Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:12Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2005Bitstream added on 2014-06-13T19:05:29Z : No. of bitstreams: 1 santos_do_dr_botfmvz.pdf: 1641256 bytes, checksum: 66b081e448579c7f03456bb3c349c89a (MD5) / Empresa Brasileira de Pesquisa Agropecuária (EMBRAPA) / O presente estudo identificou o perfil protéico da membrana plasmática dos espermatozóides, congelados, de caprinos, através de eletroforese bidimensional (2-D). O objetivo foi encontrar proteínas que possam ser utilizadas como marcadores de congelabilidade na seleção precoce de doadores de sêmen. Para isso, foram utilizados seis machos caprinos, da raça Anglo-nubiana, de propriedade da Embrapa Caprinos, mantidos em regime de estabulação. O sêmen foi colhido, em vagina artificial, durante três épocas de inseminação artificial (EIA I - época seca; II - época chuvosa-seca; III - época seca-chuvosa), nos anos de 2002, 2003 e 2004, e avaliado a fresco, quanto ao volume (mL), a concentração (x 109 spz/mL), motilidade progressiva individual (MIP-f, %), o vigor (0 a 5) e a morfologia (% de defeitos maiores, DMa-f; menores, Dme-f e totais, DT-f). Logo após, foi submetido a congelação, em palhetas de 0,5 mL, numa concentração de 150 x 106 espermatozóides por palheta, de acordo com o protocolo do Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos. Em seguida foi armazenado em nitrogênio líquido até seu uso na inseminação artificial e analise de proteínas. Para avaliar a fertilidade do sêmen foram inseminadas 321 cabras, sem raça definida, manejadas em pastagem nativa, com escore corporal entre 2,5 e 4,0, distribuídas por reprodutor e EIA’s. As cabras foram inseminadas após estimulação do estro, através do “Efeito Macho”, a partir do oitavo dia, pela via transcervical, entre 10 e 12 horas após a identificação do estro, quando o sêmen foi então descongelado. Os resultados das características espermáticas foram analisados pela analise de variância e as proteínas qualitativamente, registrando-se o peso molecular... . / The study identified the goat frozen sperm plasmatic membrane proteins profile, using bidimensional electrophoresis (2-D). The aim was to detect those proteins that eventually could be used as markers to select the males by fertility. To evaluate the fertility rates six Anglo-nubian goat male belonging to Embrapa Caprinos kept in stable was used. The sperm was collected by artificial vagina during three insemination seasons (EIA; I, dry season; II, rains-dry season; III, dry-rains season) and the years 2002, 2003 and 2004. The ejaculated sperm was evaluated by volume (mL), concentration (x109 spz/mL), individual progressive motility (MIP-f, %) and vigor-f (0 to 5), and morphology (% of major, DMa-f; minor Dme-f and total, DT-f, abnormalities). There after the sperm was frozen according to Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos, in 0.5 mL straw, with a concentration of 150 x 106 spz/straw and stored in liquid nitrogen. These frozen sperm was maintained until insemination and protein analysis. To evaluate the fertility rate, 321 crossbreed goats, raised on native pasture, with body score between 2.5 and 4.0, were inseminated. Males and EIA’s divided the goats in groups. The goats were inseminates after estrus stimulation (male effect) on eighth day after 10 to 12 hours of estrus identification. At insemination the sperm was towed and its characteristics evaluated. The sperm parameters were analyzed by variance analysis and the proteins qualified by molecular weight (kDa) and isoelectric point (pI). The ejaculated sperm showed values of MIP-f ranging from 68.4 to 86.3%, vigor-f 3.3 to 3.8 and DT-f 10.6 to 19.5%; the frozen values of MIP-d were 21.2 to 27.9%, vigor-d 1,7 to 2.0 and DT-d 12.6 to 17.6%. It was observed a significant variation (P<0.05) of MIP-f between the males and even EIA’s... (Complete abstract, click electronic address below).

Resumo: O presente estudo identificou o perfil protéico da membrana plasmática dos espermatozóides, congelados, de caprinos, através de eletroforese bidimensional (2-D). O objetivo foi encontrar proteínas que possam ser utilizadas como marcadores de congelabilidade na seleção precoce de doadores de sêmen. Para isso, foram utilizados seis machos caprinos, da raça Anglo-nubiana, de propriedade da Embrapa Caprinos, mantidos em regime de estabulação. O sêmen foi colhido, em vagina artificial, durante três épocas de inseminação artificial (EIA I - época seca; II - época chuvosa-seca; III - época seca-chuvosa), nos anos de 2002, 2003 e 2004, e avaliado a fresco, quanto ao volume (mL), a concentração (x 109 spz/mL), motilidade progressiva individual (MIP-f, %), o vigor (0 a 5) e a morfologia (% de defeitos maiores, DMa-f; menores, Dme-f e totais, DT-f). Logo após, foi submetido a congelação, em palhetas de 0,5 mL, numa concentração de 150 x 106 espermatozóides por palheta, de acordo com o protocolo do Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos. Em seguida foi armazenado em nitrogênio líquido até seu uso na inseminação artificial e analise de proteínas. Para avaliar a fertilidade do sêmen foram inseminadas 321 cabras, sem raça definida, manejadas em pastagem nativa, com escore corporal entre 2,5 e 4,0, distribuídas por reprodutor e EIA's. As cabras foram inseminadas após estimulação do estro, através do "Efeito Macho", a partir do oitavo dia, pela via transcervical, entre 10 e 12 horas após a identificação do estro, quando o sêmen foi então descongelado. Os resultados das características espermáticas foram analisados pela analise de variância e as proteínas qualitativamente, registrando-se o peso molecular... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo). / Abstract: The study identified the goat frozen sperm plasmatic membrane proteins profile, using bidimensional electrophoresis (2-D). The aim was to detect those proteins that eventually could be used as markers to select the males by fertility. To evaluate the fertility rates six Anglo-nubian goat male belonging to Embrapa Caprinos kept in stable was used. The sperm was collected by artificial vagina during three insemination seasons (EIA; I, dry season; II, rains-dry season; III, dry-rains season) and the years 2002, 2003 and 2004. The ejaculated sperm was evaluated by volume (mL), concentration (x109 spz/mL), individual progressive motility (MIP-f, %) and vigor-f (0 to 5), and morphology (% of major, DMa-f; minor Dme-f and total, DT-f, abnormalities). There after the sperm was frozen according to Laboratório de Andrologia, Tecnologia de Sêmen e Inseminação Artificial da Embrapa Caprinos, in 0.5 mL straw, with a concentration of 150 x 106 spz/straw and stored in liquid nitrogen. These frozen sperm was maintained until insemination and protein analysis. To evaluate the fertility rate, 321 crossbreed goats, raised on native pasture, with body score between 2.5 and 4.0, were inseminated. Males and EIA's divided the goats in groups. The goats were inseminates after estrus stimulation (male effect) on eighth day after 10 to 12 hours of estrus identification. At insemination the sperm was towed and its characteristics evaluated. The sperm parameters were analyzed by variance analysis and the proteins qualified by molecular weight (kDa) and isoelectric point (pI). The ejaculated sperm showed values of MIP-f ranging from 68.4 to 86.3%, vigor-f 3.3 to 3.8 and DT-f 10.6 to 19.5%; the frozen values of MIP-d were 21.2 to 27.9%, vigor-d 1,7 to 2.0 and DT-d 12.6 to 17.6%. It was observed a significant variation (P<0.05) of MIP-f between the males and even EIA's... (Complete abstract, click electronic address below). / Orientador: Antonio Emidio Dias Feliciano Silva / Coorientador: Francisco de Assis Paiva Campos / Doutor

Orientador: Alvimar José da Costa / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Anderson Barbosa Moura / Resumo: Seis caprinos machos em idade reprodutiva foram selecionados e distribuídos em três grupos: GI dois caprinos mantidos como controle (placebo), GII dois caprinos inoculados com 1 x 106 taquizoítos de T. gondii (cepa RH) e GIII dois caprinos inoculados com 2 x 105 oocistos de T. gondii (cepa P). Periodicamente foram aferidos parâmetros clínicos, hematológicos e sorológicos, assim como avaliações parasitêmicas, além de exames andrológicos. A presença do parasito no sêmen e, também, nos tecidos do sistema reprodutor foi pesquisada por meio das técnicas de bioprova, PCR e imunohistoquímica. Surtos parasitêmicos foram detectados em todos os animais inoculados com taquizoítos ou com oocistos. A recíproca dos títulos sorológicos (RIFI) alcançou valores máximos de 4096 nos dois grupos de animais que receberam o Toxoplasma gondii. Pela técnica da bioprova foi possível revelar precocemente a presença do coccídio nas amostras seminais dos animais inoculados como taquizoítos (5°, 7°, 28°, 49°, 63° e 70° DPI) e um pouco mais tardiamente nas amostras seminais daqueles inoculados com oocistos (56° e 70° DPI). Pela PCR foi possível identificar, no sêmen, material genético de T. gondii, em cinco e em duas datas experimentais pós-inoculanção dos animais pertencentes aos grupos GII e GIII, respectivamente. Por esta mesma técnica foi possível, ainda, isolar material genético deste protozoário também em amostras teciduais (pool de próstata, testículo, vesícula seminal e epidídimo) dos caprinos 11 e 36 inoculados com taquizoítos e oocistos, respectivamente. Pela imunohistoquímica foi diagnosticado o T. gondii no epidídimo de todos os caprinos que receberam o protozoário. O isolamento de T. gondii, no sistema reprodutor de caprinos (sêmen e tecidos), sugere a possibilidade da transmissão sexual constituir uma importante via na disseminação desta zoonose tão difundida na caprinocultura mundial. / Abstract: Six goat males in reproductive age had been selected and distributed in three groups: GI - two goat noninoculated (control), GII - two goat inoculated with 1 x 106 tachyzoites of T. gondii (RH strain) and GIII - two goat inoculated with 2 x 105 oocysts of T. gondii (P strain). Periodically had been measured clinical parameters, hematologics and sorologics evaluations, as well as parasitemics, beyond andrologics examinations. The presence of the parasite in the semen, and also in tissues of the reproductive system was searched by means of the techniques of bioassay, PCR and immunehistochemistry (only for tissues). Parasitemia was detected in the two animals inoculated with tachyzoites and in the inoculated others two with oocysts. The reciprocal one of the sorologicys titles (RIFI) reached maximal level of 4096 in the two groups of animals inoculated with the Toxoplasma gondii. Using biossay technique was possible precociously to disclose to the presence of the coccidy in the seminal samples of animals inoculated with tachyzoites (5°, 7°, 28°, 4 9°, 63° e 70° DPI) and a little more delayed in the seminal samples of it inoculated with oocysts (56° e 70° DPI). For the PCR it was possible to identify to the genetic material of the T. gondii, in the semen in five and two experimental dates after-inoculanção of the pertaining animals to groups GII and GIII respectively. For this same technique was possible still to isolate material genetic of this protozoario also in tissues samples (pool of prostate, testícule, vesicula seminal and epididim) of goat 11 and 36 inoculated with tachyzoites and oocysts, respectively. By the immunehistochemistry was diagnosised T. gondii in epididim of all goats ones that had received the protozoario. The isolation of T. gondii, in the reproductive system of goat (semen and tissues), suggests the possibility of the sexual transmission to constitute... (Complete abstract, click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:15Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-08-25Bitstream added on 2014-06-13T18:58:51Z : No. of bitstreams: 1 sakashita_sm_me_botfmvz.pdf: 493745 bytes, checksum: b66b1a455367ff9bb2f050d0a9445f86 (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Objetivou-se determinar in vitro o efeito da adição de antioxidantes Trolox® e Catalase ao diluidor Glicina-Gema-Leite com 5% de gema de ovo, utilizado na refrigeração do sêmen caprino em sistema de Equitainer® por 24 ou 48 horas, avaliando-se a motilidade espermática determinada no sistema computadorizado (CASA), a integridade de membrana plasmática pela combinação dos corantes fluorescente iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína (IP+DIC), patologia espermática em câmara úmida em solução de gluteraldeído e após a refrigeração ao teste de exaustão em banho-maria (37ºC até 240 minutos). Para isso foi utilizado o sêmen em duplicata (12 amostras) de 6 caprinos Boer, coletados com vagina artificial e diluído na concentração final de 400x106 espermatozóides/mL em meio Glicose-Leite (GL) e nos diluidores Glicina-Gema-Leite com (GGLtc) e sem (GGL) antioxidantes Trolox® e Catalase. As análises foram realizadas no sêmen fresco, após diluição (pré-refrigeração), 24 e 48 horas pós-refrigeração no sistema Equitainer®, e durante o teste de exaustão nos tempos 30, 60, 120 e 240 minutos de incubação em banho-maria. Foi demonstrado que o diluidor GGLtc demonstrou melhor eficiência na proteção de acrossomo entre os diluidores. A adição de antioxidante ao diluidor GGL com 5% de gema de ovo foi capaz de manter baixo percentual de acrossomo lesado durante a refrigeração de até 48 horas e o sistema Equitainer® eficiente durante a refrigeração até 48 horas / The objetive was to determine in vitro the effect of adding antioxidant Trolox® and Catalase in the extender Glycine-Yolk-Milk with 5% of egg yolk, used in the goat semen cooling in Equitainer® system for 24 or 48 hours, evaluating sperm motility determined by the computerized semen analysis (CASA), the integrity of the plasma membrane by a combination of fluorescent carboxyfluorescein diacetato(DIC) and propidium iodide(IP), sperm pathology in the humid chamber in gluteraldehyde solution and after cooling to the exhaustion test in a water bath (37°C up to 240 minutes). For the semen that was used in duplicate (12 samples) for six Boer goats, collected with artificial vagina and diluted at a final concentration of 400x106 sperm/mL using extenders Glucose-Milk (GL) and Glycine-Yolk-Milk (GGLtc) and without (GGL) antioxidant Trolox® and Catalase. Analyses were performed in fresh semen, after diluition (pre-cooling) and 24 or 48 hours post cooling in Equitainer® system, and during the exhaustion test incubation in a water bath for 30, 60, 120 and 240 minutes. It has been shown that the extender GGLtc showed better efficiency in protection acrossome between the extenders. The addition of antioxidant in the GGL with 5% egg yolk (GGLtc) was able to maintain a low percentage of damaged acrossome during cooling up to 48 hours and the Equitainer® system during the cooling efficiency up to 48 hours

Orientador: Sony Dimas Bicudo / Banca: Daniel Bartoli de Sousa / Banca: Cezinande Meira / Resumo: Objetivou-se determinar in vitro o efeito da adição de antioxidantes Trolox® e Catalase ao diluidor Glicina-Gema-Leite com 5% de gema de ovo, utilizado na refrigeração do sêmen caprino em sistema de Equitainer® por 24 ou 48 horas, avaliando-se a motilidade espermática determinada no sistema computadorizado (CASA), a integridade de membrana plasmática pela combinação dos corantes fluorescente iodeto de propídio e diacetato de carboxifluoresceína (IP+DIC), patologia espermática em câmara úmida em solução de gluteraldeído e após a refrigeração ao teste de exaustão em banho-maria (37ºC até 240 minutos). Para isso foi utilizado o sêmen em duplicata (12 amostras) de 6 caprinos Boer, coletados com vagina artificial e diluído na concentração final de 400x106 espermatozóides/mL em meio Glicose-Leite (GL) e nos diluidores Glicina-Gema-Leite com (GGLtc) e sem (GGL) antioxidantes Trolox® e Catalase. As análises foram realizadas no sêmen fresco, após diluição (pré-refrigeração), 24 e 48 horas pós-refrigeração no sistema Equitainer®, e durante o teste de exaustão nos tempos 30, 60, 120 e 240 minutos de incubação em banho-maria. Foi demonstrado que o diluidor GGLtc demonstrou melhor eficiência na proteção de acrossomo entre os diluidores. A adição de antioxidante ao diluidor GGL com 5% de gema de ovo foi capaz de manter baixo percentual de acrossomo lesado durante a refrigeração de até 48 horas e o sistema Equitainer® eficiente durante a refrigeração até 48 horas / Abstract: The objetive was to determine in vitro the effect of adding antioxidant Trolox® and Catalase in the extender Glycine-Yolk-Milk with 5% of egg yolk, used in the goat semen cooling in Equitainer® system for 24 or 48 hours, evaluating sperm motility determined by the computerized semen analysis (CASA), the integrity of the plasma membrane by a combination of fluorescent carboxyfluorescein diacetato(DIC) and propidium iodide(IP), sperm pathology in the humid chamber in gluteraldehyde solution and after cooling to the exhaustion test in a water bath (37°C up to 240 minutes). For the semen that was used in duplicate (12 samples) for six Boer goats, collected with artificial vagina and diluted at a final concentration of 400x106 sperm/mL using extenders Glucose-Milk (GL) and Glycine-Yolk-Milk (GGLtc) and without (GGL) antioxidant Trolox® and Catalase. Analyses were performed in fresh semen, after diluition (pre-cooling) and 24 or 48 hours post cooling in Equitainer® system, and during the exhaustion test incubation in a water bath for 30, 60, 120 and 240 minutes. It has been shown that the extender GGLtc showed better efficiency in protection acrossome between the extenders. The addition of antioxidant in the GGL with 5% egg yolk (GGLtc) was able to maintain a low percentage of damaged acrossome during cooling up to 48 hours and the Equitainer® system during the cooling efficiency up to 48 hours / Mestre

Submitted by Marco Antônio de Ramos Chagas (mchagas@ufv.br) on 2016-08-10T10:28:19Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 475943 bytes, checksum: 4700679733e56fffafeea553d2dd1f56 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-10T10:28:19Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 475943 bytes, checksum: 4700679733e56fffafeea553d2dd1f56 (MD5) Previous issue date: 2016-02-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / Este estudo foi realizado com o objetivo de verificar se a ação antioxidante da melatonina influencia na viabilidade in vitro pós-descongelamento dos espermatozoides caprinos, bem como verificar o potencial uso deste antioxidante em diferentes concentrações de espermatozoides caprinos criopreservados. Foram utilizados dois machos adultos da raça Alpina e dois machos adultos da raça Saanen. Para as coletas de sêmen foi utilizada vagina artificial onde se obteve seis ejaculados por animal. Após a coleta, fez-se a avaliação das características macro e microscópicas. Em seguida, o sêmen foi diluído com os seguintes tratamentos : T1 40 X 10^6 espermatozoides sem antioxidante (Controle); T2 40 X 10^6 espermatozoides com antioxidante; T3 80 X 10^6 espermatozoides sem antioxidante; T4 80 X 10^6 espermatozoides com antioxidante; T5 100 X 10^6 espermatozoides sem antioxidante e T6 100 X 10^6 espermatozoides com antioxidante.Após as diluições finais, foram avaliados a motilidade progressiva e vigor espermático de cada tratamento. O sêmen foi envasado em palhetas de 0,25mL, as palhetas foram resfriadas a cinco graus celsius, durante uma hora em refil plástico contendo álcool etílico. O pré-congelamento foi realizado em vapor de nitrogênio líquido durante 15 minutos. Após esse período, as palhetas foram imersas no nitrogênio para o congelamento do sêmen. As partidas foram descongeladas em banho-maria a 37 °C por 30 segundos, acondicionadas em microtubos e homogeneizadas para a análise imediata de motilidade e vigor espermático, teste hiposmótico e teste de termorresistência. As amostras foram avaliadas mediante patologia espermática e por meio de citometria de fluxo quanto à integridade de membrana plasmática e acrossomal, potencial mitocondrial e produção de peróxido de hidrogênio intracelular No sêmen fresco, as características físicas estavam dentro dos parâmetros normais. O melhor resultado obtido no TTR foi referente aos tratamento 100μM (p<0,05), manteve a maior média de motilidade espermática total após cinco minutos de incubação a 37°C. O potencial mitocondrial sofreu alteração frente aos tratamentos com uma concentração de 40 X 10^6 sptz/dose (p<0,05). Em relação à raça, foi observado maior viabilidade celular com presença de peróxido de hidrogênio intracelular na raça saanen comparada a raça alpina (p<0,05). Em relação à concentração espermática, foi observado maior proporção de células viáveis com presença de peróxido de hidrogênio intracelular nos tratamentos com concentração espermática de 40 e 80 x 10^6 espermatozoide/mL, enquanto a menor proporção foi observada no tratamento com 100 x 10^6 espermatozoide/mL (p<0,05). Os resultados obtidos quanto à ação da Melatonina não foram satisfatórios, porém as concentrações utilizadas neste experimento mantiveram a viabilidade seminal de acordo com as características preconizadas pelo CBRA, mas não foram superior ao tratamento controle. / The aim of this study was to evaluate the antioxidant effect of melatonin on the viability in vitro post-thaw sperm of goats, as well as to investigate the potential use of this antioxidant in different concentrations of sperm cryopreserved goats. Four Billy goats were used and six samples were colleted from each and their semen was cryopreserved in commercial diluent Botubov ® . After each collection, the semen was diluted and analyzed, and then distributed along nine experimental treatments: T1 (control) – 40 X 10^6 spermatozoa without melatonin; T2 - 40 X 10^6 spermatozoa with 1μM melatonin; T3 - 40 X 10^6 spermatozoa with 100μM melatonin; T 4 - 80 X 10 6 spermatozoa with without melatonin; T5 - 80 X 10^6 spermatozoa with 1μM melatonin; T6 - 80 X 10^6 spermatozoa with 100μM melatonin; T7 - 100 X 10^6 spermatozoa without melatonin; T8 - 100 X 10^6 spermatozoa with 1μM melatonin; T9 - 100 X 10^6 spermatozoa with 100μM melatonin. After dilutions, the semen was coled to 5°C, kept in a three- hour period of equilibrium, and then stored in previously identified and sealed 0,25mL straws. The straws were frozen in a liquid nitrogen vapor for 15 minutes, submerged in nitrogen, and then stored in cryogenic cylinder. The doses of semen in the treatments were thawed at 37°C for 30 seconds and subjected to in vitro tests: motility, vigor, morphology, membrane functionality by hypoosmotic test and thermoresistance test (TRT) at 37°C for three hours and by flow cytometry as to integrity of plasma and acrosomal membrane, mitochondrial potential and intracellular peroxide hydrogen production. The results related to Melatonin were not satisfactory, revealing with it the need for new studies about its optimal concentration and effects on semen freezing goats. The best result obtained in TTR was referring to 100μM treatment (p <0.05), maintained the highest average total sperm motility after five minutes of incubation at 37°C. Mitochondrial potential was altered to the treatments with a concentration of 40 X 10^6 sperm / dose (p <0.05). In regard to race, greater cell viability was observed with the presence of intracellular hydrogen peroxide in the Alpine compared Saanen (p <0.05). Regarding the sperm concentration was observed a higher proportion of viable cells in presence of intracellular hydrogen peroxide in treatments with sperm concentration of 40 to 80 x 10^6 sperm / ml, while the smaller proportion was observed in the treatment with 100 x 10^6 sperm / ml (p <0.05). The results obtained as to the action of melatonin were not satisfactory, however the concentrations used in this experiment maintained seminal viability according to the features prescribed by the CBRA, but not higher than the control treatment.

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:27:17Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2007-01-30Bitstream added on 2014-06-13T20:35:34Z : No. of bitstreams: 1 santana_lf_me_jabo.pdf: 793308 bytes, checksum: 144da7774a5d1aadcadce3f1534456c3 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Seis caprinos machos em idade reprodutiva foram selecionados e distribuídos em três grupos: GI dois caprinos mantidos como controle (placebo), GII dois caprinos inoculados com 1 x 106 taquizoítos de T. gondii (cepa RH) e GIII dois caprinos inoculados com 2 x 105 oocistos de T. gondii (cepa P). Periodicamente foram aferidos parâmetros clínicos, hematológicos e sorológicos, assim como avaliações parasitêmicas, além de exames andrológicos. A presença do parasito no sêmen e, também, nos tecidos do sistema reprodutor foi pesquisada por meio das técnicas de bioprova, PCR e imunohistoquímica. Surtos parasitêmicos foram detectados em todos os animais inoculados com taquizoítos ou com oocistos. A recíproca dos títulos sorológicos (RIFI) alcançou valores máximos de 4096 nos dois grupos de animais que receberam o Toxoplasma gondii. Pela técnica da bioprova foi possível revelar precocemente a presença do coccídio nas amostras seminais dos animais inoculados como taquizoítos (5°, 7°, 28°, 49°, 63° e 70° DPI) e um pouco mais tardiamente nas amostras seminais daqueles inoculados com oocistos (56° e 70° DPI). Pela PCR foi possível identificar, no sêmen, material genético de T. gondii, em cinco e em duas datas experimentais pós-inoculanção dos animais pertencentes aos grupos GII e GIII, respectivamente. Por esta mesma técnica foi possível, ainda, isolar material genético deste protozoário também em amostras teciduais (pool de próstata, testículo, vesícula seminal e epidídimo) dos caprinos 11 e 36 inoculados com taquizoítos e oocistos, respectivamente. Pela imunohistoquímica foi diagnosticado o T. gondii no epidídimo de todos os caprinos que receberam o protozoário. O isolamento de T. gondii, no sistema reprodutor de caprinos (sêmen e tecidos), sugere a possibilidade da transmissão sexual constituir uma importante via na disseminação desta zoonose tão difundida na caprinocultura mundial. / Six goat males in reproductive age had been selected and distributed in three groups: GI - two goat noninoculated (control), GII - two goat inoculated with 1 x 106 tachyzoites of T. gondii (RH strain) and GIII - two goat inoculated with 2 x 105 oocysts of T. gondii (P strain). Periodically had been measured clinical parameters, hematologics and sorologics evaluations, as well as parasitemics, beyond andrologics examinations. The presence of the parasite in the semen, and also in tissues of the reproductive system was searched by means of the techniques of bioassay, PCR and immunehistochemistry (only for tissues). Parasitemia was detected in the two animals inoculated with tachyzoites and in the inoculated others two with oocysts. The reciprocal one of the sorologicys titles (RIFI) reached maximal level of 4096 in the two groups of animals inoculated with the Toxoplasma gondii. Using biossay technique was possible precociously to disclose to the presence of the coccidy in the seminal samples of animals inoculated with tachyzoites (5°, 7°, 28°, 4 9°, 63° e 70° DPI) and a little more delayed in the seminal samples of it inoculated with oocysts (56° e 70° DPI). For the PCR it was possible to identify to the genetic material of the T. gondii, in the semen in five and two experimental dates after-inoculanção of the pertaining animals to groups GII and GIII respectively. For this same technique was possible still to isolate material genetic of this protozoario also in tissues samples (pool of prostate, testícule, vesicula seminal and epididim) of goat 11 and 36 inoculated with tachyzoites and oocysts, respectively. By the immunehistochemistry was diagnosised T. gondii in epididim of all goats ones that had received the protozoario. The isolation of T. gondii, in the reproductive system of goat (semen and tissues), suggests the possibility of the sexual transmission to constitute... (Complete abstract, click electronic access below)

Made available in DSpace on 2015-08-20T17:10:04Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-03-20. Added 1 bitstream(s) on 2015-08-20T17:25:55Z : No. of bitstreams: 1 000837195_20150920.pdf: 65943 bytes, checksum: 3d08551c973f38fe482173b18c355947 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-09-21T13:18:54Z: 000837195_20150920.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-09-21T13:19:51Z : No. of bitstreams: 1 000837195.pdf: 1333023 bytes, checksum: 03e8d0fbb6f677497c15b782303ed41d (MD5) / O herpesvírus caprino tipo 1 (CpHV-1) e o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) acarretam consideráveis perdas econômicas para o produtor, uma vez que determinam transtornos reprodutivos na espécie hospedeira. A escassez de estudos sobre esses vírus em plantéis caprinos brasileiros direcionaram o presente estudo que objetivou verificar se indícios da infecção por esses vírus influenciam a eficiência reprodutiva, por meio de uma análise precedente dos parâmetros reprodutivos descritos na escrituração zootécnica apresentados por animais positivos e negativos no exame pontual de um rebanho caprino com histórico de problemas reprodutivos no município de Monte Santo de Minas (MG), além de proceder pesquisa de ocorrência de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-1 e o CpHV-1 pelo teste de virusneutralização (VN) em rebanhos caprinos em três ambientes diferentes: estado de São Paulo, Zona da Mata Mineira (MG) e uma propriedade no município de Monte Santo de Minas (MG). Assim, verificou-se que nos rebanhos do estado de São Paulo e da Zona da Mata Mineira não havia indícios de circulação viral recente de qualquer das espécies virais estudadas. Por outro lado, no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) houve evidências da circulação viral recente especificamente para o CpHV-1, mas não para o BoHV-1. A análise estatística mostrou que houve mais chances dos animais serem positivos para o BoHV-1 no rebanho de Ipiguá (SP), e para o CpHV-1 no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) e que, apesar do não isolamento, tanto BoHV-1 quanto CpHV-1 estão presentes entre rebanhos caprinos nos estados de São Paulo e de Minas Gerais. Ademais, a associação das condições sanitárias caracterizadas pela análise sorológica com detecção de alterações de parâmetros reprodutivos específicos no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) direcionam o diagnóstico da infecção pelo CpHV-1 como... / The caprine herpesvirus type 1 (CpHV-1) and the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) cause considerable economic losses for the producer, since they determine the host species reproductive disorders. The scarcity of studies about theses virus in brazilian goat herds directed this study that aimed to verify if infection evidence by them influence reproductive efficiency, carrying out the previous analysis of reproductive parameters of the zootechnical bookkeeping showed by negative and positive animals on the pontual assay of a goat herd with reproductive problems, in the municipality of Monte Santo de Minas, by research of the occurrence of neutralizing, besides research of the occurrence of neutralizing antibodies against BoHV-1 and CpHV-1, using virusneutralization test (VN), in goat herds in three different environments: São Paulo State, Zona da Mata Mineira (Minas Gerais State) and in a farm in the municipality of Monte Santo de Minas (Minas Gerais State). Thus, it was found that in São Paulo State and in Zona da Mata Mineira (MG) there was no evidence of recent viral circulation of any of the genotypes studied. On the other hand, in Monte Santo de Minas farm there were evidences of recent viral circulation specifically for CpHV-1, but not for BoHV-1. The statistical analysis showed that there were more chances of the animals were positive for BoHV-1 in Ipiguá herd (SP), and for CpHV-1 in Monte Santo de Minas (MG) herd and, despite not isolated both BoHV-1 and CpHV-1 are present in got herds of São Paulo and Minas Gerais herds. In addition, the association of health conditions characterized by serological analysis with detection of specific changes in reproductive parameters in Minas Gerais (MG) goat directs the diagnosis of infection by CpHV-1 as the cause of the problems presented by the herd showing that the presence of this virus causes reproductive problems in ...

Orientador: Samir Issa Samara / Coorientador: Edviges Maristela Pituco / Banca: Maria da Glória Buzinaro / Banca: Bruna Alexandrino / Banca: Moacir Marchiori Filho / Banca: Fernanda Senter Magajevski / Resumo: O herpesvírus caprino tipo 1 (CpHV-1) e o herpesvírus bovino tipo 1 (BoHV-1) acarretam consideráveis perdas econômicas para o produtor, uma vez que determinam transtornos reprodutivos na espécie hospedeira. A escassez de estudos sobre esses vírus em plantéis caprinos brasileiros direcionaram o presente estudo que objetivou verificar se indícios da infecção por esses vírus influenciam a eficiência reprodutiva, por meio de uma análise precedente dos parâmetros reprodutivos descritos na escrituração zootécnica apresentados por animais positivos e negativos no exame pontual de um rebanho caprino com histórico de problemas reprodutivos no município de Monte Santo de Minas (MG), além de proceder pesquisa de ocorrência de anticorpos neutralizantes contra o BoHV-1 e o CpHV-1 pelo teste de virusneutralização (VN) em rebanhos caprinos em três ambientes diferentes: estado de São Paulo, Zona da Mata Mineira (MG) e uma propriedade no município de Monte Santo de Minas (MG). Assim, verificou-se que nos rebanhos do estado de São Paulo e da Zona da Mata Mineira não havia indícios de circulação viral recente de qualquer das espécies virais estudadas. Por outro lado, no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) houve evidências da circulação viral recente especificamente para o CpHV-1, mas não para o BoHV-1. A análise estatística mostrou que houve mais chances dos animais serem positivos para o BoHV-1 no rebanho de Ipiguá (SP), e para o CpHV-1 no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) e que, apesar do não isolamento, tanto BoHV-1 quanto CpHV-1 estão presentes entre rebanhos caprinos nos estados de São Paulo e de Minas Gerais. Ademais, a associação das condições sanitárias caracterizadas pela análise sorológica com detecção de alterações de parâmetros reprodutivos específicos no rebanho de Monte Santo de Minas (MG) direcionam o diagnóstico da infecção pelo CpHV-1 como... / Abstract: The caprine herpesvirus type 1 (CpHV-1) and the bovine herpesvirus type 1 (BoHV-1) cause considerable economic losses for the producer, since they determine the host species reproductive disorders. The scarcity of studies about theses virus in brazilian goat herds directed this study that aimed to verify if infection evidence by them influence reproductive efficiency, carrying out the previous analysis of reproductive parameters of the zootechnical bookkeeping showed by negative and positive animals on the pontual assay of a goat herd with reproductive problems, in the municipality of Monte Santo de Minas, by research of the occurrence of neutralizing, besides research of the occurrence of neutralizing antibodies against BoHV-1 and CpHV-1, using virusneutralization test (VN), in goat herds in three different environments: São Paulo State, Zona da Mata Mineira (Minas Gerais State) and in a farm in the municipality of Monte Santo de Minas (Minas Gerais State). Thus, it was found that in São Paulo State and in Zona da Mata Mineira (MG) there was no evidence of recent viral circulation of any of the genotypes studied. On the other hand, in Monte Santo de Minas farm there were evidences of recent viral circulation specifically for CpHV-1, but not for BoHV-1. The statistical analysis showed that there were more chances of the animals were positive for BoHV-1 in Ipiguá herd (SP), and for CpHV-1 in Monte Santo de Minas (MG) herd and, despite not isolated both BoHV-1 and CpHV-1 are present in got herds of São Paulo and Minas Gerais herds. In addition, the association of health conditions characterized by serological analysis with detection of specific changes in reproductive parameters in Minas Gerais (MG) goat directs the diagnosis of infection by CpHV-1 as the cause of the problems presented by the herd showing that the presence of this virus causes reproductive problems in ... / Doutor

Submitted by Nathália Faria da Silva (nathaliafsilva.ufv@gmail.com) on 2017-07-17T11:59:44Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 405604 bytes, checksum: 783a646364e842546441c0e45e7ed73e (MD5) / Made available in DSpace on 2017-07-17T11:59:44Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 405604 bytes, checksum: 783a646364e842546441c0e45e7ed73e (MD5) Previous issue date: 2005-08-01 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O experimento foi conduzido no Setor de Caprinocultura do Departamento de Zootecnia da Universidade Federal de Viçosa, com o objetivo de avaliar o efeito da curva de resfriamento em função do diluente utilizado na conservação do sêmen caprino armazenado a 5o C. Foram utilizados quatro reprodutores caprinos adultos das raças Parda Alpina e Saanen, sendo dois de cada raça. O sêmen foi coletado pelo método da vagina artificial. O ejaculado foi dividido em duas partes iguais, e cada uma das partes foi diluída com um dos respectivos diluentes. Foram utilizados os seguintes diluentes: um à base de leite desnatado e outro à base de gema-de-ovo (citrato-gema). Após o envase em palhetas francesas de 0,25 mL, as amostras foram submetidas a duas curvas de resfriamento, sendo uma com taxa de resfriamento de -0,033o C/minuto e a outra com -0,5 o C/minuto , até alcançar a temperatura de 5oC, e analisadas a cada 8 horas, durante um período de 48 horas. A eficiência na preservação celular teve influência direta das curvas de resfriamento, quando associadas aos diluentes utilizados. O diluente citrato- gema, quando utilizado em conjunto com as curvas lenta (CR 1) ou rápida (CR 2), foi o que melhor preservou as células espermáticas ao longo do tempo de armazenamento. O diluente leite desnatado obteve melhor taxa de preservação das células, quando associado à curva de resfriamento rápida (CR 2). A taxa de resfriamento de -0,5o C/minuto (CR 2) proporcionou melhor manutenção da viabilidade espermática, quando o sêmen foi armazenado a 5oC, durante 48 horas. / The aim of this study was to evaluate the effect of different cooling rates and diluents in the conservation of goat sperm viability stored at 5o C during 48 hours. The semen of two Saanen and Alpine goats were collected by an artificial vagina and than assigned into four treatments. Treatment 1 (T1): Egg- yolk diluent (YOD) + Low cooling rate (LCR; -0.33°C / minute); T2: Egg-yolk diluent + high cooling rate (HCR; -0.05°C / minute); T3: Skimmilk Diluent (SMD) + LCR; T4, Skimmilk Diluent (SMD) + HCR. The semen was stored at 5o C and evaluated at each 8 hours until it complete 48 hours of conservation. There was effect of the two diluents and cooling rates on the conservation of the goat spermatozoa. The YOD had better conservation of the sperm integrity than the SMD. The SMD had a superior preservation when cooled in a high cooling hate. The higher cooling hate (-0.5o C/minuto) promotes a better conservation of the goat sperm viability at 5o C and during 48 hours after collected.