Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, 2007. / Submitted by Raquel Viana (tempestade_b@hotmail.com) on 2009-11-23T17:34:03Z No. of bitstreams: 1 2007_AdrianaMarquesAlmeidaLuz.pdf: 2670614 bytes, checksum: 7ec9ce9843e16ed11be9b1631ba90937 (MD5) / Approved for entry into archive by Carolina Campos(carolinacamposmaia@gmail.com) on 2009-12-03T17:14:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2007_AdrianaMarquesAlmeidaLuz.pdf: 2670614 bytes, checksum: 7ec9ce9843e16ed11be9b1631ba90937 (MD5) / Made available in DSpace on 2009-12-03T17:14:08Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2007_AdrianaMarquesAlmeidaLuz.pdf: 2670614 bytes, checksum: 7ec9ce9843e16ed11be9b1631ba90937 (MD5) Previous issue date: 2007 / Os bisfosfonatos (BP) são medicamentos efetivos para o controle de várias doenças ósseas, são recomendados como coadjuvantes no tratamento de pacientes portadores de mieloma múltiplo e com metástases ósseas de doenças malignas. Sua ação basicamente é de inibir a reabsorção óssea. Este estudo foi desenvolvido visando caracterizar a osteonecrose através da avaliação clínica e radiográfica de pacientes que procuraram por atendimento na Clínica de Estomatologia e Centro de Câncer Bucal da Divisão de Odontologia do HUB. Um total de quatro homens e 10 mulheres, com idade média de 66,4 anos, que usavam pamidronato ou ácido zoledrônico ou fizeram uso dos dois BP por mais de um ano. As lesões de osteonecrose foram avaliadas quanto à sua localização (mandíbula ou maxila), quanto à extensão da exposição óssea e sua associação com fatores locais. Os resultados do tratamento oferecido aos pacientes para a osteonecrose foram qualificados e um estudo estatístico realizado correlacionando as diversas variáveis. As alterações imaginológicas foram detalhadas. Concluiu-se que: todos os pacientes avaliados tiveram um fator local envolvido para desencadear a osteonecrose; o tempo de uso de BP é fator decisivo para o desenvolvimento da osteonecrose; quando o ácido zoledrônico é usado seqüencialmente ao pamidronato existe uma tendência de piora do quadro clínico; a radiografia panorâmica ajuda no diagnóstico, sendo que a tomografia computadorizada oferece melhores recursos para delimitar a extensão da lesão. Constatou-se ainda que medidas apropriadas devem ser implementadas para reduzir o risco e controlar com eficiência a osteonecrose em pacientes portadores de neoplasias malignas, usuários de BP. ______________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Bisphosphonates (BP) are effective drugs for various bone diseases control, they are recommended as adjuvant therapy in the multiple myeloma and bone metastasis from solid tumors patients. BP’s action is basically to inhibit bone resorption. This study was developed aiming to characterize jaw BP’s osteonecrosis through clinical and radiographical evaluation of patients who were looking for care at the Stomatology Clinic and the Oral Cancer Center on the Dentistry Division in the University Hospital of Brasilia. A total of four men and ten women, in the average of 66.4 years old, who have used pamidronato or zoledronic acid or both BP for more than a year. Osteonecrosis’ lesions were evaluated on their location (mandible or maxilla), as to the bone exposure extent and its association with local factors. The results of treatment offered to patients were qualified and a statistical study done about the different variables correlations. The radiographic changes were detailed. This study’s conclusions are: all evaluated patients had a local factor involved that unchained the osteonecrosis; BP’ time use is a decisive factor for the osteonecrosis development; when the zoledronic acid is used sequentially to pamidronate exist a trend of osteonecrosis worsening, a panoramic radiograph aid in the diagnosis, and the computed tomography offers better resources to limit the osteonecrosis extent. Appropriate measures must be implements to reduce the risks and control efficiently the bisphosphonate-related jaw osteonecrosis in patients with malignancies.

La alta afinidad de los bisfosfonatos (BPs) por la hidroxiapatita del hueso y la capacidad que tienen para inhibir la resorción ósea hace que sean el medicamento de elección para la prevención y el tratamiento de enfermedades donde la acti-vidad osteoclástica se encuentra exacerbada. Sin embargo, el mecanismo de acción preciso de los BPs, principalmente en osteoblastos, aún no ha sido completamente elucidado. En el presente trabajo de tesis se investigó la existencia de una entidad receptora para el amino-BP Alendronato (ALN) en células osteoblásticas ROS 17/2.8, a partir del cual se induce un mecanismo de transducción de señales intracelulares. Además, se estudió la modulación por ALN de las cascadas de señalización de las proteínas quinasas activadas por mitóge-nos (MAPKs), y su participación en la proliferación de estas células. Los estudios realizados demuestran que las células osteoblásticas presentan un sitio de unión específico para el ALN, que es reversible, saturable y de alta afinidad. Mediante ensayos de ligado en células (HeLa) que no expresan conexina 43 (Cx43), se determinó que esta proteína no es necesaria para la unión del BP a la célula. Además, el ligado específico en osteoblastos cuya Cx43 basal se trató con desacoplantes de hemicanales demostró que la formación del conexón tampoco es necesaria para la unión del BP a la célula. Adicio-nalmente, se comprobó en ambas líneas celulares que el BP es capaz de ingresar, por un mecanismo aún no estudiado, observándose mayor distribución en citoplasma y región perinuclear. El desplazamiento de ALN ligado observado en presencia de sustratos de fosfatasas, evidenció a estas enzimas como posibles moléculas blanco de BP. A su vez, se demostró por primera vez la expresión basal de proteínas tirosina fosfatasas (PTPs) receptoras de membrana y citoplas-máticas en osteoblastos y se observó que ALN inhibió la actividad de todas las PTPs estudiadas, al igual que el conoci-do inhibidor de PTPs, ortovanadato. Tratamientos a tiempos cortos con ALN promovieron la fosforilación de las MAPKs ERK1/2, ERK5, p38 y p46 JNK, en forma dependiente del tiempo. De la misma manera que los inhibidores de fosfatasas, ortovanadato y fluoruro de sodio, el BP produjo un aumento en la proliferación, tanto de células ROS 17/2.8 como de aquellas que no expresan Cx43, a 48 h de tratamiento en forma dependiente de la dosis. Estos resultados en conjunto indican que si bien esta proteína es requerida en la acción anti-apoptótica del BP en osteocitos y osteoblastos según estudios previos, no es necesaria para el ligado de ALN a la célula como tampoco para su efecto proliferativo. Los resul-tados presentados en este trabajo de tesis son aportes originales al conocimiento del mecanismo de acción de los amino-BPs en células osteoblásticas y podrían ser de relevancia para la mejora de las terapias preventivas de enfermedades metabólicas óseas frecuentes. / The high affinity of bisphosphonates (BPs) for hydroxyapatite and their ability to inhibit bone resorption makes them the drug widely used in the clinic for the prevention and treatment of diseases in which osteoclast activity is exacer-bated. However, the precise mechanism of action of BPs, particularly in osteoblasts, has not yet been completely understood. In this thesis work it was investigated the existence of a receptor entity for the amino-BP alendronate (ALN) in ROS 17/2.8 osteoblastic cells, from which it induces a mechanism of intracellular signal transduction. In addition, the modulation of mitogen-activated protein kinases (MAPKs) signaling pathways induced by ALN and their involvement in the proliferation of osteoblasts were studied. The results reported here provide strong evidences that osteoblastic cells present a specific binding site, which is reversible and satu-rable, with high affinity for ALN. Binding assays in cells (HeLa) that do not express connexin 43 (Cx43), demonstrated that this protein is not necessary for BP binding to the cell. Furthermore, specific ALN binding to osteoblasts treated with agents that disassemble Cx43 hemichannels showed that the pore formation is not either required for BP binding to the cell. Additionally, both cell lines internalized ALN from solution, by a mechanism not yet studied, showing a wide distribution in cytosol and peri-nuclear region. The displacement of ALN bound to ROS 17/2.8 cells by phosphatases substrates, suggests that these enzymes may be molecular targets. Moreover, it was demonstrated for the first time the basal expression of cytoplasmic and receptor-like protein tyrosine phosphatase (PTPs) in osteoblasts. Additionally, like the most frequently used PTP inhibitor, orthovanadate; ALN inhibited the phosphatase activity of all the PTPs evaluated. Short-term treatment with BP increased phosphorilation of ERK1/2, ERK5, p38 and p46 JNK MAPKs in a time-dependent manner. Like the PTPs inhibitors, orthovanadate and sodium fluoride, the BP induced an increase in osteoblastic cells proliferation, as well as in cells that do not express Cx43, in a dose-dependent manner after 48 h of treatment. These results altogether indicate that Cx43 is not necessary for the BP binding to the cell and the proliferative effect, even though this protein is required for the antiapoptotic action of ALN on osteoblasts and osteocytes. The results presented in this thesis work are original contributions to the knowledge of amino-BP mechanism of action on osteoblastic cells and may be of relevance to the improvement of the preventive therapies applied for common bone diseases.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / Fundação de Apoio à Pesquisa do Distrito Federal (FAP-DF). / INTRODUÇÃO: Vários aspectos relacionados à osteonecrose por medicação ainda não foram completamente esclarecidos, inclusive a patogênese da doença. Muitos modelos animais foram desenvolvidos para estudar essa condição, que tem potencial de provocar significativa morbidade aos pacientes. Nesse contexto, diante da complexidade dessa doença, há necessidade de maior compreensão a respeito dos mecanismos envolvidos na etiopatogenia da osteonecrose. OBJETIVO: Caracterizar histopatologicamente possíveis alterações provocadas pelo ácido zoledrônico em hemimandíbulas de ratos na ausência de trauma. MÉTODO: 40 ratos Wistar foram divididos em dois grupos: experimental, composto por 20 animais, receberam 66μg/kg de ácido zoledrônico, três vezes por semana, durante três semanas; e controle, composto por 20 animais, que receberam soro fisiológico em dosagem análoga à administrada no grupo experimental. Os animais foram submetidos à exodontia do primeiro molar inferior esquerdo e eutanasiados após seis semanas. As hemimandíbulas contralaterais ao trauma, do lado direito, foram submetidas a processamento histológico e analisadas histopatologicamente e por meio de histoenzimologia TRAP e histomorfometria. RESULTADOS: Durante o experimento, houve a perda de 4 animais e a exclusão de mais 4. Assim, foram analisadas 32 hemimandíbulas, sendo que 18 pertenciam ao grupo experimental e 14 ao controle. Não foram constatadas extensas áreas necróticas, tampouco infiltrado inflamatório e colônias bacterianas. Reação periosteal estava presente nas hemimandíbulas de apenas três animais do grupo experimental. Entretanto, foi observado aumento da densidade óssea volumétrica, do número de osteoclastos morfologicamente alterados e de focos de necrose no grupo experimental em relação ao controle. Também houve redução da infiltração gordurosa da medula óssea no grupo experimental em relação ao controle. CONCLUSÃO: A administração de ácido zoledrônico foi suficiente para induzir alterações histopatológicas em hemimandíbulas de ratos. Os achados sugerem que o fármaco promove alteração na fisiologia e remodelação óssea, antes da manifestação clínica da doença (caracterizada por osso exposto) e mesmo na ausência de trauma (que é considerada o principal fator de risco para estimular a manifestação da osteonecrose). / INTRODUCTION: Several aspects related to medication-related osteonecrosis have not yet been fully understood, including the pathogenesis of the disease. Many animal models have been developed to study this condition, which has the potential to cause significant morbidity in patients. In this context, in view of the complexity of this disease, there is a need for greater understanding of the mechanisms involved in the pathogenesis of osteonecrosis. PURPOSE: To characterize histopathologically possible alterations caused by zoledronic acid in hemimandíbulas of rats in the absence of trauma. METHODS: 40 Wistar rats were divided into two groups: experimental, composed by 20 animals which received 66 μg / kg zoledronic acid three times a week for three weeks; and control, composed by 20 animals which received saline solution in a dose analogous to that administered in the experimental group. The animals were submitted to the first lower left molar extraction and euthanized after six weeks. The hemimandibula contralateral to the trauma, on the right side, were submitted to histological processing and analyzed histopathologically and by histoenzimologia TRAP and histomorphometry. RESULTS: During the experiment, 4 animals died and 4 were excluded. Thus, 32 hemimandibulae were analyzed, 18 of which belonged to the experimental group and 14 to the control group. No extensive necrotic areas, no inflammatory infiltrate, and no bacterial colonies were found. Periosteal reaction was present in the hemimandibula of only three animals in the experimental group. However, there was an increase in volume bone density, number of morphologically altered osteoclasts and foci of necrosis in the experimental group in relation to the control group. There was also a reduction of fatty infiltration of the bone marrow in the experimental group in relation to the control. CONCLUSION: The administration of zoledronic acid was able to induce histopathological changes in the hemimandibula of rats. The findings suggest that the drug promotes changes in bone physiology and remodeling, prior to the clinical manifestation of the disease (characterized by exposed bone) and even in the absence of trauma (which is considered the main risk factor for stimulating the manifestation of osteonecrosis).

Submitted by Etelvina Domingos (etelvina.domingos@ufpe.br) on 2015-04-08T18:57:45Z No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Marina Lins Maymone de Melo.pdf: 897152 bytes, checksum: bced8c7adc190105e134586fa6da3fec (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T18:57:45Z (GMT). No. of bitstreams: 2 DISSERTAÇÃO Marina Lins Maymone de Melo.pdf: 897152 bytes, checksum: bced8c7adc190105e134586fa6da3fec (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / REUNI-UFPE / O objetivo deste estudo foi comparar, em modelo animal, o tratamento da osteonecrose dos maxilares induzida por bisfosfonatos (OMIB) realizado por cirurgia com laser Er:YAG com a cirurgia convencional. Foi realizado um estudo controlado experimental in vivo, utilizando 12 ratos Wistar machos, divididos em três grupos: controle (C), cirurgia convencional (CONV) e cirurgia a laser (LAS). Os animais foram tratados por 12 semanas com uma injeção intra-peritoneal semanal utilizando soro fisiológico na dosagem de 0,1ml/100g (grupo C) ou ácido zoledrônico (ZA) com doses de 0,15mg/Kg (grupos CONV e LAS). Os animais foram submetidos a exodontia de primeiro e segundo molares mandibulares para indução da OMIB, e então tratados com curetagem (grupo CONV) ou ablação a laser de Er:YAG (grupo LAS). Após a eutanásia, as mandíbulas foram removidas, fixadas em formol a 10% e analisadas através microtomografia computadorizada (microCT) para avaliação do padrão de trabeculado e densidade óssea. Os espécimes foram então processados e corados em HE para avaliação microscópica.A análise das imagens do microCT mostrou presença de sequestros ósseos, com aumento dos espaços medulares do osso esponjoso no grupo CONV. O trabeculado do grupo LAS apresentou padrão semelhante ao grupo C. A densidade óssea não apresentou diferença estatisticamente significante entre os grupos. A análise microscópica evidenciou reparo ósseo alveolar avançado (acima de 60%) em todos os animais do grupo C e 75% do grupo LAS, sendo ausente em 50% do grupo CONV. O laser de Er:YAG apresenta-se como uma importante estratégia terapêutica para o tratamento cirúrgico da OMIB, sendo superior à curetagem.

SILVA, Paulo Goberlânio de Barros. Avaliação das alterações sistêmicas e hematológicas em modelo experimental de Osteonecrose dos Maxilares Induzida por Ácido Zoledrônico. 2013. 81 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2013. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2014-09-23T16:24:59Z No. of bitstreams: 1 2013_dis_pgbsilva.pdf: 1787229 bytes, checksum: be6ecfe31416cd6507bdd383c44d63f8 (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2014-09-23T16:27:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2013_dis_pgbsilva.pdf: 1787229 bytes, checksum: be6ecfe31416cd6507bdd383c44d63f8 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-09-23T16:27:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2013_dis_pgbsilva.pdf: 1787229 bytes, checksum: be6ecfe31416cd6507bdd383c44d63f8 (MD5) Previous issue date: 2013 / Introduction: Several mechanisms have been proposed to explain the induced Osteonecrosis of the Jaw Bisphosphonates (OMB), but there is no consensus about the pathophysiological development of this condition. Objective: To evaluate the effect of systemic and hematologic changes that may interfere with the development of OMB. Methods: After three consecutive weekly venous infusions of zoledronic acid (AZ) (0.04, 0.20, 1,00mg / kg) or saline (control), male Wistar rats (n = 6-7) had their first molars left extracted four weeks after the last administration. A week after extraction extra infusion of AZ or saline (control) was performed, and the animals were sacrificed 28 days after the extraction. The animals were weighed and blood was collected weekly (analysis of variance in body weight and hematologic analysis, respectively) furthermore jaws, liver, spleen, kidney and stomach were removed and examined microscopically. Results: Obervou0se bone necrosis in animals treated with 0.20 and 1.00 mg / kg of AZ under the radiographic and histological aspects (p <0.0001). In both groups there was a significant increase in the number of circulating leukocytes (p <0.0001) compared to the control group and the rates of anemia (p <0.0001) were also higher. There was no liver and kidney toxicity, however the spleen showed increased numbers of hemosiderin pigment deposition in both experimental groups (p = 0.0004), which also showed a significant gastric inflammatory changes (p = 0.0168). Conclusion: The OMB is directly associated with leukocytosis, anemia and probable (hematologic and organ-specific) systemic toxicity. / Introdução: Diversos mecanismos têm sido propostos para explicar a Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB), mas não há consenso acerca do desenvolvimento fisiopatológico dessa condição. Objetivo: Avaliar o efeito de alterações sistêmicas e hematológicas que possam interferir no desenvolvimento de OMB. Métodos: Após três infusões venosas semanais consecutivas de Ácido Zoledrônico (AZ) (0,04, 0,20, 1,00mg/kg) ou salina (controle), ratos Wistar machos (n=6-7) tiveram seus primeiros molares inferiores esquerdos extraídos quatro semanas após a última administração. Uma semana após exodontia foi realizada infusão extra de AZ ou salina (controle), sendo os animais sacrificados 28 dias após a exodontia. Os animais foram pesados e foi coletado sangue semanalmente (análise de variação de peso corpóreo e análise hematológica, respectivamente), além disso, mandíbulas, fígado, baço, rins e estômago foram removidos e analisados microscopicamente. Resultados: Obervou0se necrose óssea nos animais tratados com 0,20 e 1,00 mg/kg de AZ sob os aspectos radiográficos e histológicos (p<0.0001). Nesses dois grupos houve aumento significativo do número de leucócitos circulantes (p<0.0001) em relação ao grupo controle e os índices de anemia (p<0.0001) também se mostraram superiores. Não houve toxicidade hepática e renal, no entanto o baço apresentou número aumentado de deposição de pigmentos de hemossiderina nos dois grupos experimentais (p=0.0004), os quais apresentaram também significante alteração inflamatória gástrica (p=0.0168). Conclusão: a OMB está diretamente associada a leucocitose, anemia e provável toxicidade sistêmica (hematológica e órgão-específica).

OLIVEIRA, Camila Carvalho de. Avaliação do efeito da dexametasona e da nimesulida na quimionecrose do osso mandibular induzida por ácido zoledrônico em ratos. 2015. 119 f. Dissertação (Mestrado em Odontologia ) - Universidade Federal do Ceará. Faculdade de Farmácia, Odontologia e Enfermagem, Fortaleza, 2015. / Submitted by denise santos (denise.santos@ufc.br) on 2015-03-26T16:12:06Z No. of bitstreams: 1 2015_dis_ccoliveira.pdf: 4919157 bytes, checksum: aa591fd9a4ee1bf1b6b0a8d6e069c00f (MD5) / Approved for entry into archive by denise santos(denise.santos@ufc.br) on 2015-03-26T16:16:49Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2015_dis_ccoliveira.pdf: 4919157 bytes, checksum: aa591fd9a4ee1bf1b6b0a8d6e069c00f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-26T16:16:49Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2015_dis_ccoliveira.pdf: 4919157 bytes, checksum: aa591fd9a4ee1bf1b6b0a8d6e069c00f (MD5) Previous issue date: 2015 / Bisphosphonate-associated osteonecrosis of the jaw (OMB) has no defined pathophysiology, but has been linked to proinflammatory events. Dexamethasone (DEX) and nimesulide (NIM), steroidal and nonsteroidal anti-inflammatory agents (AIs), respectively, reduce inflammation mediators. The aim of this study was to evaluate the effect of dexamethasone and nimesulide in the chemonecrosis on jawbone associated with zoledronic acid (AZ) in rats. OMB was induced in male Wistar rats (n=40) by AZ administration and by extraction of the first left molar (OMB groups). DEX (0.04, 0.4, 4 mg/kg) or saline was administered, by gavage, 24 h, or NIM (10.3 mg/kg), 24 h and 12 h before each infusion of ZA, for eight weeks. Controls groups (n=40) received just treatment with AIs or saline. The body mass variation and hematological analyses were conducted weekly. Surgical time and number of fractured roots were measured to assess the difficulty of dental extraction. After the sacrifice (day 70), jaws and organs were excised. Digital x-rays of the jaws were made to measure the suggestive radiolucent area of necrosis and, later, histological slides were made (hematoxylin-eosin) to histomorphometric analysis. Kidney, liver, spleen and stomach were weighed, to express the organ index, and, after, these were submitted to histological processing for histopathological analysis. The group OMB DEX 4 mg/kg presented higher surgical time compared to saline. Radiographic analysis showed higher radiolucent area in the OMB groups compared to controls (p<0.05). Histomorphometric analysis revealed devitalized bone with of empty osteocytes lacunae, apoptotic osteoclasts, bacterial colonies and inflammatory infiltrate in the animals from AZ, whereas in the control animals, was visualized healing and new bone formation. The OMB DEX 0.4 and 4 mg/kg groups had the greatest number of bacterial colonies (p <0.05) and neutrophils when they were compared with the saline-OMB. Already on the OMB-Nimesulide group was seen less inflammatory infiltrate (p <0.05). The OMB groups showed anemia associated with leukocytosis, which was reduced by DEX administration. VMC analysis revealed lower weight of rats OMB treated with AIs compared to controls on day 13 (p <0.05). Treatments with DEX 4 mg/kg and NIM, associated or not to AZ, seemed cause worse damage in the stomach and liver. In the kidney, treatment with AI in OMB animals was observed numerous hyaline-cylinders. In the spleen, DEX caused atrophy of the white pulp, associated with splenic index. Thus, treatment with AIs was not effective in prevention OMB. AZ infusion was associated with the occurrence of anemia, leukocytosis, and weight loss in 13 days. / Osteonecrose dos Maxilares induzida por Bisfosfonatos (OMB) não possui fisiopatologia definida, porém tem sido associada a eventos pró-inflamatórios. Dexametasona (DEX) e nimesulida (NIM), anti-inflamatórios (AIs) esteroidal e não-esteroidal, respectivamente, reduzem mediadores da inflamação. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da dexametasona e da nimesulida na quimionecrose no osso mandibular associada ao ácido zoledrônico (AZ) em ratos. OMB foi induzida em ratos Wistar (n=40) por administração de AZ e exodontia do primeiro molar inferior (grupos OMB). Foram administradas, por gavagem, DEX (0,04; 0,4 e 4 mg/kg) ou salina 24 h, ou NIM (10,3 mg/kg) 24 e 12 h antes de cada infusão de AZ, por oito semanas. Grupos Controles (n=40) receberam apenas tratamento com AIs ou salina. Foram realizadas análises da variação de massa corpórea (VMC) e hematológica semanalmente. Tempo cirúrgico e número de fraturas radiculares foram medidos para avaliar a dificuldade de exodontia. Após o sacrifício (dia 70), mandíbulas e órgãos foram excisados. Com as mandíbulas, foram feitas radiografias digitais para mensuração da área radiolúcida sugestiva de necrose e, posteriormente, lâminas histológicas (hematoxilina-eosina) para análise histomorfométrica. Rim, fígado, baço e estômago foram pesados, para expressar o índice do órgão, e submetidos a processamento histológico para análise histopatológica. O grupo OMB DEX 4 mg/kg apresentou tempo cirúrgico superior em relação ao salina. Na análise radiográfica, houve maior área radiolúcida nos grupos OMB em relação aos controles (p<0,05). A análise histomorfométrica revelou osso desvitalizado, com lacunas de osteócitos vazias, osteoclastos apoptóticos, colônias bacterianas e infiltrado inflamatório nos animais que receberam AZ, enquanto que, nos controles, foi visto osso cicatricial e neoformado. Os grupos OMB-DEX 0,4 e 4 mg/kg apresentaram maior número de colônias bacterianas e polimorfonucleares neutrófilos quando comparado ao salina-OMB (p<0,05). Já no grupo OMB-Nimesulida foi visto menos infiltrado inflamatório neurofílico (p<0,05). A análise hematológica revelou que grupos OMB apresentaram alterações sugestivas de anemia, associada à leucocitose, que foi reduzida com o tratamento com DEX. A análise da VMC revelou menor peso de ratos OMB tratados com AIs em relação aos controles no dia 13 (p<0,05). Os tratamentos com DEX 4 mg/kg e NIM, associados ou não ao AZ, pareceram causar maiores danos em estômago e fígado. No rim, o tratamento com AIs em animais submetidos à OMB foram observados numerosos cilindros-hialinos, e no baço, a DEX causou atrofia da polpa branca, associado à redução do índice esplênico. Assim, os tratamentos com AIs não pareceram ser eficazes em prevenir a OMB. A infusão de AZ foi relacionada à ocorrência de anemia, leucocitose e perda de peso no 13º dia.

Submitted by Etelvina Domingos (etelvina.domingos@ufpe.br) on 2015-04-08T19:47:51Z No. of bitstreams: 2 TESE Talita Ribeiro Tenório de França.pdf: 2159437 bytes, checksum: a09cf062950b6f3702406267ef2fb752 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-04-08T19:47:52Z (GMT). No. of bitstreams: 2 TESE Talita Ribeiro Tenório de França.pdf: 2159437 bytes, checksum: a09cf062950b6f3702406267ef2fb752 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2014 / Introdução: Os principais fatores de risco locais para o desenvolvimento da osteonecrose associada ao uso bisfosfonatos (OABF) são a extração dentária e a presença de doença periodontal. Lesões periapicais crônicas são comuns na clínica odontológica, mas ainda não está totalmente esclarecido se a presença destas lesões pode ser um fator de risco para o desenvolvimento de OABF. O objetivo deste estudo foi determinar se lesões periapicais são fatores de risco para o desenvolvimento de osteonecrose em animais tratados com zolendronato. Métodos: Foram utilizados 40 ratos Wistar machos. Para induzir lesões periapicais, as polpas dos primeiros molares inferiores foram expostas usando uma broca esférica ½ acoplada a um motor de alta rotação. Em seguida, foram formados 8 grupos com 5 animais em cada um: G1- indução da lesão periapical (LP) e a administração intraperitoneal semanal (AIS) de solução salina (NaCl 0,9 %) durante 4 semanas; G2- indução LP e AIS de zolendronato (0,15 mg/kg/semana) durante 4 semanas; G3- indução da LP e AIS de solução salina por 8 semanas; G4- indução da LP e AIS de zolendronato por 8 semanas; G5- AIS de solução salina durante 4 semanas e posterior indução da LP; G6- AIS de zolendronato durante 4 semanas e posterior indução da LP; G7- AIS de solução salina durante 8 semanas e posterior indução da LP; G8- AIS de zolendronato durante 8 semanas e posterior indução da LP. Para mensurar o tamanho da LP foram realizadas tomografia computadorizada de feixe cônico (TCFC). Também foi realizada uma análise histomorfológica para determinar a intensidade do infiltrado inflamatório e a presença de necrose óssea. As análises estatísticas usadas foram o teste ANOVA e o Kruskal-Wallis. Resultados: Os grupos tratados com zolendronato mostraram tamanho da LP significativamente menor que o grupo tratado com NaCl 0,9% (p < 0,05). As lesões periapicais eram compostas por inflamação crônica variando de leve a moderada, sem diferença entre os grupos. Não foi observada necrose mandibular em todas as amostras analisadas. Conclusão: A presença de LP não representa um fator de risco importante para o desenvolvimento de OABF. Além disso, o tratamento com zolendronato não alterou a população de células de LP.

A periodontite é uma doença de natureza multifatorial e infecciosa, que resulta na inflamação e perda dos tecidos de suporte dos dentes. Essa inflamação é causada por bactérias associadas ao biofilme, causando a perda progressiva de inserção. Os bisfosfonatos são fármacos com capacidade de inibir a reabsorção óssea, atuando nas células clásticas. O presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos do alendronato, um bisfosfonato nitrogenado com grande potência antireabsortiva, na evolução da doença periodontal induzida em ratos, bem como a possível presença de necrose óssea no processo alveolar. Foram utilizados 48 ratos Wistar albinos, do sexo masculino, com 3 meses de vida e peso médio de 250g. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Alendronato (ALN) e Controle (CON). A periodontite foi induzida com a inserção de um fio de seda 4.0 no sulco gengival do segundo molar superior. Os ratos do grupo ALN, receberam doses diárias de 2,5 mg/kg durante 7 dias antes e 7, 14, 21 e 30 dias após a indução da doença; o grupo CON recebeu solução salina estéril. Nos tempos citados as maxilas foram fixadas, descalcificadas e incluídas em parafina ou resina Spurr. Os cortes foram corados com HE, para análise morfológica, e histomorfométrica. Alguns cortes foram submetidos à imuno-histoquímica para detecção de RANKL e OPG. Foi utilizado o método TRAP, marcador de osteoclastos e microscopia eletrônica de transmissão para análise ultraestrutural. O ALN inibiu a reabsorção da crista alveolar de todos os grupos tratados. As células clásticas apresentaram-se em estado latente. No grupo controle a crista alveolar foi reabsorvida e o TRAP revelou clastos ativos, achados confirmados pela microscopia eletrônica de transmissão. A expressão de RANKL, molécula ativadora da célula clástica, não foi inibida pela droga. A expressão de OPG foi aumentada nos animais tratados. Os animais do grupo tratado durante 21 e 30 dias, apresentaram sinais de osteonecrose na crista alveolar, como lacunas de osteócitos vazias e regiões exposta de osso. Os resultados demonstraram que o uso de alendronato durante a doença periodontal inibe a reabsorção óssea e que durante tempos prolongados pode gerar osteonecrose na região da crista óssea. / Periodontitis is an infectious disease of multifactor nature that results in the inflammation of the tissues supporting the teeth. This inflammation is caused by accumulation of biofilm and causes progressive insertion and bone loss. The bisphosphonates are drugs with the capability to inhibit the activity of clastic cells. The aim of this study was to investigate the effects of alendronate, a nitrogenated bisphosphonate with high antiresorptive power on experimental periodontal disease, and to analyze the possible presence of osteonecrosis in the rat alveolar process. Forty-eight male Wistar rats, three months old, with 250g weight were used. The animals were randomly divided into two groups: Alendronate (ALN) and Control (CON). The periodontitis was induced with a 4.0 silk wire inserted into the gingival sulcus around the right upper second molar. The ALN rats, received daily doses of 2.5 mg/kg alendronate (ALN) for 7 days before the induction of periodontitis; the treatment continued for additional 7, 14, 21 or 30 days. The CON rats, received sterile saline solution. In the time points cited, the maxillae were fixed, decalcified and embedded in Spurr resin or paraffin. The specimens were morphologically analyzed in HE stained sections, after which histomorphometry was carried out. Some stained sections were used for immunolabeling for RANKL and OPG. The osteoclasts were marker by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) histochemistry. The ultrathin sections were examined in a transmission electron microscope. ALN reduced the activity of osteoclasts and significantly decreased the resorption of the alveolar crest. In the control group the alveolar crest appeared resorbed, while TRAP showed active osteoclasts, findings confirmed by transmission electron microscopy. The expression of RANKL, an osteoclast-activating molecule, was not inhibited by the drug. The expression of OPG was increased in the treated animals. The animals of the group treated for 21 and 30 days showed signs of osteonecrosis of the alveolar crest, as empty osteocyte lacunae in the exposed bone regions. The results showed that the use of ALN for periodontal disease inhibited bone resorption; when it was administered for prolonged periods it can cause osteonecrosis in the bone crest area.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:59Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005-12-16Bitstream added on 2014-06-13T19:01:06Z : No. of bitstreams: 1 fernandes_rg_dr_sjc.pdf: 1447209 bytes, checksum: f3ae23b178b1c3e233c4acb1b08af663 (MD5) / Esta pesquisa avaliou o efeito do uso local do alendronato sódico, da hidroxiapatita e da associação alendronato mais hidroxiapatita em diferentes concentrações molares, no processo de reparação de defeitos ósseos em fêmures de ratos. Foi confeccionado no fêmur de 168 ratos (84 machos e 84 fêmeas) um defeito ósseo medindo 2,5mm de diâmetro. Estes animais foram divididos em grupos: controle, amido, alendronato um mol, alendronato dois moles, hidroxiapatita um mol, hidroxiapatita dois moles e alendronato mais hidroxiapatita, de acordo com o material de preenchimento utilizado. Nos animais do grupo controle o defeito ficou preenchido apenas pelo coágulo proveniente do defeito. Os animais foram sacrificados aos sete e 21 dias, quando o fêmur era removido, fixado e descalcificado, para a confecção de lâminas histológicas. Foi realizada análise histológica e histomorfométrica, e os dados obtidos foram submetidos à análise estatística ANOVA. Aos sete dias, observava-se trabéculas ósseas imaturas, contendo grandes osteócitos. Notava-se neoformação óssea em todos os grupos, exceto nos animais machos onde o alendronato se fazia presente. Nos grupos que receberam a hidroxiapatita, visualizava-se as imagens negativas dos grânulos da hidroxiapatita. Aos 21 dias, as trabéculas praticamente fechavam o defeito da maioria dos espécimes estudados. Estatisticamente, houve diferenças entre machos e fêmeas, entre os períodos de observação e com relação ao uso do alendronato. Concluiu-se que a aplicação local do alendronato sódico interferiu negativamente na reparação óssea, que a hidroxiapatita e o alendronato mais a hidroxiapatita não interferiram na reparação e que a reparação óssea foi maior nas fêmeas independentemente do período estudado. / This research evaluated the effect of the local use of sodium alendronate, of hydroxyapatite and the association alendronate more hydroxyapatite in different molars concentrations, in the repair of bone defects in femurs of mices. We made in the femur of 168 mices (84 males and 84 females) a bone defect measuring 2,5mm of diameter. We divided these animals in groups: control, starch, alendronate one mol, alendronate two mols, hydroxyapatite one mol, hydroxyapatite two mols and alendronate more hydroxyapatite, in accordance with the material of fulfilment used. In the animals of the control group, the defect was just filled by the clot originating from defect. The animals were sacrificed at seven and 21 days, when the femur was removed, fixed and decalcified, to making histologics laminae. Histological and histomorphometric analyses were performed and the results obtained were submitted to statistical analysis ANOVA. At seven days, it was observed immature bone trabeculae with larges osteocyties. It was noticed bone formation in all groups, exceptin the male animals where the alendronate was present. In the group that received hydroxyapatite, it was visualized negatives images of the hydroxyapatite's granules. At 21 days, the trabeculae practically closed the defect of most studied specimens. Statistically, there were differences between males and females, between the observation periods and with relationship of the alendronate use. It was concluded that the local application of sodium alendronate interfered negatively in bone repair, that the hydroxyapatite and alendronate more hydroxyapatite didn't interfere in the repair and that the bone repair was larger in the females independently of studied period.

A periodontite é uma doença de natureza multifatorial e infecciosa, que resulta na inflamação e perda dos tecidos de suporte dos dentes. Essa inflamação é causada por bactérias associadas ao biofilme, causando a perda progressiva de inserção. Os bisfosfonatos são fármacos com capacidade de inibir a reabsorção óssea, atuando nas células clásticas. O presente estudo teve como objetivo investigar os efeitos do alendronato, um bisfosfonato nitrogenado com grande potência antireabsortiva, na evolução da doença periodontal induzida em ratos, bem como a possível presença de necrose óssea no processo alveolar. Foram utilizados 48 ratos Wistar albinos, do sexo masculino, com 3 meses de vida e peso médio de 250g. Os animais foram divididos aleatoriamente em dois grupos: Alendronato (ALN) e Controle (CON). A periodontite foi induzida com a inserção de um fio de seda 4.0 no sulco gengival do segundo molar superior. Os ratos do grupo ALN, receberam doses diárias de 2,5 mg/kg durante 7 dias antes e 7, 14, 21 e 30 dias após a indução da doença; o grupo CON recebeu solução salina estéril. Nos tempos citados as maxilas foram fixadas, descalcificadas e incluídas em parafina ou resina Spurr. Os cortes foram corados com HE, para análise morfológica, e histomorfométrica. Alguns cortes foram submetidos à imuno-histoquímica para detecção de RANKL e OPG. Foi utilizado o método TRAP, marcador de osteoclastos e microscopia eletrônica de transmissão para análise ultraestrutural. O ALN inibiu a reabsorção da crista alveolar de todos os grupos tratados. As células clásticas apresentaram-se em estado latente. No grupo controle a crista alveolar foi reabsorvida e o TRAP revelou clastos ativos, achados confirmados pela microscopia eletrônica de transmissão. A expressão de RANKL, molécula ativadora da célula clástica, não foi inibida pela droga. A expressão de OPG foi aumentada nos animais tratados. Os animais do grupo tratado durante 21 e 30 dias, apresentaram sinais de osteonecrose na crista alveolar, como lacunas de osteócitos vazias e regiões exposta de osso. Os resultados demonstraram que o uso de alendronato durante a doença periodontal inibe a reabsorção óssea e que durante tempos prolongados pode gerar osteonecrose na região da crista óssea. / Periodontitis is an infectious disease of multifactor nature that results in the inflammation of the tissues supporting the teeth. This inflammation is caused by accumulation of biofilm and causes progressive insertion and bone loss. The bisphosphonates are drugs with the capability to inhibit the activity of clastic cells. The aim of this study was to investigate the effects of alendronate, a nitrogenated bisphosphonate with high antiresorptive power on experimental periodontal disease, and to analyze the possible presence of osteonecrosis in the rat alveolar process. Forty-eight male Wistar rats, three months old, with 250g weight were used. The animals were randomly divided into two groups: Alendronate (ALN) and Control (CON). The periodontitis was induced with a 4.0 silk wire inserted into the gingival sulcus around the right upper second molar. The ALN rats, received daily doses of 2.5 mg/kg alendronate (ALN) for 7 days before the induction of periodontitis; the treatment continued for additional 7, 14, 21 or 30 days. The CON rats, received sterile saline solution. In the time points cited, the maxillae were fixed, decalcified and embedded in Spurr resin or paraffin. The specimens were morphologically analyzed in HE stained sections, after which histomorphometry was carried out. Some stained sections were used for immunolabeling for RANKL and OPG. The osteoclasts were marker by tartrate-resistant acid phosphatase (TRAP) histochemistry. The ultrathin sections were examined in a transmission electron microscope. ALN reduced the activity of osteoclasts and significantly decreased the resorption of the alveolar crest. In the control group the alveolar crest appeared resorbed, while TRAP showed active osteoclasts, findings confirmed by transmission electron microscopy. The expression of RANKL, an osteoclast-activating molecule, was not inhibited by the drug. The expression of OPG was increased in the treated animals. The animals of the group treated for 21 and 30 days showed signs of osteonecrosis of the alveolar crest, as empty osteocyte lacunae in the exposed bone regions. The results showed that the use of ALN for periodontal disease inhibited bone resorption; when it was administered for prolonged periods it can cause osteonecrosis in the bone crest area.