Submitted by Alisson Mota (alisson.davidbeckam@gmail.com) on 2015-07-15T20:20:54Z No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andrezza Miná Barbosa.pdf: 3904234 bytes, checksum: 41d632827153f290e67ab2e51e20b09f (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-16T18:15:08Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andrezza Miná Barbosa.pdf: 3904234 bytes, checksum: 41d632827153f290e67ab2e51e20b09f (MD5) / Approved for entry into archive by Divisão de Documentação/BC Biblioteca Central (ddbc@ufam.edu.br) on 2015-07-16T18:22:06Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andrezza Miná Barbosa.pdf: 3904234 bytes, checksum: 41d632827153f290e67ab2e51e20b09f (MD5) / Made available in DSpace on 2015-07-16T18:22:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertação - Andrezza Miná Barbosa.pdf: 3904234 bytes, checksum: 41d632827153f290e67ab2e51e20b09f (MD5) Previous issue date: 2012-06-28 / Não Informada / Picrolemma sprucei (Simaroubaceae) known as caferana, is widely distributed in the Amazonian Region. The tea of the leaves and the roots is used to treatgastritis, fever, as anti-helminthic and as anti-malarial. Considering the ethnobotanical information and the small numbers of works with proven activities, this work proposes a pharmacological study with a standardized extract obtained from the plant leaves on behavior and vital functions in rodents, and also to analyze the molecular mechanisms responsible for the observed effects. The plant leaves were collected in Manaus/AM, dried in the shade and ground. The aqueous extract (AE) was obtained from the leaves infusion (2.5%), yielding 15%, and the butanolic fraction (BuF) was obtained from the AE partition with butanol. The BuF purification in HPLC yielded 4 fractions with RTs: F1=5,4 to12 min, F2 =12,1 to 19 min, F3=19,1 to 27,7 min; F4= 27,8 to 38 min. The oral administration of AE or BuF (1,0 g/kg) was lethal within 24 h. The treatment with AE (0,1 to 1,0 g/kg, p.o.) caused hypothermia and reduced the cold stress-induced gastric ulcers in mice. The AE, BuF and F4 inhibited the gastric acid secretion in rats with pylorus ligation. However, the AE (1 to 300 µg/mL) did not inhibit the H+-K+-ATPase pump in vitro. In anesthetized rats, the BuF (3 mg/kg, e.v.) produced a double depression on the arterial blood pressure (BP) and on the heart rate (HR): the doseof 3.0 mg/kg reduced the BP by 22 mm Hg and the HR by 20 bpm with the maximal effect after 1,5 min and reversion in 5 minutes; this effect was followed by late long lasting hypotension (90 mm Hg), concomitant to a HR decrease. Vagotomy or atropine (0.1 mg/kg e.v.) blocked the later effects on BP and on HR. The fractions F1 (0.2 to 5.4 mg/kg, e.v.) and F3 (0.3 to 2.4 mg/kg, e.v.) caused hypotension (5 to 40 mm Hg) related to the doses. The BuF (10 to 100 µg/mL) inhibited the spontaneous beats of the isolated rat right atrium without altering the BuF inotropic effect in the isolated left atrium. In aorta rings with intact endothelium, the tonus induced by noradrenalin was relaxed with BuF incubation. This effect was not abolished by the endothelium mechanicaldestruction, indicating a NO sintase independent mechanism of action. The AE and the BuF oral administration were lethal at the highest dose; the F4 fraction was identified as the lethal fraction of BuF. The toxic effect of AE and BuF was delayed on time and probably unrelated to the original plant extract, but to compounds produced during their liver metabolism. / Picrolemma sprucei (Simaroubaceae) conhecida como caferana, é amplamente distribuída na Região Amazônica. Ochá das folhas e das raízes é utilizado no tratamento de gastrite, como febrífugo, anti-helmíntico e antimalárico. Considerando as informações etnobotânicas existentes, e o pequeno número de atividades comprovadas, este trabalho propõe a realização de estudos farmacológicos com um extrato padronizado de folhas de caferana no comportamento e funções vitais de roedores, como também analisar os mecanismos moleculares responsáveis pelos efeitos observados.Folhas foram coletadas em Manaus/AM, secas à sombra e trituradas. Infusão a 2,5% originou o extrato aquoso (EA) que rendeu 15% e a fração butanólica (FBut) foi gerada pela partição do EA com n-butanol. A purificação da FBut em CLAE originou 4 frações com TRs: F1=5,4a12 min, F2 =12,1a 19 min, F3=19,1a 27,7 min; F4= 27,8a 38 min. A administração oral do EA e da FBut (1,0 g/kg) foi letal. Com o EA (0,1 a 1,0 g/kg, v.o.) os animais apresentaram hipotermia, eas lesões da mucosa gástrica desencadeadas por estresse a frio em camundongosforam reduzidas. O EA, a FBut e a fração F4 inibiram a secreção ácida gástrica em ratas com ligadura pilórica. No entanto, o EA (1 a 300 µg/mL) não inibiu a atividade da H+-K+-ATPase. Em ratas anestesiadas aFBut (3 mg/kg, e.v.) produziu efeito duplo na pressão arterial (PA) e na frequência cardíaca (FC):a injeção de3,0 mg/kg reduziu a PA de 22 mmHg e a FCde 20 bpm com pico máximo após 1,5 min e reversão em 5 min;este efeito foi seguido de hipotensão maior (90 mmHg), mais tardia (4,5 min) e duradoura, concomitante à diminuição da FC. A vagotomia, ou a administração de atropina, bloquearam os efeitos tardios na PAe na FC. As frações F1 (0,2 a 5,4 mg/kg, e.v.) e F3 (0,3 a 2,4 mg/kg, e.v.) da FBut produziram hipotensão (5 a 40 mm Hg) proporcional às doses. A FBut (10 a 100 µg/mL) diminuiu a frequência de batimentos espontâneos do átrio direito isolado de rato, sem alteração do inotropismo do átrio esquerdo. O tônus induzido pela noradrenalina em anéis de aorta de rato com endotélio foi relaxado com a adição de FBut. Este efeito não foi abolido pela destruição mecânica do endotélio, indicando um mecanismo de ação independente da síntese de NO. O EA e a FBut por via oral foram letais na maior dose, a F4 foi a fração identificada com o poder letal. O efeito tóxico foi tardio e provavelmente relacionado a atividade decompostos originados do metabolismo hepático.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 francisco.pdf: 1029822 bytes, checksum: a55ebb42d97e615744cc7460ffefa1d1 (MD5) Previous issue date: 2011-03-24 / Caferana Picrolemma sprucei Hook a plant from the Simarubaceae family with antimalarial effects well known by the Amazon region native populations is being used without any criteria by them as a medicinal tea in order to fight this disease. The plant has a taproot that could reach over 2mts depth. On chapter one, it has been researched the regrowing of the species in its own habitat, in order to evaluate the increment of vegetal material, in a given period of four years to attain technical information on cultivated stuff and a sprout production method. The selected part of plant was the stem in natural habitat, close-cut regrowing at ground-surface. The population had 75% of plants with average height of 50 cm. On following four years, after being cut to measure average height, 75 % of plants have reached maximum height between 28 to 30cm. As a main conclusion, it could be inferred that, according field observation the caferana plant needs at least the minimum of four years to recompose its growth after being cut. It has been observed a rather slow regrowth increment, because unknown factors. On chapter two, it has been used the agronomic stake technique aiming at to evaluate plant viability for sprout production. It was adopted a casual design experiment absolutely at random in factorial scheme 4 x 4 with four types of stakes ligneous, semi-ligneous, herbaceous and semi-herbaceous and four types of soil; S1 with sand 100%, S2 with 50% sand plus 50% clay, S3 with clay 100%, and S4 with composite soil 30% plus 30% clay plus 40% sand. Best kind of soil for caferana has been S4 composite 21,67%, and best stakes were: ligneous 29,16% and herbaceous 20%. On a general mood, roots were only established after one and a half year of sprout maintenance, turning rather difficult its identification, diminishing sprout development, making non-feasible the stake-technique for sprout production. On chapter three, it has been evaluated caferana plants sprouting with seeds collected at UFAM-AM. The experiment was sketched in blocks at random, with four types of soils; S1 (100% sand); S2 (50% sand plus 50% clay); S3 (100% clay) S4 (30% composite plus 30% clay plus 40% sand), during four years. At the green-house caferana has been watered with automatic sprinkling every ten minutes at 60 second - irrigating period. The largest percentage sprouting average was with substratum S4 (41.02%) followed by S3 (31.92%) and S2 (30,29%) which do not differed between them. The worst performance has been for substratum S1 (22,94%). Germination techniques in green-house, for Picrolemma spruce Hook sprout production has had a rather medium yield. It has been concluded that there is a great dependence on moisture for this species germination, already proved by best treatments (S4, S3, S2), containing (clay and humus) moisture retaining particles, which was also verified in its habitat next to Igarapes (creeks), where they develop in larger quantities. It is highly recommended to test other sprout production techniques, as in B.O.D chambers where could prove better results than in soil substrata germination. On chapter four, it has been evaluated the analysis by genetic markers conducted by three different combinations of four EcoRI-Msel starters, resulting in a total number of 443 polymorphic bands. These data has been used for the analysis of genetic divergence among populations. It was observed low-levels of genetic divergence among them. Genetic similarity at must has been of 88.8% inside C population, 39% inside D population, being similar inside P population, indicating, and lower genetic variability on C population, then influenced to endogamy crossing. Clustering populations has being displayed in the form of a dendrogram; inferring that, populations with greater Jaccard coefficient tend to have more similarity, and trees next to each other tend to be more similar among them. / Atualmente, há um grande interesse em plantas para extração de princípios ativos com atividade antimalárica, principalmente na Amazônia, onde a doença já se alastra há tempos, sem uma ação eficaz para sua erradicação. A Caferana (Picrolemma sprucei Hook. f.) é uma planta Simaroubaceae, conhecida como antimalárica por povos nativos da região Amazônica, sendo utilizada sem critérios como chá medicinal para combate à doença. A planta possui uma raiz pivotante e atinge em torno de 2 m de profundidade. No capítulo I, foi investigado o recrescimento da espécie em seu habitat, a fim de avaliar o incremento do material vegetal, num período de quatro anos, para obter informações sobre recrescimento do material selvagem e o melhor método de produção de mudas. A planta foi cortada no caule (corte rente à superfície do solo) em seu habitat natural. A população original apresentava 75% das plantas com altura média de 50 cm. Nos quatro anos seguintes, o recrescimento médio de 75% das plantas atingiu a altura de (28 a 30 cm). Concluiu-se que a planta necessita, conforme observações em campo, não menos que quatro anos para se recompor em recrescimento depois de cortada. Tendo um incremento de recrescimento lento e com grande variabilidade, devido a fatores desconhecidos. No capítulo II, utilizou-se a técnica agronômica de estaquia a fim de avaliar a viabilidade na propagação da planta nativa para produção de mudas. Adotou-se experimento em delineamento inteiramente ao acaso em esquema fatorial (4X4) com quatro tipos de estacas (lenhosa, semi-lenhosa, herbácea e semi-herbácea) e quatro tipos de substratos: (S1) com areia (100%); (S2) com 50% de areia + 50% de solo argiloso; (S3), com solo argiloso (100%); e (S4) com 30% de terra compostada + 30% de solo argiloso + 40% de areia). O melhor substrato para caferana foi o compostado S4 (21,67%), e as melhores estacas foram: lenhosa (29,16%) e herbácea (20%). De um modo geral, as raízes só apareceram após um ano e meio de manutenção da muda, tornando difícil sua identificação, diminuindo o desenvolvimento da muda e inviabilizando a técnica de estaquia para produção das mudas nativas. No capítulo III, avaliou-se a germinação de plantas de caferana com sementes coletadas na UFAM/AM. O experimento foi delineado em blocos ao acaso, com quatro tipos de substratos: S1 (100% areia); S2 (50% areia + 50% solo argiloso); S3 (100% solo argiloso) e S4 (30% composto + 30% solo argiloso + 40% areia). Na casa de vegetação regou-se com aspersão automática a cada 10 min., com período de rega de 60s. A maior percentagem média de germinação foi com o substrato S4 (41,02%) seguido de S3 (31,92%) e S2 (30,29%) que não diferiram entre si. Obtendo o pior desempenho o substrato S1 (22,94%). A técnica de germinação em casa de vegetação para produção de mudas da espécie Picrolemma sprucei, apresentou um rendimento apenas mediano. Conclui-se que há dependência de umidade para germinação da espécie, provada pela composição dos melhores tratamentos S4, S3 e S2, contendo partículas redutoras de argila e húmus, grande retentora de água, e, também verificada em seu habitat, próximas aos igarapés, se desenvolvem em maior quantidade. Recomenda-se testar outras técnicas de produção de mudas, em câmaras de BOD, onde poderá demonstrar melhores resultados do que a germinação em substratos de solo. Com relação ao experimento com marcador molecular AFLP, capítulo IV, obteve-se um índice de similaridade genética máxima em torno de 29% para a população P (ZF2), 33% para apopulação D (Ducke) e o maior índice em torno de 87% para a população C (cultivada), mostrando definitivamente a baixa variabilidade genética em populações cultivadas, possivelmente devido ao endocruzamento. A análise por marcador genético foi realizada por sete diferentes combinações de iniciadores EcoRI-MseI, resultando num total de 443 bandas polimórficas. Esses dados foram utilizados para análise da divergência genética entre populações e dentro delas. Foram detectados baixos níveis de divergência genética entre populações. O máximo de similaridade genética foi de 88,8%, dentro de população C , o de 39% dentro da população D e semelhante dentro da P (39%), indicando uma menor variabilidade genética na população C que ficou sujeita a cruzamentos endogâmicos. O agrupamento das populações, a partir do dendrograma (Apêndice I) encontrado, sugere que populações com maior coeficiente de JACCARD, tenham maior similaridade e árvores próximas tendem a ser mais similar entre si.

Made available in DSpace on 2015-04-20T12:31:29Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Rodrigo Cesar das Neves Amorim.pdf: 5191612 bytes, checksum: 928eb24ece47b6a34630736ce7c58e0c (MD5) Previous issue date: 2009-09-11 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / Isobrucein B (2) and neosergeolide (5) are quassinoids which are obtained from Picrolemma sprucei. These compounds have proven in vitro antitumor, antimalarial, anthelminthic, cytotoxic, insecticide and leishmanicidal activities. Herein, in vitro techniques were used to investigate a range of biological activities of 2 and 5 and known semi-synthetic derivative 1,12-diacetylisobrucein B (21) and 12-acetylneosergeolide (22). These compounds were evaluated for general toxicity toward the brine shrimp species Artemia franciscana, cytotoxicity toward human tumour cells, larvicidal activity toward the dengue fever mosquito vector Aedes aegypti and antimalarial activity against the human malaria parasite Plasmodium falciparum. 2 and 5 exhibited the greatest antimalarial activity against multidrug-resistant P. falciparum K1 strain. 2 and 5 (LC50 = 3.2-4.4 mg/L) displayed greater lethality than derivative 22 (LC50 = 75.0 mg/L) toward A. aegypti larvae, while derivative 21 was inactive. Biological assays were also performed with extracts and fractions obtained from P. sprucei fruit. A TLC densitometry method was developed to mensurate the quassinoids content in fruits extracts and fractions. This analysis determinate that only chloroform fractions presents significative content of 2 and 5 and this data is related to the biological activities. Infusions of the stems of P. sprucei are used in the Amazon region as antimalarials. They contain 2 and 5. An LC-(+)-ESI-MS/MS method was developed and applied to the determination of 2 and 5 in P. sprucei infusions. The concentrations of 2 and 5 in the stem infusion were found to be 60.1 and 774 μg L-1, respectively / Isobruceína B (2) e a neosergeolida (5) são quassinóides obtidos de Picrolemma sprucei. Essas substâncias possuem atividade antitumoral, antimalárica, anti-helmíntica, citotóxica, inseticida e leishmanicida in vitro já comprovadas. Neste trabalho, técnicas in vitro foram utilizadas para investigar uma variedade de atividades biológicas de 2 e 5 e dos derivados semi-sintéticos 1,12-diacetilisobruceína B (21) e 12-acetilneosergeolida (22). Essas substâncias foram avaliadas quanto à sua toxicidade geral frente a larvas do microcrustáceo Artemia franciscana, citotoxicidade frente a células tumorais humanas em colaboração com o laboratório de Oncologia da UFC, sob coordenação da Profa. Cláudia Pessoa, atividade larvicida frente a larvas do mosquito vetor da dengue Aedes aegypti e atividade antimalárica frente ao parasita causador da malária humana Plasmodium falciparum. 2 e 5 exibiram elevada atividade antimalárica frente à cepa multiresistente de P. falciparum K1 (CI50 1,0-4,0 ng/mL). 2 e 5 (CL50 3,2-4,4 mg/L) apresentaram letalidade bem mais elevada do que o derivado 22 frente a larvas de A. aegypti, ao passo que o derivado 21 se mostrou inativo. Ensaios biológicos também foram realizados com extratos e frações obtidos de frutos de P. sprucei. Um método baseado em CCD-densitometria foi desenvolvido para mensurar o teor de quassinóides nos frutos e frações destes frutos. Essas análises determinaram que apenas as frações obtidas em clorofórmio apresentam teores significativos de 2 e 5 e esses teores estão relacionados às atividades biológicas. Infusões dos caules de P. sprucei são utilizadas na Amazônia . Um método baseado em LC-(+)-ESI-MS/MS foi desenvolvido e aplicado para determinar o teor de 2 e 5 em infusões de P. sprucei. As concentrações de 2 e 5 nas infusões de caules são de 60,1 e 774 μg L-1, respectivamente