Les traitements antirétroviraux (ARV) ont profondément amélioré l’espérance de vie des patients infectés par le VIH-1. Cependant, chez ces patients traités par ARV, le Virus de l’Immunodéficience Humaine de type 1 (VIH-1) reste présent dans les réservoirs cellulaires composés notamment de lymphocytes T CD4+ quiescents infectés de façon latente dans lesquels le provirus intégré est transcriptionellement silencieux. L’existence de ces réservoirs très stables au cours du temps et contenant des provirus réactivables compromet la possibilité d’une éradication complète du VIH-1. Le VIH-1 s’intègre préférentiellement dans les régions codantes du génome grâce à l’action de l’Intégrase virale et de son cofacteur cellulaire LEDGF/p75. Bien que la majorité des événements d’intégration se traduisent par l’expression des gènes viraux, une partie des provirus intégrés dans les lymphocytes T CD4+ activés peuvent également être inhibés transcriptionnellement. Au laboratoire, nous avons montré que LEDGF/p75 forme un complexe avec deux autres protéines cellulaires Iws1 (Interacting With Spt6) et Spt6. Ce complexe est recruté au niveau du provirus et participe à l’établissement et au maintien de la latence dans les lymphocytes T CD4+ (Gérard et al, 2015). Iws1 est une protéine qui intervient dans la régulation transcriptionnelle particulièrement au cours de la phase d’élongation de l’ARN polymérase II (ARNPII). Nos travaux indiquent que l’extinction de l’expression d’Iws1 dans des cellules infectées de manière latente induit la réactivation de l’expression virale. L’objectif de ma thèse a été de comprendre comment Iws1 participe au contrôle de l’expression du VIH-1 à la fois lors des étapes post-intégratives conduisant à la latence mais aussi au cours de la réactivation de l’expression des gènes viraux. La purification de la protéine Iws1 suivi de l’identification par spectrométrie de masse nous a permis d’identifier plusieurs de ses cofacteurs cellulaires. Parmi eux, nous avons identifié PNUTS, Tox4, Wdr82 et la protéine phosphatase 1 (PP1) qui sont les sous-unités du complexe PTW/PP1 récemment décrit comme étant impliqué dans la régulation transcriptionnelle de gènes cellulaires. Le rôle de ce complexe dans la régulation de l’expression du VIH-1 a ensuite été exploré. L’extinction de l’expression des protéines du complexe PTW aboutit à la réactivation du promoteur viral. Des expériences d’immunoprécipitation de la chromatine (ChIP) indiquent qu’Iws1, PNUTS et Wdr82 sont présents au niveau du provirus transcriptionnellement inactif. L’activation de l’expression - 2 - virale induite par traitement au phorbol ester corrèle avec une forte augmentation du recrutement d’Iws1 et de PNUTS le long de la région codante du VIH-1 alors que la distribution de Wdr82 n’est pas affectée. Nous avons développé une lignée de cellule J-Lat dans laquelle le gène codant pour Iws1 a été invalidé (J-Lat Iws1 -/-) afin d’étudier son rôle dans le recrutement du complexe PTW/PP1. Au cours de l’activation transcriptionnelle, la déplétion d’Iws1 augmente sensiblement le recrutement de PNUTS et de l’ARNPII le long du génome viral alors que le recrutement de Wdr82 diminue dans sa région 3’. Ces travaux montrent qu’en interagissant avec le complexe PTW/PP1, Iws1 participe à la régulation transcriptionnelle du VIH-1. / No abstract

L’homéostasie des mélanocytes est d'une importance primordiale dans la prévention de la transformation maligne. Les mélanocytes transformés conduisent souvent à un type particulièrement agressif de cancer de la peau, le mélanome, qui est souvent réfractaire au traitement. Plusieurs processus clés impliquant MAPK, PI3K, et les cascades de signalisation WNT, ont été identifiés comme indispensables pour la transition des mélanocytes cellules de mélanome. L'objectif de cette thèse était de décrire le rôle de la signalisation WNT/β-caténine dans la régulation de l'équilibre homéostatique dans la mélanogénèse et sa fonction tout aussi importante dans melanomagénèse. Nous avons identifié un rôle inconnu de la β-caténine dans la production de mélanine. Nous avons démontré que l’activation de la β– caténine avait un impact sur les niveaux d’expression de gènes mélanosomaux clés et que. De plus, nous avons observé que cela n’avait pas simplement un effet sur la production des mélanosomes, mais aussi sur leur migration intracellulaire. Par ailleurs, nous avons été en mesure d'associer cette production dysfonctionnelle avec un phénotype de l'hypopigmentation, observée chez les souris transgéniques qui contiennent de la β-caténine transcriptionnellement active. L’ensemble de ces résultats replacerait ainsi la β-caténine au centre de l’homéostasie mélanocytaire. Enfin, nous avons évalué la conséquence de la perturbation de la signalisation PI3K, par l'intermédiaire de la perte de suppresseur de tumeur PTEN, et par l’activation concomitante de NRAS, l’effecteur des MAPK. Nos résultats démontrent de façon concluante que les mutations NRAS et la perte de PTEN, dans les mélanocytes, peuvent effectivement induire et maintenir la formation de mélanomes. Nous avons également démontré que ce processus est modulé par une boucle de rétro-contrôle positif impliquant la translocation de la membrane des complexes β-catenin/Caveolin-1 et la répression de microARN. Cette partie du travail peut fournir plus de détails sur la complexité de la régulation de la transcription par la β-caténine et que celle-ci ne régule pas seulement l’expression des gènes mais aussi celle ce microARN, au moins dans le mélanome. / Melanocyte homeostasis is of paramount importance in preventing malignant transformation. The transformed melanocytes often lead to a particularly aggressive type of skin cancer, melanoma, which is often unresponsive to therapy. Several key processes, involving the MAPK, PI3K, and WNT signaling cascades, have been identified as indispensable for the transition from melanocyte to melanoma cells. The goal of this PhD thesis was to describe the role of WNT/β-catenin signaling in regulating homeostatic balance in melanogenesis and its equally important function in melanomagenesis. Firstly, we identified an unknown role of β-catenin in melanin production. We demonstrate that β-catenin activation impacts the expression levels of key melanosomal related genes. Additionally, we observed that this effect was not restricted to just melanosome production but also intracellular migration. Moreover, we were able to associate the dysfunctional production with a hypopigmentation phenotype, observed in mice that transgenically contain transcriptionally active β- catenin. Altogether, these findings would place β-catenin again in the center of melanocyte homeostatsis. Lastly, we evaluated the consequence of disrupting PI3K signaling, via loss of the tumor suppressor PTEN, and concomitant activation of the MAPK effector NRAS. Our results conclusively demonstrate that NRAS mutation and loss of PTEN, in melanocytes, can effectively induce and maintain melanoma tumor formation. We could also demonstrate that this process is driven by a positive auto regulatory loop involving β-catenin/Caveolin-1 membrane translocation and repression of microRNAs. This part of the work may provide further details of the complex level of β-catenin transcriptional regulation and that transcription may not be solely gene dependent, at least in melanoma.

Les phéochromocytomes et les paragangliomes (PPGL) sont des tumeurs neuroendocrines rares qui se développent aux dépens des paraganglions et qui sont identiquement déterminées dans 40% des cas. Parmi les gènes de prédisposition, les mutations du gène SDHB qui code pour l’une des sous-unités catalytiques de la succinate déshydrogénase mitochondriale constituent un facteur de risque de phénotype métastatique associé à un mauvais pronostic. Mon travail de thèse avait pour objectif d’élucider le lien entre les mutations du gène SDHB et la malignité des PPGL par l’étude du rôle du microenvironnement tumoral et en particulier de la matrice extracellulaire (MEC) dans le processus métastatique. L’analyse transcriptomique de l’expression de 310 gènes associés a la MEC dans 188 PPGL humains de la cohorte COMETE, a mis en évidence une régulation spécifique de ces gènes dans les tumeurs présentant des mutations SDHx. J’ai utilisé un modèle murin de cellules chromaffines déficientes en succinate déshydrogénase, les cellules Sdhb-/-, en comparaison avec les cellules sauvages (wild-type, WT). Les cellules Sdhb-/‐ possèdent des capacités migratoires et adhésives accrues dues a l’accumulation de succinate inhibant les dioxygénases dépendantes du 2‐oxoglutarate (2‐OG). J’ai mis en évidence que la MEC secrétée par les cellules Sdhb‐/- est capable d’augmenter les capacités migratoires et d’adhésion des cellules WT. Inversement, la MEC secrétée par les cellules WT diminue la migration et l’adhésion des cellules Sdhb-/-. Ainsi, les cellules Sdhb‐/- semblent secréter une matrice qui favorise le replacement des cellules et donc leur potentiel métastatique. Afin d’identifier les acteurs responsables de ce phénotype particulier nous avons analyse le sécrétome de la MEC : le matrisome des cellules Sdhb-/- et des WT, nous permettant d’identifier la fibronectine, cible de l’hypoxie, comme l’une des protéines majeures de la MEC secrétée par les cellules Sdhb-/‐. J’ai montré que la fibronectine augmente de façon drastique la migration et l’adhésion des cellules WT et qu’elle participe a la migration des cellules Sdhb‐/-. L’analyse du transcriptome et du matrisome des cellules Sdhb-/- a également mis en évidence la surexpression de nombreux collagènes et en particulier le gène Col4a2 qui code pour l’un des composants majoritaires des membranes basales. J’ai montré que malgré l’accumulation de succinate dans les cellules Sdhb-/-, les collagènes hydroxylases 2-OG dépendantes, restent probablement actives ce qui permet la maturation des collagènes puis leur sécrétion dans le milieu extracellulaire. Cependant, le collagène IVα2 est fragmenté dans les cellules Sdhb-/- suggérant des modifications après sa sécrétion. J’ai ainsi montré que l’activation de la MMP9 dans les cellules Sdhb‐/-, participe à la dégradation du collagène IVα2. L’ensemble de ces résultats a ainsi révélé l’existence d’un remodelage de la MEC spécifique aux cellules Sdhb‐/- qui favorise le phénotype métastatique en promouvant notamment la migration et l’adhésion cellulaire. En parallèle de ce travail et dans le cadre d’un projet collaboratif, j’ai montré que seules les cellules Sdhb-/- sont capables d’induire le processus d’angiogenèse compare aux cellules WT et de le maintenir en faisant croître des vaisseaux pré-existants en 3-dimensions. Au sein de la même collaboration, j’ai également travaillé sur la mise au point d’une lignée humaine de cellules chromaffines tumorales en 3-dimensions à partir de culture primaire de PPGL humains. Ce travail se poursuit actuellement et pourrait donner lieu à la mise au point des premières conditions expérimentales permettant de cultiver ces cellules in vitro. / Pheochromocytomas and paragangliomas (PPGL) are rare neuroendocrine tumors, which arise from paraganglia and are genetically determined in 40% of cases. Among the predisposition genes, mutations in the SDHB gene, which encodes the catalytic core subunit of the mitochondrial enzyme, succinate dehydrogenase, are associated with malignancy and poor prognosis. The main objective of my thesis project was to elucidate the link between SDHB mutations and PPGL malignancy by studying the role of tumor microenvironment and in particular of the extracellular matrix (ECM) in the metastatic process. The transcriptomic analysis of 310 ECM‐associated genes in 188 human PPGL of the COMETE collection showed a specific regulation of ECM-encoding genes in SDHx-mutated tumors. I used a mouse model of Sdhb deficient chromaffin cells compared to their wild-type (WT) counterparts. Sdhb-/- cells display increased migratory and adhesive capacities cause by succinate accumulation that inhibit 2-oxoglutarate (2--‐OG) dependent dioxygenases. I showed that the ECM secreted by Sdhb‐/- cells is able to increase migration and cell adhesion of WT cells. Conversely, the ECM secreted by WT cells decreases migration and adhesion of Sdhb-/- cells. Hence, Sdhb-/- cells seem to secrete an ECM promoting cell motility and thus their metastatic potential. To identify specific ECM components responsible for this particular phenotype, we analyzed the ECM secretome, i.e. the matrisome, of both cells types. This study identified fibronectin as one of main ECM protein secreted by Sdhb-/- cells. I showed that fibronectin drastically increases migration and adhesion of WT cells and participates to Sdhb- /- cells migration. Sdhb-/- transcriptome and matrisome analyses also highlighted the overexpression of many collagens and in particular Col4a2 encoding one of main component of basement membranes. I demonstrated that despite succinate accumulation in Sdhb‐/- cells, 2-OG dependent collagen hydroxylases remain apparently active, allowing collagen maturation and their subsequent secretion in the extracellular space. Besides, collagen IVα2 is fragmented in Sdhb-/‐ cells suggesting post-excretion modifications. I showed that MMP9 activation in Sdhb‐/‐ cells, participates to collagen IVα2 degradation. Alltogether, these results revealed the existence of Sdhb‐/- specific remodelling of the ECM which may promote mestastatic phenotype by inducing migration cell and adhesion. In parallel, and as a part of a collaborative project, I showed that Sdhb‐/- chromaffin cells (but not WT cells) are able to induce the angiogenic process and to maintain the growth of pre-existing vessels in 3-dimensions. Within the same collaboration, I also worked on the development of a human tumoral chromaffin cells line using 3-dimensions spheroid cultures of human PPGL. This work is ongoing and could lead to the development of the first experimental conditions for growing human PPGL cells in vitro.

L’acrodysostose est une chondrodysplasie associant une petite taille et des anomalies des extrémités et de la face. Les mécanismes moléculaires sous-jacents ont récemment été identifiés, et deux types d’acrodysostose sont individualisés : 1) l’acrodysostose avec résistance hormonale (acroR1a), en lien avec des mutations du gène PRKAR1A, codant pour une sous-unité régulatrice de la PKA et 2) l’acrodysostose « sans » résistance hormonale (acroPDE), en lien avec des mutations du gène PDE4D, codant pour la phosphodiestérase 4D. Dans les deux cas, il existe une altération de la voie de signalisation de l’AMPc entraînant une résistance au PTHrp à l’origine du phénotype osseux des patients, similaire à celui observé dans la PHP 1a due à des mutations inactivatrices du gène GNAS, codant pour la protéine Gsα. Je me suis intéressée dans ce travail aux mécanismes cellulaires à l’origine du phénotype de l’acroPDE et pouvant expliquer ses différences phénotypiques avec l’acroR1a et la PHP1a. Ces trois pathologies offrent un outil précieux pour l’étude de la voie de signalisation des RCPG puisqu’elles sont toutes dues à un défaut génétique altérant cette voie, mais s’exprimant cliniquement de façon différente bien que proche, notamment en ce qui concerne les résistances hormonales autres que celle du PTHrp dans les chondrocytes. Dans la première partie, afin de mettre en évidence une spécificité tissulaire pouvant expliquer les différences d’expression phénotypique de ces mutations, j’ai utilisé deux modèles cellulaires humains, des fibroblastes et la lignée HEK293, et observé les effets de l’inhibition sélective de la PDE4 par du rolipram à différentes étapes de la voie de signalisation, après stimulation par deux agonistes, la PTH et la PGE2. Les résultats indiquent que l’impact du rolipram est d’autant plus important que la stimulation par l’agoniste est faible. La modulation du signal par la PDE4 dépend donc à la fois du type cellulaire et de l’intensité initiale du stimulus par l’agoniste. Dans la seconde partie, pour comparer plus directement l’effet des mutations de ces trois gènes au niveau cellulaire, j’ai réalisé une étude détaillée du phénotype des fibroblastes de témoins et de patients atteints de PHP1a, d’acroR1a et d’acroPDE, à différentes étapes de la voie de signalisation, après stimulation par la PTH et la PGE2, et en présence ou non d’inhibiteur des PDE. Il n’existe pas de différence significative dans l’expression des transcrits ou la traduction des protéines impliquées dans la voie de signalisation dans les différents groupes de fibroblastes. En revanche, l’effet de l’inhibition des PDE4 sur la quantité d’AMPc intracellulaire est plus important dans les fibroblastes mutés PDE4D, allant dans le sens de mutations activatrices. Nous n’avons pas pu mettre en évidence de différence significative dans la phosphorylation de CREB dans ce modèle. Et enfin, dans la 3ème partie, je présente la mise au point d’une technique de BRET permettant l’étude fonctionnelle des différentes mutations de PDE4D connues pour être responsables d’acroPDE. Les résultats sont en faveur d’un caractère activateur des mutations de PDE4D à l’origine d’une dégradation plus rapide d’AMPc aboutissant à une diminution de l’activité PKA. En conclusion, ces résultats concordent à montrer que les mutations de PDE4D sont activatrices, augmentant ainsi la dégradation de l’AMPc ce qui serait à l’origine des résistances hormonales. Ce phénomène est d’autant plus important dans les situations où l’augmentation d’AMPc est modeste, expliquant probablement l’absence de résistance hormonale dans certains tissus. Bien sûr, ces résultats sont à pondérer par le fait qu’il existe de nombreuses autres phosphodiestérases pouvant compenser ces phénomènes, qu’il existe une troisième voie d’utilisation de l’AMPc (Epac), et qu’il faudrait poursuivre les investigations notamment en étudiant les phénomènes de compartimentalisation de la cellule pour élucider ces mécanismes. / No abstract

Le virus de l’immunodéficience humaine (VIH-1) est l’agent causal de la pandémie du syndrome d’immunodéficience acquise (SIDA). Les rétrovirus ont la capacité de rétro-transcrire leur génome ARN en ADN afin qu’il soit intégré dans celui de l’hôte. Les traitements antirétroviraux (ART) actuels combinent plusieurs classes d’antirétroviraux (ARV) ciblant majoritairement les enzymes virales nécessaires à la réplication du VIH-1: la reverse transcriptase (RT), la protéase (PR) et l’intégrase (IN). L’émergence et la transmission de virus multirésistants à l’ensemble des ARV illustrent la nécessité de développer de nouveaux mécanismes thérapeutiques. Les inhibiteurs catalytiques d’IN (INSTIs) utilisés dans les ART ciblent le site actif de l’enzyme et empêchent ainsi la réaction de transfert de brin de l’intégration du VIH-1. La protéine cellulaire Lens Epithelium-Derived Growth Factor (LEDGF/p75), liée à la chromatine, est l’un des principaux cofacteurs de IN. En permettant le ciblage de l’intégration dans des régions actives du génome de l’hôte, l’interaction IN-LEDGF joue un rôle crucial pour la réplication effective du VIH-1 ce qui en fait une cible de premier ordre pour de nouvelles thérapies. Au cours de ces dernières années, des inhibiteurs allostériques de l’interaction IN-LEDGF (INLAIs encore appelés LEDGINs ou ALLINIs) ont été développés afin d’inhiber l’étape d’intégration. De manière inattendue, ces molécules exercent de fait une double activité antirétrovirale. En effet les INLAIs ciblent l'intégration mais possèdent également une seconde activité plus efficace sur les étapes tardives de la réplication du VIH-1. Celle-ci se traduit par la production de virions présentant un défaut d’infectivité. Mon projet de thèse, réalisé en partenariat avec la société biopharmaceutique Mutabilis, s’est intéressé à la caractérisation de l’activité antirétrovirale d’une nouvelle classe d’INLAIs selon deux axes: (1) l’approfondissement des mécanismes d’action de ces INLAIs sur les étapes tardives de la réplication du VIH-1 ; (2) l’appréciation de leur spectre d’activité sur la réplication du virus de l’immunodéficience simienne (SIV). J’ai pu montrer que les virions produits en présence d’INLAIs développées par Mutabilis présentent un défaut de transcription inverse lors de l’infection des cellules cibles, qui les rend non infectieux. Ces molécules n’influencent pas les étapes tardives de maturation protéique et d’empaquetage de l’ARN du VIH-1 dans les virions. De façon intéressante, ces virions non infectieux sont efficacement reconnus par un panel d’anticorps neutralisants spécifiques de l’enveloppe virale du VIH-1 et conservent la capacité d’induire une réponse immunitaire T CD4+ de type Th1 dans des cellules de patients infectés. Nous avons également évalué l’effet des INLAIs sur la réplication du SIV. Des expérimentations in vitro ont permis de montrer que certaines INLAIs inhibent efficacement l’interaction IN-LEDGF mais n’induisent pas la multimérisation anormale de IN SIV contrairement à ce que nous observons pour IN VIH-1. Ces résultats ont été confirmés in vivo et indiquent que si certaines INLAIs de seconde génération montrent une activité antirétrovirale au cours des étapes précoces, elles ne sont pas capables d’inhiber efficacement les étapes tardives de la réplication du SIV. De fait, la production de virions SIV en présence de ces INLAIs n’entraîne qu’une faible diminution de leur infectivité. Mes travaux ont donc permis de mettre en évidence que les virions “inactivés“ par ces INLAIs pourraient représenter un nouveau type d’immunogènes pour l’établissement d’une réponse immunitaire anti VIH-1. Cependant l’étude du spectre d’activité suggère que bien que la capacité de certaines INLAIs à inhiber l’interaction IN-LEDGF/p75 semble relativement bien conservée entre le VIH-1 et SIV, elles sont peu efficaces sur les étapes tardives du cycle de réplication du SIV. / No abstract

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / This study presents as its central theme the importance of using different didactic tools to overcome the learning difficulties in abstract content such as Cellular and Molecular Biology in the elementary and high school. The didactic resources offer to motivate students in the teaching-learning process, represent an alternative to overcome the exclusive use of the textbook as research material, reading for students and lessons planning for teachers. The thesis is divided in four chapters presented in the form of articles. The first chapter presents an investigation about behavior, acceptance and performance of students in high school facing the use of Information and Communication Technologies (ICT). Allied ICT analyzed the applicability of practical activities in teaching Biology to support the introduction of computer resources. Chapter two investigates whether students motivated by the use of different teaching strategies to better understand about organization and functioning of the cell. In the third one investigates the use of different didactic resources (practical class with microscope and historical replicas, reading comic books and model building) in understanding of Cell Biology for students of elementary school and whether the program about cell teaching is really suitable. The fourth chapter examines whether the program about cell teaching is worked differently in the elementary and high school and which idea that students have about Cell Biology at the different levels of education. The ICT, through the webquest tool, proved to be an important didactic resource for teaching Molecular Biology, as well as motivated and instigated the students to build your knowledge. Moreover, the webquest presented applicability when combined with practical activity of DNA extraction. The different didactic resources had an important role in the student s motivation. Besides motivating, the different teaching tools helped in learning when the Cell Biology was related the student s daily life. The results indicated that the cell teaching is taught similarly in the elementary and high school. There was no greater maturity and conceptual evolution in high school, because the level of response complexity was similar to that found in elementary school. Thus, the didactic-pedagogic resources may be strategies important to stimulate students' curiosity, the desire for discovery and knowledge. / Este estudo apresenta como tema central a importância de se utilizar diferentes ferramentas didáticas com o intuito de superar as dificuldades de aprendizagem em conteúdos abstratos como a Biologia Celular e Molecular, no Ensino Fundamental e Médio. Os recursos didático-pedagógicos apresentam potencial para motivar os estudantes no processo de ensinoaprendizagem, representam uma alternativa ao uso exclusivo do livro didático como material de pesquisa, leitura para o aluno e planejamento das aulas para professor. A tese está dividida em quatro capítulos apresentados sob a forma de artigos. O primeiro capítulo apresenta uma investigação a respeito do comportamento, aceitação e desempenho dos estudantes de 3º ano do Ensino Médio frente à utilização das Tecnologias da Informação e Comunicação (TIC). Aliada às TIC analisou-se a aplicabilidade de atividades práticas no ensino de Biologia como suporte e complemento à introdução de recursos de informática. O capítulo dois investiga se estudantes motivados pela utilização de estratégias didáticas diversas compreendem melhor a organização e funcionamento da célula. No terceiro capítulo, investiga-se o efeito da utilização de diferentes recursos didáticos (aula prática com microscópio e réplicas históricas, leitura de gibi e confecção de modelo) como auxiliares na compreensão de conceitos de Biologia Celular por alunos do 8º ano do Ensino Fundamental bem como se o conteúdo programático sobre célula trabalhado nas escolas é adequado à série em questão. O quarto capítulo analisa se o conteúdo programático sobre célula é trabalhado de forma diferenciada no 8º ano do Ensino Fundamental e 2º ano do Ensino Médio e investiga qual a ideia que os estudantes apresentam sobre Biologia Celular nos diferentes níveis de ensino. As TIC, através da ferramenta webquest, demonstraram ser um importante recurso didático para o ensino de Biologia Molecular, pois além de motivar, instigaram os alunos a buscarem informações para construção do seu conhecimento. Além disso, a webquest apresentou aplicabilidade quando aliada à atividade prática de extração do DNA. A utilização de diferentes recursos didáticos teve um importante papel na motivação dos estudantes. Além de motivador, as diferentes ferramentas didáticas auxiliaram na aprendizagem quando a Biologia Celular foi relacionada aos assuntos do cotidiano dos alunos. Os resultados indicaram que o conteúdo sobre célula é ensinado de maneira semelhante no Ensino Fundamental e Médio. Não se observou maior maturidade e evolução conceitual no Ensino Médio, pois o nível de complexidade das respostas foi semelhante ao encontrado no Ensino Fundamental. Logo, se bem empregados, os recursos didático-pedagógicos podem ser importantes estratégias para estimular a curiosidade dos alunos, o desejo pela descoberta e pelo conhecimento.