteins. After the fractionation was completed, through successive precipitations in ethanol, it was observed by the FTIR spectrum, a reduction of the carbohydrate content and an increase in the protein content. Molecular absorption of the samples indicated the absence of free protein in the purificated polysaccharides and its fractions, which point to the existence of the effective link between carbohydrate and protein, characteristics of the proteoglucans. The analyses revealed the presence of glucans of configuration b(1Â6) and a(1Â4), with the first having the most representative content. The glucose monosaccharides were predominant between the sugars present and the mineral phosphorus element was the major constituent between the elements analysed. The study of the purified polysaccharides and the isolated fractions of the Agaricus blazei Murill, cultivated in SÃo Paulo (Cog-SP) were carried out in a second stage of the research. The isolated purified polysaccharides, after analyses of the constituents, were characterized and its properties in solutions were investigated, taking into consideration physical-chemical parameters and rheological properties. Furthermore, biological assays were also carried out for evaluation in the case of therapeutic activities. The analyses by 1H and 13C NMR made evident the presence of b glucans (1Â6) and a(1Â4), which the glucana b(1Â6) was predominant. The presence of glucans a(1Â4) were greater in relation to the presented content by Cog- Ce. The glucose monosaccharides and the mineral phosphorus element were also predominants in Cog-SP, in relation to the sugars and the minerals present respectively. The greater protein content and the smallest carbohydrate content were found for the purified polysaccharides of Cog-SP when compared to the Cog-Ce. Glucans b(1Â6) were isolated through the specific purification procedure with the use of Timol. FTIR and 1H, 13C NMR and the bidimensional COSY and HMQC, confirmed the purity of the material in the b(1Â6) configuration, with indication of the link to protein group. The study of purified polysaccharides in solutions showed compounds with high molecular weight. The confirmation of random coils was strongly suggested by light scattering, which was, probably, due to the presence of protein and mineral elements. Low viscosities were observed in the polysaccharides when compared to those of the glucans traditionally used in foods. Rheological measurements demonstrated a Newtonian behavior of the materials. Physical-chemical parameters, such as surface tension and critical micelle concentration (cmc), as well as others, demonstrated similar characteristics to those found for polymers with tensoactive properties. Due to these characteristics, the purified polysaccharides were tested in relation to the solubilizing capacity using the poorly water soluble drug griseofulvin as a model solubilizate. The preliminary test suggest that these polysaccharides, in the gluco-protein form, in solution, are potentially useful to act as a solubilizer for aromatic drugs. The biological test carried out with the purified polysaccharides and/or proteoglucans, demonstrated that they present anti-tumoral activities in vitro, through inhibition of the replication of poliovirus and anti-tumoral in vivo against the Sarcoma 180.

Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-01T11:24:15Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2016-06-01T11:26:44Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-01T11:26:44Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Murilo Machado dos Anjos - 2015.pdf: 3279307 bytes, checksum: dc7ced1aa57b2f7b3078d3d7c37e0ae1 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2015-06-19 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The world's population sees aging and some diseases that become more common. Alzheimer's disease (AD) is a dementia caused by loss of cognitive function of the individual and drugs used in their treatment is based on the inhibition of the enzyme acetylcholinesterase (AChE). Cancer is a group of diseases that develop due to the disorderly proliferation of cells may be related to genetic factors as well as dietary habits and exposure to radiation, the treatment being based on three main techniques: surgery, radiation and chemotherapy. In this work we synthesized 15 compounds (11 chalcones and 4 imines), based on the condensation of Claisen-Smth, and they are characterized by NMR (1H and 13C), IV These compounds were submitted to acetylcholinesterase activity by the modified method of Elman, using CCD and Martson, in addition to the evaluation of cytotoxic tumorias lines SF-295 (glioblastoma - human), HL-60 (acute leukemia promielítica) and HCT-116 (colon). The compounds showed no activity for the enzyme AChE front of the methods employed, and this cause investigated using molecular modeling methods, which sought in the literature active compounds for this enzyme, containing resemblance with the structures synthesized in this work. 80 descriptors were calculated being submitted to statistical analysis (Fisher's weight) where the number of variables is reduced to 24 and these have been selected GAP and bond angle where it was observed that the values of the synthesized compounds, mostly It was found out of range for the active compounds. The previous modeling studies are not sufficient to determine the causes of inactivity of the compounds, being necessary to the realization of a structure and reactivity studies. The evaluation of the antitumor compounds presented become more positive as the MCH-1 / A população mundial veem envelhecendo e com isto algumas doenças tornam-se mais comum. A doença de Alzheimer (DA) é uma demencia causada pela perda da função cognitiva do indivíduo e as drogas empregadas no seu tratamento tem como base a inibição da enzima acetilcolinesteráse (AChE). O cancer é um conjunto de doenças que se desenvolvem pela multiplicação desordenada de células, pode estar relacionado com fatores genéticos como também hábitos alimentares e exposição à radiação, sendo o tratamento baseado em três principais técnicas: cirurgia, radioterapia e quimioterapia. Neste trabalho foram sintetizados 15 compostos (11 chalconas e 4 iminas), baseando-se na condensação de Claisen-Smth, sendo os mesmos caracterizados por RMN (1H e 13C) e I.V. Estes compostos foram submetidos à atividade anticolinesterásica pelo método modificado de Elman, utilizando-se CCD, e Martson, além da avaliação citotóxica para as linhagens tumorias SF-295 (glioblastoma - humano), HL-60 (leucemia promielítica aguda) e HCT-116 (colón). Os compostos não apresentaram atividade para a enzima AChE frente aos métodos empregado, sendo esta causa investigada utilizando métodos de modelagem molecular, onde buscou-se na literatura compostos ativos para esta enzima, que continham similiaridades com as estruturas sintetizadas neste trabalho. Foram calculados 80 descritores sendo estes submetidos à uma análise estátistica (peso de fisher) onde o número de variáveis foi reduzido para 24 e destas foram selecionadas o GAP e ângulo de ligação, onde observou-se que os valores dos compostos sintetizados, em sua maioria, estavam fora da faixa encontrada para os compostos ativos. Os estudos prévios de modelagem não são suficientes para determinar as causas da inatividade dos compostos, sendo necessário a realização de um estudo de estrutura e reatividade. A avaliação antitumoral dos compostos apresentou-se mais positiva, sendo as chalconas Mch-1 e Mch-7 ativas para duas linhagens celulares tumorais (HCT-116 e SF-265).

Submitted by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-05T19:30:57Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Erika Demachki (erikademachki@gmail.com) on 2015-03-05T19:33:23Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-05T19:33:23Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Afif Felix Monteiro - 2014.pdf: 8486450 bytes, checksum: 34a1a47b84a7dcbbf48150e8468d914b (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-03-31 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The Brazilian Savannah is rich in plant species, and that is why it is promising to study natural products (NPs) which can act as sources for the development of new drugs, such as chemotherapeutic and chemopreventive agents, and inhibitors of enzymes such as cathepsins, which are lysosomal proteases with beneficial functions but are also involved in pathological processes (cancer, arthritis, osteoporosis, immune disorders and viral infections). Although these enzymes have been studied as targets for drug development, few inhibitors based on NPs have been described in the literature. In this work the chemical-biological study of Hymenaea stigonocarpa was carried out in the search for potential secondary metabolites capable of inhibiting the activity of cathepsins K, L and V as well as the viability of tumor cells S-180 and Ehrlich. By means of chromatographic techniques, 5 substances were isolated from the leaf extract, which have not been previously reported to H. stigonocarpa: labd-7,13-dien-15-oic acid (I), labd-7-en-15-oic acid (II), ent-Δ13,14-labd-8-β-ol-15-oic acid (III), 4’,5,7-trihydroxy-3’,5-dimethoxyflavone (IV) and p-hydroxybenzoic acid (V), along with one substance obtained from the flower extract, which has not been described in the literature: 18-hydroxy-ent-halima-1(10),13-E-dien-15-oic acid (VI). Therefore, this study has contributed to enrich the knowledge of NPs produced by this species. The diterpenoids I and III were assayed for their cytotoxic potential, showing unsatisfactory IC50 values. However, studies have shown that labdane and halimane diterpenoids possess potent cytotoxic effect and that substance IV, isolated in this work, can be considered to have pronounced anticancer activity, making this species promising in the search for compounds capable of inhibiting tumor cells viability. Compounds I, III, III* (methyl ester of III), IV, V and VI were tested against cathepsins K, L and V. The most significant results were observed for compounds I, IV, V and VI against cathepsin V; I and V against the cathepsin L and I against cathepsin K. The inhibitory potency values of these compounds were determined and the most significant results were observed for compound IV (IC50 = 2.9 and 36.9 mM) against cathepsins V and L, respectively. Literature data have reported significant inhibitory activities for flavonoids against cathepsin K, indicating, together with the results obtained in this work, the need for further studies of H. stigonocarpa in the search for cysteine proteases inhibitors. / O Cerrado brasileiro, rico em espécies vegetais, torna-se promissor para estudos de produtos naturais (PNs) que possam atuar como fontes para o desenvolvimento de novos fármacos, como agentes quimioterapêuticos e quimiopreventivos, e inibidores de enzimas, tais como as catepsinas, proteases lisossomais com funções benéficas, porém atuando em processos patológicos (câncer, artrite, osteoporose, desordens imunológicas e infecções virais). Embora tais enzimas tenham sido estudadas como alvos para o desenvolvimento de fármacos, poucos inibidores baseados em PNs foram descritos na literatura. Assim, neste trabalho foi realizado o estudo químico-biológico de Hymenaea stigonocarpa, em busca de metabólitos secundários potenciais em inibir a atividade das catepsinas K, L e V, bem como a viabilidade celular das linhagens de células tumorais S-180 e Ehrlich. Através de técnicas cromatográficas, do extrato das folhas foram isoladas 5 substâncias, ainda não relatadas para H. stigonocarpa: ácido labd-7,13-dien-15-oico (I), ácido labd-7-en-15-oico (II), ácido Δ13,14-ent-labd-8-β-ol-15-oico (III), 4’,5,7-trihidroxi-3’,5-dimetoxiflavona (IV) e ácido p-hidroxibenzoico (V); e uma substância do extrato das flores, a qual ainda não está descrita na literatura: ácido 18-hidroxi-ent-halima-1(10),13-E-dien-15-oico (VI). Portanto, este estudo contribuiu para enriquecer o conhecimento sobre os PNs produzidos por esta espécie. Os diterpenoides I e III foram avaliados quanto aos seus potenciais citotóxicos, demonstrando valores de IC50 não satisfatórios. No entanto, estudos demonstraram que diterpenoides labdano e halimano possuem efeito citotóxico e consideraram a substância IV, isolada neste trabalho, como detentora de atividade anticâncer, tornando esta espécie promissora na busca por compostos capazes de inibir a viabilidade de células tumorais. Os compostos I, III, III* (éster de metila de III), IV, V e VI foram ensaiados frente às catepsinas K, L e V, sendo os resultados mais expressivos para os compostos I, IV, V e VI frente à catepsina V; I e V frente à catepsina L e I frente à catepsina K. Essas substâncias foram avaliadas quanto à potência inibitória, sendo os resultados mais significativos para o composto IV (IC50= 2,9 e 36,9 μM), frente às catepsinas V e L, respectivamente. Dados da literatura reportam atividades inibitórias para flavonoides frente à catepsina K, evidenciando, juntamente com os resultados obtidos, a necessidade de continuação dos estudos de H. stigonocarpa na busca por inibidores de cisteíno proteases.

Submitted by Napoleana Barros Martins (napoleana_martins@hotmail.com) on 2016-08-08T13:34:15Z No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:40:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-26T13:44:01Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação- Márcia Regina Pereira das Neves.pdf: 1414436 bytes, checksum: 0d8d84d35c876b0040aa1f5d3c6e67f9 (MD5) Previous issue date: 2016-03-21 / CAPES - Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Lately there has been a great interest in natural dyes due to problems of toxicity and biodegradability associated with the use of synthetic colorings. Colorants from fungal metabolites are still underexplored despite having a very attractive biotechnological potential. In this context, the aim of this study was to investigate the production of dyes and biological activity of sclerotiorin. Then in sequence, bioprocesses in a submerged solid media were realized in order to investigate the influence of the bioprocess factors in the production of colorants. The colorants produced were subjected to isolation methods (column chromatography, thin-layer chromatography), and identification of the chemical structure (nuclear magnetic resonance). The sclerotiorin dye was purchased commercially and it was evaluated their cytotoxic and antifungal activity. In relation to the bioprocesses, factors: sucrose, peptone, bioprocess time and orbital shaking had influence in the submerged bioprocesses, while only the time factor was shown to have influence on the bioprocess in a solid medium. It was not possible to isolate and identify colorants with strain P. sclerotiorum 2AV2, however the oleic acid was obtained as a major component in a colored fraction (PS 4.2). Finally, when performed sclerotiorin in bioassays, this compound demonstrated antitumor activity against the SKMEL-19, SKMEL-28, and MESA-DX cells. In addition, it can demonstrate the antifungal activity of sclerotiorin against the pathogenic fungus Cryptococcus neoformans. The biotechnological potential of the pigments produced by fungi is great and motivates further research that may result in new biotechnological products. / Ultimamente tem havido um grande interesse por colorantes naturais devido a problemas de toxicidade e biodegradabilidade associados ao uso de colorantes sintéticos. Os colorantes provenientes de metabólitos fúngicos ainda são pouco explorados apesar de apresentarem um potencial biotecnológico muito atraente. Nesse contexto, o objetivo deste trabalho foi investigar a produção de colorantes e atividade biológica de esclerotiorina. Em seguida, bioprocessos em meio submerso e sólido foram realizados com a finalidade de investigar a influência dos fatores de bioprocesso na produção dos colorantes. Os colorantes produzidos foram submetidos a metodologias de isolamento (cromatografia em coluna, cromatografia de camada delgada) e identificação da sua estrutura química (ressonância magnética nuclear). O colorante esclerotiorina foi adquirido comercialmente e avaliou-se a sua atividade citotóxica e antifúngica. Quanto aos bioprocessos, os fatores: sacarose, peptona, tempo de bioprocesso e agitação orbital tiveram influência nos bioprocessos submersos, enquanto que apenas o fator tempo demonstrou ter influência nos bioprocessos em meio sólido. Não foi possível isolar e nem identificar colorantes com a cepa P. sclerotiorum 2AV2, no entanto foi obtido o ácido oleico como componente majoritário em uma fração colorida (PS 4.2). Por fim, quando avaliada a esclerotiorina em bioensaios, essa demonstrou atividade antitumoral frente às linhagens SKMEL-19, SKMEL-28 e MESA-DX. Em acréscimo, pode-se demonstrar a atividade antifúngica da esclerotiorina frente ao fungo patogênico Cryptococcus neoformans. O potencial biotecnológico dos pigmentos produzidos por fungos é grande e motiva novas pesquisas que possam resultar em novos produtos biotecnológicos.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Socratea exorrhiza (Mart.) H. Wendland é conhecida popularmente como paxiuba. Esta Arecaceae ocorre naturalmente na região amazônica. É muito utilizada por caboclos e índios de Roraima, porém pouco estudada quanto ao perfil químico e biológico. Neste trabalho investigou-se o potencial bioativo dos extratos da parte externa e interna da raiz e do broto da raiz de S. exorrhiza, mediante testes de atividade citotóxica (Artemia salina Laech), antioxidante (DPPH) e antimicrobiana contra as bactérias (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 7002) e a levedura Candida albicans ATCC18804. Dos extratos mais ativos determinaram-se os teores de fenólicos e flavonóides por espectrofotometria. O processo de extração foi a quente em sistema de Soxhlet, usando solventes orgânicos de polaridades crescentes (hexano, clorofórmio, acetato de etila e metanol). Os resultados mostraram que os extratos acetato de etila da parte externa da raiz e do broto da raiz destacaram se nos testes de atividade citotóxica e antioxidante, sendo o do broto da raiz (DL50 473 e IC50 24,03 μg/mL) o mais ativo para os dois testes. A ação positiva desses extratos nas atividades biológicas pode estar relacionada à presença de flavonoides evidenciada pelo elevado teor encontrado (76,8% e 64,66%, respectivamente). Os extratos metanólicos da parte externa da raiz e do broto da raiz apresentaram alto poder inibitório frente à levedura C. albicans (halos de18 e 25 mm) respectivamente. Todos os extratos do broto da raiz apresentaram ação inibitória moderada contra o crescimento das bactérias Gram-negativas E. coli e P. mirabilis com halos que variaram entre 10 e 17 mm, sendo que o extrato metanólico do broto da raiz obteve alto poder inibitório no crescimento de P. mirabilis (halo 22 mm). A ação positiva dos extratos da parte externa da raiz e do broto da raiz contra bactérias Gram-negativas corrobora com o conhecimento tradicional, que preconiza a utilização das raízes de S. exorrhiza na medicina popular para o tratamento de doenças sexualmente transmissíveis, o que torna ainda maior o valor dos resultados obtidos. Outro dado importante obtido com trabalho é o novo registro de ocorrência de S. exorrhiza para o estado de Roraima. Os resultados aqui apresentados são inéditos e importantes na ampliação do conhecimento sobre esta palmeira, estimulando a continuidade de estudos mais aprofundados. / Socratea exorrhiza (Mart.) H. Wendland is popularly known as paxiuba. This Arecaceae occurs naturally in the rain forest. It is widely used by the locals and the native Indians of Roraima, however it is not as studied as in regards to its biological and chemical profile. In this work, it was investigated that the extracts of the bioactive potential of the outer and inner parts of the root and of the sprout from the root of S. exorrhiza, by cytotoxic activity tests (Artemia salina Laech), antioxidant (DPPH) and antimicrobial against bacteria (Staphylococcus aureus ATCC 6538, Escherichia coli ATCC 25922, Proteus mirabilis ATCC 7002) and with Candida albicans yeast ATCC18804. Among the most active extracts were determined the levels of phenolics and flavonoids by spectrophotometry method. The extraction process was heat by the Soxhlet method, using organic solvents of increasing polarity (hexane, chloroform, ethyl acetate and methanolic). extracts of the outer part of the root and the sprout from the root stood out on the cytotoxic activity and the antioxidant tests, being the sprout from the root (DL50 473 and IC50 24,03 μg/mL) the most active of the two tests. The positive Action of these two extracts on the biological activities can be related to the presence of flavonoids evidenced by the high content found on the of the outer part of the root extracts 76,8% and sprout from the root 64,66%. The methanolic extracts of the outer part of the root and the sprout from the root demonstrated high inhibitory power before the C. albicans yeast (halos of 18 and 25 mm) respectively. All the sprouts from the root extracts presented moderate inhibitory action against the growth of the Gram-negative E. coli and P. mirabilis bacteria with halos that varied between 10 and 17mm, and the methanolic extracts sprout from the root obtained high inhibitory power on the growth of P. mirabilis (halo 22 mm). The extracts‟ positive action of the outer part of the root and the sprout from the root against Gram-negative bacteria collaborates with the traditional knowledge that advocates the use of the S. exorrhiza roots in popular medicine for the sexually transmitted diseases (STD), which makes even higher the values of the results with these extracts. Another important finding in this work is the new record of occurrence of S. exorrhiza for the state of Roraima.The data herein presented is new and important in advancing knowledge about this palm tree, stimulating the continuity of deeper studies.

Foram isolados 37 fungos endofíticos de Viguiera arenaria (VA1 a VA37), sendo 32 oriundos de folhas e 5 de raízes. Os fungos foram classificados por métodos de biologia molecular, sendo Glomerella cingulata a espécie predominante. Os fungos foram cultivados em culturas fermentativas em duas etapas, em pequena escala, para obtenção dos extratos em AcOEt, BuOH e MeOH. Os extratos em AcOEt foram avaliados em ensaios antimicrobianos, citotóxicos frente a células leucemia T humana (JURKAT) e frente às enzimas GAPDH de Trypanosoma cruzi e APRT de Leishmania tarentolae. Diversos extratos apresentaram atividades biológicas significativas. Os perfis químicos dos extratos em AcOEt foram avaliados através de CLAE-UV e RMN 1H. Os fungos VA1 (Glomerella cingulata) e VA17 (Fusarium sp.), selecionados após as triagens química e biológica, foram cultivados em escala ampliada. A partir do extrato AcOEt do fungo VA1 foram isoladas duas substâncias, nectriapirona (I) e tirosol (II). A nectriapirona apresentou atividade citotóxica significativa contra células de leucemia T humana (linhagens JURKAT) e melanoma (linhagens B16F10). Ergosterol (III) foi isolado do extrato micelial metanólico do fungo VA1. A partir do extrato micelial metanólico do fungo VA5 (G. cingulata), cultivado em pequena escala, foi isolado o manitol (IV). Após do cultivo em escala ampliada do fungo VA17 (Fusarium sp.) foram isolados três derivados dicetopiperazinícos, um oriundo do extrato AcOEt, substância V, ainda não relatada na literatura, e dois do extrato micelial MeOH, fusaperazina B (VI) e substância VII, também inédita na literatura. O isolamento das substâncias foi realizado através de técnicas cromatográficas, como CC, CCDP e CLAE. As estruturas químicas foram elucidadas com auxílio de técnicas espectroscópicas (RMN 1H e 13C, HMQC, HMBC, NOE-diff) e espectrométricas (ESI-MS). Experimentos de modelagem molecular foram realizados com a fusaperazina B (VI), que corroboraram com os dados de NOE-diff, indicando que a conformação dobrada do anel dicetopiperazínico é a mais predominante. Foi ainda realizada avaliação do perfil químico dos extratos obtidos em pequena escala dos fungos classificados como G. cingulata, via CLAE e RMN 1H, verificando-se diferenças químicas significativas, o que pode sugerir variabilidade genética entre as linhagens. O tirosol (II) foi detectado na maioria dos extratos de G. cingulata. / A total of 37 endophytic fungi were isolated from Viguiera arenaria (VA1 to VA37), 32 from the leaves and 5 from the roots. Endophytes were classified by means of molecular biology methods, and Glomerella cingulata was the predominant species. The endophytes were cultured in a two step fermentative process in small scale to give the EtOAc, BuOH and MeOH extracts. The EtOAc extracts were submitted to antimicrobial assays, citotoxic assays against human leukemia T cells (JURKAT) and assays against two enzymes, GAPDH from Trypanosoma cruzi and APRT from Leishmania tarentolae. Several extracts showed promising activities in the bioassays. The chemical profiles of the EtOAc extracts were obtained through HPLC and 1H NMR. Endophytes VA1 (Glomerella cingulata) e VA17 (Fusarium sp.) were cultured in large scale after chemical and biological screenings. Nectriapyrone (I) and tirosol (II) were isolated from the EtOAc extract from VA1. Nectriapyrone showed high citotoxicity against leukemia T human cells (JURKAT) and melanoma cells (B16F10). Ergosterol (III) was isolated from the micelial MeOH extract of VA1. Mannitol (IV) was isolated from the micelial MeOH extract from the fungus VA5 (G. cingulata). Extracts from VA17 (Fusarium sp.), obtained in large scale, yielded three diketopiperazine derivatives. A novel derivative was isolated from the EtOAc extract (compound V). Two derivatives were obtained from the micelial MeOH extract, fusaperazine B (VI) and a new diketopiperazine (VII). The isolation of the compounds was carried out using chromatography techniques (column, prep. TLC, and HPLC) and the identification was achieved by spectroscopic (1D and 2D NMR) and spectrometric methods (ESI-MS). Molecular modeling experiments were carried out with fusaperazine B (VI), showing that the diketopiperazine ring is predominantly in the folded conformation, in agreement with NOE-diff experiments. Significant differences were observed in the HPLC profiles and 1H NMR spectra of the extracts from the G. cingulata strains, which might be related to genetic variability among the strains. Tirosol (II) was detected in the majority of G. cingulata extracts

O estudo fitoquímico dos extratos de plantas adultas e plântulas da espécie Piper reticulatum, coletada na Floresta Nacional de Carajás, levou ao isolamento de quatro amidas, incluindo diidrowisanidina, descrita previamente nesta espécie, wisanidina, (2E,4E)-N-isobutileicosa-2,4-dienamida, (3E,5E,14E)-N-pirrolidileicosa-3,5,14-trienamida (inédita em função da posição das insaturações da cadeia alquílica), uma lignana (siringaresinol) e uma nitrila (benzoato de cianobenzila), além de terem sido propostas as estruturas de oito amidas contendo longa cadeia alquílica, com base nos dados de cromatografia gasosa e líquida acoplada a espectrometria de massas. Os extratos e produtos naturais isolados foram avaliados quanto aos seus potenciais antifúngicos frente aos fitopatógenos Cladosporium cladosporioides e C. sphaerospermum e atividade inibidora da enzima acetilcolinesterase, sendo constatada forte atividade para as amidas em ambos ensaios, além de forte atividade para a nitrila contra C. sphaerospermum. Além disso, os extratos de plantas adultas e plântulas de P. reticulatum foram analisados através de EM (ESI+) e os dados analisados por PCA (análise dos componentes principais) e através de HCA (análise por agrupamento hierárquico) juntamente com a espécie P. amalago, filogeneticamente relacionada com P. reticulatum, P. crassinervium, P. solmsianum, P. fuligineum, P. gaudichaudianum, P. aduncum e P. tuberculatum, afim de uma distinção ou classificação de grupos seguindo parâmetros metabólicos. / The phytochemical study of extracts from adult plants and seedlings of the species Piper reticulatum, collected in the Carajás National Forest, afforded the isolation of four amides, including dihydrowisanidine, previously described from this species, wisanidine, (2E,4E)-N-2-isobutyleicosa-2,4-dienamide, (3E,5E,14E)-N-3,5,14-pyrrolidyleicosa-trienamide (novel based on the unsaturations position at the alkyl chain), a lignan (syringaresinol) and a nitrile (cianobenzyl benzoate) and, additionaly eigh amides containing long alkyl chain had their structures proposed based on gas and liquid chromatography coupled to mass spectrometry data. The extracts and the isolated natural products were evaluated for their potential antifungal activity against the phytopathogens Cladosporium cladosporioides and C. sphaerospermum and acetylcholinesterase inhibitory activity, being found strong activity for amides for both two tests, and strong activity for nitrile against C. sphaerospermum. In addition, extracts of adult plants and seedlings of P. reticulatum were analyzed by MS (ESI +) and by PCA (principal component analysis) and HCA (hierarchical cluster analysis) together with the species P. amalago, phylogenetically related to P. reticulatum, P. crassinervium, P. solmsianum, P. fuligineum, P. gaudichaudianum, P. aduncum and P. tuberculatum in order to distinguish or classify them according to the metabolic profile.

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Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The present work describes the synthesis of twenty-two new derivatives (4-25) from stigmasterol (1) and seven new derivatives (26-32) from ursolic acid (2) via esterification and coupling reactions with different amino acids. All the structures of the compounds were confirmed by 1H and 13C NMR. The derivatives were tested for their antimicrobial activity, antitumor activity against cancer cells HT -29 (colorectal) and inhibition of POP, AChE and BChE enzymes. In antimicrobial activity among the compounds tested, ursolic acid (1) showed the greatest potential for inhibition. The results obtained from enzyme inhibition tests were satisfactory, generally the activities of the starting compounds 1 and 2 were increased after the introduction of the amino acids. Among the derivatives evaluated, ursolic-proline-proline-OH acid (32) showed the highest inhibitory capacity of AChE and BChE enzymes and may be considered a dual cholinesterase inhibitor, which can provide greater efficacy in the treatment of Alzheimer's disease. In the evaluation of the antitumor effect, after the first 24 h, most of ursolic acid derivatives showed inhibition effect in cell viability between 33.7 and 70%. After 72 h, the derivative 32 showed the best performance because it did not increase the number of viable cells at any concentration tested, indicating that this compound may be a candidate for antitumor drug. / O presente trabalho descreve a síntese de vinte e dois novos derivados (4 - 25) do estigmasterol (1) e sete novos derivados (26 - 32) do ácido ursólico (2) através de reações de esterificação e de acoplamento com diferentes aminoácidos. Todas as estruturas dos compostos foram confirmadas por RMN 1H e RMN 13C. Os derivados foram testados quanto à sua atividade antimicrobiana, atividade antitumoral frente à célula cancerígena HT-29 (colorretal) e de inibição das enzimas POP, AChE e BChE. Na atividade antimicrobiana, dentre os compostos testados, o ácido ursólico (1) demonstrou o maior potencial de inibição. Os resultados obtidos nos ensaios de inibição enzimática foram satisfatórios, geralmente ocorrendo um aumento da atividade dos compostos de partida 1 e 2 após a introdução dos aminoácidos. Dentre os derivados avaliados, o ácido ursólico-prolina-prolina-OH (32) apresentou a maior capacidade inibitória das enzimas AChE e BChE, podendo ser considerado um inibidor colinesterásico dual, o que pode proporcionar maior eficácia no tratamento da doença de Alzheimer. Na avaliação do efeito antitumoral, após as primeiras 24 h, a maioria dos derivados do ácido ursólico demonstrou efeito de inibição da viabilidade celular entre 33,7 e 70 %. Após 72 h, o derivado 32 foi o que apresentou melhor desempenho, pois não aumentou o número de células viáveis em nenhuma concentração testada, o que indica que este composto pode ser um candidato a fármaco antitumoral.

Hanusová P.: Alkaloids of Amaryllidaceae family: isolation, structural identification, biological activity. III. Diploma thesis, Charles University, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové, Department of Pharmaceutical Botany and Ecology, Hradec Králové, 2017. For phytochemical study was selected plant cultivar Narcissus cv. PROFESSOR EINSTEIN. The aim of the work was to isolate Amaryllidaceae alkaloids in pure form and screening of their biological activities. Summary alkaloidal extract was prepared from 34 kg of fresh bulbs and separated by column chromatography. Preparative TLC and crystallization were used for the isolation of substances from subfraction 6/1. Two pure alkaloids of galanthamine structural type were obtained. The alkaloids were identified based on their MS, NMR analysis and optical rotation as narwedine and lycoraminone. Lycoraminone has been isolated for the first time from natural source. Both substances were tested for their acetylcholinesterase, butyrylcholinestease and prolyl oligopeptidase inhibition activity. Anticancer activity against two gastrointestinal cancer cell lines Caco-2 and HT-29 (colorectal adenocarcinoma) and antimalarial activity has been also measured. Unfortunately, none of isolated alkaloids showed some significant activity in biological assays. Keywords:...