Submitted by Bruno Martinucci null (martinucci.bruno@ibb.unesp.br) on 2017-03-23T12:44:49Z No. of bitstreams: 1 Dissertação.pdf: 4223949 bytes, checksum: 231b0f2acac0e4ee8296d480b95afa5d (MD5) / Approved for entry into archive by Luiz Galeffi (luizgaleffi@gmail.com) on 2017-03-23T15:00:19Z (GMT) No. of bitstreams: 1 martinucci_b_me_bot.pdf: 4223949 bytes, checksum: 231b0f2acac0e4ee8296d480b95afa5d (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-23T15:00:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 martinucci_b_me_bot.pdf: 4223949 bytes, checksum: 231b0f2acac0e4ee8296d480b95afa5d (MD5) Previous issue date: 2017-02-06 / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O câncer de próstata (CaP) continua a ser uma das principais causas de morte entre os homens. Mesmo com suas altas taxas de mortalidade e incidência, pouco ainda se sabe sobre os aspectos moleculares desta doença. Entre os diversos fatores envolvidos na carcinogênese prostática, elementos da matriz extracelular (MEC) desempenham papel fundamental. Na próstata, a fibronectina (FN), proteína multimodular que tem sido relacionada ao desenvolvimento de múltiplos tipos de câncer, a migração e invasão celular, tem sua expressão restrita ao compartimento estromal. Contudo, no desenvolvimento tumoral, o padrão de expressão da FN é alterado, com secreção desregulada e falta de organização da matriz. Desta forma, para investigar o impacto da FN no CaP, as células neoplásicas LNCaP foram expostas somente à FN solúvel (25μg/mL) e em combinação com uma membrana basal. Nossos resultados demonstraram que quando a FN é o elemento predominante, as células tumorais desenvolvem um comportamento invasivo e resistência à apoptose. No entanto, na presença de uma membrana basal, a FN diminuiu o potencial maligno e metastático destas células, que neste novo ambiente exibiam perfil de expressão gênica mais semelhante às células RWPE-1, linhagem celular que ilustra as características do epitélio prostático normal. Consequentemente, sabendo que a relação entre as células tumorais e a MEC é regulada em múltiplos níveis, os microRNAs emergiram como importantes moléculas reguladoras. Portanto, também investigamos o impacto da FN na expressão de miRNAs em células LNCaP e PC-3. Nossos resultados mostraram que cinco miRNAs apresentavam expressão diferencial (miR-21, miR-29b, miR-125b, miR-221 e miR-222) após exposição à FN. Para uma análise mais profunda, analisamos a expressão regular de possíveis mRNAs alvos destes miRNAs em dados de RNAseq disponíveis, construímos redes de interação protéica baseadas no banco de dados STRING e realizamos as análises de enriquecimentos de via e de função gênica para avaliarmos de maneira mais abrangente os possíveis efeitos desta proteína. De maneira geral, nosso estudo mostrou que a FN pode estar envolvido na progressão do CaP através da modulação de vias de sinalização, como PI3K/AKT, resposta a drogas e hipóxia. Desta forma, acreditamos que nossos resultados fornecem a base para estudos futuros, abordando o papel da FN no crescimento tumoral, particularmente no contexto de evolução/progressão do câncer de um tumor primário sólido para um estado circulante transitório. / Prostate cancer (PCa) continues to be a leading cause of death among men. Even with its high mortality and incidence rates, little is known about the molecular aspects of this disease. Among the various factors involved in the carcinogenesis of the prostate, components of the extracellular matrix (ECM) play key roles. In the prostate, fibronectin (FN), a multimodular protein that has been linked to the development of multiple cancers and involved with cell migration and invasion, has its expression restricted to the stromal compartment. However, in tumor development, the pattern of expression of FN becomes altered, with deregulated secretion and a lack of matrix organization. Thus, in order to investigate the impact of FN on PCa, the neoplastic cells LNCaP were exposed only to soluble FN (25μg/mL) or in combination with a basement membrane. Our results demonstrated that when FN is the predominant element, tumor cells develop an invasive behavior and become resistant to apoptosis. However, in the presence of a basement membrane, FN decreases the malignant and metastatic potential of these cells, which in this new environment displayed a gene expression profile more similar to the RWPE- 1 cells, a cell line that illustrates the characteristics of the normal prostate epithelium. Consequently, knowing that the relationship between tumor cells and the ECM is regulated at multiple levels, microRNAs have emerged as important regulatory molecules. Therefore, we also investigated the impact of FN on the expression of miRNAs in LNCaP and PC-3 cells. Our results showed that five miRNAs exhibited differential expression (miR-21, miR-29b, miR- 125b, miR-221 and miR-222) after exposure to FN. For a more in-depth analysis, we analyzed the basal expression of mRNAs possibly targeted by these miRNAs in published RNAseq data, constructed protein interactions networks based on the STRING database, and performed pathway enrichment and gene function analyzes to evaluate more comprehensively the possible effects of this protein. Overall, our study showed that FN may be involved in the progression of PCa through the modulation of signaling pathways, such as PI3K/AKT, drug response and hypoxia. Thus, we believe that our results provide the basis for future studies addressing the role of FN in tumor development, particularly in the context of cancer progression from a solid primary tumor to a transient circulating state. / FAPESP: 2014/25702-0

Orientador: Deilson Elgui Oliveira / Resumo: Durante processos patológicos como o câncer, a atividade migratória de células neoplásicas aumenta, sendo um passo crítico para a disseminação dessas células a órgãos distantes. O processo migratório dessas células depende da formação de protrusões citoplasmáticas chamadas invadopódios, através da nucleação e polimerização de actina e degradação da matriz extracelular (MEC). A MEC é uma rede complexa de proteínas que fornece sustentação e moléculas sinalizadoras responsáveis pela homeostase dos tecidos. Dentre essas proteínas, a fibronectina (FN) é uma glicoproteína multiadesiva fundamental no comportamento celular normal e apresenta-se aumentada no tecido tumoral. Esse trabalho teve como objetivo avaliar a influência da FN, isolada ou em associação com componentes da membrana basal, no processo migratório de células tumorais prostáticas, com ênfase no mecanismo de formação dos invadopódios. Para isso, as linhagens celulares LNCaP e PC-3 foram divididas nos seguintes grupos experimentais: Controle, FN solúvel (10µg/mL), FN coating (10µg/mL), FN+Geltrex e Geltrex com exposição aos componentes por 4 dias. Nas células LNCaP, foi possível observar alterações morfológicas dos grupos expostos a FN (solúvel, coating e em associação com Geltrex) com diminuição na área celular em comparação ao grupo controle. A proliferação celular aumentou nos grupos com recobrimento da superfície (FN coating, FN+Geltrex e Geltrex). Também foi possível observar a diminuição na taxa de motilidade dess... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: During pathological processes like cancer, the migratory activity of neoplasic cells increases, being a critical step for the dissemination of these cells to distant organs. The migratory process depends on the formation of cytoplasmic protrusions called invadopodia, through actin polymerization and extracellular matrix degradation (ECM). ECM is a complex protein network that provides support and molecules responsible for tissue homeostasis. Among these proteins, fibronectin (FN) is an essential adhesive glycoprotein in normal conditions however, is unregulated in tumor tissue. The objective of this study was to evaluate the influence of FN, alone or in association with basement membrane (BM) components, within migratory process of prostatic tumor cells, with emphasis on the mechanism of invadopodia. For this, the LNCaP and PC-3 cell lines were divided into the following experimental groups: Control, FN soluble (10μg / mL), FN coating (10μg / mL), FN + Geltrex and Geltrex. Exposure time was established into 4 days. We could observe morphological alterations of the groups exposed to FN in LNCaP cells, with a decrease in the cellular area in comparison to the control group. Cell proliferation was increased in the groups with surface coating (FN coating, FN + Geltrex and Geltrex). It was also possible to observe a decrease in the motility rate of these cells in all the exposed groups. Key proteins expression important to invadopodia formation (Cortactin, Dynamin-2 and Actin-F) w... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-03-30 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O cancer de prostata e o segundo tipo de cancer mais frequente. Calicreinas teciduais e integrinas estao diretamente relacionadas com essa doenca, interferindo na adesao celular, diferenciacao e proliferacao. Neste trabalho utilizamos as linhagens estabelecidas DU145 e PC3 de cancer de prostata para o estudo do efeito do inibidor de calicreina recombinante, rBbKIm, o qual contem em sua sequencia primaria o motivo RGD, proveniente do inibidor BrTI isolado de Bauhnina rufa. O meio condicionado da cultura de DU145 e PC3 tratadas com rBbKIm por 48 horas inibiu cerca de 95% a atividade hidrolitica de HD-Pro-Phe-Arg- ƒÏNa por serino proteases da familia das calicreinas. rBbKIm inibiu a viabilidade celular da DU145 (56%, 100 ƒÊM, 48 horas) e da PC3 (28%, 100 ƒÊM, 48 horas) e interferiu somente em 5% da viabilidade da linhagem de fibroblastos de liquido amniotico (100 ƒÊM, 48 horas). rBbKIm nao inibiu a adesao das linhagens DU145 e PC3 sobre a fibronectina, laminina, colageno I e IV. Embora rBbKIm nao tenha interferido na migracao de DU145 o inibidor reduziu em 38% o processo migratorio da linhagem PC3 (100 ƒÊM) apos 23 horas de tratamento. Em relacao ao efeito do inibidor sobre a morte celular DU145 e PC3 tratadas com de rBbKIm (50 e 100 ƒÊM, 24 e 48 h) induziu a morte celular por apoptose. Alteracoes no ciclo celular foram observadas na linhagem PC3 com parada do ciclo nas fases G0/G1 e G2/M. Nao houve alteracao no ciclo celular na linhagem DU145. Ambas as celulas externalizaram o citocromo c para o citoplasma quando tratadas com rBbKIm (50 e 100 ƒÊM) por 24 horas. No caso da PC3 observou-se a ativacao de caspase-9 com 50 ƒÊM de rBbKIm apos 48 horas, nao havendo ativacao de caspase-3 enquanto que com a DU145 ocorreu ativacao da caspase-3 e nao houve ativacao da caspase-9. Os peptideos contendo a sequencia RGD e RGE nao inibiram a viabilidade celular de DU145 e PC3. Analises sobre o efeito de rBbKIm na viabilidade e migracao da linhagem endotelial humana (HUVEC), mostrou que rBbKIm (50 ƒÊM) inibiu 28% da viabilidade celular e 30% da motilidade celular da HUVEC. rBbKIm tambem apresentou atividade inibitoria na formacao de estruturas angiogenicas sobre Matrigel in vitro. Em resumo, o presente trabalho demonstrou a ação diferencial do inibidor de protease rBbKIm em linhagens de câncer de próstata independentes de andrógenos, PC3 e DU145, e em células normais de fibroblastos de líquido amniótico e em células endoteliais humanas, HUVEC. / Prostate cancer is the second more frequent type of cancer. In this work, using DU145 and PC3 prostate cancer cellular lines, we studied the effect of recombinant kallikrein inhibitor modified form (rBbKm), in which the sequence containing the signal motif sequence RGD of the inhibitor BrTI from Bauhnina rufa was inserted. When DU145 and PC3 were incubated with rBbKIm for 48h, and the conditioned medium the culture was incubated with the HD-Pro-Phe-Arg-ñNa, an kallikrein substrate, inhibited 95% of the degradation of this in both cells. rBbKIm inhibited cell viabillity of DU145 (56%, 100 ìM, 48 h) and PC3 (28%, 100 ìM, 48 h), but affect only 5% of the viabillity of fibroblast normal cell line (100 ìM, 48h). In cell adhesion, rBbKIm did not inhibit DU145 and PC3 cell line adhesion on fibronectin, laminin, collagen I and IV coat. In cell migration, rBbKIm did not inhibit DU145, but inhibited 38% of the PC3 (100 ìM) after 23 h. To evaluate the cytotoxicity, DU145 and PC3 were incubated with rBbKIm (50 and 100 ìM, 24 and 48h) inducing cell death by apoptosis. The presence of rBbKIm arrest PC3 cell cycle at the G0/G1 and G2/M phase, but did not affect DU145. Both cells released cytocrome c to the cytosol when treated with rBbKIm (50 and 100 ìM) for 24h. Moreover, DU145 when was treated with rBbKIm for 48h activated the caspase-3. However PC3 did not activated caspase-3, but activated caspase-9. The peptides containing the RGD and RGE sequence did not inhbit the cell viabillity of DU145 and PC3. Analyzing the effect of rBbKIm on HUVEC viabillity and migration, rBbKIm (50ìM) inhibited 28% and 30%, respectively. This protein inhibited 49% of the HUVEC angiogenesis in vitro on Matrigel. In summary, we have demonstrated the differential action of the protease inhibitor rBbKIm on androgen-independent prostate cancer PC3 and DU145, normal fibroblast and endothelial HUVEC cells. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

O acometimento por uma doença crônica como o câncer se constitui em uma ameaça à vida e tem repercussões físicas, psicológicas e sociais no decorrer da existência. No caso do câncer de próstata, sabe-se que seus tratamentos podem interferir na sexualidade masculina, causando perda do desejo sexual e disfunção erétil. Considerando esta realidade, o objetivo deste trabalho foi compreender o modo como homens com câncer de próstata vivenciam e atribuem significados à sua sexualidade. Optou-se pela metodologia da pesquisa qualitativa, na perspectiva da Fenomenologia Ontológico-Hermenêutica de Heidegger. E utilizou-se a história oral de vida como estratégia de acesso aos relatos dos colaboradores. Foram entrevistados 10 homens com câncer de próstata que foram submetidos a tratamentos, com idades entre 51 e 82 anos, pertencentes às classes econômicas D a B2. Os resultados dos relatos possibilitaram a construção de cinco categorias: 1) A temporalidade da infância e da adolescência; 2) A temporalidade da vida adulta: o casamento, a família e os relacionamentos afetivo-sexuais; 3) O adoecimento: as relações afetivo-sexuais após a vivência do câncer; 4) O horizonte do silêncio: o que vela e desvela o ser; e 5) Projeto de vida. A análise interpretativa desvelou a dor e o sofrimento desses homens ao apresentarem disfunção erétil e seqüelas no seu desempenho sexual, atributo do ideal de masculinidade advindo do sistema patriarcal. As vivências de dor remetem-se aos modos de existir autêntico e inautêntico. A inautenticidade foi observada na recusa em aceitar a facticidade da existência, ou seja, a concretude de um corpo que envelhece, adoece e deixa de responder ao desejo sexual. O acometimento pelo câncer de próstata potencializa o contato com a própria finitude, e alguns colaboradores fogem à angústia que surge quando se constata a possibilidade última e mais própria do existir: a morte. Esses homens buscam, então, os tratamentos disponíveis para a disfunção erétil e projetam seu porvir na possibilidade de voltarem a ter ereções satisfatórias, o que expressa o sonho do desempenho sexual vivido na juventude. Todavia, nessa trajetória, alguns colaboradores apresentaram um modo de existir autêntico, evidenciado pela compreensão da temporalidade de sua existência. Seus relatos desvelaram a consciência de que, por não poderem escapar à finitude, lhes resta aceitar as modificações na sexualidade e buscar vivenciá-la de acordo com seus limites e possibilidades. O modo de existir autêntico, que constitui a abertura do homem para o poder-ser-si-mesmo, foi desvelado na afetividade e no diálogo dos colaboradores com suas parceiras. Nesse momento em que os homens perdem a capacidade de ter ereções e sentem-se frágeis em sua masculinidade, se permitem expressar um aspecto fundamental da existência: a afetividade. A abertura para falar sobre si mesmo e ouvir sua parceira evidencia a dimensão do cuidado e da solicitude na relação afetivo-sexual. Os resultados deste estudo apontam para a compreensão ontológica do ser do homem com câncer de próstata na Pós-Modernidade e podem contribuir na construção de práticas de atenção à saúde mais humanizadas. / The effect for a chronic illness as cancer constitutes in a threat the life and has physical, psychological and social repercussions in elapsing of the existence. In the case of cancer of prostate, it is known that its treatment can intervene with the masculinity sexuality, causing loss of the sexual desire and erect dysfunction. Considering this reality, the objective of this work was to understand the way as men with cancer of prostate live deeply and attribute meanings to their sexuality. It was opted to the methodology of the qualitative research, in the perspective of the Martin Heidegger?s Ontological ? Hermeneutical Phenomenology. It was used verbal story of life as strategy of access to the stories of the collaborators. Ten men with cancer of prostate had been interviewed who had been submitted the treatments, with ages between 51 and 82 years, pertaining to economic classes D to B2. The results of the stories make possible the construction of five categories: 1) the temporality of infancy and the adolescence; 2) the temporality of the adult life: the affective marriage, family and sexual relationships; 3) the sickness: sexual affective relations after the experience of cancer; 4) the horizon of silence: what close and disclose the being; 5) life project. The interpretative analyzes exposed the pain and the suffering of these men when presenting erect dysfunction and aftermaths in their sexual performance, attribute of the ideal of masculinity happened of the patriarchal system. The pain experiences send the ways to it to exist authentic and fake. The fake way was observed in the refusal in accepting the fact of the existence, or either the acceptance of a body that ages, sickens and leaves to answer to the sexual desire. The effect for cancer of prostate elevates the contact with the proper end and some collaborators runs away to distresses that it appears when the last possibility is evidenced and more proper to exist: the death. These men search then, the available treatments for the erect dysfunction and project their future in the possibility to come back to have satisfactory erections, what express the dream of the lived sexual performance in youth. However, in this trajectory, some collaborators presents a way to exist authentic, evidenced for the understanding of the temporality of their existence. Their relates disclosed the conscience of that, for not being able to escape to the end, it remains to accept the modifications to them in the sexuality and in accordance with to live deeply their limits and possibilities. The way to exist authentic, that it constitutes the opening of the man to be able to be same itself, was disclosed in the affectivity and the dialogue of the collaborators with their partners. At this moment when the men lose the capacity to have erections and feel themselves fragile in their masculinity, if they allow expressing a basic aspect of the existence: the affectivity. The opening to speak about himself exactly and to hear his partner evidences the dimension of the care and the attention in the affective-sexual relation. The results of this study point with respect to the ontological understanding of the being of the man with cancer of prostate in Post-modernity and can contribute in the construction of practical of attention to health more humanized.

PANDER/FAM3B (PANcreatic-DERived factor) é uma citocina capaz de induzir apoptose em células-β secretoras de insulina e regular a homeostase da glicose nos tecidos periféricos. Considerando que PANDER/FAM3B também é expresso em tumores de próstata, o presente trabalho avaliou o papel desta citocina na inibição da apoptose in vitro, assim como o crescimento e invasividade tumoral de células de carcinoma de próstata da linhagem DU145 in vivo, usando o modelo de superexpressão estável mediada por lentivirus. Os nossos resultados apontam um aumento da viabilidade e uma diminuição da morte celular em células que superexpressam PANDER quando comparadas ao grupo controle. Este efeito protetor é acompanhado por um aumento da expressão de genes anti-apoptoticos e uma diminuição da atividade proteolítica das caspases. Por outro lado, a superexpressão de PANDER/FAM3B por tumores in vivo se correlaciona com aumento da massa tumoral e o aumento de vasos sanguíneos nos tumores. Em síntese, nossos dados demonstram que, em contraste ao papel observado em células β-pancreáticas, o PANDER/FAM3B inibe morte celular e promove a tumorigenicidade e o crescimento tumoral in vivo, sugerindo ao mesmo tempo, algum envolvimento com angiogênese e metástase em células DU145. / PANDER / FAM3B (pancreatic-derived factor) is a cytokine capable of inducing apoptosis in secreting β-cells and insulin to regulate glucose homeostasis in peripheral tissues. Whereas PANDER / FAM3B is also expressed in prostate tumors, this study evaluated the role of this cytokine in the inhibition of apoptosis in vitro as well as tumor growth and invasiveness of prostate carcinoma DU145 cells lineage in vivo, using the model Stable overexpression mediated by lentivirus. Our results suggest that increased viability and decreased cell death in cells that overexpress PANDER when compared to the control group. This protective effect is accompanied by an increased expression of anti-apoptotic genes and a decrease in proteolytic activity of caspases. Moreover, overexpression of PANDER / FAM3B by tumors in vivo correlates with increased tumor mass and the increase of blood vessels in tumors. In summary, our data demonstrate that in contrast to the role observed in pancreatic cells, PANDER / FAM3B inhibits cell death and promotes tumorigenicity and tumor growth in vivo, suggesting at the same time, some involvement in angiogenesis and metastasis in cell DU145.

A partir de um melhor entendimento sobre a radiossensibilidade do câncer de próstata, com a redefinição de parâmetros radiobiológicos, atualmente os esquemas hipofracionados de próstata tornaram-se um dos principais desafios da radioterapia moderna. Associado a este conhecimento, o emprego de técnicas precisas de radioterapia possibilitaram a entrega de maiores doses por fração, com manutenção da toxicidade e melhor controle de qualidade dos planos de tratamento. Pretendemos avaliar a implementação da radioterapia tridimensional computadorizada (3D-CRT) ou intensidade modulada do feixe (IMRT) utilizando o regime de hipofracionamento moderado (70 Gy em 28 frações) em pacientes com neoplasia localizada da próstata na rotina do departamento de radioterapia do Hospital das Clínicas da FMRP-USP. Avaliação da viabilidade técnica e do impacto financeiro na utilização da radioterapia hipofracionada na instituição. / Evaluate the implementation of computerized three-dimensional radiation therapy (3D-CRT) or intensity modulated beam (IMRT) using moderate hypofractionation schedule (70 Gy in 28 fractions) in patients with localized prostate cancer (no metastasis lymph node or distant metastasis) in routine of department of radiotherapy of the Hospital of FMRP-USP. Assessment of technical feasibility and financial impact on the use of hypofractionated radiotherapy in the institution.

A partir de um melhor entendimento sobre a radiossensibilidade do câncer de próstata, com a redefinição de parâmetros radiobiológicos, atualmente os esquemas hipofracionados de próstata tornaram-se um dos principais desafios da radioterapia moderna. Associado a este conhecimento, o emprego de técnicas precisas de radioterapia possibilitaram a entrega de maiores doses por fração, com manutenção da toxicidade e melhor controle de qualidade dos planos de tratamento. Pretendemos avaliar a implementação da radioterapia tridimensional computadorizada (3D-CRT) ou intensidade modulada do feixe (IMRT) utilizando o regime de hipofracionamento moderado (70 Gy em 28 frações) em pacientes com neoplasia localizada da próstata na rotina do departamento de radioterapia do Hospital das Clínicas da FMRP-USP. Avaliação da viabilidade técnica e do impacto financeiro na utilização da radioterapia hipofracionada na instituição. / Evaluate the implementation of computerized three-dimensional radiation therapy (3D-CRT) or intensity modulated beam (IMRT) using moderate hypofractionation schedule (70 Gy in 28 fractions) in patients with localized prostate cancer (no metastasis lymph node or distant metastasis) in routine of department of radiotherapy of the Hospital of FMRP-USP. Assessment of technical feasibility and financial impact on the use of hypofractionated radiotherapy in the institution.

Orientador: Valber de Albuquerque Pedrosa / Resumo: O câncer de próstata é uma das principais causas de mortalidade masculina. Na atualidade, a detecção do câncer depende fortemente de métodos tradicionais baseados na análise da morfologia celular por meio de biopsias e análise do tecido. Por isso, o desenvolvimento de novos dispositivos para monitorar o metabolismo celular no diagnóstico de doenças é necessário. Atualmente pesquisas utilizando biossensores para esta finalidade possibilitaram a criação de novos dispositivos com alta sensibilidade de detecção, especificidade e capacidade de multiplexação em dispositivos portáteis para uso em diferentes áreas. Aqui iremos abortar o monitoramento dos produtos secretados por células cancerígenas utilizando biossensores. O trabalho se desenvolveu em duas frentes de pesquisa para o estudo dos compostos liberados por células cancerígenas. A primeira tratou-se de uma plataforma de biossensor integrada para monitorar a detecção de multi-analitos (glicose, lactato, superóxidos e peróxido de hidrogênio) onde o microambiente celular pode ser definido com precisão. O biossensor eletroquímico para detecção de glicose, lactato e superóxidos se baseou na utilização do hidrogel de polietileno glicol (PEG) acoplado com as enzimas: glicose oxidase (GOX), lactato desidrogenase (LOX) e superóxido dismutase (SOD) e ferroceno (Fc) como par redox utilizado nas análises eletroquímicas, em adição, a enzima peroxidase (HRP) foi conjugada com nanopartículas de ouro (par redox nas análises eletroquímicas)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Doutor

Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2014-05-20T18:01:40Z No. of bitstreams: 1 Polyanna Carôzo de Oliveira. Ancrestalidade... 2014.pdf: 1254857 bytes, checksum: e5708eec3bc58766116c313a7e16ea18 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-05-20T18:01:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Polyanna Carôzo de Oliveira. Ancrestalidade... 2014.pdf: 1254857 bytes, checksum: e5708eec3bc58766116c313a7e16ea18 (MD5) Previous issue date: 2014 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisa Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / O Cancêr de Próstata (CaP) é um dos tipos de neoplasias mais frequentes nos homens em todo o mundo e também na população masculina brasileira. A incidência, mortalidade e agressividade do CaP são maiores em homens negros. De acordo com o IBGE a Bahia é o estado que apresenta a maior porcentagem de população afrodescendente e os indivíduos que moram em Salvador apresentam maior ancestralidade africana que os nascidos no interior do estado. O presente estudo verificou a associação entre maior ancestralidade genética africana e genes de suscetibilidade ao CaP em pacientes do estado da Bahia oriundos do setor particular e público de serviço à saúde. Participaram do estudo 189 homens com CaP, sendo 82 atendidos no serviço privado e 107 no serviço público e 112 homens saudáveis atendidos no serviço público. Foram utilizados 9 marcadores informativos de ancestralidade (AIM) para estimar a ancestralidade genética e quatro genes de suscetibilidade: CYP3A4, CYP17, GSTM1 e GSTT1.No grupo caso houve maior contribuição europeia (47%) e no grupo controle maior contribuição africana (43%). Entre os genes de suscetibilidade, observou-se que o genótipo GG, bem como a associação dos genótipos GG+AG na variante CYP3A4-392 A>G estiveram relacionados ao aumento do risco de CaP tanto de modo global, bem como em indivíduos com maior ancestralidade africana, além de estarem associado positivamente com o aumento da agressividade do tumor para esta população. A variante CYP17-34 T>C não apresentou relação com aumento do risco para o CaP entre casos e controles, mas ao estratificar a população observou-se maior risco associado ao genótipo heterozigoto (TC) em indivíduos com maior contribuição africana, mas não houve relação entre a variante e o aumento da agressividade do tumor. Por fim, o genótipo GSTM1-0 esteve associado ao aumento do risco para o CaP de modo geral, mas não esteve relacionado com o aumento da agressividade do tumor. Estes resultados podem auxiliar estudos de associação entre CaP e maior suscetibilidade de populações afrodescendentes e assim, ajudar na melhoria das estratégias em torno de programas de saúde que visem ampliar a triagem e o diagnóstico precoce para esta populações mais vulneráveis. / Prostate cancer (PCa) is one of the most common types of cancer in men worldwide and also in Brazilian male population. The incidence, mortality and PCa aggressiveness are higher in black men. According to the IBGE, Bahia is the state with the highest percentage of people of African descent and people who live in Salvador has the largest African ancestry born in the state. The present study sought to determine the association between African ancestry and greater susceptibility genes in PCa patients of Bahia state from public and private sector health service. The study included 189 men with PCa, 82 served in the private and 107 public service and 112 healthy men served in the public service. We used ancestry informative markers 9 (AIM) to estimate genetic ancestry and 4 susceptibility genes, among them: CYP3A4, CYP17, GSTM1 e GSTT1. The case group was greater European contribution (47%) in the control group and largest African contribution (43%). Between susceptibility genes, it was found that the GG genotype, and the association of the genotypes GG + GA in CYP3A4-392A>G varinatwere associated with an increased risk of PCa so both overall as well as for individuals with higher African ancestry, and are positively associated with increased tumor agressivadade for this population. The variant CYP17-34T>C gene was not associated with increased risk for PCa between cases and controls, but to stratify the population was more strongly associated with the risk genotype (TC) in subjects with higher African contribution, but there was no relationship between the variant and increased tumor aggressiveness. Finally, GSTM1-0 genotype was associated with increased risk for CaP generally, but not correlate with increasing tumor aggressiveness. These results may help studies of association between PCa and greater susceptibility of African descent populations and thus help improve strategies around health programs aimed at increasing screening and early diagnosis for this most vulnerable populations.

Orientador: Flávia Karina Delella / Resumo: O câncer de próstata (CaP) continua a ser uma das principais causas de morte entre os homens. Mesmo com suas altas taxas de mortalidade e incidência, pouco ainda se sabe sobre os aspectos moleculares desta doença. Entre os diversos fatores envolvidos na carcinogênese prostática, elementos da matriz extracelular (MEC) desempenham papel fundamental. Na próstata, a fibronectina (FN), proteína multimodular que tem sido relacionada ao desenvolvimento de múltiplos tipos de câncer, a migração e invasão celular, tem sua expressão restrita ao compartimento estromal. Contudo, no desenvolvimento tumoral, o padrão de expressão da FN é alterado, com secreção desregulada e falta de organização da matriz. Desta forma, para investigar o impacto da FN no CaP, as células neoplásicas LNCaP foram expostas somente à FN solúvel (25μg/mL) e em combinação com uma membrana basal. Nossos resultados demonstraram que quando a FN é o elemento predominante, as células tumorais desenvolvem um comportamento invasivo e resistência à apoptose. No entanto, na presença de uma membrana basal, a FN diminuiu o potencial maligno e metastático destas células, que neste novo ambiente exibiam perfil de expressão gênica mais semelhante às células RWPE-1, linhagem celular que ilustra as características do epitélio prostático normal. Consequentemente, sabendo que a relação entre as células tumorais e a MEC é regulada em múltiplos níveis, os microRNAs emergiram como importantes moléculas reguladoras. Portanto, também inve... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Prostate cancer (PCa) continues to be a leading cause of death among men. Even with its high mortality and incidence rates, little is known about the molecular aspects of this disease. Among the various factors involved in the carcinogenesis of the prostate, components of the extracellular matrix (ECM) play key roles. In the prostate, fibronectin (FN), a multimodular protein that has been linked to the development of multiple cancers and involved with cell migration and invasion, has its expression restricted to the stromal compartment. However, in tumor development, the pattern of expression of FN becomes altered, with deregulated secretion and a lack of matrix organization. Thus, in order to investigate the impact of FN on PCa, the neoplastic cells LNCaP were exposed only to soluble FN (25μg/mL) or in combination with a basement membrane. Our results demonstrated that when FN is the predominant element, tumor cells develop an invasive behavior and become resistant to apoptosis. However, in the presence of a basement membrane, FN decreases the malignant and metastatic potential of these cells, which in this new environment displayed a gene expression profile more similar to the RWPE- 1 cells, a cell line that illustrates the characteristics of the normal prostate epithelium. Consequently, knowing that the relationship between tumor cells and the ECM is regulated at multiple levels, microRNAs have emerged as important regulatory molecules. Therefore, we also investigated the ... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre