Orientador: Carmelinda Schmidt Unterkircher / Banca: Natalia Reiko Sato / Banca: Sandro Araujo de Almeida / Banca: Maria Filomena Rocha Lima Huhtala / Banca: Sueli Mutti Naressi / RESUMO: Neste estudo, objetivou-se avaliar as correlações existentes entre experiência decárie, acúmulo de placa bacteriana e nível de IgAanti - Streptococcus mutansna saliva de crianças de 8 a 12 anos de idade, com dentição mista. Foram examinadas 110 crianças, divididas em três grupos: sem experiência de cárie (SC), com lesões de cárie tratadas (CT) e com lesões de cárie não tratadas (CA), utilizando-se os índices lHOS, ceod, ceos. CPOD e CPOS. Foram também coletadas amostras desaliva não estimulada. A concentração de IgA específica foi quantificada, por ELISA para células inteiras de S. mutans. Não houve correlação significante entreo acúmulo de placa bacteriana e a concentração de IgA salivar específica. Houve correlação negativa entre o nível de IgA salivar específica e a experiência de cáriena dentição decídua das crianças com lesões de cárie não tratadas, indicando papel protetor. Houve porém, correlação positiva entre o nível de IgA e a experiência de cárie na dentição permanente das crianças com lesões de cárie tratadas. A IgAsalivar específica anti-mutans não impede o acúmulo de placa bacteriana, tendo papel protetor sobre a dentição decídua e não sobre a dentição permanente / ABSTRACT: This study aimed to evaluate the correlation between caries experience, plaque buildupandlevel ofIgAanti-Streptococcus mutansin salivaof children8-12years ofage,with mixed dentition. Withoutcaries(SC) lesions treated caries (CT) and untreated caries(CA), using the lHOSindex, ceod, ceos: 110 children, divided into three groups were examined.DMFT and DMFS.Samples were collected fromun stimulated saliva. The concentration of specific IgA was quantitated by ELISA to whole cell sof S. mutans. There was no significant correlation between the accumulation of plaque and salivary Ig Aspecific. There was a negative correlation between the level of specific salivary IgA and caries in the primary dentition of children with untreated caries lesions, indicating protective role. There was however,a positive correlation between the level of IgA and caries experiencein the permanent dentition of children with caries lesions treated. The salivary IgA specificanti-mutans does not prevent the buildup of plaque, with protective paperon the deciduous dentition and noton the permanent dentition / Doutor

Orientador: Marcelle Danelon / Coorientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Francisco Nunes Souza Neto / Banca: Robson Frederico Cunha / Resumo: Objetivo: Avaliar o efeito de um dentifrício fluoretado contendo trimetafosfato de sódio de tamanho nanométrico (TMPnano) na desmineralização do esmalte in situ e composição do biofilme. Métodos: Este estudo foi duplo-cego cruzado consistindo em quatro fases experimentais (7 dias cada) com 12 voluntários que utilizavam dispositivos orais contendo quatro blocos de esmalte bovino. O desafio cariogênico foi realizado por solução de sacarose 30% (6x/dia). Os tratamentos com dentífricos (3x/dia) foram os seguintes: sem F/TMP/TMPnano (Placebo), 1100 ppm F (1100F), 1100F mais 3% de TMP micrométrico ou nanométrico (1100F/TMP; 1100F/TMPnano). A porcentagem de perda de dureza da superfície (%SH) e a perda integrada de dureza de subsuperfície (ΔKHN), bem como o cálcio (Ca), o fósforo (P) e o fluoreto (F) foram determinados. Além disso, o biofilme formado nos blocos foi analisado quanto às concentrações de polissacarídeos extracelulares (EPS), F, Ca, P. Os dados foram analisados utilizando ANOVA 1-critério de medidas repetidas seguidas pelo teste Fisher LSD (p < 0,001). Resultados: 1100F/TMPnano promoveu menor %SH e ΔKHN entre todos os grupos (p < 0,001). A adição de TMPnano a 1100F não aumentou a absorção de F no esmalte, mas aumentou significativamente as concentrações de Ca do esmalte (p <0,001). 1100F/TMPnano apresentou valores mais baixos de concentração de EPS quando comparados com 1100F (~ 80%) (p < 0,001). Quanto os graus de saturação, os grupos 1100F/TMP e 1100F/TMPnano mostrar... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Objective: To evaluate the effect of a fluoride toothpaste containing nano-sized sodium trimetaphosphate (TMPnano) on enamel demineralization in situ and composition of the biofilm. Methods: This crossover double-blind study consisted of four phases (7 days each) and 12 volunteers who wore oral appliances containing four enamel bovine blocks. The cariogenic challenge was performed by 30% sucrose solution (6x/day). The toothpaste treatments (3x/day) were as follows: no F/TMP/TMPnano (Placebo), 1,100 ppm F (1100F), 1100F plus 3% micrometric or nano-sized TMP (1100F/TMP; 1100F/TMPnano). Percentage of surface hardness loss (%SH), and integrated loss of subsurface hardness (ΔKHN), as well as enamel calcium (Ca), phosphorus (P), and fluoride (F) were determined. Moreover, biofilm formed on the blocks were analyzed for F, Ca, P, and insoluble extracellular polysaccharide (EPS) concentrations. Data were analyzed using one-way ANOVA, repeated measures followed by Fisher LSD test (p < 0.001). Results: 1100F/TMPnano promoted the lowest %SH and ΔKHN among all groups (p < 0.001). The addition of TMPnano to 1100F did not enhance enamel F uptake, but significantly increased enamel Ca concentrations (p < 0.001). 1100F/TMPnano showed lower values of EPS concentration when compared with 1100F (~80%) (p < 0.001). As for phase saturation, the 1100F/TMP and 1100F/TMPnano groups showed the highest supersaturation with respect to HA and similar to each other for CaF2 (p > 0.001). The ionic activity of CaF+ and HF0 for the 1100F/TMP and 1100F/TMPnano groups were similar (p > 0.001). Conclusion: 1100F/TMPnano promoted a greater protective effect against enamel demineralization and significantly affected the composition of biofilm formed in situ when compared to 1100F toothpaste. Clinical Significance: This toothpaste could be a viable alternative to patients at high risk of caries / Mestre

Submitted by Carla Corrêa Mendes Gouvêa (carla_cmendes@hotmail.com) on 2018-06-07T14:56:34Z No. of bitstreams: 1 Tese corrigida Carla Correa Mendes Gouvêa.pdf: 2438125 bytes, checksum: 89f73cd540d3d9b9bbdf46167a4ca374 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Rimoli de Oliveira null (anapaula@foa.unesp.br) on 2018-06-07T18:14:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 gouvea_ccm_dr_araca_int.pdf: 2438125 bytes, checksum: 89f73cd540d3d9b9bbdf46167a4ca374 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-07T18:14:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 gouvea_ccm_dr_araca_int.pdf: 2438125 bytes, checksum: 89f73cd540d3d9b9bbdf46167a4ca374 (MD5) Previous issue date: 2018-05-04 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O objetivo deste estudo foi sintetizar e caracterizar nanocompósitos formados por polifosfatos (trimetafosfato de sódio (TMP) ou hexametafosfato de sódio (HMP)) e flúor (F) associados à nanopartículas de prata. Esses nanocompósitos foram avaliados quanto à sua ação anti-biofilme de Candida albicans (ATCC 10231) e Streptococcus mutans (ATCC 25175) e seu potencial em inibir a desmineralização do esmalte dentário por meio de ensaio in vitro de ciclagem de pH. As nanopartículas de prata foram sintetizadas através da redução do nitrato de prata (1 ou 10%) pelo borihidreto de sódio (NaBH4) em meio isopropílico contendo trimetafosfato de sódio (TMP) ou hexametafosfato de sódio (HMP)) e flúor (F). Os nanocompósitos foram caracterizados por microscopia eletrônica de varredura (MEV) e por difração de raios-X, e também determinada a concentração inibitória mínima (MIC) contra células planctônicas de C. albicans e S. mutans. A efetividade contra biofilmes pré-formados de 24h dos nanocompósitos, foi testada em concentrações de 1x e 10x os valores de MIC (de 40μg Ag ml−1), avaliada através da quantificação de células cultiváveis (CFUs), da atividade metabólica (XTT) e da biomassa total (Cristal Violeta). Os nanocompósitos contendo 10% de Ag apresentaram maior efetividade antimicrobiana contra ambos os microrganismos, comparados aos nanocompósitos contendo 1% de prata. O biofilme de S. mutans foi mais suscetível aos nanocompósitos TMP ou HMP/AgNP que o biofilme de C. albicans, com reduções respectivas de 2,88-3,71 log10 e 0,45-1,43 log10. Os nanocompósitos permitiram uma diminuição de cerca de 75% da biomassa total e em torno de 90% da atividade metabólica em ambos os biofilmes. Para avaliação in vitro do potencial anticárie, foi sintetizado um novo nanocompósito contendo 0,2% de TMP, 100 ppm de flúor e 10% de Ag e caracterizado por microscopia eletrônica de transmissão (MET). Blocos de esmalte bovino (4 mm x 4 mm, n = 60) selecionados pela dureza superficial inicial (SHi) foram alocados em cinco grupos (n = 12): água deionizada (Placebo), 100 ppm F (100F), 225 ppm F (225F), 100 ppm F + 0,2% TMP (100F/TMP) e 100 ppm F + 0,2% TMP + 10% Ag (100F/TMP/Ag). Os blocos foram tratados 2x ao dia com as soluções e submetidos a cinco ciclos de pH (soluções des e remineralizadora) à 37° C. Em seguida, determinou-se a dureza superficial final (SHf) e a dureza subsuperficial integrada (ΔKHN), e a concentração de fluoreto (F) e cálcio (Ca) no esmalte. A efetividade desse nanocompósisto (100F/TMP/Ag) contra a formação de biofilmes simples e misto de C. albicans (ATCC 10231) e S. mutans (ATCC 25175) foi avaliada por meio da contagem de unidades formadoras de colônias (CFUs). Os biofilmes foram também analisados por microscopia eletrônica de varredura (MEV). A dureza superficial (% SH) foi similar nas amostras tratadas com soluções contendo 225F, 100F/TMP e 100F/TMP/Ag (p> 0,001). Além disso, a capacidade de reduzir o corpo da lesão (ΔKHN) foi maior em 110F, 225F, 100F/TMP e 100F/TMP/Ag (p <0,001) na área A (5-20 μm) e na área B somente com 225F e 100F/TMP. O grupo 100F/ TMP/Ag apresentou maior desmineralização na área B (20-130 μm) (p <0,001). A concentração de F da solução 100F/TMP/Ag foi semelhante a 225F (p <0,001). Os grupos 100F, 225F, 100F/TMP e 100F/TMP/Ag apresentaram a maior e similar concentração de Ca (p> 0,001). A dureza superficial (% SH) foi similar nas amostras tratadas com soluções contendo 225F, 100F / TMP e 100F / TMP / Ag (p> 0,001). Além disso, a capacidade de reduzir o corpo da lesão (ΔKHN) foi maior em 110F, 225F, 100F / TMP e 100F / TMP / Ag (p <0,001) na zona A (5-20 μm) e na zona B apenas com 225F e 100F / TMP. O grupo 100F / TMP / Ag apresentou maior desmineralização na zona B (20-130 μm) (p <0,001). A concentração de F da solução 100F / TMP / Ag foi semelhante a 225F (p <0,001). Os grupos 100F, 225F, 100F / TMP e 100F / TMP / Ag apresentaram a maior e a mesma concentração de Ca (p> 0,001).Embora a solução 100F/TMP/Ag tenha apresentado valores mais baixos de áreas profundas do que a solução contendo 225 ppm F, o nanocompósito foi capaz de inibir a desmineralização da superfície do esmalte. Estes nanocompósitos demonstraram atividade antimicrobiana significativa, especialmente contra S. mutans, e podem ser considerados uma alternativa potencial para novos biomateriais odontológicos, visando a prevenção ou tratamento de lesões cariosas. / The aim of this study was to synthesize and characterize nanocomposites formed polyphosphates (sodium trimetaphosphate (TMP) or sodium hexametaphosphate (HMP)) and fluoride (F) associated with silv er nanoparticles. The anti - biofilm activity of the nanocomposites were evaluated against Candida albicans (ATCC ATCC 10231) and Streptococcus mutans (ATCC 25175) . as well as their potential in inhibiting demineralization and increasing the remineralizatio n of dental enamel by in vitro pH cycling assay. Silver nanoparticles were synthesized by reduction of silver nitrate (1 or 10%) by sodium bor ohydride (NaBH 4 ) in isopropylic medium containing sodium trimetaphosphate (TMP) or sodium hexametap hosphate (HMP)) and fluoride (F) . The nanocomposites were characterized by scanning electron microscopy (SEM) and X - ray diffraction. The minimum inhibitory concentration (MIC) of the nanocomposites was determined against planktonic cells of C. albicans and S. mutans . Eff ect iveness of preformed 24 - hour biofilms of nanocomposites at 1x and 10x MIC values was assessed by quantifying viable cells (CFUs), metabolic activity (XTT) and total biomass (Crystal Violet). The nanocomposites containing 10% Ag showed higher antimicrobia l effectiveness against both microorganisms compared to nanocomposites containing 1% silver. The S. mutans biofilm was more susceptible to the TMP or HMP - AgNP nanocomposites than the C. albicans biofilm, with respective reductions of 2.88 - 3.71 log 10 and 0. 45 - 1.43 log 10 . The nanocomposites allowed a reduction of about 75% of the total biomass and about 90% of the metabolic activity in both biofilms. For the in vitro evaluation of the anticaries potential, a new nanocomposite containing 0.2% TMP, 100 ppm fluo rine and 10% Ag was synthesized and characterized by transmission electron microscopy (TEM). B ovine enamel blocks (4 mm x 4 mm, n = 60) selected by initial surface hardness (SHi) were allocated in five groups (n=12): deionized water (Placebo ), 100 ppm F (1 00 F), 225 ppm F (225 F), 100 ppm F + 0.2% TMP (100 F / TMP) and 100 ppm F + 0.2% TMP + 10% Ag (100F / TMP / Ag). The blocks were treated 2x daily with the solutions and subjected to five pH cycles (deismineralizang and remineralizing solutions) at 37 ° C. Then, the final surface hardness (SHf) and integrated subsurface hardness ( Δ KHN), the concentration of fluoride (F) and calcium (Ca) in the enamel was determined. The effectiveness of this nanocomposite (100F / TMP / Ag) against the formation of single an d mixed biofilms of C. albicans (ATCC 10231) and S . mutans (ATCC 25175) was evaluated by the count ing colony forming units (CFUs). Biofilms were also analyzed by scanning electron microscopy (SEM). Similar values of % SH wer e observed for groups 225F, 100F /TMP and 100F/TMP Ag (p> 0.001). The 225F, 100F/TMP and 100F/TMP/Ag solutions showed capacity to reduce the lesion body (ΔKHN) in the depth of 5 - 20 μm. F concentration was similar in the enamel for the 100F/TMP/Ag and 225F (p> 0.001). The groups 100F, 225F, 100F/TMP and 100F/TMP/Ag presented the highest and the same concentration of Ca (p> 0.001). In relation to viable cells 100F/TMP/Ag nanocomposite promoted significant log reductions in the number of CFUs of S. mutans , of 5.42 and 4.46 log 10 respectivel y in single and mixed biofilms and C. albicans was mor e resistant. SEM images confirmed these results. The surface hardness (% SH) was similar in the samples treated with solutions containing 225F, 100F/TMP and 100F/TMP/ Ag (p> 0.001). In addition, the abil ity to reduce the lesion body (ΔKHN) was greater in 110F, 225F, 100F / TMP and 100F/TMP/ Ag (p <0.001) in zone A (5 - 20 μm) and in zone B only with 225F and 100F/TMP. The 100F/TMP/ Ag group showed greater demineralization in zone B (20 - 130 μm) (p <0.001). The F concentration of the 100F /TMP/ Ag solution was similar to 225F (p <0. 001). Groups 100F, 225F, 100F/ TMP and 100F /TMP/ Ag showed the highest and the same concentration of Ca (p> 0.001).Although the 100F/TMP/Ag solution yielded lower values of lesion deep ar eas than the solution containing 225 ppm F, but the nanocomposite was able to inhibit demineralization of surface of enamel. These compounds have demonstrated significant antimicrobial activity, especially against S. mutans , and can be considered a potenti al alternative for new dental bio materials , aiming at the prevention or treatment of carious lesions .

Os produtos comerciais a base de esteviosídeo usualmente contêm, em sua formulação, outros edulcorantes que podem modificar o efeito desse composto sobre a formação de placa bacteriana e desmineralização do esmalte dentário. O objetivo desta investigação foi testar o adoçante comercial Stevita®, que contém na sua composição esteviosídeo e lactose. Sete indivíduos usaram aparelhos de acrílico palatinos removíveis com quatro blocos de esmalte dentário. Cada adoçante foi utilizado por períodos de 28 dias. As soluções-testes foram: sacarose 17%, Stevita® 2% ( esteviosídeo 10% + lactose 90%), lactose 1,8% e esteviosídeo 0,2%. Após 28 dias, amostras de placa foram coletadas de dois blocos de esmalte e analisada quanto à microflora cariogênica ( estreptococos do grupo mutans-SM e lactobacilos). As amostras de placa coletadas dos outros dois blocos de esmalte foram utilizadas para determinação da concentração de polissacarídeos solúveis e insolúveis. A perda mineral dos blocos de esmalte dentário foi avaliada através de: 1) exame visual com lupa dos blocos de esmalte dentário, realizado por dois examinadores; 2) medições de microdureza em profundidade. Os resultados mostraram que o esteviosídeo é um adoçante não cariogênico, ocasionando o menor acúmulo de placa bacteriana (9,20±3,26 mg) e apresentando os mais baixos níveis de SM (2,539±2,457 log10 UFC/mg de placa) e lactobacilos (0,310±0,481 1og10UFC/mg de placa). A concentração de polissacarídeos solúveis (5,80±4,36 J..Lg/mg de placa) e insolúveis (5,32±5,03 Jlg/mg de placa) na placa bacteriana formada com esteviosídeo foi inferior aos outros adoçantes, diferindo estatisticamente da sacarose. Os dados de exame visual com lupa e microdureza do esmalte não detectaram perda mineral nos blocos de esmalte testados com esteviosídeo. A sacarose foi o tratamento mais cariogênico. Todos os blocos de esmalte dentário testados com sacarose apresentaram perda mineral severa e esse adoçante ocasionou maior acúmulo de placa bacteriana (28,80±15,00 mg) e nível de crescimento de SM (5,279±5,690 log10UFC/mg de placa) e lactobacilos (6,147±6,312 log10UFC/mg de placa). A concentração de polissacarídeos insolúveis (124,81±101,56 Jlg/mg de placa) na placa bacteriana formada na presença de sacarose foi superior aos outros adoçantes (p<0,01). O tratamento com lactose foi semelhante à sacarose nas variáveis peso úmido de placa bacteriana (18,60±11,23 mg), nível de SM (4,249±4,403 log10UFC/mg de placa) e lactobacilos (5,386±5,718 log10UFC/mg de placa) e concentração de polissacarídeos solúveis (9,37±3,76 J..!g/mg de placa). A lactose diferiu estatisticamente da sacarose na concentração de polissacarídeos insolúveis (7,53±6,96 J.lg/mg de placa) e nas medições de microdureza em profundidade até 90 pm. A Stevita® apresentou semelhança com a lactose quanto ao peso úmido de placa (14,50±8,42 mg), ao nível de SM (4,242 ±4,520 log10UFC/mg de placa), à concentração de polissacarídeos solúveis (7,53±3,66 J.lg/mg de placa) e insolúveis (8,08±5,28 J.lg/mg de placa) e às medições de microdureza em profundidade. Com lactose, 46,4% dos blocos de esmalte dentário mostraram perda mineral quando do exame visual com lupa, enquanto que a Stevita® ocasionou desmineralização em 21,4% dos blocos dentários. O adoçante comercial Stevita® apresenta um comportamento intermediário à lactose e ao esteviosídeo, podendo ser utilizado como substituto da sacarose em pacientes com alta atividade cariogênica. / Commercial products based on stevioside often contain ingredients which possibly modify the effect of this compound on plaque formation and enamel demineralization. The aim o f this investigation was to test a commercial sweetener Stevita®, which contains stevioside and lactose. Seven subjects used palatal removable appliances with four enamel slabs. Each sweetener were used during 28 days. The test solutions studied were: sucrose 17%, Stevita® 2% (1 0% stevioside+90% lactose), lactose 1,8% and stevioside 0,2%. After 28 days, the plaque samples were removed from two enamel slabs and the number of cariogenic bacteria (mutans streptococci-SM and lactobacilli) was recorded. The plaque samples were removed from others two enamel slabs and used to determine the concentrations of soluble and insoluble polysaccharides. The mineral loss of four enamel slabs was evaluated by means of: 1) visual exam with magnifying-glass; 2) measurements of microhardness. The results showed that stevioside is not a cariogenic sweetener. Stevioside caused the lowest accumulation of dental plaque (means±s.d) (9,20±3,26 mg) and showed the lowest levei of mutans streptococci (2,539±2,457log10 UFC/mg ofplaque) and lactobacilli (0,310±0,481 log10 UFC/mg of plaque). The soluble (5,80±4,36 Jlm/mg of plaque) and insoluble (5,32±5,03 )lmlmg o f plaque) polysaccharides concentrations in dental plaque formed with stevioside were lower than with other sweeteners. These differences were statistically significant when compared with sucrose, p<0,01 (Friedman's test). Visual exam with magnifying-glass and measurements of enamel microhardness did not detect mineral loss in enamel slabs tested with stevioside. Sucrose was the most cariogenic treatment. Ali enamel slabs tested with sucrose showed mineralloss. This sweetener caused the highest accumulation of dental plaque (28,80±15,00 mg) and mutans streptococci (5,279±5,690 log10 UFC/mg of plaque) and lactobacilli levei (6,147±6,312 log10 UFC/mg of plaque). Insoluble polysaccharide concentration (124,81±101,56 )lg/mg of plaque) in dental plaque formed with sucrose was higher than with others sweeteners (p<0,01). Treatment with lactose was similar to sucrose on the following variables: wet weight of dental plaque (18,60±11,23 mg), mutans streptococci ( 4,249±4,403 log10 UFC/mg of plaque) and lactobacilli levei (5,386±5,718log10 UFC/mg of plaque) and soluble polysaccharide concentration (9,37±3,76 !J.m/mg ofplaque). Lactose was statistically different of sucrose regarding insoluble polysaccharide concentration (7 ,53±6,96 !J.g/mg o f plaque) and measurements of microhardness until 90 !J.m. Stevita® were similar to lactose regarding: wet weight of plaque (14,50±8,42 mg), mutans streptococci levei (4,242±4,520 log10 UFC/mg of plaque), soluble (7,53±3,66 !J.g/mg of plaque) and insoluble (8,08±5,28 !J.mlmg of plaque) polysaccharides concentrations and measurements of microhardness. Fourty six percent of enamel slabs treated with lactose showed mineral loss, while Stevita® caused demineralization in 21,4% of enamel slabs (visual exam with magnifying-glass). The commercial sweetener Stevita® showed an intermediate behaviour between lactose and stevioside. This sweetener can be used as sucrose substitute in pacients with high cariogenic activity.

Orientador : Pedro Felício Estrada Bernabé / Resumo: As lesões cariosas de superfícies proximais se destacam por sua grande incidência, tanto pelo fato da região propiciar o acúmulo de biofilme bacteriano, quanto pelas dificuldades de higienização e de diagnóstico precoce. O objetivo deste estudo foi avaliar a performance da inspeção visual + sondagem (IV+S), laser de fluorescência (L), radiografia interproximal (RXI), separação dental + inspeção visual + sondagem (SD+IV+S) e separação dental + laser de fluorescência (SD+L) no diagnóstico de lesões cariosas proximais sem e com cavitação. Foram examinadas, por 2 profissionais, 167 superfícies de 30 pacientes de faixa etária entre 4 e 12 anos de idade, utilizando-se os 5 tipos de exames. Como método de validação para lesões cariosas com cavitação foi utilizada a dupla impressão das áreas interproximais com silicona de condensação. Em relação às lesões cariosas sem cavitação, os valores médios de sensibilidade encontrados para os exames de IV+S, L, RXI, SD+IV+S e SD+L foram de 44%, 33%, 49%, 100% e 48%, respectivamente. Em relação às lesões cariosas com cavitação, a sensibilidade foi de 15%, 40%, 59%, 59% e 41%, respectivamente. A correlação dos métodos de diagnóstico, em relação às lesões cariosas com cavitação, sugeriram uma maior precisão para a SD+IV+L. Os resultados sugeriram que a utilização da separação dental aumenta o desempenho no diagnóstico de lesões cariosas proximais, e que o método de impressão com silicona pode ser indicado como um método auxiliar definitivo de diagnóstico de lesões com cavitação. / Abstract: The approximals carious lesions stand out for its great incidence, so much for the fact of the area to propitiate the accumulation of bacterial plaque, as for the difficulties of toothbrushing and of precocious diagnosis. The objective of this study went evaluate the performance of the visual inspection + probing (IV+P), laser fluorescence (LF), bitewing radiographs (BW), dental separation + visual inspection + probing (SD+IV+P) and dental separation + laser fluorescence (SD+L) in the diagnosis of approximals carious lesions without and with cavitation. 167 surfaces of 30 patient of age group between 4 and 12 years were examined for 2 professional being used the 5 types of exams. As validation method for cavitated carious lesions were the double impression of the interproximals areas with condensation-cure silicone impression material. In relation to the carious lesions without cavitation, the medium values of sensibility found for the exams of IV+P, LF, BW, SD+IV+P and SD+LF were of 44%, 33%, 49%, 100% and 48%, respectively. In relation to the cavitated carious lesions, the sensibility was of 15%, 40%, 59%, 59% and 41%, respectively. The results suggested that the use of the dental separation increases the effectiveness in the diagnosis of approximal carious lesions, and the impression method can be indicated as a definitive auxiliary method of diganosis of lesions cavitated. / Doutor

Orientador: Elerson Gaetti Jardim Júnior / Resumo: A cárie dentária é considerada a doença infecciosa crônica mais comum da infância. A pesquisa de sua manifestação tem como propósito identificar os fatores associados com o seu desenvolvimento e, dessa maneira, reduzir sua incidência. Assim, o objetivo desse estudo foi avaliar a experiência de cárie e identificar os fatores de risco associados com o seu desenvolvimento em crianças atendidas em um programa educativo-preventivo. A amostra desse estudo foi composta por 466 crianças, nas faixas etárias de 4 e de 6 anos, atendidas na Bebê-Clínica da Universidade Estadual de Londrina - PR. Exame clínico foi realizado para avaliar as condições dentárias e registrar o índice de placa. Um formulário foi aplicado às mães ou responsáveis para obter informações sobre fatores comportamentais e socioeconômico-culturais. Coleta de saliva foi realizada para avaliar os níveis de estreptococos do grupo mutans. Os dados foram submetidos à análise estatíst ica multivariada. Das 466 crianças examinadas, 112 (24,0%) desenvolveram a doença. Observou-se uma maior prevalência de cárie nas crianças aos 6 anos de idade, porém o padrão dos índices ceo-d e ceo-s foi quase o mesmo para as faixas etárias de 4 e de 6 anos. Os dentes mais afetados foram os incisivos centrais superiores e segundos molares inferiores aos 4 e 6 anos de idade respectivamente. Mostraram-se como fatores de risco para cárie, em ordem decrescente, a dificuldade em seguir as recomendações do programa, o início da utilização do fio dental somente após 24 meses de idade, renda per capita inferior a R$150,00, abandono da mamadeira após 48 meses de idade, a concepção dos pais de que algum dia o filho terá cárie e ausência de higienização bucal após utilização da mamadeira noturna. Níveis elevados de estreptococos do grupo mutans na saliva mostraram associação positiva...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The dental caries is considered the most common chronic infectious disease of the infancy. The research studies of its manifestation have the purpose to identify the factors wich are associated with its development and, thus, to reduce its incidence. Therefore, the aim of this study was to asses caries experience and to identify the risk factors associated with its development in children who are attended in a preventive-education program. The study sample included 466 children in the ages of four and six years, who are attended at Bebê-Clínica of Universidade Estadual de Londrina, Paraná, Brazil. The clinical examinations were conducted to evaluate dental conditions and plaque index register. A questionnaire was applied to the mothers or to the guardians to bring out information about the cultural, socioeconomic and behavioural risk factors. Saliva was collected to evaluate the mutans streptococci levels. Data was submitted to the multivariate statistic analysis. Among the 466 examined children, 112 (24,0%), has developed the disease. It was observed higher caries prevalence among the six-year-old children, although the dmft and dmfs indexes' standard was almost the same for those aged 4 and 6 years. The most affected teeth were the maxillary central incisors and mandibular second molars in the ages of 4 and 6 years, respectively. It was showed as risk indicators for dental caries, in a decreasing order: the difficulties in following the program recommendations, the beginning of the use of dental floss after the child is 24 months old, per capita income below than 150,00 reais, to stop using baby bottle after 48 months old, the parents'conception that one day the children will have dental caries and the absence of toothbrushing habit after the use of nighttime bottle. It was found a positive association among high levels of Streptococcus mutans and deficient oral hygiene...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Juliano Pelim Pessan / Coorientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Coorientador: Marcelle Danelon / Banca: Célio Percinoto / Banca: Cleide Cristina Rodrigues Martinhon / Banca: Douglas Roberto Monteiro / Banca: Heitor Marques Honório / Resumo: O presente estudo avaliou o efeito de vernizes fluoretados contendo nanopartículas de trimetafosfato de sódio (TMP) sobre a remineralização de lesões de cárie e erosão de esmalte dental in vitro. Assim como o padrão de liberação de F e TMP a partir destas formulações. Os vernizes testados foram: Placebo (sem flúor ou TMP, controle negativo), 2,5% NaF, 5% NaF (controle positivo), 5% NaF + 5% TMP microparticulado, 5% NaF + 2,5% TMP nanoparticulado, 5% NaF + 5% TMP nanoparticulado, além de uma formulação comercial (Duraphat), doravante denominados PLA, 2.5%F, 5%F, 5%F+5%TMPmicro, 5%F+2,5%TMPnano, 5%F+5%TMPnano e Duraphat, respectivamente. Na 1ª fase, lesões de cárie artificiais foram induzidas em blocos de esmalte bovino (n=168), os quais foram selecionados por dureza de superfície (DS). Os blocos receberam uma aplicação dos vernizes supracitados, permanecendo em contato durante 6 h. Metade dos blocos (n=12/grupo) foi utilizada para determinação da concentração de CaF2 e FA formado após o tratamento com os vernizes. A outra metade foi submetida um modelo de ciclagem de pH (6 dias). Os blocos foram analisados quanto a porcentagem de recuperação de dureza de superfície (%RDS), dureza em secção longitudinal (ΔKHN), CaF2 e FA retidos após a ciclagem de pH. Os vernizes contendo TMP promoveram %RDS significativamente maior em comparação ao verniz contendo 5%F, sem diferenças significativas entre os vernizes com TMP. Um padrão semelhante foi observado para ΔKHN, embora os valores obtid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present study evaluated the effect of fluoride varnishes containing nano-sized sodium trimetaphosphate (TMP) on the remineralization of artificial caries lesions and erosion of dental enamel in vitro. As well as the pattern of F and TMP release from these formulations. The varnishes tested were: Placebo (without fluoride or TMP, negative control), 2.5% NaF, 5% NaF (positive control), 5% NaF + 5% TMP micrometric, 5% NaF + 2.5% nano-sized TMP, 5% NaF + 5% nano-sized TMP, besides a commercial formulation (Duraphat), hereafter referred to as PLA, 2.5%F, 5%F, 5%F+5%TMPmicro, 5%F+2.5%TMPnano, 5%F+5%TMPnano and Duraphat, respectively. In the first phase, artificial caries lesions were induced on bovine enamel blocks (n=168), which were selected by surface hardness (SH). Blocks received a single application of the aforementioned varnishes, remaining in contact for 6 h. Half of the blocks (n=12/group) were used to determine the concentration of CaF2 and FA fluoride formed on the specimens after the treatment with the varnishes. The other half was subjected to a pH cycling model (6 days). The blocks were analyzed for the percentage of SH recovery (%SHR), cross-sectional hardness (ΔKHN), CaF2 and FA retained after pH cycling. The varnishes containing TMP promoted significantly higher %SHR compared to 5%F, without significant differences among the TMP-containing varnishes. A similar pattern was observed for ΔKHN, although the values obtained for 5%F+5%TMPnano were 25% lower than those obtained for 5%F+5%TMPmicro. The highest CaF2 concentrations were promoted by 5%F, 5%F+5%TMPmicro and Duraphat varnishes. The second phase evaluated the protective effect of PLA, 5%F, 5%F+5%TMPmicro, 5%F+2.5%TMPnano and 5%F+5%TMPnano varnishes on initial erosion of bovine enamel. Specimens (n=8), selected by SH, received a single application of the varnishes, remaining in contact for 6 h. Varnishes were... / Doutor

Orientador: Alberto Carlos Botazzo Delbem / Banca: Juliano Pelim Pessan / Banca: Robson Frederico Cunha / Banca: Heitor Marques Honório / Banca: Fausto Medeiros Mendes / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar (1) o efeito anticárie de dentifrícios com concentração reduzida de fluoreto (DCRFs) suplementados com polifosfatos e (2) a concentração de fluoreto (F) nas unhas das mãos e pés de bebês após o uso de DCRFs. No primeiro estudo, crianças provenientes de creches dos municípios de Araçatuba e Fernandópolis (Estado de São Paulo), com idade média de 48 meses, foram aleatoriamente divididas em três grupos, de acordo com os dentifrícios a serem utilizados (protocolo duplo-cego): 500 ppm F com 1% de trimetafosfato de sódio ("500 TMP", n=206), 500 ppm F com 0,25% de glicerofosfato de cálcio ("500 GPCa", n=193) e 1100 ppm F (n=201). Exames clínicos (ceo-s) foram realizados no início e aos 18 meses do estudo, e o incremento de lesões de cárie (IC) foi calculado para crianças com e sem experiência prévia de cárie (EC). Para o segundo estudo, crianças (18 a 30 meses de idade, n=56) sem uso prévio de dentifrícios fluoretados, provenientes de um programa preventivo para bebês, fizeram uso dos dentifrícios supramencionados. Unhas das mãos e pés foram coletadas mensalmente, durante 12 meses, a partir do início do uso dos dentifrícios. O F ingerido a partir da água, dieta e dentifrício também foram determinados. As análises foram realizadas com um eletrodo íon-seletivo, após difusão facilitada por HMDS ou pelo método direto, de acordo com as amostras. Os dados foram submetidos a ANOVA a 1 critério (ingestão de F pela água) e 2 critérios (IC, concentração de F nas unhas e ingestão de F pela dieta), seguida do teste de Student-Newman-Keuls (p < 0,05). O IC foi significativamente menor com o uso do dentifrício 500 TMP (p < 0,05), tendo os dentifrícios 1100 ppm F e 500 GPCa apresentado IC similares (p=0,275). Não houve diferenças significativas... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to assess (1) the anticaries effect of low-fluoride dentifrices (LFDs) supplemented with polyphosphates and (2) fluoride (F) concentrations in fingernails and toenails of babies after the use of LFDs. In the first study, children attending day care centers from the cities of Araçatuba and Fernandópolis (State of São Paulo, Brazil), with average age of 48 months, were randomly assigned to 3 different groups (double-blind protocol), according to the dentifrices to be used: 500 ppm F with sodium trimetaphosphate ("500 TMP", n=206), 500 ppm F with 0,25% calcium glycerophosphate ("500 CaGP", n=193) and 1100 ppm F (n=201). Clinical examinations (dmfs) were done at the beginning and 18 months after using the dentifrices, and caries increment (CI) was calculated for children with and without previous caries experience (CE). For the second study, children (18 to 30 months old, n=56), without previous contact with fluoridated dentifrices and who attended a preventive program directed to babies, were randomly assigned to the above-mentioned dentifrices (double-blind protocol). Fingernails and toenails were monthly clipped from the beginning of the study for up to 12 months. F intake from water, diet and dentifrice was also determined. F analyses were carried out with an ion-selective electrode after HMDS-facilitated diffusion or by the direct method, depending on the sample. Data were submitted to 1-way (F intake from water) or 2-way (CI, F concentrations in nails and F intake from the diet) ANOVA, followed by Student-Newman-Keuls test (p<0.05). CI was significantly lower for children using the 500 TMP dentifrice (p<0.05), with similar values for the 1100 ppm F and 500 CaGP dentifrices (p=0.275). No significant... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Lactobacilos são um grupo de bactérias relacionadas com cárie dental. Há falta de estudos sobre a biologia populacional dos lactobacilos na cárie dental. O objetivo do estudo foi avaliar o efeito das modificações ambientais na composição, diversidade genética dos lactobacilos e Identificar a filogenia dos Lactobacillus paracasei isolados do biofilme. Lactobacilos foram isolados em um modelo de formação de biofilme in situ antes e depois de 28 dias de exposição à solução de sacarose 20%. As colônias foram randomicamente selecionadas do meio Rogosa Ágar e subcultivadas (n=222, 31 antes e 191 após período de exposição à sacarose). Os isolados foram identificados usando o seqüenciamento parcial dos genes pheS ou rpoA. As espécies de lactobacilos predominantes encontradas foram L. paracasei, L. fermentum e L. rhamnosus. A diferença na composição e na diversidade genética de lactobacilos associada às modificações ambientais no biofilme foi analisada através de PCR utilizando palíndromes repetitivos extragênicos (REP-PCR). Após a fase com sacarose, um maior número de lactobacilos pode ser encontrado no biofilme (p=0,001). A prevalência de L.fermentum foi similar na fase sem sacarose (6/11 indivíduos colonizados) e na fase com sacarose (8/11 indivíduos colonizados) (p=0,721). A prevalência de L. rhamnosus e L. paracasei aumentou no biofilme de 2/11 para 8/11 indivíduos (p= 0,028) e de 2/11 para 7/11 indivíduos colonizados (p=0,012) após exposição a sacarose, respectivamente. A prevalência de L. gasseri foi baixa e em ambas as fases (p=1,00). As espécies de Lactobacilos apresentaram maior diversidade na fase com sacarose (2 a 3 espécies por indivíduo) do que na fase sem sacarose (0 a 2 espécies por indivíduo) (p=0,045). Na maioria dos casos, diferentes genótipos estavam presentes na fase sem sacarose em comparação à fase com sacarose (p=0,01). Aqueles lactobacilos identificados como L. paracasei foram também submetidos à tipificação através do seqüenciamento de múltiplos loci (MLST). No MLST, foi obtida a sequência parcial de 7 genes de referência: fusA, ileS, lepA, leuS, pyrG, recA, e recG. Sete indivíduos apresentavam L. paracasei (n=75) e 14 seqüências de tipificação (ST) foram encontradas. Verificou-se que indivíduos não relacionados podem apresentar uma mesma ST e que múltiplas STs estão presentes por indivíduo. Três indivíduos apresentavam STs previamente isoladas de produtos alimentícios lácteos. Resultados conflitantes na comparação entre REP-PCR e MLST foram observados na genotipagem de L. paracasei. Diferentes números de padrões foram obtidos para os L. paracasei de acordo com o método molecular utilizado (14 com MLST versus 25 com REP-PCR). Para algumas cepas, REP-PCR foi mais discriminatório do que MLST. Em outros casos, cepas pertencentes a diferentes STs foram agrupadas pelo REP-PCR, mostrando que o MLST foi mais discriminatório do que o REP-PCR. Em poucos casos, MLST e REP-PCR apresentaram o mesmo poder discriminatório. Em geral, REP-PCR mostrou um maior poder discriminatório em comparação ao MLST, mas pouca concordância foi apresentada entre os dois métodos. Assim, MLST pode contribuir na identificação da diversidade genética obtida pelo REP-PCR em alguns casos. Os dados obtidos permitiram concluir que após exposição a sacarose observa-se (a) aumento no número de lactobacilos e de superfícies colonizadas; e (b) aumento na diversidade genética e de espécies. Além disso, observou-se que (c) alguns lactobacilos orais podem apresentar origem exógena, e que (d) a combinação dos métodos MLST e REP-PCR aumenta o poder discriminatório quanto à diversidade genética de L. paracasei. / Lactobacilli are a group of bactéria related to dental caries. There is a lack of studies on the population biology of this organisms in dental caries. The aim of the study was to evaluate the effect of the environmental changes in the composition, genetic diversity and identify the filogeny of Lactobacillus paracasei isolated from biofilm. Lactobacilli were isolated from a biofilm model, formed in situ prior to and during a 28-day period of exposure to 20% sucrose solution. The lactobacillus colonies were randomly selected from Rogosa Agar medium and subcultured (n=222, 31 prior to and 191 following a sucrose exposure period). The isolates were identified using pheS or rpoA gene sequence analysis. The predominant lactobacilli were L. paracasei, L. fermentum and L. rhamnosus. The difference in composition and genetic diversity of lactobacilli related to environmental changes in biofilm was analysed by repetitive extragenic palindromic PCR (REP-PCR). After the sucrose phase, a higher number of lactobacilli could be found in dental biofilm (p=0.001). The prevalence of L. fermentum was similar in the non-sucrose (6/11 subjects) compared to the sucrose phase (8/11 subjects) (p=0.721). Prevalence of L. rhamnosus and L. paracasei increased in biofilm from 2/11 to 8/11 subjects (p= 0.028) and from 2/11 to 7/11 subjects (p=0.012) after sucrose exposure, respectively. L. gasseri prevalence was low in both phases (p=1.00). Lactobacilli exhibited greater species diversity (2 or 3 species per subject) in the sucrose phase, than those isolated from the non-sucrose phase (0-2 species per subject) (p=0.045). In most of the cases different genotypes were present in the non-sucrose phase in comparison to the sucrose phase. Those lactobacilli identified as L. paracasei were subjected to multilocus sequencing typing (MLST). In MLST, partial sequences of seven housekeeping genes fusA, ileS, lepA, leuS, pyrG, recA, and recG was obtained. Seven subjects harboured L. paracasei (n=75) and these represented 14 sequence types (ST). Comparison of the STs showed that unrelated subjects may harbour the same ST and that individuals harbour multiple STs. Three subjects harboured STs previously isolated from dairy products. There were mixed results among REP-PCR patterns compared with the MLST in the L. paracasei genotyping. Different numbers of patterns were obtained for L. paracasei according to the molecular technique used (14 MLST versus 25 REP-PCR patterns). For some strains, REP-PCR was more discriminatory than MLST. In other cases, strains belonging to different ST were grouped together by REP-PCR, showing that MLST was more discriminatory than REP-PCR. In few cases MLST and REP-PCR presented the same discriminatory power. REP-PCR showed a greater discriminatory power in comparison to MLST, but little agreement was observed between this two methods. Therefore, MLST could enhance the genetic diversity obtained by REP-PCR. The present data support that after sucrose exposure there is (a) an increase in the number of lactobacilli and colonized surfaces; and (b) increase in lactobacilli species and genetic diversity. Also it was found that (c) some oral lactobacilli may be of exogenous origin; and (d) the combination of MLST and REP-PCR increased the discriminatory power in genotyping L. paracasei.

O objetivo deste ensaio clínico randomizado de boca dividida foi avaliar a interferência do selamento na progressão de lesões cariosas proximais ativas em molares decíduos de pacientes inseridos em um programa de tratamento para a atividade cariosa. Buscou-se também investigar a retenção do material na superfície proximal através do exame clínico e avaliação das réplicas. Vinte e sete crianças apresentando no mínimo duas lesões cariosas proximais em molares decíduos, radiograficamente detectadas em esmalte ou metade externa de dentina e clinicamente diagnosticadas como ativas, participaram do estudo. Randomicamente, uma lesão recebeu o selamento e outra permaneceu como controle. Foram obtidas réplicas da superfície proximal selada, após impressão com silicona de adição, e radiografias padronizadas das lesões em estudo. Todos os pacientes receberam tratamento para a atividade cariosa. Após um período de 6 meses, novas réplicas e radiografias foram realizadas. A retenção do selante foi avaliada através do exame clínico da superfície proximal, assim como do exame dos pares de réplicas. Presença ou ausência de progressão das lesões cariosas foi determinada por 3 métodos diferentes: inspeção visual individual das radiografias, inspeção visual das radiografias aos pares e avaliação qualitativa da subtração radiográfica. As lesões em estudo foram comparadas quanto à presença de progressão utilizando o teste de McNemar e não foram detectadas diferenças entre os grupos, independente do método de aferição de progressão utilizado. O exame clínico da retenção do selante detectou sucesso na manutenção do material em 55,6% das superfícies seladas e a avaliação dos pares de réplicas em 58,3%. A reprodutibilidade das duas técnicas de aferição da retenção do selante foi de 0,66 (kappa). Adequada retenção do material, avaliada clinicamente, foi associada à ausência de progressão da lesão cariosa de acordo com a avaliação da subtração radiográfica (p=0,03). O selamento não foi capaz de reduzir a progressão de lesões cariosas proximais em molares decíduos de pacientes cárieativos, achado que pode estar relacionado à falha na retenção do material. / The aim of this split-mouth randomized clinical trial was to assess the efficacy of sealing proximal caries lesions on primary molars in cariesactive patients receiving an individualized treatment to caries activity. It also evaluated sealant retention on proximal surface by direct visual inspection and by replicas. Twenty-seven children with at least two proximal active caries lesions in a deciduous molar, detected in the bitewing radiograph in enamel or outer half of dentine and clinically diagnosed as active, participated in the study. One randomly selected lesion received a sealant and another remained as control. A replica was obtained by copying the sealed surface with an impression material and standardized bitewing radiographs were taken. All patients received caries activity treatment. After 6 months, new radiographs and proximal replicas were obtained. Sealant retention was examined by clinical evaluation and by proximal replicas evaluation in pairs. Lesion progression was radiographically assessed using three methods: conventional visual independent reading, conventional pair-wise visual reading and qualitative inspection of subtraction radiography of digitized images. Presence of lesion progression was compared between test and control lesions with McNemar test and no difference was observed in all evaluation methods. Clinical evaluation classified sealant retention as successful in 55.6% of the sealed surfaces and replica evaluation in 58.3%. Reproducibility of sealant retention analysis with the two mentioned methods was 0.66 (kappa). Sealant retention assessed clinically as successful was associated with absence of lesion progression detected by the qualitative inspection of subtraction radiography (p=0.03). Proximal sealing was not effective in reducing lesion progression in deciduous molars from caries-active patients and this can be partially explained by a failure in material retention.