O presente trabalho teve como objetivo determinar os efeitos da anoxia ambiental e da recuperação da anoxia sobre o metabolismo da glicose em brânquias anteriores e posteriores de caranguejos Chasmagnathus granulatus alimentados com uma dieta rica em carboidratos ou proteínas. Os animais foram coletados e aclimatados em aquários com aeração constante e salinidade de 20‰, temperatura de 250C e fotoperíodo natural durante 15 dias, onde receberam as respectivas dietas, ad libitum, uma vez ao dia no fim de cada tarde. Um grupo foi alimentado com dieta rica em proteínas (HP) e outro com uma dieta rica em carboidratos (HC) pobre em proteínas. As dietas HC e HP são isocalóricas. Para os estudos de anoxia, grupos de 15 animais que receberam dietas HC ou HP foram mantidos em aquários onde o oxigênio foi substituído por gás N2, até que a concentração de oxigênio chegasse à zero, e os animais, então, foram submetidos à anoxia durante uma hora, para depois serem utilizados nos experimentos. O grupo controle foi mantido em normóxia (PO2 18,95%), com salinidade 20‰ e temperatura de 25 0C.Para os experimentos de recuperação, os animais foram mantidos sob as mesmas condições de anoxia descritas acima. Após período de anoxia de 1h, a água desoxigenada foi substituída por água em condições de normóxia. Depois de três horas em normóxia, os animais foram utilizados nos experimentos. Após os períodos de anoxia ou de recuperação eram coletadas amostras de hemolinfa e os animais eram crioanestesiados durante cinco minutos para a retirada das brânquias 6 anteriores e posteriores utilizadas nos experimentos. Animais do grupo em normóxia (controle) sofriam os mesmos tratamentos. Nas brânquias anteriores de animais que receberam dieta HP e foram submetidos à recuperação, verifica-se uma diminuição de 33% na captação de glicose (p<0,05) quando comparada ao grupo anoxia. Nas brânquias posteriores de animais que receberam a dieta HC e foram submetidos à recuperação, a capacidade de síntese de glicogênio aumentou 60% (p<0,05) em relação ao grupo controle. Nas brânquias posteriores de animais com dieta HC, pós-incubação de 1 h em meio livre de glicose, a concentração de 14C-glicogênio foi 8 e 4 vezes maior (p<0,05) no grupo recuperação quando comparada àquelas obtidas nos grupos controle e anoxia, respectivamente. Nas brânquias anteriores (dieta HC), no grupo recuperação, a concentração de 14C-glicogênio foi cerca de 2,5 vezes maior (p<0,05) quando comparada àquela obtida no grupo controle. Nas brânquias posteriores de animais que receberam a dieta HP, grupo anoxia, a síntese de lipídeos (p<0,05) aumentou cerca de 6 vezes quando comparada àquela do controle. Na fase de recuperação, a síntese de 14C-lipídios reduziu 3 vezes quando comparada àquela observada no grupo anoxia. A comparação entre as duas dietas demonstra que a síntese de 14C-lipídios no grupo anoxia da dieta HP foi 2 vezes maior (p<0,05) que aquela constatada no mesmo grupo em caranguejos alimentados com a dieta HC. Nas brânquias anteriores de animais que receberam a dieta HP, grupo anoxia, a síntese de lipídios aumentou cerca de 3 vezes (p<0,05) quando comparada àquela do controle. Na fase de recuperação, a síntese de 14C-lipídios reduziu 6 vezes quando comparada àquela observada no grupo anoxia. A comparação entre as duas dietas mostra que a síntese de 14C-lipídios no grupo anoxia da dieta 7 HP foi 3 vezes maior (p<0,05) que aquela constatada no mesmo grupo em caranguejos alimentados com a dieta HC. Nas brânquias posteriores e anteriores dos animais em normóxia (controle) alimentados com dieta rica em proteínas, a formação de 14CO2 foi 5 e 10 vezes maior (p<0,05), respectivamente, comparada ao grupo HC. Nas brânquias posteriores, a formação de 14CO2 no grupo HP submetido à recuperação diminuiu 39% (p<0,05) em relação ao grupo submetido à anoxia. Nas brânquias anteriores, no grupo HP em recuperação, a formação de 14CO2 foi 59% e 60% menor, quando comparada àquelas obtidas nos grupos anoxia e controle, respectivamente. Nas brânquias posteriores de animais alimentados com dieta HP a anoxia por 1h reduziu (p<0,05) a concentração de glicogênio. O período de 3h em normóxia não foi suficiente para que os níveis de glicogênio voltassem a valores semelhantes aqueles do grupo controle. Nas brânquias posteriores de caranguejos mantidos com a dieta HC, a recuperação de 3h aumentou 2 e 4 vezes (p<0,05) a concentração de glicogênio quando comparada àquelas obtidas nos grupos controle e anoxia, respectivamente. Nas brânquias posteriores de caranguejos mantidos com a dieta HC, a recuperação de 3h aumentou 2 e 4 vezes (p<0,05) a concentração de glicogênio quando comparada àquelas obtidas nos grupos controle e anoxia, respectivamente. Nas brânquias anteriores do grupo HC, a recuperação de 3h incrementou significativamente os valores de glicogênio, quando comparados àqueles obtidos no grupo anoxia. Em animais do grupo HC submetidos à anoxia aumentaram significativamente (p<0,05) os valores de glicose hemolinfática. Entretanto, a recuperação por 3h diminuiu em apenas 50% (p<0,05). No grupo HP a anoxia também elevou significativamente os valores de glicose na hemolinfa. Contudo, a recuperação de 3h foi suficiente para que a concentração de glicose hemolinfática chegasse a valores semelhantes àqueles verificados no grupo controle. A comparação dos valores de glicose hemolinfática entre os grupos HP e HC mostra, nas 3 8 situações experimentais estudadas, concentrações significativamente maiores no grupo alimentados com a dieta HC. Os resultados do presente trabalho mostram que em C. granulatus a glicose foi utilizada nas brânquias por diferentes vias durante o estresse anóxico e a fase de recuperação. Entretanto, a composição da dieta administrada por 15 dias aos caranguejos modifica o fluxo deste substrato para vias diferenciadas, alterando, assim, o padrão de resposta metabólica ao estresse anóxico e à fase de recuperação.

A hipótese do fenótipo econômico propõe que a associação epidemiológica entre a restrição de crescimento intra-uterino e subseqüente desenvolvimento de Diabete Mellitus Tipo II (DM II) e a Síndrome Plurimetabólica resultam dos efeitos da má nutrição durante períodos críticos do crescimento e do desenvolvimento, que produz mudanças permanentes no metabolismo da glicose. Estas mudanças incluem capacidade reduzida para a secreção de insulina e resistência a insulina que, combinada com os efeitos da obesidade, do envelhecimento e da inatividade física, são fatores muito importantes no desenvolvimento do DM II. As ratas foram divididas em cinco grupos. Dois grupos receberam durante a gestação as seguintes dietas: grupo desnutrido e normonutrido: 7% e 25% de proteína e 10% de lipídio (óleo de soja), respectivamente. Após o nascimento as ratas continuaram com a dieta ofertada às mães até os 4 meses de idade. Grupo hipoprotéico e normoprotéico hiperlipídicos: 7% e 25% de proteína e 15% de lipídio (óleo de soja) durante a gestação e a lactação. Após o período lactacional as ratas dos grupos hiperlipídicos foram submetidas a uma dieta contendo 25% de proteína e 42% de lipídio (40 de banha de porco + 2% óleo de soja) até aos 8 meses de idade. O grupo que foi submetido a dieta comercial recebeu esta dieta durante a gestação e o período pós-natal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar: I. Massa corporal; II. Relação tecido adiposo visceral/100 g massa corporal; III. Glicemia; IV. Concentração hepática de triglicerídeos; V. Captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo sóleo; VI. Teste de Sensibilidade à Insulina (TSI); VII. Teste de Tolerância à Glicose (TTG). Verificamos no presente trabalho que no grupo desnutrido: (i) a massa corporal foi menor em todas as idades avaliadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo foi 29,8% maior; (iii) no TTG a glicemia foi menor aos 30, 60 e 120 minutos após a injeção i.p. de glicose; (iiii) no TSI a glicemia foi menor aos 30 e 60 minutos após a injeção i.p. de insulina em relação ao grupo normonutrido. Verificamos, também, no presente trabalho que no grupo hipoprotéico hiperlipídico: (i) a relação do tecido adiposo total e visceral/100 g massa corporal foi maior nas duas idades estudadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo apresentou uma redução de 15,35%; (iii) a concentração plasmática de glicose foi 11,8% maior; (iiii) no TTG a glicemia foi maior, aos 30 e 60 minutos, após a injeção i.p. de glicose; (iiiii) a concentração hepática de triglicerídeos foi maior em relação ao grupo que foi submetido à dieta comercial Prévios estudos mostram que o insulto provocado pela restrição protéica durante o período fetal e lactacional aumenta a ação da insulina apesar de sua prejudicada secreção, mantendo assim uma tolerância normal à glicose. Mas, a ingestão de uma dieta hiperlipídica leva a um modesto prejuízo na ação periférica da insulina sem afetar a tolerância à glicose, em conseqüência da aumentada secreção de insulina. No entanto, a exposição crônica das duas intervenções dietéticas resulta em uma interação sinérgica, levando a um importante prejuízo na ação periférica da insulina em combinação com prejudicada resposta secretora de insulina, resultando em intolerância à glicose. Com estes resultados pode-se inferir que o genótipo econômico, a desnutrição durante a gestação e a lactação, uma dieta hiperlipídica e o estilo de vida sedentário são fatores que contribuem para o desenvolvimento da obesidade e conseqüentemente da resistência à insulina e do DM II.

O trans-resveratrol é uma fitoalexina natural encontrada em uvas, amoras, amendoim e muitas espécies de plantas. Em uvas o trans-resveratrol é responsável pela proteção natural contra doenças e sua concentração depende da origem geográfica, da variedade e dos métodos de fabricação do vinho; sendo considerado por muitos autores como um geroprotetor. O objetivo do presente trabalho foi verificar o efeito do transresveratrol na longevidade e no metabolismo de carboidratos (glicogênio, atividade e expressão da enzima glicogênio fosforilase - GFT) de Drosophila melanogaster em diferentes idades (0, 7, 14, 18 e 21 dias). Para a análise da longevidade espécimes de D. melanogaster com idade de 10 dias foram colocados em vidros contendo meio de cultura padrão acrescido de água ou dimetilsulfóxido (DMSO) 0,03%, ou trans-resveratrol nas concentrações de 1, 10 ou 20μM para ovoposição durante 24 horas, a prole recebeu os seus respectivos tratamentos durante toda a vida. Para as análises do metabolismo de glicogênio os espécimes de D. melanogaster foram colocados em meio de cultura padrão adicionado de água ou dimetilsulfóxido 0,03% (DMSO) ou ainda, trans-resveratrol na concentração de 1μM dissolvido em DMSO (0,03%) para ovoposição; seus ovos foram mantidos até a eclosão, durante a fase adulta os animais continuaram a receber os seus respectivos tratamentos até os pontos em que foram feitas as determinações bioquímicas e moleculares. Os resultados indicam que o tratamento com trans-resveratrol modulou o metabolismo de carboidratos em fêmeas e em machos de forma diferenciada; contudo, este composto não foi capaz de alterar a expressão gênica da GFT. Nas fêmeas tratadas com trans-resveratrol 1μM verificou-se um aumento de 127% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Já nos machos tratados com trans-resveratrol 1μM observou-se um acréscimo de 50% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Em ambos sexos tratados com Trans-resveratrol 10 e 20μM não houve aumento significativo da longevidade. Com base nos resultados podemos sugerir que o trans-resveratrol como outros antioxidantes descritos na literatura tem seus efeitos benéficos na menor dose administrada, podendo nas doses mais elevadas estar atuando como um pró-oxidante. Os resultados obtidos sugerem que o trans-resveratrol modula o metabolismo do glicogênio tanto em machos como em fêmeas e aumenta a longevidade do modelo experimental testado.

Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Núcleo de Pesquisas em Ciências Biológicas, Pró-Reitoria de Pesquisa e Pós Graduação, Universidade Federal de Ouro Preto. / Submitted by Oliveira Flávia (flavia@sisbin.ufop.br) on 2014-10-29T16:02:24Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) / Approved for entry into archive by Gracilene Carvalho (gracilene@sisbin.ufop.br) on 2014-11-18T15:31:05Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) / Made available in DSpace on 2014-11-18T15:31:05Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 22190 bytes, checksum: 19e8a2b57ef43c09f4d7071d2153c97d (MD5) TESE_EfeitoTemporalDieta.pdf: 10989301 bytes, checksum: a6872bd3a68ec838770ada66460c8050 (MD5) Previous issue date: 2014 / O presente trabalho teve como objetivo avaliar o efeito temporal de uma dieta rica em carboidratos simples (PTD), após o desmame, sobre o metabolismo do tecido adiposo retroperitoneal (TAR) de ratos jovens. Por questões didáticas, dividimos esta tese em 3 capítulos: 1) efeito da PTD sobre a atividade transcricional de genes adipogênicos em três períodos de tempo (4, 8 e 12 semanas), a fim de se fornecer as informações sobre as networks envolvidas na resposta do TAR ao excesso de carboidrato simples; 2) efeito do exercício de endurance (durante 4 e 8 semanas) em ratos recém desmamados (RD) alimentados com a PTD sobre os níveis de leptina e suas ações periféricas no TAR; e o 3) efeito temporal da PTD sobre a expressão de microRNAs no mesmo tecido. No Capítulo I, ratos Wistar RD foram alimentados com uma dieta padrão (STD) ou PTD (68% de carboidratos) durante 4, 8 ou 12 semanas e o TAR foi removido para análises histopatológicas e PCR array (adipogênese). A PTD induziu hipertrofia e hiperplasia dos adipócitos no TAR após 12 semanas de ingestão. Além disso, a PTD alterou VLDLc e tracilglicerois séricos, bem como parâmetros glicometabólicos. O agrupamento hierárquico demonstrou mudanças induzidas pela PTD no padrão de expressão do grupo de genes testados. Análises de vias metabólicas, as quais utilizaram o algoritmo para análise de enriquecimento da plataforma MetaCore da Thompson Reuters, associaram o cluster dos genes diferencialmente expressos com vias canônicas relacionadas à regulação da diferenciação e proliferação de adipócitos (p-valor< 10-7). Portanto, nossos resultados sugerem que ratos RD alimentados com PTD aumentam o tamanho e o número de adipócitos devido à up regulation de sinais pró-adipogênicos (sinalização do PPAR) e à down regulation de sinais anti-adipogênicos (sinalização Wnt) em adultos jovens. No Capítulo II, ratos RD alimentados com as dietas STD ou PTD foram submetidos ao treinamento físico em esteira durante 4 ou 8 semanas. Os principais resultados obtidos sugerem que a PTD induz um aumento na expressão da leptina no TAR, enquanto o treinamento de endurance reduz o tamanho dos adipócitos via lipólise mediada pela leptina após 8 semanas. Em ratos treinados alimentados com a PTD, ocorre o desenvolvimento do depósito de gordura e a up regulation do mRNA e da leptina circulante. No Capítulo III, ratos RD alimentados com as dieta STD ou PTD durante 4, 8 ou 12 semanas tiveram o TAR removido para análise da expressão de miRNAs, cuja escolha foi baseada nos prováveis alvos dos mesmos, os quais apresentaram alteração na expressão após análise do agrupamento hierárquico (Capítulo I): três miRNAs anti-adipogênicos (rno-miR-let-7, rno-miR-27a-3p e rno-miR-200c-3p) e três miRNAs associados às condições metabólicas (rno-miR-125a-5p, rno-miR-125a-3p e rno-miR-126a-3p). Em conjunto, estes dados nos permitem concluir que a PTD regula a expressão de miRNAs no TAR, induzindo um aumento na expressão do miRNA rno-miR-200c-3p e reduzindo a expressão do miRNA rno-miR-27a-3p. Embora estes resultados estejam em fase de finalização, este é o primeiro estudo que considera a expressão de miRNAs desencadeada pela interação entre dieta pós-desmame e tempo, o que pode ser crucial para compreender o impacto que a composição da dieta possui sobre a decisão da célula adiposa de aumentar o volume ou em número. _________________________________________________________________________ / ABSTRACT: In this study, we assessed the time-course effect of a high-sugar diet (HSD), after weaning, on retroperitoneal white adipose tissue (rWAT) metabolism of young rats. To didactic purposes, we have divided this thesis in three chapters: 1) the effect of a HSD on the transcriptional activity of adipogenic genes in a time-course study (4-week, 8-week and 12 week periods), to provide insight regarding the genetic networks involved in the rWAT response to dietary sugar; 2) the effect of endurance training (4-week and 8-week periods) in weaned rats fed with a HSD on leptin levels and its actions on rWAT; and 3) the time-course effect of a HSD on microRNAs expression on rWAT. In Chapter I, weaned male Wistar rats were fed a standard (STD) or HSD (68% carbohydrates) for 4-week, 8-week or 12-weeks, and rWAT was removed for histopathology and PCR array (adipogenesis) analyses. The HSD induced adipocyte hypertrophy and hyperplasia in rWAT after 12 weeks of ingestion. Additionally, the HSD altered serum VLDLc, triacylglycerol, and glucometabolic parameters. Hierarchical clustering revealed HSD-induced changes in the expression patterns of the tested gene set. Pathway analysis, which used the enrichment analysis algorithm of the Thompson Reuters MetaCore platform, associated a cluster of differentially expressed genes with canonical pathways related to regulating adipocyte differentiation and proliferation (P-value < 10-7). Thus, HSD feeding post-weaning increased both the adipocyte size and number by simultaneously up-regulating pro-adipogenic signals (the PPAR pathway) and down-regulating anti-adipogenic signals (Wnt pathway) in young adults. In Chapter II, weaned rats fed with STD or HSD diets were subjected to running training for 4- and 8-week periods. Our results suggest that an HSD induces an increase in leptin expression in rWAT, while reducing adipocytes via leptin-mediated lipolysis after an 8-week period. In exercised rats fed an HSD, TAG synthesis and storage overlaps with lipolysis, promoting fat store development and Lep mRNA and plasma protein up regulation in adult rats. In Chapter III, rWAT of post-weaning rats fed with STD or HSD diets for 4-week, 8-week or 12-week periods was removed to access the miRNAs levels. We chose miRNAs whose possible targets were altered in the PCR array: three anti-adipogenics miRNAs (rno-miR-let-7, rno-miR-27a-3p, and rno-miR-200c-3p), and three miRNAs related to metabolic conditions (rno-miR-125a-5p, rno-miR-125a-5p and rno-miR-126a-3p). Together, these data suggest that HSD regulates the miRNAs expression on rWAT, increasing the miRNA rno-miR-200c-3p levels and down regulating the miRNA rno-miR-27a -3p levels. Although our results require further investigation, this is the first study that relates the relationship between high-sugar diet and period of feeding after weaning, which may be essential to understand the diet composition impact on fat cell fate: increase the volume or number.

Made available in DSpace on 2016-03-07T19:20:45Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2015-08-21. Added 1 bitstream(s) on 2016-03-07T19:24:25Z : No. of bitstreams: 1 000858780.pdf: 676512 bytes, checksum: 23e04903472acf005be1a9059a91291f (MD5) / As formigas cortadeiras são importantes pragas agrícolas; anualmente realizam a fundação de novas colônias. O voo nupcial e a escavação do ninho é uma atividade de alta intensidade, envolvendo o consumo de reservas corporais. O trabalho teve como objetivos: (1) verificar o esforço de escavação por medição do teor de carboidratos e lipídios totais em machos e fêmeas, antes e após o voo nupcial, e o esforço de escavação da rainha durante a fundação; (2) estudar os ninhos na fase claustral da colônia, o desenvolvimento e a produção de CO2 durante a fundação e assentamento do ninho; (3) determinar o teor de proteína bruta das rainhas de Atta sexdens rubropilosa antes do voo nupcial e após a fase claustral em colônias de laboratório e campo. Para determinar o esforço de escavação, as rainhas foram estimuladas a escavar um ninho, uma, duas e três vezes consecutivas, em relação às rainhas que não escavaram. O método calorimétrico foi usado para determinar os carboidratos e um método de extração para os lipídeos totais. O estudo dos ninhos na fase claustral e a produção de CO2 foi feito analisando o desenvolvimento de 50 colônias iniciais de Atta sexdens rubropilosa, e a produção de dióxido de carbono expelido em situação controlada. A proteína bruta das rainhas foi determinada pela digestão do material orgânico em ácido sulfúrico em temperaturas elevadas. Com relação aos resultados chegamos à conclusão que o teor de carboidratos é o principal recurso energético utilizado para o voo nupcial e a escavação do ninho para fêmeas de formigas cortadeiras. A concentração de CO2 teve um grande aumento na sexta semana e sétima semana, e depois retornando a valores menores. A proteína é aproveitada para a sobrevivência da rainha e desenvolvimento inicial da colônia, pelo fato da diminuição do teor de proteína bruta em função do tempo de clausura. / The leaf-cutting ants are important agricultural pests; held annually the foundation of new colonies. The nuptial flight and the nest digging are high intensity activity which consume body reserves. The study goals to: (1) verify the digging effort by measuring the carbohydrate content and total lipids in males and females before and after nuptial flight, and the queen's digging effort during the foundation; (2) study the nests in the claustral phase or the development and the production of CO2 during the foundation and establishment of the nest; (3) determine the crude protein content of the queens of Atta sexdens before the nuptial flight at the claustral phase in laboratory and field colonies. The digging effort was quantified by experimentally stimulating the queens to dig a nest one, two or three consecutive times compared to the queens that did not dig. The colorimetric method was used to determine the soluble carbohydrates and extraction method of immersion was used to determine the total lipids. The study of the nests claustral phase and the CO2 production was done by analyzing the development of the initial 50 colonies of Atta sexdens rubropilosa, and production of expelled carbon dioxide under laboratory conditions. Crude protein was determined by digestion of the organic material with sulfuric acid at high temperatures. Based on our results we conclude that the carbohydrate content is the main energetic resource used for the nuptial flight and nest digging, for gynes of leaf-cutting ants. The concentration of CO2 had a large increase in week six and seven weeks, and then returning to lower values. Protein is used for survival of the queen and for early colony growth, as demonstrated by the reduction in crude protein content as a function of duration of the claustral phase.

A hipótese do fenótipo econômico propõe que a associação epidemiológica entre a restrição de crescimento intra-uterino e subseqüente desenvolvimento de Diabete Mellitus Tipo II (DM II) e a Síndrome Plurimetabólica resultam dos efeitos da má nutrição durante períodos críticos do crescimento e do desenvolvimento, que produz mudanças permanentes no metabolismo da glicose. Estas mudanças incluem capacidade reduzida para a secreção de insulina e resistência a insulina que, combinada com os efeitos da obesidade, do envelhecimento e da inatividade física, são fatores muito importantes no desenvolvimento do DM II. As ratas foram divididas em cinco grupos. Dois grupos receberam durante a gestação as seguintes dietas: grupo desnutrido e normonutrido: 7% e 25% de proteína e 10% de lipídio (óleo de soja), respectivamente. Após o nascimento as ratas continuaram com a dieta ofertada às mães até os 4 meses de idade. Grupo hipoprotéico e normoprotéico hiperlipídicos: 7% e 25% de proteína e 15% de lipídio (óleo de soja) durante a gestação e a lactação. Após o período lactacional as ratas dos grupos hiperlipídicos foram submetidas a uma dieta contendo 25% de proteína e 42% de lipídio (40 de banha de porco + 2% óleo de soja) até aos 8 meses de idade. O grupo que foi submetido a dieta comercial recebeu esta dieta durante a gestação e o período pós-natal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar: I. Massa corporal; II. Relação tecido adiposo visceral/100 g massa corporal; III. Glicemia; IV. Concentração hepática de triglicerídeos; V. Captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo sóleo; VI. Teste de Sensibilidade à Insulina (TSI); VII. Teste de Tolerância à Glicose (TTG). Verificamos no presente trabalho que no grupo desnutrido: (i) a massa corporal foi menor em todas as idades avaliadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo foi 29,8% maior; (iii) no TTG a glicemia foi menor aos 30, 60 e 120 minutos após a injeção i.p. de glicose; (iiii) no TSI a glicemia foi menor aos 30 e 60 minutos após a injeção i.p. de insulina em relação ao grupo normonutrido. Verificamos, também, no presente trabalho que no grupo hipoprotéico hiperlipídico: (i) a relação do tecido adiposo total e visceral/100 g massa corporal foi maior nas duas idades estudadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo apresentou uma redução de 15,35%; (iii) a concentração plasmática de glicose foi 11,8% maior; (iiii) no TTG a glicemia foi maior, aos 30 e 60 minutos, após a injeção i.p. de glicose; (iiiii) a concentração hepática de triglicerídeos foi maior em relação ao grupo que foi submetido à dieta comercial Prévios estudos mostram que o insulto provocado pela restrição protéica durante o período fetal e lactacional aumenta a ação da insulina apesar de sua prejudicada secreção, mantendo assim uma tolerância normal à glicose. Mas, a ingestão de uma dieta hiperlipídica leva a um modesto prejuízo na ação periférica da insulina sem afetar a tolerância à glicose, em conseqüência da aumentada secreção de insulina. No entanto, a exposição crônica das duas intervenções dietéticas resulta em uma interação sinérgica, levando a um importante prejuízo na ação periférica da insulina em combinação com prejudicada resposta secretora de insulina, resultando em intolerância à glicose. Com estes resultados pode-se inferir que o genótipo econômico, a desnutrição durante a gestação e a lactação, uma dieta hiperlipídica e o estilo de vida sedentário são fatores que contribuem para o desenvolvimento da obesidade e conseqüentemente da resistência à insulina e do DM II.

O trans-resveratrol é uma fitoalexina natural encontrada em uvas, amoras, amendoim e muitas espécies de plantas. Em uvas o trans-resveratrol é responsável pela proteção natural contra doenças e sua concentração depende da origem geográfica, da variedade e dos métodos de fabricação do vinho; sendo considerado por muitos autores como um geroprotetor. O objetivo do presente trabalho foi verificar o efeito do transresveratrol na longevidade e no metabolismo de carboidratos (glicogênio, atividade e expressão da enzima glicogênio fosforilase - GFT) de Drosophila melanogaster em diferentes idades (0, 7, 14, 18 e 21 dias). Para a análise da longevidade espécimes de D. melanogaster com idade de 10 dias foram colocados em vidros contendo meio de cultura padrão acrescido de água ou dimetilsulfóxido (DMSO) 0,03%, ou trans-resveratrol nas concentrações de 1, 10 ou 20μM para ovoposição durante 24 horas, a prole recebeu os seus respectivos tratamentos durante toda a vida. Para as análises do metabolismo de glicogênio os espécimes de D. melanogaster foram colocados em meio de cultura padrão adicionado de água ou dimetilsulfóxido 0,03% (DMSO) ou ainda, trans-resveratrol na concentração de 1μM dissolvido em DMSO (0,03%) para ovoposição; seus ovos foram mantidos até a eclosão, durante a fase adulta os animais continuaram a receber os seus respectivos tratamentos até os pontos em que foram feitas as determinações bioquímicas e moleculares. Os resultados indicam que o tratamento com trans-resveratrol modulou o metabolismo de carboidratos em fêmeas e em machos de forma diferenciada; contudo, este composto não foi capaz de alterar a expressão gênica da GFT. Nas fêmeas tratadas com trans-resveratrol 1μM verificou-se um aumento de 127% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Já nos machos tratados com trans-resveratrol 1μM observou-se um acréscimo de 50% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Em ambos sexos tratados com Trans-resveratrol 10 e 20μM não houve aumento significativo da longevidade. Com base nos resultados podemos sugerir que o trans-resveratrol como outros antioxidantes descritos na literatura tem seus efeitos benéficos na menor dose administrada, podendo nas doses mais elevadas estar atuando como um pró-oxidante. Os resultados obtidos sugerem que o trans-resveratrol modula o metabolismo do glicogênio tanto em machos como em fêmeas e aumenta a longevidade do modelo experimental testado.

Orientador: Luiz Carlos Forti / Coorientador: Roberto da Silva Camargo / Banca: Maria Aparecida Castellani / Banca: Andre Rodrigues / Resumo: As formigas cortadeiras são importantes pragas agrícolas; anualmente realizam a fundação de novas colônias. O voo nupcial e a escavação do ninho é uma atividade de alta intensidade, envolvendo o consumo de reservas corporais. O trabalho teve como objetivos: (1) verificar o esforço de escavação por medição do teor de carboidratos e lipídios totais em machos e fêmeas, antes e após o voo nupcial, e o esforço de escavação da rainha durante a fundação; (2) estudar os ninhos na fase claustral da colônia, o desenvolvimento e a produção de CO2 durante a fundação e assentamento do ninho; (3) determinar o teor de proteína bruta das rainhas de Atta sexdens rubropilosa antes do voo nupcial e após a fase claustral em colônias de laboratório e campo. Para determinar o esforço de escavação, as rainhas foram estimuladas a escavar um ninho, uma, duas e três vezes consecutivas, em relação às rainhas que não escavaram. O método calorimétrico foi usado para determinar os carboidratos e um método de extração para os lipídeos totais. O estudo dos ninhos na fase claustral e a produção de CO2 foi feito analisando o desenvolvimento de 50 colônias iniciais de Atta sexdens rubropilosa, e a produção de dióxido de carbono expelido em situação controlada. A proteína bruta das rainhas foi determinada pela digestão do material orgânico em ácido sulfúrico em temperaturas elevadas. Com relação aos resultados chegamos à conclusão que o teor de carboidratos é o principal recurso energético utilizado para o voo nupcial e a escavação do ninho para fêmeas de formigas cortadeiras. A concentração de CO2 teve um grande aumento na sexta semana e sétima semana, e depois retornando a valores menores. A proteína é aproveitada para a sobrevivência da rainha e desenvolvimento inicial da colônia, pelo fato da diminuição do teor de proteína bruta em função do tempo de clausura. / Abstract: The leaf-cutting ants are important agricultural pests; held annually the foundation of new colonies. The nuptial flight and the nest digging are high intensity activity which consume body reserves. The study goals to: (1) verify the digging effort by measuring the carbohydrate content and total lipids in males and females before and after nuptial flight, and the queen's digging effort during the foundation; (2) study the nests in the claustral phase or the development and the production of CO2 during the foundation and establishment of the nest; (3) determine the crude protein content of the queens of Atta sexdens before the nuptial flight at the claustral phase in laboratory and field colonies. The digging effort was quantified by experimentally stimulating the queens to dig a nest one, two or three consecutive times compared to the queens that did not dig. The colorimetric method was used to determine the soluble carbohydrates and extraction method of immersion was used to determine the total lipids. The study of the nests claustral phase and the CO2 production was done by analyzing the development of the initial 50 colonies of Atta sexdens rubropilosa, and production of expelled carbon dioxide under laboratory conditions. Crude protein was determined by digestion of the organic material with sulfuric acid at high temperatures. Based on our results we conclude that the carbohydrate content is the main energetic resource used for the nuptial flight and nest digging, for gynes of leaf-cutting ants. The concentration of CO2 had a large increase in week six and seven weeks, and then returning to lower values. Protein is used for survival of the queen and for early colony growth, as demonstrated by the reduction in crude protein content as a function of duration of the claustral phase. / Mestre

A hipótese do fenótipo econômico propõe que a associação epidemiológica entre a restrição de crescimento intra-uterino e subseqüente desenvolvimento de Diabete Mellitus Tipo II (DM II) e a Síndrome Plurimetabólica resultam dos efeitos da má nutrição durante períodos críticos do crescimento e do desenvolvimento, que produz mudanças permanentes no metabolismo da glicose. Estas mudanças incluem capacidade reduzida para a secreção de insulina e resistência a insulina que, combinada com os efeitos da obesidade, do envelhecimento e da inatividade física, são fatores muito importantes no desenvolvimento do DM II. As ratas foram divididas em cinco grupos. Dois grupos receberam durante a gestação as seguintes dietas: grupo desnutrido e normonutrido: 7% e 25% de proteína e 10% de lipídio (óleo de soja), respectivamente. Após o nascimento as ratas continuaram com a dieta ofertada às mães até os 4 meses de idade. Grupo hipoprotéico e normoprotéico hiperlipídicos: 7% e 25% de proteína e 15% de lipídio (óleo de soja) durante a gestação e a lactação. Após o período lactacional as ratas dos grupos hiperlipídicos foram submetidas a uma dieta contendo 25% de proteína e 42% de lipídio (40 de banha de porco + 2% óleo de soja) até aos 8 meses de idade. O grupo que foi submetido a dieta comercial recebeu esta dieta durante a gestação e o período pós-natal. O objetivo do presente trabalho foi avaliar: I. Massa corporal; II. Relação tecido adiposo visceral/100 g massa corporal; III. Glicemia; IV. Concentração hepática de triglicerídeos; V. Captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo sóleo; VI. Teste de Sensibilidade à Insulina (TSI); VII. Teste de Tolerância à Glicose (TTG). Verificamos no presente trabalho que no grupo desnutrido: (i) a massa corporal foi menor em todas as idades avaliadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo foi 29,8% maior; (iii) no TTG a glicemia foi menor aos 30, 60 e 120 minutos após a injeção i.p. de glicose; (iiii) no TSI a glicemia foi menor aos 30 e 60 minutos após a injeção i.p. de insulina em relação ao grupo normonutrido. Verificamos, também, no presente trabalho que no grupo hipoprotéico hiperlipídico: (i) a relação do tecido adiposo total e visceral/100 g massa corporal foi maior nas duas idades estudadas; (ii) a captação de 2-deoxiglicose em fatias de músculo apresentou uma redução de 15,35%; (iii) a concentração plasmática de glicose foi 11,8% maior; (iiii) no TTG a glicemia foi maior, aos 30 e 60 minutos, após a injeção i.p. de glicose; (iiiii) a concentração hepática de triglicerídeos foi maior em relação ao grupo que foi submetido à dieta comercial Prévios estudos mostram que o insulto provocado pela restrição protéica durante o período fetal e lactacional aumenta a ação da insulina apesar de sua prejudicada secreção, mantendo assim uma tolerância normal à glicose. Mas, a ingestão de uma dieta hiperlipídica leva a um modesto prejuízo na ação periférica da insulina sem afetar a tolerância à glicose, em conseqüência da aumentada secreção de insulina. No entanto, a exposição crônica das duas intervenções dietéticas resulta em uma interação sinérgica, levando a um importante prejuízo na ação periférica da insulina em combinação com prejudicada resposta secretora de insulina, resultando em intolerância à glicose. Com estes resultados pode-se inferir que o genótipo econômico, a desnutrição durante a gestação e a lactação, uma dieta hiperlipídica e o estilo de vida sedentário são fatores que contribuem para o desenvolvimento da obesidade e conseqüentemente da resistência à insulina e do DM II.

O trans-resveratrol é uma fitoalexina natural encontrada em uvas, amoras, amendoim e muitas espécies de plantas. Em uvas o trans-resveratrol é responsável pela proteção natural contra doenças e sua concentração depende da origem geográfica, da variedade e dos métodos de fabricação do vinho; sendo considerado por muitos autores como um geroprotetor. O objetivo do presente trabalho foi verificar o efeito do transresveratrol na longevidade e no metabolismo de carboidratos (glicogênio, atividade e expressão da enzima glicogênio fosforilase - GFT) de Drosophila melanogaster em diferentes idades (0, 7, 14, 18 e 21 dias). Para a análise da longevidade espécimes de D. melanogaster com idade de 10 dias foram colocados em vidros contendo meio de cultura padrão acrescido de água ou dimetilsulfóxido (DMSO) 0,03%, ou trans-resveratrol nas concentrações de 1, 10 ou 20μM para ovoposição durante 24 horas, a prole recebeu os seus respectivos tratamentos durante toda a vida. Para as análises do metabolismo de glicogênio os espécimes de D. melanogaster foram colocados em meio de cultura padrão adicionado de água ou dimetilsulfóxido 0,03% (DMSO) ou ainda, trans-resveratrol na concentração de 1μM dissolvido em DMSO (0,03%) para ovoposição; seus ovos foram mantidos até a eclosão, durante a fase adulta os animais continuaram a receber os seus respectivos tratamentos até os pontos em que foram feitas as determinações bioquímicas e moleculares. Os resultados indicam que o tratamento com trans-resveratrol modulou o metabolismo de carboidratos em fêmeas e em machos de forma diferenciada; contudo, este composto não foi capaz de alterar a expressão gênica da GFT. Nas fêmeas tratadas com trans-resveratrol 1μM verificou-se um aumento de 127% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Já nos machos tratados com trans-resveratrol 1μM observou-se um acréscimo de 50% na longevidade quando comparado ao grupo controle. Em ambos sexos tratados com Trans-resveratrol 10 e 20μM não houve aumento significativo da longevidade. Com base nos resultados podemos sugerir que o trans-resveratrol como outros antioxidantes descritos na literatura tem seus efeitos benéficos na menor dose administrada, podendo nas doses mais elevadas estar atuando como um pró-oxidante. Os resultados obtidos sugerem que o trans-resveratrol modula o metabolismo do glicogênio tanto em machos como em fêmeas e aumenta a longevidade do modelo experimental testado.