Orientador : Prof. Dr. Ivan Roque de Barros Filho / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 31/03/2016 / Inclui referências : f. 25-28;41-45;47-53 / Área de concentração : Ciências veterinárias / Resumo: O deslocamento de abomaso (DA) é uma doença metabólica que acomete, em sua maioria, vacas leiteiras de alta aptidão leiteira. O início da lactação é o momento em que ocorre uma inversão de metabolismo anabólico para catabólico, sendo os primeiros 30 dias os mais críticos para o aparecimento de diversas doenças, entre elas deslocamento de abomaso, hipocalcemia, cetose, endometrite, entre outras. Primeiramente, apresenta-se um capítulo de revisão sobre os principais fatores envolvidos no desenvolvimento de DA e possíveis técnicas cirúrgicas para tratamento. Posteriormente, relata-se um levantamento epidemiológico da incidência de DA no município de Palmeira, na região dos Campos Gerais no Estado do Paraná. Foram levantados dados de 135 casos de DA ocorridos naturalmente em 39 rebanhos leiteiros da região, num total de 6.454 animais e destes, 2.987 em lactação. O período de coleta se deu de julho de 2012 a junho de 2015, sendo a incidência de 2,09% do número total de animais. O DA foi classificado com deslocamento de abomaso a esquerda (DAE) e deslocamento de abomaso a direita (DAD), tendo o primeiro ocorrido em 127 (94,07%) casos e o segundo em 8 (5,93%). Sendo a região estudada uma importante bacia leiteira do Estado do Paraná, o aparecimento de doenças metabólicas, dentre elas o DA, deve demandar cuidados especiais para amenizar os custos e prejuízos causados por esses eventos. Palavras-chave: doença metabólica, atividade leiteira, vacas, produção / Abstract: Displacement of abomasum (DA) is a metabolic disease that mostly affects dairy cows with high dairy capabilities. The beginning of lactation is the time when an inversion from an anabolic metabolism into a catabolic metabolism occurs, and the first 30 days are the most critical for the outbreak of various diseases, among which displacement of abomasum, hypocalcemia, ketosis, endometritis, among others. First, a review chapter is presented on the main factors involved in the development of DA and potential surgical techniques for the treatment. Next, an epidemiological survey on the incidence of DA in the municipality of Palmeira, in the region of the General Fields in the State of Paraná is reported. Data from 135 cases of DA have been collected which naturally occurred among 39 dairy herds in the region, totalizing 6,454 animals where 2,987 thereof are lactating dairy cows. The collection period was from July 2012 to June 2015, and there was an incidence of 2.09% on the total number of animals. The DA was classified as left displacement of abomasum (LDA) and right displacement of abomasum (RDA), where the first one occurred in 127 (94.07%) cases and the latter in 8 (5.93%). Since the study area is a major dairy production basin in the State of Paraná, the outbreak of metabolic diseases, among them the DA, should require special attention to mitigate costs and losses caused by such events. Keywords: metabolic disease, dairy activity, cows, production

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-09-28Bitstream added on 2014-06-13T19:30:03Z : No. of bitstreams: 1 loureiro_mg_me_botfmvz.pdf: 397974 bytes, checksum: 0f9aa9e1b52dd5ba24b3c6f4f7257ffe (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A Dermatite Digital Papilomatosa (DDP) é uma enfermidade com etiologia bacteriana associadas às espiroquetas. O tratamento consiste na administração de antimicrobianos parenterais ou tópicos, destacando-se especialmente as tetraciclinas. Os objetivos deste trabalho foram analisar e comparar a eficiência do tratamento tópico e sistêmico com oxitetraciclina em vacas acometidas por DDP, e a presença de resíduos deste antimicrobiano no leite e suas concentrações no líquido sinovial e plasma. Foram utilizadas 8 vacas no grupo 1 tratadas topicamente e 8 no grupo 2 tratadas por via sistêmica . As amostras foram coletadas nos momentos M0: anterior aos tratamentos, M1: 6 horas pós-tratamento, M2: 12 horas após, e em intervalos de 12 horas até o M23. A eficiência dos tratamentos foi avaliada através do grau de claudicação e da extensão da lesão. As concentrações do antimicrobiano de oxitetraciclina foram determinadas por HPLC. As vacas do Grupo 1 apresentaram redução das lesões e no grau de claudicação e as do grupo 2 não demonstraram melhora nas lesões e elevação no grau de claudicação. As concentrações avaliadas em leite, líquido sinovial e plasma no Grupo 1, revelaram valores abaixo dos limites de detecção estabelecidos pelo HPLC. A avaliação dos resíduos de oxitetraciclina no leite do Grupo 2, entre M1 e M23, encontram-se acima dos limites máximos estabelecidos pela legislação. Conclui-se que a oxitetraciclina em pó foi eficiente para o tratamento de DDP e não apresenta resíduos em plasma, líquido sinovial e leite e que o tratamento sistêmico apresenta baixa eficiência e elevadas concentrações no leite / Papillomatous digital dermatitis (PDD) is a restricted digital disease caused by a spirochete-like and other bacterias. The treatment consists of administrating systemic or topics antibiotics, especially tetracyclines. With this work it is intended to compare the efficiency of the topical and systemic treatment with oxitetracycline in cows with PDD and analyze the presence of residues of this antibiotic in the milk and its concentration in the sinovial liquid and plasma. The total of 16 lactating cows with PDD were divided in 2 treatment groups. The samples were obtained in the moments M0: previous to the treatments, M1: 6 hours pos treatment, M2: 12 hours after treatment, and in intervals of 12 hours after treatment until M23. The efficiency of the treatment was evaluated through the lameness degree and the extension of the lesion. The assayed for oxitetracycline content was measured by means of HPLC. The cows of the Group 1 presented reduction of the lesions and in the lameness degree. Cattle of the Group 2 did not demonstrate improvement in the lesions and showed elevation in the lameness degree. The concentration of sinovial fluid and plasma in the milk of cows belonging to Group 1 revealed values below the established detection limits for HPLC in milk. The evaluation of the residues of oxitetracycline in the milk of the Group 2, between M1 and M23, were above the maximum limits established by legislation. As a matter of conclusion it is argued that the powdered oxitetracycline was efficient for the treatment of PDD and it does not present residues in milk, level of plasma or sinovial fluid. Otherwise, the systemic treatment presents low efficiency and high concentration of such substance in the milk

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:32:52Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-05-14Bitstream added on 2014-06-13T20:04:30Z : No. of bitstreams: 1 victoria_c_dr_botfmvz_prot.pdf: 1093615 bytes, checksum: 38f6838cc7718e11088dbd2ac37600cf (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A proposta do presente estudo foi determinar se o Corynebacferium bovis possui a capacidade de se multiplicar em temperatura de refrigeração e se este microrganismo possui os genes aprX e lipA, capazes Je produzir enzimas termoestáveis que degradam proteínas e gorduras do leite armazenado por longos períodos de tempo. Para isto o agente foi submetido a ncubação em temperatura de refrigeração que variou entre 0,7 e 4°C, por 10 :lIas consecutivos, com a aferição dos valores de absorbância (A) em espectrofotômetro a cada 24 horas, correspondendo aos momentos MO à M9. Para a verificação da presença dos genes foi realizada a técnica da reação em cadeia pela polimerase (PCR). Os resultados obtidos revelaram que o C. bovis é capaz de se multiplicar em temperatura de refrigeração após 120 horas de ncubação onde houve diferença estatisticamente significante com p>0,05 entre os períodos M5(A = 0,264) e M6(A = 0,297) podendo ser considerado então como psicrotrófico. Por outro lado, não possui os genes aprX e lipA, não oroduzindo as enzimas codificadas por estes genes, o que não significa que o C. bovis não possua genes para a produção de outras enzimas degradantes, não pesquisadas no presente estudo. Isto sugere que novos estudos do genoma deste microrganismo são necessários, para se elucidar o verdadeiro papel deste agente na alteração da qualidade do leite e de seus subprodutos. / The purpose of the present study was to determine if Corynebacferium bovis has the capacity to multiply in low temperature and if this microorganism possesses the genes aprX and lipA, capable to produce term stable enzymes that degrade proteins and fats of the milk stored by long Deriods of time. At the first part of this study was accomplished with the agent's ncubation by 10 consecutive days in temperature of cooling that varied Jetween 0,7 and 4°C, and daily reading of absorbance (A) in spectrophotometer, corresponding from moments MO to M9. The gene presence was accomplished with polimerase chain reaction (PCR). The results -evealed that C. bovis is capable to multiply at low temperature after 120 hours of incubation as observed between the moments M5(A = 0,264) and M6(A = 0,297)where p>0,05 confirming that this microorganism could be considered as psychotropic. In the other hand the studied microorganism doesn't possess the lipA and aprX genes, therefore it is not capable to produce the enzymes codified by these genes, what doesn't mean that C. bovis doesn't possess genes for the production of other degrading enzymes, don't researched in the present study. This suggests that new studies of the genome of this microorganism are necessary, to elucidate this agent's true paper in the alteration of the quality of the milk and of their products.

Orientador: Hélio Langoni / Banca: Elizabeth F. de Oliveira Costa / Banca: Nilson Roberti Benites / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: José Paes de Almeida Nogueira Pinto / Resumo: A proposta do presente estudo foi determinar se o Corynebacferium bovis possui a capacidade de se multiplicar em temperatura de refrigeração e se este microrganismo possui os genes aprX e lipA, capazes Je produzir enzimas termoestáveis que degradam proteínas e gorduras do leite armazenado por longos períodos de tempo. Para isto o agente foi submetido a ncubação em temperatura de refrigeração que variou entre 0,7 e 4°C, por 10 :lIas consecutivos, com a aferição dos valores de absorbância (A) em espectrofotômetro a cada 24 horas, correspondendo aos momentos MO à M9. Para a verificação da presença dos genes foi realizada a técnica da reação em cadeia pela polimerase (PCR). Os resultados obtidos revelaram que o C. bovis é capaz de se multiplicar em temperatura de refrigeração após 120 horas de ncubação onde houve diferença estatisticamente significante com p>0,05 entre os períodos M5(A = 0,264) e M6(A = 0,297) podendo ser considerado então como psicrotrófico. Por outro lado, não possui os genes aprX e lipA, não oroduzindo as enzimas codificadas por estes genes, o que não significa que o C. bovis não possua genes para a produção de outras enzimas degradantes, não pesquisadas no presente estudo. Isto sugere que novos estudos do genoma deste microrganismo são necessários, para se elucidar o verdadeiro papel deste agente na alteração da qualidade do leite e de seus subprodutos. / Abstract: The purpose of the present study was to determine if Corynebacferium bovis has the capacity to multiply in low temperature and if this microorganism possesses the genes aprX and lipA, capable to produce term stable enzymes that degrade proteins and fats of the milk stored by long Deriods of time. At the first part of this study was accomplished with the agent's ncubation by 10 consecutive days in temperature of cooling that varied Jetween 0,7 and 4°C, and daily reading of absorbance (A) in spectrophotometer, corresponding from moments MO to M9. The gene presence was accomplished with polimerase chain reaction (PCR). The results -evealed that C. bovis is capable to multiply at low temperature after 120 hours of incubation as observed between the moments M5(A = 0,264) and M6(A = 0,297)where p>0,05 confirming that this microorganism could be considered as psychotropic. In the other hand the studied microorganism doesn't possess the lipA and aprX genes, therefore it is not capable to produce the enzymes codified by these genes, what doesn't mean that C. bovis doesn't possess genes for the production of other degrading enzymes, don't researched in the present study. This suggests that new studies of the genome of this microorganism are necessary, to elucidate this agent's true paper in the alteration of the quality of the milk and of their products. / Doutor

Orientador : Prof. Dr. Ivan Roque de Barros Filho / Tese (doutorado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Ciências Veterinárias. Defesa: Curitiba, 07/10/2016 / Inclui referências : f. 29-36;68-72 / Resumo: O deslocamento de abomaso à esquerda é uma doença que afeta principalmente vacas leiteiras no período de transição. Possui como sinais clínicos queda na ingestão de alimentos e na produção leiteira e som ressonante timpânico à auscultação no abdome esquerdo. O tratamento é basicamente cirúrgico, sendo utilizadas técnicas cirúrgicas convencionais como a omentopexia pelo flanco esquerdo ou direito. Porém, estas técnicas são invasivas e o uso de antibióticos e anti-inflamatórios no pós-operatório é inevitável, aumentando os custos e obrigando o descarte do leite. A técnica de abomasopexia por laparoscopia foi desenvolvida para reduzir as complicações associadas com as técnicas cirúrgicas convencionais. A técnica laparoscópica em um passo possui a vantagem de ser mais rápida, evitando derrubar o animal. Assim, objetivou-se estudar o efeito da técnica de abomasopexia por laparoscopia em um passo sobre a produção leiteira, consumo de alimentos, equilíbrio ácido-base e eletrolítico e parâmetros metabólicos em vacas leiteiras acometidas naturalmente por deslocamento de abomaso à esquerda. Esta tese está dividida em quatro capítulos. O capítulo inicial apresenta uma introdução e revisão de literatura sobre o assunto, enfatizando a relevância e a finalidade da pesquisa. O segundo capítulo apresenta um artigo científico intitulado "Laparoscopia em um passo para a correção do deslocamento de abomaso à esquerda em vacas leiteiras de alta produção", aceito para publicação na Revista Semina: Ciências Agrárias. O trabalho relatou as primeiras experiências do uso da técnica laparoscópica em um passo no Brasil, assim como as dificuldades encontradas durante a sua execução. O terceiro capítulo, intitulado "Complicações cirúrgicas associadas com a abomasopexia por laparoscopia em um passo em vacas leiteiras", relata as complicações encontradas durante a execução da técnica laparoscópica, como também durante o período de observação pós-operatório. O quarto capítulo, "Abomasopexia por laparoscopia em um passo em comparação à abomasopexia via laparotomia pelo flanco direito no tratamento do deslocamento de abomaso à esquerda em vacas leiteiras" resume os principais achados desta pesquisa, enfatizando as alterações do equilíbrio ácido-base e dos parâmetros metabólicos. A conclusão obtida nesta pesquisa foi que a técnica de abomasopexia por laparoscopia em um passo retorna o fluxo abomasal e que não há diferença entre esta técnica e a abomasopexia pelo flanco direito, no que tange à recuperação do animal. Palavras-chave: abomasopexia, laparoscopia, deslocamento de abomaso, vacas leiteiras, equilíbrio ácido-base. / Abstract: A left displacement of the abomasum is a common disease among dairy cattle during their transition period. The cows present the following clinical signs: a drop in milk yield and feed intake, and a resonant/tympanic percussion note during auscultation of the left paralumbar fossa. The treatment of a displaced abomasum generally involves surgical approaches, such as omentopexy via the left or right paralumbar fossae. However, these techniques are invasive, and the follow-up administration of antibiotics and anti-inflammatories is required; this increases the cost of care and requires disposal of milk that is contaminated by antibiotics. The one-step laparoscopic abomasopexy technique was developed to reduce the complications associated with laparotomy approaches. This technique avoids positioning the cow in dorsal recumbence, and is faster than the two-step laparoscopic abomasopexy. The objective of this thesis was to investigate the effects of the one-step laparoscopic abomasopexy on the milk yield, feed intake, acid-base balance, and biochemical profile of dairy cows with a left displaced abomasum. This thesis is divided into four chapters. The introductory chapter reviews this topic, and emphasizes the relevance and the purpose of this research. The second chapter presents a study entitled, "One-step laparoscopy for the correction of left abomasal displacement in highyielding Holstein dairy cows", published in the journal Semina: Ciência Rural. This report assesses the efficacy of the one-step laparoscopic abomasopexy, the first case of its use, in Brazil, and details the difficulties encountered during the surgical procedure. The third chapter, entitled, "Surgical complications associated with onestep laparoscopic abomasopexy in dairy cows", describes the complications observed during the surgical procedures and the post-operatory period in cows operated by the one-step laparoscopic abomasopexy. The fourth chapter, entitled, "One-step laparoscopic abomasopexy versus abomasopexy via the right paralumbar fossa to treat left abomasal displacement in dairy cows", summarizes the main research findings, and compiles the acid-base balance and metabolic profiles. This research concludes that one-step laparoscopic abomasopexy addresses the issue of recovery of abomasal flux, and that, furthermore, similar rates of clinical recovery among the cows operated by either laparoscopy or the paralumbar fossa laparotomy, were evident. Keywords: abomasopexy, laparoscopy, left abomasal displacement, dairy cows, acid-base balance

Orientador: Celso Antonio Rodrigues / Banca: José Luiz de Mello Nicoletti / Banca: José Wanderley Cattelan / Resumo: A Dermatite Digital Papilomatosa (DDP) é uma enfermidade com etiologia bacteriana associadas às espiroquetas. O tratamento consiste na administração de antimicrobianos parenterais ou tópicos, destacando-se especialmente as tetraciclinas. Os objetivos deste trabalho foram analisar e comparar a eficiência do tratamento tópico e sistêmico com oxitetraciclina em vacas acometidas por DDP, e a presença de resíduos deste antimicrobiano no leite e suas concentrações no líquido sinovial e plasma. Foram utilizadas 8 vacas no grupo 1 tratadas topicamente e 8 no grupo 2 tratadas por via sistêmica . As amostras foram coletadas nos momentos M0: anterior aos tratamentos, M1: 6 horas pós-tratamento, M2: 12 horas após, e em intervalos de 12 horas até o M23. A eficiência dos tratamentos foi avaliada através do grau de claudicação e da extensão da lesão. As concentrações do antimicrobiano de oxitetraciclina foram determinadas por HPLC. As vacas do Grupo 1 apresentaram redução das lesões e no grau de claudicação e as do grupo 2 não demonstraram melhora nas lesões e elevação no grau de claudicação. As concentrações avaliadas em leite, líquido sinovial e plasma no Grupo 1, revelaram valores abaixo dos limites de detecção estabelecidos pelo HPLC. A avaliação dos resíduos de oxitetraciclina no leite do Grupo 2, entre M1 e M23, encontram-se acima dos limites máximos estabelecidos pela legislação. Conclui-se que a oxitetraciclina em pó foi eficiente para o tratamento de DDP e não apresenta resíduos em plasma, líquido sinovial e leite e que o tratamento sistêmico apresenta baixa eficiência e elevadas concentrações no leite / Abstract: Papillomatous digital dermatitis (PDD) is a restricted digital disease caused by a spirochete-like and other bacterias. The treatment consists of administrating systemic or topics antibiotics, especially tetracyclines. With this work it is intended to compare the efficiency of the topical and systemic treatment with oxitetracycline in cows with PDD and analyze the presence of residues of this antibiotic in the milk and its concentration in the sinovial liquid and plasma. The total of 16 lactating cows with PDD were divided in 2 treatment groups. The samples were obtained in the moments M0: previous to the treatments, M1: 6 hours pos treatment, M2: 12 hours after treatment, and in intervals of 12 hours after treatment until M23. The efficiency of the treatment was evaluated through the lameness degree and the extension of the lesion. The assayed for oxitetracycline content was measured by means of HPLC. The cows of the Group 1 presented reduction of the lesions and in the lameness degree. Cattle of the Group 2 did not demonstrate improvement in the lesions and showed elevation in the lameness degree. The concentration of sinovial fluid and plasma in the milk of cows belonging to Group 1 revealed values below the established detection limits for HPLC in milk. The evaluation of the residues of oxitetracycline in the milk of the Group 2, between M1 and M23, were above the maximum limits established by legislation. As a matter of conclusion it is argued that the powdered oxitetracycline was efficient for the treatment of PDD and it does not present residues in milk, level of plasma or sinovial fluid. Otherwise, the systemic treatment presents low efficiency and high concentration of such substance in the milk / Mestre

Orientador: Helio Langoni / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: Marcos Veiga dos Santos / Resumo: A mastite é a afecção que mais onera o setor leiteiro mundial, sendo ainda importante entrave para melhoria da produção. O objetivo deste estudo epidemiológico prospectivo foi desenvolver um plano de controle de mastite em um rebanho de vacas Holandesas. A propriedade foi visitada durante 18 meses para colheita de dados e instituição do plano de controle. Os primeiros quatro meses corresponderam à fase de diagnóstico, seguida de uma fase de intervenção perfazendo 14 meses. O plano de controle reduziu de 53,7% para 23,3% a mastite subclínica. A contagem de células somáticas do tanque reduziu de 1446 x 103 células/mL para 214 x 103 células/mL. A prevalência de mastite clínica foi 11,11% e a incidência média foi de 7,6%. Do total de 704 casos, 30,1% (217/704) não puderam ser avaliados quanto à cura bacteriológica, por não haver a amostras pós-tratamento, 51,3% (249/485) curaram, 49,7% (236/485) falharam e repetiram o mesmo patógeno ou falharam com isolamento de um novo patógeno. Do total de 485 casos que puderam ser avaliados quanto à cura bacteriológica 71,9% (349/485), 19% (92/485), 7,4% (36/485) e 1,6% (8/485) eram, respectivamente, referentes aos primeiros, segundos, terceiros e quartos casos de mastite clínica na mesma glândula mamária. Houve falha no tratamento em 53,65% (44/82), 47,5% (165/347) e 48,21% 27/56, severidade um, dois e três, respectivamente. O plano de controle de mastite foi eficiente em reduzir a prevalência de mastite subclínica e elucidar os índices de mastite clínica, através de medidas simples de manejo e embasada no adequado diagnóstico epidemiológico / Abstract: Mastitis is a disease that more burdens the world dairy sector still major obstacle to improving production. The aim of this prospective epidemiological study was to develop a mastitis control plan in a Holstein cow herd. The property has been visited for 18 months to harvest data and control plane of the institution. The first four months corresponded to the diagnostic phase, followed by an intervention phase amounting to 14 months. The control plan has reduced from 53.7% to 23.3% subclinical mastitis. The somatic cell count of the tank reduced from 1446 x 103 cells / ml to 214 x 103 cells/ml. The prevalence of clinical mastitis was 11.11% and the average incidence was 7.6%. Of the total 704 cases, 30.1% (217/704) could not be evaluated for bacteriological cure because there is no post-treatment samples, 51.3% (249/485) healed, 49.7% (236/485) failed and repeated the same pathogen or failed to isolation of a new pathogen. Of the total 485 cases that could be evaluated for bacteriological cure 71.9% (349/485), 19% (92/485), 7.4% (36/485) and 1.6% (8/485) They were, respectively, related to the first, second, third and fourth cases of clinical mastitis in the same mammary gland. There was treatment failure in 53.65% (44/82), 47.5% (165/347) and 48.21% 27/56, severity one, two and three, respectively. The mastitis control plan was effective in reducing the prevalence of subclinical mastitis and elucidate the clinical mastitis rates through simple measures of management and grounded in proper epidemiological diagnosis / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2017-03-16T11:36:37Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1129168 bytes, checksum: bd7fe00d19a030146a8ff280ce2feafd (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-16T11:36:37Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1129168 bytes, checksum: bd7fe00d19a030146a8ff280ce2feafd (MD5) Previous issue date: 2016-08-01 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A mastite bovina é uma enfermidade de grande ocorrência em rebanhos leiteiros de todo o mundo, constituindo assim, um cenário preocupante, devido aos impactos na saúde pública e também na economia dos países, principalmente o Brasil, pois é um dos maiores produtores de leite. Concomitantemente à ocorrência da mastite, é crescente o número de isolados bacterianos causadores desta doença que têm apresentado resistência antimicrobiana às mais diversas substâncias farmacológicas, principalmente, devido à utilização indiscriminada destas drogas. A investigação de novas moléculas com potencial antimicrobiano, assim como o uso de associações com as drogas tradicionais, tornou-se de grande necessidade. Este trabalho teve como objetivo, investigar a ação antimicrobiana de duas substâncias bioativas, a gutiferona-A (M11) e 7- epiclusianona (M6), sobre isolados de campo, Streptococcus uberis (Su959) e Streptococcus agalactiae (Sa4605) obtidos de leite de animais com mastite. Realizaram-se testes para definição da Concentração Inibitória Mínima (CIM) dos antimicrobianos sintéticos e das substâncias bioativas, as quais variaram a de 0,6 a 125 μg/mL. Foi confirmado o potencial antimicrobiano destes últimos, além da ineficácia da ampicilina e gentamicina no controle da multiplicação de ambos os isolados. Após esta constatação, foi investigada a presença de interações sinérgicas, utilizando o método Checkerboard a partir de combinações de M11 e M6 com ampicilina e gentamicina. Dentre oito associações determinadas, seis apresentaram interação sinérgica positiva, evidenciando a recuperação e potencialização da ação dos antimicrobianos sintéticos frente aos isolados bacterianos estudados, antes resistentes à ação individual dos mesmos. Usando a metodologia do teste do MTT ((3-[-4,5- dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil tetrazolium brometo), avaliou-se a viabilidade celular quando da exposição individual de cada antimicrobiano (sintético e bioativo), a fim de conhecer o caráter citotóxico destas sobre as células MAC-T (células epiteliais da glândula mamaria de bovinos). O resultado obtido mostrou que somente a M11 foi citotóxica nas concentrações 2xCIM e 1xCIM determinada previamente na presença de Su959 e 2xCIM determinada previamente na presença de Sa4605. Porém, as concentrações necessárias para potenciar ação dos antimicrobianos sintéticos são doses iguais ou abaixo de 0,5xCIM, não indicadas como tóxicas no teste in vitro. Assim, pode-se afirmar que a gutiferona- A e 7-epiclusianona apresentaram eficaz ação antimicrobiana individual sobre os isolados de campo de Streptococcus uberis e Streptococcus agalactiae, além de se mostrarem promissoras candidatas para serem utilizadas em associações com os antimicrobianos sintéticos ampicilina e gentamicina, a fim de recuperar e otimizar a ação antimicrobiana dos mesmos. / Bovine mastitis is a disease of high occurrence and widespread in herds around the world, making it a worrying scenario due to the impacts on public health and also on the countries’ economies, especially Brazil, due its large produce of milk. In meanwhile, the number of resistant bacterial isolates has been increased against a variety of pharmacological medicines, mostly because of drug-indiscriminate use. The investigation of new molecules with antimicrobial potential, as well as the association with traditional drugs, became a great necessity nowadays. The aim of this study was to investigate the antimicrobial action of two bioactive substances, gutiferone-A (M11) and 7-epiclusianone (M6), on wild isolates Streptococcus uberis (Su959) and Streptococcus agalactiae (Sa4605) obtained from animals infected with mastitis. Analysis were conducted to define the Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of synthetic antimicrobials and bioactive molecules, ranging from 0.6 to 125 g/mL. The antimicrobial potential of the latter was confirmed, besides the inefficacy of ampicillin and gentamicin in control of the multiplication of both isolates. Later, the presence of synergistic interactions was investigated, using the Checkerboard method from combinations of M11 and M6 with ampicillin and gentamicin. Among the eight selected associations, six showed positive synergic interaction showing a recovery and powering the action of the synthetic antimicrobials against the bacterial isolates studied, previously resistant to their individual action. To assess the cell viability, we performed the method MTT (3 - [- 4,5-dimethyl-thiazol-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide), with individual exposure of each antimicrobial (synthetic and bioactive) targeting the MAC-T cells (bovine mammary gland epithelial cells). The results showed that only M11 was cytotoxic at 2xCIM and 1xCIM concentrations previously determined by Su959 presence. However, concentrations doses equal to or lower than 0.5x MIC are need to potentiate the action of synthetic antimicrobials, not indicated as toxic in the in vitro test. Thus, the gutiferone-A and 7- epiclusianone showed an effective antimicrobial action on the wild isolates of Streptococcus uberis and Streptococcus agalactiae, in addition to being promising candidates for use in combinations with the synthetic antimicrobials ampicillin and gentamicin, in order to recover and optimize their antimicrobial action.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2015-12-01T16:44:20Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1782590 bytes, checksum: 4e7ceb4862034e40682c3378f1bef0d1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-12-01T16:44:20Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1782590 bytes, checksum: 4e7ceb4862034e40682c3378f1bef0d1 (MD5) Previous issue date: 2014-07-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / A bovinocultura leiteira vem sofrendo por profundas transformações nos últimos anos no que diz respeito, principalmente, ao aumento da produtividade com um custo de produção cada vez menor. Em meio a todos os fatores que comprometem o êxito de um sistema de produção de leite, o estado reprodutivo dos animais ocupa um lugar de destaque. Problemas reprodutivos em uma fazenda levam a perdas econômicas devido ao aumento no intervalo entre partos, custos extras com o tratamento da enfermidade, aumento no descarte involuntário de animais e uma diminuição no potencial genético do rebanho. Neste cenário, as patologias infecciosas e inflamatórias uterinas do puerpério (período pós-parto) como metrite, endometrite clínica e endometrite subclínica são as mais comuns, sendo, geralmente, causadas por microorganismos de origem ambiental como Escherichia coli, Trueperella pyogenes, Fusobacterium necrophorum e Prevotella spp. A utilização de antibióticos e hormônios são os tratamentos mais utilizados no controle destas enfermidades, porém o uso indiscriminado de antibióticos nas últimas décadas proporcionou o aparecimento de bactérias resistentes a mais de uma classe de agentes antimicrobianos. Sendo assim, a fagoterapia surge como uma alternativa natural, não tóxica e economicamente viável para o controle destes microorganismos. Neste estudo, isolamos e caracterizamos três bacteriófagos (vB_TpyM-UFV13, vB_TpyP-UFV21 e vB_TpyM-26) que apresentaram perfil protéico e padrão de bandas (RAPD) diferentes, o que auxiliou na diferenciação viral, principalmente entre os membros da família Myoviridae. Estes fagos reduziram o número de células viáveis de T. pyogenes (variação de 9,7 a 17,4%). Além disso, foram capazes de prevenir a formação de biofilme, com valores de redução que oscilarem entre 42,5 a 63,1%. Este trabalho possui como perspectiva o sequenciamento de seus genomas, testes farmacocinéticos utilização destes vírus no controle de enfermidades que acometem vacas de leite como mastite e metrite. / The dairy cattle has suffered profound changes in recent years with regard mainly to increased productivity with a cost of production dwindling. Amid all the factors that impact the success of a system of milk production, reproductive status of animals takes a prominent place. Reproductive problems in a farm lead to economic losses due to increased calving interval, extra costs to the treatment of disease, increased involuntary culling of animals and a decrease in the genetic potential of the herd. In this setting, uterine infectious and inflammatory diseases of the puerperium (postpartum) as metritis, clinical endometritis and subclinical endometritis are the most common and are usually caused by organisms of environmental origin such as Escherichia coli, Trueperella pyogenes, Fusobacterium necrophorum and Prevotella spp. The use of antibiotics and hormones are the most commonly used treatments in the control and treatment of these diseases, but the indiscriminate use of antibiotics over the past decades afforded the appearance of bacteria resistant to more than one class of antimicrobial agents. Thus, the phage appears as a non-toxic, natural and economically viable alternative for the control of these microorganisms. In this study, we isolated and characterized three bacteriophages (vB_TpyM-UFV13, vB_TpyP-UFV21 and vB_TpyM-26) that showed protein profile and banding pattern (RAPD) different, which helped in the their differentiation, especially among members of the family Myoviridae. These phages reduced the number of viable cells of T. pyogenes (range 9.7 to 17.4%). In addition, they were able to prevent biofilm formation, with reduction values that oscillate between 42.5 to 63.1%. This work has as perspective the genome sequence of their genomes and pharmacokinetic tests using these viruses in the control of diseases that affect dairy cows as mastitis and metritis. / Não foi encontrado o cpf do autor e nem o termo de autorização.

Submitted by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-01-29T18:20:38Z No. of bitstreams: 1 Tese_grafica_pronta.pdf: 7750110 bytes, checksum: a61f7bb6959b19289aef9292429dfdad (MD5) / Approved for entry into archive by LIVIA FREITAS (livia.freitas@ufba.br) on 2016-03-03T18:46:22Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Tese_grafica_pronta.pdf: 7750110 bytes, checksum: a61f7bb6959b19289aef9292429dfdad (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-03T18:46:22Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Tese_grafica_pronta.pdf: 7750110 bytes, checksum: a61f7bb6959b19289aef9292429dfdad (MD5) / A mastite é uma doença muito comum e que causa muitos prejuízos às indústrias de laticínio e aos produtores de leite. Essa doença está associada ao aumento de células somáticas no leite e sua detecção tem sido objeto de preocupação e estudos. Este trabalho apresenta dois métodos para segmentação e contagem de células somáticas do leite bovino e caprino em imagens microscópicas capturadas através do microscópio óptico. Os métodos propostos são fundamentalmente baseados no espaço de cor CIELAB, no algoritmo de clusterização K-means, na transformada de Watershed e na proposição de dois novos métodos para limiarização unimodal e segmentação da cor. Os resultados experimentais alcançados para um grande número de imagens indicam que os novos métodos são uma solução promissora para a contagem de células somáticas, através de sistema de vídeo microscopia.